2025-2026学年下学期高二生物期末综合测评卷（一）（人教版）

**基本信息** 高二期末生物卷以发酵工程、基因工程等为核心，融合《齐民要术》酿醋工艺与双特异性抗体等真实情境，考查生命观念与科学探究能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|20/40|发酵技术、微生物培养、细胞工程|结合《齐民要术》等传统素材，考查基础原理| |非选择题|5/60|基因工程、植物体细胞杂交、实验设计|以抗冻番茄培育等为情境，综合考查科学思维与探究实践|

2025-2026学年下学期高二期末综合测评卷 生物学（一） 分值：100 分 时间：75 分钟 一、选择题：本题共 20小题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是 符合题目要求的。 1.《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（‘酢’同‘醋’）法”的酿醋工艺，“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。相关叙述错误的是（ ） A.此酿醋方法依据的原理是特定的微生物可将酒精转化为醋酸 B.加水稀释的目的是避免酒精浓度过高抑制微生物的生长繁殖 C.“衣（指菌膜）生”是由酵母菌在发酵液表面大量繁殖形成的 D.“挠搅”有利于酒精与微生物的充分接触，且可增加溶解氧 2.如图所示，甲、乙、丙依次表示果酒、果醋和腐乳的制作，①②③④表示它们制作的相同之处，下列相关叙述错误的是（ ） A.①可表示两者制作时所用的主要菌种都是单细胞 B.②可表示两者制作时所用丙的主要菌种都属于真核生物 C.③可表示两者制作过程都需要有氧环境 D.④可表示三者制作过程的温度相同 3.研究小组探究泡菜制作过程中不同浓度的食盐对亚硝酸盐产生的影响，结果如图。下列叙述正确的是（ ） A.腌制过程中产生的亚硝酸盐，直接决定了泡菜的品质和口味 B.在一定浓度范围内，亚硝酸盐含量峰值与NaCl溶液浓度呈负相关 C.生活中为减少亚硝酸盐的摄入量，应拒绝食用泡菜 D.泡菜腌制后期，乳酸菌生长受抑制，导致亚硝酸盐含量下降 4.某实验室为分离土壤中的纤维素分解菌，分别采用平板划线法和稀释涂布平板法接种，操作中涉及培养基处理、接种流程等。下列相关叙述错误的是（ ） A.常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，可杀灭芽孢等 B.平板划线时，划线前和划线后均需要对接种环进行灼烧灭菌 C.稀释涂布平板法操作时，需用无菌水对菌液进行梯度稀释 D.采用上述两种方法接种同种菌到同一培养基，菌落的形状、颜色等特征不同 5.由大丽轮枝菌引起的棉花黄萎病被称为棉花的“癌症”，是棉花生产的头号杀手，对棉花生产造成巨大的经济损失。研究人员对某地区土壤中大丽轮枝菌进行了分离与计数，具体操作流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A.接种微生物的方法有很多，图中③的接种方法为稀释涂布平板法 B.为使实验结果更加准确可靠，应同时至少接种三个培养皿 C.为了使大丽轮枝菌均匀分布在无菌水中，进行②过程时应充分振荡 D.培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利 6.发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的基本环节如图所示。下列说法正确的是（ ） A.菌种的选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可以从自然界筛选 B.啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在后发酵阶段完成 C.发酵结束后，可通过过滤、沉淀等方法分离出微生物细胞本身 D.通过发酵获得大量的微生物蛋白质即单细胞蛋白 7.某科研团队为培育“枸杞—沙棘抗逆杂交品种”（枸杞耐寒性一般但果实营养价值高，沙棘耐盐耐旱但果实小），开展了植物体细胞杂交研究，流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A.①中使用的酶为纤维素酶和果胶酶，处理细胞时需注意控制温度 B.②中PEG的作用是打破原生质体膜的表面张力，促进膜融合 C.③中培养基可帮助排除未融合的原生质体及同种融合的原生质体 D.④中生长素比例高促进芽分化，该过程需避光以避免影响分化方向 8.我国利用茎尖组织培养技术结合病毒检测培育了脱毒马铃薯（如青薯9号），有效解决了种薯退化问题，推动其成为继水稻、小麦、玉米之后的第四主粮，下列叙述错误的是（ ） A.茎尖组织培养获得脱毒苗的原理是植物细胞的全能性，茎尖因病毒含量极低成为理想材料 B.青薯9号“耐旱、高产”的性状体现了生物对环境的适应性，其培育过程需经过脱分化、再分化等阶段 C.若将青薯9号的茎尖细胞与耐盐植物细胞融合，可直接获得耐盐高产的马铃薯新品种 D.马铃薯主粮化战略可增加粮食供应多样性，其加工成的馒头、面条、米粉等主食富含淀粉 9.科研人员将奶山羊的离体组织剪成1mm3组织块，均分为ABC三组，分别用表中的三种方法消化后，分离出细胞并测定其细胞密度和细胞活率（具有生理活性的细胞所占的比例）；将细胞悬液调至相同密度后，在适宜条件下培养并检测细胞增殖能力。相关检测结果如图所示，下列分析正确的是（ ） 组别（酶消化法） 酶消化处理 A（胰酶消化法） 胰蛋白酶，30 min B（两步酶消化法） 胶原蛋白酶IV，30 min→培养基清洗5 min→胰蛋白酶，15 min C（两步混合酶消化法） 胶原蛋白酶IV+透明质酸酶Ⅱ，30min→培养基清洗5min→胰蛋白酶+DNA酶I，15min A.消化之后的操作是离心后弃上清→加入培养基→滤除组织残留→加入培养基 B.向培养基中添加的动物血清和抗生素等物质，能为细胞的生长提供必需的营养 C.A组处理效果较差，原因可能是胰蛋白酶破坏了细胞膜蛋白，细胞的损伤较大 D.两步酶消化法兼顾效果及操作简便性，所得细胞在传代培养中遗传稳定性最高 10.甲型H1N1流感病毒表面的神经氨酸酶有4个抗原决定簇，一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（Ab）。由多种抗原决定簇刺激机体产生的多种抗体的总和称为多克隆抗体。如图为制备多克隆抗体（简称“多抗”）和单克隆抗体（简称“单抗”）的示意图。下列叙述正确的是（ ） A.多抗由单一B细胞克隆产生，可以识别多种抗原表位 B.利用灭活病毒诱导法融合骨髓瘤细胞与B细胞时，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子会重新排布 C.筛选②需要将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔进行培养 D.甲型H1N1流感病毒部分抗原结构改变后，会出现多抗失效而单抗有效的情况 11.第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植，流程如图所示。图中检测包括PGD、PGS(PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是（ ） A.受精前需将采集的卵子培养至MⅡ期，精子在含Mg2+载体的获能液中获能 B.PGD和PGS技术可分别用于筛选唐氏综合征和红绿色盲 C.进行胚胎移植前需要对夫妻双方进行免疫检查，以防止移植后出现免疫排斥反应 D.“理想胚胎”需培养至桑葚胚或囊胚期才能植入子宫 12.如图是小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系获得过程，相关叙述错误的是（ ） A.卵母细胞只有在受精后才能完成减数分裂，因此不能直接用卵母细胞培养 B.过程①中，精子需要在ATP培养液中获能，卵母细胞应处于减数第二次分裂时期 C.过程②中，受精卵进行早期分裂时，细胞的数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加 D.题图中的早期胚胎最可能是囊胚，其中的内细胞团细胞具有全能性 13.用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因的质粒如图所示。用限制酶切割含有目的基因的DNA片段和图示质粒，构建基因表达载体，并导入受体菌中。下列叙述正确的是（ ） A.若用Sca Ⅰ酶切质粒，所得产物经凝胶电泳可形成1个条带 B.应选用Hind Ⅲ和Sca Ⅰ酶切，以防止目的基因与质粒反向连接 C.若仅用Pvu Ⅰ酶切，并用含四环素培养基筛选，存活受体菌中不一定含有目的基因 D.若用Sph Ⅰ酶切，筛选时应先将转化处理的菌液涂布到含四环素的培养基中长成菌落，再影印接种到含氨苄青霉素的培养基中 14.拟南芥中的RGL1酶作为E3泛素连接酶（AtRZF1）的抑制因子在响应植物干旱胁迫中发挥着重要作用。研究发现，AtRZF1功能丧失突变体比野生型拟南芥具有更高的耐旱性。研究人员采用融合PCR技术（原理如图所示）将RGL1酶基因和AtRZF1基因连接起来构建融合基因以研究两种基因的相互作用。下列说法正确的是（ ） A.RGL1酶在植物干旱胁迫响应中起到正调控作用 B.图中第一阶段经过1次PCR循环即可获得含引物2的双链等长的DNA C.图中第二阶段构建融合基因时能够起到“搭桥融合”作用的引物有4种 D.融合PCR技术操作过程中的每个阶段都需经历两次降温和一次升温 15.GM-CSF（粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子）可增加白细胞的数量，在临床上用于肿瘤治疗，但自然条件下含量很低且很难获得。为满足临床需求，科研人员构建了GM-CSF重组质粒，通过基因工程大量生产GM-CSF。如图为GM-CSF基因及质粒上相关限制酶的酶切位点。下列分析正确的是（ ） A.题图质粒上还必须具有的结构是起始密码子、终止子和复制原点 B.应选择Hind Ⅲ、Pst Ⅰ两种“分子手术刀”同时处理目的基因和质粒 C.用镁离子处理大肠杆菌后，采用农杆菌转化法将GM-CSF导入大肠杆菌 D.将大肠杆菌直接接种到含有四环素的培养基中即可筛选出导入GM-CSF基因的目的菌 16.为探究AtGA2ox8基因在拟南芥中的生物学功能，研究者采用PCR技术从拟南芥基因组中扩增得到了该基因，并采用农杆菌转化法将该基因导入拟南芥细胞中，得到了AtGA2ox8基因高表达的纯合转基因拟南芥植株，该植株表现为发育迟缓。下列叙述错误的是（ ） A.利用PCR扩增AtGA2ox8基因时，循环n次需要消耗2n-2个引物 B.若AtGA2ox8基因的序列已知，还可通过人工合成的方法获取该基因 C.利用农杆菌转化法培育转基因拟南芥的过程中至少要进行两次筛选 D.PCR技术还可以检测AtGA2ox8基因是否转录出相应的mRNA 17.如图为转基因抗冻番茄培育过程的示意图（其中AmpR为氨苄青霉素抗性基因）。下列叙述正确的是（ ） A.可同时选用限制酶Pst Ⅰ、Sma Ⅰ对含目的基因的DNA进行切割 B.过程②中，通常直接将过程①得到的产物注入受体细胞 C.过程③需要用到纤维素酶和果胶酶，以便获得并培养活的原生质体 D.过程④中，若利用探针在试管苗细胞内检测到目的基因，则转基因成功 18.水蛭是我国的传统中药材，主要药理成分水蛭素为水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。拟通过蛋白质工程改造水蛭素结构，提高其抗凝血活性。蛋白质工程流程如图所示。下列关于蛋白质工程叙述正确的是（ ） A.蛋白质工程是在分子水平上对DNA分子直接进行操作，定向改变分子的结构 B.图中的b为mRNAa为蛋白质，b和a对应的单体序列都是唯一的 C.通过蛋白质工程改造的水蛭蛋白是自然界已有的蛋白质 D.蛋白质工程改造的水解蛋白过程中不涉及中心法则 19.如图是培育“试管婴儿”的主要过程。2012年中国首例“设计试管婴儿”诞生，设计这个婴儿的目的是挽救其患有重度致命贫血病的14岁姐姐。下列叙述错误的是（ ） A.“设计试管婴儿”需在过程②时进行遗传学诊断 B.“试管婴儿”和“设计试管婴儿”均为有性生殖 C.“设计试管婴儿”的技术不属于“治疗性克隆” D.该女婴造血干细胞不能挽救其他贫血病患者 20.随着转基因技术的发展，“基因污染”应运而生，下列关于基因污染的叙述错误的是（ ） A.转基因作物的外源基因可能通过花粉扩散到其近亲作物上，从而污染生物基因库 B.抗除草剂基因有可能通过花粉传播进入杂草，从而产生“超级杂草” C.杂草、害虫从其近亲获得抗性基因，可能破坏生态系统的稳定性 D.转基因生物的外源基因本身来源于自然界，故不存在“基因污染” 二、非选择题：本大题共 5 小题，共 60分 21.（10分）某品牌老陈醋有丰富的营养成分，在酿造过程中产生了川芎嗪、黄酮类化合物等对人体有益的物质，极具养生价值。一企业对老配方进行了更新，并设计了制作流程，如图1。请回答下列问题： （1）对主粮膨化处理的作用是_________________________。酿制粮食酒时，______（填“需要”或“不需要”）对主粮进行严格的消毒处理，原因是____________________________________。 多次进行甜醋发酵实验发现，在发酵液的液面经常观察到一层明显的菌膜，该膜是由_________繁殖而成的。 （2）研究表明，在陈醋的酿造过程中，起主导作用的是醋酸菌，而乳酸菌也存在于醋醅中，其代谢产生的乳酸是影响陈醋风味的重要因素。成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期________________________（至少写出2种）等环境因素的变化，淘汰了部分种类乳酸菌。 （3）乙偶姻和川芎嗪均是山西老陈醋中重要的风味物质，对熏醅阶段中二者的含量进行测定得到了如图2的结果，川芎嗪最早产生于________（填时间），乙偶姻可能在更早的醋酸发酵阶段就开始产生。熏醅阶段的第1~5天，随着熏醅的进行，乙偶姻与川芎嗪的含量变化趋势______（填“相同”“相反”或“无关联”），推测二者关系为_______________________________。 22.（12分）两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如图所示。回答下列问题： （1）过程①需要用__________________去除细胞壁，有人说该过程体现了酶的专一性，请为他的说法提供依据： ____________________________________________________________。 （2）过程②紫外线的作用是__________________________________________；过程③采用的化学法有______________________________（答出2种方法即可）。 （3）过程④利用的原理是____________________________________，该过程培养得到的试管苗移栽前先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养箱中生长几日，用流水洗去根部培养基，再移植到消过毒的珍珠岩或蛭石等环境中，其目的是___________________________________。 （4）下图是采用特异性引物对双亲及再生植株1~4进行PCR扩增后电泳的结果。据图判断，再生植株1~4中一定是杂种植株的是__________________，判断依据是____________________________________；这些植株电泳图谱不同的原因是___________________________________。 23.（13分）双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题： （1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是____________________，过程②选用的骨髓瘤细胞________（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。 （2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行______________和______________，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是________________________________（答出三点）。 （3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是________________________________。图2方框内需要经过________次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为____________________、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。 （4）假设图2中双特异性抗体分子是由若干个氨基酸形成的，下列叙述不正确的是________。 A.该特异性抗体能与人体内各类肿瘤细胞结合 B.双特异性抗体可以在人体内持续发挥作用 C.该双特异性抗体的制备过程中只用到了动物细胞融合技术 D.双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合，因而不具有特异性 （5）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是____________________________________________________。 24.（13分）在水体净化和污水处理领域，因为大肠杆菌在粪便中数量较多，故常用为检查水源是否被粪便污染的关键指标。 （1）为检测水样中的大肠杆菌，首先要配制培养基，步骤如下：称取适量的蛋白胨、NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后_________分装到锥形瓶后利用_______进行灭菌，再在无菌条件下加入灭菌的乳糖溶液、伊红及美蓝溶液，摇匀后立即倒平板。从培养基物理性质上看，该培养基为__________培养基。根据培养基成分可知，大肠杆菌的同化作用类型是_____________。 （2）取待检水样1mL加入9mL无菌水中，制成接种样液。 实验组：将_____________用_____________法接种在上述培养基上。 对照组：将_________________用划线法接种。 在相同培养基上或不接种相同条件下培养48h后观察结果。如果实验结果出现____________________________________，则可基本排除操作误差对实验结果的影响。 （3）某同学将提取到的大肠杆菌接种在含有利福平（一种广谱抗生素）的伊红美蓝培养基上，结果获得了多个菌落，为确定菌落出现的原因，设计实验如下： ①培养基中加入利福平的目的是_________________________。 ②采用____________________法接种大肠杆菌样液，将接种后的培养皿_____________放在36℃的恒温箱中培养相同时间。 ③该实验有两个假设： 假设一：大肠杆菌的抗利福平突变发生在大肠杆菌与利福平接触之前。 假设二：大肠杆菌的抗利福平突变发生在大肠杆菌与利福平接触之后。你认为图中的实验结果支持假设________（填“一”或“二”），如果另一个假设成立的话，实验结果应该是___________________________________________________。 ④A4与A5数据差异大的原因最可能是____________________________________________。 25.（12分）乙型病毒性肝炎（乙肝）是一种严重危害人类健康的传染病。注射乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的有效方法。研究人员利用巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程如图所示。 注：巴斯德毕赤酵母菌能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因［5'AOXl和3'AOX1（TT）分别是AOX1基因：的启动子和终止子］受到诱导而表达。 （1）利用PCR技术获取和扩增HBsAg基因，除向反应体系中加入乙肝病毒DNA、四种脱氧核苷酸和两种引物外，还需加入____________，并且需要在含__________（填离子）的缓冲液中进行。在设计两种引物时，在两种引物的_______（填“3'”或“5'”）端需分别添加_____________（填限制酶名称）的识别序列，从而使HBsAg基因能正确插到pPIC9K质粒中。 （2）pPIC9K质粒上的5'AOX1的作用是______________________，过程①称为________，该过程需要用到的酶有限制酶和________________。 （3）过程②用限制酶_______________来切割重组质粒获得重组DNA片段，然后将重组DNA片段重组入巴斯德毕赤酵母菌，若要确定巴斯德毕赤酵母菌是否成功转化，应向培养基中加入_________进行培养筛选，转化后的酵母菌是否含有HBsAg基因，可用_____________技术进行检测。 （4）转化成功的酵母菌在后期培养时需向培养基中添加___________以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。 答案及解析 1.答案：C 解析：该方法的原理是醋酸菌在氧气充足、缺少糖源时可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，A正确；加水的目的是对“酒”进行稀释，避免酒精浓度过高杀死醋酸菌（失水过多），B正确；醋酸菌对氧气的含量特别敏感，“衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的，C错误；醋酸菌是一种好氧菌，“挠搅”有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧，D正确。 2.答案：D 解析：A、甲菌种酵母菌属于单细胞真菌，乙菌种醋酸菌属于细菌，也是单细胞的生物，丙菌种霉菌属于多细胞真菌，因此①表示两者的主要菌种都是单细胞生物，A正确； B、甲菌种酵母菌属于单细胞真菌，乙菌种霉菌属于多细胞真菌，真菌是真核生物，因此②表示两者的主要菌种都属于真核生物，B正确； C、乙菌种醋酸菌、丙菌种霉菌，都是需氧菌，因此，③表示两者制作过程都需要氧气，C正确； D、果酒、果醋和腐乳制作所需温度分别为18～25℃、30～35℃和15～18℃，④表示三者制作过程的温度相同，D错误。 故选D。 3.答案：B 解析：亚硝酸盐含量较低，不会影响泡菜的口味，泡菜的口味主要由食盐、乳酸等含量决定，A错误。亚硝酸盐在发酵后期含量减少，搭配合适的烹饪方法，可适量食用泡菜，C错误。亚硝酸盐并非乳酸菌的发酵产物，其含量与乳酸菌生长无直接关系，D错误。 4.答案：D 解析：A、高压蒸汽灭菌法可杀灭培养基中的微生物、芽孢及孢子，是培养基灭菌的常用方法，A正确； B、平板划线时，划线前灼烧接种环灭菌，划线后灼烧接种环，防止菌种污染环境，B正确； C、稀释涂布平板法需用无菌水对菌液进行梯度稀释，避免菌落重叠，C正确； D、平板划线法和稀释涂布平板法接种同种菌，菌落的形状、颜色等特征相同，D错误。 故选D。 5.答案：D 解析：接种微生物的方法有很多，图中③过程所示为稀释涂布平板法，A正确；用该方法统计样本菌落数时，同时需要涂布至少三个培养皿，使实验结果更加准确可靠，B正确；充分振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中，有利于后续的梯度稀释，C正确；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水，将出现因失水过多而死亡的现象，对生长不利，D错误。 6.答案：C 解析：A.发酵罐中发酵是发酵工程的中心环节，要严格控制发酵条件，A错误； B.啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在主发酵阶段完成，B错误； C.如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥得到产品，如果是代谢产物则采用提取、分离、纯化等方法获取，C正确； D.单细胞蛋白本身就是微生物菌体，而不是从微生物细胞中提取的，可直接作为微生物饲料，D错误。 7.答案：D 解析：植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，需用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁。酶的活性受温度影响，故需注意控制温度，A正确。PEG是常用的诱导植物原生质体融合的化学诱导剂，其作用是打破膜表面张力，促进膜融合，B正确。用PEG诱导融合后，体系中存在未融合枸杞原生质体、未融合沙棘原生质体、枸杞—枸杞同种融合原生质体、沙棘—沙棘同种融合原生质体、枸杞—沙棘杂种原生质体五种类型，需通过选择培养基筛选，仅保留枸杞—沙棘杂种原生质体，C正确。再分化阶段，激素比例决定分化方向——生长素与细胞分裂素比值高时有利于根的分化，比值低时有利于芽的分化，且该过程需要光照，而脱分化过程需避光，D错误。 8.答案：C 解析：A.植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，植物茎尖的分生区细胞病毒含量极低甚至不含病毒，是培育脱毒苗的理想材料，A正确； B.青薯9号“耐旱、高产”的性状使其能更好地适应干旱环境，体现了生物对环境的适应性；茎尖组织培养过程需经过脱分化形成愈伤组织、再分化形成幼根幼芽的阶段，最终发育为完整植株，B正确； C.两种植物细胞融合后，首先需要筛选出符合要求的杂种细胞，再通过植物组织培养才能培育成完整植株，且杂种细胞不一定能同时表达两个亲本的优良性状，无法直接获得耐盐高产的马铃薯新品种，C错误； D.马铃薯块茎富含淀粉，将其主粮化可以丰富粮食供应的种类，增加粮食供应多样性，其加工产物馒头、面条等主食也富含淀粉，D正确。 9.答案：C 解析：动物细胞培养。消化之后的操作是：滤除组织残留→加入培养基→离心后弃上清液→加入培养基，A错误；动物血清能为细胞生长提供营养，抗生素的作用是避免杂菌污染，B错误；从图中可以看出，A组细胞培养后细胞密度、细胞活率、细胞增殖能力都低于其他两组，可能是胰蛋白酶破坏了细胞膜蛋白，对细胞的损伤较大，C正确；根据实验结果无法判断两步酶消化法所得细胞在传代培养中遗传稳定性最高，D错误。 10.答案：B 解析：A选项，多抗由多种B细胞克隆产生，可识别多种抗原表位，A错误；B选项，灭活病毒诱导细胞融合时，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，B正确；C选项，筛选②需将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞培养，C错误；D选项，甲型H1N1流感病毒抗原结构改变后，多抗可能部分失效，单抗针对性强也可能失效，D错误。故选B。 11.答案：D 解析：A、体外受精前，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养MII期，精子在含Ca2+载体的获能液中获能，A错误； B、PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGD可用于筛选红绿色盲；PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测，PGS可用于筛选唐氏综合征，B错误； C、受体子宫对外来胚胎几乎不发生免疫反应，因此进行胚胎移植前不需要对夫妻双方进行免疫检查，C错误； D、早期胚胎需要发育至囊胚或桑葚胚期才能进行移植，即“理想胚胎”需培养至桑椹或囊胚才能植入子宫，D正确。 故选D。 12.答案：B 解析：卵母细胞只有在受精后才能完成减数分裂，所以需要用精子刺激卵母细胞，然后移除雄原核再进行培养，A正确；过程①中，精子需要用获能液培养，卵母细胞应处于减数第二次分裂时期，B错误；过程②是早期胚胎发育，此过程中，受精卵有一段时间是在透明带内进行分裂，细胞的数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加，C正确；据题图可知，该早期胚胎最可能是囊胚，囊胚的内细胞团细胞具有发育的全能性，D正确。 13.答案：C 解析：质粒上有两个Sca I酶切位点，用Sca Ⅰ酶切质粒后，质粒会被切成两段，所得产物经凝胶电泳可形成2个条带，A错误；用Hind Ⅲ和Sca Ⅰ酶切，会把两个标记基因都破坏，不能用这两个酶同时切割，B错误；若仅用Pvu Ⅰ酶切，含质粒的细胞和重组质粒的细胞都能在含四环素培养基上生长，用含四环素培养基筛选，存活受体菌可能导入了重组质粒，也可能导入了空白质粒（不含目的基因），C正确；若用Sph I酶切，会破坏四环素抗性基因，筛选时应先将转化处理的菌液涂布到含氨苄青霉素的培养基中长成菌落，将导入空白质粒和导入重组质粒的细胞筛选出来，再影印接种到含四环素的培养基中，从而将含重组质粒的细胞筛选出来，D错误。 14.答案：A 解析：A、据题意，AtRZF1功能丧失突变体比野生型拟南芥具有更高的耐旱性，说明AtRZF1在干旱胁迫响应中起抑制作用，而RGL1酶作为E3泛素连接酶（AtRZF1）的抑制因子，所以RGL1酶在植物干旱胁迫响应中起到正调控作用，A正确； B、由图可知，引物2和引物3的一端都添加了一段序列，所以经过1次PCR循环得到的是含有引物2、引物3的产物，其DNA双链不等长，该产物继续进行第二次扩增（循环），才能获得双链等长的DNA，B错误； C、由图可知，融合PCR中是通过在引物2和引物3的一端添加能与碱基互补配对的序列，从而在第二阶段利用这两段互补序列形成具有重叠链的PCR引物。所以能够起到“搭桥融合”作用的引物有2种，即引物2和引物3，C错误； D、PCR技术操作过程中，每轮循环是需要一次降温和两次升温，D错误； 故选A。 15.答案：B 解析：起始密码子位于mRNA，不在质粒（环状DNA）上，A错误；应选择限制酶Hind Ⅲ、Pst Ⅰ同时处理目的基因和质粒，防止GM-CSF基因、质粒的自身环化，以及反向连接，重组质粒不含四环素抗性基因，所以不能将大肠杆菌接种到含有四环素的培养基中进行筛选，B正确，D错误；用钙离子处理大肠杆菌，使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态，再将GM-CSF导入大肠杆菌，C错误。 16.答案：A 解析：A、由于作为模板的目的基因不需要引物，则扩增AtGA2ox8基因时，循环n次得到2n+1条链，需要消耗引物2n+1-2个，A错误； B、获取目的基因的方法有PCR，从基因文库中获取，若AtGA2ox8基因的序列已知，还可通过人工合成的方法获取该基因，B正确； C、利用农杆菌转化法培育转基因拟南芥的过程中至少要进行两次筛选，第一次是筛选重组质粒是否导入受体细胞，第二次筛选是目的基因有没有整合到染色体上，C正确； D、分子水平检测目的基因，包括通过PCR等技术检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录出了mRNA，从转基因品种中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交，检测目的基因是否翻译成相应的蛋白等，D正确。 故选A。 17.答案：A 解析：目的基因两侧分别有限制酶Sma Ⅰ和Pst Ⅰ的识别序列，且质粒上也含有这两种限制酶的切割位点，所以可同时选用限制酶Pst Ⅰ、Sma Ⅰ对含目的基因的DNA进行切割，A正确；目的基因不可直接导入植物细胞，常用花粉管通道法或农杆菌转化法，B错误；过程③为植物组织培养，不需要用纤维素酶和果胶酶处理，C错误；过程④中，若利用探针在试管苗细胞内检测到目的基因，不能说明转基因成功，转基因成功的标志是目的基因成功表达出相应性状，D错误。 18.答案：A 解析：A、蛋白质工程直接的操作对象是水蛭素基因，是在分子水平上对DNA分子直接进行操作，定向改变分子的结构，A正确；B、据图可知，物质a是具有氨基酸序列的多肽链，物质b是mRNA。在生产过程中，物质b可能不同，原因是密码子的简并性，即一种氨基酸可能对应几个密码子，B错误；C、通过蛋白质工程改造的水蛭蛋白是自然界没有的蛋白质，C错误；D、根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列，涉及到了中心法则，D错误。故选A。 19.答案：D 解析：“设计试管婴儿”的目的是治疗某些疾病，需在过程②，即胚胎移植前进行遗传学诊断，A正确；“试管婴儿”和“设计试管婴儿”均经过精子和卵细胞在体外受精的过程，所以均为有性生殖，B正确；“设计试管婴儿”是利用体外受精和胚胎移植的方法培育新生命，属于有性生殖，不属于克隆，C正确；只要供者和受者的主要人类白细胞抗原（HLA）有一半以上相同，即可进行造血干细胞移植，因此该女婴造血干细胞也可能挽救其他贫血病患者，D错误。 20.答案：D 解析：转基因作物的外源基因可能通过花粉扩散到它的近亲作物上，从而污染生物基因库，A正确；转基因植物的抗除草剂基因可能会通过花粉传播给其他杂草，产生抗除草剂的“超级杂草”，B正确；杂草、害虫从其近亲中获得抗性基因，成为“超级杂草”或“超级害虫”，可能破坏生态系统的稳定性，C正确；转基因植物的外源基因通过花粉传播到其他类型的植物中，会存在“基因污染”，D错误。 21.答案：（1）增加与红曲霉的接触面积；不需要；随着发酵过程的进行，酒精逐渐积累，大多数杂菌对酒精不耐受，生命活动受到抑制；醋酸菌 （2）氧气、营养物质、pH （3）熏醅阶段第2天；相反；川芎嗪可能是由乙偶姻转化而来的 解析：（1）由题意可知，膨化处理是指将粮食加入密闭容器中，加热加压后突然减压，粮食中的水分汽化膨胀，使其出现许多小孔，变得松脆，这有利于加大粮食与红曲霉的接触面积，使发酵更充分。酿制粮食酒时，不需要对主粮进行严格的消毒处理，原因是随着发酵过程的进行，酒精逐渐积累，大多数杂菌对酒精不耐受，生命活动受到抑制。甜醋发酵时，发酵液的液面经常观察到一层明显的菌膜，该膜是由醋酸菌繁殖而成的。 （2）在陈醋的酿造过程中，起主导作用的是醋酸菌，成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期氧气、营养物质、pH等环境因素的变化（如pH降低，营养物质缺乏等），使部分乳酸菌的生长繁殖受到抑制，从而淘汰了部分种类乳酸菌。 （3）见题图解读。 22.答案：（1）纤维素酶和果胶酶；植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，纤维素酶和果胶酶可分别催化纤维素和果胶分解，体现了酶的专一性 （2）诱发中间偃麦草的染色体断裂；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法 （3）植物细胞的全能性；待幼苗长壮后再移植到土壤中，提高试管苗的成活率 （4）1、2、4；它们同时具有普通小麦和中间偃麦草的DNA片段；中间偃麦草的原生质体接受紫外线照射后染色体发生断裂，断裂的位置是随机的 解析：（1）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，由于酶的作用具有专一性，过程①需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。 （2）过程②紫外线的作用是诱导中间偃麦草的染色体断裂，从而可以实现将中间偃麦草的耐盐相关基因整合到小麦染色体上，获得耐盐小麦新品种；过程③为促进原生质体融合，通常可采用物理或化学的方法进行诱导，其中采用的化学方法有聚乙二醇（PEG）融合法和高Ca2+—高pH融合法。 （3）过程④为利用植物组织培养技术获得杂种植株的过程，该过程利用的原理是植物细胞的全能性；过程④培养得到的试管苗移栽前先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养箱中生长几日，用流水洗去根部培养基，再移植到消过毒的珍珠岩或蛭石等环境中，这样做的目的是待幼苗长壮后再移植到土壤中，提高试管苗的成活率。 （4）根据题意，杂种植株应同时具有普通小麦和中间偃麦草的DNA片段，根据电泳图谱可知，普通小麦含有300bp和600bp的DNA片段，中间偃麦草含有1000bp、1300bp和1500bp的DNA片段；再生植株3只含有长度为300bp和600bp的DNA片段，与普通小麦一致；再生植株1、2、4既含有普通小麦的DNA片段，又含有中间偃麦草的DNA片段，因此为杂种植株。这些植株电泳图谱不同是因为中间偃麦草接受紫外线照射后染色体发生断裂，断裂的位置是随机的。 23.答案：（1）灭活的病毒；不能 （2）克隆化培养；抗体检测（专一抗体检测）；特异性强、灵敏度高、可大量制备 （3）刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞；2；细胞密度过大 （4）ABCD （5）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞 解析：（1）诱导动物细胞融合的方法有：物理法（电融合、离心）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒），与植物体细胞杂交相比特有的方法是采用灭活的病毒。小鼠B淋巴细胞在HAT培养基上可正常存活，但不能繁殖，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，骨髓瘤细胞与B淋巴细胞之间形成的融合细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖。 （2）为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈阳性的细胞，进行克隆化培养。单克隆抗体具有能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原进行特异性结合，并且可大量制备的优点。 （3）图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞。图1方框内需要经过2次筛选，先筛选得到对长春碱免疫的B淋巴细胞，后筛选出杂交—杂交瘤细胞。 （4）根据题意分析，若图2中双特异性抗体分子是由若干个氨基酸形成的，对各选项叙述分析如下：该特异性抗体可以识别两种抗原——癌胚抗原和长春碱，不识别所有的肿瘤细胞，A错误；不同的抗体在人体内存留的时间长短不同，抗体不一定在人体内持续发挥作用，B错误；该抗体的制备过程用到了动物细胞培养技术和动物细胞融合技术，C错误；双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合，具有特异性，D错误。 （5）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，对人体的副作用更小，这是利用单克隆抗体治疗疾病。 24.答案：（1）调节pH；高压蒸汽灭菌法；固体；异养型 （2）接种样液；划线；无菌水；对照组无菌落生长 （3）①选择具有抗利福平突变的大肠杆菌；②稀释涂布平板；倒置；③一；A、B两组中所有的培养皿中的菌落数没有显著差异；④A5比A4发生突变的时间早，导致具有抗利福平突变的大肠杆菌数比A4多，培养皿中出现的菌落数就多 解析：（2）根据结论“基本排除操作误差对实验结果的影响”反推：本实验目的“排除操作误差的影响”→用无菌水接种和菌液接种进行对照→实验组、对照组应采用同一接种方法，即划线法。 （3）③根据不同假设对结果进行演绎如下： 假设 演绎 A组 B组 假设二：抗性突变发生在接触后 A、B两组大肠杆菌与利福平同时接触，两组结果差异不大 假设一：抗性突变发生在接触前 大肠杆菌在试管内可能已发生抗性突变且突变时间不同； 若某试管突变发生早→繁殖产生的突变细菌多→接种后在平板上形成的菌落多； 不同平板上菌落数目差异明显 大肠杆菌在试管内发生突变，突变细菌在培养液中基本分布均匀； 接种后在不同平板上形成的菌落数目相当 25.答案：（1）耐高温的DNA聚合酶；Mg2+； 5'；SnaB Ⅰ、Avr Ⅱ （2）RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录；构建基因表达载体；DNA连接酶 （3）Bgl Ⅱ；卡那霉素；PCR （4）甲醇 解析：（1）利用PCR技术进行扩增时，反应体系中需要加入模板、四种脱氧核苷酸、引物和耐高温的DNA聚合酶，并且需要在含有Mg2+的缓冲液中进行。对HBsAg基因进行扩增时，需在引物的5'端添加限制酶识别序列。图中质粒含有SnaB Ⅰ、Avr Ⅱ、Bgl Ⅱ和Sac Ⅰ4种限制酶切割位点，其中Sac Ⅰ的切割位点位于启动子上，Bgl Ⅱ的切割位点位于启动子之前和终止子之后，故只能用限制酶SnaB Ⅰ和Avr Ⅱ（识别的序列在启动子与终止子之间）切割质粒，所以应在HBsAg基因两侧的位置接上SnaB Ⅰ、Avr Ⅱ限制酶识别序列，从而使HBsAg基因能正确插到pPIC9K质粒中。 （2）质粒上的启动子作为RNA聚合酶识别和结合的位点，可以驱动基因转录。过程①是HBsAg基因与pPIC9K质粒重组的过程，即构建基因表达载体过程。 （3）重组DNA片段的两侧分别是5'AOX1和3'AOX1，因此过程②是用Bgl Ⅱ来切割重组质粒获得重组DNA片段的。重组DNA片段中含有卡那霉素抗性基因，该基因为标记基因，所以要确定巴斯德毕赤酵母菌是否成功转化，应向培养基中加入卡那霉素进行筛选。检测受体细胞中是否含有目的基因，可用PCR、DNA分子杂交技术等。 学科网（北京）股份有限公司 $