精品解析：甘肃省民乐县第一中学2025-2026学年高二下学期6月诊断生物试卷

民乐一中2025-2026学年第二学期高二（5）部6月诊断考试 生物试卷 一、选择题（共16个小题，每小题3分，共48分，每小题只有一个选项符合题意。） 1. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢”（酢同醋） 法的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成。”下列叙述错误的是（　　） A. 该方法依据的原理是醋酸菌在氧气充足、糖源不充足时将酒精转化为乙酸 B. 加水的目的是对酒进行稀释，避免渗透压过高杀死醋酸菌 C. “衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的 D. “挠搅”有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧 【答案】C 【解析】 【详解】A、醋酸菌为好氧细菌，当氧气充足、糖源不足时，可将酒精转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸（醋酸），该工艺用酒酿醋符合该原理，A正确； B、当酒精浓度较高时，溶液渗透压过高，会导致醋酸菌失水死亡，加水稀释可降低渗透压，为醋酸菌提供适宜的生存环境，B正确； C、“衣”是酒表面的菌膜，是由醋酸菌在液面大量繁殖形成的，不是酵母菌，C错误； D、“挠搅”即搅拌，既可以促进醋酸菌与酒精充分接触，提高反应效率，又可以增加溶液中的溶解氧，满足醋酸菌的有氧呼吸需求，D正确。 2. 下列关于微生物培养与无菌技术的操作，符合规范的是（　　） A. 培养基在高压蒸汽下灭菌15-30min，可杀灭所有微生物的芽孢和孢子 B. 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C. 为了防止污染，接种环经火焰灼烧灭菌后应趁热快速挑取菌落 D. 为保证无菌环境，接种操作时应打开紫外灯 【答案】A 【解析】 【详解】A、高压蒸汽灭菌在100kPa、121℃条件下灭菌15-30min，能够杀灭包括芽孢、孢子在内的所有微生物，A正确； B、倒平板时若将皿盖完全打开放在一边，空气中的杂菌会落入培养基造成污染，正确操作是仅将皿盖打开一条稍大于瓶口的缝隙，B错误； C、接种环灼烧灭菌后温度极高，趁热挑取菌落会杀死目标菌种，需待接种环冷却后再挑取菌落，C错误； D、接种操作时需在酒精灯火焰旁的无菌区进行，紫外灯对人体有伤害，接种操作过程中不能打开紫外灯，紫外灯仅用于接种前后对操作空间进行消毒，D错误。 3. 某发酵工厂利用黑曲霉生产柠檬酸的工艺流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程可通过紫外线、亚硝酸等诱变方法进行诱变育种，提高产酸能力 B. ③过程是发酵工程的中心环节，产物的合成主要在此阶段完成 C. ④过程只需要简单的过滤和沉淀即可获得纯度合格的柠檬酸成品 D. ③过程在发酵罐中进行时，需要根据黑曲霉的好氧特性进行通气搅拌 【答案】C 【解析】 【详解】A、①过程为菌种选育，紫外线属于物理诱变因素，亚硝酸属于化学诱变因素，二者均可用于诱变育种，提高突变率，进而筛选出产酸能力更强的黑曲霉菌株，A正确； B、③过程是发酵罐内发酵，属于发酵工程的中心环节，该阶段黑曲霉完成增殖并合成柠檬酸等代谢产物，产物主要在此阶段合成，B正确； C、④过程为产品分离、纯化，过滤和沉淀仅能去除菌体等大颗粒杂质，无法去除液体杂质，若要得到纯度合格的柠檬酸，还应经过萃取、离子交换、浓缩结晶等多步操作，C错误； D、黑曲霉为好氧微生物，③过程中进行通气搅拌可以增加发酵液溶氧量，满足黑曲霉有氧呼吸的需求，保证其正常生长和产酸，D正确。 4. 某科研小组想要筛选出某种维生素缺陷型菌株，采用与影印法类似的技术（用无菌的特殊材质的丝绒布覆盖在长满菌落的原培养基上，然后不转动角度，“复印”到新培养基）进行初检。下列关于该过程的相关操作及说法，错误的是（　　） A. 原培养基上的菌落分布是通过稀释涂布平板法获得的，接种后需静置待菌液吸收再倒置培养 B. 进行影印操作时，应先“复印”到不含该维生素的基本培养基上，再“复印”到含该维生素的完全培养基上 C. 维生素缺陷型菌株应从基本培养基上没有菌落生长，而完全培养基上对应位置有菌落的地方挑选 D. 维生素缺陷型菌株在基本培养基上能形成菌落，只是菌落的生长速度比完全培养基慢 【答案】D 【解析】 【详解】A、稀释涂布平板法接种后，静置待菌液吸收再倒置培养，既可以避免菌液流动导致菌落分布不均，也能防止冷凝水滴落污染培养基，A正确； B、若先“复印”到含维生素的完全培养基，丝绒布会携带该维生素，后续“复印”到基本培养基时会造成营养污染，干扰筛选结果，因此应先“复印”到基本培养基，再“复印”到完全培养基，B正确； C、维生素缺陷型菌株无法合成该种维生素，在不含该维生素的基本培养基中不能生长，在含该维生素的完全培养基中可以正常生长，因此目标菌株对应位置为基本培养基无菌落、完全培养基有菌落的区域，C正确； D、维生素缺陷型菌株自身不能合成所需的该种维生素，基本培养基不含该维生素时，菌株无法进行正常的生命活动，完全不能生长形成菌落，并非生长速度慢，D错误。 5. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列表述正确的是（　　） A. 愈伤组织是一团高度分化、具有旺盛分裂能力的薄壁细胞 B. ①、②过程都必须在暗处进行，光照会抑制愈伤组织的形成和试管苗的生长 C. 获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病毒能力 D. 通过细胞培养获得辣椒素的过程可不需要实现细胞的全能性 【答案】D 【解析】 【详解】A、愈伤组织是外植体经脱分化形成的，是未高度分化、具有旺盛分裂能力的薄壁细胞，选项表述错误，A错误； B、①为脱分化过程，需在暗处进行，避免形成维管组织影响愈伤组织形成；②为再分化过程，需要光照以诱导叶绿素合成，利于试管苗生长，并非都需避光，B错误； C、获得脱毒苗常用的外植体是茎尖、根尖的分生区（该部位病毒极少甚至无病毒），不是成熟的根和茎；脱毒苗是不含或少含病毒，并非具有更强的抗病毒能力，C错误； D、细胞全能性的体现需要发育为完整个体，通过细胞培养获得辣椒素仅需培养得到高产细胞系、获取细胞代谢产物即可，不需要发育为完整植株，因此不需要实现细胞的全能性，D正确。 6. 如图为肾脏上皮细胞培养过程示意图，下列叙述正确的是（　　） A. 肾脏上皮细胞培养所需的气体环境为95%的氧气和5%的CO2 B. 甲→乙过程，需要用胰蛋白酶处理，培养液中需要加入血清以抑制微生物生长 C. 乙到丙过程中，贴壁生长的肾脏上皮细胞会出现接触抑制的现象 D. 丙到丁的过程除了定期更换培养液，还需在培养基中加入大量的抗生素 【答案】C 【解析】 【详解】A、动物细胞培养所需的气体环境为95%的空气和5%的CO2，5%的CO2作用是维持培养液pH，并非95%的氧气，A错误； B、甲→乙过程用胰蛋白酶处理可将组织块分散为单个细胞，培养液中加入血清的作用是补充细胞生长所需的未知营养，抑制微生物生长需要添加抗生素，B错误； C、乙到丙为原代培养过程，肾脏上皮细胞是正常动物体细胞，贴壁生长时细胞相互接触后会停止分裂增殖，出现接触抑制现象，C正确； D、丙到丁为传代培养过程，定期更换培养液可清除代谢废物、补充营养，培养基中仅需添加适量抗生素抑制杂菌污染，大量抗生素会损伤培养的细胞，D错误。 7. 如图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤①给小鼠注射IL-6后，应从小鼠腹水中获得能产生抗体的B淋巴细胞 B. 步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液 C. 为了避免病毒感染，步骤③只能用PEG融合法和电融合法 D. 步骤⑤经过克隆化培养和专一抗体检测筛选出了能分泌特定的杂交瘤细胞 【答案】D 【解析】 【详解】A、给小鼠注射IL-6免疫后，能产生相应抗体的B淋巴细胞需从小鼠脾脏中获取，小鼠腹水是后续培养杂交瘤细胞时提取单克隆抗体的场所之一，不是获取B淋巴细胞的部位，A错误； B、将脾组织分散为单细胞悬液需使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，胃蛋白酶的最适pH为酸性，在动物细胞生活的中性环境中会失活，无法发挥分散细胞的作用，B错误； C、诱导动物细胞融合的方法包括PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法，灭活的病毒不具备感染活性，可用于诱导融合，并非只能使用前两种方法，C错误； D、步骤④筛选得到的是所有杂交瘤细胞，步骤⑤需经克隆化培养和专一抗体检测，才能筛选出能分泌抗IL-6这一特定抗体的杂交瘤细胞，D正确。 8. 如图为早期胚胎经胚胎移植后发育为不同类型动物的示意图，下列叙述正确的是（　　） A. 获取①高产试管奶牛时应在胚胎移植前对供体母牛和受体母牛进行同期发情处理 B. ②过程获得的克隆动物，遗传物质全部来自供核体细胞 C. ③过程获得的干扰素常用于治疗人类的细菌感染性疾病 D. 若要获取特定性别的克隆猴，重构胚发育至原肠胚阶段时，需通过滋养层细胞进行性别鉴定 【答案】A 【解析】 【详解】A、胚胎移植前对供体母牛和受体母牛进行同期发情处理，可使二者生殖器官的生理状态一致，为移入胚胎提供相同的生理环境，保障胚胎正常着床发育，A正确； B、克隆动物的核遗传物质来自供核体细胞，但细胞质遗传物质来自提供去核卵母细胞的个体，并非全部遗传物质都来自供核体细胞，B错误； C、干扰素是免疫活性物质，主要功能是抗病毒、抑制肿瘤细胞增殖，无法治疗细菌感染，细菌感染一般使用抗生素治疗，C错误； D、克隆动物的性别由提供细胞核的供体性别直接决定，无需再进行性别鉴定，D错误。 9. 如图是小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞的获得过程，相关叙述正确的是（　　） A. 过程①中，精子需要培养在获能液中，使其获得能量 B. 过程②中，经历了有丝分裂和分化，不同细胞中的基因存在差异 C. 单倍体干细胞的染色体数目为小鼠体细胞的一半，里面的性染色体只有X D. “早期胚胎”最可能是囊胚，其中的滋养层细胞具有发育全能性 【答案】C 【解析】 【详解】A、精子获能的实质是精子获得与卵细胞完成受精的能力，而非获得能量，A错误； B、过程②为早期胚胎发育，细胞经有丝分裂增殖，细胞分化的本质是基因的选择性表达，分化过程中遗传物质不发生改变，不同细胞的基因一般不存在差异，B错误； C、该单倍体干细胞的核遗传物质全部来自卵母细胞，卵母细胞是经减数分裂产生的，染色体数目为小鼠体细胞的一半，雌性小鼠的性染色体组成为XX，产生的配子中性染色体只有X，因此该单倍体干细胞的性染色体只有X，C正确； D、囊胚期的内细胞团细胞具有发育全能性，滋养层细胞后续会发育为胎膜和胎盘，不具有发育全能性，D错误。 10. PCR技术是基因工程中扩增目的基因的核心技术，下列相关叙述正确的是（　　） A. PCR反应体系中需加入解旋酶，以解开DNA的双螺旋结构 B. 已知基因的部分序列时，也可用PCR进行目的基因的扩增 C. PCR的延伸阶段，温度需控制在90℃以上，以保证Taq酶的活性 D. 在设计两种引物时，需要让引物与引物之间的碱基序列互补 【答案】B 【解析】 【详解】A、PCR反应中通过90℃以上的高温使DNA双链解开，不需要加入解旋酶，A错误； B、只要获知目的基因两端的部分序列，就能设计出对应的特异性引物，进而通过PCR完成目的基因的扩增，因此已知基因的部分序列时可进行PCR扩增，B正确； C、PCR的延伸阶段温度通常控制在72℃左右，90℃以上是变性阶段的温度，C错误； D、设计引物时需避免引物之间的碱基序列互补，否则引物会相互结合形成引物二聚体，无法结合模板完成扩增，D错误。 11. 关于“DNA的粗提取与鉴定”（实验Ⅰ）和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”（实验Ⅱ）的实验操作，下列相关叙述正确的是（　　） A. 实验中Ⅰ，将白色丝状物直接加入二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定DNA B. 实验中Ⅰ，不能用羊血作材料，整个DNA提取过程中可以不使用离心机 C. 实验Ⅱ中，将扩增得到的PCR产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源 D. 实验Ⅱ中，凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 【答案】B 【解析】 【详解】A、二苯胺与DNA的显色反应需在溶液环境中进行，应先将白色丝状物溶解在2mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺试剂进行沸水浴，A错误； B、羊是哺乳动物，成熟红细胞无细胞核和多种细胞器，几乎不含DNA，因此不能用羊血作为实验Ⅰ的材料；提取过程中可通过纱布过滤获取含DNA的滤液，整个提取过程可以不使用离心机，B正确； C、PCR产物凝胶电泳的操作顺序是先加样，再接通电源进行电泳，若加样前接通电源，会导致样品扩散、电泳起始位置不一致，影响实验结果，C错误； D、凝胶载样缓冲液中的指示剂的作用是指示电泳的迁移进程，仅能反映大致的电泳进度，无法指示DNA分子的具体位置，DNA的具体位置需要通过染色后观察确定，D错误。 12. 启动子包括组成型启动子（在不同组织、部位都能持续表达）和诱导型启动子（只有在激活物存在时才表达）。为快速检测水体中的污染物S，科研人员构建了下图所示的基因表达载体（部分结构），将其导入大肠杆菌，通过检测红色荧光的强度即可估计待测水体中S的相对浓度。已知调控蛋白可与S结合。下列说法错误的是（ ） A. 可通过序列数据库获取红色荧光蛋白基因的碱基序列 B. 构建上述基因表达载体时需要使用限制酶和DNA连接酶 C. 启动子1和启动子2应分别选择诱导型启动子和组成型启动子 D. 若想实现S的动态清除，可将红色荧光蛋白基因换成S的降解基因 【答案】C 【解析】 【详解】A、在基因工程中，对于已知基因（如红色荧光蛋白基因），可以通过序列数据库获取其碱基序列，然后根据该序列进行引物设计等后续操作，A正确； B、构建基因表达载体时，需要用限制酶切割目的基因（红色荧光蛋白基因等）和载体，以获得相同的黏性末端或平末端，然后再用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来，形成重组表达载体，B正确； C、调控蛋白需持续表达以感知S的存在，故其启动子1应为组成型启动子(持续表达)；红色荧光蛋白需在S存在时才表达，故其启动子2应为诱导型启动子(仅调控蛋白+S时激活)，C错误； D、若想实现S的动态清除，可将红色荧光蛋白基因换成S的降解基因。这样当水体中有S时，调控蛋白与S结合启动S的降解基因表达，对S进行降解，从而实现S的动态清除，D正确。 故选C。 13. 科学家为了提高枯草杆菌蛋白酶的耐热性，对其编码基因进行了改造。他们通过分析该酶的三维结构，决定将第166位的天冬氨酸（Asp）替换为精氨酸（Arg）。随后，通过基因定点诱变技术获得了突变基因，并将其导入受体细胞表达，最终得到了比天然酶耐热性提高30℃的新一代工程酶。根据上述材料，结合蛋白质工程相关知识，判断下列说法正确的是（　　） A. 蛋白质工程的基本原理是中心法则的正向流动，即：DNA→mRNA→蛋白质→生物功能 B. 蛋白质工程只能改造现有蛋白质，不能合成自然界中不存在的全新蛋白质 C. 材料中将第166位氨基酸替换的操作，属于通过改造基因来定向改变蛋白质的氨基酸序列 D. 由于改造对象是蛋白质，这种耐热性的改变属于不可遗传的变异，仅作用于当代 【答案】C 【解析】 【详解】A、天然蛋白质的合成遵循中心法则的正向流动，而蛋白质工程是从预期蛋白质功能出发，逆向设计、改造对应基因，其基本原理是中心法则的逆推，并非正向流动，A错误； B、蛋白质工程既可以改造现有蛋白质，也能通过人工合成或改造基因，合成自然界中不存在的全新蛋白质，B错误； C、蛋白质工程的直接操作对象是基因，材料中通过基因定点诱变技术改造编码基因，进而定向改变了蛋白质的氨基酸序列，将第166位的天冬氨酸替换为精氨酸，C正确； D、该操作改造的是蛋白质的编码基因，遗传物质发生了改变，属于可遗传的变异，并非不可遗传的变异，D错误。 14. 下列有关生物技术安全性和伦理问题的叙述，正确的是（　　） A. 只要转入的基因是自然界已经存在的，转基因植物就是安全的 B. 转基因食品中的外源基因经过食用后会进入人体细胞并整合到人体的基因组中 C. 干细胞可用于治疗多种疾病，有不涉及安全与伦理问题等优点 D. 杂草、害虫从其近亲获得抗性基因，可能破坏生态系统的稳定性 【答案】D 【解析】 【详解】A、即使转入的是自然界已经存在的基因，转基因植物也可能存在产生未知过敏原、影响原有物种生存等潜在风险，并非绝对安全，A错误； B、转基因食品中的外源基因本质为DNA，进入人体消化道后会被消化分解为脱氧核苷酸，无法以完整的基因形式进入人体细胞并整合到人体基因组中，B错误； C、干细胞临床应用存在致瘤等安全风险，且胚胎干细胞的获取、应用涉及诸多伦理问题，并非不涉及安全与伦理问题，C错误； D、转基因作物的抗性基因可通过基因漂移传递给其近亲杂草、害虫，使杂草、害虫获得相应抗性，打破原有生态的种间关系，可能破坏生态系统的稳定性，D正确。 15. 用A和B两种限制酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点一定能切开），电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述错误的是（　　） A. 若用酶A和酶B同时处理该DNA片段，则电泳后得到5种产物 B. 用酶A和酶B同时处理图1中DNA片段可增加6个游离的磷酸基团 C. 电泳过程中，带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动 D. 图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点 【答案】A 【解析】 【详解】A、由题干信息限制酶在对应切点一定能切开，可知用酶A和酶B同时处理该DNA可以得到4个DNA片段，电泳后得到4种产物，A错误； B、限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段，可断开6个磷酸二酯键，最终得到6个游离的磷酸基团，B正确； C、电泳过程中，DNA带负电荷会向正极移动，带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，C正确； D、图2的结果①得到的碱基对数分别是500、3500、6000，结果②得到的碱基对数分别是2000、8000，结合图1可推测Y是限制酶A的酶切位点，X代表的碱基对数为4500，即图1中有两个限制酶A的酶切位点，切割完后得到三个长度的片段：3500、（4500+1500）、500，正好与图2的酶①结果相符，D正确。 16. 质粒K中含有β−半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分解X-gal，产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体，采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是（　　） A. 将重组质粒导入大肠杆菌，需用Ca2+处理大肠杆菌以提高转化效率 B. 筛选平板中长出的白色菌落不一定为表达目标蛋白的菌株 C. 应选择蓝色菌落内的大肠杆菌进行扩大培养 D. 若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌 【答案】C 【解析】 【详解】A、将重组质粒导入大肠杆菌时，用Ca2+处理大肠杆菌可使其处于感受态，提高细胞吸收外源DNA的能力，进而提高转化效率，A正确； B、白色菌落仅说明β−半乳糖苷酶基因被破坏，可能存在插入非目的基因片段、目的基因插入方向错误或无法正常表达等情况，因此不一定是能表达目标蛋白的菌株，B正确； C、蓝色菌落说明β−半乳糖苷酶基因结构完整，即质粒中未成功插入目的基因，因此不应选择蓝色菌落的大肠杆菌扩大培养，C错误； D、质粒K经酶切后若自身环化，β−半乳糖苷酶基因未被破坏，导入大肠杆菌后可表达出有活性的酶分解X-gal，使菌落呈蓝色，因此蓝色菌落偏多可能是质粒自身环化导致的，D正确。 二、非选择题（共5小题，共52分） 17. 青霉素发酵是高耗氧过程，发酵过程中给微生物持续高效地供氧是保证青霉素持续高产的关键。血红蛋白具有很强的携带O2的能力，将其引入青霉菌是提高青霉素产能的思路之一。血红蛋白不仅存在于人和动物的红细胞中，某些细菌（如透明颤菌）细胞中也存在。研究人员为了将透明颤菌的血红蛋白引入青霉菌，设计了如下图所示的方案。回答下列问题： 注：某氨基酸缺陷型菌株是指该菌株在缺少该种氨基酸的培养基上会暂停生长。 （1）在制备培养青霉菌的培养基时，培养基中一般含有4大营养成分，即________、碳源和氮源，除此以外还需要将pH调至________性。与获得单菌落的培养基相比，对微生物进行扩大培养时，所配制的培养基中不能含有________。 （2）上图步骤②采用的接种方法是________，步骤③得到的平板中菌落较________（填“大”或“小”）的菌株即为甲硫氨酸营养缺陷型菌株。 （3）简述图甲步骤⑧从融合细胞中筛选目的菌株的基本思路________。 （4）除上述方案，请再提出一种将透明颤菌的血红蛋白引入青霉菌的方法_______。 【答案】（1） ①. 水、无机盐 ②. 酸 ③. 凝固剂##琼脂 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 小 （3）用缺乏甲硫氨酸和精氨酸但其他营养成分齐全的培养基培养融合细胞，能够在培养基上生长的即为杂种菌株） （4）利用基因工程技术，将透明颤菌的血红蛋白基因转入青霉菌 【解析】 【小问1详解】 在制备培养青霉菌的培养基时，培养基一般含有水、无机盐、碳源和氮源这4大营养成分。青霉菌是真菌，培养真菌时需将pH调至酸性。获得单菌落的培养基是固体培养基，对微生物进行扩大培养时用液体培养基，所以所配制的培养基中不能含有凝固剂（或琼脂）。 【小问2详解】 图中平板上的菌落分布比较均匀，该步骤②采用的接种方法是稀释涂布平板法。经过步骤③得到的平板中菌落较小的菌株即为甲硫氨酸营养缺陷型菌株，因为该营养缺陷型菌株生长缓慢，繁殖能力比天然菌株差一些。 【小问3详解】 处理⑧的目的是要筛选得到杂种菌株，可以根据两种“亲本”菌种的特点，采取双营养缺陷的培养基进行筛选。方案为：用缺乏甲硫氨酸和精氨酸但其他营养成分齐全的培养基培养融合细胞，能够在培养基上生长的即为杂种菌株。 【小问4详解】 透明颤菌属于原核生物，青霉菌属于真核生物， 除了上述方案，将透明颤菌的血红蛋白引入青霉菌的技术手段是：利用基因工程技术，将透明颤菌的血红蛋白基因转入青霉菌。 18. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程手段进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程，请回答下列问题： （1）狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都用到了________技术，启动②③的关键激素是_______，乙、丙、丁中核遗传物质与甲不同的是________。 （2）黄酮类化合物是植物的________代谢产物（填“初生”或“次生”），经过⑥生产黄酮类化合物利用了________技术，原理是________。 （3）⑤需要用________处理，原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇，从细胞吸水和失水角度分析目的是________。 【答案】（1） ①. 植物组织培养 ②. 生长素和细胞分裂素 ③. 丙 （2） ①. 次生 ②. 植物细胞培养 ③. 细胞增殖 （3） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 维持细胞内外渗透压平衡##防止原生质体吸水涨破 【解析】 【小问1详解】 狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都是经过在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织，在经过再分化最终形成完整的植株的过程，都利用了植物组织培养技术。植物组织培养过程中启动②脱分化和③再分化的关键激素是生长素和细胞分裂素。植株丙经历了诱变处理，基因发生了突变，遗传物质与甲植株不同；植株乙、丁形成过程未作诱变处理，遗传物质与甲植株相同。 【小问2详解】 黄酮类化合物是植物生长发育过程中非必需的，属于次生代谢产物。⑥过程是将愈伤组织细胞进行培养，通过愈伤组织细胞的大量增殖以获得细胞代谢物的过程，为植物细胞培养，该过程的原理是细胞增殖。 【小问3详解】 植物细胞的最外层是细胞壁，去掉细胞壁后的结构称为原生质体，因此⑤过程常用纤维素酶和果胶酶处理以获得原生质体。去掉细胞壁的原生质体失去了细胞壁的保护，容易大量吸水而涨破，因此常在原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇，以维持细胞内外渗透压平衡。 19. CD19是癌细胞表面的抗原蛋白，与相应受体或抗体结合后可招募其它免疫细胞发挥免疫反应；抗原A位于T细胞表面，与抗体结合后，其免疫功能得到激活。下图是研究人员通过杂交瘤细胞技术生产双特异性单克隆抗体的部分过程，回答问题。 （1）制备单克隆抗体依赖的生物技术有________（答出两点）。 （2）步骤②和④所用诱导方法与植物体细胞杂交技术所用方法不同的是________。图中③选出的杂交瘤细胞，还需进行________，才能筛选出足够量的杂交瘤细胞进行体内培养或体外培养。 （3）与从血清中提取的CD19抗体、抗A抗原的抗体相比，通过双杂交瘤细胞得到双特异性单克隆抗体的优点是________（答出1点即可）。双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于抗体CD19和A抗体的联合使用，原因是________。 （4）酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是________。 【答案】（1）动物细胞培养、动物细胞融合 （2） ①. 灭活病毒诱导法 ②. 克隆化培养和抗体检测 （3） ①. 能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可大量制备##双特异性单克隆抗体可以识别两种抗原 ②. 双特异性单克隆抗体能使T细胞更精准地接触到癌细胞，大大提高了杀灭癌细胞的效率，对人体副作用更小##既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量 （4）与待测抗原结合，并催化检测底物生成产物 【解析】 【小问1详解】 图示②、④过程为动物细胞融合，筛选的杂交瘤细胞还需要进行动物细胞培养，因此制备单克隆抗体需要依赖动物细胞培养、动物细胞融合技术。 【小问2详解】 据图可知，过程②和④是诱导动物细胞融合的过程，该过程可用化学诱导法，也可用物理诱导法，与诱导植物细胞融合所用方法不同的是该过程还能用灭活的病毒诱导。由于从小鼠体内获得的B淋巴细胞有多种，因此图中③选出的杂交瘤细胞不一定能产生所需的抗体，还需要进行克隆化培养和抗体检测，才能筛选出足够量的杂交瘤细胞进行体内培养或体外培养。 【小问3详解】 抗体与抗原只能发生特异性结合，与从血清中提取的CD19抗体，抗A抗原的抗体相比，通过双杂交瘤细胞得到的双特异性单克隆抗体的优点是能能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可大量制备，双特异性单克隆抗体可以识别两种抗原；双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于抗体CD19和A抗体的联合使用，原因是该特异性抗体可以借助单克隆抗体的识别作用，使T细胞更精准地接触到癌细胞，大大提高了杀灭癌细胞的效率，并且既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。 【小问4详解】 已知固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，根据图示可知，酶标抗体既能与待测抗原结合，又能利用携带的酶将特定底物分解，形成易于检测的产物。 20. 人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血液中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下： Ⅰ．将人体血清白蛋白基因导入“奶牛胚胎”的细胞中，形成重组细胞①； Ⅱ．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②； Ⅲ．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎； Ⅳ．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。 请回答下列问题： （1）本实验用到的细胞工程技术手段有________（答出三点即可）。 （2）在实验过程1中要选择奶牛胚胎的性别是_________，构建表达载体时要将人体血清白蛋白基因与________等调控元件连接。 （3）过程a动物细胞培养需要满足的条件有营养条件、________、适宜的温度、pH和渗透压、适宜的气体条件。 （4）过程b采集到的卵母细胞需要在体外培养至________期，目前常用显微操作法去核，“去核”是指去除________。 （5）胚胎移植前取________处（填序号）的细胞进行遗传病筛查，该处的细胞将来发育成________。胚胎分割时要将_________（填序号）均等分割。f→g过程为胚胎移植和孕育过程，从免疫学角度分析，早期胚胎能够在受体内存活的主要生理学基础________。 【答案】（1）动物细胞培养、核移植技术、胚胎移植 （2） ①. 雌性 ②. 乳腺细胞中特异性表达的基因的启动子 （3）无菌、无毒的环境 （4） ①. 减数第二次分裂中（MII中） ②. 纺锤体-染色体复合物 （5） ①. ③ ②. 胎膜和胎盘 ③. ② ④. 受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应 【解析】 【小问1详解】 根据实验流程可知，该过程中依次用到了动物细胞培养（过程a培养重组细胞）、核移植（将转基因细胞的细胞核移入去核卵母细胞）、早期胚胎培养（重组细胞培养为早期胚胎）、胚胎移植等技术。 【小问2详解】 该过程的目的是从奶牛乳汁中获取人血清白蛋白，只有雌性个体性成熟后可分泌乳汁，因此应选择雌性胚胎。为保证在乳汁中能提取到人体血清白蛋白，则需要让血清白蛋白基因在乳腺细胞内表达，因此构建表达载体时要将人体血清白蛋白基因与乳腺细胞中特异性表达的基因的启动子等调控元件连接。 【小问3详解】 动物细胞培养的四个条件为：无菌无毒的培养环境；充足的营养条件；适宜温度、pH和渗透压；适宜气体环境。 【小问4详解】 过程b的核移植操作中，采集的卵母细胞需要体外培养到减数第二次分裂中期，此时卵母细胞发育成熟，具备支持细胞核全能性表达的条件；去核是去除卵母细胞的纺锤体-染色体复合物，保证重组细胞的核遗传物质来自供体细胞。 【小问5详解】 图示中①是透明带、②是内细胞团，③是滋养层。由于滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，而内细胞团可发育为胎儿的各种组织，因此进行遗传病筛查时，取滋养层（③）细胞检测不会影响胚胎的发育；胚胎分割时需要将内细胞团（②）均等分割，避免影响分割后胚胎的恢复和发育；由于受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，因此早期胚胎能够在受体内存活，这是胚胎移植的主要生理学基础。 21. Ⅰ虾青素是雨生红球藻的产物，具有抗氧化和提高免疫力等特点，但并非是其基本生命活动必需的产物。某科研团队从雨生红球藻中克隆虾青素合成关键酶基因（crtZ），通过基因工程改造酿酒酵母构建工程菌株，并结合发酵工艺优化实现虾青素产业化生产。回答下列问题： （1）提取雨生红球藻的总DNA作为模板，设计特异性引物扩增crtZ基因，此过程每次循环可以分为_______三步。 （2）为使基因crtZ片段能正确连接到图中质粒，应选用限制酶________来处理质粒。 （3）将重组质粒导入大肠杆菌后，需在含________的培养基上筛选，以排除未导入质粒的大肠杆菌；再从阳性大肠杆菌中提取重组质粒，导入URA3基因缺失的酿酒酵母，应在________的培养基上筛选工程酵母。 Ⅱ番茄不耐寒，冬季容易冻坏，难以储藏。我国科研人员从某植物中提取了一种抗冻基因AtCOR15a，经过一系列过程获得转基因抗冻的番茄新品种，操作流程如图。回答下列问题： （4）上述过程中存在两次导入和两次拼接，第一次导入是将________，第二次拼接是将插入AtCOR15a基因的T-DNA_________。 （5）为了提高AtCOR15a基因的表达能力，可将AtCOR15a基因与外源强启动子连接，如下图所示。利用PCR检测上述连接是否正确，可选择的引物组合是________。 （6）为了进一步提高番茄的储藏时间，可从该植物体内提取ErsI基因（乙烯受体基因）将ErsI基因重新导回该植物，致使该植物原有ErsI基因翻译受抑制。推测该方法提高番茄储藏时间的机理是________。 【答案】（1）变性、复性、延伸 （2）BamHI和EcoRI （3） ①. 氨苄青霉素 ②. 不含尿嘧啶 （4） ①. 含AtCOR15a的Ti质粒导入农杆菌 ②. 拼接到番茄细胞的染色体DNA上 （5）①+③ （6）反义基因转录的mRNA与ErsI基因转录出的mRNA互补配对，乙烯受体基因的翻译过程受阻，不能合成乙烯受体，从而无法正常识别乙烯信号，进而延缓成熟 【解析】 【小问1详解】 提取雨生红球藻的总DNA作为模板，设计特异性引物扩增crtZ基因，利用的是PCR技术，PCR过程中，每次循环可分为变性→复性→延伸三步。 【小问2详解】 由题图可知，由于目的基因crtZ的两端只含有BglⅡ和EcoRⅠ两个限制酶的酶切位点，所以只能用这两个限制酶对目的基因进行酶切，又因为质粒启动子两端存在BglⅡ的酶切位点，所以为了防止启动子被切除，不可采用该酶对质粒进行酶切，参考题表中各限制酶的识别序列可知，BamHⅠ与BglⅡ切割后的黏性末端相同，所以在切割质粒时，应该使用EcoRⅠ和BamHⅠ进行切割。 【小问3详解】 结合题图分析，质粒含Ampr，对氨苄青霉素具有抗性，且在插入目的基因的过程中该基因未被破坏，所以将重组质粒导入大肠杆菌后，应在含有氨苄青霉素的培养基上筛选，排除掉未导入质粒的大肠杆菌。从能够在含氨苄青霉素的培养基中生存的大肠杆菌中进一步挑选，题图显示质粒含有URA3基因，将重组质粒导入URA3基因缺失的酿酒酵母后，酵母能够在不含尿嘧啶的培养基上生存，而未导入该重组质粒的酵母则无法在该培养基上生存，所以应该在不含尿嘧啶的培养基上筛选所需要的工程酵母。 【小问4详解】 将目的基因导入植物细胞常选用农杆菌转化法，该过程中第一次导入是将含AtCOR15a的Ti质粒导入农杆菌，第二次导入是利用农杆菌感染植物细胞将T-DNA导入番茄细胞，该过程中第一次拼接是将AtCOR15a基因与Ti质粒拼接，第二次拼接是指将携带AtCOR15a基因的T-DNA与番茄细胞的染色体DNA进行拼接。 【小问5详解】 为检测AtCOR15a基因与外源强启动子是否连接正确，PCR扩增时需要选用一个能与强启动子一端的碱基序列互补的引物，另一个引物需要选择能与强启动子之外的DNA碱基序列互补的引物，结合图示可知，应选择引物①和③进行PCR扩增。 【小问6详解】 若要使原有ErsI基因翻译受抑制，则需要转入的ErsI基因转录形成的RNA能与细胞内原有ErsI基因转录形成的mRNA能够发生碱基互补配对，即将提取的ErsI基因反向插入启动子和终止子之间，反向插入的基因转录的mRNA与细胞内原有ErsI基因转录出的mRNA互补配对，乙烯受体基因的翻译过程受阻，不能合成乙烯受体，从而无法正常识别乙烯信号，进而延缓成熟，以提高番茄储藏时间。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 民乐一中2025-2026学年第二学期高二（5）部6月诊断考试 生物试卷 一、选择题（共16个小题，每小题3分，共48分，每小题只有一个选项符合题意。） 1. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢”（酢同醋） 法的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成。”下列叙述错误的是（　　） A. 该方法依据的原理是醋酸菌在氧气充足、糖源不充足时将酒精转化为乙酸 B. 加水的目的是对酒进行稀释，避免渗透压过高杀死醋酸菌 C. “衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的 D. “挠搅”有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧 2. 下列关于微生物培养与无菌技术的操作，符合规范的是（　　） A. 培养基在高压蒸汽下灭菌15-30min，可杀灭所有微生物的芽孢和孢子 B. 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C. 为了防止污染，接种环经火焰灼烧灭菌后应趁热快速挑取菌落 D. 为保证无菌环境，接种操作时应打开紫外灯 3. 某发酵工厂利用黑曲霉生产柠檬酸的工艺流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程可通过紫外线、亚硝酸等诱变方法进行诱变育种，提高产酸能力 B. ③过程是发酵工程的中心环节，产物的合成主要在此阶段完成 C. ④过程只需要简单的过滤和沉淀即可获得纯度合格的柠檬酸成品 D. ③过程在发酵罐中进行时，需要根据黑曲霉的好氧特性进行通气搅拌 4. 某科研小组想要筛选出某种维生素缺陷型菌株，采用与影印法类似的技术（用无菌的特殊材质的丝绒布覆盖在长满菌落的原培养基上，然后不转动角度，“复印”到新培养基）进行初检。下列关于该过程的相关操作及说法，错误的是（　　） A. 原培养基上的菌落分布是通过稀释涂布平板法获得的，接种后需静置待菌液吸收再倒置培养 B. 进行影印操作时，应先“复印”到不含该维生素的基本培养基上，再“复印”到含该维生素的完全培养基上 C. 维生素缺陷型菌株应从基本培养基上没有菌落生长，而完全培养基上对应位置有菌落的地方挑选 D. 维生素缺陷型菌株在基本培养基上能形成菌落，只是菌落的生长速度比完全培养基慢 5. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列表述正确的是（　　） A. 愈伤组织是一团高度分化、具有旺盛分裂能力的薄壁细胞 B. ①、②过程都必须在暗处进行，光照会抑制愈伤组织的形成和试管苗的生长 C. 获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病毒能力 D. 通过细胞培养获得辣椒素的过程可不需要实现细胞的全能性 6. 如图为肾脏上皮细胞培养过程示意图，下列叙述正确的是（　　） A. 肾脏上皮细胞培养所需的气体环境为95%的氧气和5%的CO2 B. 甲→乙过程，需要用胰蛋白酶处理，培养液中需要加入血清以抑制微生物生长 C. 乙到丙过程中，贴壁生长的肾脏上皮细胞会出现接触抑制的现象 D. 丙到丁的过程除了定期更换培养液，还需在培养基中加入大量的抗生素 7. 如图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤①给小鼠注射IL-6后，应从小鼠腹水中获得能产生抗体的B淋巴细胞 B. 步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液 C. 为了避免病毒感染，步骤③只能用PEG融合法和电融合法 D. 步骤⑤经过克隆化培养和专一抗体检测筛选出了能分泌特定的杂交瘤细胞 8. 如图为早期胚胎经胚胎移植后发育为不同类型动物的示意图，下列叙述正确的是（　　） A. 获取①高产试管奶牛时应在胚胎移植前对供体母牛和受体母牛进行同期发情处理 B. ②过程获得的克隆动物，遗传物质全部来自供核体细胞 C. ③过程获得的干扰素常用于治疗人类的细菌感染性疾病 D. 若要获取特定性别的克隆猴，重构胚发育至原肠胚阶段时，需通过滋养层细胞进行性别鉴定 9. 如图是小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞的获得过程，相关叙述正确的是（　　） A. 过程①中，精子需要培养在获能液中，使其获得能量 B. 过程②中，经历了有丝分裂和分化，不同细胞中的基因存在差异 C. 单倍体干细胞的染色体数目为小鼠体细胞的一半，里面的性染色体只有X D. “早期胚胎”最可能是囊胚，其中的滋养层细胞具有发育全能性 10. PCR技术是基因工程中扩增目的基因的核心技术，下列相关叙述正确的是（　　） A. PCR反应体系中需加入解旋酶，以解开DNA的双螺旋结构 B. 已知基因的部分序列时，也可用PCR进行目的基因的扩增 C. PCR的延伸阶段，温度需控制在90℃以上，以保证Taq酶的活性 D. 在设计两种引物时，需要让引物与引物之间的碱基序列互补 11. 关于“DNA的粗提取与鉴定”（实验Ⅰ）和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”（实验Ⅱ）的实验操作，下列相关叙述正确的是（　　） A. 实验中Ⅰ，将白色丝状物直接加入二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定DNA B. 实验中Ⅰ，不能用羊血作材料，整个DNA提取过程中可以不使用离心机 C. 实验Ⅱ中，将扩增得到的PCR产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源 D. 实验Ⅱ中，凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 12. 启动子包括组成型启动子（在不同组织、部位都能持续表达）和诱导型启动子（只有在激活物存在时才表达）。为快速检测水体中的污染物S，科研人员构建了下图所示的基因表达载体（部分结构），将其导入大肠杆菌，通过检测红色荧光的强度即可估计待测水体中S的相对浓度。已知调控蛋白可与S结合。下列说法错误的是（ ） A. 可通过序列数据库获取红色荧光蛋白基因的碱基序列 B. 构建上述基因表达载体时需要使用限制酶和DNA连接酶 C. 启动子1和启动子2应分别选择诱导型启动子和组成型启动子 D. 若想实现S的动态清除，可将红色荧光蛋白基因换成S的降解基因 13. 科学家为了提高枯草杆菌蛋白酶的耐热性，对其编码基因进行了改造。他们通过分析该酶的三维结构，决定将第166位的天冬氨酸（Asp）替换为精氨酸（Arg）。随后，通过基因定点诱变技术获得了突变基因，并将其导入受体细胞表达，最终得到了比天然酶耐热性提高30℃的新一代工程酶。根据上述材料，结合蛋白质工程相关知识，判断下列说法正确的是（　　） A. 蛋白质工程的基本原理是中心法则的正向流动，即：DNA→mRNA→蛋白质→生物功能 B. 蛋白质工程只能改造现有蛋白质，不能合成自然界中不存在的全新蛋白质 C. 材料中将第166位氨基酸替换的操作，属于通过改造基因来定向改变蛋白质的氨基酸序列 D. 由于改造对象是蛋白质，这种耐热性的改变属于不可遗传的变异，仅作用于当代 14. 下列有关生物技术安全性和伦理问题的叙述，正确的是（　　） A. 只要转入的基因是自然界已经存在的，转基因植物就是安全的 B. 转基因食品中的外源基因经过食用后会进入人体细胞并整合到人体的基因组中 C. 干细胞可用于治疗多种疾病，有不涉及安全与伦理问题等优点 D. 杂草、害虫从其近亲获得抗性基因，可能破坏生态系统的稳定性 15. 用A和B两种限制酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点一定能切开），电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述错误的是（　　） A. 若用酶A和酶B同时处理该DNA片段，则电泳后得到5种产物 B. 用酶A和酶B同时处理图1中DNA片段可增加6个游离的磷酸基团 C. 电泳过程中，带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动 D. 图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点 16. 质粒K中含有β−半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分解X-gal，产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体，采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是（　　） A. 将重组质粒导入大肠杆菌，需用Ca2+处理大肠杆菌以提高转化效率 B. 筛选平板中长出的白色菌落不一定为表达目标蛋白的菌株 C. 应选择蓝色菌落内的大肠杆菌进行扩大培养 D. 若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌 二、非选择题（共5小题，共52分） 17. 青霉素发酵是高耗氧过程，发酵过程中给微生物持续高效地供氧是保证青霉素持续高产的关键。血红蛋白具有很强的携带O2的能力，将其引入青霉菌是提高青霉素产能的思路之一。血红蛋白不仅存在于人和动物的红细胞中，某些细菌（如透明颤菌）细胞中也存在。研究人员为了将透明颤菌的血红蛋白引入青霉菌，设计了如下图所示的方案。回答下列问题： 注：某氨基酸缺陷型菌株是指该菌株在缺少该种氨基酸的培养基上会暂停生长。 （1）在制备培养青霉菌的培养基时，培养基中一般含有4大营养成分，即________、碳源和氮源，除此以外还需要将pH调至________性。与获得单菌落的培养基相比，对微生物进行扩大培养时，所配制的培养基中不能含有________。 （2）上图步骤②采用的接种方法是________，步骤③得到的平板中菌落较________（填“大”或“小”）的菌株即为甲硫氨酸营养缺陷型菌株。 （3）简述图甲步骤⑧从融合细胞中筛选目的菌株的基本思路________。 （4）除上述方案，请再提出一种将透明颤菌的血红蛋白引入青霉菌的方法_______。 18. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程手段进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程，请回答下列问题： （1）狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都用到了________技术，启动②③的关键激素是_______，乙、丙、丁中核遗传物质与甲不同的是________。 （2）黄酮类化合物是植物的________代谢产物（填“初生”或“次生”），经过⑥生产黄酮类化合物利用了________技术，原理是________。 （3）⑤需要用________处理，原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇，从细胞吸水和失水角度分析目的是________。 19. CD19是癌细胞表面的抗原蛋白，与相应受体或抗体结合后可招募其它免疫细胞发挥免疫反应；抗原A位于T细胞表面，与抗体结合后，其免疫功能得到激活。下图是研究人员通过杂交瘤细胞技术生产双特异性单克隆抗体的部分过程，回答问题。 （1）制备单克隆抗体依赖的生物技术有________（答出两点）。 （2）步骤②和④所用诱导方法与植物体细胞杂交技术所用方法不同的是________。图中③选出的杂交瘤细胞，还需进行________，才能筛选出足够量的杂交瘤细胞进行体内培养或体外培养。 （3）与从血清中提取的CD19抗体、抗A抗原的抗体相比，通过双杂交瘤细胞得到双特异性单克隆抗体的优点是________（答出1点即可）。双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于抗体CD19和A抗体的联合使用，原因是________。 （4）酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是________。 20. 人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血液中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下： Ⅰ．将人体血清白蛋白基因导入“奶牛胚胎”的细胞中，形成重组细胞①； Ⅱ．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②； Ⅲ．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎； Ⅳ．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。 请回答下列问题： （1）本实验用到的细胞工程技术手段有________（答出三点即可）。 （2）在实验过程1中要选择奶牛胚胎的性别是_________，构建表达载体时要将人体血清白蛋白基因与________等调控元件连接。 （3）过程a动物细胞培养需要满足的条件有营养条件、________、适宜的温度、pH和渗透压、适宜的气体条件。 （4）过程b采集到的卵母细胞需要在体外培养至________期，目前常用显微操作法去核，“去核”是指去除________。 （5）胚胎移植前取________处（填序号）的细胞进行遗传病筛查，该处的细胞将来发育成________。胚胎分割时要将_________（填序号）均等分割。f→g过程为胚胎移植和孕育过程，从免疫学角度分析，早期胚胎能够在受体内存活的主要生理学基础________。 21. Ⅰ虾青素是雨生红球藻的产物，具有抗氧化和提高免疫力等特点，但并非是其基本生命活动必需的产物。某科研团队从雨生红球藻中克隆虾青素合成关键酶基因（crtZ），通过基因工程改造酿酒酵母构建工程菌株，并结合发酵工艺优化实现虾青素产业化生产。回答下列问题： （1）提取雨生红球藻的总DNA作为模板，设计特异性引物扩增crtZ基因，此过程每次循环可以分为_______三步。 （2）为使基因crtZ片段能正确连接到图中质粒，应选用限制酶________来处理质粒。 （3）将重组质粒导入大肠杆菌后，需在含________的培养基上筛选，以排除未导入质粒的大肠杆菌；再从阳性大肠杆菌中提取重组质粒，导入URA3基因缺失的酿酒酵母，应在________的培养基上筛选工程酵母。 Ⅱ番茄不耐寒，冬季容易冻坏，难以储藏。我国科研人员从某植物中提取了一种抗冻基因AtCOR15a，经过一系列过程获得转基因抗冻的番茄新品种，操作流程如图。回答下列问题： （4）上述过程中存在两次导入和两次拼接，第一次导入是将________，第二次拼接是将插入AtCOR15a基因的T-DNA_________。 （5）为了提高AtCOR15a基因的表达能力，可将AtCOR15a基因与外源强启动子连接，如下图所示。利用PCR检测上述连接是否正确，可选择的引物组合是________。 （6）为了进一步提高番茄的储藏时间，可从该植物体内提取ErsI基因（乙烯受体基因）将ErsI基因重新导回该植物，致使该植物原有ErsI基因翻译受抑制。推测该方法提高番茄储藏时间的机理是________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $