湖南省长沙市2025-2026学年高二下学期期末考试生物学自编试卷（人教版）

**基本信息** 高二下学期期末生物试卷，以传统发酵、微生物培养、神经调节、基因工程等为核心，融合莫能菌素生产、海珠湿地生态修复等真实情境，突出生命观念与科学思维的考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/40分|发酵技术、细胞代谢、生态多样性、神经调节|结合海珠斯萤叶甲新物种等实例，考查结构与功能观| |非选择题|5题/60分|基因工程、微生物筛选、神经传导|如17题非洲猪瘟病毒抗原制备，整合PCR技术与单克隆抗体制备，体现探究实践；21题解磷菌筛选实验，培养数据分析能力|

湖南省长沙市2025-2026学年高二下学期期末考试自编试卷 生物学试题 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第I卷（选择题 共40分） 一、选择题：本题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1．下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（　　） A．制作酸奶时，牛奶巴氏消毒冷却后接种乳酸菌，先通气后密封发酵 B．制作泡菜时，用水密封泡菜坛口，使气体只能从坛中排出而不能进入 C．制作腐乳时，发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是曲霉 D．制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行灭菌，以防止杂菌污染 2．肉桂链霉菌是生产莫能菌素的重要细菌，莫能菌素具有显著的抗球虫和抗肿瘤活性。在实验室对该菌进行纯培养的过程中，下列说法错误的是（　　） A．培养基经高压蒸汽灭菌冷却后再倒平板 B．超净工作台、接种室、空气可以通过紫外线消毒 C．平板划线法可用于微生物的分离、纯化和计数 D．平板划线后培养微生物时要倒置培养以防止污染 3．下图为对刚收获的种子所做的一系列处理，据图分析有关说法正确的是（　　） A．④和⑤分别是结合水、自由水，①和②均能够萌发形成幼苗 B．点燃后产生的CO2中的C可来自种子中的糖类、脂肪、蛋白质等有机物 C．图中的③为生物体的生命活动提供能量 D．刚收获的种子含④/⑤的比例小，代谢旺盛，不利于储存 4．近年来，广州市海珠区湿地生态修复显著，2021年在海珠湿地采集到的昆虫标本超过了15万种，并发现了海珠斯萤叶甲和海珠珐轴甲两个新物种。下列有关说法错误的是（    ） A．昆虫的种类繁多体现了基因的多样性和物种的多样性 B．海珠斯萤叶甲和海珠珐轴甲不能相互杂交产生可育后代 C．昆虫的科研价值和药用价值体现了生物多样性的间接价值 D．生态环境恢复过程中发生的演替类型属于次生演替 5．某人腰椎部位受外伤导致右侧下肢运动障碍， 受伤的腰椎部位与右侧下肢的反射弧如图所示，其中③④分别表示腰椎部神经中枢的背部侧和腹部侧，下列分析错误的是 A．若受伤部位是②，刺激右侧下肢无感觉 B．若受伤部位是③，刺激右侧下肢有感觉 C．若受伤部位是④，刺激右侧下肢有感觉 D．若受伤部位是⑤，刺激右侧下肢有感觉 6．人在过马路时，若看到汽车突然快速驶来，则会产生心跳加速、支气管扩张等一系列变化，神经调节和体液调节均参与了上述变化。下列叙述错误的是（　　） A．神经调节反应较为迅速 B．体液调节作用时效长 C．神经调节作用范围较窄 D．两种调节分别独立进行 7．下图为某神经纤维电位的测量模式图，图中刺激为有效刺激，a处为受刺激部位。下列叙述正确的是（　　） A．图示刺激引起的兴奋在神经纤维上单向传导 B．受到刺激后，a处膜内的Na+浓度高于膜外的 C．受到刺激后，a处的膜电位会变为内正外负 D．电流计的指针会先向左偏转，再向右偏转 8．青霉素是人类发现的第一种抗生素，其工业化生产流程如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．虽然青霉素具有杀菌作用，但仍然需对发酵罐进行灭菌 B．过程①、②的目的是快速增加菌种的数量，③是接种发酵，都使用了液体培养基 C．过程③中需从下方的充气口通入无菌空气以提高溶解氧，过程④一般通过湿热灭菌 D．过程⑤常用的方法是过滤和沉淀，可从分离出的菌种中提取到单细胞蛋白，但菌种不可再使用 9．下列研究方法与研究内容相匹配的是（    ） 选项 研究方法 研究内容 ① 在固体培养基表面划线并培养 计数某种微生物的菌落数目 ② 诱变剂处理愈伤组织细胞并观察其分裂 特定基因在减数分裂过程中的分配 ③ 标记抗体与抗原特异性结合 转入的目的基因是否成功表达 ④ 电泳 鉴定PCR的产物情况 A．①② B．③④ C．①③ D．②④ 10．下列实例与采用的生物技术对应错误的是（    ） A．利用酵母菌、乳酸菌分别制作果酒和酸奶——发酵技术 B．利用草莓部分组织可以短期内诱导出大量试管苗——杂交技术 C．将环斑病毒株系Ys的复制酶基因转入番木瓜，培育出抗病毒番木瓜——转基因技术 D．将北极狼体细胞中的细胞核与比格犬的去核卵细胞融合，培育出北极狼——克隆技术 11．青霉素发酵是高耗氧过程。在青霉素的发酵生产过程中总有头孢霉素产生。人们通过对青霉菌代谢途径的研究发现，在青霉素与头孢霉素的合成过程中、它们有一个共同的前体，这个前体经过两种不同酶的作用分别合成两种产物。下列相关叙述错误的是（    ） A．工业化生产之前需要进行青霉菌纯培养，筛选育霉素分泌量高的优良菌种 B．进行主发酵前一次性加足所需的营养组分以利于工业化生产 C．通过敲除其中一种酶的基因，从而使青霉菌只产生一种产物 D．将血红蛋白基因导入青霉菌是一种保证发酵过程中高效供氧的思路 12．光抑制现象是指强光条件下当植物接收的光能超过其光合作用的利用量时，光合作用强度下降的现象。为探究油菜素内酯（BR）对光抑制的影响机制，将某植物幼苗进行分组处理，用强光照射，其中试剂L可抑制光反应关键蛋白的合成。下列说法正确的是（　　） A．可以使用无水乙醇分离植物幼苗叶肉细胞中的光合色素 B．与乙组相比，丙组的设置采用了自变量控制中的“减法原理” C．与甲组相比，乙组加入BR后光抑制现象增强 D．BR可能通过促进光反应中关键蛋白的合成发挥作用 二、多项选择题：本题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对的得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分。 13．如图是活细胞中三种元素含量或三种化合物的扇形图，下表是几种细胞中六种大量元素的百分比含量。下列叙述正确的是（　　） 元素 O C H N P S 玉米细胞（干重） 44.43 43.57 6.24 1.46 0.20 0.17 人细胞（干重） 14.62 55.99 7.46 9.33 3.11 0.78 人活细胞 65.00 18.00 10.00 3.00 1.40 0.30 A．若扇形图代表化合物的含量，则甲因其具有氢键所以是良好的溶剂 B．若扇形图代表元素的含量，则糖类物质一般只含甲、乙、丙三种元素 C．O在玉米干重中占比大于人细胞，其主要原因之一是玉米细胞中糖类较多 D．生物体中所有金属元素都是微量元素 14．甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。下列相关叙述正确的是（    ） A．操作过程中生物材料、培养基、培养环境都要严格灭菌 B．过程a中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗 C．过程b中可以用物理法或化学法诱导原生质体融合 D．过程c中只有活性部位互补的融合细胞才可以正常生长 15．限制酶和DNA连接酶是重组DNA技术常用的工具酶，限制酶通常将DNA分子切割成带有黏性末端的DNA片段，而DNA连接酶可缝合带有黏性末端的DNA片段。据图分析，下列叙述错误的是（    ）    A．图示三个黏性末端可由两种或三种不同的限制酶切割产生 B．图示中共有三种黏性末端，其中甲与乙黏性末端可以互补配对 C．a处和b处的核苷酸之间均需要DNA连接酶连接 D．催化甲形成的限制酶有可能不识别由甲、乙形成的重组DNA分子 16．选用红色苋菜叶做叶绿体色素提取与分离实验，由于红色苋菜叶肉细胞中花青素多于叶绿素而使叶片呈红色，分离结果显示滤纸条上依然只出现四条色素带。下列推断不合理的是（    ） A．用有机溶剂提取色素时，加入碳酸钙是为了防止叶绿素被破坏 B．该实验提取和分离色素的方法可用于测定绿叶中各种色素含量 C．连续多次重复画滤液细线可累积更多的色素，使色素带清晰 D．滤纸条上并未出现花青素条带，可能的原因是花青素为水溶性色素 第II卷（非选择题 共60分） 三、非选择题：本题共5小题，共60分。 17．非洲猪瘟病毒是一种双链DNA病毒，可引起急性猪传染病。基因A编码该病毒的主要结构蛋白A，其在病毒侵入宿主细胞和诱导机体免疫应答过程中发挥重要作用。回答下列问题： (1)制备特定抗原 ①获取基因A，构建重组质粒（该质粒的部分结构如图所示）。重组质粒的必备元件包括目的基因、限制酶切割位点、标记基因、启动子和______等；为确定基因A已连接到质粒中且插入方向正确，应选用图中的一对引物______对待测质粒进行PCR扩增，预期扩增产物的片段大小为______bp。 ②将DNA测序正确的重组质粒转入大肠杆菌构建重组菌。培养重组菌，诱导蛋白A合成。收集重组菌发酵液进行离心，发现上清液中无蛋白A，可能的原因是______（答出两点即可）。 (2)制备抗蛋白A单克隆抗体 用蛋白A对小鼠进行免疫后，将免疫小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，诱导融合的常用方法有______（答出一种即可）。选择培养时，对杂交瘤细胞进行克隆化培养和______，多次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。体外培养或利用小鼠大量生产的抗蛋白A单克隆抗体，可用于非洲猪瘟的早期诊断。 18．在全球气候变化条件下，干旱胁迫严重降低了作物的质量和产量，成为威胁粮食安全的不利因素。甜菜碱醛脱氢酶（BADH）是合成渗透调节剂甜菜碱的关键酶，将其导入玉米体内可以提高玉米的抗旱性。图1表示转基因过程所用质粒结构的示意图，图中限制酶PvitⅡ的切割位点位于识别序列的中轴线，其余限制酶的切割位点均位于识别序列中轴线的两侧。图2表示利用PCR对BADH基因进行扩增的过程示意图。回答下列问题：    (1)PCR扩增时引物与模板结合的温度为_____℃左右，据图1和图2分析，对BADH基因进行扩增应选择引物_____，且需要在引物的__________（填“5′”或“3′”）端分别添加限制酶__________（限制酶与前面所写引物顺序相对应）的识别序列。 (2)用限制酶切割质粒和BADH基因后，最好选用__________（填“E.coliDNA”或“T4DNA”）连接酶将二者相连，构建__________，该步骤的目的是__________。 (3)将目的基因导入植物细胞常用的方法是__________，该方法经过改造也可将目的基因导入玉米细胞。筛选出含目的基因的玉米细胞后，还需对其进行植物组织培养，经__________、_____两个阶段获得转基因幼苗，该两个阶段培养基所添加的__________不同。 (4)为检测转基因玉米幼苗是否具有抗旱性，在个体生物学水平上，操作方法是_____。 19．科研人员利用农杆菌转化法，将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞，培育抗虫杨树。利用含Pin-Ⅱ的DNA分子和Ti质粒构建基因表达载体的过程如图所示，图中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，neoR表示新霉素抗性基因，箭头表示限制酶的酶切位点，相关酶的识别位点如表所示。回答下列问题： (1)利用PCR扩增目的基因时，应该选择的引物是________，引物的作用是________。为使Pin-Ⅱ与Ti质粒正确连接，应在所选引物的5′端分别添加限制酶________的识别序列。 (2)为了更好地将表达载体导入农杆菌，一般要先用________处理农杆菌细胞，目的是________。 (3)用含重组Ti质粒的农杆菌侵染杨树后，应在含________的培养基中进行筛选。为检测转基因杨树的Pin-Ⅱ是否成功表达出相应蛋白质，常用的方法是________。 20．河豚的肝脏、血液等有剧毒，食后易中毒，但也可合理利用其多样性价值。研究者为研究河豚毒素的作用机制，选用枪乌贼的神经组织进行实验，结果如下表所示。 组别 实验处理 微电极刺激并测定突触前神经纤维的动作电位/mV 室温，0.5ms后测得突触后神经元动作电位/mV Ⅰ 未加河豚毒素 75 75 Ⅱ 浸润在河豚毒素中 5min后 65 65 Ⅲ 10min后 50 25 Ⅳ 15min后 40 0 回答相关问题： (1)设置对照组Ⅰ的目的是____________________，实验组突触前神经元动作电位降低的最可能原因是____________________，实验结果表明河豚毒素阻断兴奋传导的部位有____________________。 (2)若利用河豚毒素的生理作用开发药物，可作为_______（多选）。 A．降糖药 B．麻醉药 C．镇痛剂 D．抗肌肉痉挛剂 (3)研究人员为了进一步验证兴奋在反射弧中只能单向传递，利用新剥离的枪乌贼反射弧设计以下实验：（图中①②③表示刺激或检测电位变化的部位）    刺激图中①处，测量__________处电位变化；再刺激③处，测量__________处的电位变化。 预期结果：____________________。 21．磷是植物生长的重要元素，施入土壤中的磷，大多数会与Ca²⁺等阳离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土壤中筛选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程如下图所示。回答下列问题： (1)步骤③在最后一次稀释后，在3个平板上分别滴入0.1mL稀释液，经适当培养后，得到的结果分别是39、38、37，据此计算每克土样中的活菌数为______个。运用这种方法统计的菌落数往往比活菌实际数目______（填“少”或“多”），原因是_______。 (2)步骤④中待菌落长好后，应以______为标准来挑选菌落，再进行下一步平板划线操作。通常情况下，对获得的纯菌种可以依据______（如形状、大小、颜色等）对细菌进行初步的鉴定和分类。 (3)实验中欲判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置______作为对照。 (4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到特定的培养基中，并在37℃、200r·min-1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到如图的曲线。 实验中用摇床进行培养的优点是______（答2点）。本实验结果表明最优良的解磷菌株是______。 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $ 湖南省长沙市2025-2026学年高二下学期期末考试自编试卷 生物学试题（解析版） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B C B C B D C D B B 题号 11 12 13 14 15 16 答案 B D BC BCD ABC BC 1．B 【详解】A、乳酸菌为严格厌氧型微生物，通气会抑制乳酸菌的生长繁殖，制作酸奶全程需要无氧环境，无需通气，A错误； B、制作泡菜依赖乳酸菌的无氧呼吸，水密封泡菜坛口，既可以让坛内发酵产生的多余气体排出，又能隔绝外界空气进入，保证坛内无氧环境，B正确； C、腐乳发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉，不是曲霉，C错误； D、葡萄酒发酵所需的酵母菌来自葡萄皮表面的野生型酵母菌，若对葡萄汁灭菌会杀死菌种，仅需对发酵装置进行消毒即可，不需要对葡萄汁灭菌，D错误。 2．C 【详解】A、培养基经高压蒸汽灭菌后，需冷却至约50℃再倒平板，可避免温度过高导致皿盖产生大量冷凝水、或破坏培养基中热敏性营养成分，A正确； B、紫外线可破坏微生物的核酸结构起到消毒作用，超净工作台、接种室、空气都可通过紫外线消毒，B正确； C、平板划线法可通过连续划线逐步稀释菌群，实现微生物的分离和纯化，但无法对微生物进行计数，微生物计数常用稀释涂布平板法，C错误； D、平板划线后倒置培养，可避免皿盖的冷凝水滴落污染培养基，同时也能减少培养基水分过快蒸发，D正确。 3．B 【详解】A、据图示可知，①为种子晒干的过程，②为种子烘干的过程，③为种子燃烧后剩下的灰分，即无机盐，④为自由水，⑤为结合水。②为种子烘干的过程，细胞结构被破坏，故②不能够萌发形成幼苗，A错误； B、种子中的糖类、脂肪、蛋白质等有机物都含C元素，点燃时有机物氧化分解，产生的CO2中的C可来自这些有机物，B正确； C、③为无机盐，不能为生物体的生命活动提供能量，C错误； D、刚收获的种子中自由水（④）比例大，结合水（⑤）比例小，即④/⑤的比例大，代谢旺盛，不利于储存，D错误。 4．C 【分析】生物多样性价值： 直接价值：是指对人类有食用、药用和工业原料等实用意义的，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的价值； 间接价值：是指对生态系统起到重要调节作用的价值，如森林和草地对水土的保持作用，湿地在蓄洪防旱、调节气候等方面的作用； 潜在价值：是指目前人类尚不清楚的价值。 【详解】A、昆虫的种类繁多，因此存在多个不同的物种，且同一物种存在多种不同的品系，体现了基因多样性和物种多样性，A正确； B、由于海珠斯萤叶甲和海珠珐轴甲两种昆虫属于不同的物种，因此存在生殖隔离，不能通过杂交产生可育后代，B正确； C、昆虫的科研价值和药用价值体现了生物多样性的直接价值，而不是间接价值，C错误； D、生态环境恢复过程中发生的演替是次生演替，D正确。 故选C。 5．B 【分析】冲动在反射弧中传导方向为：感受器→传入神经→神经中枢→传出神经→效应器；该反射弧的神经中枢在脊髓，脊髓中分灰质和白质，白质在外，连接传入神经和大脑；灰质在内，连接传出神经。 【详解】A. 若受伤部位是②，②是传入神经，则刺激右侧下肢无感觉，Ａ正确； B. ③是腰椎部神经中枢的背部侧的低级神经中枢，若受伤部位是③，则不能通过上行传导束传到大脑皮层，刺激右侧下肢无感觉，Ｂ错误； C. ④是腰椎部神经中枢的腹部侧的低级神经中枢，若受伤部位是④，刺激右侧下肢有感觉，Ｃ正确； D. ⑤是传出神经，若受伤部位是⑤，刺激右侧下肢有感觉，Ｄ正确。 故选B。 6．D 【详解】A、神经调节通过反射弧传导神经冲动，以电信号和化学信号快速传递，反应速度远快于体液调节，A正确； B、体液调节依赖激素等化学物质通过体液运输，作用缓慢但持续时间较长（如肾上腺素在血液中维持较久），B正确； C、神经调节通过特定神经纤维支配效应器（如特定肌肉或腺体），作用范围局限且精准，C正确； D、神经调节和体液调节并非独立进行，而是相互协调配合。例如，本题中交感神经兴奋可直接作用于心脏和支气管（神经调节），同时交感神经还可促进肾上腺髓质分泌肾上腺素（神经-体液调节），肾上腺素进一步加快心跳、扩张支气管（体液调节），两者共同作用完成生理反应，D错误。 故选D。 7．C 【详解】A、在神经纤维上，兴奋在离体的神经纤维上是双向传导的，在反射弧中是单向传导的。本题中仅展示了神经纤维，未涉及反射弧相关结构，所以图示刺激引起的兴奋在神经纤维上双向传导，而不是单向传导，A错误； B、受到刺激后，Na+通过离子通道以协助扩散的方式大量内流，形成动作电位。但需要注意的是，即使在Na+大量内流的情况下，a处膜内的Na+浓度依然低于膜外的，B错误； C、神经纤维未受刺激时，膜电位表现为内负外正的静息电位；当受到刺激后，Na+内流，使膜电位变为内正外负的动作电位，所以受到刺激后，a处的膜电位会变为内正外负，C正确； D、由于图中电流计的两个电极都位于神经纤维的膜外，刺激前两电极处电位相同，电流计指针不偏转；刺激后，兴奋先传到左侧电极处，此时左侧电极处膜外电位变为负，右侧电极处膜外电位仍为正，电流计指针向右偏转；当兴奋传到右侧电极处时，右侧电极处膜外电位变为负，左侧电极处膜外电位恢复为正，电流计指针向左偏转，即电流计的指针会先向右偏转，再向左偏转，D错误。 故选C。 8．D 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品。发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、灭菌、接种、发酵、产品的分离、提纯等。 【详解】A、发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种。一旦有杂菌污染，可能导致产量大大下降。虽然青霉素能杀细菌，但为了防止其他真菌等微生物的污染，获得纯净的青霉素，发酵罐仍需严格灭菌，A正确； B、发酵工程需要接种大量菌种，过程①、②的目的是快速增加菌种的数量，过程③是将菌种接种到发酵罐，过程①、②、③都使用了液体培养基，B正确； C、青霉菌是异养需氧型微生物，因此在发酵过程中需从下方的充气口通入无菌空气以提高溶解氧，过程④是对培养基进行灭菌，一般采用湿热灭菌，C正确； D、发酵产品单细胞蛋白指通过发酵获得的大量微生物菌体，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，分离出的菌种具有生物活性，可以再使用，D错误。 故选D。 9．B 【详解】①在固体培养基表面划线并培养属于平板划线法，平板划线法可用于分离纯化微生物，不能用于计数，①错误； ②愈伤组织细胞只能进行有丝分裂，无法观察特定基因在减数分裂过程中的分配，②错误； ③抗原-抗体杂交技术可通过标记抗体检测目的基因表达的蛋白质，③正确； ④PCR扩增的产物一般用琼脂糖凝胶电泳进行鉴定，④正确。 故选B。 10．B 【分析】生物技术是指人们以现代生命科学为基础，结合其他科学的原理，采用先进的科学手段，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的。 【详解】A、酵母菌无氧呼吸可产生酒精，乳酸菌无氧呼吸可产生乳酸，故可通过发酵技术利用酵母菌、乳酸菌分别制作果酒和酸奶，A正确； B、利用植物组织培养技术，只需用少量植物材料，就可以在短期内诱导出大量试管苗，B错误； C、转基因技术是指利用分子生物学和基因工程的手段，将某种生物的基因（即外源基因）转移到其他生物物种中，从而使其出现原物种所不具备的新性状的技术，故将环斑病毒株系Ys的复制酶基因转入番木瓜，培育出抗病毒番木，利用的生物技术是转基因技术，C正确； D、动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术，故将北极狼体细胞中的细胞核与比格犬的去核卵细胞融合，培育出北极狼，利用的生物技术是克隆技术，D正确。 故选B。 11．B 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身；发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养、培养基的配置、灭菌、接种、发酵、产品的分离、提纯等方面；发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。 【详解】A、工业化生产是为获得专一的产物，同时为了获得更高的经济效益，在工业化生产之前需要进行青霉菌纯培养，筛选育霉素分泌量高的优良菌种，A正确； B、持续加入发酵原料有利于工业化生产，源源不断产生发酵产品，B错误； C、由题干信息“在青霉素与头孢霉素的合成过程中、它们有一个共同的前体，这个前体经过两种不同酶的作用分别合成两种产物”可知，对青霉菌株中控制其中一种酶的合成基因进行敲除，则青霉菌只能产生另一种酶，故青霉菌只产生一种产物，C正确； D、青霉菌是需氧型微生物，血红蛋白能运输氧气，将血红蛋白基因转入青霉菌中是一种保证发酵过程中高效供氧的思路，D正确。 故选B。 12．D 【详解】A、光合色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中：可以使用无水乙醇提取植物幼苗叶肉细胞中的光合色素，而不同色素在层析液中的溶解度不同，分离色贵时应使用层析液，A错误； B、由图中乙、丙两组的处理可知，乙丙两组的区别在于有无加入试剂L，丙组的自变量处理运用了“加法原理”，B错误； C、与甲组相比，乙组加入BR后幼苗的光合作用强度上升，光抑制减弱，C错误； D、与甲组相比，丙组光合作用强度上升，已知试剂L可抑制光反应关键蛋白的合成，由甲组、丙组相比，丙组光合作用强度较大可推测，BR可能通过促进光反应中关键蛋白的合成发挥作用，D正确。 故选D。 13．BC 【详解】A、细胞中含量最多的化合物是水，所以甲代表水，水是良好的溶剂是因为它是极性分子，A错误； B、若扇形图代表元素的含量，则甲、乙、丙分别代表O、C、H三种元素，糖类物质一般只含甲、乙、丙三种元素，B正确； C、O在玉米干重中占比大于人细胞，其主要原因是组成玉米细胞的化合物中糖类较多，C正确； D、有些金属元素是大量元素，例如钙、镁等，D错误。 故选BC。 14．BCD 【详解】A、操作过程中生物材料需要进行消毒，培养基、培养环境需要灭菌，培养时也要定期消毒，A错误； B、茎尖或芽尖(分生组织)病毒极少甚至无病毒，进行植物组织培养有利于获得脱毒苗，B正确； C、过程b为诱导原生质体融合，诱导方法有物理法和化学法，如聚乙二醇、离心等，C正确； D、据图分析，原生质体甲细胞质经处理失活，原生质体乙经处理细胞核失活，因此过程c中只有活性部位互补的融合细胞具有完整的细胞结构，可以正常生长，D正确。 故选BCD。 15．ABC 【分析】限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种；DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 【详解】A、切割产生甲的限制酶的识别序列为：GAATTC//CTTAAG，切割产生乙的限制酶的识别序列为： CAATTG//GTTAAC，切割产生丙的限制酶的识别序列为：CTTAAG//GAATTC，由此可见，图示三个黏性末端是由三种不同的限制酶催化产生的，A错误； B、由图可知，甲、乙的黏性末端相同，均为AATT—，丙的黏性末端为TTAA—，因此图示中共有两种黏性末端，其中甲与乙黏性末端可以互补配对，B错误； C、DNA连接酶能催化磷酸二酯键的形成，a处的核苷酸之间需要DNA连接酶连接，但b处（氢键）不需要，C错误； D、切割甲的限制酶的识别序列为：GAATTC//CTTAAG，而甲、乙片段形成的重组DNA分子的序列可为：GAATTG//CTTAAC，故催化甲形成的限制酶有可能不识别由甲、乙形成的重组DNA分子，D正确。 故选ABC。 16．BC 【详解】A、用有机溶剂提取色素时，加入碳酸钙的作用是防止研磨过程中色素被破坏，A正确； B、该实验中分离色素的方法是纸层析法，可根据各种色素在滤纸条上呈现的色素带的宽窄来比较判断各色素的含量，但该实验不能具体测定绿叶中各种色素含量，B错误； C、画滤液细线时要间断画2～3次，即等上一次干了以后再画下一次，若连续多次重复画滤液细线虽可累积更多的色素，但会造成滤液细线过宽，易出现色素带重叠，C错误； D、花青素存在于液泡中，溶于水，不易溶于有机溶剂，所以滤纸条上并未出现花青素条带，可能的原因是花青素为水溶性色素，D正确。 故选BC。 17．(1) 终止子（复制原点） P1 和 P3 782 蛋白A在大肠杆菌细胞内合成，缺失分泌到细胞外的信号，不能分泌到细胞外；基因A未表达；基因A丢失 (2) 聚乙二醇（PEG）融合法（或灭活病毒诱导法、电融合法） 抗体检测 【分析】1基因工程的操作步骤：（1）目的基因的选与获取：从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术获取和扩增目的基因、化学方法直接合成目的基因。（2）基因表达载体的构建：基因表达载体是载体的一种，除目的基因、标记基因外，它还必须有启动子、终止子(terminator等，这是基因工程的核心步骤。（3）将目的基因导入受体细胞：构建好的基因表达载体需要通过一定的方式才能进入受体细胞。（4）目的基因的检测与鉴定。首先是分子水平的检测，包括通过PCR等技术检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录出了mRNA；从转基因生物细胞中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原一抗体杂交，检测目的基因是否翻译成相应的蛋白等。其次，还需要进行个体生物学水平的鉴定。 【详解】（1）重组质粒的必备元件包括目的基因、限制酶切割位点、标记基因、启动子和终止子，复制原点等，终止子能终止转录过程。 要确定基因 A 已连接到质粒中且插入方向正确，应选用引物 P1 和 P3。因为 P1 与基因 A 下游的非编码区互补配对，P3 与基因 A 上游且靠近启动子的区域互补配对，这样扩增的片段大小为200+582=782bp。 将 DNA 测序正确的重组质粒转入大肠杆菌构建重组菌，培养后上清液中无蛋白 A，可能的原因有：缺失分泌到细胞外的信号，重组菌没有将蛋白A释放到细胞外；基因A未表达；基因A丢失。 （2）①诱导动物细胞融合的常用方法有聚乙二醇（PEG）融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等，这里答出其中一种即可，比如聚乙二醇（PEG）融合法。 ②选择培养时，对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 18．(1) 50 2和3 5′ EcoR Ⅰ、Pvit Ⅱ (2) T4DNA 基因表达载体 使目的基因能够在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代,并且让目的基因能够表达和发挥作用 (3) 农杆菌转化法 脱分化 再分化 植物激素的种类、浓度(或“生长素、细胞分裂素的浓度、比例等”也可) (4)将转基因玉米幼苗和未转基因的对照玉米幼苗置于相同的干旱条件下（如减少浇水或模拟干旱环境），观察并记录两组幼苗在干旱条件下的生长状况，包括叶片萎蔫程度、存活率、生物量等。 【分析】1、基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。 2、PCR技术可特异性的扩增DNA片段，关键在于引物可以和特定DNA片段的3'端特异性结合，使耐高温的DNA聚合酶酶沿引物的3'端延伸子链。基因表达载体一般包括启动子、终止子、目的基因、标记基因、复制原点等元件。 【详解】（1）PCR 扩增时，引物与模板结合发生在复性时，此时温度常控制在 50 ℃左右。引物与模板链3'端结合，沿模板链由3'端向5'端延伸，故据图1和图2分析，对BADH基因进行扩增应选择引物2和3。进行PCR时，新合成的链的延伸方向是由5'端向3'端，若要添加限制酶的识别序列，要加在5'端，这样限制酶在处理扩增出来的BADH基因时，才不会破坏基因内部结构。BADH基因要能在受体细胞中正确表达，则其要导入质粒的启动子和终止子间。故要在Pvit Ⅱ、Kpn Ⅰ和EcoR Ⅰ三种限制酶中做选择。据图1可知，KpnI在质粒上不止一个酶切位点，所以应该选择EcoRⅠ和PvitⅡ两种酶。由图1可知，BADH基因与引物3互补的链碱基序列为3'-TAC-5'，转录方向由BADH左侧向右侧，故可判断BADH基因3'-TAC-5'这条链为转录的模板链，其3'端连接在启动子侧，故引物3的5'端要加上Pvit Ⅱ识别序列，引物2的5'端要加上EcoR Ⅰ识别序列。 （2）依题意，图中限制酶PvitⅡ的切割位点位于识别序列的中轴线，其余限制酶的切割位点均位于识别序列中轴线的两侧，故EcoR Ⅰ、Pvit Ⅱ切割的切口分别是黏性末端和平末端。E.coli DNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来，不能连接具有平末端的DNA片段。而T4 DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，因此，用限制酶切割质粒和BADH基因后，最好选用T4 DNA连接酶将二者相连，构建基因表达载体，该步骤的目的是使目的基因能够在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代,并且让目的基因能够表达和发挥作用。 （3）将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。植物细胞一般具有全能性。在一定的激素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞可以经过脱分化、再分化培育出幼苗。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。故脱分化和再分化阶段培养基所添加的植物激素的种类、浓度不同（或“生长素、细胞分裂素的浓度、比例等”）。 （4）为检测转基因玉米幼苗是否具有抗旱性，可将转基因玉米幼苗和未转基因的对照玉米幼苗置于相同的干旱条件下（如减少浇水或模拟干旱环境），观察并记录两组幼苗在干旱条件下的生长状况，包括叶片萎蔫程度、存活率、生物量等。 19．(1) 引物2和引物3 使DNA聚合酶能够从引物3′端开始连接脱氧核苷酸 KpnⅠ、HindⅢ (2) Ca2+ 使农杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态 (3) 新霉素 抗原—抗体杂交法 【分析】基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心。 【详解】（1）根据引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物3'端开始连接脱氧核苷酸，利用PCR扩增目的基因时，应该选择引物2和引物3。为使Pin-Ⅱ与T质粒正确连接，应在所选引物的5'端添加限制酶Kpn I、HindⅢ的识别位点，因为EoRI会破坏目的基因。 （2）原核生物作为受体细胞时，一般要先用Ca2+处理受体细胞，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。 （3）用含重组Ti质粒的农杆菌侵染杨树后，T-DNA区段会导入杨树细胞的染色体，T-DNA区段含有新霉素抗性基因，因此应在含新霉素的培养基中进行筛选。为了检测目的基因是否表达，需从转基因杨树中提取蛋白质，用相应的抗体进行检测，该方法称为抗原一抗体杂交法。 20．(1) 排除无关变量的干扰,确保实验结果是河豚毒素引起 河豚毒素可能会抑制Na+通过神经细胞膜 神经纤维和突触 (2)BCD (3) ③ ①或② 刺激①处时③处检测不到电位变化，刺激③处时①处（或②处）能够检测到电位变化 【分析】1、神经调节的基本方式是反射，它是指在中枢神经系统参与下，动物或人体对内外环境变化作出的规律性应答。完成反射的结构基础是反射弧。 2、神经调节作用途径是反射弧，反应速度迅速，作用范围准确、比较局限，作用时间短暂。 3、题图分析：加入河豚毒素后，随时间的延长，突触后神经元动作电位逐渐降低。 【详解】（1）设置对照组Ⅰ（空白对照）的目的是排除无关变量的干扰，确保实验结果是河豚毒素引起，由图中Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ可知，加入河豚毒素后，随时间的延长，突触前神经元神经元动作电位逐渐降低，原因是河豚毒素可能会抑制Na+通过神经细胞膜，突触后神经元动作电位逐渐降低，可能是河豚毒素抑制了神经递质在突触处的传递。实验结果表明河豚毒素阻断兴奋传导的部位有神经纤维和突触。 （2）河豚毒素可以抑制神经递质在突触处的传递，因此，若利用河豚毒素的生理作用开发药物，可用作麻醉药、镇痛剂或抗肌肉痉挛剂，A错误，BCD正确。 故选BCD。 （3）兴奋在神经元之间是单向传递的，因为神经递质只能由突触前膜释放，作用于突触后膜。 实验思路：刺激图中①处，测量③处处电位变化；再刺激③处，测量①或②处的电位变化。 预期结果：当刺激①处时，兴奋会沿着神经纤维传到②处，由于突触的存在，兴奋不能传到③处，所以②处能检测到电位变化，③处检测不到；当刺激③处时，兴奋会通过突触结构将兴奋传到①处（或②处），所以①处（或②处）能检测到电位变化。 21．(1) 3.8×106 少 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 (2) 溶磷圈直径与菌落直径比值较大 菌落的特征 (3)接种等量土壤悬浮液的牛肉膏蛋白胨培养基 (4) 增加培养液中的溶氧量；使菌株与营养物质充分接触 M-3-01 【分析】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等。筛选目的微生物必须使用选择培养基。从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株常用的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法。 【详解】（1） 步骤③进行了3次稀释，每次稀释了10倍，则共将土壤悬浮液稀释了1000倍。（39+38+37）÷3÷0.1×104=3.8×106个。由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此该数值与活菌的实际数目相比偏低。 （2）溶磷圈直径（D）与菌落直径（d）比值较大，说明细菌分解磷酸盐的能力较强，所以选择溶磷圈直径（D）与菌落直径（d）比值较大的菌落。不同的微生物具有特定的菌落特征，所以可通过观察菌落的形状、大小、颜色等特征对细菌进行初步的鉴定和分类。 （3）采用稀释涂布平板法可对高效解磷菌进行分离和计数，若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种等量土壤悬浮液的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，若该培养基上的微生物种类和数量多，则可证明选择培养基的选择作用。 （4） 摇床培养是实验室培养需氧微生物的常用方法，使用摇床培养，不仅可以增大培养液中溶氧量，促进微生物的有氧呼吸，而且能够增加菌体与培养液的接触，有利于物质交换，提高营养物质的利用率。根据实验曲线图，培养相同时间后，M-3-01的上清液中可溶性磷含量较高，可知M-3-01实际溶解磷能力最强。 学科网（北京）股份有限公司 $