精品解析：四川省泸州高级中学校2025-2026学年高二下学期6月期中生物试题

泸州高中2026年春期高2024级期中考试 生物学试题 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 第Ⅰ卷（选择题，共45分） 一、单项选择题：本大题共15个小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是最符合题目要求的。 1. 山西老陈醋的酿制工艺独特，要经过“蒸、酵、熏、淋、陈”等多道工序。其中，酒精发酵是关键步骤，醋酸发酵则在酒精发酵的基础上，将乙醇氧化为醋酸。下列有关叙述错误的是（　　） A. 酒精发酵阶段主要依赖酵母菌，醋酸发酵阶段主要依赖醋酸菌 B. 酒精发酵和醋酸发酵过程中，发酵液的pH均会下降 C. 发酵阶段要密封，以保证醋酸菌进行无氧呼吸产生醋酸 D. 发酵过程中，发酵液中的葡萄糖为菌体提供碳源和能量 【答案】C 【解析】 【详解】A、酒精发酵的核心菌种是酵母菌，醋酸发酵的核心菌种是醋酸菌，A正确； B、酒精发酵过程中酵母菌产生的CO2溶于发酵液形成碳酸，使pH下降；醋酸发酵过程中产生醋酸，也会使发酵液pH下降，B正确； C、醋酸菌是好氧细菌，只有在有氧条件下才能将乙醇氧化为醋酸，发酵阶段需要保持通气，密封会导致醋酸菌缺氧死亡无法产生醋酸，C错误； D、葡萄糖含有碳元素，属于可被微生物利用的有机物，既可以为菌体提供碳源，也可通过氧化分解释放能量为菌体供能，D正确。 故选C。 2. 某检测小组为验证使用公筷的必要性，将聚餐时的每道菜品分为两份，一份使用公筷进食，一份不使用公筷进食。通过无菌操作采集样品，定量稀释后等量接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，恒温培养适宜时间，进行细菌菌落总数统计，结果如下表，（其中CFU/g表示每克样品在培养基上形成的菌落总数）。下列叙述正确的是（ ） 菜名 细菌菌落总数（CFU/g） 餐前 餐后 公筷 非公筷 凉拌黄瓜 14000 16000 45000 香辣牛蛙 60 150 560 A. 为了鉴别上述平板中的菌落是不是大肠杆菌，可配制含刚果红的培养基 B. 用未接种的牛肉膏蛋白胨培养基培养一段时间可检测配制的培养基是否被污染 C. 使用公筷能明显降低菜品细菌的污染，使用非公筷不会导致菜品间的交叉污染 D. 凉拌黄瓜餐前的菌落数远高于香辣牛蛙是由于黄瓜表面更容易携带菌体 【答案】B 【解析】 【分析】根据题干信息和表格分析，该实验的目的是验证使用公筷的必要性，自变量是菜品的种类和是否所用公筷，因变量是菌落数。与餐前相比，餐后无论是否所用公筷，菌落数都增加了，且为所用公筷的增加较多。 【详解】A、为了鉴别上述平板中的菌落是不是大肠杆菌，可配制伊红-亚甲蓝培养基，生长在此培养基上的大肠杆菌呈深黑色，并有金属光泽，A错误； B、在接种前需要检测使用的培养基是否被污染，方法是用未接种的牛肉膏蛋白胨培养基做对照培养一段时间，若空白培养基经培养后无菌落产生，说明培养基的制备是合格的，B正确； C、分析可知使用公筷能明显降低菜品细菌的污染，使用非公筷会导致菜品间的交叉污染，C错误； D、凉拌黄瓜餐前的菌落数远远高于香辣牛蛙最可能是凉拌黄瓜没有经过高温烹饪，D错误。 故选B。 3. 下图为啤酒生产的主要流程，下列相关叙述错误的是（ ） A. 粉碎的目的是有利于麦芽中的淀粉与a-淀粉酶充分接触，缩短糖化过程时间 B. 麦汁煮沸的主要目的是抑制糖化过程后残留酶的活性同时杀死麦汁中微生物 C. 加入酒花的主要目的是提供酵母菌菌种有利于主发酵进行并产生大量酒精 D. 主发酵结束后发酵液还要在低温密闭的环境下储存一段时间才能形成成熟啤酒 【答案】C 【解析】 【分析】啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 【详解】A、“糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质”，故过程破碎有利于淀粉与α−淀粉酶的充分接触，缩短糖化过程所用的时间，A正确； B、麦汁煮沸的主要目的是使淀粉酶失活，终止酶的进一步作用，并对糖浆杀菌，B正确； C、加入酒花的主要目的是赋予啤酒特殊的香味，赋予啤酒爽快的苦味，增加防腐能力，提高啤酒的非生物稳定性，防止煮沸时窜味，C错误； D、主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒，D正确。 故选C。 4. 寒兰为名贵的兰花品种，一般生长在深山幽谷的山腰谷壁。由于人类的过度采摘，现在很难找到寒兰，偶尔能发现的也只是较小的植株。为了增加野生寒兰数量，科研人员希望对其进行大量人工繁殖，再移栽至原有生境。下列有关叙述错误的是（　　） A. 可将寒兰的组织细胞放置在培养基中进行植物组织培养 B. 须用适宜浓度的酒精和次氯酸钠的混合液对外植体消毒 C. 诱导愈伤组织期间一般不需要光照，再分化需要光照 D. 再分化为芽和根，本质上是基因选择性表达的结果 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物组织培养利用植物细胞的全能性，可将寒兰的组织细胞置于培养基中培育成完整植株，A正确； B、植物组织培养中，对外植体的消毒流程是：先用适宜浓度的酒精消毒，再用次氯酸钠溶液消毒（并非 “混合液”），且两种试剂需依次使用、不能混合，B错误； C、愈伤组织诱导阶段需避光（防止光照促进分化），再分化阶段需光照（促进叶绿素合成及器官形成），C正确； D、再分化形成芽和根的过程是细胞分化，根本原因是基因的选择性表达，D正确。 故选B。 5. 三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A. ①过程可利用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成 B. ②过程通常在低渗溶液中采用PEG融合法诱导原生质体融合 C. 杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，但结构不变 D. 图中所示的生产流程体现了细胞膜的流动性，但未体现植物细胞的全能性 【答案】D 【解析】 【分析】图示为三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③脱分化形成愈伤组织，④提取代谢产物。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此过程①三白草和鱼腥草体细胞杂交过程中要利用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁获得原生质体，盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液会杀死细胞，A错误； B、过程②通常在等渗或略高渗溶液中，不能用低渗溶液，不然原生质体会吸水涨破；可以采用化学法（PEG融合法）或物理法诱导原生质体融合，B错误； C、植物细胞的脱分化就是让已分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能，而转变为未分化的细胞——愈伤组织的过程，因此杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，结构也发生改变，C错误； D、图中过程②原生质体融合体现了细胞膜的流动性；将杂种细胞培育成一个完整的新的植物体的过程才体现了植物细胞的全能性，故图中所示的生产流程没有体现植物细胞的全能性，D正确。 故选D。 6. 中药材怀菊含有多种活性物质，具有清热、明目等功效。植物组织培养技术可用于怀菊的脱毒和快速繁殖。下列叙述正确的是（ ） A. 怀菊中含有的次生代谢物通常是怀菊基本生命活动所必需的 B. 怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传 C. 利用怀菊的茎段作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗 D. 生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的小 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、怀菊中含有的初生代谢物通常是怀菊基本生命活动所必需的，而次生代谢物不是怀菊基本生命活动所必需的，A错误； B、怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传，该过程的原理是植物细胞的全能性，B正确； C、利用怀菊的茎尖作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗，因为茎尖中几乎不带毒，C错误； D、生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的大，进而促进生芽，生长素偏多时有利于生根，D错误。 故选B。 7. 通过细胞培养构建的人造皮肤在治疗大面积烧伤时具有较好应用前景，下列叙述正确的是（　　） A. 选择非患者细胞进行培养获得人造皮肤，可以降低免疫排斥的发生 B. 细胞培养获得人造皮肤的过程中，可加入纤维素酶处理贴壁的细胞 C. 培养时需将细胞置于中性偏酸的培养基中培养 D. 由于对细胞所需的营养物质未全部研究清楚，培养时通常加入血清 【答案】D 【解析】 【详解】A、非患者细胞的表面抗原与患者存在差异，选择其培养获得的人造皮肤移植后会引发更强的免疫排斥，应选择患者自身细胞培养以降低免疫排斥，A错误； B、纤维素酶用于分解植物细胞壁，动物细胞无细胞壁，处理贴壁生长的动物细胞需使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，不能使用纤维素酶，B错误； C、动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，属于中性偏碱的环境，并非中性偏酸，C错误； D、目前人类尚未完全研究清楚动物细胞所需的全部营养物质，因此培养动物细胞时通常在合成培养基中加入血清等天然成分，补充细胞所需的未知营养，D正确。 8. 下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，不正确的是（ ） A. 动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核膜的融合 B. 可以从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体 C. 在体外培养条件下，一个B淋巴细胞可以无限增殖 D. 单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，产量高 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞融合特有的诱导因素为灭活的病毒；免疫后的小鼠从脾脏中获取的是多种B淋巴细胞；单克隆抗体是杂交瘤细胞增殖并产生的抗体。 【详解】A、动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核膜的融合，该过程体现细胞膜具有一定的流动性，A正确； B、融合的杂交瘤细胞需要筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，再在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖，再从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体，B正确； C、B淋巴细胞是不可以无限增殖，C错误； D、杂交瘤细胞产生的单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强、灵敏度高、产量高，优越性明显，D正确。 故选C。 9. 我国科学家利用体细胞克隆技术成功培育出克隆猴“中中”和“华华”，流程为：将猕猴的体细胞直接注入去核卵母细胞，构建重组细胞，经体外培养获得早期胚胎，再移植到代孕母猴体内发育。下列叙述正确的是（　　） A. 重组细胞的细胞质基因来自去核卵母细胞及供体细胞 B. 这一技术体现了动物细胞具有全能性 C. 代孕母猴为胚胎发育提供遗传物质和适宜的生理环境 D. 与胚胎细胞相比，利用体细胞进行核移植的成功率更高 【答案】A 【解析】 【详解】A、该操作是将完整的供体体细胞直接注入去核卵母细胞，供体体细胞自身携带少量含细胞质基因的细胞质，同时重组细胞的大部分细胞质来自去核卵母细胞，因此重组细胞的细胞质基因来自两者，A正确； B、该技术并没有直接将动物体细胞直接培养成胚胎，依旧采用了移植到去核卵母细胞中再培养成胚胎，说明动物体细胞的细胞质会限制细胞全能性的表达，不能体现动物细胞具有全能性，B错误； C、代孕母猴仅为胚胎发育提供适宜的生理环境，不会为胚胎提供遗传物质，胚胎的遗传物质来自供体体细胞和提供卵母细胞的个体，C错误； D、胚胎细胞分化程度更低，细胞核全能性更容易表达，与体细胞相比，利用胚胎细胞进行核移植的成功率更高，D错误。 10. 科研人员为高效检测食品中的有毒物质苏丹红I，构建了抗苏丹红I和吖啶酯的双特异性抗体，其中吖啶酯是一种能在特定条件下发光的物质。检测时，先将适量双特异性抗体、待测样品、吖啶酯加入固定了苏丹红I的96孔板中，一段时间后洗去游离的物质，提供发光条件并检测发光强度。下图表示制备双特异性抗体的部分流程。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①可采用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等处理 B. 抗苏丹红Ⅰ杂交瘤细胞在②过程的选择培养基上可以正常生长 C. 通过③可筛选出能分泌双特异性抗体的杂交瘤细胞 D. 待测样品中苏丹红Ⅰ含量越高，最终检测到的发光强度越高 【答案】C 【解析】 【详解】A、 ①是动物细胞融合过程，诱导动物细胞融合常用方法为物理法（电刺激）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活病毒）。Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂适用于激活重构胚，不是诱导动物细胞融合的试剂，A错误； B、 ②是选择培养基筛选阶段，该选择培养基的作用是淘汰未融合的亲本细胞、同种细胞融合的细胞，仅允许异种融合的杂交瘤生长，因此单独的抗苏丹红Ⅰ杂交瘤细胞无法在该培养基上正常生长，B错误； C、单克隆抗体制备需要两次筛选：②是第一次筛选，获得杂交瘤细胞；③是第二次筛选，通过专一抗体阳性检测，筛选出能分泌所需双特异性抗体的杂交瘤细胞，筛选后再注射到小鼠腹腔进行体内扩大培养，C正确； D、双特异性抗体可同时结合苏丹红Ⅰ和吖啶酯，96孔板固定了苏丹红Ⅰ；若待测样品中苏丹红Ⅰ含量越高，会结合越多的双特异性抗体的苏丹红结合位点，导致能结合到孔板固定苏丹红上的双特异性抗体越少，最终结合在孔板上的吖啶酯越少，检测到的发光强度越低，D错误。 11. 下列有关胚胎工程理论基础的叙述，正确的是（　　） A. 在自然条件下，哺乳动物的受精作用在子宫内完成 B. 常以观察到三个极体作为受精的标志 C. 囊胚期的细胞开始出现了分化，透明带发育成胎盘和胎膜 D. 精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带发生生理反应，阻止后来精子进入 【答案】D 【解析】 【详解】A、哺乳动物的受精作用在输卵管壶腹部完成，而非子宫，A错误； B、受精时，次级卵母细胞完成减数第二次分裂，排出第二极体，故观察到两个极体（第一极体和第二极体）可作为受精完成的标志，B错误； C、囊胚期细胞分化为滋养层（发育为胎盘和胎膜）和内细胞团（发育为胎儿），透明带是包裹在卵母细胞外的糖蛋白结构，并非细胞，C错误； D、精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带发生生理反应，阻止后来精子进入，D正确。 故选D。 12. Leigh氏综合征是一种攻击神经系统的严重神经障碍，其致病基因位于线粒体DNA中。一位母亲约有1/4的线粒体携带有这种致病基因，她的前两个孩子因为患有Leigh氏综合征而天亡。她的第三个孩子因为接受另一名女性捐赠的健康基因而成为全球首个拥有“三个父母”的男婴。请根据男婴孕育过程判断以下说法正确的是（ ） A. 该母亲细胞质中遗传物质的均匀分配通常会导致产生含较多缺陷线粒体的卵细胞 B. 孕育该健康男婴时依次使用了核移植、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术 C. 图示过程中代表该母亲卵母细胞的是A，取卵之前该母亲需要注射促性腺激素，使其超数排卵 D. 因男性线粒体不会遗传给后代，所以胚胎移入子宫前需取内细胞团细胞进行性别鉴定 【答案】B 【解析】 【分析】识图分析可知，该健康男孩的出生，首先是利用核移植技术，将卵母细胞B的细胞核取出注入到去核的卵母细胞A中，形成杂合的卵母细胞，再与精子进行体外受精，形成受精卵，再通过体外胚胎培养形成早期胚胎，再移入母体子宫中发育产生个体。 【详解】A、根据题意可知，该母亲细胞质的遗传物质的分配是随机的，母亲可能产生含较多缺陷线粒体的卵细胞，受精卵的线粒体几乎全部来自于卵细胞，导致前两个孩子患病天亡，A错误； B、根据图示信息可知，该健康男婴孕育过程中依次使用了核移植、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，B正确； C、图示过程中，重组的卵细胞获取了卵母细胞A中的细胞质，说明A的细胞质基因是正常的，因此代表该母亲卵母细胞的是B，取卵之前，该母亲需要注射促性腺激素，进行超数排卵，C错误； D、因为男性线粒体不会遗传给后代，所以选择男性胚胎移入子宫，若要鉴定性别需要取滋养层细胞鉴定，D错误。 故选B。 13. 通过体外受精、核移植或转基因等方法获得的早期胚胎，经胚胎移植给受体甲后可以产生后代。下列叙述正确的是（　　） A. 经胚胎移植产生的后代，其遗传特性都与受体甲保持一致 B. 通过体外受精、核移植或转基因等方法获得后代的生殖方式都属于无性生殖 C. 不同方法获得的早期胚胎，都需要MⅡ期的去核卵母细胞 D. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 【答案】D 【解析】 【详解】A、经胚胎移植产生的后代，遗传物质来自提供胚胎的供体，受体甲仅为胚胎发育提供子宫孕育环境，不提供遗传物质，因此后代遗传特性与供体保持一致，与受体甲无关，A错误； B、体外受精过程经过了两性生殖细胞的结合，属于有性生殖，仅核移植获得后代的生殖方式属于无性生殖，B错误； C、只有核移植技术需要将供体细胞核导入MⅡ期的去核卵母细胞中构建重组细胞，体外受精、转基因技术获得早期胚胎不需要该操作，C错误； D、胚胎移植前需对供体和受体进行同期发情处理，保证二者生理环境相同，胚胎移植的实质就是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。 14. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是（　　） A. ②的构建需要限制酶和DNA聚合酶的参与 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. ④的染色体上若含抗虫基因，代表抗虫植株培育成功 D. 利用该方法可以侵染水稻、玉米等多种单子叶植物 【答案】B 【解析】 【详解】A、构建重组Ti质粒（基因表达载体）时，需要限制酶切割目的基因和Ti质粒，再用DNA连接酶连接二者的黏性末端或平末端，不需要DNA聚合酶，A错误； B、农杆菌侵染植物细胞时，重组Ti质粒上的T-DNA片段可携带抗虫基因转移至植物细胞，并整合到植物细胞的染色体DNA上，B正确； C、染色体上插入抗虫基因仅完成了转化步骤，抗虫基因不一定能正常表达出相关蛋白，还需要进行分子水平检测和个体抗虫接种实验，确认植株表现出抗虫性状才算培育成功，C错误； D、自然条件下农杆菌仅能侵染双子叶植物和裸子植物，对水稻、玉米等大多数单子叶植物没有感染能力，该方法不适用于多数单子叶植物，D错误。 15. Cas13是一种能结合活细胞内RNA并对其进行切割的核酸酶。科研人员改造Cas13获得失去切割能力的dCas13，将dCas13与sgRNA(向导RNA)、绿色荧光RNA适体（能结合并激活荧光染料)结合形成结构a，以实现对目标RNA的靶向结合、可视化检测和成像（如下图)。下列叙述正确的是（ ） A. dCas13失去的是断裂磷酸二酯键和氢键的能力 B. 用不同的sgRNA制备结构a可同时检测不同RNA C. sgRNA序列越长，与目标RNA的结合越精准 D. 细胞成像情况只可评估目标RNA的含量 【答案】C 【解析】 【详解】A、Cas13是一种能结合活细胞内RNA并对其进行切割的核酸酶，失去切割能力的dCas13失去的是断裂核糖核苷酸之间磷酸二酯键的能力，A错误； B、对RNA的位置和含量的检测是通过绿色荧光呈现的，因此用不同的sgRNA制备结构a不能同时检测不同RNA，应分别检测，B错误； C、sgRNA序列越长，特异性越强，脱靶率越低，即与目标RNA的结合越精准，C正确； D、细胞成像情况可评估目标RNA的位置和含量，D错误。 故选C。 第II卷（非选择题，共55分） 二、分析填空题：本大题共5个小题，除注明外，每空2分，共55分。 16. 柑橘是我国南方重要的经济果树，长期无性繁殖导致病毒在植株体内累积，引发树势衰退、果实变小、品质下降等问题。科研人员利用植物组织培养技术，成功培育出无病毒柑橘种苗，实现了优质种苗的工厂化生产，技术流程如下图所示。请结合所学知识，回答下列问题： （1）在进行过程①之前，需对茎尖进行消毒处理，并且需要严格把握消毒剂的消毒时间，原因是____________。 （2）过程②为____________，该过程形成的愈伤组织特点是____________。 （3）该技术的理论基础是____________，若要利用此技术大规模生产柑橘精油等次生代谢产物，可对图中____________进行液体悬浮培养。与传统扦插、分株等无性繁殖方式相比，利用该技术培育柑橘脱毒苗的优势是____________（写出两点）。 （4）实验后期，需将培育的柑橘脱毒苗进行炼苗处理后再移栽到田间，炼苗的目的是____________。 【答案】（1）消毒剂既能杀死外植体表面的杂菌，也会对植物茎尖细胞产生毒害；消毒时间过短，灭菌不彻底易造成污染；消毒时间过长，会损伤甚至杀死茎尖分生组织，导致外植体失活 （2） ①. 脱分化 ②. 呈无定形的薄壁组织团块 （3） ①. 植物细胞的全能性 ②. 愈伤组织 ③. 获得无病毒植株，提升柑橘产量与品质；繁殖速度快，可快速大量获得保持亲本优良性状的优质种苗；该生产过程不受季节、环境的限制 （4）使试管苗逐步适应外界自然环境，提高抗逆性，提高移栽成活率 【解析】 【小问1详解】 在进行过程①之前，需对茎尖进行严格的消毒处理，并且需要严格把握消毒剂的消毒时间，原因是：消毒剂既能杀死外植体表面的杂菌，也会对植物茎尖细胞产生毒害；消毒时间过短，灭菌不彻底易造成污染；消毒时间过长，会损伤甚至杀死茎尖分生组织，导致外植体失活。 【小问2详解】 过程②为脱分化过程，获得愈伤组织，愈伤组织排列疏松、呈无定形的薄壁组织团块。 【小问3详解】 植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性。若要利用此技术大规模生产柑橘精油等次生代谢产物，可对图中愈伤组织进行液体悬浮培养，而后对获得的大量细胞进行诱导培养获得柑橘精油等次生代谢产物。与传统扦插、分株等无性繁殖方式相比，利用该技术培育柑橘脱毒苗的优势是获得无病毒植株，提升柑橘产量与品质；繁殖速度快，可快速大量获得保持亲本优良性状的优质种苗，同时该生产过程不受季节、环境的限制。 【小问4详解】 脱毒苗长期生长在无菌、恒温恒湿的人工培养环境，对自然环境适应力差，炼苗的目的是使试管苗逐步适应外界自然环境，提高抗逆性，提高移栽成活率。 17. 反硝化细菌是一类能将硝态氮（NO3--N）通过一系列中间产物（NO2-、NO、N2O）还原为气态氮（N2）的细菌群，反硝化作用也是产碱过程。反硝化细菌对于解决水体富营养化和亚硝酸盐对水生动物的毒害，具有十分重要的意义。某课题小组通过采集活性污泥样品，并从中分离反硝化细菌，研究影响菌株反硝化作用的主要环境因素，为反硝化细菌在养殖废水处理应用中提供理论指导。反硝化细菌的分离和鉴定流程如下，回答下列问题： （1）将采集的活性污泥样品1mL加入到装有9mL、pH7.2的磷酸盐缓冲液的100mL烧杯中，取样接种到富集培养基中培养，富集培养基的成分有：KNO32g，FeSO40.2g，KH2PO41.0g，MgSO40.5g，NaCl2g，CaCO35g，其中为反硝化细菌提供氮源的是____________。可采用____________法对该培养基进行灭菌。 （2）若将采集的活性污泥样品5mL直接用无菌水进行梯度稀释后涂布平板（涂布平板时所用菌液为0.2mL），稀释倍数103、104、105对应平板平均菌落数分别为589、112、12个，则每毫升样品中反硝化细菌数约____________个，此方法计数结果往往低于实际活菌数，原因是____________。 （3）将富集后的样品进行等比稀释后，使用 ____________（填工具）将样液均匀涂布在BTB培养基（BTB培养基初始pH=6.8，BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色）上，放在30℃环境中培养2～3天后，挑选周围显 ____________ 色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。 【答案】（1） ①. KNO3 ②. 高压蒸汽灭菌##湿热灭菌 （2） ①. 5.6×106 ②. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落 （3） ①. 涂布器 ②. 蓝 【解析】 【小问1详解】 培养基的成分主要包括碳源、氮源、水、无机盐等，培养基中KNO3含有N，可以为反硝化细菌提供氮源。培养基灭菌常采用高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）法。 【小问2详解】 采用稀释涂布平板法计数时，为保证结果准确，需选择菌落数在30~300之间的平板进行统计，所以若将采集的活性污泥样品5mL直接用无菌水进行梯度稀释后涂布平板（涂布平板时所用菌液为0.2mL），稀释倍数103、104、105对应平板平均菌落数分别为589、112、12个，有效数值为稀释倍数104对应平板平均菌落数分别为112个，根据公式：每毫升样品中反硝化细菌数约=（C÷V）×M，其中V为涂布平板时所用的稀释液的体积，M为稀释倍数，C为某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，故每毫升样品中反硝化细菌数约=（112÷0.2）×104=5.6×106个。当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落，因此用稀释涂布平板法测定微生物数量时，计数结果往往低于实际活菌数。 【小问3详解】 稀释涂布平板法用到涂布器将样液均匀涂布在培养基上。分析题干，反硝化细菌可以产生碱性物质，BTB是酸碱指示剂，碱性条件下为蓝色，故挑选周围显蓝色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。 18. HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）制备抗HER2-ADC的过程中，需要用____________对小鼠多次进行免疫，取相应组织用酶处理后制成细胞悬液，置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的____________中培养，然后离心收集小鼠的B淋巴细胞。 （2）过程①中，跟植物体细胞杂交相比，动物细胞特有的融合方法是____________。 （3）经过过程②筛选的细胞还需进行过程③____________和____________，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （4）过程④合成的抗HER2-ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，其原因是________________________。 （5）为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的乳腺癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。结果如图2所示： ①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200 mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射____________，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。 ②实验结果表明________________________。 【答案】（1） ①. HER2 ②. CO2培养箱 （2）灭活病毒诱导 （3） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测 （4）将药物定向递送到HER2过度表达的癌细胞处，减少对正常细胞的杀伤 （5） ①. 等量的磷酸缓冲液 ②. 抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好 【解析】 【小问1详解】 制备单克隆抗体时，需要用目标抗原HER2多次免疫小鼠，刺激小鼠产生相应B淋巴细胞，B淋巴细胞从免疫小鼠的脾脏中分离获取。动物细胞悬液需要放入95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中培养。O2是细胞代谢所必需的，CO2主要是为了维持培养液的pH。 【小问2详解】 细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性；与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合特有的诱导方法是用灭活病毒诱导。 【小问3详解】 第一次筛选得到杂交瘤细胞后，还需要经过克隆化培养和抗体检测，才能得到能稳定分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 【小问4详解】 抗HER2-ADC可依靠抗原抗体特异性结合，将药物定向递送到HER2过度表达的癌细胞处，减少对正常细胞的杀伤，从而降低药物副作用。 【小问5详解】 ①实验的空白对照组遵循单一变量原则，需要注射等量的溶剂，即磷酸缓冲液。 ②根据实验结果可知，抗HER2-ADC组裸鼠的肿瘤体积最小，且比初始肿瘤体积小，说明抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好。 19. 异体器官移植是替代器官功能的有效途径，科学家试图通过异种体内培育人源化器官来解决器官供体短缺难题，但此前从未成功。我国科学家综合利用多种现代生物技术，首次在猪胚胎内培育出主要由人体细胞构成的“人—猪嵌合中期肾”，且维持到胚胎第28天。该研究成功实现了首例人源化中肾的异种体内再生壮举。图1为实验过程示意图，①～③为技术操作或生理过程，图2为CRISPR-Cas9基因编辑示意图。请回答下列问题： （1）图1中在体外培养iPS细胞过程中，当细胞表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖，这种现象称为____________，这时需要对细胞进行 培养。 （2）为了敲除掉与猪肾脏发育密切相关的关键基因SLX1，图1过程①采用了CRISPR-Cas9基因编辑技术。根据图2所示，推测Cas9蛋白的作用是________________。科学家敲除SLX1基因的目的是________________。 （3）图1中过程③所用iPS来自________（选填“人”或“猪”），选择iPS作为肾脏供体细胞的原因是____________________。 【答案】（1） ①. 接触抑制 ②. 传代 （2） ①. 对DNA进行切割##使磷酸二酯键断裂 ②. 避免发育成猪肾脏，促进人类肾脏发育 （3） ①. 人 ②. iPS具有与胚胎干细胞类似的分裂和分化能力，在特定条件诱导下能定向分化为特定的组织器官 【解析】 【小问1详解】 细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，称为接触抑制。此时可以使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，离心收集之后进行传代培养。 【小问2详解】 根据图2可知Cas9蛋白的作用是对DNA进行切割（或“使磷酸二酯键断裂”）。实验目的是猪胚胎内培 育出主要由人体细胞构成的“人—猪嵌合中期肾”，科学家敲除掉SLX1基因的目的是使猪胚胎在发育过程中避免猪细胞与外来的iPS竞争肾脏发育位置，发育成猪肾脏，促进人类肾脏发育。 【小问3详解】 最终是获得主要由人体细胞构成的“人—猪嵌合中期肾”，因此图1中过程③所用诱导多能干细胞（iPS）来自人，选择iPS作为肾脏供体细胞的原因是iPS具有与胚胎干细胞类似的分裂和分化能力，在特定条件诱导下能定向分化为特定的组织器官。 20. 重组人胰岛素是首个通过基因工程实现产业化的医用蛋白，科研人员以人胰岛素基因为目的基因，利用大肠杆菌BL21（DE3）菌株构建工程菌生产重组胰岛素，其部分过程如下图。回答下列问题： 限制酶 酶切序列5′→3′ BamHⅠ G↓GATCC BglⅡ A↓GATCT NheⅠ G↓CTAGC SmaⅠ CCC↓GGG XmaⅠ C↓CCGGG （1）图中过程①中由RNA得到的人胰岛素基因中________（选填“含有”或“不含有”）启动子；过程②需要的酶有________________。 （2）已知胰岛素基因的A链为转录的非模板链，其部分碱基序列为5′－CAGCTT …… AAGATCTT …… TACGCT－3′。为了使目的基因与载体正确连接，应该选择限制酶____________切割质粒，扩增目的基因时的PCR引物是______________。 A．5′－CCC′GGGCAGCTT－3′ B．5′－AGATCTCAGCTT－3′ C．5′－GGATCCCAGCTT－3′ D．5′－GCTAGCAGCGTA－3′ （3）将质粒导入大肠杆菌后，还需要进行筛选。需要先将大肠杆菌置于含______________的A培养基中培养，再从A培养基中选取菌落接种于含______________的B培养基，________________的菌落即为成功导入胰岛素基因的大肠杆菌。 【答案】（1） ①. 不含有 ②. 限制酶和DNA连接酶 （2） ①. BglⅡ、NheⅠ ②. CD （3） ①. 氨苄青霉素 ②. 四环素 ③. 能够在A上生长，不能够在B上生长 【解析】 【小问1详解】 过程①为逆转录法获取目的基因，人胰岛素基因仅在人胰岛B细胞中选择性表达产生胰岛素mRNA，因此需要从该细胞提取RNA。启动子是DNA上调控转录的序列，不会被转录进成熟mRNA，因此逆转录得到的人胰岛素基因不含有启动子。过程②是构建重组质粒（基因表达载体），需要限制酶切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶连接二者，因此所需酶为限制酶和DNA连接酶。 【小问2详解】 SmaⅠ、XmaⅠ的识别序列相同，若用这两种限制酶中的任何一种切割质粒，都会导致两个标记基因均被破坏，故不能选择这两种限制酶进行切割。因此只能选择限制酶BglⅡ、NheⅠ切割质粒。根据目的基因编码链序列可知，目的基因中含有BglⅡ的识别序列，故不能用BglⅡ切割目的基因，应该选择BglⅡ的同尾酶BamHⅠ切割目的基因，即应该在目的基因的两端分别加上BamHⅠ和NheⅠ的识别序列，PCR扩增目的基因时，上游引物与A链5'端序列一致，需要在5'端添加BamHⅠ酶切位点，对应选项C（5′-GGATCCCAGCTT-3′ ，可与BglⅡ切出相同的黏性末端）；下游引物与A链3'端互补，需要添加NheⅠ酶切位点，对应选项D（5'-GCTAGCAGCGTA-3'，含NheⅠ识别序列）。 【小问3详解】 由质粒结构可知，BglⅡ和NheⅠ的酶切位点都位于四环素抗性基因内部，目的基因插入后四环素抗性基因被破坏失活，而氨苄青霉素抗性基因保持完整。因此筛选时：先将大肠杆菌放在含氨苄青霉素的A培养基培养，存活的都是导入了质粒的大肠杆菌；再将存活的菌落接种到含四环素的B培养基，导入重组目的基因的大肠杆菌四环素抗性失活，因此不能生长的菌落就是成功导入目的基因的工程菌，即能够在A上生长，不能够在B上生长的菌落即为成功导入了胰岛素基因的大肠杆菌。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 泸州高中2026年春期高2024级期中考试 生物学试题 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 第Ⅰ卷（选择题，共45分） 一、单项选择题：本大题共15个小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是最符合题目要求的。 1. 山西老陈醋的酿制工艺独特，要经过“蒸、酵、熏、淋、陈”等多道工序。其中，酒精发酵是关键步骤，醋酸发酵则在酒精发酵的基础上，将乙醇氧化为醋酸。下列有关叙述错误的是（　　） A. 酒精发酵阶段主要依赖酵母菌，醋酸发酵阶段主要依赖醋酸菌 B. 酒精发酵和醋酸发酵过程中，发酵液的pH均会下降 C. 发酵阶段要密封，以保证醋酸菌进行无氧呼吸产生醋酸 D. 发酵过程中，发酵液中的葡萄糖为菌体提供碳源和能量 2. 某检测小组为验证使用公筷的必要性，将聚餐时的每道菜品分为两份，一份使用公筷进食，一份不使用公筷进食。通过无菌操作采集样品，定量稀释后等量接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，恒温培养适宜时间，进行细菌菌落总数统计，结果如下表，（其中CFU/g表示每克样品在培养基上形成的菌落总数）。下列叙述正确的是（ ） 菜名 细菌菌落总数（CFU/g） 餐前 餐后 公筷 非公筷 凉拌黄瓜 14000 16000 45000 香辣牛蛙 60 150 560 A. 为了鉴别上述平板中的菌落是不是大肠杆菌，可配制含刚果红的培养基 B. 用未接种的牛肉膏蛋白胨培养基培养一段时间可检测配制的培养基是否被污染 C. 使用公筷能明显降低菜品细菌的污染，使用非公筷不会导致菜品间的交叉污染 D. 凉拌黄瓜餐前的菌落数远高于香辣牛蛙是由于黄瓜表面更容易携带菌体 3. 下图为啤酒生产的主要流程，下列相关叙述错误的是（ ） A. 粉碎的目的是有利于麦芽中的淀粉与a-淀粉酶充分接触，缩短糖化过程时间 B. 麦汁煮沸的主要目的是抑制糖化过程后残留酶的活性同时杀死麦汁中微生物 C. 加入酒花的主要目的是提供酵母菌菌种有利于主发酵进行并产生大量酒精 D. 主发酵结束后发酵液还要在低温密闭的环境下储存一段时间才能形成成熟啤酒 4. 寒兰为名贵的兰花品种，一般生长在深山幽谷的山腰谷壁。由于人类的过度采摘，现在很难找到寒兰，偶尔能发现的也只是较小的植株。为了增加野生寒兰数量，科研人员希望对其进行大量人工繁殖，再移栽至原有生境。下列有关叙述错误的是（　　） A. 可将寒兰的组织细胞放置在培养基中进行植物组织培养 B. 须用适宜浓度的酒精和次氯酸钠的混合液对外植体消毒 C. 诱导愈伤组织期间一般不需要光照，再分化需要光照 D. 再分化为芽和根，本质上是基因选择性表达的结果 5. 三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A. ①过程可利用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成 B. ②过程通常在低渗溶液中采用PEG融合法诱导原生质体融合 C. 杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，但结构不变 D. 图中所示的生产流程体现了细胞膜的流动性，但未体现植物细胞的全能性 6. 中药材怀菊含有多种活性物质，具有清热、明目等功效。植物组织培养技术可用于怀菊的脱毒和快速繁殖。下列叙述正确的是（ ） A. 怀菊中含有的次生代谢物通常是怀菊基本生命活动所必需的 B. 怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传 C. 利用怀菊的茎段作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗 D. 生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的小 7. 通过细胞培养构建的人造皮肤在治疗大面积烧伤时具有较好应用前景，下列叙述正确的是（　　） A. 选择非患者细胞进行培养获得人造皮肤，可以降低免疫排斥的发生 B. 细胞培养获得人造皮肤的过程中，可加入纤维素酶处理贴壁的细胞 C. 培养时需将细胞置于中性偏酸的培养基中培养 D. 由于对细胞所需的营养物质未全部研究清楚，培养时通常加入血清 8. 下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，不正确的是（ ） A. 动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核膜的融合 B. 可以从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体 C. 在体外培养条件下，一个B淋巴细胞可以无限增殖 D. 单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，产量高 9. 我国科学家利用体细胞克隆技术成功培育出克隆猴“中中”和“华华”，流程为：将猕猴的体细胞直接注入去核卵母细胞，构建重组细胞，经体外培养获得早期胚胎，再移植到代孕母猴体内发育。下列叙述正确的是（　　） A. 重组细胞的细胞质基因来自去核卵母细胞及供体细胞 B. 这一技术体现了动物细胞具有全能性 C. 代孕母猴为胚胎发育提供遗传物质和适宜的生理环境 D. 与胚胎细胞相比，利用体细胞进行核移植的成功率更高 10. 科研人员为高效检测食品中的有毒物质苏丹红I，构建了抗苏丹红I和吖啶酯的双特异性抗体，其中吖啶酯是一种能在特定条件下发光的物质。检测时，先将适量双特异性抗体、待测样品、吖啶酯加入固定了苏丹红I的96孔板中，一段时间后洗去游离的物质，提供发光条件并检测发光强度。下图表示制备双特异性抗体的部分流程。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①可采用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等处理 B. 抗苏丹红Ⅰ杂交瘤细胞在②过程的选择培养基上可以正常生长 C. 通过③可筛选出能分泌双特异性抗体的杂交瘤细胞 D. 待测样品中苏丹红Ⅰ含量越高，最终检测到的发光强度越高 11. 下列有关胚胎工程理论基础的叙述，正确的是（　　） A. 在自然条件下，哺乳动物的受精作用在子宫内完成 B. 常以观察到三个极体作为受精的标志 C. 囊胚期的细胞开始出现了分化，透明带发育成胎盘和胎膜 D. 精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带发生生理反应，阻止后来精子进入 12. Leigh氏综合征是一种攻击神经系统的严重神经障碍，其致病基因位于线粒体DNA中。一位母亲约有1/4的线粒体携带有这种致病基因，她的前两个孩子因为患有Leigh氏综合征而天亡。她的第三个孩子因为接受另一名女性捐赠的健康基因而成为全球首个拥有“三个父母”的男婴。请根据男婴孕育过程判断以下说法正确的是（ ） A. 该母亲细胞质中遗传物质的均匀分配通常会导致产生含较多缺陷线粒体的卵细胞 B. 孕育该健康男婴时依次使用了核移植、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术 C. 图示过程中代表该母亲卵母细胞的是A，取卵之前该母亲需要注射促性腺激素，使其超数排卵 D. 因男性线粒体不会遗传给后代，所以胚胎移入子宫前需取内细胞团细胞进行性别鉴定 13. 通过体外受精、核移植或转基因等方法获得的早期胚胎，经胚胎移植给受体甲后可以产生后代。下列叙述正确的是（　　） A. 经胚胎移植产生的后代，其遗传特性都与受体甲保持一致 B. 通过体外受精、核移植或转基因等方法获得后代的生殖方式都属于无性生殖 C. 不同方法获得的早期胚胎，都需要MⅡ期的去核卵母细胞 D. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 14. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是（　　） A. ②的构建需要限制酶和DNA聚合酶的参与 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. ④的染色体上若含抗虫基因，代表抗虫植株培育成功 D. 利用该方法可以侵染水稻、玉米等多种单子叶植物 15. Cas13是一种能结合活细胞内RNA并对其进行切割的核酸酶。科研人员改造Cas13获得失去切割能力的dCas13，将dCas13与sgRNA(向导RNA)、绿色荧光RNA适体（能结合并激活荧光染料)结合形成结构a，以实现对目标RNA的靶向结合、可视化检测和成像（如下图)。下列叙述正确的是（ ） A. dCas13失去的是断裂磷酸二酯键和氢键的能力 B. 用不同的sgRNA制备结构a可同时检测不同RNA C. sgRNA序列越长，与目标RNA的结合越精准 D. 细胞成像情况只可评估目标RNA的含量 第II卷（非选择题，共55分） 二、分析填空题：本大题共5个小题，除注明外，每空2分，共55分。 16. 柑橘是我国南方重要的经济果树，长期无性繁殖导致病毒在植株体内累积，引发树势衰退、果实变小、品质下降等问题。科研人员利用植物组织培养技术，成功培育出无病毒柑橘种苗，实现了优质种苗的工厂化生产，技术流程如下图所示。请结合所学知识，回答下列问题： （1）在进行过程①之前，需对茎尖进行消毒处理，并且需要严格把握消毒剂的消毒时间，原因是____________。 （2）过程②为____________，该过程形成的愈伤组织特点是____________。 （3）该技术的理论基础是____________，若要利用此技术大规模生产柑橘精油等次生代谢产物，可对图中____________进行液体悬浮培养。与传统扦插、分株等无性繁殖方式相比，利用该技术培育柑橘脱毒苗的优势是____________（写出两点）。 （4）实验后期，需将培育的柑橘脱毒苗进行炼苗处理后再移栽到田间，炼苗的目的是____________。 17. 反硝化细菌是一类能将硝态氮（NO3--N）通过一系列中间产物（NO2-、NO、N2O）还原为气态氮（N2）的细菌群，反硝化作用也是产碱过程。反硝化细菌对于解决水体富营养化和亚硝酸盐对水生动物的毒害，具有十分重要的意义。某课题小组通过采集活性污泥样品，并从中分离反硝化细菌，研究影响菌株反硝化作用的主要环境因素，为反硝化细菌在养殖废水处理应用中提供理论指导。反硝化细菌的分离和鉴定流程如下，回答下列问题： （1）将采集的活性污泥样品1mL加入到装有9mL、pH7.2的磷酸盐缓冲液的100mL烧杯中，取样接种到富集培养基中培养，富集培养基的成分有：KNO32g，FeSO40.2g，KH2PO41.0g，MgSO40.5g，NaCl2g，CaCO35g，其中为反硝化细菌提供氮源的是____________。可采用____________法对该培养基进行灭菌。 （2）若将采集的活性污泥样品5mL直接用无菌水进行梯度稀释后涂布平板（涂布平板时所用菌液为0.2mL），稀释倍数103、104、105对应平板平均菌落数分别为589、112、12个，则每毫升样品中反硝化细菌数约____________个，此方法计数结果往往低于实际活菌数，原因是____________。 （3）将富集后的样品进行等比稀释后，使用 ____________（填工具）将样液均匀涂布在BTB培养基（BTB培养基初始pH=6.8，BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色）上，放在30℃环境中培养2～3天后，挑选周围显 ____________ 色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。 18. HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）制备抗HER2-ADC的过程中，需要用____________对小鼠多次进行免疫，取相应组织用酶处理后制成细胞悬液，置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的____________中培养，然后离心收集小鼠的B淋巴细胞。 （2）过程①中，跟植物体细胞杂交相比，动物细胞特有的融合方法是____________。 （3）经过过程②筛选的细胞还需进行过程③____________和____________，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （4）过程④合成的抗HER2-ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，其原因是________________________。 （5）为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的乳腺癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。结果如图2所示： ①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200 mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射____________，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。 ②实验结果表明________________________。 19. 异体器官移植是替代器官功能的有效途径，科学家试图通过异种体内培育人源化器官来解决器官供体短缺难题，但此前从未成功。我国科学家综合利用多种现代生物技术，首次在猪胚胎内培育出主要由人体细胞构成的“人—猪嵌合中期肾”，且维持到胚胎第28天。该研究成功实现了首例人源化中肾的异种体内再生壮举。图1为实验过程示意图，①～③为技术操作或生理过程，图2为CRISPR-Cas9基因编辑示意图。请回答下列问题： （1）图1中在体外培养iPS细胞过程中，当细胞表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖，这种现象称为____________，这时需要对细胞进行 培养。 （2）为了敲除掉与猪肾脏发育密切相关的关键基因SLX1，图1过程①采用了CRISPR-Cas9基因编辑技术。根据图2所示，推测Cas9蛋白的作用是________________。科学家敲除SLX1基因的目的是________________。 （3）图1中过程③所用iPS来自________（选填“人”或“猪”），选择iPS作为肾脏供体细胞的原因是____________________。 20. 重组人胰岛素是首个通过基因工程实现产业化的医用蛋白，科研人员以人胰岛素基因为目的基因，利用大肠杆菌BL21（DE3）菌株构建工程菌生产重组胰岛素，其部分过程如下图。回答下列问题： 限制酶 酶切序列5′→3′ BamHⅠ G↓GATCC BglⅡ A↓GATCT NheⅠ G↓CTAGC SmaⅠ CCC↓GGG XmaⅠ C↓CCGGG （1）图中过程①中由RNA得到的人胰岛素基因中________（选填“含有”或“不含有”）启动子；过程②需要的酶有________________。 （2）已知胰岛素基因的A链为转录的非模板链，其部分碱基序列为5′－CAGCTT …… AAGATCTT …… TACGCT－3′。为了使目的基因与载体正确连接，应该选择限制酶____________切割质粒，扩增目的基因时的PCR引物是______________。 A．5′－CCC′GGGCAGCTT－3′ B．5′－AGATCTCAGCTT－3′ C．5′－GGATCCCAGCTT－3′ D．5′－GCTAGCAGCGTA－3′ （3）将质粒导入大肠杆菌后，还需要进行筛选。需要先将大肠杆菌置于含______________的A培养基中培养，再从A培养基中选取菌落接种于含______________的B培养基，________________的菌落即为成功导入胰岛素基因的大肠杆菌。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $