精品解析：甘肃酒泉市玉门一中等校2025-2026学年高二下学期5月阶段检测生物试题

高二生物学 考生注意： 1．本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间75分钟。 2．答题前，考生务必用直径0.5毫米黑色墨水签字笔将密封线内项目填写清楚。 3．考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。 4．本卷命题范围：人教版选择性必修3第1章～第3章第3节。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 腐乳是我国传统的发酵食品，以其独特风味深受人们喜爱。下列有关腐乳制作的叙述，正确的是（ ） A. 经过微生物发酵，豆腐中的蛋白质被分解为小分子肽和甘油，使腐乳味道鲜美 B. 与发酵之前的物料相比，腐乳中的有机物种类和所含能量都有所增加 C. 在腐乳制作过程中，必须要有生产蛋白酶的微生物参与 D. 腐乳发酵过程中仅依靠毛霉一种微生物就能完成，无需其他微生物参与 【答案】C 【解析】 【详解】A、腐乳发酵中，蛋白质被蛋白酶分解为小分子肽和氨基酸，甘油是脂肪分解的产物，A错误； B、发酵过程中微生物呼吸作用消耗有机物，释放能量，因此腐乳中有机物总能量减少，有机物种类增加（大分子分解成若干小分子），B错误； C、豆腐含大量蛋白质，腐乳制作过程需将蛋白质分解，因此必须有能产生蛋白酶的微生物（如毛霉）参与，C正确； D、腐乳发酵过程是毛霉、酵母、曲霉等多种微生物共同作用的结果，D错误。 2. 《齐民要术》记载：“世人云：“米过酒甜＇此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”下列叙述错误的是（　　） A. 米过酒甜是因为米中糖类物质过量，发酵停止时仍未被完全消耗 B. 酿酒过程起泡现象是微生物厌氧呼吸产生的CO2释放形成的 C. “酒冷沸止”说明酵母菌的代谢产热和释放CO2逐渐停止 D. “曲势尽”的原因可能是发酵过程pH值升高或营养物质含量下降 【答案】D 【解析】 【分析】1、利用酵母菌发酵产生酒精的原理酿酒，利用其发酵产生二氧化碳的原理制作面包、馒头。 2、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 【详解】A、酿造米酒的原料富含糖类，米酒过甜是因为米中有糖类物质未被完全消耗，A正确； B、起泡是由于微生物进行呼吸作用产生的CO2释放形成的，酿酒过程主要是无氧呼吸产生，B正确; C、“酒冷沸止”说明酵母菌的代谢产热和释放CO2逐渐停止，由于微生物呼吸作用消耗糖类等有机物，会释放能量，且释放的能量绝大多数以热能的形式散失，导致酒液温度产生变化，C正确; D、微生物无氧呼吸产生的CO2，导致瓮中液体pH值降低，“曲势尽”的原因可能是发酵过程pH值降低或酒液中酒精含量升高，D错误。 故选D。 3. 在抗生素抑菌实验过程中，规格相同的无菌滤纸片a、b、c分别浸有浓度相同的不同抗生素溶液，同规格无菌滤纸片d浸有无菌水，然后放在涂布有大肠杆菌的培养基上，培养数天后结果如图所示。下列说法正确的是（ ） A. a处抑菌效果小于b处 B. b滤纸片没有沥干 C. c处的抑菌效果最明显 D. d处没有大肠杆菌生长 【答案】B 【解析】 【分析】本实验是利用抗生素抑制细菌的生长来检测细菌对各种抗生素的药敏程度，实验结果可通过抑菌圈的大小来确定抗生素的杀菌能力，抑菌圈越大表示杀菌能力越强。d浸有无菌水，是对照组。 【详解】A、对比a与b可知两处的抑菌圈的大小差不多大，说明两处的抑菌效果相似，A错误； B、b处抑菌圈应成圆形，左侧漫延开来了，说明滤纸片没有沥干，B正确； C、c处与d处结果相似，没有抑均圈，说明c处抗生素无效，C错误； D、d处滤纸片浸的是无菌水，没有使用抗生素，有大肠杆菌生长，D错误。 故选B。 4. 某地生活用水中大肠杆菌超标，质检部门对该地水源中大肠杆菌含量进行抽检，所用培养基成分如下表所示（大肠杆菌菌落遇伊红美蓝会呈现金属光泽紫黑色）。下列相关叙述错误的是（ ） 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 伊红美蓝 琼脂 含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL A. 根据用途划分该培养基属于选择培养基 B. 该培养基中的碳源为乳糖、蔗糖、蛋白胨 C. 可根据培养基上的紫黑色菌落数推算出大肠杆菌的数量 D. 若培养基上菌落叠加则说明水源中大肠杆菌含量可能超标 【答案】A 【解析】 【详解】A、从配方表中可看出，该培养基中含有指示剂伊红美蓝，可以用来鉴别微生物，故根据用途划分该培养基属于鉴别培养基，A错误； B、该培养基中的碳源为乳糖、蔗糖和蛋白胨，其中蛋白胨既是碳源也是氮源，B正确； C、在该培养基上生长的大肠杆菌，其菌落颜色为具有金属光泽的紫黑色，可以根据培养基上的紫黑色菌落数推算出大肠杆菌的数量，C正确； D、培养基上菌落叠加可能是大肠杆菌浓度过高导致，则说明水源中大肠杆菌含量可能超标，D正确。 5. 如图为酵母菌纯培养的部分操作过程示意图，下列相关叙述正确的是（ ） A. ②步骤中用接种环蘸取一环菌液后应立即将试管塞上棉塞 B. ①②③步骤的完成均需要在酒精灯火焰附近操作以防止杂菌污染 C. 完成图④，接种环共灼烧4次，而且1区和5区的划线不能相连 D. 将接种后的平板放入28℃左右的恒温培养箱中培养24~48h 【答案】B 【解析】 【详解】A、②步骤接种环蘸取菌液后，应先将试管口通过火焰，再塞上棉塞，A错误； B、①②③步骤的完成均需要在酒精灯火焰附近操作以防止杂菌污染，B正确； C、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，完成图④的过程中，接种环共灼烧了6次，而且不能将1区和5区的划线相连，C错误； D、将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24~48h，D错误。 6. 《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、止泻的功效。樱桃植株中的槲皮素等酚类化合物具有抗氧化活性。为了获得槲皮素（次生代谢物），可以先用植物外植体获得愈伤组织，然后在生物反应器中悬浮培养。下列相关叙述错误的是（　　） A. 樱桃幼嫩的茎段比成年的茎段更容易诱导再分化形成愈伤组织 B. 由愈伤组织获得胚状体的过程是细胞中基因选择性表达的结果 C. 槲皮素并不是樱桃生长所必需的物质，且在樱桃植株中含量较低 D. 反应器中悬浮培养细胞合成槲皮素优于从樱桃树皮中直接提取 【答案】A 【解析】 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、樱桃幼嫩茎的细胞分化程度较低，因此幼嫩茎段比成年老枝更容易诱导脱分化形成愈伤组织，A错误； B、获得愈伤组织的过程为脱分化，由愈伤组织获得胚状体的过程是再分化，是细胞中基因的选择性表达的结果，B正确； C、槲皮素作为樱桃体内的一种次生代谢产物，并不是其生长所必需的，含量较低，C正确； D、与从樱桃树皮中直接提取相比，通过茎段组培获得的愈伤细胞悬浮培养生产槲皮素的优点是可以在生物反应器中大规模培养细胞，并且通过控制培养条件使培养细胞合成大量槲皮素，D正确。 故选A。 7. 人参是重要的药用植物，常以根入药，由于过度采挖导致野生人参资源枯竭，而人参的人工栽培周期较长，研究表明，可采用植物组织培养的方式获得人参植株，用于满足市场需求。下列相关叙述正确的是（　　） A. 同一株人参不同根细胞经培养获得的新的人参植株的基因型均不同 B. 生长素/细胞分裂素的比值＞1时，有利于芽的分化，抑制根的形成 C. 从人参植株上取下的组织可直接接种于固体培养基上进行组织培养 D. 试管苗可先在消过毒的珍珠岩等环境中生长一段时间后再进行移植 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织)，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。 【详解】A、同一株人参不同根细胞中具有发育成完整植株的全套遗传信息，同一株人参不同根细胞经培养获得的新的人参植株的基因型相同，A错误； B、生长素的用量比细胞分裂素用量的比值高时，有利于根的分化，抑制芽的形成，B错误； C、外植体需经过消毒后才能接种到培养基上，C错误； D、试管苗可先在消过毒的珍珠岩等环境中生长一段时间，待其长壮后再进行移植，D正确。 故选D。 8. 细胞悬浮培养是指通过振荡或转动装置使细胞在培养液内始终处于分散悬浮状态。下列叙述错误的是（ ） A. 原代培养时，悬浮细胞培养的气体环境为95%的空气和5%的CO2 B. 细胞悬浮培养与传代培养可使细胞更充分地接触氧气和养料 C. 为使悬浮细胞正常生长与分裂，培养基须保持适当的温度、pH和渗透压 D. 培养过程中分裂期的细胞同源染色体联会后分离，染色体平均分配 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞原代培养时，所需气体环境为95%空气（满足细胞有氧呼吸需求）+5%CO2（维持培养液pH），A正确； B、悬浮培养使细胞始终保持分散悬浮状态，能让细胞更充分接触培养液中的氧气和营养物质，B正确； C、细胞正常生长分裂需要适宜的外界条件，培养基必须维持合适的温度、pH和渗透压，否则细胞无法正常代谢，C正确； D、同源染色体联会、分离是减数分裂的特有行为，细胞悬浮培养过程中进行有丝分裂，不会出现该行为，D错误。 9. 体细胞在一定条件下经培养可得到重编程干细胞。在培养液中加入特定分化诱导因子后，重编程干细胞可分化产生神经干细胞，用于治疗缺血性中风。下列叙述正确的是（ ） A. 已分化细胞可在体外被诱导成为一种类似于胚胎干细胞的细胞 B. 利用神经干细胞成功诱导产生神经细胞，体现了细胞的全能性 C. 与神经细胞相比，重编程干细胞的分化程度更高且全能性更低 D. 重编程干细胞分化产生神经干细胞的过程中遗传物质发生了改变 【答案】A 【解析】 【详解】A、已分化细胞如成纤维细胞，可在体外被诱导成为一种类似于胚胎干细胞的细胞，A正确； B、利用神经干细胞成功诱导产生神经细胞，但没有发育为完整个体，不能体现细胞的全能性，B错误； C、重编程干细胞可分化产生神经干细胞，因此与神经细胞相比，其分化程度更低，全能性更高，C错误； D、重编程干细胞分化产生神经干细胞过程中遗传物质没有发生改变，细胞分化的实质是基因的选择性表达，导致细胞形态、结构改变，D错误。 故选A。 10. 科学家在制备原生质体时，有时使用蜗牛消化道提取液来降解植物细胞的细胞壁。下列叙述正确的是（　　） A. 推测蜗牛的消化道提取液中含有胰蛋白酶 B. 应在低渗溶液中进行植物原生质体的制备 C. 可利用灭活病毒诱导法诱导原生质体间的融合 D. 融合后得到的杂种细胞经诱导可形成愈伤组织 【答案】D 【解析】 【分析】原生质体是指植物细胞去除细胞壁之后的结构，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，通常采用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体。 【详解】A、纤维素酶和果胶酶能分解细胞壁，推测蜗牛的消化道提取液中含有纤维素酶和果胶酶，A错误； B、制备原生质体时应在等渗溶液或略高渗溶液中进行操作，B错误； C、灭活病毒诱导法用于诱导动物细胞间的融合，诱导植物原生质体融合一般不采用该方法，C错误； D、合后得到的杂种细胞经诱导可脱分化形成愈伤组织，D正确。 故选D。 11. 大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较低，数量仍然非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫，基本过程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. ①过程只能通过显微操作的方法去除细胞核 B. ③过程获得重构胚后可用胰蛋白酶将其激活 C. ④过程表示早期胚胎发育，并未经历原肠胚阶段 D. 丁的遗传物质全部来自乙，性状也与乙完全一致 【答案】C 【解析】 【详解】A、体细胞核移植过程中普遍采用的是显微操作方法去除细胞核，也可采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法去核，A错误； B、③过程获得重构胚后可用乙醇和蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，而不是用胰蛋白酶激活重构胚，B错误； C、胚胎移植通常选择的是发育至桑葚胚或囊胚阶段的胚胎，④过程表示早期胚胎培养，依次经历了桑葚胚和囊胚阶段，并未经历原肠胚阶段，C正确； D、丁为克隆熊猫，其核遗传物质来自乙，质遗传物质来自甲，性状与乙不完全一致，D错误。 故选C。 12. 下图为科研人员对获取的人精子和卵子进行的部分处理，下列叙述错误的是（ ） A. 为获得更多的卵子可对女性注射促性腺激素 B. 精子和卵子完成受精的标志是细胞膜的融合 C. ①中进行基因检测可以预测某些疾病的发病风险 D. ②中冷冻保存可以用来保存青年夫妇的生殖能力 【答案】B 【解析】 【分析】1、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始； 2、受精作用完成的标志：在卵细胞膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体（一个是第一极体，还有一个是第二极体）。 【详解】A、为获得更多的卵子可对女性注射促性腺激素，A正确； B、完成受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，B错误； C、对早期胚胎的细胞进行基因检测，可以预测某些疾病的发病风险，C正确； D、对早期胚胎进行冷冻保存，可以用来保存青年夫妇的生殖能力，D正确。 故选B。 13. 与胚胎工程中的其他技术相比，胚胎移植已经是较为成熟的技术。下列有关胚胎移植技术的叙述，错误的是（ ） A. 对供体、受体母畜用相关激素进行同期发情处理 B. 冲卵的目的是把供体母畜子宫内的胚胎冲洗出来 C. 胚胎发育成桑葚胚、囊胚或原肠胚阶段进行移植 D. 胚胎分割的关键操作是对囊胚的内细胞团均等分割 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术．胚胎移植的基本程序：对供体和受体的选择和处理（同期发情处理，超数排卵处理）、配种或进行人工授精、对胚胎的收集检查培养或保存、进行胚胎移植。 【详解】A、对供体、受体母畜用孕激素进行同期发情处理，便于受体母畜的生理状态与供体母畜保持一致，A正确； B、冲卵的目的是把供体母畜子宫内的胚胎冲洗出来，进行下一步的胚胎移植，B正确； C、胚胎发育成桑葚胚、囊胚胚阶段进行移植，原肠胚细胞已经分化，不再适合移植，C错误； D、胚胎分割的最关键操作是对囊胚的内细胞团均等分割，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步的发育，D正确。 故选C。 【点睛】 14. BamHⅠ和BclⅠ是两种限制性内切核酸酶，其识别序列及切割位点如下表所示。下列相关叙述错误的是（　　） 限制酶 BamHI BclI 识别序列及切割位点 A. 限制性内切核酸酶主要是从原核生物中分离得到 B. 限制性内切核酸酶能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列 C. 分别被BamHⅠ和BclⅠ切割后产生的DNA片段能互补配对 D. 若某链状DNA分子有两个BclⅠ识别位点，则被其切割后会产生2个DNA 片段 【答案】D 【解析】 【分析】限制酶主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。 【详解】A、限制性内切核酸酶主要是从原核生物中分离得到，A正确； B、限制性内切核酸酶能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，B正确； C、据表分析可知，两种酶切割后产生的黏性末端相同，故分别被BamHⅠ和BclⅠ切割后产生的DNA片段能互补配对，C正确； D、若某链状DNA分子有两个BclⅠ识别位点，则被其切割后会产生3个DNA片段，D错误。 故选D。 15. DNA聚合酶与DNA连接酶都能够对DNA进行连接。下列关于两种酶的比较，叙述错误的是（ ） A. 两种酶的作用对象都是磷酸二酯键 B. 两种酶均能对DNA片段进行连接 C. DNA连接酶可以连接黏性末端和平末端 D. DNA聚合酶主要在DNA复制过程中起作用 【答案】B 【解析】 【详解】A、两种酶的作用对象都是磷酸二酯键，二者都可以催化磷酸二酯键的形成，A正确； BD、DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸链，通常在DNA复制过程中起作用，DNA连接酶连接两个DNA片段，B错误，D正确； C、DNA连接酶可以连接限制酶产生的黏性末端和平末端，C正确。 故选B。 16. 下列关于“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 酒精预冷处理可防止DNA被降解，且DNA更易析出 B. 提取植物细胞中的DNA，幼嫩部位比衰老部位更易提取出DNA C. 室温环境下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色，可以用于鉴定DNA D. 粗提取得到的DNA白色丝状物可用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌卷起 【答案】C 【解析】 【分析】1、DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。 2、DNA粗提取与鉴定的实验中，不同操作步骤中加水的作用不同，破碎细胞获取含DNA的滤液时加蒸馏水的目的是使血细胞涨破；出去滤液中的杂质时，加蒸馏水的目的是降低NaCl溶液浓度使DNA析出。 【详解】A、酒精预冷处理的优点：抑制核酸水解酶的活性，防止DNA 降解；降低分子运动，易于形成沉淀析出；低温有利于增加DNA分子的柔韧性，减少断裂。酒精预冷处理可以使DNA更易析出，A正确； B、提取植物细胞中的DNA需要先研磨破坏细胞结构，研磨过滤后从滤液中分离提取DNA，幼嫩细胞结构更易被破坏，B正确； C、DNA遇二苯胺试剂在水浴加热的条件下会呈现蓝色，C错误； D、粗提取得到的DNA白色丝状物可用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌卷起，防止DNA断裂，D正确。 故选C。 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17. 泡菜在我国已有数千年历史，白萝卜、红萝卜、小黄瓜等均可作为泡菜的原料，经发酵后在口感上比新鲜蔬菜更爽脆，既好吃，又助消化。为提高泡菜品质，某兴趣小组选取了多个不同的乳酸菌菌种和萝卜切条分别进行发酵实验，实验结果绘制曲线如图。回答下列问题： （1）小强同学第一次尝试做泡菜时将煮沸后还未放凉的泡菜盐水倒进已装好干净蔬菜的坛中，此举存在不当之处，原因是____，请你根据泡菜的发酵原理给小强提出简单有效的补救措施____。 （2）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的数量变化分别是____，原因是____。若在适宜温度下，制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是____。 （3）从实验结果分析，图中适合泡菜发酵的菌种为____，依据是____。 【答案】（1） ①. 高温会杀死蔬菜表面的乳酸菌 ②. 等泡菜水放凉后添加陈泡菜水（或乳酸菌） （2） ①. 乳酸菌数量增加，杂菌数量减少 ②. 乳酸菌比杂菌更耐酸 ③. 盐过多，抑制了乳酸菌的发酵 （3） ①. 菌种2 ②. 与其他菌种及对照组相比，该菌种发酵过程中pH最低，说明产生的乳酸最多，另外亚硝酸盐含量最低 【解析】 【分析】制作泡菜的原理是：乳酸菌在无氧条件下，将葡萄糖分解为乳酸。制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的。发酵期间，乳酸会不断积累，当它的质量百分比为0.4%～0.8%时，泡菜的口味、品质最佳。泡菜在腌制过程中会有亚硝酸盐的产生，如果人体摄入亚硝酸盐过量，会发生中毒，甚至死亡。 【小问1详解】 与泡菜制作有关的微生物是乳酸菌。做泡菜时将煮沸后还未放凉的泡菜盐水倒进已装好干净蔬菜的坛中，由于盐水温度高，会杀死蔬菜表面的乳酸菌，所以此举存在不当之处。若要采取简单有效的补救措施，可以等泡菜水放凉后添加陈泡菜水，以提供乳酸菌菌种，也可以直接添加乳酸菌。 【小问2详解】 从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，乳酸菌无氧呼吸产生的乳酸不断积累，泡菜液逐渐变酸，由于乳酸菌比杂菌更耐酸，所以这段时间内，泡菜坛中乳酸菌的数量增加，杂菌数量减少。制作泡菜，需要用清水与食盐配制盐水，若用的盐过多，会抑制乳酸菌的发酵，导致在适宜温度下，制作的泡菜“咸而不酸”。 【小问3详解】 分析题图可知：与其他菌种及对照组相比，使用菌种2的发酵过程中，pH最低，说明产生的乳酸最多，另外亚硝酸盐的含量也最低，说明图中适合泡菜发酵的菌种为菌种2。 18. 苯酚（C6H6O）是重要的化工原料，被广泛应用工业生产中，易形成污染，具有致癌、致畸和致突变作用。苯酚降解菌能分解工业废水中的苯酚。自然界中能分解苯酚的微生物有几百种，多为细菌、放线菌等。分离和纯化高效降解苯酚的微生物的实验流程如图所示： 请回答下列问题： （1）在制作苯酚降解菌的富集培养基和平板分离培养基时，培养基中应以______为唯一碳源，后者除基本营养成分外，还应添加______（物质），然后用____________（方法）对培养基进行灭菌。 （2）用平板划线法分离得到的单个菌落大小、颜色、隆起度等不完全一致的原因是__________________。 （3）对分离得到的某株苯酚降解菌进行菌株生长及苯酚降解实验，结果如图所示。实验结果表明此菌株适于降解的苯酚浓度为____g/L，判断依据是_____________。 【答案】 ①. 苯酚 ②. 琼脂 ③. 高压蒸汽灭菌 ④. 工业废水中能降解苯酚的微生物有多种，不同种类的微生物在平板上形成的菌落特征不同 ⑤. 1.0 ⑥. 此苯酚浓度下菌体繁殖快（或菌体数量最多），且苯酚的降解率高 【解析】 【分析】1、干热灭菌法：是利用干热空气或火焰使细菌的原生质凝固，并使细菌的酶系统破坏而杀死细菌的方法。多用于容器及用具的灭菌.适用于耐高温的玻璃、金属等用具。 2、高压蒸汽灭菌法：系指在密闭的高压蒸汽灭菌器内，利用压力大于常压的饱和水蒸气来杀灭微生物的方法。具有灭菌完全可靠、效果好、时间短、易于控制等优点，能杀灭所有繁殖体和芽孢。 【详解】（1）本实验的目的是筛选能降解苯酚的微生物，故在配置相应的培养基时，应该以苯酚为唯一碳源，制作成选择培养基，才可达到筛选的目的。而平板分离培养基与富集培养基相比，平板分离培养基是在培养皿上分离微生物，得到单菌落，故应制成固体培养基，应再添加凝固剂琼脂成分，制作好的培养基采用高压蒸汽灭菌法灭菌。 （2）因为降解苯酚的微生物有几百种，不同种的微生物形成的单菌落在形态大小、颜色、隆起程度上会有差异。 （3）从曲线图分析可知，在苯酚浓度为1g/L时，菌株的数量是最多的，苯酚降解率达100%，表明此浓度下该菌株的繁殖能力强，且降解苯酚能力也很强。 【点睛】本题考查了微生物分离与培养的有关知识，在平时学习中要注意积累。 19. 如图为制备单克隆抗体的两种方式，回答下列问题： （1）淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜_____。融合后的细胞具有的特点是_____。 （2）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有这两种合成DNA的途径，但一般不分裂增殖；鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞放在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请设计一种方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂交瘤细胞：_____。 （3）杂交瘤细胞繁殖进行的是_____分裂，其遗传性状_____。 （4）杂交瘤细胞体外培养所用的培养基与植物组织培养所用的培养基相比，主要有何不同？_____。 （5）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞等）并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了_____。 （6）在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的_____和_____两大技术。 【答案】（1） ①. 具有一定的流动性 ②. 具有无限增殖能力，能产生特异性抗体 （2）在培养液中加入氨基蝶呤，收集增殖的细胞 （3） ①. 有丝 ②. 保持不变（稳定） （4）动物细胞培养用的是液体培养基，且其中含有动物血清 （5）抗原与抗体之间结合的高度特异性 （6） ①. 动物细胞融合 ②. 动物细胞培养 【解析】 【分析】单克隆抗体制备 1、核心原理：将能产生特异性抗体的 B 淋巴细胞（不能无限增殖）与能无限增殖的骨髓瘤细胞融合，获得 “既能无限增殖，又能产生专一抗体” 的杂交瘤细胞。 2、关键步骤（对应题目流程） 免疫动物：给动物注射特定抗原，诱导产生能分泌对应抗体的 B 淋巴细胞； 细胞融合：用聚乙二醇（PEG）诱导 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细胞（依赖细胞膜的流动性）； 筛选与克隆： 第一次筛选：用选择培养基（如题目中的 “氨基蝶呤”）筛选出杂交瘤细胞； 第二次筛选：克隆化培养 + 抗体检测，筛选出能分泌所需专一抗体的杂交瘤细胞； 抗体生产： 体外培养：杂交瘤细胞→培养液→提取单克隆抗体； 体内培养：杂交瘤细胞注射到动物腹腔→腹水→提取单克隆抗体。 3、杂交瘤细胞的特点 同时具备 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞的优势：无限增殖能力 + 分泌特异性抗体的能力。 【小问1详解】 细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性；杂交瘤细胞的特点是具有无限增殖能力，能产生特异性抗体。 【小问2详解】 为了筛选出杂交瘤细胞，除去其他细胞，可向培养液中加入氨基蝶呤，使D合成途径阻断，仅有该合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的瘤细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖，收集的细胞为杂交瘤细胞。 【小问3详解】 杂交瘤细胞繁殖进行的是有丝分裂，其遗传性状保持不变。 【小问4详解】 动物细胞培养用的是液体培养基，且其中含有动物血清；植物组织培养过程中的培养基是固体培养基，而且含有生长素和细胞分裂素。 【小问5详解】 单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了抗原与抗体之间结合的高度特异性。 【小问6详解】 在单克隆抗体制备过程中用到了细胞工程的细胞融合（杂交瘤细胞的形成）与细胞培养。 20. 人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得，具体操作流程如下图所示： 回答下列问题： （1）从良种母羊体内的输卵管采集的卵母细胞处于__________期，此时采集的卵母细胞______（填“能”或“不能”）直接与获能的精子在体外受精。防止多精入卵受精的两道屏障是_____________。 （2）为了使htPA基因顺利在羊的乳腺细胞中表达，要将htPA基因与___________________等调控组件重组在一起，通过_____________法导入羊的受精卵，然后将受精卵移入发育培养液中培养，为防止杂菌污染，培养液中需要加入_____________。 （3）受精卵经过卵裂可以发育成早期胚胎，在胚胎发育的____________阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能。 （4）为获得高产奶雌羊，在胚胎移植过程中，需对早期胚胎的性别进行鉴定，应取囊胚的__________细胞做DNA分析性别鉴定。将经过性别鉴定的早期胚胎置入代孕母羊子宫之前需对其做____________处理，这就为早期胚胎移入代孕母羊体内提供了相同的生理环境。 【答案】 ①. 减数第二次分裂中 ②. 能 ③. 透明带反应、卵细胞膜反应 ④. 乳腺蛋白基因的启动子 ⑤. 显微注射 ⑥. 抗生素 ⑦. 桑椹胚 ⑧. 滋养层 ⑨. 同期发情 【解析】 【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔[细胞分化在胚胎期达到最大限度]。 【详解】（1）从良种母羊体内的输卵管采集的卵母细胞处于减数第二次分裂中期，具备受精能力，所以此时采集的卵母细胞能直接与获能的精子在体外受精。防止多精入卵受精的两道屏障是透明带反应、卵细胞膜反应。 （2）特定的启动子能够启动基因在特定细胞内的转录过程，所以为了使htPA基因顺利在羊的乳腺细胞中表达，要将htPA基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起。将基因表达载体导入动物细胞常用显微注射法。早期胚胎培养过程中，为防止杂菌污染，培养液中需要加入抗生素。 （3）受精卵经过卵裂可以发育成早期胚胎，在胚胎发育的桑椹胚阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，囊胚期开始出现细胞分化。 （4）囊胚期的滋养层细胞可发育为胎盘和胎膜，内细胞团可发育为胎儿的各种组织和器官，对早期胚胎做DNA分析性别鉴定时，可取囊胚期的滋养层细胞，这样不会影响胎儿的正常发育。胚胎移植前需要对受体进行同期发情处理，目的是为早期胚胎移入代孕母羊体内提供了相同的生理环境。 【点睛】本题综合考查了基因工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的步骤、早期胚胎培养的条件和胚胎移植的步骤，能利用所学知识解决问题。 21. 科学家从某细菌中提取抗病基因并转入番茄，来培育转基因抗病番茄植株，过程如图所示。含目的基因的外源DNA上的箭头表示相关限制酶的切割位点。回答下列问题： （1）以含目的基因（抗病基因）的外源DNA为模板进行PCR获取抗病基因时，除加入引物、模板、缓冲液、Mg2+外，还需加入________等（答两点）；缓冲液中Mg2+的作用是________。应设计2种引物，原因是________。 （2）已知抗病蛋白基因转录得到的mRNA前三个碱基为起始密码子AUG。研究发现在紧邻起始密码子前加入5′-GCCACC-3′序列，会显著提高基因的表达效率。利用PCR技术获取抗病蛋白基因时，为保证抗病基因能正确插入Ti质粒且高效表达，需在上游的引物的5′端增加碱基序列5′-________-3′（写出12个碱基），据图可知，应选用________处理Ti质粒。 （3）图中步骤③是将含重组Ti质粒的农杆菌导入番茄细胞，实现该目的的基础是农杆菌侵染植物细胞后，能将________，步骤④是________过程。 （4）欲鉴定经过步骤④获得的转基因番茄植株是否具有抗病性，进行个体检测和鉴定的方法是：________。 【答案】（1） ①. 耐高温的DNA聚合酶、4种脱氧核苷酸 ②. 激活耐高温的DNA聚合酶 ③. DNA分子的两条链反向平行，DNA聚合酶只能从一（3’）端延伸DNA链，因此要用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增 （2） ①. GTCGACGCCACC ②. XhoⅠ和MunⅠ （3） ①. Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的细胞，并将其整合到该细胞的染色体DNA ②. 再分化 （4）将该番茄种植于易感病毒环境中，观察其对病毒抗性及抗性程度 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 以含目的基因（抗病基因）的外源DNA进行PCR以获取抗病基因时，除加入引物、模板、缓冲液、Mg2+外，还需加入耐高温的DNA聚合酶、4种脱氧核苷酸等；缓冲液中Mg2+的作用是激活耐高温的DNA聚合酶。应设计2种引物，其原因是DNA分子的两条链反向平行，DNA聚合酶只能从一端（3’端）延伸DNA链，因此要用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增。 【小问2详解】 分析题图可知，在Ti质粒的T-DNA区域的启动子和终止子之间含有XhoⅠ、MunⅠ、SalⅠ三种限制酶识别位点，抗病基因两侧含有XhoⅠ、EcoRⅠ、MunⅠ、SalⅠ四种限制酶识别位点，但MunⅠ会破坏抗病基因。根据题图给出的限制酶识别序列和切割位点可知，MunⅠ和EcoRⅠ能切出相同的黏性末端，XhoⅠ和SalⅠ能切出相同的黏性末端。综合题干抗病基因的方向以及启动子和终止子的方向考虑，为保证抗病基因能正确插入Ti质粒且高效表达，需要用SalⅠ和EcoRⅠ分别切割抗病基因的上游和下游，用XhoⅠ和MunⅠ切割质粒。已知抗病蛋白基因转录得到的mRNA前三个碱基为起始密码子AUG。研究发现在紧邻起始密码子前加入5′-GCCACC-3′序列，会显著提高基因的表达效率。需在上游的引物的5′端增加碱基序列5′-GTCGACGCCACC-3′。 【小问3详解】 图中步骤③是将含重组Ti质粒的农杆菌导入番茄细胞，实现该目的的基础是农杆菌侵染植物细胞后，Ti质粒上的T-DNA能转移到被侵染的细胞，并将其整合到该细胞的染色体DNA上。步骤④是植物组织培养中的再分化过程。 【小问4详解】 欲鉴定经过步骤④获得的转基因番茄植株是否具有抗病性，可通过分子水平、个体生物学水平进行检测与鉴定。分子水平上可通过PCR等技术检测番茄细胞的染色体DNA上是否插入了抗病基因或检测抗病基因是否转录出了相应mRNA，也可以从转基因番茄中提取出蛋白质，用相应的抗体进行抗原一抗体杂交，检测抗病基因是否翻译出相应的抗性蛋白。个体生物学水平上，可将该番茄种植于易感病毒环境中，看其对病毒抗性及抗性程度。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物学 考生注意： 1．本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间75分钟。 2．答题前，考生务必用直径0.5毫米黑色墨水签字笔将密封线内项目填写清楚。 3．考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。 4．本卷命题范围：人教版选择性必修3第1章～第3章第3节。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 腐乳是我国传统的发酵食品，以其独特风味深受人们喜爱。下列有关腐乳制作的叙述，正确的是（ ） A. 经过微生物发酵，豆腐中的蛋白质被分解为小分子肽和甘油，使腐乳味道鲜美 B. 与发酵之前的物料相比，腐乳中的有机物种类和所含能量都有所增加 C. 在腐乳制作过程中，必须要有生产蛋白酶的微生物参与 D. 腐乳发酵过程中仅依靠毛霉一种微生物就能完成，无需其他微生物参与 2. 《齐民要术》记载：“世人云：“米过酒甜＇此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”下列叙述错误的是（　　） A. 米过酒甜是因为米中糖类物质过量，发酵停止时仍未被完全消耗 B. 酿酒过程起泡现象是微生物厌氧呼吸产生的CO2释放形成的 C. “酒冷沸止”说明酵母菌的代谢产热和释放CO2逐渐停止 D. “曲势尽”的原因可能是发酵过程pH值升高或营养物质含量下降 3. 在抗生素抑菌实验过程中，规格相同的无菌滤纸片a、b、c分别浸有浓度相同的不同抗生素溶液，同规格无菌滤纸片d浸有无菌水，然后放在涂布有大肠杆菌的培养基上，培养数天后结果如图所示。下列说法正确的是（ ） A. a处抑菌效果小于b处 B. b滤纸片没有沥干 C. c处的抑菌效果最明显 D. d处没有大肠杆菌生长 4. 某地生活用水中大肠杆菌超标，质检部门对该地水源中大肠杆菌含量进行抽检，所用培养基成分如下表所示（大肠杆菌菌落遇伊红美蓝会呈现金属光泽紫黑色）。下列相关叙述错误的是（ ） 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 伊红美蓝 琼脂 含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL A. 根据用途划分该培养基属于选择培养基 B. 该培养基中的碳源为乳糖、蔗糖、蛋白胨 C. 可根据培养基上的紫黑色菌落数推算出大肠杆菌的数量 D. 若培养基上菌落叠加则说明水源中大肠杆菌含量可能超标 5. 如图为酵母菌纯培养的部分操作过程示意图，下列相关叙述正确的是（ ） A. ②步骤中用接种环蘸取一环菌液后应立即将试管塞上棉塞 B. ①②③步骤的完成均需要在酒精灯火焰附近操作以防止杂菌污染 C. 完成图④，接种环共灼烧4次，而且1区和5区的划线不能相连 D. 将接种后的平板放入28℃左右的恒温培养箱中培养24~48h 6. 《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、止泻的功效。樱桃植株中的槲皮素等酚类化合物具有抗氧化活性。为了获得槲皮素（次生代谢物），可以先用植物外植体获得愈伤组织，然后在生物反应器中悬浮培养。下列相关叙述错误的是（　　） A. 樱桃幼嫩的茎段比成年的茎段更容易诱导再分化形成愈伤组织 B. 由愈伤组织获得胚状体的过程是细胞中基因选择性表达的结果 C. 槲皮素并不是樱桃生长所必需的物质，且在樱桃植株中含量较低 D. 反应器中悬浮培养细胞合成槲皮素优于从樱桃树皮中直接提取 7. 人参是重要的药用植物，常以根入药，由于过度采挖导致野生人参资源枯竭，而人参的人工栽培周期较长，研究表明，可采用植物组织培养的方式获得人参植株，用于满足市场需求。下列相关叙述正确的是（　　） A. 同一株人参不同根细胞经培养获得的新的人参植株的基因型均不同 B. 生长素/细胞分裂素的比值＞1时，有利于芽的分化，抑制根的形成 C. 从人参植株上取下的组织可直接接种于固体培养基上进行组织培养 D. 试管苗可先在消过毒的珍珠岩等环境中生长一段时间后再进行移植 8. 细胞悬浮培养是指通过振荡或转动装置使细胞在培养液内始终处于分散悬浮状态。下列叙述错误的是（ ） A. 原代培养时，悬浮细胞培养的气体环境为95%的空气和5%的CO2 B. 细胞悬浮培养与传代培养可使细胞更充分地接触氧气和养料 C. 为使悬浮细胞正常生长与分裂，培养基须保持适当的温度、pH和渗透压 D. 培养过程中分裂期的细胞同源染色体联会后分离，染色体平均分配 9. 体细胞在一定条件下经培养可得到重编程干细胞。在培养液中加入特定分化诱导因子后，重编程干细胞可分化产生神经干细胞，用于治疗缺血性中风。下列叙述正确的是（ ） A. 已分化细胞可在体外被诱导成为一种类似于胚胎干细胞的细胞 B. 利用神经干细胞成功诱导产生神经细胞，体现了细胞的全能性 C. 与神经细胞相比，重编程干细胞的分化程度更高且全能性更低 D. 重编程干细胞分化产生神经干细胞的过程中遗传物质发生了改变 10. 科学家在制备原生质体时，有时使用蜗牛消化道提取液来降解植物细胞的细胞壁。下列叙述正确的是（　　） A. 推测蜗牛的消化道提取液中含有胰蛋白酶 B. 应在低渗溶液中进行植物原生质体的制备 C. 可利用灭活病毒诱导法诱导原生质体间的融合 D. 融合后得到的杂种细胞经诱导可形成愈伤组织 11. 大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较低，数量仍然非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫，基本过程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. ①过程只能通过显微操作的方法去除细胞核 B. ③过程获得重构胚后可用胰蛋白酶将其激活 C. ④过程表示早期胚胎发育，并未经历原肠胚阶段 D. 丁的遗传物质全部来自乙，性状也与乙完全一致 12. 下图为科研人员对获取的人精子和卵子进行的部分处理，下列叙述错误的是（ ） A. 为获得更多的卵子可对女性注射促性腺激素 B. 精子和卵子完成受精的标志是细胞膜的融合 C. ①中进行基因检测可以预测某些疾病的发病风险 D. ②中冷冻保存可以用来保存青年夫妇的生殖能力 13. 与胚胎工程中的其他技术相比，胚胎移植已经是较为成熟的技术。下列有关胚胎移植技术的叙述，错误的是（ ） A. 对供体、受体母畜用相关激素进行同期发情处理 B. 冲卵的目的是把供体母畜子宫内的胚胎冲洗出来 C. 胚胎发育成桑葚胚、囊胚或原肠胚阶段进行移植 D. 胚胎分割的关键操作是对囊胚的内细胞团均等分割 14. BamHⅠ和BclⅠ是两种限制性内切核酸酶，其识别序列及切割位点如下表所示。下列相关叙述错误的是（　　） 限制酶 BamHI BclI 识别序列及切割位点 A. 限制性内切核酸酶主要是从原核生物中分离得到 B. 限制性内切核酸酶能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列 C. 分别被BamHⅠ和BclⅠ切割后产生的DNA片段能互补配对 D. 若某链状DNA分子有两个BclⅠ识别位点，则被其切割后会产生2个DNA 片段 15. DNA聚合酶与DNA连接酶都能够对DNA进行连接。下列关于两种酶的比较，叙述错误的是（ ） A. 两种酶的作用对象都是磷酸二酯键 B. 两种酶均能对DNA片段进行连接 C. DNA连接酶可以连接黏性末端和平末端 D. DNA聚合酶主要在DNA复制过程中起作用 16. 下列关于“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 酒精预冷处理可防止DNA被降解，且DNA更易析出 B. 提取植物细胞中的DNA，幼嫩部位比衰老部位更易提取出DNA C. 室温环境下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色，可以用于鉴定DNA D. 粗提取得到的DNA白色丝状物可用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌卷起 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17. 泡菜在我国已有数千年历史，白萝卜、红萝卜、小黄瓜等均可作为泡菜的原料，经发酵后在口感上比新鲜蔬菜更爽脆，既好吃，又助消化。为提高泡菜品质，某兴趣小组选取了多个不同的乳酸菌菌种和萝卜切条分别进行发酵实验，实验结果绘制曲线如图。回答下列问题： （1）小强同学第一次尝试做泡菜时将煮沸后还未放凉的泡菜盐水倒进已装好干净蔬菜的坛中，此举存在不当之处，原因是____，请你根据泡菜的发酵原理给小强提出简单有效的补救措施____。 （2）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的数量变化分别是____，原因是____。若在适宜温度下，制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是____。 （3）从实验结果分析，图中适合泡菜发酵的菌种为____，依据是____。 18. 苯酚（C6H6O）是重要的化工原料，被广泛应用工业生产中，易形成污染，具有致癌、致畸和致突变作用。苯酚降解菌能分解工业废水中的苯酚。自然界中能分解苯酚的微生物有几百种，多为细菌、放线菌等。分离和纯化高效降解苯酚的微生物的实验流程如图所示： 请回答下列问题： （1）在制作苯酚降解菌的富集培养基和平板分离培养基时，培养基中应以______为唯一碳源，后者除基本营养成分外，还应添加______（物质），然后用____________（方法）对培养基进行灭菌。 （2）用平板划线法分离得到的单个菌落大小、颜色、隆起度等不完全一致的原因是__________________。 （3）对分离得到的某株苯酚降解菌进行菌株生长及苯酚降解实验，结果如图所示。实验结果表明此菌株适于降解的苯酚浓度为____g/L，判断依据是_____________。 19. 如图为制备单克隆抗体的两种方式，回答下列问题： （1）淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜_____。融合后的细胞具有的特点是_____。 （2）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有这两种合成DNA的途径，但一般不分裂增殖；鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞放在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请设计一种方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂交瘤细胞：_____。 （3）杂交瘤细胞繁殖进行的是_____分裂，其遗传性状_____。 （4）杂交瘤细胞体外培养所用的培养基与植物组织培养所用的培养基相比，主要有何不同？_____。 （5）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞等）并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了_____。 （6）在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的_____和_____两大技术。 20. 人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得，具体操作流程如下图所示： 回答下列问题： （1）从良种母羊体内的输卵管采集的卵母细胞处于__________期，此时采集的卵母细胞______（填“能”或“不能”）直接与获能的精子在体外受精。防止多精入卵受精的两道屏障是_____________。 （2）为了使htPA基因顺利在羊的乳腺细胞中表达，要将htPA基因与___________________等调控组件重组在一起，通过_____________法导入羊的受精卵，然后将受精卵移入发育培养液中培养，为防止杂菌污染，培养液中需要加入_____________。 （3）受精卵经过卵裂可以发育成早期胚胎，在胚胎发育的____________阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能。 （4）为获得高产奶雌羊，在胚胎移植过程中，需对早期胚胎的性别进行鉴定，应取囊胚的__________细胞做DNA分析性别鉴定。将经过性别鉴定的早期胚胎置入代孕母羊子宫之前需对其做____________处理，这就为早期胚胎移入代孕母羊体内提供了相同的生理环境。 21. 科学家从某细菌中提取抗病基因并转入番茄，来培育转基因抗病番茄植株，过程如图所示。含目的基因的外源DNA上的箭头表示相关限制酶的切割位点。回答下列问题： （1）以含目的基因（抗病基因）的外源DNA为模板进行PCR获取抗病基因时，除加入引物、模板、缓冲液、Mg2+外，还需加入________等（答两点）；缓冲液中Mg2+的作用是________。应设计2种引物，原因是________。 （2）已知抗病蛋白基因转录得到的mRNA前三个碱基为起始密码子AUG。研究发现在紧邻起始密码子前加入5′-GCCACC-3′序列，会显著提高基因的表达效率。利用PCR技术获取抗病蛋白基因时，为保证抗病基因能正确插入Ti质粒且高效表达，需在上游的引物的5′端增加碱基序列5′-________-3′（写出12个碱基），据图可知，应选用________处理Ti质粒。 （3）图中步骤③是将含重组Ti质粒的农杆菌导入番茄细胞，实现该目的的基础是农杆菌侵染植物细胞后，能将________，步骤④是________过程。 （4）欲鉴定经过步骤④获得的转基因番茄植株是否具有抗病性，进行个体检测和鉴定的方法是：________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $