北京市北京中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

**基本信息** 2025-2026高二生物质量检测卷以现代生物科技为情境，整合基因工程、细胞工程等核心知识，通过梯度设问考查科学思维与探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|15/30|微生物发酵、细胞代谢、单克隆抗体等|结合猕猴桃醋生产流程考查原核生物结构，引用海淀二模题体现真题导向| |非选择题|6/70|基因工程、植物体细胞杂交、免疫调节等|“工程菌检测癌基因”综合水平基因转移与CRISPR技术，“基因振荡器”构建考查基因表达调控，凸显科技前沿与科学探究|

2025-2026学年高二年级质量检测试卷（生物） 本试卷共10页，满分100分。考试时长90分钟。考生务必将答案写在答题卡对应题号框内，在试卷上作答无效。考试结束后，将答题卡交回。 一、选择题（每小题只有一个选项符合题意，共15小题，每小题2分，合计30分） 1. 下图表示猕猴桃醋生产的基本工艺流程，下列叙述正确的是 猕猴桃酶解酒精发酵醋酸发酵成品 A. 与酵母菌相比，乳酸菌与醋酸菌均没有核膜包被的细胞核 B. 和处理都属于灭菌，能杀灭发酵液中所有微生物 C. 酒精发酵阶段所添加的乳酸菌能够无氧呼吸产生酒精 D. 醋酸发酵阶段需要密封，以免有氧时醋酸被分解为二氧化碳 2. 近年来，由于全球变暖，导致葡萄中糖的积累过多，造成葡萄酒中的平均乙醇含量升高，葡萄酒品质下降。下图①、②、③表示酿酒酵母中特定代谢途径，相关叙述正确的是 A. 图中①、②的发生场所是线粒体，③的发生场所是细胞质基质 B. 酵母菌通过②途径能产生大量ATP，通过③途径只能产生少量ATP C. 在无氧条件下抑制③途径会导致酵母细胞中[H]的产生和消耗失衡 D. 选育无法进行①途径的酿酒酵母新品种能降低葡萄酒中乙醇含量 3. 观察“接种和分离酵母菌”实验操作图（部分），结合微生物实验规范，下列说法错误的是 A. 操作全程需在酒精灯火焰旁进行 B. 培养温度应控制在范围内 C. 部分步骤操作顺序是：①③②③④ D. 步骤④用接种环在培养基表面划无数条线 4. 我国科研人员改良棉花幼胚的体外培养技术，加快了幼胚发育至幼苗的速度（如图），缩短了棉花杂交育种所需的时间。相关叙述正确的是 A. 接种用的外植体幼胚需要消毒，培养基需要灭菌 B. 幼胚经过脱分化和再分化发育为试管苗 C. 图中不同幼胚的基因组成完全相同 D. 该过程体现了高度分化的植物细胞具有全能性 5. 利用植物体细胞杂交技术培养番茄-马铃薯杂种植株，过程如图。下列说法正确的是 A. 过程①需要使用胰蛋白酶和果胶酶处理两种细胞 B. 过程②可以使用PEG或灭活病毒诱导促使其融合 C. 可利用细胞膜表面荧光标记颜色筛选融合原生质体 D. 过程④的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化和再分化 6. 下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是 注： +表示该孔中存在对应蛋白的抗体， -表示没有对应抗体 A. 应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间 B.W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得 C. 步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞 D. 应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体 7. 中国科学院研究团队利用相关生物学技术，成功培育出世界上首例只有双雌来源的孤雌小鼠和双雄来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。下列描述错误的是 A．上述过程培育获得的孤雄小鼠的性染色体组成为XY B．甲囊胚内细胞团均等分割可获得具有相同遗传物质的孤雌小鼠 C．孤雄小鼠的获得利用细胞工程、基因工程、胚胎工程相关技术 D．上述技术为拯救仅存单一性别的濒危哺乳动物提供了可能性 8. 近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家期望通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，其过程如下图。 以下说法错误的是 A. 胚胎工程一般采用促性腺激素处理B使其超数排卵 B. 若过程①表示体外受精，C的精子可直接受精 C. 过程②通过显微操作法去除受体卵母细胞的细胞核 D. 过程③表示早期胚胎培养，获得的F后代是克隆动物 9. 科学家将某些诱导基因转入小鼠成纤维细胞中成功获取诱导多能干细胞，这类细胞可用于一系列的研究，具体过程如下图所示。 以下说法错误的是 A. 过程②实质是基因的选择性表达 B. 过程③可用聚乙二醇诱导细胞融合 C. 培养诱导多能干细胞时，需要定期更换培养液 D. 可将丁细胞注射到小鼠脾脏中提取单克隆抗体 10.OsGLO1、EcCAT、EcCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如下图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是 A. 可用抗原-抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量 B. 四个基因转录时都以DNA的同一条单链为模板 C. 应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞 D. 四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译 11.利用基因工程技术生产特定单克隆抗体的流程如下图。下列叙述错误的 A. 过程①需要使用限制酶、DNA连接酶 B. 过程②是将重组质粒导人噬菌体并启动基因表达 C. 过程③利用抗原-抗体的特异性结合筛选目标抗体 D.过程4可将目标抗体A的基因导入酵母菌进行发酵生产 12.（2025海淀二模15题）为合成出局部为双链的RNA用于沉默特定基因，先将目的基因X从重组质粒pHIBS切割出来，再巧妙地连接到质粒载体pUAST中，如下图，其中质粒只展示了局部。 下列叙述正确的是 A.该操作过程中还需要DNA连接酶和耐高温的DNA聚合酶 B.利用B和Bg、S和Xh黏性末端相同，实现基因X与pUAST连接 C.基因X的DNA片段需要完整保留启动子和终止子区域 D.可以用E和Bg，或者Xh和K双酶切重组pUAST 13.天然β-淀粉酶耐热性较差，难以满足工业化生产需求。通过PCR对天然β-淀粉酶基因进行改造，将其导入大肠杆菌表达后，获得了一种耐高温的β-淀粉酶。与天然酶相比，改造后的酶在第476位发生了氨基酸替换，由天冬氨酸改变为天冬酰胺。下列叙述错误的是 A.天冬酰胺与天冬氨酸的R基不同，该替换导致酶的空间结构改变 B.根据新的氨基酸序列可逆推出唯一对应的基因编码序列 C.PCR技术在此过程中实现了对β-淀粉酶基因的定点突变 D.这种通过设计并合成新蛋白质的技术属于蛋白质工程 14. 下列对转基因技术的认识正确的是 A.被转移的基因是功能已知的基因，不会引起安全性问题 B.转基因技术可用于建立疾病动物模型，模拟疾病的发生发展过程 C.转基因作物被食用后，目的基因会转入动物细胞内 D.外源基因一定不会影响作物细胞内其他基因的表达 15. 下列相关实验的叙述错误的是 A. 溶解粗提取的DNA加入二苯胺试剂沸水浴，溶液呈蓝色 B. 用95%的冷酒精析出DNA，溶解蛋白质 C.PCR是酶促反应，需加入耐高温DNA连接酶 D. 通过引物的设计可以做到选择性PCR扩增DNA片段 二、非选择题（共6小题，计70分） 16.（12分）中国科学家从盐碱地沉积物中筛选出一株嗜盐菌，能够以葡萄糖为原料合成新型可降解的生物 塑料——聚羟基脂肪酸酯（PHA）。 （1）研究人员从盐碱地沉积物中取样进行富集培养，培养基中需添加葡萄糖，为微生物生长提供            。 将培养的菌液            后分别涂布于不同的平板培养基上，分离、培养并鉴定出该菌株。 （2）该菌株合成PHA的主要途径如图1。为提高PHA产量，研究人员敲除菌株中编码P酶的基因，目的是             。在敲除P酶基因的菌株中过表达M基因，显微镜下观察菌株形态，结果如图2。结果显示，与对 照组细胞相比，实验组细胞            。实验组菌株能够在液体培养基中自动沉降。 （3）利用如图3所示的“非灭菌连续开放发酵系统”培养实验组菌株并生产PHA。在发酵过程中，可以通过 调节马达转速控制            。根据图中培养条件分析，该系统不需要灭菌的2条理由是            。 （4）综合上述信息，分析利用（3）所示系统生产PHA的两点优势。 17. 甘蔗是蔗糖的主要来源，甘蔗R具有高产高糖的优良特性但耐寒性差，甘蔗G是耐寒品种。科研人员利用植物体细胞杂交技术以期快速培育出耐寒性更强且性状更优良的甘蔗新品种。 （1）如图1，利用            去除细胞壁获得原生质体。分别加入IOA和R-6G钝化后诱导原生质体融合。仅有杂种原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是            。 注：IOA可抑制细胞呼吸第一阶段；R-6G可抑制细胞呼吸第二、三阶段。 图1 （2）科研人员发现制备原生质体及原生质体融合后均会不同程度发生氧化褐变、细胞壁再生困难的现象。为解决这一问题，科研人员利用甘蔗杂种原生质体进行以下实验。 激素组合1：2 mg/L 2，4 - D + 3 mg/L 6 - BA 激素组合2：4 mg/L 2，4 - D + 1 mg/L 6 - BA ①由图2可知，甘蔗杂种原生质体再生过程中最好使用            。 ②科研人员推测激素通过促进果胶合成关键酶基因GAUT表达，从而促进细胞壁再生，请将下表补充完整为该推测提供证据（选填下列字母）。 组别 激素使用 实验处理 检测指标 1 a 原生质体中转入过量表达GAUT基因载体 2 原生质体中转入抑制GAUT基因表达载体 3 不转入基因的原生质体 a. 不使用激素 b. 使用激素组合1 c. 使用激素组合2 d. 原生质体中2，4 - D和6 - BA的含量 e. 完成再生壁的细胞比例 ③上表实验是否能够达成完整验证推测的目的？请简述理由。 18.（12分）肿瘤细胞可分泌乳酸，肿瘤微环境中乳酸积累会减弱细胞毒性T淋巴细胞（Tc细胞）的杀伤能力。 （1）体外培养肿瘤细胞，需要添加的营养成分除了葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，还需要添加 。 （2）Tc细胞可通过分泌肿瘤坏死因子（TNF）等发挥 杀伤作用。用M蛋白抑制剂、乳酸处理活化的 Tc细胞，分选高表达TNF的Tc细胞，结果如 图1所示（数值为高表达TNF的Tc细胞占全部 Tc细胞的百分比）。结果表明乳酸可通过M蛋白 抑制Tc细胞活性，依据是 。 （3）为探究M蛋白抑制Tc细胞活性的机制，利用甲乙丙三种转基因小鼠，通过杂交和筛选，获得仅在T 细胞中M基因被敲除且T细胞能表达特定抗原受体D的小鼠。 注：LoxP为一段特殊的DNA序列，被A基因编码的重组酶识别并剪切后，两个LoxP之间的序列将被删除。 T启动子是T细胞特异性启动子。D基因编码的抗原受体能够特异性识别卵清蛋白肽段。 ① 获获取基因型为 的纯合小鼠作为实验组。 ② 提取实验组和对照组小鼠Tc细胞，用 和、细胞因子 处理以活化Tc细胞。检测小鼠活化的Tc细胞膜上葡萄糖转运 蛋白1（GLUT1）的含量，结果如图3所示。 （4）综合以上研究，补充完善乳酸减弱Tc细胞杀伤能力的机制。 乳酸促进Tc细胞M基因表达 → → → Tc细胞的肿瘤杀伤 能力减弱 19.（10分）阅读下面的材料，回答（1）~（5）。 工程菌检测癌基因 贝氏不动杆菌（B菌）是一种能在肠道定植且对人体健康无害的细菌。B菌可吸收环境中的DNA片段，并将其整合至自身基因组，该过程称为水平基因转移（HGT）。研究者改造B菌，借助其HGT捕获诱发结肠癌的突变K基因，以辅助诊断结肠癌。 为鉴定B菌捕获K基因的HGT能力，研究者制备两种转基因细胞。转基因结肠癌细胞（R1细胞）染色体上部分DNA序列和转基因B菌（B1菌）拟核上部分DNA序列如图1。当细菌细胞中两个DNA分子的两端具有同源序列时，可发生同源序列之间的片段互换。将B1菌与R1细胞裂解液混合一段时间，再把B1菌接种至含有卡那霉素或壮观霉素的平板上，根据菌落生成情况，确认其具有捕获K基因的HGT能力。 结肠癌细胞以及正常结肠细胞死亡后会将其DNA释放至肠腔中。为进一步获得能够区分突变K基因和正常K基因的B菌，需对其进行优化。B菌中天然存在用于防御噬菌体的CRISPR/Cas系统。CRISPR/Cas系统由Cas蛋白与gRNA构成，其工作原理如图2。目标DNA被Cas蛋白切断后，会在细菌细胞中被降解。研究者利用这一机制，构建相关重组DNA并导入B菌，获得B2菌。B2菌仅在捕获突变K基因后才能在含有卡那霉素的平板上存活。 研究者对B菌的工程改造策略为检测突变基因提供了新的思路，未来可能会有广泛用途。 （1）图1中B1菌的HGT过程与减数分裂中的            过程机制相似，都属于基因重组。 （2）成功捕获K基因的B1菌在含卡那霉素或壮观霉素的平板上的菌落生成情况分别是            。 （3）对文中CRISPR/Cas系统的理解，正确的是            （多选） A.CRISPR序列中的重复序列编码的RNA序列能与噬菌体DNA碱基互补配对 B.Cas蛋白能独立识别特定DNA序列并断开磷酸二酯键 C.B菌的不同菌株中CRISPR序列可能是有差异的 D.利用人工改造后的CRISPR/Cas系统可实现对细胞内基因的编辑 （4）B2菌中重组DNA的设计方案如下图，已知TetR基因的表达产物可抑制P启动子的转录活性。请将选项的序号填入下图相应的方框中。 a.持续启动基因表达的强启动子  b.卡那霉素诱导型启动子 c.突变K基因  d.正常K基因 e.壮观霉素抗性基因  f.卡那霉素抗性基因 20.（12分）人工构建 “基因振荡器”，可以在微生物细胞内精准控制基因周期性地表达。 （1）研究者合成了如图1所示的PB - A、PC - B、PA - C、PB - GFP（GFP为绿色荧光蛋白基因）四种   目的基因，将这些基因插入质粒，构建了表达载体。 因A、B、C分别表达蛋白A、B、C。蛋白 C分别与启动子、、结合，结合后 下游基因转录，不结合时启动子正常启动 “T”代表终止子。   构建表达载体的过程中，需要用到的工具酶有限制酶和            。切割目的基因时常用两种不同   的限制酶。除了切割产生不同的黏性末端外，限制酶还应满足的条件是在目的基因和其他基因内部            。 （2）检测发现，与稳定表达的红色荧光蛋白相比，GFP的表达量出现明显的周期性波动，反映出细胞内基   因表达的 “振荡”。具体机制可以解释为：在一个波动周期内，当基因B表达量增加时，            ，   基因B表达量减少；相似的机制又会使基因B表达量重新增加。 （3）研究者设计了一段人工合成的DNA序列（海绵序列），该序列中有多个重复单元，每个单元不表达任   何蛋白，但能够被B蛋白特异性识别并结合。在图1表达载体中插入海绵序列，可以通过            ，   使振荡周期延长。 （4）野生型酵母菌有相互抑制的两个衰老基因Sir和Hap，Sir或Hap基因高表达会导致酵母菌以不同途   径衰老（如图2）。请在图3虚线框内绘制重构思路，建立基因Sir和Hap之间的振荡关系，以延缓   酵母菌衰老。   野生型酵母菌 21.（12分）自然环境中植物会同时面临多种压力，脱落酸（ABA）是植物适应非生物胁迫最重要的调节因子。为探究植物如何整合不同信号，进行如下实验。 （1）植物生长发育的调控是由            、激素调节和环境因素调节共同完成的。 （2）检测水稻根部在不同硝酸盐浓度下ABA诱导的基因表达，结果如图1。由图1可知，提高ABA浓度可            高浓度对ABA反应的抑制，研究者推测ABA和可能以竞争的方式被相同的受体识别。 （3）质膜上的硝酸盐转运蛋白NRT可作为感知细胞外硝酸盐浓度的受体。为探究ABA是否也以NRT为受体，进行了实验。 ① 获取用FLAG（一种短肽链）标记的NRT和突变蛋白nrt1，分别加入不同浓度ABA孵育一段时间，然后与蛋白酶K混合，电泳并用抗FLAG抗体检测（图2）。该结果证明ABA可直接与NRT结合，据此推测ABA、NRT、蛋白酶K之间的关系：            。 ② 研究者进一步通过实验证明“ABA以NRT为受体”。实验组所用材料、处理及检测指标应为______。 A. 野生型水稻 B.nrt1突变体水稻 C. 低条件 D. 高条件 E. 不用ABA处理叶片 F. 用适宜浓度ABA处理叶片 G.ABA响应基因的表达H. 响应基因的表达 （4）为进一步探究NRT响应ABA的信号转导机制，进行如下实验。用不同浓度ABA处理携带SPX-nLUC和cLUC-NRT的叶片，结果如图3。 NLP是ABA信号转导中一个重要的转录因子，与SPX蛋白结合时不发挥作用。构建（GFP为绿色荧光蛋白）转基因水稻，用100nM ABA处理后，检测到荧光信号由细胞质向细胞核集中。根据以上实验结果推测NRT响应ABA的信号转导机制            。 （5）综合以上研究，分析植物整合环境中非生物胁迫和营养条件（）信号的意义。 学科网（北京）股份有限公司 $