湖南省益阳市2025-2026学年高二下学期期末考试生物学自编试卷（人教版）

**基本信息** 以传统发酵、微生物培养、生态修复及基因工程等为情境，融合细胞培养肉、CRISPR-Cas9等科技前沿，突出生命观念与科学思维的考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|单选12题24分、多选4题16分|发酵技术（题1）、微生物培养（题2-3）、生态系统（题4-5）、神经调节（题13）|结合“蓝色海湾”整治考查生态位重叠（题15），体现进化与适应观| |非选择题|5题60分|基因工程（题19）、细胞工程（题20）、发酵工程（题21）|CRISPR-Cas9系统分析（题19）考查科学思维，植物体细胞杂交实验设计（题20）强化探究实践|

湖南省益阳市2025-2026学年高二下学期期末考试自编试卷 生物学试题（解析版） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B C C B A B C A A A 题号 11 12 13 14 15 16 答案 B D ABD ABD AD ABC 1．B 【详解】A、乳酸菌为严格厌氧型微生物，通气会抑制乳酸菌的生长繁殖，制作酸奶全程需要无氧环境，无需通气，A错误； B、制作泡菜依赖乳酸菌的无氧呼吸，水密封泡菜坛口，既可以让坛内发酵产生的多余气体排出，又能隔绝外界空气进入，保证坛内无氧环境，B正确； C、腐乳发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉，不是曲霉，C错误； D、葡萄酒发酵所需的酵母菌来自葡萄皮表面的野生型酵母菌，若对葡萄汁灭菌会杀死菌种，仅需对发酵装置进行消毒即可，不需要对葡萄汁灭菌，D错误。 2．C 【详解】A、培养基经高压蒸汽灭菌后，需冷却至约50℃再倒平板，可避免温度过高导致皿盖产生大量冷凝水、或破坏培养基中热敏性营养成分，A正确； B、紫外线可破坏微生物的核酸结构起到消毒作用，超净工作台、接种室、空气都可通过紫外线消毒，B正确； C、平板划线法可通过连续划线逐步稀释菌群，实现微生物的分离和纯化，但无法对微生物进行计数，微生物计数常用稀释涂布平板法，C错误； D、平板划线后倒置培养，可避免皿盖的冷凝水滴落污染培养基，同时也能减少培养基水分过快蒸发，D正确。 3．C 【详解】A、平板划线法通过逐步划线稀释菌体以获得单菌落，若最后一次划线末端与第一次划线首端相连，无法达到稀释菌体的效果，不能得到单菌落，不利于酵母菌的分离，A错误； B、若待检测水样先经过灭菌，会杀死水中的大肠杆菌，导致无法准确检测大肠杆菌的实际含量，B错误； C、用稀释涂布平板法进行微生物计数时，若两个或多个活菌连在一起，平板上只会形成一个菌落，因此统计的菌落数往往低于实际活菌数，C正确； D、若菌液浓度过高，涂布后菌体密度过大，会出现多个菌落重叠的情况，无法形成单菌落，只有稀释度适宜的菌液才可在培养基表面形成单菌落，D错误。 4．B 【详解】A、题干信息可知，“两片海”重新连通，连通后，使地理隔离长达10余年的鲈鱼重新形成一个大种群，说明鲈鱼是一个物种，不存在生殖隔离，A正确； B、地理隔离会导致种群间基因交流受阻，随着时间推移，由于突变、自然选择、遗传漂变等因素的作用，两个隔离种群的基因库会逐渐分化，因此原地理隔离的两个鲈鱼种群基因库不完全相同，B错误； C、外源性因素指的是来自生物体外部环境的因素，包括非生物因素（如栖息地的物理环境、资源可获得性）和生物因素（如天敌、竞争者、共生生物等），这些因素通过影响出生率、死亡率、迁入率和迁出率来调节种群数量。因此栖息地、天敌都是调节黄嘴白鹭种群数量的外源性因素，C正确； D、整治后当地生态系统物种丰富度高，营养结构复杂，抵抗外界干扰的能力更强，D正确。 5．A 【详解】A、生物量金字塔反映某一时间点各营养级的现存生物量，营养结构的复杂程度和生态系统的稳定性直接相关，必然会影响到生物量金字塔的变化，A错误； B、如图，气候变暖会改变金字塔的形状，但食物网没有改变，B正确； C、如图，海洋酸化会导致各个营养级的生物量都增加，C正确； D、长期变暖和酸化会导致金字塔顶端崩溃，食物链变短，D正确。 6．B 【详解】A、斐林试剂用于鉴定还原糖时，需甲液和乙液等量混合后水浴加热，而选项描述为“先加甲液后滴加乙液”，混淆了斐林试剂与双缩脲试剂的用法，A错误； B、黑藻叶片细胞含有叶绿体便于观察细胞质流动，且为成熟植物细胞含液泡，可用于质壁分离实验，B正确； C、平板划线法中最后一次划线需从上一次划线的末端开始，目的是稀释菌种，但无需与第一次划线相连，C错误； D、植物组织培养中，外植体需消毒而非灭菌（灭菌会杀死细胞），培养基和培养瓶需灭菌，D错误。 故选B。 7．C 【详解】A、胰蛋白酶用于分散细胞，使干细胞分离成单细胞悬液以便培养，A正确； B、干细胞需诱导分化为肌肉细胞才能形成类似肌肉的组织，B正确； C、动物细胞培养的气体环境通常为95%空气和5%CO₂（维持pH），而非95%O₂，高浓度O₂可能抑制细胞呼吸，C错误； D、通过调控干细胞分化可定制肉质，符合技术发展前景，D正确。 故选C。 8．A 【分析】分析题图可知：一个冬眠阵中，入眠阶段体温和代谢率逐渐下降，深冬眠阶段维持低体温和低代谢率，激醒阶段体温和代谢率升高，阵间觉醒阶段维持正常体温。 【详解】A、入眠阶段该动物体温呈下降趋势，其散热量大于产热量，A错误； B、深冬眠阶段该动物产热减少，为维持体温的恒定，其皮肤毛细血管收缩，减少散热，B正确； C、深冬眠过程中该动物呼吸速率下降，降低其代谢率，C正确； D、激醒过程中该动物体温和代谢率均上升，甲状腺激素和肾上腺素的分泌可能增加，增加机体代谢，以升高体温，D正确。 故选A。 9．A 【分析】静息电位形成的主要原因是K+外流，动作电位形成的原因是Na+内流。 【详解】A、静息电位形成的主要原因是K+经协助扩散外流，A错误； B、已知辅酶A参与糖和脂肪等有机物的氧化分解，补充辅酶A可增强糖和脂肪等有机物的氧化分解，从而促进ATP的生成，B正确； C、HCO₃⁻/H₂CO₃是血浆中重要的缓冲对，能中和酸性或碱性物质以维持pH稳定，C正确； D、细胞外液渗透压主要由Na⁺、Cl⁻等无机盐离子维持，合剂中的K⁺、Cl⁻、Na⁺等均参与此过程，D正确。 故选A。 10．A 【详解】A、固态发酵法利用多种天然微生物，它们在相同环境中会争夺营养和空间，存在竞争关系，A正确； B、糖化过程是将淀粉分解为葡萄糖，需淀粉酶而非蛋白酶，蛋白酶用于分解蛋白质，B错误； C、密封的主要目的是为酵母菌无氧发酵创造条件，酒精本身可抑制杂菌，而非单纯防止污染，C错误； D、多种微生物共同作用可产生丰富风味物质，单一菌种可能降低白酒品质，D错误。 故选A。 11．B 【详解】A、图中①表示将目的基因导入受体细胞，利用受精卵作为重组表达载体的宿主细胞常采用显微注射的方法将载体注入，③表示胚胎移植，A正确； B、转基因动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞是体细胞有丝分裂再经分化而来，遗传信息相同，B错误； C、对代孕母体进行同期发情处理，以使其子宫处于与供体相同的生理状态，C正确； D、由于只有雌性动物哺乳期才能产奶，因此与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受转基因动物性别和年龄的限制，D正确。 故选B。 12．D 【分析】PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。 【详解】A、利用PCR扩增Act-1基因启动子时，无需加入SalⅠ酶和HindⅢ酶，而是在引物上引入这两种酶的识别序列，A错误； B、在添加氨苄青霉素的培养基上获得的菌落有两种：导入空白质粒的大肠杆菌和导入重组质粒的大肠杆菌，只有后者能发出荧光，B错误； C、Ori可能富含A—T碱基对，氢键数量少，DNA不稳定，有利于DNA从此处开始解旋，C错误； D、启动子的两边为SalⅠ酶和HindⅢ酶序列，重组质粒中酶识别序列为XhoⅠ酶和HindⅢ酶序列，因此启动子与质粒重组前需添加XhoⅠ酶的识别序列，以便质粒与基因重组，D正确。 故选D。 13．ABD 【分析】兴奋在神经纤维上以电信号形式进行传导，静息电位表现外正内负，主要与钾离子外流有关，动作电位表现为外负内正，主要与钠离子内流有关，由于兴奋部位是外正内负，未兴奋部位是外负内正，在兴奋部位与未兴奋部位存在电位差，形成局部电流，兴奋在神经纤维上以局部电流的形式进行传导。 【详解】A、K+与静息电位的形成有关，Na+与动作电位的形成有关，因此降低神经元A周围环境中的K+浓度，则其难以兴奋，A错误； B、刺激A和C，若C产生抑制性神经递质，则C可能抑制A释放递质，导致A释放神经递质减少，B错误； C、图2中兴奋传导的方向是从左向右，②处在恢复静息电位K+外流，④即将兴奋Na+内流形成动作电位，C正确； D、由图2可知，横坐标为位置，①处正在恢复静息电位，而④即将兴奋，因此兴奋传导的方向是从左向右，D错误。 故选ABD。 14．ABD 【分析】抗原是指能引起机体发生特异性免疫的物质，抗原刺激机体产生的抗体与抗原发生特异性结合，对于入侵到细胞内的抗原，机体先通过细胞免疫将靶细胞裂解释放其中抗原，再通过体液免疫产生的抗体与之结合。 【详解】A、一种B细胞激活后产生一种抗体，A正确； B、由图可知，NK细胞通过FcR与抗体结合激活，B正确； C、胞毒颗粒属于NK细胞释放的免疫活性物质，化学本质为蛋白质，通过胞吐出细胞，依赖细胞膜流动性，C错误； D、免疫系统的功能包括防御、自稳、监控，NK细胞清除病原体的过程体现了免疫系统的免疫防御功能，D正确。 故选ABD。 15．AD 【详解】A、出现频率、种群密度以及它与其他物种的关系等通常属于研究植物的生态位范畴，而研究某种动物的生态位，通常要研究它的栖息地、食物、天敌以及与其他物种的关系等，A错误； B、据图可知，总体上暖季的有蹄类时间生态位有更高的重叠度，可能是由于环境条件的改善，动物们的活动时间更加灵活，从而导致时间生态位的重叠度增加，B正确； C、据图可知，毛冠鹿在冷季和暖季的活动时间范围都相对固定，且主要集中在白天，而中华斑羚主要在白天活动，且其活动时间范围在冷季和暖季也基本保持一致，因此暖季时中华扭角羚与毛冠鹿出现较大的生态位重叠，竞争能力弱的物种可能会走向灭亡，C正确； D、中华斑羚的种群数量不仅受生物因素（食物、天敌、种间关系）影响，还受非生物因素（光照、温度、水分等）的影响，D错误。 故选AD。 16．ABC 【分析】病原体在进入机体后，其表面一些特定的蛋白质等物质，能够与免疫细胞表面的受体结合，从而引发免疫反应。这些能引发免疫反应的物质称为抗原。人体的免疫系统具有分辨“自己”和“非己”成分的能力，一般不会对自身成分发生免疫反应。但是，在某些特殊情况下，免疫系统也会对自身成分发生反应。如果自身免疫反应对组织和器官造成损伤并出现了症状，就称为自身免疫病。RA属于自身免疫病。 【详解】A、抗体是由浆细胞产生的，A错误； B、免疫自稳是指机体清除衰老或损伤的细胞，进行自身调节，维持内环境稳态的功能。正常情况下，免疫系统对自身的抗原物质不产生免疫反应；若该功能异常，则容易发生自身免疫病。因此，RA属于免疫自稳功能异常导致的自身免疫病，而免疫监视功能低下或失调，机体会有肿瘤发生或持续的病毒感染，B错误； C、CAR-T的治疗机理是替代细胞毒性T细胞的作用，C错误； D、单抗R可诱导血液中的异常B细胞凋亡，CAR - T可有效清除淋巴结等处的异常B细胞。类风湿性关节炎与某些B细胞异常活化有关，将单抗R和CAR-T联用，既能作用于血液中的异常B细胞，又能作用于淋巴结等处的异常B细胞，能更全面、快速地清除异常B细胞，从而可快速、有效缓解RA症状，D正确。 故选ABC。 17．(1) 内质网 高尔基体 (2) 降低 水 (3)提高CFTR蛋白含量 (4) 错误 错误折叠的CFTR蛋白无法正常运输氯离子，氯离子运输效率下降 【分析】根据题意分析，人体的CFTR蛋白是细胞膜上主动转运氯离子的载体，若细胞膜上CFTR蛋白缺失，导致氯离子在细胞中累积，细胞内渗透压升高，进而导致水分出细胞发生障碍，使患者易出现呼吸道感染。 【详解】（1）CFTR蛋白为细胞膜上的载体蛋白，需要在内质网和高尔基体内加工，最终通过囊泡与细胞膜融合完成定位。 （2）人体的CFTR蛋白是细胞膜上主动转运氯离子的载体，该种类型的囊性纤维病患者细胞膜上CFTR蛋白缺失，导致氯离子在细胞中累积，会导致细胞外液中的氯离子浓度降低，随着细胞中氯离子浓度逐渐升高，该侧的水分子被运输到外侧的速度会下降，即影响水的运输，最终使得细胞外液的黏液增多。 （3）在细胞处于应激状态时，内质网中的“救援蛋白”通过塑造特殊结构，介导CFTR蛋白直达细胞膜，该运输途径的生物学意义是：在应激条件下提高CFTR蛋白含量，有利于快速保障部分功能以维持生命活动。 （4）科研人员推测，该途径可能不会缓解囊性纤维病病情，原因是CFTR蛋白通过“管道”直达细胞膜，可能会运输错误折叠的蛋白质，导致错误折叠的CFTR蛋白无法正常运输氯离子，氯离子运输效率下降。 18．(1) 甘露醇 该培养基中无氮源，自生固氮菌能利用空气中的氮气来生长繁殖，没有固氮能力的微生物生长会受到抑制 (2) 湿热灭菌 保证无氮培养基未被杂菌污染 (3) 降低样液中菌种的浓度，以便接种后能获得单个菌落 使涂布均匀 涂布平板法得到的菌落仅分布在培养基表面；倾注平板法得到的菌落分布在培养基表面和内部 (4) （培养皿）皿底 防止培养基中的微生物污染环境 【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】（1）培养基中作为碳源的是甘露醇；利用该培养基能分离出自生固氮菌的原理是无氮培养基中，自生固氮菌能利用空气中氮气作为氮源来生长繁殖，其他没有固氮能力的微生物因缺氮源生长会受到抑制。 （2）培养基灭菌用湿热灭菌法（或高压蒸汽灭菌法）进行灭菌，将未长微生物的培养皿用于实验，目的是保证无氮培养基未被杂菌污染（或检测培养基灭菌是否彻底）。 （3）样液充分稀释是为了降低样液中菌种的浓度，以便接种后能获得单个菌落（避免菌体重叠，便于计数和分离）；涂布时转动培养皿是为使菌液均匀涂布在培养基表面；由题图分析可知，涂布平板法得到的菌落仅分布在培养基表面；倾注平板法得到的菌落分布在培养基表面和内部。 （4）在使用培养皿前，需在培养皿底部写信息；使用后灭菌是为防止培养基中的微生物污染环境。 19．(1)防止外源基因插入并表达，保持了细菌遗传性状，以保证自身的安全 (2) 3'-UCGUA…CAUGGA-5' 限制性内切核酸 磷酸二酯 (3) 短 sgRNA的识别序列短，特异性差，容易与其他片段结合造成编辑出错，造成脱靶，故RNA的序列越短脱靶率越高。 (4) XmaI和BglⅡ 使用这两种酶切割质粒可产生与改良基因两端相同的黏性末端 (5)插入的改良基因可以正常表达 (6) Ca2+ 能吸收周围环境中DNA分子 (7) 不一定 若农杆菌细胞中导入的是未携带改良基因的质粒，其只要含氨苄青霉素抗性基因，也能在含氨苄青霉素的培养基中生长 (8)生长素和细胞分裂素的比例不同 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】（1）CRISPR/Cas9是一种高效的基因编辑技术，在单链向导RNA（SgRNA）引导下，Cas9基因表达产生的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”，切割DNA双链以敲除目标基因（靶基因），因此细菌细胞内存在CRISPR-Cas9系统可通过切割外源DNA使之失效，防止外源基因插入并表达，保持了细菌遗传性状，以保证自身的安全。 （2）向导RNA与目标基因的碱基序列应互补，且两条链方向相反，因此若目标基因序列为 5′−AGCAT⋯⋅⋅⋅GTACCT−3′ ，则设计的向导RNA中相应的序列应为3′−UCGUA⋅⋅⋅⋅⋅⋅CAUGGA−5′。Cas9基因表达产生的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”，切割DNA双链以敲除目标基因（靶基因），因此Cas9蛋白相当于限制性内切核酸酶，可催化磷酸二酯键的断裂。 （3）由于其他DNA序列也含有与向导RNA互补配对的序列，sgRNA的识别序列短，特异性差，容易与其他片段结合造成编辑出错，造成脱靶，故RNA的序列越短脱靶率越高。 （4）根据改良基因两侧的黏性末端可知，将改良基因和农杆菌的Ti质粒连接时，需用限制性内切核酸酶Xma Ⅰ和Bgl Ⅱ对农杆菌的Ti质粒进行切割，选用上述酶进行切割质粒可产生与改良基因两端相同的黏性末端。 （5）图1中构建的基因表达载体，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，其中目的基因的上下游序列需具备启动子和终止子，以确保插入的改良基因可以正常表达。 （6）将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用Ca2+处理处理农杆菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。 （7）基因表达载体上含有标记基因氨苄青霉素抗性基因，可便于重组DNA的筛选，但由于农杆菌细胞只要含氨苄青霉素抗性基因，即使不含改良基因，也能在含氨苄青霉素的培养基中生长，故在含氨苄青霉素的培养基中能够生长的农杆菌细胞中不一定含有改良基因。 （8）分析题图2可知，愈伤组织经再分化过程形成转基因水稻苗，培养基2的目的是获得愈伤组织，培养基3的目的是获得转基因水稻，在配制这两个培养基时所用的生长素和细胞分裂素的比例不同 。 20．(1) 纤维素酶和果胶酶 杂种原生质体可通过互补解除IOA和R-6G的抑制作用 再分化 (2) 1 e 原生质体中转入抑制GAUT基因表达载体 不能，还需进行实验验证使用激素组合对GAUT基因表达量的影响 【分析】植物体细胞杂交技术：指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。操作步骤：先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁得到原生质体，再利用聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法或电融合法、离心法诱导原生质体融合，融合后的杂种细胞再经过诱导可形成愈伤组织，并可进一步发育成完整的杂种植株。 【详解】（1） 分析题图1，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，可利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体。IOA可抑制细胞呼吸第一阶段，R-6G可抑制细胞呼吸第二、三阶段，杂种原生质体生理互补，可通过互补解除IOA和R-6G的抑制作用，细胞呼吸正常，能正常分裂，而未融合或同种融合原生质体会在细胞呼吸不同阶段受到抑制从而无法正常分裂，因此诱导原生质体融合后，只有杂种原生质体可持续分裂形成再生细胞团，而未融合或同种融合原生质体不能分裂。在植物组织培养过程中，愈伤组织经过再分化后，进而发育成再生植株。细胞呼吸正常，能正常分裂，而未融合或同种融合原生质体会在细胞呼吸不同阶段受到抑制从而无法正常分裂，因此诱导原生质体融合后，只有杂种原生质体可持续分裂形成再生细胞团，而未融合或同种融合原生质体不能分裂。在植物组织培养过程中，愈伤组织经过再分化后，进而发育成再生植株。 （2）①分析题图2可知，与使用激素组合2相比，使用激素组合1的甘蔗杂种原生质体完成再生壁的细胞比例较高，故甘蔗杂种原生质体再生过程中最好使用激素组合1。②为验证激素通过促进果胶合成关键酶基因GAUT表达，从而促进细胞壁再生，自变量为GAUT基因的有无，因变量为杂种原生质体再生情况，可进行如下实验设计：将甘蔗杂种原生质体随机均分为1、2、3三组，1组不使用激素，原生质体中转入过量表达GAUT基因载体；2组不使用激素，原生质体中转入抑制GAUT基因表达载体；3组不使用激素，原生质体中不转入GAUT基因。在相同且适宜的条件下培养一段时间，检测各组完成再生壁的细胞比例。但由于没有进行实验验证使用激素组合对GAUT基因表达量的影响，故上表实验不能够达成完整验证推测的目的。 21．(1) 发酵罐内发酵 前 酸 稀释涂布平板 (2) 纤维素 透明圈 (3) 维生素B1 3与5的交界处 【分析】发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产物的分离和提纯等方面。纯化微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。从土壤中分离出能产生纤维素酶的纤维素分解菌，应用纤维素作为唯一碳源制成选择培养基进行分离。 【详解】（1）整个发酵过程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，即图中的发酵罐中发酵。在制备培养基时，应在灭菌前将pH调至酸性，因为产黄青霉菌适宜在酸性环境中生长。对微生物进行分离纯化并计数常采用稀释涂布平板法。 （2）欲从土壤中分离出能产生纤维素酶的纤维素分解菌，可用纤维素作为唯一碳源制成选择培养基进行分离，因为只有能分解利用纤维素的微生物才能在该培养基上生长。在分离纤维素分解菌的培养基中加入刚果红，刚果红能与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红 - 纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，通过观察是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 （3）营养缺陷型菌株是指野生型菌株经过人工诱变或自然突变失去合成某种营养的能力，只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子后才能生长。观察表格中 15 种维生素的分组情况，发现维生素B1只在 1 组和 2 组中存在，其他组均无。因为实验结果显示 1 组和 2 组滤纸片周围产生生长圈，这意味着只有在含有维生素B1的条件下该菌才能生长，所以可以推断出该营养缺陷型大肠杆菌不能合成的维生素是维生素B1。已知该菌株为叶酸和生物素的双营养缺陷型大肠杆菌，观察表格可知叶酸只在 3 组，生物素只在 5 组，所以只有在同时含有叶酸和生物素的区域，即 3 与 5 的交界处，该菌株才能生长并形成菌落。 学科网（北京）股份有限公司 $ 湖南省益阳市2025-2026学年高二下学期期末考试自编试卷 生物学试题 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第I卷（选择题 共40分） 一、选择题：本题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1．下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（　　） A．制作酸奶时，牛奶巴氏消毒冷却后接种乳酸菌，先通气后密封发酵 B．制作泡菜时，用水密封泡菜坛口，使气体只能从坛中排出而不能进入 C．制作腐乳时，发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是曲霉 D．制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行灭菌，以防止杂菌污染 2．肉桂链霉菌是生产莫能菌素的重要细菌，莫能菌素具有显著的抗球虫和抗肿瘤活性。在实验室对该菌进行纯培养的过程中，下列说法错误的是（　　） A．培养基经高压蒸汽灭菌冷却后再倒平板 B．超净工作台、接种室、空气可以通过紫外线消毒 C．平板划线法可用于微生物的分离、纯化和计数 D．平板划线后培养微生物时要倒置培养以防止污染 3．下列有关微生物培养与应用技术的叙述，正确的是（　　） A．最后一次划线末端与第一次划线首端相连，有利于酵母菌的分离 B．若要检测水中大肠杆菌是否超标，待检测水样需要经过灭菌后再检测 C．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果往往比实际值低 D．采用稀释涂布平板法接种后，不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单菌落 4．某地通过实施“蓝色海湾”整治，应用“破堤通海”等策略，成功改善了海洋海岛生态。“破堤通海”是指让大堤两侧的“两片海”重新连通，连通后，使地理隔离长达10余年的鲈鱼重新形成一个大种群，恢复其繁衍栖息地。红树林、盐沼湿地新增常驻候鸟20余种，吸引了黄嘴白鹭等79种鸟类栖息繁衍。下列叙述错误的是（    ） A．“两片海”的鲈鱼种群不存在生殖隔离 B．原地理隔离的两个鲈鱼种群基因库完全相同 C．栖息地、天敌都是调节黄嘴白鹭种群数量的外源性因素 D．整治后当地生态系统抵抗外界干扰的能力更强 5．人类活动导致海洋酸化和气候变暖是现在关键的环境问题，科学家研究在环境胁迫下，基本的生态系统属性能否通过稳定过程持续到未来，研究结果如图所示，下列说法错误的是（    ） A．营养结构的复杂程度对生物量金字塔的变化没有影响 B．气候变暖会改变生物量金字塔的形状但不会改变营养结构 C．海洋酸化在所有食物网层面上都有适度的积极影响 D．长期变暖和酸化共同影响会导致生物量金字塔顶端崩溃 6．下列实验操作中，正确的是（    ） A．检测还原糖时，先向待测样液中加入斐林试剂甲液，混匀后滴加少量乙液 B．黑藻叶片既可用于观察细胞质的流动，也可用于探究植物细胞的吸水和失水 C．酵母菌的纯培养实验中，平板划线时最后一次的划线必须与第一次的划线相连 D．植物的组织培养过程要保证严格无菌环境，外植体、培养基、培养瓶均需灭菌 7．科学家通过体外培养鸡的干细胞，得到100%细胞培养肉，在色香味以及营养角度与传统鸡肉相差无几。相关叙述错误的是（    ） A．需要先使用胰蛋白酶等处理干细胞 B．后期需诱导干细胞分化成肌肉细胞 C．需置于95%O2+5%CO2混合气体环境 D．未来可根据个人口感或需求实现定制肉 8．储脂类哺乳动物的整个冬眠过程包含多个冬眠阵。每个冬眠阵由入眠、深冬眠、激醒和阵间觉醒四个阶段组成，如图表示一个冬眠阵过程中其体温和代谢率的变化。下列相关叙述错误的是（    ） A．入眠阶段该哺乳动物的散热量等于产热量 B．深冬眠阶段该动物的皮肤毛细血管收缩，减少散热 C．深冬眠过程中该动物呼吸速率下降，从而降低代谢率 D．激醒过程中甲状腺激素和肾上腺素的分泌可能增加 9．临床上常用能量合剂给患者提供能量，改善细胞功能，提高治疗效果。某能量合剂的配方如下表，其中辅酶A参与糖和脂肪等有机物的氧化分解。下列叙述错误的是（    ） 成分 ATP 辅酶A 10%KCl 5%NaHCO3 用量 60mg 100U 10mL 50mL 用法 溶于500mL5%葡萄糖溶液后，静脉滴注 A．K+经协助扩散内流以维持神经细胞静息电位 B．补充辅酶A可增强细胞呼吸促进ATP生成 C．/H2CO3在维持血浆pH稳定中起重要作用 D．合剂中的无机盐离子参与细胞外液渗透压的维持 10．固态发酵法是我国酿造白酒的传统方法之一，是一种利用多种天然微生物接种、固态糖化发酵同时进行、固态甑桶蒸馏的酿酒法。以高粱、小麦、大米、玉米等为原料，在蒸煮、糖化、发酵、蒸馏等主要酿造过程中采用固态基质形态生产白酒。下列有关叙述正确的是（    ） A．参与发酵过程的多种微生物之间可能存在着竞争关系 B．固态发酵法的糖化过程中主要利用了微生物产生的蛋白酶 C．生产白酒的发酵过程一般要采取密封措施以防止杂菌的污染 D．参与发酵的菌种越单一，最终生产出来的白酒品质就会越高 11．研究人员仿照制备乳腺生物反应器的思路，制备了一种膀胱生物反应器用其获得人体特殊功能蛋白W，基本过程如下图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．图中①和③过程代表的操作分别是显微注射和胚胎移植 B．转基因动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的遗传信息不同 C．需用激素对代孕母体进行同期发情处理 D．与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受转基因动物性别和年龄的限制 12．为降低寄生虫疫苗候选抗原蛋白异位表达毒性等副作用，研究者将增强绿色荧光蛋白（EGFP）基因与线虫肌动蛋白（Act-1）启动子核心片段重组，利用大肠杆菌表达荧光蛋白，来确定Act-1基因启动子核心片段的活性，其主要步骤如图所示。下列叙述正确的是（    ） 注：Ori表示复制原点；AmpR表示氨苄青霉素抗性基因。 A．利用PCR扩增Act-1基因启动子时，需用到SalⅠ酶和HindⅢ酶 B．在添加氨苄青霉素的培养基上，获得的菌落均能发出荧光 C．Ori可能富含G—C碱基对，有利于DNA从此处开始解旋 D．启动子与质粒重组前需添加XhoⅠ酶的识别序列 二、多项选择题：本题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对的得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分。 13．图1为人体内3个神经元之间的联系示意图，图2表示某时刻兴奋在神经元B上的部分传导过程。下列相关叙述错误的有（    ）    A．若降低神经元A周围环境中的K+浓度，则其兴奋性增强 B．若同时刺激神经元A和C，比起单独刺激神经元A，神经元A释放递质更多 C．图2中的②处K+外流恢复静息电位，④处Na+内流形成动作电位 D．图2中兴奋以电信号的形式沿神经纤维从右向左传导 14．当病原体被抗体包被形成的颗粒较大而无法被巨噬细胞吞噬时，NK细胞可释放胞毒颗粒裂解病原体，其过程如图所示。下列相关叙述正确的有（    ） A．一种B细胞在被激活后只能产生一种抗体 B．③中NK细胞通过FcR与抗体结合被激活 C．胞毒颗粒属于免疫活性物质，其释放依赖于细胞膜的选择透过性 D．NK细胞清除病原体的过程体现了免疫系统的免疫防御功能 15．物种在种间竞争中通过适应或者改变行为来调整在空间、时间和营养生态位的重叠，以获得最大化收益，实现共存。研究人员对四川小寨子沟国家级自然保护区冷、暖季有蹄类动物的时间生态位进行调查，结果如图。下列叙述错误的是（　　） A．出现频率、种群密度以及它与其他物种的关系等通常属于该有蹄类动物生态位研究的范畴 B．冬季大多数有蹄类动物向南迁移，因此总体上暖季的有蹄类时间生态位有更高的重叠度 C．暖季时中华扭角羚与毛冠鹿出现较大的生态位重叠，竞争能力弱的物种可能会走向灭亡 D．中华斑羚的种群数量受食物、天敌等生物因素的影响，而与光照、温度等非生物因素无关 16．类风湿性关节炎（RA）是一种自身免疫病，与某些B细胞异常活化有关。靶向B细胞膜蛋白CD20的单抗R可诱导血液中的异常B细胞凋亡，靶向B细胞膜蛋白CD19的特殊T细胞（CAR-T）可有效清除淋巴结等处的异常B细胞。下列叙述错误的是（　　） A．异常B细胞识别自身抗原后直接产生抗体 B．RA属于免疫监视功能异常导致的自身免疫病 C．CAR-T的治疗机理是替代辅助性T细胞的作用 D．单抗R和CAR-T的联用可快速、有效缓解RA症状 第II卷（非选择题 共60分） 3、 非选择题：本题共5小题，共60分。 17．某种类型的囊性纤维病患者的细胞膜上缺少负责正常运输氯离子的CFTR蛋白，导致黏液堆积在肺部等器官。研究表明，当细胞遇到病毒感染等应激状态时，内质网里的一些“救援蛋白”会将内质网改造成管道形状的特殊结构，直接让CFTR蛋白通过“管道”直达细胞膜。分析下图，回答下列问题：   (1)正常情况下，CFTR蛋白需依次经过_______、_______的加工运输，最终通过囊泡与细胞膜融合完成定位。 (2)该种类型的囊性纤维病患者细胞膜上CFTR蛋白缺失，会导致细胞外液中的氯离子浓度_______（填“增高”或“降低”），影响_______的运输，最终使得细胞外液的黏液增多。 (3)在细胞处于应激状态时，内质网中的“救援蛋白”通过塑造特殊结构，介导CFTR蛋白直达细胞膜，该运输途径的生物学意义是：在应激条件下________，有利于快速保障部分功能以维持生命活动。 (4)科研人员推测，该途径可能不会缓解囊性纤维病病情，原因是CFTR蛋白通过“管道”直达细胞膜，可能会运输_______（填“正确”或“错误”）折叠的蛋白质，导致_______。 18．取农田表层土壤样品10g，放入无菌研钵中，并注入5mL无菌水制成稀泥浆，再将稀泥浆接种到无氮培养基上进行培养。该方法可将自生固氮菌与其他细菌分离开来。阿须贝氏无氮培养基配方如下所示。回答下列问题： 甘露醇10g（可用蔗糖代替）；磷酸氢二钾0.2g，硫酸镁0.2g；氯化钠0.1g；硫酸钙0.1g，碳酸钙5g；琼脂15~18g；水1000mL；pH=7.0. (1)阿须贝氏培养基各成分中作为碳源的是_______；利用该培养基能分离出自生固氮菌的原理是________ (2)制备好的无氮培养基需用______法进行灭菌，灭菌后，需将盛有无氮培养基的培养皿放在37℃的恒温箱中两天。随后，选取培养基上没有生长任何微生物的培养皿供实验用，这一操作的目的是_____。 (3)如图所示，接种可采用涂布平板法和倾注平板法。两种接种方法都需要先将样液进行充分稀释，目的是______。涂布平板时需将涂布器放在酒精灯的火焰上灭菌，略微打开培养皿盖，将冷却的涂布器伸进培养皿对加入的稀泥浆进行涂布，涂布时可转动培养皿，目的是________。倾注平板法接种时先向培养皿中加入稀泥浆，再倾注培养基。这两种接种方法培养得到的菌落在培养基空间分布的情况是_________。    (4)在使用培养皿前，需在________上写明实验内容、接种人的姓名和接种日期等；使用后的培养基丢弃前需要进行灭菌处理，目的是________。 19．I近年来现代生物技术飞速发展，以下是两种现代生物技术的流程图，请据图回答： (1)研究发现CRISPR-Cas9系统广泛存在于细菌细胞内，这对细菌来说的意义是______。 (2)CRISPR/Cas9系统能精准识别目标基因，若目标基因序列为5'-AGCAT…GTACCT-3'。则设计的向导RNA中相应的序列应为______。Cas9蛋白相当于______酶、可催化______键断裂。 (3)sgRNA切割非特异性DNA导致CRISPR/Cas9编辑系统对非目的基因进行编辑的现象称为“脱靶”。研究发现脱靶几率与sgRNA的长度相关，sgRNA的识别序列越_______（填“长”或“短”），基因编辑的脱靶率越高，原因是______。 Ⅱ普通水稻含铁量极低，研究人员通过改良相关基因，培育出了铁含量比普通水稻高60%的转基因水稻。图1为改良基因及Ti质粒的示意图，该质粒含有氨苄青霉素抗性基因、LacZ基因及一些酶切位点，图2为后续培养过程。回答下列问题： (4)将改良基因和农杆菌的Ti质粒连接时，需用限制性内切核酸酶______对Ti质粒进行切割，选用上述酶进行切割的理由是______。 (5)图1中构建的基因表达载体，改良基因的上下游序列需具备启动子和终止子，以确保_______。 (6)将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用______处理农杆菌，使细胞处于一种____________的生理状态，从而易于重组Ti质粒导入。 (7)在含氨苄青霉素的培养基中能够生长的农杆菌细胞中______（填“一定”或“不一定”）含有改良基因，原因是_______、 (8)图2中愈伤组织经过程形成转基因水稻苗，培养基2与培养基3的区别是________。 20．甘蔗是蔗糖的主要来源，甘蔗R具有高产高糖的优良特性但耐寒性差；甘蔗G是耐寒品种。科研人员利用植物体细胞杂交技术以期快速培育出耐寒性更强且性状更优良的甘蔗新品种，技术流程如图1所示。请分析回答下列问题： (1)如图1，过程①可利用______去除细胞壁获得原生质体。分别加入IOA和R-6G钝后诱导原生质体融合。仅有杂种原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是_______过程⑥中，愈伤组织经过_______（填“脱分化”或“再分化”）后，进而发育成再生植株。 (2)科研人员发现制备原生质体及原生质体融合后均会不同程度发生氧化褐变、细胞壁再生困难的现象。为解决这一问题，科研人员利用甘蔗杂种原生质体进行以下实验。 ①由图2可知，甘蔗杂种原生质体再生过程中最好使用激素组合_______。 ②科研人员推测激素通过促进果胶合成关键酶基因GAUT表达，从而促进细胞壁再生，请将下表补充完整为该推测提供证据（选填下列字母）。 组别 激素使用 实验处理 检测指标 1 不使用激素 原生质体中转入过量表达GAUT基因载体 ________ 2 ________ 3 原生质体中不转入GAUT基因 a.不使用激素 b.使用激素组合1 c.使用激素组合 2 d.原生质体中2，4-D和6-BA的含量 e.完成再生壁的细胞比例 上表实验是否能够达成完整验证推测的目的?请简述理由：________。 21．分发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图1所示。回答相关问题： (1)整个发酵过程的中心环节是________。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH在灭菌________（填“前”或“后”）调至________性。对产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了________法。 (2)欲从土壤中分离出能产生纤维素酶的纤维素分解菌，可用加入________作为唯一碳源制成的选择培养基进行分离。若将样品接种到分离纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料刚果红，通过观察是否产生________来筛选纤维素分解菌。 (3)研究发现，某些青霉菌属于维生素营养缺陷型菌株，失去合成某种维生素的能力，只有在基本培养基中补充所缺乏的维生素后才能生长。某研究小组筛选出某种维生素营养缺陷型菌株，为了进一步确定该菌株的具体类型，他们把15种维生素按照不同组合分为5个小组，用5个滤纸片分别蘸取不同小组的维生素，然后覆于接种后的琼脂平板上培养一段时间。结果如表： 组别 维生素组合 1 维生素A 维生素B1 维生素B2 维生素B6 维生素B12 2 维生素C 维生素B1 维生素D2 维生素E 烟酰胺 3 叶酸 维生素B2 维生素D2 胆碱 泛酸钙 4 对氨基苯甲酸 维生素B6 维生素E 胆碱 肌醇 5 生物素 维生素B12 烟酰胺 泛酸钙 肌醇 实验结果显示1组和2组滤纸片周围产生生长圈（图2），则该营养缺陷型大肠杆菌不能合成的维生素是________。若该菌株为叶酸和生物素的双营养缺陷型大肠杆菌，则其在培养基上形成菌落的位置是________。 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $