精品解析：陕西宝鸡市某校2025-2026学年高二下学期第二次质量检测生物试卷

凤翔中学2025--2026学年度第二学期高二年级第二次质量检测生物科试题 一、单选题：（每小题3分，共60分） 1. 关于“利用乳酸菌发酵制作酸奶或泡菜”的实验，下列叙述正确的是（ ） A. 制作泡菜的菜料不宜完全淹没在煮沸后冷却的盐水中 B. 制作酸奶的牛奶须经过高压蒸汽灭菌后再接种乳酸菌 C. 发酵装置需加满菜料或牛奶并封装，以抑制乳酸菌的无氧呼吸 D. 控制好发酵时间，以避免过量乳酸影响酸奶或泡菜的口味和品质 【答案】D 【解析】 【分析】泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸的过程。 【详解】A、制作泡菜是利用乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，所以为制造无氧环境，制作泡菜的菜料要完全淹没在煮沸后冷却的盐水，A错误； B、制作酸奶时，将牛奶倒入灭菌后的奶瓶中，倒入的奶液量不要超过奶瓶容积的2/3，再将牛奶加热至90 ℃，保温5 min，或将牛奶置于80 ℃恒温水浴箱中 15 min。如果采用市售未开封的鲜奶,可直接使用，不需要灭菌，B错误； C、发酵时菜料装至八成满，然后加盐水，以利于乳酸菌的无氧呼吸，C错误； D、制作酸奶或泡菜时，控制好发酵时间，以避免过量乳酸影响酸奶或泡菜的口味和品质，D正确。 故选D。 2. 为研究土壤食细菌线虫对农药A降解菌的影响，研究人员在实验室适宜培养条件下，利用农药A污染已灭菌土壤，并设计实验：对照组接种农药A降解菌，实验组接种农药A降解菌和食细菌线虫，实验结果如图所示。下列说法错误的是（　　） A. 可用干热灭菌法对被污染的土壤进行灭菌 B. 0～7d，食细菌线虫减少与适应环境有关 C. 食细菌线虫种群数量到达K值后保持不变 D. 食细菌线虫能增加农药A降解菌的数量 【答案】C 【解析】 【分析】种群的数量增长模型：“S”形曲线：由于食物空间有限，种内竞争加剧。 【详解】A、耐高温的、需要保持干燥的物品，可用干热灭菌法进行灭菌，被污染的土壤可用干热灭菌法进行灭菌，A正确； B、接种的食细菌线虫种群数量少，需要适应新环境，因此，在接种0～7d时，食细菌线虫减少，B正确； C、K值是指环境所能维持的最大种群数量，当种群数量达到K值后，数量保持动态平衡，C错误； D、据图可知，实验组的农药A降解菌数量比对照组的农药A降解菌的数量多，说明食细菌线虫能增加农药A降解菌的数量，D正确。 故选C。 3. 研究人员以拟南芥愈伤组织为材料，探究IAA诱导愈伤组织生根的作用，结果如下表。下列相关说法正确的是（　　） 组别 培养基 植物类型 生根数(条) 1组 RIM 野生型 75 2组 RIM W8突变体 60 3组 不含IAA的RIM 野生型 59 4组 不含IAA的RIM W8突变体 17 注：RIM为诱导生根的培养基，配方中含有IAA；W8为IAA合成基因 A. 愈伤组织细胞排列疏松，高度液泡化，分化程度高 B. 诱导愈伤组织生根需要避光，诱导生芽需要光照处理 C. 野生型细胞自身产生的IAA促进了其在不含IAA的RIM生根 D. 若增加1组培养基中IAA的浓度，推测其生根的效果会更好 【答案】C 【解析】 【详解】A、愈伤组织是经过脱分化形成的，分化程度低，A错误； B、诱导愈伤组织的形成需要避光处理，诱导生根、生芽的过程都需要一定的光照处理，B错误； C、野生型在不含IAA的RIM中生根数为59，表明细胞利用了自身产生的IAA促进了愈伤组织分化生根，C正确； D、由于生长素具有低浓度促进生长，高浓度抑制生长的特点，若增加1组培养基中IAA的浓度，其生根的效果不一定更好，D错误。 故选C。 4. 人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列说法错误的是（ ） A. 人参皂苷是人参的次生代谢产物，是其生长所必需的 B. 细胞融合前必须先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 C. 聚乙二醇、高Ca2+—高pH溶液均可促进细胞融合 D. 上述融合细胞可能通过快速生长提高人参皂苷的产率 【答案】A 【解析】 【分析】次生代谢产物是一类小分子有机化合物（如酚类、萜类和含氮化合物等），不是生物生长所必须的。 【详解】A、人参皂苷是人参的次生代谢产物，次生代谢产物是一类小分子有机化合物（如酚类、萜类和含氮化合物等），不是生物生长所必须的，A错误； B、植物细胞壁影响植物细胞融合，因此细胞融合前可利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁以制备原生质体，B正确； C、聚乙二醇、高Ca2+—高pH溶液有利于两种原生质体的融合，C正确； D、由题干信息“诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率”，说明杂交细胞包含两种细胞的遗传物质，可能具有生长快速的优势，D正确。 故选A。 5. 研究人员取胰岛B细胞功能受损的糖尿病患者的成纤维细胞，在加入特殊诱导因子促进Sox2，Klf4，Oct4，c-Myc（简称SKOM）4种基因表达的孵化器中培养得到多能干细胞（iPS细胞），再定向诱导分化为可移植的正常胰岛B细胞。下列叙述正确的是（ ） A. SKOM中可能含有原癌基因或抑癌基因，参与调控细胞周期 B. 孵化器中要加入动物血清来防止动物细胞受病原体侵染 C. 导入的SKOM使成纤维细胞具有衰老细胞的特征 D. iPS细胞分化为胰岛B细胞的过程体现了细胞的全能性 【答案】A 【解析】 【分析】动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。 【详解】A、SKOM为特殊诱导因子，可能含有原癌基因或抑癌基因，参与调控细胞周期，A正确； B、孵化器中要加入动物血清，可保证细胞营养需要，B错误； C、导入SKOM基因的目的是将成纤维细胞重编程为多能干细胞（iPS细胞），此过程逆转了细胞分化状态，而非使其衰老，C错误； D、细胞全能性需发育为完整个体，而iPS细胞分化为胰岛B细胞仅体现细胞分化能力，D错误。 故选A。 6. 下图为利用正常的小鼠细胞进行动物细胞培养的过程，①～④表示相关过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程①可以使用机械法或胃蛋白酶等将组织分散成细胞 B. 过程②和过程④中细胞只能贴壁生长 C. 培养细胞2需要贴附于基质表面生长，可直接用离心法进行收集 D. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素、血清等 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、过程①可以使用机械法或酶解法使细胞分散成单个细胞，所用酶为胰蛋白酶或胶原蛋白酶，A错误； B、过程②和过程④中某些细胞可悬浮生长；B错误； C、培养细胞2时，一般会出现接触抑制和贴壁生长现象，需先用胰蛋白酶等处理，后才能用离心法进行收集，C错误； D、培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素、血清等，D正确。 故选D。 7. 下图是制备单克隆抗体流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是（ ） A. ①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B. ④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 C. ②中使用活性较强的病毒有利于杂交瘤细胞的形成 D. ③同时具有巨噬细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 【答案】B 【解析】 【分析】1、杂交瘤技术的目的是制备对抗原有特异性的单克隆抗体，所以融合一方必须是经过抗原刺激产生的效应B淋巴细胞（浆细胞）。 2、使用细胞融合剂造成细胞膜一定程度的损伤，使细胞易于相互粘连而融合在一起。最佳的融合效果应是最低程度的细胞损伤而又产生最高频率的融合。聚乙二醇是目前最常用的细胞融合剂。 3、细胞融合是一个随机的物理过程，在小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞混合细胞悬液中，经融合后细胞将以多种形式出现。如融合的脾细胞和瘤细胞、融合的脾细胞和脾细胞、融合的瘤细胞和瘤细胞、未融合的脾细胞、未融合的瘤细胞以及细胞的多聚体形式等。在选择培养基的作用下，只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交才具有持续增殖的能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞克隆。 【详解】A、①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞，A错误； B、④表示用选择培养基筛选出的能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞群，B正确； C、在动物细胞融合过程中，可用物理法、化学法、生物法，②中使用灭活的病毒有利于杂交瘤细胞的形成，但不能使用毒性较强的病毒，会影响杂交瘤细胞的生存，C错误； D、杂交瘤细胞同时具有效应B细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性，D错误。 故选B。 8. 细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述错误的是（　　） A. 选择植物的茎尖分生区进行组织培养，可以获得脱毒植物幼苗 B. 选择病人的核移植胚胎干细胞诱导分化后可形成免疫匹配的移植器官 C. 选择去核卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率 D. 选择分化程度较高的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞 【答案】D 【解析】 【详解】A、茎尖分生区细胞分裂旺盛，病毒含量极少，通过组织培养可获得脱毒苗，A正确； B、核移植胚胎干细胞的遗传物质来自病人，诱导分化的器官与病人免疫匹配，移植后不会出现免疫排斥作用，B正确； C、卵母细胞质中含有激活细胞核全能性的物质，选择去核卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率，C正确； D、分化程度高的细胞分裂能力弱，难以大量增殖，应选择分化程度低的细胞进行培养，D错误。 故选D。 9. 如图为某哺乳动物生殖过程示意图（b 为卵母细胞）。下列相关叙述中错误的是（　　） A. 动物个体①②的产生分别属于有性生殖和无性生殖 B. 按照动物个体②的产生方式，后代的性别比例仍为1:1 C. 动物个体②的产生表明，动物细胞核也具有全能性 D. 图中a、b、c 三种细胞的产生方式，仅c 为有丝分裂 【答案】B 【解析】 【分析】图示哺乳动物生殖过程，其中a为精子，b为卵细胞，c为体细胞。动物个体①是由正常的受精卵发育形成的，属于有性生殖；动物个体②是通过核移植、早期胚胎培养和胚胎移植形成的，属于无性生殖。 【详解】A、动物个体①是由受精卵发育而来的，属于有性生殖，动物个体②是通过细胞核移植技术产生的，属于无性生殖，A正确； B、按照动物个体②的产生方式，后代的性别由供体的细胞核决定，后代的性别比例不一定为1：1，B错误； C、动物个体②是通过细胞核移植技术产生的，表明高度分化的动物细胞核也具有发育成完整个体的潜在能力，即表明动物细胞核也具有全能性，C正确； D、a、b通过减数分裂产生的，c细胞是通过有丝分裂产生，D正确。 故选B。 10. 某一生物工程技术过程中出现细胞融合的操作，下列叙述正确的是（ ） A. 若为植物体细胞杂交技术，则用聚乙二醇处理两种植物细胞后会直接出现膜融合 B. 若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的细胞分别经过特定选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测就可得到大量的单克隆抗体 C. 若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞可直接移植到受体母牛子宫内获得克隆牛 D. 若为体外受精技术，细胞融合时可在显微镜下观察到雌、雄原核 【答案】D 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术中首先用酶解法去壁，一般使用纤维素酶和果胶酶处理；然后诱导原生质体融合，采用的方法一般包括物理法（离心、振荡、电激）、化学法（用聚乙二醇处理）；培养融合的原生质体再生出新的细胞壁，形成杂种细胞。然后杂种细胞经过植物组织培养技术可以培养形成杂种植株。 【详解】A、若甲、乙为植物细胞，首先用酶解法去壁，一般使用纤维素酶和果胶酶处理，A错误； B、若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的细胞分别经过特定选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测，然后将杂交瘤细胞大量培养，可得到大量的单克隆抗体，B错误； C、若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞需培养到桑椹胚或囊胚，然后移植到受体母牛子宫内获得克隆牛，C错误； D、若为体外受精技术，细胞融合时可在显微镜下观察到雌、雄原核或透明带和卵细胞膜之间的两个极体，D正确。 故选D。 11. “三亲婴儿”的培育过程的技术流程如下图，相关叙述正确的是（ ） A. 三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核 B. 图中MⅡ期卵母细胞可与获得能量后的精子完成受精作用 C. 该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植、体外受精技术 D. 卵母细胞捐献者的红绿色盲基因能够传递给“三亲婴儿” 【答案】C 【解析】 【分析】由图可知，“三亲婴儿”的培育过程涉及动物细胞培养（图中卵母细胞和重组细胞的培养）、细胞核移植（母亲卵母细胞的核移入捐献者去核卵母细胞中）、体外受精以及胚胎移植等技术。 【详解】A、结合图示可知，三亲婴儿的染色体来自两个亲本，即父亲和母亲，A错误； B、图中MⅡ期卵母细胞可与获得受精能力（而非能量）后的精子完成受精作用，B错误； C、由图可知，“三亲婴儿”的培育过程涉及动物细胞培养（图中卵母细胞和重组细胞的培养）、细胞核移植（母亲卵母细胞的核移入捐献者去核卵母细胞中）、体外受精以及胚胎移植等技术，C正确； D、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵母细胞的细胞质，故卵母细胞捐献者的红绿色盲基因不能够传递给“三亲婴儿”，D错误。 故选C。 12. 我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。获得耐盐基因后，为了构建重组DNA分子，在此过程中DNA连接酶作用的位点及相应的化学键为（ ） A. a、磷酸二酯键 B. b、氢键 C. a、氢键 D. b、磷酸二酯键 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程的工具酶包括限制酶和DNA连接酶的作用是断开或连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键；图中a为磷酸二酯键是限制酶、DNA连接酶的作用位点；b为氢键，是解旋酶的作用位点。 【详解】AC、a为磷酸二酯键，是DNA连接酶的作用位点，A正确，C错误； BD、b为氢键，是解旋酶的作用位点，BD错误。 故选A。 13. 某同学以鸡血细胞为材料进行“DNA粗提取和鉴定”实验。下列叙述错误的是（　　） A. 向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌，可加快血细胞破裂，释放DNA B. 向DNA溶液中加入2mol/LNaCl溶液，能析出DNA并提高其纯度 C. 向DNA溶液中加入体积分数为95%的预冷酒精，可对DNA进行纯化 D. DNA溶液与二苯胺试剂反应后，溶液呈现的蓝色越深，说明提取的DNA越多 【答案】B 【解析】 【分析】DNA粗提取的原理主要基于DNA与其他物质在物理和化学性质上的差异，通过相应处理将DNA分离出来。DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同： DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，此时易析出；而在浓度较高的2mol/LNaCl溶液中溶解度较高，能溶解在溶液中。利用这一特性，可通过调整NaCl溶液浓度，使DNA溶解或析出，与其他杂质分离。 DNA不溶于酒精，而某些杂质可溶。 体积分数为95%的冷酒精能使DNA沉淀析出，而蛋白质等许多杂质可溶于酒精，因此可用酒精进一步纯化DNA。 【详解】A、向鸡血细胞液中加入蒸馏水，由于细胞内液浓度高于外界蒸馏水浓度，细胞会吸水涨破，搅拌可以加快血细胞破裂，从而释放DNA，A正确； B、DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度较高，不会析出DNA，B错误； C、DNA不溶于体积分数为95%的预冷酒精，而一些杂质如蛋白质可以溶于酒精，所以向DNA溶液中加入体积分数为95%的预冷酒精，可对DNA进行纯化，C正确； D、在沸水浴条件下，DNA与二苯胺试剂反应呈现蓝色，溶液呈现的蓝色越深，说明提取的DNA越多，D正确。 故选B。 14. 研究人员欲将某动物体内基因X导入大肠杆菌的质粒中保存，质粒含有抗性基因与酶切位点，目的基因两端酶切位点如下图所示，下列叙述错误的是（　　） A. 使用HindⅢ和XbaI进行酶切能避免基因X与质粒反向连接 B. 目的基因X与质粒连接可使用E.coliDNA连接酶 C. Ca2+处理大肠杆菌能降低细胞膜通透性，有利于重组质粒导入受体细胞 D. 含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、分析题图可知，使用HindⅢ和XbaI进行酶切会产生不同的粘性末端，故能避免基因X与质粒反向连接，A正确； B、目的基因X与质粒用HindⅢ和XbaI酶切会产生粘性末端，E.coliDNA连接酶可连接粘性末端，故目的基因X与质粒连接可使用E.coliDNA连接酶，B正确； C、用Ca2+处理大肠杆菌，能提高细胞膜的通透性，使细胞处于感受态即能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，有利于重组质粒导入受体细胞，C错误； D、分析题图可知，重组质粒上含有氨苄青霉素抗性基因，故含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长，D正确。 故选C。 15. 如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述错误的是（　　） A. ①→②过程可用不同的限制酶分别切割Ti质粒和含抗虫基因的DNA B. ②→③过程可用Ca2+处理农杆菌细胞 C. ③→④过程是将重组Ti质粒整合到受体植物细胞的染色体DNA上 D. ④→⑤过程体现了植物细胞的全能性，不同阶段所需的培养条件不同 【答案】C 【解析】 【分析】图示是利用基因工程培育抗虫植物的示意图，其中①为质粒，作为运载体；②为重组质粒；③为含有重组质粒的农杆菌；④为含有目的基因的植物细胞；⑤为转基因植株。 【详解】A、①→②过程是构建基因表达载体，可用相同或不同的限制酶分别切割Ti质粒和含抗虫基因的DNA，Ti质粒和含抗虫基因的DNA能产生相同的末端即可，A正确； B、②→③过程是将重组Ti质粒转入农杆菌，农杆菌是细菌，可用Ca2+处理农杆菌细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境DNA分子的生理状态，从而将重组Ti质粒转入农杆菌，B正确； C、③→④过程是将重组Ti质粒导入植物细胞，重组Ti质粒上的T−DNA才能整合到受体植物细胞的染色体DNA上，C错误； D、④→⑤过程是植物组织培养，体现了植物细胞的全能性，不同阶段所需的光照、营养条件等不同，D正确。 故选C。 16. CRISPR/Cas9技术在遗传病治疗中展现出巨大潜力。镰刀型细胞贫血症是因β-珠蛋白基因（HBB）发生点突变所致，患者红细胞呈镰刀状。科学家计划利用CRISPR/Cas9技术治疗该疾病，流程大致为：设计靶向突变HBB基因的单链向导RNA（SgRNA），引导Cas9蛋白切割突变序列，同时导入正常HBB基因片段作为修复模板，最终使细胞表达正常β-珠蛋白。下列叙述错误的是（ ） A. 若sgRNA与某正常基因序列存在部分碱基互补，可能导致Cas9错误切割该基因（脱靶效应） B. Cas9切割突变HBB基因后，细胞可利用导入的正常基因片段进行修复，但该过程易受细胞内酶的影响，导致修复片段降解 C. 构建重组表达载体时，需包含sgRNA基因、Cas9基因和正常HBB基因模板，无需添加启动子，需添加特定的标记基因 D. 不同患者的HBB基因突变位点可能存在差异，因此需根据患者具体突变序列设计特异性sgRNA 【答案】C 【解析】 【详解】A、sgRNA通过碱基互补配对引导Cas9切割特定DNA序列，若与正常基因部分互补，可能引发脱靶效应，导致错误切割，A正确； B、Cas9切割突变HBB基因后，细胞可利用导入的正常基因片段作为修复模板进行修复，但外源模板可能被细胞内核酸酶降解，影响修复效率，B正确； C、基因表达载体需启动子驱动sgRNA基因和Cas9基因的转录，需要添加启动子，标记基因用于筛选成功转化的细胞，C错误； D、不同患者的HBB基因突变位点不同，需设计特异性sgRNA靶向对应突变序列，D正确。 故选C。 17. 用限制酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14kb（1kb即1000个碱基对）的长链，而同时用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，见下图（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一个黏性末端）。 若用MboⅠ限制酶单独切割该普通质粒，则产生的DNA片段的长度为（ ） A. 6和8 B. 2.5和11.5 C. 14 D. 5.5和8.5 【答案】A 【解析】 【分析】题图分析，用限制酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14kb(1kb即1000个碱基对)的长链，说明质粒中含有1个EcoRⅤ切点；同时用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，说明质粒中含有2个MboⅠ切点。 【详解】用限制酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14kb(1kb即1000个碱基对)的长链，说明质粒中含有1个EcoRⅤ切点；同时用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，说明质粒中含有2个MboⅠ切点。即质粒中含有1个EcoRⅤ切点，2个MboⅠ切点。且根据星号可知，EcoRⅤ限制酶将8kb的片段分割成两段，分别为2.5和5.5kb，据此可推测，若用MboⅠ限制酶单独切割该普通质粒，则产生的DNA片段为2种，应该是6和8kb，A正确。 故选A。 18. 科研人员通过切割pET-SEA质粒上SEA基因和终止子之间的部分序列，将猪流行性腹泻病毒的S基因插入，以构建pET-SEA-S重组质粒，并在大肠杆菌中高效表达SEA-S融合蛋白。目的基因导入受体细胞后，可用PCR技术筛选出成功导入pET-SEA-S融合表达质粒的细菌。下列各项所列引物用来进行筛选最合适的是（　　） A. 引物1和引物4 B. 引物3和引物4 C. 引物1和引物5 D. 引物2和引物5 【答案】A 【解析】 【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，利用的原理是DNA复制，需要条件有模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），过程包括：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【详解】据题干信息可知，需要用PCR技术筛选出含有pET-SEA-S融合表达质粒的细菌，即扩增出的DNA片段含有SEA基因和S基因，故选引物1和引物4，A正确，BCD错误。 故选A。 19. 下表为常用的限制性内切核酸酶(限制酶)及其识别序列和切割位点，下列说法错误的是（ ） 限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHI G↓GATCC KpnI GGTAC↓C EcoRI G↓AATTC Sau3AI ↓GATC HindII GTY↓RAC SmaI CCC↓GGG 注 ：Y=C或T，R=A或G。 A. 所有的限制酶都具有专一性 B. Sau3A I限制酶不可切割BamH I限制酶的识别核苷酸序列 C. BamH I和Sau3A I两种限制酶切割后形成相同的黏性末端 D. Hind Ⅱ识别多种核苷酸序列，EcoR I识别一种核苷酸序列 【答案】B 【解析】 【分析】本题考察限制性内切核酸酶的特性，包括专一性、识别序列及切割位点的关系。需结合表格中不同酶的识别序列和切割位点进行判断。 【详解】A、限制酶的专一性指其只能识别特定核苷酸序列并在特定位点切割，所有限制酶均具有此特性，A正确； B、Sau3AI的识别序列为↓GATC，BamHI的识别序列为G↓GATCC。Sau3AI可切割BamHI识别序列中的GATC部分（位于BamHI切割位点之后），B错误； C、BamHI切割后产生黏性末端GATC，Sau3A I切割后也产生GATC的黏性末端，两者黏性末端相同，C正确； D、HindII的识别序列为GTY↓RAC（Y=C/T，R=A/G），可识别多种序列；EcoRI的识别序列为G↓AATTC，仅一种，D正确。 故选B。 20. PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），利用大肠杆菌表达该蛋白。下图为所用载体示意图，phb2基因基因序列不含图中限制酶的识别序列。下列叙述错误的是（　　） A. 将phb2基因与载体正确连接构建基因表达载体是培育转基因大肠杆菌的核心工作 B. 为使phb2基因与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端可分别引入PvuⅡ和EcoRI限制酶的识别序列 C. 在使phb2基因与载体连接时，在扩增的phb2基因两端都引入PvuⅡ限制酶的识别序列可能导致目的基因环化 D. 构建基因表达载体时，需选择BamHI限制酶破坏氨苄青霉素抗性基因，以便对目的基因是否正常转入进行检测与鉴定 【答案】D 【解析】 【分析】限制酶的选择不能破坏目的基因，不能破坏载体上的关键结构，比如启动子、终止子、复制原点等。 【详解】A、将phb2基因与载体正确连接构建基因表达载体是培育转基因大肠杆菌的核心工作，A正确； B、限制酶的选择不能破坏目的基因，不能破坏载体上的关键结构，为使phb2基因与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端可分别引入PvuⅡ和EcoRI限制酶的识别序列，也可以防止自身环化，B正确； C、在使phb2基因与载体连接时，在扩增的phb2基因两端都引入PvuⅡ限制酶的识别序列，会产生可以互补配对的序列，可能导致目的基因环化，C正确； D、氨苄青霉素抗性基因是标记基因，选择BamHI限制酶破坏氨苄青霉素抗性基因,则不利于目的基因是否正常转人进行检测与鉴定，D错误。 故选D。 二、非选择题：（除标注外，每空1分，共40分） 21. 甲品种青花菜具有多种由核基因控制的优良性状，但其属于细胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，科研人员成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲品种中，下图为该操作示意图。请据图回答下列问题： （1）图中A过程为______，可采用______酶获得原生质体。 （2）诱导甲、乙原生质体融合的化学方法包括聚乙二醇融合法和______等，该过程成功的标志是______。 （3）杂种细胞诱导形成杂种植株的过程的两大关键步骤是______。 （4）植物体细胞杂交技术的生殖方式为______（填“有性”或“无性”）。 【答案】（1） ①. 去除细胞壁 ②. 纤维素酶和果胶 （2） ①. 高Ca+-高pH融合法 ②. 再生出细胞壁 （3）脱分化和再分化 （4）无性 【解析】 【分析】分析题图：该图为体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以酶解法，然后原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因。 【小问1详解】 据题图分析，该图为体细胞杂交过程图，其中A过程为去除细胞壁；制备原生质体可以用酶解法，植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，可采用纤维素酶和果胶酶获得原生质体。 【小问2详解】 诱导原生质体融合的化学方法有聚乙二醇（PEG）融合法和高Ca2+—高pH融合法等，融合成功的标志是再生出细胞壁。 【小问3详解】 杂种细胞诱导形成杂种植株的两大关键步骤是先诱导杂种细胞脱分化形成愈伤组织，再经组织再分化培育出完整杂种植株。 【小问4详解】 植物体细胞杂交技术的生殖方式为无性生殖。 22. 细胞工程在治疗疾病和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答下列问题。 Ⅰ：为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题: （1）若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。这两个品种的花粉可用化学诱导剂诱导融合，共可产生 _______种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合）。 （2）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，在细胞融合前，应使用_____方法去壁，以便有利于两细胞融合。 （3）植物细胞工程有一项应用是培育“脱毒苗”，培育脱毒马铃薯时，外植体宜选用_________。 Ⅱ：美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下图。回答下列问题： （4）SP2/0细胞是骨髓瘤细胞的一种，在进行该细胞培养时，需要给细胞提供气体环境为95％空气和5％，其中5％的作用是_____ ，培养过程中我们需要定期更换培养液，目的是_______ （5）诱导B淋巴细胞与SP2/0细胞融合除了物理和化学方法外，还可以使用_________进行诱导；产生的CD14的单克隆抗体的优点是_______。 【答案】（1）6##六 （2）酶解法 （3）茎尖 （4） ①. 维持培养液的pH ②. 清除代谢产物，防止代谢产物积累，对细胞自身造成危害（为细胞提供充足的营养） （5） ①. 灭活的病毒 ②. 特异性强、灵敏度高、可大量制备 【解析】 【分析】据图分析，ab细胞融合形成c，d细胞具有两个亲本的遗传特性。植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，再采用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株；单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，再克隆化培养获得单克隆抗体。 【小问1详解】 结合题干信息分析，a的基因型为yyRr，产生yR、yr两种配子，b的基因型为YYrr，产生Yr一种配子，故花粉有3种，即yR、yr、Yr，因此两两融合可产生6种基因型的融合细胞，即yyRR、yyrr、YYrr、YyRr、Yyrr、yyRr。 【小问2详解】 若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，在细胞融合前，应使用酶解法去壁，通常使用纤维素酶和果胶酶。 【小问3详解】 培育脱毒马铃薯时，外植体宜选用茎尖，理由是茎尖细胞全能性高，且其中含有病毒少或几乎不含病毒。 【小问4详解】 在进行该细胞培养时，需要给细胞提供气体环境为95％空气和5％CO2，其中5％CO2的作用是维持培养液的pH；培养过程中我们需要定期更换培养液，目的是清除代谢产物，防止代谢产物积累，对细胞自身造成危害（为细胞提供充足的营养）。 【小问5详解】 诱导B淋巴细胞与SP2/0细胞融合除了物理和化学方法外，还可使用灭活的病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；单克隆抗体的优点是特异性强，灵敏度高，可大量制备。 23. 2n/4n嵌合体胚胎是指用四倍体(4n)胚胎与二倍体胚胎(2n)或胚胎干细胞(ES细胞)进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2n/4n嵌合体胚胎的构建常用方法如图，请据图分析回答： （1）受精卵是胚胎发育的开端，图中的卵细胞发育到___________时期，才具备受精的能力，而精子需经过___________过程才能和卵细胞结合。 （2）2N的ES细胞来自胚胎发育过程的___________期，本实验中从功能上说明了该细胞___________。 （3）2n/4n嵌合体胚胎的构建用到的现代生物工程技术主要有：___________。 （4）ES细胞经嵌合体方法培育的动物与核移植方法培育的动物相比，遗传物质来源的区别主要是什么？___________。 【答案】（1） ①. MⅡ ②. 获能 （2） ①. 囊胚 ②. 具有发育的全能性 （3）动物细胞的培养、动物细胞融合和胚胎移植 （4）用ES细胞经嵌合体方法克隆的动物是完全的复制体而用核移植方法克隆的动物只是核型一致但胞质类型却不一定相同。 【解析】 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术，经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。 【小问1详解】 在受精过程中，卵细胞需要达到减数第二次分裂中期才具备受精能力。而精子不能直接与卵细胞结合，必须先在雌性生殖道中停留一段时间，经历精子获能过程，才具备与卵子受精的能力。 【小问2详解】 囊胚期的特点是细胞开始出现分化，不过该时期细胞的全能性仍比较高。其中聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来会发育成胎儿的各种组织。2N的ES细胞就来自胚胎发育过程的囊胚期，从本实验能看出该细胞具有发育的全能性，可参与到嵌合体胚胎的发育过程中。 【小问3详解】 从构建2n/4n嵌合体胚胎的过程来看，首先要对相关细胞进行动物细胞的培养；将四倍体 （4n ）胚胎与二倍体胚胎（2n ）或胚胎干细胞 （ES 细胞）进行聚合，这涉及动物细胞融合技术；最后要将构建好的胚胎移植到雌性动物体内，用到了胚胎移植技术。 【小问4详解】 ES细胞经嵌合体方法培育的动物，其细胞来源于二倍体胚胎的内细胞团，因此是原来细胞的完全复制体。而核移植也就是克隆，克隆动物的遗传物质中细胞核DNA与供核细胞一致，但细胞质遗传物质来自提供细胞质的细胞，所以用核移植方法克隆的动物只是核型一致，但胞质类型却不一定相同 。 24. 科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因（Pin-Ⅱ）通过农杆菌导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。如图表示利用含目的基因的DNA分子和Ti质粒构建基因表达载体的过程，图中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，NeoR表示新霉素抗性基因，箭头表示限制酶的酶切位点，相关酶的识别序列如表所示，图中所示引物表示与相应链结合。回答下列问题： （1）EcoRⅠ识别的碱基序列是5′-GAATTC-3′，该序列中有____个嘌呤。为使目的基因与质粒高效重组，双酶切最好选用____。 （2）利用PCR技术进行目的基因的扩增，应选择的一对引物分别是____，引物的作用为____，并在引物的____端添加相应酶切位点。PCR过程除需要模板和引物外，还需要____（写两点）。若最初该反应体系中只有1个DNA分子模板，进行第4次循环时，需要消耗引物____个。 （3）为将表达载体导入农杆菌，可使用____对农杆菌进行处理提高导入的成功率，筛选成功导入重组质粒的农杆菌表现为：在含有氨苄青霉素的培养基中______（填“能”或“不能”）正常生长，在含有新霉素的培养基中______（填“能”或“不能”）正常生长。成功导入目的基因的杨树细胞只能表现出新霉素抗性，原因是______。 【答案】（1） ①. 6##六 ②. KpnI和HindⅢ （2） ①. 引物2和引物3 ②. 在DNA聚合酶的催化下，在引物的3′端连接上脱氧核苷酸 ③. 5′ ④. 耐高温（Taq）DNA聚合酶、Mg2+、dNTP、缓冲液等 ⑤. 16 （3） ①. Ca2+ ②. 能 ③. 能 ④. 只有T-DNA区段会导入植物受体细胞，氨苄青霉素抗性基因不会导入受体细胞中 【解析】 【分析】基因工程包括四个基本程序：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细 胞、目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 EcoRⅠ识别的碱基序列是5′-GAATTC-3′，而DNA序列有两条链，有6个嘌呤（4个腺嘌呤和2个鸟嘌呤）；因为SmaI切割DNA后形成平末端，T4DNA连接酶连接平末端的效率相对较低，所以选用KpnⅠ和HindⅢ比选用KpnⅠ和SmaⅠ效果更好。 【小问2详解】 引物的作用是在DNA聚合酶催化下从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，利用PCR扩增目的基因时，应该选择引物2和引物3，在引物5′端添加相应酶切位点；PCR过程的每个循环分为3个步骤依次是变性、退火、延伸。变性温度为90~95℃，退火温度为50~60℃，延伸温度一般为72℃。PCR过程除需要模板和引物外，还需要耐高温（Taq）DNA聚合酶、dNTP（原料和能量）、缓冲液、Mg2+（激活耐高温DNA聚合酶）等，原先只有1个DNA，三轮循环结束共有8个DNA，根据半保留复制原理，第四轮循环共形成16个DNA，新合成的子链有16条，每条子链需要一个引物，所以进行第4次循环时，需要消耗引物16个。 【小问3详解】 为将表达载体导入农杆菌，可以使用Ca2+处理受体细胞，使其处于能吸收周围环境中DNA分子的状态，然后再将重组质粒导入农杆菌；农杆菌中基因表达载体（重组质粒）中的氨苄青霉素抗性基因和新霉素抗性基因均未被破坏，在含有氨苄青霉素的培养基和含有新霉素的培养基中均能正常生长；而农杆菌侵染植物受体细胞，只有T—DNA区段会导入植物受体细胞整合到植物细胞的染色体上，因此氨苄青霉素抗性基因不会导入植物受体细胞中，所以成功导入目的基因的杨树细胞只能表现出新霉素抗性，原因是只有T—DNA区段会导入植物受体细胞，氨苄青霉素抗性基因不会导入受体细胞中。 25. 微生物吸附是重金属废水的处理方法之一。金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在于动植物中的金属结合蛋白，具有吸附重金属的作用。科研人员将枣树的MT基因导入大肠杆菌构建工程菌。回答下列问题： （1）根据枣树的MTcDNA的核苷酸序列设计了相应的引物（图1甲），通过PCR扩增MT基因。已知A位点和B位点分别是起始密码子和终止密码子对应的基因位置，选用的引物组合应为___________。转录时以图1甲__________（填写“上”或“下”）面一条链为模板。 （2）本实验中，PCR所用的DNA聚合酶扩增出的MT基因的末端为平末端。由于载体E只有能产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P将MT基因接入载体E。载体P和载体E的酶切位点及相应的酶切序列如图1乙所示。 ①选用___________酶将载体P切开，再用___________（填“T4DNA或“E·coliDNA”）连接酶将MT基因与载体P相连，构成重组载体P′。 ②载体P′不具有表达MT基因___________和___________。选用___________酶组合对载体P′和载体E进行酶切，将切下的MT基因和载体E用DNA连接酶进行连接，将得到的混合物导入到钙离子处理的大肠杆菌，筛出MT工程菌。 （3）MT基因在工程菌的表达量如图2所示，结果仍无法说明已经成功构建能较强吸附废水中重金属的MT工程菌，理由是________________。 【答案】（1） ①. 引物1和引物4 ②. 下 （2） ①. EcoR Ⅴ ②. T4DNA ③. 启动子 ④. 终止子 ⑤. Xho I和Pst I （3）尚未在个体生物学水平上对MT工程菌吸附重金属的能力进行鉴定 【解析】 【小问1详解】 密码子位于mRNA上，是决定氨基酸的三个相邻碱基，起始密码子和终止密码子分别控制翻译的开始和结束，故为保证基因的正常表达，一对引物应分别位于位点A和位点B的两侧，且引物的5'端要与模板链的3'端互补，故需选择引物1和引物4。由于A位点和B位点分别是起始密码子和终止密码子对应的基因位置，且转录时mRNA的延伸方向是由5'→3'，mRNA与DNA的模板链方向相反，故转录时以图1甲下面一条链为模板。 【小问2详解】 ①MT基因的末端为平末端，结合图中不同限制酶识别的序列和切割后的末端可知，需要用EcoR Ⅴ或Sma Ⅰ切割载体P，但后续需进一步将重组载体P′和载体E连接，结合载体E上的限制酶种类可知，需将MT基因插入Xho I和Pst I两个酶切位点之间，故选EcoR Ⅴ将载体P切开；由于E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端，而T4DNA连接酶可以连接平末端，而MT基因的末端为平末端，故需要用T4DNA连接酶将MT基因与载体P相连，构成重组载体P′。 ②据图可知，载体P不含启动子和终止子，构建的载体P′是重组质粒，也不含有表达MT基因的启动子和终止子；为避免自身环化和反向连接，可选用两种酶切割两种载体，据图可知，载体P′和载体E均含有Xho I和Pst I酶，故可选用Xho I和Pst I酶进行酶切。 【小问3详解】 由于尚未在个体生物学水平上对MT工程菌吸附重金属的能力进行鉴定，故即使MT工程菌的MT蛋白相对含量较高，也无法说明已经成功构建能较强吸附废水中重金属的MT工程菌。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 凤翔中学2025--2026学年度第二学期高二年级第二次质量检测生物科试题 一、单选题：（每小题3分，共60分） 1. 关于“利用乳酸菌发酵制作酸奶或泡菜”的实验，下列叙述正确的是（ ） A. 制作泡菜的菜料不宜完全淹没在煮沸后冷却的盐水中 B. 制作酸奶的牛奶须经过高压蒸汽灭菌后再接种乳酸菌 C. 发酵装置需加满菜料或牛奶并封装，以抑制乳酸菌的无氧呼吸 D. 控制好发酵时间，以避免过量乳酸影响酸奶或泡菜的口味和品质 2. 为研究土壤食细菌线虫对农药A降解菌的影响，研究人员在实验室适宜培养条件下，利用农药A污染已灭菌土壤，并设计实验：对照组接种农药A降解菌，实验组接种农药A降解菌和食细菌线虫，实验结果如图所示。下列说法错误的是（　　） A. 可用干热灭菌法对被污染的土壤进行灭菌 B. 0～7d，食细菌线虫减少与适应环境有关 C. 食细菌线虫种群数量到达K值后保持不变 D. 食细菌线虫能增加农药A降解菌的数量 3. 研究人员以拟南芥愈伤组织为材料，探究IAA诱导愈伤组织生根的作用，结果如下表。下列相关说法正确的是（　　） 组别 培养基 植物类型 生根数(条) 1组 RIM 野生型 75 2组 RIM W8突变体 60 3组 不含IAA的RIM 野生型 59 4组 不含IAA的RIM W8突变体 17 注：RIM为诱导生根的培养基，配方中含有IAA；W8为IAA合成基因 A. 愈伤组织细胞排列疏松，高度液泡化，分化程度高 B. 诱导愈伤组织生根需要避光，诱导生芽需要光照处理 C. 野生型细胞自身产生的IAA促进了其在不含IAA的RIM生根 D. 若增加1组培养基中IAA的浓度，推测其生根的效果会更好 4. 人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列说法错误的是（ ） A. 人参皂苷是人参的次生代谢产物，是其生长所必需的 B. 细胞融合前必须先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 C. 聚乙二醇、高Ca2+—高pH溶液均可促进细胞融合 D. 上述融合细胞可能通过快速生长提高人参皂苷的产率 5. 研究人员取胰岛B细胞功能受损的糖尿病患者的成纤维细胞，在加入特殊诱导因子促进Sox2，Klf4，Oct4，c-Myc（简称SKOM）4种基因表达的孵化器中培养得到多能干细胞（iPS细胞），再定向诱导分化为可移植的正常胰岛B细胞。下列叙述正确的是（ ） A. SKOM中可能含有原癌基因或抑癌基因，参与调控细胞周期 B. 孵化器中要加入动物血清来防止动物细胞受病原体侵染 C. 导入的SKOM使成纤维细胞具有衰老细胞的特征 D. iPS细胞分化为胰岛B细胞的过程体现了细胞的全能性 6. 下图为利用正常的小鼠细胞进行动物细胞培养的过程，①～④表示相关过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程①可以使用机械法或胃蛋白酶等将组织分散成细胞 B. 过程②和过程④中细胞只能贴壁生长 C. 培养细胞2需要贴附于基质表面生长，可直接用离心法进行收集 D. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素、血清等 7. 下图是制备单克隆抗体流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是（ ） A. ①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B. ④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 C. ②中使用活性较强的病毒有利于杂交瘤细胞的形成 D. ③同时具有巨噬细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 8. 细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述错误的是（　　） A. 选择植物的茎尖分生区进行组织培养，可以获得脱毒植物幼苗 B. 选择病人的核移植胚胎干细胞诱导分化后可形成免疫匹配的移植器官 C. 选择去核卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率 D. 选择分化程度较高的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞 9. 如图为某哺乳动物生殖过程示意图（b 为卵母细胞）。下列相关叙述中错误的是（　　） A. 动物个体①②的产生分别属于有性生殖和无性生殖 B. 按照动物个体②的产生方式，后代的性别比例仍为1:1 C. 动物个体②的产生表明，动物细胞核也具有全能性 D. 图中a、b、c 三种细胞的产生方式，仅c 为有丝分裂 10. 某一生物工程技术过程中出现细胞融合的操作，下列叙述正确的是（ ） A. 若为植物体细胞杂交技术，则用聚乙二醇处理两种植物细胞后会直接出现膜融合 B. 若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的细胞分别经过特定选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测就可得到大量的单克隆抗体 C. 若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞可直接移植到受体母牛子宫内获得克隆牛 D. 若为体外受精技术，细胞融合时可在显微镜下观察到雌、雄原核 11. “三亲婴儿”的培育过程的技术流程如下图，相关叙述正确的是（ ） A. 三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核 B. 图中MⅡ期卵母细胞可与获得能量后的精子完成受精作用 C. 该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植、体外受精技术 D. 卵母细胞捐献者的红绿色盲基因能够传递给“三亲婴儿” 12. 我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。获得耐盐基因后，为了构建重组DNA分子，在此过程中DNA连接酶作用的位点及相应的化学键为（ ） A. a、磷酸二酯键 B. b、氢键 C. a、氢键 D. b、磷酸二酯键 13. 某同学以鸡血细胞为材料进行“DNA粗提取和鉴定”实验。下列叙述错误的是（　　） A. 向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌，可加快血细胞破裂，释放DNA B. 向DNA溶液中加入2mol/LNaCl溶液，能析出DNA并提高其纯度 C. 向DNA溶液中加入体积分数为95%的预冷酒精，可对DNA进行纯化 D. DNA溶液与二苯胺试剂反应后，溶液呈现的蓝色越深，说明提取的DNA越多 14. 研究人员欲将某动物体内基因X导入大肠杆菌的质粒中保存，质粒含有抗性基因与酶切位点，目的基因两端酶切位点如下图所示，下列叙述错误的是（　　） A. 使用HindⅢ和XbaI进行酶切能避免基因X与质粒反向连接 B. 目的基因X与质粒连接可使用E.coliDNA连接酶 C. Ca2+处理大肠杆菌能降低细胞膜通透性，有利于重组质粒导入受体细胞 D. 含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长 15. 如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述错误的是（　　） A. ①→②过程可用不同的限制酶分别切割Ti质粒和含抗虫基因的DNA B. ②→③过程可用Ca2+处理农杆菌细胞 C. ③→④过程是将重组Ti质粒整合到受体植物细胞的染色体DNA上 D. ④→⑤过程体现了植物细胞的全能性，不同阶段所需的培养条件不同 16. CRISPR/Cas9技术在遗传病治疗中展现出巨大潜力。镰刀型细胞贫血症是因β-珠蛋白基因（HBB）发生点突变所致，患者红细胞呈镰刀状。科学家计划利用CRISPR/Cas9技术治疗该疾病，流程大致为：设计靶向突变HBB基因的单链向导RNA（SgRNA），引导Cas9蛋白切割突变序列，同时导入正常HBB基因片段作为修复模板，最终使细胞表达正常β-珠蛋白。下列叙述错误的是（ ） A. 若sgRNA与某正常基因序列存在部分碱基互补，可能导致Cas9错误切割该基因（脱靶效应） B. Cas9切割突变HBB基因后，细胞可利用导入的正常基因片段进行修复，但该过程易受细胞内酶的影响，导致修复片段降解 C. 构建重组表达载体时，需包含sgRNA基因、Cas9基因和正常HBB基因模板，无需添加启动子，需添加特定的标记基因 D. 不同患者的HBB基因突变位点可能存在差异，因此需根据患者具体突变序列设计特异性sgRNA 17. 用限制酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14kb（1kb即1000个碱基对）的长链，而同时用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，见下图（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一个黏性末端）。 若用MboⅠ限制酶单独切割该普通质粒，则产生的DNA片段的长度为（ ） A. 6和8 B. 2.5和11.5 C. 14 D. 5.5和8.5 18. 科研人员通过切割pET-SEA质粒上SEA基因和终止子之间的部分序列，将猪流行性腹泻病毒的S基因插入，以构建pET-SEA-S重组质粒，并在大肠杆菌中高效表达SEA-S融合蛋白。目的基因导入受体细胞后，可用PCR技术筛选出成功导入pET-SEA-S融合表达质粒的细菌。下列各项所列引物用来进行筛选最合适的是（　　） A. 引物1和引物4 B. 引物3和引物4 C. 引物1和引物5 D. 引物2和引物5 19. 下表为常用的限制性内切核酸酶(限制酶)及其识别序列和切割位点，下列说法错误的是（ ） 限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHI G↓GATCC KpnI GGTAC↓C EcoRI G↓AATTC Sau3AI ↓GATC HindII GTY↓RAC SmaI CCC↓GGG 注 ：Y=C或T，R=A或G。 A. 所有的限制酶都具有专一性 B. Sau3A I限制酶不可切割BamH I限制酶的识别核苷酸序列 C. BamH I和Sau3A I两种限制酶切割后形成相同的黏性末端 D. Hind Ⅱ识别多种核苷酸序列，EcoR I识别一种核苷酸序列 20. PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），利用大肠杆菌表达该蛋白。下图为所用载体示意图，phb2基因基因序列不含图中限制酶的识别序列。下列叙述错误的是（　　） A. 将phb2基因与载体正确连接构建基因表达载体是培育转基因大肠杆菌的核心工作 B. 为使phb2基因与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端可分别引入PvuⅡ和EcoRI限制酶的识别序列 C. 在使phb2基因与载体连接时，在扩增的phb2基因两端都引入PvuⅡ限制酶的识别序列可能导致目的基因环化 D. 构建基因表达载体时，需选择BamHI限制酶破坏氨苄青霉素抗性基因，以便对目的基因是否正常转入进行检测与鉴定 二、非选择题：（除标注外，每空1分，共40分） 21. 甲品种青花菜具有多种由核基因控制的优良性状，但其属于细胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，科研人员成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲品种中，下图为该操作示意图。请据图回答下列问题： （1）图中A过程为______，可采用______酶获得原生质体。 （2）诱导甲、乙原生质体融合的化学方法包括聚乙二醇融合法和______等，该过程成功的标志是______。 （3）杂种细胞诱导形成杂种植株的过程的两大关键步骤是______。 （4）植物体细胞杂交技术的生殖方式为______（填“有性”或“无性”）。 22. 细胞工程在治疗疾病和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答下列问题。 Ⅰ：为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题: （1）若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。这两个品种的花粉可用化学诱导剂诱导融合，共可产生 _______种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合）。 （2）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，在细胞融合前，应使用_____方法去壁，以便有利于两细胞融合。 （3）植物细胞工程有一项应用是培育“脱毒苗”，培育脱毒马铃薯时，外植体宜选用_________。 Ⅱ：美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下图。回答下列问题： （4）SP2/0细胞是骨髓瘤细胞的一种，在进行该细胞培养时，需要给细胞提供气体环境为95％空气和5％，其中5％的作用是_____ ，培养过程中我们需要定期更换培养液，目的是_______ （5）诱导B淋巴细胞与SP2/0细胞融合除了物理和化学方法外，还可以使用_________进行诱导；产生的CD14的单克隆抗体的优点是_______。 23. 2n/4n嵌合体胚胎是指用四倍体(4n)胚胎与二倍体胚胎(2n)或胚胎干细胞(ES细胞)进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2n/4n嵌合体胚胎的构建常用方法如图，请据图分析回答： （1）受精卵是胚胎发育的开端，图中的卵细胞发育到___________时期，才具备受精的能力，而精子需经过___________过程才能和卵细胞结合。 （2）2N的ES细胞来自胚胎发育过程的___________期，本实验中从功能上说明了该细胞___________。 （3）2n/4n嵌合体胚胎的构建用到的现代生物工程技术主要有：___________。 （4）ES细胞经嵌合体方法培育的动物与核移植方法培育的动物相比，遗传物质来源的区别主要是什么？___________。 24. 科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因（Pin-Ⅱ）通过农杆菌导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。如图表示利用含目的基因的DNA分子和Ti质粒构建基因表达载体的过程，图中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，NeoR表示新霉素抗性基因，箭头表示限制酶的酶切位点，相关酶的识别序列如表所示，图中所示引物表示与相应链结合。回答下列问题： （1）EcoRⅠ识别的碱基序列是5′-GAATTC-3′，该序列中有____个嘌呤。为使目的基因与质粒高效重组，双酶切最好选用____。 （2）利用PCR技术进行目的基因的扩增，应选择的一对引物分别是____，引物的作用为____，并在引物的____端添加相应酶切位点。PCR过程除需要模板和引物外，还需要____（写两点）。若最初该反应体系中只有1个DNA分子模板，进行第4次循环时，需要消耗引物____个。 （3）为将表达载体导入农杆菌，可使用____对农杆菌进行处理提高导入的成功率，筛选成功导入重组质粒的农杆菌表现为：在含有氨苄青霉素的培养基中______（填“能”或“不能”）正常生长，在含有新霉素的培养基中______（填“能”或“不能”）正常生长。成功导入目的基因的杨树细胞只能表现出新霉素抗性，原因是______。 25. 微生物吸附是重金属废水的处理方法之一。金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在于动植物中的金属结合蛋白，具有吸附重金属的作用。科研人员将枣树的MT基因导入大肠杆菌构建工程菌。回答下列问题： （1）根据枣树的MTcDNA的核苷酸序列设计了相应的引物（图1甲），通过PCR扩增MT基因。已知A位点和B位点分别是起始密码子和终止密码子对应的基因位置，选用的引物组合应为___________。转录时以图1甲__________（填写“上”或“下”）面一条链为模板。 （2）本实验中，PCR所用的DNA聚合酶扩增出的MT基因的末端为平末端。由于载体E只有能产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P将MT基因接入载体E。载体P和载体E的酶切位点及相应的酶切序列如图1乙所示。 ①选用___________酶将载体P切开，再用___________（填“T4DNA或“E·coliDNA”）连接酶将MT基因与载体P相连，构成重组载体P′。 ②载体P′不具有表达MT基因___________和___________。选用___________酶组合对载体P′和载体E进行酶切，将切下的MT基因和载体E用DNA连接酶进行连接，将得到的混合物导入到钙离子处理的大肠杆菌，筛出MT工程菌。 （3）MT基因在工程菌的表达量如图2所示，结果仍无法说明已经成功构建能较强吸附废水中重金属的MT工程菌，理由是________________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $