精品解析：河北省秦皇岛市第三中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

秦皇岛市第三中学2025-2026学年度第二学期 第二次月考高二生物 考试时间：75分钟 一、单选题（每题2分，共60分） 1. 某同学利用传统发酵技术酿制葡萄酒，下列操作错误的是（ ） A. 为了减少杂菌污染，对葡萄进行消毒处理 B. 为防止杂菌污染，排气时没有完全打开罐口 C. 为提高酒精发酵效率，控制发酵温度在18～30℃ D. 若观察到发酵液表面形成一层菌膜，则应停止发酵 2. 腐乳、泡菜、果酒、果醋等发酵食品深受消费者青睐，这些美食的制作都离不开传统发酵技术。下列有关叙述错误的是（　　） A. 传统发酵缺乏对菌种的选育，以混合菌种的固体或半固体发酵为主 B. 毛霉将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，使腐乳味道鲜美 C. 制作泡菜时，发酵液表面的白膜可能是产膜酵母大量繁殖引起的 D. 葡萄酒制作完成后，只需要打开瓶盖通入空气即可进行葡萄醋的发酵 3. 下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（ ） A. 制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行高压蒸汽灭菌，以防止杂菌污染 B. 制作果醋时，先接种醋酸菌再接种酵母菌，可提高果醋的发酵效率 C. 制作泡菜时，泡菜坛口的水封结构可营造有氧环境，满足乳酸菌的代谢需求 D. 制作腐乳时，发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉 4. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ） A. 传统发酵利用的微生物一般为天然存在的单一菌种 B. 传统发酵常常是固体发酵或者半固体发酵 C. 传统饮食中的酱油、醋、泡菜等可通过传统发酵获得 D. 传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题 5. 下列关于酵母菌纯培养的叙述，正确的是（　　） A. 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行 B. 除了第一次划线需将接种环灼烧灭菌外，后续不用灼烧即可划线 C. 最后一次划线末端与第一次划线首端相连，有利于酵母菌的分离 D. 吸管、培养皿、培养基、金属用具等可以采用干热灭菌法进行灭菌 6. 中科院微生物研究所益生菌研发团队对植物乳杆菌进行纯培养研究，为国产益生菌制剂研发提供核心菌种，配制培养基是培养微生物的第一步，下列有关微生物纯培养的叙述错误的是（　　） A. 培养基中一般都含有碳源和氮源等 B. 配制固体培养基时一般不加入水分 C. 培养基配制好后再进行灭菌、接种等步骤 D. 倒入培养基的培养皿应冷却凝固后倒置 7. 下列关于微生物培养的叙述，正确的是（　　） A. 不同培养基的具体配方不同，但一般都有水、碳源、氮源和无机盐 B. 制备固体培养基的操作程序为配制培养基、灭菌、调pH、倒平板 C. 倒平板后应立即将培养皿倒置 D. 用不含有机碳源的培养基可筛选培养固氮微生物 8. 在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。相关叙述正确的是（　　） A. 巴氏消毒法可以杀死牛奶中绝大多数的微生物，并且不会破坏牛奶中的蛋白质 B. 消毒是用强烈的理化方法杀死物体内外的所有微生物 C. 配制好培养基后，先高压蒸汽灭菌，后定容 D. 采用紫外线照射消毒前，适量喷洒石炭酸，可强化消毒效果 9. 平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。下列相关叙述正确的是（ ） A. 用平板划线法接种时，每次划线之前都需蘸取菌液 B. 平板划线法划线过程中，不能将最后一次的划线与第一次的划线相连 C. 利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数 D. 统计菌落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数目最多的平板进行统计 10. 尿素分解菌能产生脲酶，将尿素分解成NH3和CO2，NH3溶于水后菌落周围的pH升高，使溴甲酚紫显紫色。将土壤样液稀释涂在平板上培养，以筛选尿素分解菌，培养基成分见下表。下列叙述错误的是（　　） 成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4 葡萄糖 尿素 琼脂 水 含量/g 1.4 2.1 0.2 10.0 1.0 15.0 定容至1L A. 在培养基灭菌前需要将pH调至中性或弱碱性 B. KH2PO4、Na2HPO4能维持培养基pH稳定 C. CO2是尿素分解菌生长繁殖的主要碳源 D. 在尿素分解菌菌落的周围会出现紫色圈 11. 微生物计数时，若一个平板上菌落数为300，稀释倍数为106，则每克样品中的活菌数约为（　　） A. 3×108 B. 3×107 C. 3×109 D. 3×106 12. 某科研小组欲从农田土壤中分离筛选能高效降解纤维素的菌株，配制了含纤维素的选择培养基，该培养基中不应加入的物质是（　　） A. 琼脂 B. 刚果红 C. 葡萄糖 D. 无机盐 13. 产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。科研人员开展了相关研究，试图从土壤中分离出产脂肪酶酵母，相关流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 若稀释倍数都为10，则x应为8 B. 接种后应将培养皿倒置，并在皿盖上标好接种日期等 C. 将涂布器放在火焰上燃烧后立即进行涂布 D. 应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值 14. 酸笋是竹笋通过发酵产生的传统食品， 具有独特的酸味和脆爽口感。下图为酸笋自然发酵的过程， 下列说法错误的是（ ） A. 沸水漂烫的目的是杀死原料表面的杂菌 B. 盐水需煮沸冷却后使用，加入罐中没过全部菜料 C. 酸笋的酸味主要是醋酸菌发酵产生的醋酸导致 D. 若加入上一批次的发酵液可加快发酵进程 15. 我国葡萄酒酿造历史悠久、传统发酵技术延续至今。下列叙述错误的是（　　） A. 传统发酵时，葡萄酒的发酵过程中存在的菌种有葡萄果皮上的多种微生物 B. 工业化生产时，酵母菌需在无氧条件下进行扩大培养和酒精发酵 C. 通过诱变育种或基因工程育种能够改良葡萄酒发酵菌种的性状 D. 大规模发酵时，需要监测发酵温度、pH值、罐压及溶解氧等参数 16. 北京天安门广场大型立体花坛中的花卉是通过植物组织培养获得的，呈现出高度一致的颜色和形态，下列叙述错误的是（ ） A. 进行植物组织培养时必须选取离体的植物器官、组织或细胞等 B. 花卉组织培养时，脱分化形成愈伤组织的过程需要充足光照 C. 调控植物激素的比例，能诱导愈伤组织分化成根、芽等不同器官 D. 植物组织培养技术的理论基础是植物细胞的全能性 17. 马铃薯叶片细胞的细胞壁被酶解后，可获得原生质体。以下对原生质体的叙述错误的是（ ） A. 制备时需用纤维素酶和果胶酶 B. 膜具有选择透过性 C. 可再生出细胞壁 D. 在高渗溶液中培养 18. 为应对气候变化带来的盐碱地扩张问题，我国科研团队利用植物体细胞杂交技术，将耐盐性强的野生二倍体偃麦草（2n=14）的原生质体与高产但不耐盐的普通小麦（6n=42）的原生质体进行融合，经筛选与培养获得耐盐小麦新品种“山融3号”。下列说法错误的是（ ） A. 融合前需用纤维素酶和果胶酶处理两种植物细胞以获得原生质体 B. 可使用聚乙二醇（PEG）法或电融合法诱导原生质体融合 C. 杂种细胞发育成植株的理论基础是植物细胞的全能性 D. 偃麦草和普通小麦的原生质体融合，使“山融3号”具有两个物种的所有性状 19. 科研人员利用植物体细胞杂交技术，培育出白菜-甘蓝杂种植株，下列相关叙述正确的是（  ） A. 需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体 B. 可通过电融合法、PEG诱导法、灭活病毒诱导法诱导原生质体融合，融合成功的标志是杂种细胞再生细胞壁 C. 该技术并未克服了白菜和甘蓝远缘杂交不亲和的障碍，培育出新型作物 D. 杂种细胞不需经过脱分化和再分化过程，就能培育成完整的杂种植株 20. 下列育种方法中，能产生新基因的是（　　） A. 诱变育种 B. 杂交育种 C. 单倍体育种 D. 多倍体育种 21. 为缩短育种年限，研究人员常采用花药离体培养得到单倍体幼苗，再用秋水仙素处理，使其染色体数目加倍，进而筛选出可育的纯合品系，这种育种新技术称为（ ） A. 诱变育种 B. 杂交育种 C. 多倍体育种 D. 单倍体育种 22. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ） A. 培养过程中需定期更换培养液，目的是清除代谢废物和补充营养物质 B. 添加95%的空气和5%的CO2可以为细胞提供呼吸条件的同时维持培养液的pH C. 进行动物细胞培养时需将培养液的pH调至7.2～7.4 D. 动物细胞培养时，可以用胃蛋白酶将组织分散成单个细胞 23. 航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频；下列叙述错误的是（　　） A. 培养心肌细胞时需要为其提供充足的营养和稳定的环境 B. 培养心肌细胞时，应定期更换培养液，以便清除代谢废物 C. 传代培养时，悬浮培养的心肌细胞可直接用离心法收集 D. 心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂的方式无限增殖 24. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，下列叙述错误的是（ ） A. 动物细胞培养的结果是获得大量的细胞或完整的动物个体 B. 培养基中应含有糖类、氨基酸、无机盐和血清等营养物质 C. 培养瓶中贴壁生长的细胞可定期用胰蛋白酶处理，分瓶后进行传代培养 D. 细胞需置于含有95%空气和5%CO2混合气体的培养箱中进行培养 25. 科学家制备抗HPV（人乳头瘤病毒）单克隆抗体用于开发诊断试剂。下列叙述错误的是（ ） A. 可用灭活的病毒诱导细胞融合 B. 用选择培养基筛选杂交瘤细胞 C. 杂交瘤细胞均能产生抗HPV抗体 D. 该单克隆抗体识别HPV特定抗原 26. 抗体-药物偶联物（ADC）通过将药物（如细胞毒素）与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC作用机制如图所示，下列叙述错误的是（ ） A. ADC的抗体具有靶向运输作用，可以将药物输送到靶细胞 B. 制备单克隆抗体时，获得的杂交瘤细胞需进行克隆化培养和抗体检测 C. 用荧光标记抗肿瘤表面抗原的单克隆抗体，可以确定肿瘤的复发与转移 D. 与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更大 27. 下列关于体细胞核移植技术的叙述错误的是（　　） A. 体细胞核移植难度大于胚胎细胞核移植的原因是细胞分化程度高 B. 在动物体细胞核移植中，非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难 C. 体细胞核移植技术的理论已经非常完善，绝大多数克隆动物不存在健康问题 D. 通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞形成重构胚 28. 下列对动物细胞核移植技术的描述中，错误的是（　　） A. 动物细胞核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植 B. 体细胞核移植过程中通常采用受精卵作为受体细胞 C. 重构胚具有发育成完整个体的能力 D. 经体细胞核移植生产的克隆动物不是对供核动物的100%复制 29. 科学家将黑鼠卵丘细胞（卵巢内卵细胞周围的体细胞）的核物质注入去核的棕鼠卵细胞内，激活以后，移入白鼠的子宫，白鼠最终产下一只克隆鼠，这只克隆鼠的体色和性别是（ ） A. 体色为黑色，性别为雌性 B. 体色为棕色，性别为雄性 C. 体色为白色，性别为雌性 D. 体色为灰色，性别为雄性 30. 我国科学家利用重编程技术成功建立了大熊猫成纤维细胞来源的诱导多能干细胞系iPSCs，这些大熊猫iPSCs不仅能在体外培养条件下稳定增殖传代，还能在体内和体外分化条件下，分化为特定的功能性细胞。下列相关叙述错误的是（ ） A. 成纤维细胞是高度分化的细胞，细胞核不再具有全能性 B. 体外培养成纤维细胞使用的是添加了血清的液体合成培养基 C. 可以通过导入DNA或蛋白质的方式来诱导成纤维细胞转化 D. 将iPSCs用于大熊猫的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险 二、解答题（除标记外，每空2分，共40分） 31. 尿素是一种重要的农业氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后，被植物吸收利用。某微生物的培养基配方如下： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4g 2.1g 0.2g 1.0g 10.0g 1.0g 15.0g （1）配制上述培养基的过程中，培养基常用的灭菌方法是______。 （2）根据培养基的成分分析，其从物理性质上看属于______培养基。该培养基上生长的细菌是否都能分解尿素______（填“是”或“否”），原因是______。 （3）若要统计土壤中分解尿素的细菌的活菌数，需采用的接种方法是______，这种方法统计的数目往往比实际结果偏______，原因是______。 32. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄——马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。据图回答下列问题： （1）为获得原生质体，过程①需要利用________酶处理两种植物细胞，促进原生质体融合的方法有________、________（写出两个），两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是________。 （2）过程③和④利用的植物细胞工程技术是______。该技术依据的生物学原理是______。该技术需要光照的是过程____。（填“③”或“④”），光照的作用______。 （3）已知番茄细胞内有24条染色体，马铃薯细胞内共48条染色体，则在“番茄—马铃薯”杂种细胞中有_____条染色体。 33. 手足口病是由肠道病毒引起的传染病，其中以肠道病毒71型(EV71)最为常见。科研人员用小鼠进行实验，以该病毒核衣壳蛋白为抗原来制备能够中和EV71感染的单克隆抗体，制备流程如图所示。 回答下列问题： （1）在制备抗EV71单克隆抗体的过程中，给小鼠注射的抗原是___________，之后用动物细胞融合时特有的___________法诱导小鼠脾中分离出的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞发生融合。接着用___________进行筛选，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞才能生长。 （2）将上述杂交瘤细胞进行克隆化培养和___________，培养时常用96孔培养板进行杂交瘤细胞的培养和筛选，最终筛选出的杂交瘤细胞的主要特点是___________。 （3）杂交瘤细胞与大多数普通动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和___________的特点，因此后者进一步培养时，需要定期用___________等消化处理。 （4）最终获得的抗EV71单克隆抗体的主要特点是___________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 秦皇岛市第三中学2025-2026学年度第二学期 第二次月考高二生物 考试时间：75分钟 一、单选题（每题2分，共60分） 1. 某同学利用传统发酵技术酿制葡萄酒，下列操作错误的是（ ） A. 为了减少杂菌污染，对葡萄进行消毒处理 B. 为防止杂菌污染，排气时没有完全打开罐口 C. 为提高酒精发酵效率，控制发酵温度在18～30℃ D. 若观察到发酵液表面形成一层菌膜，则应停止发酵 【答案】A 【解析】 【详解】A、传统葡萄酒发酵依靠葡萄皮表面附着的野生型酵母菌作为发酵菌种，对葡萄进行消毒处理会杀死所需的酵母菌，导致发酵无法正常进行，A错误； B、排气时不完全打开罐口，可避免空气中的杂菌进入发酵装置造成污染，B正确； C、酵母菌酒精发酵的适宜温度范围是18～30℃，该温度下酵母菌活性较高，可提高酒精发酵效率，C正确； D、发酵液表面的菌膜是密封不严时，好氧的醋酸菌等杂菌在液面繁殖形成的，说明发酵已被杂菌污染，继续发酵会导致葡萄酒变质，应停止发酵，D正确。 2. 腐乳、泡菜、果酒、果醋等发酵食品深受消费者青睐，这些美食的制作都离不开传统发酵技术。下列有关叙述错误的是（　　） A. 传统发酵缺乏对菌种的选育，以混合菌种的固体或半固体发酵为主 B. 毛霉将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，使腐乳味道鲜美 C. 制作泡菜时，发酵液表面的白膜可能是产膜酵母大量繁殖引起的 D. 葡萄酒制作完成后，只需要打开瓶盖通入空气即可进行葡萄醋的发酵 【答案】D 【解析】 【详解】A、传统发酵是利用自然环境中的野生菌种进行发酵，未经过人工选育菌种，多以混合菌种的固体或半固体发酵为主，A正确； B、腐乳制作的主要发酵菌种是毛霉，毛霉可分泌蛋白酶，将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，还可分泌脂肪酶分解脂肪为甘油和脂肪酸，使腐乳味道鲜美，B正确； C、制作泡菜的发酵液为酸性环境，且液面表层氧气含量较高，适合产膜酵母繁殖，因此发酵液表面的白膜多由产膜酵母大量繁殖形成，C正确； D、葡萄醋发酵的菌种为醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，最适发酵温度为30~35℃，高于果酒发酵的温度，因此葡萄酒制作完成后，除通入空气外，还需要将温度调整至醋酸菌适宜的发酵温度才能进行葡萄醋发酵，仅打开瓶盖通入空气无法正常进行果醋发酵，D错误。 3. 下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（ ） A. 制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行高压蒸汽灭菌，以防止杂菌污染 B. 制作果醋时，先接种醋酸菌再接种酵母菌，可提高果醋的发酵效率 C. 制作泡菜时，泡菜坛口的水封结构可营造有氧环境，满足乳酸菌的代谢需求 D. 制作腐乳时，发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉 【答案】D 【解析】 【详解】A、制作葡萄酒的菌种主要来自葡萄表面的野生酵母菌，若对葡萄汁进行高压蒸汽灭菌会杀死野生酵母菌，导致发酵无法进行，仅需对发酵装置进行消毒处理即可，A错误； B、制作果醋时，应先接种酵母菌进行酒精发酵产生酒精，再接种醋酸菌将酒精转化为醋酸，若先接种醋酸菌无法获得底物酒精，会降低发酵效率，B错误； C、乳酸菌是厌氧型微生物，泡菜坛口的水封结构是为了隔绝空气，营造无氧环境，满足乳酸菌的代谢需求，C错误； D、腐乳发酵过程中有毛霉、青霉、酵母菌、曲霉等多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉，毛霉产生的蛋白酶、脂肪酶可分解豆腐中的蛋白质和脂肪等物质，D正确。 4. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ） A. 传统发酵利用的微生物一般为天然存在的单一菌种 B. 传统发酵常常是固体发酵或者半固体发酵 C. 传统饮食中的酱油、醋、泡菜等可通过传统发酵获得 D. 传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题 【答案】A 【解析】 【分析】发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。 【详解】A、现代发酵工程所用大多为单一菌种，有杂菌污染影响产量，培养基和设备需严格灭菌；而传统发酵技术很难实现单一菌种的利用，A错误； B、传统发酵过程一般为混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的，不需要进行严格的灭菌，B正确； C、传统饮食中的酱油、醋、泡菜等可通过传统发酵获得，如果醋、泡菜制作可分别利用的醋酸菌和乳酸菌发酵获得，C正确； D、发酵工程产物无论是代谢物还是菌体本身，都需要进行质量检查，合格后才能成为正式产品，而传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题，D正确。 故选A。 5. 下列关于酵母菌纯培养的叙述，正确的是（　　） A. 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行 B. 除了第一次划线需将接种环灼烧灭菌外，后续不用灼烧即可划线 C. 最后一次划线末端与第一次划线首端相连，有利于酵母菌的分离 D. 吸管、培养皿、培养基、金属用具等可以采用干热灭菌法进行灭菌 【答案】A 【解析】 【详解】A、酒精灯火焰附近存在无菌区域，实验操作在此处进行可避免周围环境中的杂菌污染，A正确； B、平板划线操作中，每次划线前都需要灼烧接种环，杀死上次划线后接种环上残留的菌种，保证后续划线的菌种仅来自上一次划线的末端，实现菌种逐步稀释，B错误； C、平板划线法的目的是通过逐步稀释菌种获得单菌落，若最后一次划线末端与第一次划线首端相连，无法实现菌种的充分稀释，不能得到单菌落，不利于酵母菌分离，C错误； D、干热灭菌法适用于耐高温、需保持干燥的物品，如吸管、培养皿、金属用具等，但培养基含水分和热敏感营养成分，需用高压蒸汽灭菌法灭菌，不可使用干热灭菌，D错误。 6. 中科院微生物研究所益生菌研发团队对植物乳杆菌进行纯培养研究，为国产益生菌制剂研发提供核心菌种，配制培养基是培养微生物的第一步，下列有关微生物纯培养的叙述错误的是（　　） A. 培养基中一般都含有碳源和氮源等 B. 配制固体培养基时一般不加入水分 C. 培养基配制好后再进行灭菌、接种等步骤 D. 倒入培养基的培养皿应冷却凝固后倒置 【答案】B 【解析】 【详解】A、微生物生长繁殖需要的基本营养物质包含碳源、氮源、水、无机盐，部分微生物还需要额外添加生长因子，因此培养基中一般都含有碳源和氮源等成分，A正确； B、固体培养基是在含有水分的液体培养基中加入琼脂等凝固剂配制而成的，必须含有水分，B错误； C、培养基配制完成后需要先进行灭菌处理，待冷却至50℃左右时倒平板，温度降至适宜后再接种，避免高温杀死待接种的菌种，C正确； D、倒入培养基的培养皿冷却凝固后倒置，既可以避免皿盖上的冷凝水滴落污染培养基，也能减少培养基中水分的过快蒸发，D正确。 7. 下列关于微生物培养的叙述，正确的是（　　） A. 不同培养基的具体配方不同，但一般都有水、碳源、氮源和无机盐 B. 制备固体培养基的操作程序为配制培养基、灭菌、调pH、倒平板 C. 倒平板后应立即将培养皿倒置 D. 用不含有机碳源的培养基可筛选培养固氮微生物 【答案】A 【解析】 【详解】A、不同培养基的配方虽存在差异，但基本营养成分一般都包含水、碳源、氮源和无机盐，部分特殊培养基还需额外添加生长因子，A正确； B、制备固体培养基的正确流程是配制培养基、调pH、灭菌、倒平板，若先灭菌再调pH会引入杂菌造成培养基污染，B错误； C、倒平板后需要等培养基冷却完全凝固后再倒置，若立即倒置，未凝固的培养基会流动甚至黏附在皿盖上，影响后续使用，C错误； D、固氮微生物的特点是可利用空气中的氮气作为氮源，因此需要用不含氮源的培养基筛选，不含有机碳源的培养基是用于筛选自养型微生物的，D错误。 8. 在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。相关叙述正确的是（　　） A. 巴氏消毒法可以杀死牛奶中绝大多数的微生物，并且不会破坏牛奶中的蛋白质 B. 消毒是用强烈的理化方法杀死物体内外的所有微生物 C. 配制好培养基后，先高压蒸汽灭菌，后定容 D. 采用紫外线照射消毒前，适量喷洒石炭酸，可强化消毒效果 【答案】D 【解析】 【详解】A、巴氏消毒法采用相对较低的温度处理牛奶，可杀死绝大多数微生物，仅会少量破坏牛奶中的蛋白质，最大程度保留营养，并非完全不破坏蛋白质，A错误； B、消毒是用温和的理化方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），使用强烈理化方法杀死物体内外所有微生物（含芽孢、孢子）的操作是灭菌，B错误； C、配制培养基的正确顺序是计算、称量、溶化、定容、调pH、高压蒸汽灭菌、倒平板，若先灭菌后定容会引入杂菌，且无法保证培养基浓度准确，C错误； D、紫外线的穿透能力较弱，消毒前适量喷洒石炭酸等消毒剂，既可以促进空气中悬浮的微生物沉降，也可协同紫外线发挥杀菌作用，强化消毒效果，D正确。 9. 平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。下列相关叙述正确的是（ ） A. 用平板划线法接种时，每次划线之前都需蘸取菌液 B. 平板划线法划线过程中，不能将最后一次的划线与第一次的划线相连 C. 利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数 D. 统计菌落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数目最多的平板进行统计 【答案】B 【解析】 【详解】A、平板划线法仅第一次划线前需要蘸取菌液，后续每次划线均从上一次划线的末端开始，无需再次蘸取菌液，以此逐步稀释菌液获得单菌落，A错误； B、平板划线法的目的是通过多次划线逐步降低菌液浓度，最终获得单菌落，若最后一次划线与第一次划线相连，无法达到稀释分离单菌落的目的，因此操作中不能将二者相连，B正确； C、利用稀释涂布平板法统计菌落数时，若两个或多个活菌连在一起，平板上只会形成一个菌落，因此统计的菌落数通常低于活菌实际数目，C错误； D、统计菌落数目时，为保证结果准确，一般选择菌落数在30~300之间的平板进行统计，菌落数过多易出现菌落重叠，导致统计误差较大，D错误。 10. 尿素分解菌能产生脲酶，将尿素分解成NH3和CO2，NH3溶于水后菌落周围的pH升高，使溴甲酚紫显紫色。将土壤样液稀释涂在平板上培养，以筛选尿素分解菌，培养基成分见下表。下列叙述错误的是（　　） 成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4 葡萄糖 尿素 琼脂 水 含量/g 1.4 2.1 0.2 10.0 1.0 15.0 定容至1L A. 在培养基灭菌前需要将pH调至中性或弱碱性 B. KH2PO4、Na2HPO4能维持培养基pH稳定 C. CO2是尿素分解菌生长繁殖的主要碳源 D. 在尿素分解菌菌落的周围会出现紫色圈 【答案】C 【解析】 【详解】A、尿素分解菌属于细菌，适宜在中性或弱碱性环境中生长，培养基配制时需在灭菌前将pH调至中性或弱碱性，避免灭菌后调pH引入杂菌污染，A正确； B、KH2PO4和Na2HPO4为缓冲对，可缓冲微生物代谢产物对培养基pH的影响，维持培养基pH相对稳定，B正确； C、尿素分解菌为异养型微生物，无法利用CO2合成有机物，培养基中的葡萄糖是其生长繁殖的主要碳源，C错误； D、尿素分解菌产生的脲酶可将尿素分解为NH3，NH3溶于水使菌落周围pH升高，溴甲酚紫在碱性环境中显紫色，因此菌落周围会出现紫色圈，D正确。 11. 微生物计数时，若一个平板上菌落数为300，稀释倍数为106，则每克样品中的活菌数约为（　　） A. 3×108 B. 3×107 C. 3×109 D. 3×106 【答案】C 【解析】 【详解】稀释涂布平板法计数活菌的公式为： 每克样品活菌数 =（平板菌落数 ÷ 涂布接种的稀释液体积）× 稀释倍数 。微生物计数实验中，涂布平板时所用稀释液的体积是0.1mL，代入数据计算：(300÷0.1)×106=3×109，C正确。 12. 某科研小组欲从农田土壤中分离筛选能高效降解纤维素的菌株，配制了含纤维素的选择培养基，该培养基中不应加入的物质是（　　） A. 琼脂 B. 刚果红 C. 葡萄糖 D. 无机盐 【答案】C 【解析】 【详解】A、琼脂是固体培养基的凝固剂，筛选菌株需要制备固体培养基以获得单菌落，因此可加入琼脂，A不符合题意； B、刚果红可与纤维素形成红色复合物，纤维素被降解后菌落周围会出现透明圈，能够用于鉴别纤维素分解菌，可加入该培养基，B不符合题意； C、若加入葡萄糖，葡萄糖作为易利用的碳源，会导致不能降解纤维素的微生物也能生长，无法起到筛选纤维素降解菌的选择作用，因此不应加入，C符合题意； D、无机盐是微生物生长必需的营养成分，培养基中需要添加，D不符合题意。 13. 产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。科研人员开展了相关研究，试图从土壤中分离出产脂肪酶酵母，相关流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 若稀释倍数都为10，则x应为8 B. 接种后应将培养皿倒置，并在皿盖上标好接种日期等 C. 将涂布器放在火焰上燃烧后立即进行涂布 D. 应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值 【答案】D 【解析】 【详解】A、若稀释倍数都为10，则x应为18，A错误； B、接种后应将培养皿倒置，并在皿底上标好接种日期等，B错误； C、将涂布器放在火焰上燃烧，等冷却后再进行涂布，C错误； D、应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值，D正确。 故选D。 14. 酸笋是竹笋通过发酵产生的传统食品， 具有独特的酸味和脆爽口感。下图为酸笋自然发酵的过程， 下列说法错误的是（ ） A. 沸水漂烫的目的是杀死原料表面的杂菌 B. 盐水需煮沸冷却后使用，加入罐中没过全部菜料 C. 酸笋的酸味主要是醋酸菌发酵产生的醋酸导致 D. 若加入上一批次的发酵液可加快发酵进程 【答案】C 【解析】 【详解】A、沸水漂烫可以高温杀死原料表面杂菌，减少杂菌污染，A正确； B、盐水煮沸的目的是杀灭盐水中的杂菌，冷却后使用是为了避免高温杀死目的菌种乳酸菌，加盐水没过全部菜料是为了创造无氧环境，B正确； C、醋酸菌是好氧菌，该发酵为密封厌氧环境，酸笋的酸味是乳酸菌无氧发酵产生乳酸导致的，不是醋酸菌产生的醋酸，C错误； D、上一批次发酵液含有大量乳酸菌，加入后增加了菌种数量，可加快发酵进程，D正确。 15. 我国葡萄酒酿造历史悠久、传统发酵技术延续至今。下列叙述错误的是（　　） A. 传统发酵时，葡萄酒的发酵过程中存在的菌种有葡萄果皮上的多种微生物 B. 工业化生产时，酵母菌需在无氧条件下进行扩大培养和酒精发酵 C. 通过诱变育种或基因工程育种能够改良葡萄酒发酵菌种的性状 D. 大规模发酵时，需要监测发酵温度、pH值、罐压及溶解氧等参数 【答案】B 【解析】 【详解】A、传统葡萄酒发酵利用的是葡萄果皮上附着的野生酵母菌等多种微生物，无需额外人工接种菌种，A正确； B、酵母菌是兼性厌氧菌，工业化生产时，酵母菌扩大培养需要在有氧条件下进行，促进酵母菌有氧呼吸大量繁殖，仅酒精发酵阶段需要无氧条件，B错误； C、诱变育种可通过诱导基因突变获得优良变异菌株，基因工程育种可定向改造菌种的遗传性状，二者都能改良葡萄酒发酵菌种的性状，C正确； D、大规模发酵时，温度、pH值会影响微生物酶活性，罐压和发酵产生的CO2积累有关，溶解氧会影响酵母菌的呼吸类型，这些参数都会影响发酵效率和产物品质，需要实时监测，D正确。 16. 北京天安门广场大型立体花坛中的花卉是通过植物组织培养获得的，呈现出高度一致的颜色和形态，下列叙述错误的是（ ） A. 进行植物组织培养时必须选取离体的植物器官、组织或细胞等 B. 花卉组织培养时，脱分化形成愈伤组织的过程需要充足光照 C. 调控植物激素的比例，能诱导愈伤组织分化成根、芽等不同器官 D. 植物组织培养技术的理论基础是植物细胞的全能性 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物组织培养的外植体需要选取离体的植物器官、组织或细胞，未离体的植物细胞在植株上只会发生基因的选择性表达，无法发育为完整个体，A正确； B、花卉组织培养脱分化形成愈伤组织的过程需要避光处理，光照会抑制愈伤组织的形成，该阶段不需要光照，B错误； C、培养基中生长素和细胞分裂素的比例是诱导愈伤组织分化方向的关键，生长素比例偏高时诱导生根，细胞分裂素比例偏高时诱导生芽，因此调控植物激素比例可诱导愈伤组织分化为不同器官，C正确； D、植物组织培养技术的理论基础是植物细胞的全能性，即已分化的植物细胞仍具有发育为完整个体的潜能，D正确。 17. 马铃薯叶片细胞的细胞壁被酶解后，可获得原生质体。以下对原生质体的叙述错误的是（ ） A. 制备时需用纤维素酶和果胶酶 B. 膜具有选择透过性 C. 可再生出细胞壁 D. 在高渗溶液中培养 【答案】D 【解析】 【详解】A、植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，根据酶的专一性，制备原生质体时需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A正确； B、生物膜的功能特点是具有选择透过性，所以膜具有选择透过性，B正确； C、原生质体为具有活性的植物细胞，可合成纤维素、果胶等细胞壁组分，在适宜培养条件下可以再生出细胞壁，C正确； D、原生质体若在高渗溶液中培养会发生渗透失水皱缩，甚至死亡，无法正常生长，因此不能在高渗溶液中培养，D错误。 18. 为应对气候变化带来的盐碱地扩张问题，我国科研团队利用植物体细胞杂交技术，将耐盐性强的野生二倍体偃麦草（2n=14）的原生质体与高产但不耐盐的普通小麦（6n=42）的原生质体进行融合，经筛选与培养获得耐盐小麦新品种“山融3号”。下列说法错误的是（ ） A. 融合前需用纤维素酶和果胶酶处理两种植物细胞以获得原生质体 B. 可使用聚乙二醇（PEG）法或电融合法诱导原生质体融合 C. 杂种细胞发育成植株的理论基础是植物细胞的全能性 D. 偃麦草和普通小麦的原生质体融合，使“山融3号”具有两个物种的所有性状 【答案】D 【解析】 【详解】A、植物细胞有细胞壁，需用纤维素酶和果胶酶去除，才能获得原生质体，A正确； B、人工诱导原生质体融合的常用方法包括聚乙二醇（PEG）法和电融合法，B正确； C、杂种细胞需通过植物组织培养技术发育为完整植株，其理论基础是植物细胞的全能性，C正确； D、体细胞杂交后，由于基因的选择性表达或存在不亲和性，杂种植株不会包含两个物种的所有性状，D错误。 19. 科研人员利用植物体细胞杂交技术，培育出白菜-甘蓝杂种植株，下列相关叙述正确的是（  ） A. 需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体 B. 可通过电融合法、PEG诱导法、灭活病毒诱导法诱导原生质体融合，融合成功的标志是杂种细胞再生细胞壁 C. 该技术并未克服了白菜和甘蓝远缘杂交不亲和的障碍，培育出新型作物 D. 杂种细胞不需经过脱分化和再分化过程，就能培育成完整的杂种植株 【答案】A 【解析】 【详解】A、植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，使用纤维素酶和果胶酶酶解细胞壁，可获得具有活力的原生质体，A正确； B、电融合法、PEG（聚乙二醇）诱导法均是诱导原生质体融合的常用方法，原生质体融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁，灭活病毒诱导法是动物细胞融合的诱导方法，B错误； C、植物体细胞杂交技术可打破生殖隔离，克服白菜和甘蓝不同物种间远缘杂交不亲和的障碍，能培育出常规有性杂交无法获得的新型作物，C错误； D、杂种细胞需借助植物组织培养技术培育为完整杂种植株，该过程需依次经过脱分化形成愈伤组织、再分化形成胚状体或丛芽，最终发育为完整植株，D错误。 20. 下列育种方法中，能产生新基因的是（　　） A. 诱变育种 B. 杂交育种 C. 单倍体育种 D. 多倍体育种 【答案】A 【解析】 【详解】A、诱变育种的原理是基因突变，基因突变是DNA分子中发生碱基的增添、缺失或替换而引起的基因结构的改变，是新基因产生的根本途径，因此诱变育种能产生新基因，符合题意，A正确； B、杂交育种的原理是基因重组，基因重组是控制不同性状的基因的重新组合，只能产生新的基因型，不能产生新基因，不符合题意，B错误； C、单倍体育种的原理是染色体数目变异，仅通过染色体数目成倍减少、再人工诱导加倍得到纯合个体，不会产生新基因，不符合题意，C错误； D、多倍体育种的原理是染色体数目变异，仅使染色体数目成倍增加，只改变基因的数量，不能产生新基因，不符合题意，D错误。 21. 为缩短育种年限，研究人员常采用花药离体培养得到单倍体幼苗，再用秋水仙素处理，使其染色体数目加倍，进而筛选出可育的纯合品系，这种育种新技术称为（ ） A. 诱变育种 B. 杂交育种 C. 多倍体育种 D. 单倍体育种 【答案】D 【解析】 【详解】单倍体育种通过花药离体培养获得单倍体，再用秋水仙素处理使其染色体加倍，直接得到纯合体，显著缩短育种年限，ABC错误，D正确。 故选D。 22. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ） A. 培养过程中需定期更换培养液，目的是清除代谢废物和补充营养物质 B. 添加95%的空气和5%的CO2可以为细胞提供呼吸条件的同时维持培养液的pH C. 进行动物细胞培养时需将培养液的pH调至7.2～7.4 D. 动物细胞培养时，可以用胃蛋白酶将组织分散成单个细胞 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养过程中，细胞代谢会积累有害代谢废物，同时不断消耗营养物质，定期更换培养液可清除代谢废物、补充营养，避免细胞代谢中毒，A正确； B、培养时的气体环境中，95%的空气可为细胞有氧呼吸提供氧气，5%的CO2的作用是维持培养液的pH稳定，B正确； C、动物内环境的pH为7.2~7.4，为模拟动物体内环境，保证细胞正常生存，需将培养液pH调至该范围，C正确； D、胃蛋白酶的最适pH为强酸性（约1.5），在动物细胞培养液的中性偏碱环境下会失活，无法发挥作用，分散动物组织应使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，D错误。 23. 航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频；下列叙述错误的是（　　） A. 培养心肌细胞时需要为其提供充足的营养和稳定的环境 B. 培养心肌细胞时，应定期更换培养液，以便清除代谢废物 C. 传代培养时，悬浮培养的心肌细胞可直接用离心法收集 D. 心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂的方式无限增殖 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养需要提供充足的营养，以及温度、pH、无菌无毒的稳定环境，A正确； B、心肌细胞代谢会产生代谢废物，代谢废物积累会毒害细胞，因此培养时需定期更换培养液清除代谢废物，B正确； C、传代培养时，贴壁生长的细胞需要先用胰蛋白酶处理脱离培养容器壁再收集，而悬浮培养的心肌细胞可直接用离心法收集，C正确； D、由于代谢产物积累、营养物质有限等原因，心肌细胞在培养容器中无法通过有丝分裂不断增殖，D错误。 24. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，下列叙述错误的是（ ） A. 动物细胞培养的结果是获得大量的细胞或完整的动物个体 B. 培养基中应含有糖类、氨基酸、无机盐和血清等营养物质 C. 培养瓶中贴壁生长的细胞可定期用胰蛋白酶处理，分瓶后进行传代培养 D. 细胞需置于含有95%空气和5%CO2混合气体的培养箱中进行培养 【答案】A 【解析】 【详解】A、动物细胞培养的原理是细胞增殖，仅能获得大量细胞，高度分化的动物体细胞全能性受限制，仅通过细胞培养无法得到完整动物个体，A错误； B、动物细胞培养使用液体培养基，应含有糖类、氨基酸、无机盐和血清等营养物质，B正确； C、培养瓶中贴壁生长的细胞需定期用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分瓶后进行传代培养，C正确； D、动物细胞培养的气体环境为95%空气（满足细胞有氧呼吸对氧气的需求）和5%CO2（维持培养液pH稳定），需置于CO2培养箱中培养，D正确。 25. 科学家制备抗HPV（人乳头瘤病毒）单克隆抗体用于开发诊断试剂。下列叙述错误的是（ ） A. 可用灭活的病毒诱导细胞融合 B. 用选择培养基筛选杂交瘤细胞 C. 杂交瘤细胞均能产生抗HPV抗体 D. 该单克隆抗体识别HPV特定抗原 【答案】C 【解析】 【详解】A、动物细胞融合的常用诱导方法包括聚乙二醇诱导、电融合法、灭活的病毒诱导法，因此可用灭活的病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，A正确； B、细胞融合后体系中存在未融合的亲本细胞、同种细胞融合的细胞，选择培养基可淘汰上述不需要的细胞，仅筛选出杂交瘤细胞，B正确； C、初步筛选得到的杂交瘤细胞是由多种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的，并非都能产生抗HPV的抗体，还需进行抗体检测和克隆化培养，才能筛选出能分泌抗HPV抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、单克隆抗体具有特异性强的特点，只能识别HPV的特定抗原，D正确。 26. 抗体-药物偶联物（ADC）通过将药物（如细胞毒素）与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC作用机制如图所示，下列叙述错误的是（ ） A. ADC的抗体具有靶向运输作用，可以将药物输送到靶细胞 B. 制备单克隆抗体时，获得的杂交瘤细胞需进行克隆化培养和抗体检测 C. 用荧光标记抗肿瘤表面抗原的单克隆抗体，可以确定肿瘤的复发与转移 D. 与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更大 【答案】D 【解析】 【详解】A、ADC由抗体、接头和药物组成，其中抗体的主要作用是靶向运输，即通过与靶细胞表面的特异性抗原结合，将连接的药物精准输送到靶细胞，A正确； B、制备单克隆抗体时，杂交瘤细胞需克隆化培养（获大量细胞）和抗体检测（选能产生所需抗体的细胞），以筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确； C、用荧光标记肿瘤表面抗原的单克隆抗体，可通过荧光定位肿瘤细胞，确定复发与转移，C正确； D、与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更小。因为ADC中的抗体能特异性识别靶细胞，将药物精准输送到靶细胞，减少对正常细胞的损伤，D错误。 27. 下列关于体细胞核移植技术的叙述错误的是（　　） A. 体细胞核移植难度大于胚胎细胞核移植的原因是细胞分化程度高 B. 在动物体细胞核移植中，非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难 C. 体细胞核移植技术的理论已经非常完善，绝大多数克隆动物不存在健康问题 D. 通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞形成重构胚 【答案】C 【解析】 【详解】A、体细胞分化程度高于胚胎细胞，细胞核全能性更难被诱导表达，因此体细胞核移植难度大于胚胎细胞核移植，A正确； B、非人灵长类动物的卵母细胞对激活刺激敏感度低、细胞核重编程难度高，因此其体细胞核移植非常困难，B正确； C、目前体细胞核移植技术的理论和操作流程都未完善，克隆动物普遍存在易流产、发育异常、早衰等健康问题，C错误； D、体细胞核移植操作中，可通过电融合法使供体细胞与去核卵母细胞融合，供体核进入卵母细胞后形成重构胚，D正确。 28. 下列对动物细胞核移植技术的描述中，错误的是（　　） A. 动物细胞核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植 B. 体细胞核移植过程中通常采用受精卵作为受体细胞 C. 重构胚具有发育成完整个体的能力 D. 经体细胞核移植生产的克隆动物不是对供核动物的100%复制 【答案】B 【解析】 【详解】A、动物细胞核移植根据提供细胞核的细胞类型，分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，其中胚胎细胞分化程度低，核移植成功率更高，A正确； B、体细胞核移植过程中通常选择去核的MⅡ期卵母细胞作为受体细胞，这类细胞体积大易操作，且含有促进细胞核全能性表达的物质，并非采用受精卵作为受体细胞，B错误； C、重构胚是供体细胞核注入去核卵母细胞后经激活形成的，具有发育全能性，可发育为完整个体，C正确； D、克隆动物的细胞核遗传物质来自供核动物，但细胞质中的遗传物质来自受体卵母细胞，同时生物性状还会受环境因素影响，因此不是供核动物的100%复制，D正确。 29. 科学家将黑鼠卵丘细胞（卵巢内卵细胞周围的体细胞）的核物质注入去核的棕鼠卵细胞内，激活以后，移入白鼠的子宫，白鼠最终产下一只克隆鼠，这只克隆鼠的体色和性别是（ ） A. 体色为黑色，性别为雌性 B. 体色为棕色，性别为雄性 C. 体色为白色，性别为雌性 D. 体色为灰色，性别为雄性 【答案】A 【解析】 【详解】科学家将黑鼠卵丘细胞（卵巢内卵细胞周围的体细胞）的核物质注入去核的棕鼠卵细胞内，激活以后，移入白鼠的子宫，该过程中获得的克隆鼠细胞核中的遗传物质来自雌性黑鼠的卵丘细胞，体色、性别均属于核基因控制的性状，因此克隆鼠性状与供核黑鼠一致，体色为黑色，性别为雌性，A正确。 30. 我国科学家利用重编程技术成功建立了大熊猫成纤维细胞来源的诱导多能干细胞系iPSCs，这些大熊猫iPSCs不仅能在体外培养条件下稳定增殖传代，还能在体内和体外分化条件下，分化为特定的功能性细胞。下列相关叙述错误的是（ ） A. 成纤维细胞是高度分化的细胞，细胞核不再具有全能性 B. 体外培养成纤维细胞使用的是添加了血清的液体合成培养基 C. 可以通过导入DNA或蛋白质的方式来诱导成纤维细胞转化 D. 将iPSCs用于大熊猫的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险 【答案】A 【解析】 【分析】根据分化潜能分类：（1）全能干细胞：具有自我更新和分化形成任何类型细胞的能力，如胚胎干细胞。（2）多能干细胞：具有产生多种类型细胞的能力，但却失去了发育成完整个体的能力，发育潜能受到一定的限制；如造血干细胞。（3）单能干细胞（也称专能干细胞）：只能分化为成体组织、器官中的细胞。 【详解】A、高度分化的动物细胞，细胞核也具有全能性，A错误； B、动物细胞培养需要液体合成培养基，还需要添加动物血清等天然成分，B正确； C、将特定基因或特定蛋白（特定的转录因子如Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc）导入已分化的成纤维细胞，可将其诱导形成iPS细胞，C正确； D、将诱导多能干细胞系iPSCs用于大熊猫的疾病治疗还存在一些问题，如可能存在导致肿瘤发生的风险，D正确。 故选A。 二、解答题（除标记外，每空2分，共40分） 31. 尿素是一种重要的农业氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后，被植物吸收利用。某微生物的培养基配方如下： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4g 2.1g 0.2g 1.0g 10.0g 1.0g 15.0g （1）配制上述培养基的过程中，培养基常用的灭菌方法是______。 （2）根据培养基的成分分析，其从物理性质上看属于______培养基。该培养基上生长的细菌是否都能分解尿素______（填“是”或“否”），原因是______。 （3）若要统计土壤中分解尿素的细菌的活菌数，需采用的接种方法是______，这种方法统计的数目往往比实际结果偏______，原因是______。 【答案】（1）高压蒸汽灭菌法 （2） ①. 固态培养基 ②. 否 ③. 培养基中含有蛋白胨，不能分解尿素的细菌也可以利用蛋白胨中的氮源生长 （3） ①. 稀释涂布平板法 ②. 小 ③. 两个或多个细菌连在一起时，平板上只形成一个菌落，导致统计数低于实际活菌数 【解析】 【小问1详解】 配制上述培养基的过程中，培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。 【小问2详解】 由题可知培养基中加入了琼脂，从物理形态上看属于固态培养基，该培养基上生长的细菌不是都能分解尿素。其原因是培养基中含有蛋白胨等有机氮源，不能分解尿素的细菌也可以利用蛋白胨中的氮源生长，因此并非所有生长的细菌都能分解尿素。 【小问3详解】 统计土壤中分解尿素的细菌的活菌数，需采用稀释涂布平板法。这种方法统计的数目往往比实际结果偏小。其原因是当两个或多个细菌细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数会少于实际活菌数。 32. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄——马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。据图回答下列问题： （1）为获得原生质体，过程①需要利用________酶处理两种植物细胞，促进原生质体融合的方法有________、________（写出两个），两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是________。 （2）过程③和④利用的植物细胞工程技术是______。该技术依据的生物学原理是______。该技术需要光照的是过程____。（填“③”或“④”），光照的作用______。 （3）已知番茄细胞内有24条染色体，马铃薯细胞内共48条染色体，则在“番茄—马铃薯”杂种细胞中有_____条染色体。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 离心法、电融合法、聚乙二醇（PEG）融合法 ③. 高Ca2+﹣高pH融合法 ④. 杂种细胞再生出新的细胞壁 （2） ①. 植物组织培养 ②. 植物细胞具有全能性 ③. ④ ④. 诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用 （3）72 【解析】 【小问1详解】 植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，因此需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体。植物原生质体融合的方法分为物理法（离心法、电融合法等）和化学法（聚乙二醇诱导法、高Ca2+﹣高pH融合法）两类；两种植物细胞的原生质体融合成功标志是杂种细胞再生出新的细胞壁。 【小问2详解】 过程③是脱分化形成愈伤组织、过程④是再分化形成完整植株，二者共同属于植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞具有全能性。过程③脱分化过程需要避光培养，过程④再分化过程需要光照：光照可以诱导叶绿素合成，使分化出的幼苗能够进行光合作用合成有机物，支撑植株生长。 【小问3详解】 植物体细胞杂交过程中，两个物种体细胞的染色体会全部整合到杂种细胞中，因此杂种细胞的染色体数为两个亲本体细胞染色体数之和，即24+48=72条。 33. 手足口病是由肠道病毒引起的传染病，其中以肠道病毒71型(EV71)最为常见。科研人员用小鼠进行实验，以该病毒核衣壳蛋白为抗原来制备能够中和EV71感染的单克隆抗体，制备流程如图所示。 回答下列问题： （1）在制备抗EV71单克隆抗体的过程中，给小鼠注射的抗原是___________，之后用动物细胞融合时特有的___________法诱导小鼠脾中分离出的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞发生融合。接着用___________进行筛选，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞才能生长。 （2）将上述杂交瘤细胞进行克隆化培养和___________，培养时常用96孔培养板进行杂交瘤细胞的培养和筛选，最终筛选出的杂交瘤细胞的主要特点是___________。 （3）杂交瘤细胞与大多数普通动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和___________的特点，因此后者进一步培养时，需要定期用___________等消化处理。 （4）最终获得的抗EV71单克隆抗体的主要特点是___________。 【答案】（1） ①. EV71核衣壳蛋白 ②. 灭活病毒诱导 ③. (特定的)选择培养基 （2） ①. 抗体检测 ②. 既能迅速大量增殖，又能产生特定抗体 （3） ①. 接触抑制 ②. 胰蛋白酶(胶原蛋白酶) （4）能够识别抗原的细微差别并与特定抗原特异性结合，可大量制备 【解析】 【小问1详解】 制备抗EV71单克隆抗体，故给小鼠注射的抗原是EV71核衣壳蛋白，用动物细胞融合时特有的灭活病毒诱导法诱导小鼠脾中分离出的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞发生融合。第一次筛选在特定的选择培养基，在该培养基中只有杂交瘤细胞才能生长。 【小问2详解】 第二次筛选是对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，培养时常用96孔培养板进行杂交瘤细胞的培养和筛选，最终筛选出的杂交瘤细胞的主要特点是既能迅速大量增殖，又能产生特定抗体。 【小问3详解】 杂交瘤细胞无限增殖，与大多数普通动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和接触抑制（即细胞相互接触后停止分裂）的特点，需要胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，用于使贴壁生长的细胞脱落，进行传代培养。 【小问4详解】 抗EV71单克隆抗体的主要特点是能够识别抗原的细微差别并与特定抗原特异性结合，可大量制备。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $