精品解析:湖南省邵阳市邵东市创新学校2025-2026学年高二下学期5月阶段检测生物试题
2026-06-13
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资源信息
| 学段 | 高中 |
| 学科 | 生物学 |
| 教材版本 | 高中生物学人教版选择性必修3 生物技术与工程 |
| 年级 | 高二 |
| 章节 | - |
| 类型 | 试卷 |
| 知识点 | - |
| 使用场景 | 同步教学-阶段检测 |
| 学年 | 2026-2027 |
| 地区(省份) | 湖南省 |
| 地区(市) | 邵阳市 |
| 地区(区县) | 邵东市 |
| 文件格式 | ZIP |
| 文件大小 | 3.99 MB |
| 发布时间 | 2026-06-13 |
| 更新时间 | 2026-06-13 |
| 作者 | 学科网试题平台 |
| 品牌系列 | - |
| 审核时间 | 2026-06-13 |
| 下载链接 | https://m.zxxk.com/soft/58329150.html |
| 价格 | 3.00储值(1储值=1元) |
| 来源 | 学科网 |
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内容正文:
创新高级中学2026年上学期创高杯考试高二
生物试题
第I卷
一、选择题:本题共12小题,每题2分,共24分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。
1. 制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物,常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是( )
A. 食用醋的酸味主要来源于乙酸 B. 醋酸菌不适宜在无氧条件下生存
C. 醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶 D. 葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内
2. 下列有关无菌技术的说法,其中正确的是( )
①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物
②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子
③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭,所以不能在常温长期保存
④用紫外线消毒前,适量喷洒苯酚或煤酚皂,可以加强消毒效果
⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌
⑥培养皿、吸管可用干热灭菌法灭菌
A. ①②③⑤ B. ①③④⑤ C. ③④⑤⑥ D. ②③⑤⑥
3. 谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0,通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述正确的是( )
A. 发酵工程的菌种只能直接来自自然界
B. 发酵初期控制pH为7.0,后调为5.6,有利于提高L-谷氨酰胺产量
C. 必须要借助显微镜观察才能初步判断发酵过程中是否发生球状细菌污染
D. 发酵结束后,采用过滤、沉淀的方法即可获得产品
4. 嵌合体是指由两种或两种以上不同核型的细胞系组成的个体,包括同源嵌合体和异源嵌合体两类。如图表示构建嵌合体小鼠的实验,下列叙述错误的是( )
A. 嵌合体幼鼠的一个细胞中同时有白鼠和黑鼠的基因
B. 胚胎在囊胚阶段开始分化,其中的滋养层细胞将发育成胎膜和胎盘
C. 卵裂期的细胞数目不断增加,但胚胎总体积并不增加
D. 可以从囊胚的内细胞团分离出胚胎干细胞
5. 某醋厂生产的老陈醋风味独特,这源于其采用的独特分层固体发酵法——该方法使得成品中乳酸含量较高,从而形成了与众不同的风味特征。如图1是分层固体发酵法示意图,图2为发酵过程中检测的醋酸杆菌密度。酒醅是经蒸煮糊化后的粮食原料拌入糖化剂(如曲粉)和酒曲,正在进行酒精发酵的固态物料。醋醅是含有酒精的液态或固态物料(通常由酒醅发酵后的酒液等)拌入疏松材料(如谷壳、麸皮)和醋酸菌种后,正在进行醋酸发酵的固态物料。下列说法错误的是( )
A. 发酵过程中,接种醋酸杆菌后,需将发酵缸置于30-35℃条件下培养
B. 发酵过程中,发酵缸中上层醋醅有利于乳酸菌繁殖和发酵,积累乳酸
C. 据图2分析,A、B层颠倒后B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是氧气浓度
D. 分层固体发酵过程中氧气分布差异显著影响了醋酸菌在不同层次的生长状况
6. 花椰菜(2n=18)种植时容易遭受病菌侵害形成病斑,紫罗兰(2n=14)具有一定的抗病性。科研人员用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白,结果如图2所示。下列叙述正确的是( )
A. 花椰菜和紫罗兰的原生质体能融合,说明两种植株间不存在生殖隔离
B. 图1培育出的杂种植株减数分裂时的细胞中最多含有64条染色体
C. 图1培育杂种植株所用的技术体现了细胞膜具有一定流动性原理、染色体变异和植物细胞具有全能性原理
D. 可将病菌悬浮液均匀喷施于图2中的1和5植株叶片上,一段时间后,测定病斑面积占叶片总面积的百分比,筛选出抗病性强的杂种植株
7. 某科研团队利用mRNA工程技术改造来源于骨髓的异体间充质干细胞(MSC),在肿瘤治疗中展现出良好应用前景。下列关于MSC的生物学特性及培养的叙述,正确的是( )
A. MSC体外培养过程中会出现接触抑制现象,细胞铺满培养皿底后会停止分裂增殖
B. 体外培养MSC时需通入5%CO2+95%氧气,通入CO2的目的是刺激细胞呼吸
C. 培养MSC时需要定期更换培养液以清除代谢物,同时倒置培养皿以减少水分蒸发
D. MSC可诱导分化为多种类型的细胞,因此具备极高的临床应用潜力
8. 下列关于单克隆抗体制备的正确叙述是( )
A. 将抗原反复注入小鼠体内,从小鼠血清中可分离出单克隆抗体
B. 与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的是浆细胞
C. 选择培养基筛选出的杂交瘤细胞均能稳定分泌所需抗体
D. 进行亲子鉴定时利用的单克隆抗体能识别DNA特定序列
9. 基因工程中常用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。某科研团队拟将抗除草剂基因导入某双子叶植物,以培育抗除草剂植株。下列有关分析错误的是( )
A. PCR扩增的产物常通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定
B. 要将抗除草剂基因插入农杆菌Ti质粒内
C. 可用抗原-抗体杂交法来检测抗除草剂基因是否表达出蛋白质
D. 将抗除草剂基因导入植物时,常用受精卵作为受体细胞
10. 关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验,下列叙述正确的是( )
A. PCR扩增DNA片段时DNA双链的解聚原理与细胞内相同
B. 耐高温的DNA聚合酶可直接在模板链的3′端从头合成子链
C. 电泳可鉴定不同长度的DNA分子是因为它们在凝胶中的迁移速率不同
D. 染色后的凝胶条带的位置可以反映DNA分子碱基序列的组成
11. 下列有关细胞内DNA的复制与PCR的相关叙述,错误的是( )
A. 都需要DNA聚合酶和解旋酶进行催化
B. 都需要以亲代DNA的两条链分别作为模板
C. 都需要四种脱氧核苷酸作为原料
D. 都遵循相同的碱基互补配对方式
12. 载体是基因工程中携带外源DNA片段(目的基因)进入受体细胞的重要运载工具,常见的载体类型主要有基因克隆载体和基因表达载体。下图是利用细菌生产人胰岛素的基本流程示意图,下列相关叙述正确的是( )
A. 重组载体A、重组载体B分别是基因表达载体和基因克隆载体
B. 载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因
C. 必须把目的基因插入重组载体A的启动子和终止子之间
D. 培养细菌A和细菌B的培养基在营养成分和功能上没有明显差异
二、不定项选择题(共4道小题,每题4分,共16分。每题有一个或多个选项符合题目要求,全选对得4分,选对但不全得2分,有错选得0分。)
13. 天然胰岛素易形成多聚体,导致皮下注射后起效缓慢。为获得速效胰岛素,科研人员采用易错PCR技术(通过提高PCR中的碱基错配率,从而得到随机突变的多种基因)对胰岛素基因进行改造并定向筛选,最终利用大肠杆菌生产出不易聚合的速效胰岛素。下列叙述正确的是( )
A. 易错PCR技术可以定向改造胰岛素基因
B. 该技术操作过程中需要耐高温的解旋酶
C. 速效胰岛素的研发运用了蛋白质工程技术
D. 大肠杆菌生产速效胰岛素时不遵循中心法则
14. 成纤维细胞生长因子20(FGF20)可作为肿瘤标记物,为制备抗FGF20单克隆抗体以用于癌症早期诊断筛查,科研人员设计的流程如图所示。下列分析不正确的是( )
A. 抗原甲为FGF20,一般从正常人体细胞的细胞表面获取
B. ①过程获得的B淋巴细胞均能合成抗FGF20抗体
C. ②过程促进细胞融合可用PEG但不能用灭活的病毒
D. 将抗FGF20单克隆抗体与抗原甲进行杂交,可以用于检测该单克隆抗体的特异性
15. 尿素是一种重要的农业肥料,尿素分解菌可合成脲酶,利用以尿素为唯一氮源的选择培养基可从土壤中分离尿素分解菌并进行计数,科研人员取0.1 g土壤分别稀释103~107倍,将0.1 mL不同稀释倍数的土壤稀释液接种在固体培养基上,
在相同的培养条件下得到如表数据。下列叙述正确的是( )
稀释倍数
103
104
105
106
107
菌落
数/个
1号平板
478
367
270
26
5
2号平板
496
354
268
20
8
3号平板
509
332
272
29
3
A. 利用稀释涂布平板法可将稀释液中的菌体完全分离,一个菌落对应一个菌体
B. 每克土壤中尿素分解菌的数量是2.7×108个
C. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌均为尿素分解菌
D. 若在显微镜下利用细菌计数板直接计数,则统计结果一般比实际活菌数多
16. 查尔酮异构酶(CHI)普遍存在于高等植物中,有助于提高植物的耐盐碱性。科研人员构建了CHI基因与质粒的重组表达载体,并将其导入酿酒酵母中,使酿酒酵母的耐盐碱性大大提高,下列叙述错误的是( )
注:EcoRⅠ、KpnⅠ和PstⅠ是三种限制酶,箭头表示酶的切割位点。
A. 图示质粒上的卡那霉素抗性基因可作为标记基因
B. 构建重组表达载体时,选择的限制酶是KpnⅠ和PstⅠ
C. 启动子作为DNA聚合酶识别和结合的部位,驱动CHI基因转录
D. 可用适宜浓度的Mg2+溶液处理酿酒酵母,以提高转化效率
第II卷
三、非选择题(共60分)
17. 下图为果酒与果醋发酵装置示意图,请据图回答下列问题。
(1)酿造葡萄酒时,在榨汁前,要先对葡萄进行_____(填“先去除枝梗后清洗”“先清洗后去除枝梗”),该步骤可以避免去除枝梗时引起葡萄破损,增加被污染的机会。
(2)用体积分数为_____的酒精对上述装置进行消毒后,再装入葡萄汁,将发酵装置放在18~30 的环境中,每天拧开气阀b多次,排出发酵过程产生的大量气体。装置中排气口设计成弯曲形状的目的_____。
(3)10d之后,利用酸性条件下的_____对出料口c 取样的物质进行检验。若呈_____色,则说明产生了酒精。
(4)产生酒精后,在发酵液中加入醋酸菌,然后将装置所处的环境温度适当_____(填升高或降低),并适时打开气阀向发酵液中充气。充气的原因是_____。
18. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉,其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限,难以满足市场化需求。因此,目前一般通过植物细胞工程进行培养,具体过程如图所示,其中的数字序号代表处理或生理过程。请回答下列相关问题。
(1)进行①过程前要对狼爪瓦松植株甲幼嫩的叶进行消毒处理,所用的试剂为酒精和质量分数为5%左右的_____溶液。图中通过②③培养获得植株乙所利用技术的细胞学原理是_____,选用植株甲幼嫩的叶进行过程②③的原因是_____。过程②③的接种操作必须在_____旁进行。
(2)⑤过程需要用_____酶进行处理,通过植物细胞工程对狼爪瓦松培养,获得药物黄酮类化合物,下列相关叙述错误的是_____。
A. 过程③通常先在生长素与细胞分裂素比例高的培养基中培养
B. 过程④用射线处理后,经筛选可能获得目的植株
C. 所得三种植株中丙的遗传信息与甲相同
19. 类胡萝卜素具有预防、改善夜盲症和延缓衰老的功能。番茄红素β-环化酶(LCYB)是类胡萝卜素生物合成途径中的关键酶,在桂花中该酶的含量较高。某科研团队将“堰虹桂”(桂花品种)的LCYB基因转入烟草,获得了高产类胡萝卜素烟草。下表是扩增LCYB基因的引物序列,和XhoI和SmaI的识别序列及酶切位点。回答下列问题:
引物名称
引物序列(5'~3')
LCYB-F
ATGGATACTTTGCTGAAAACTCAT
LCYB-R
TCATTCTTATCCTGTACTAAATTG
(1)LCYB基因克隆。提取“堰虹桂”的总RNA,经_______得到cDNA,利用PCR技术扩增LCYB基因,若在PCR反应体系中加入1个LCYB基因和其他充足的原料,经过4个循环,共有_____个引物参与LCYB基因的合成。经该方法获得的目的基因片段缺乏______,因此不能直接在受体细胞中表达。
(2)构建基因表达载体。将扩增的目的基因插入质粒的XhoI和SmaI酶切位点之间,为保证目的基因与质粒准确连接,应对目的基因进行的操作是______。选用两种限制酶分别处理质粒和含目的基因的DNA片段的目的是_____(答两点)。
SmaI
XhoI
-CCCGGG-
-GGGCCC-
-CTCGAG-
-GAGCTC-
(3)将目的基因导入受体细胞。为获得LCYB基因的烟草,应选择______法完成目的基因导入,该方法须将目的基因连接在Ti质粒的______片段上。
20. 非洲猪瘟病毒是一种双链DNA病毒,可引起急性猪传染病。基因A编码该病毒的主要结构蛋白A,其在病毒侵入宿主细胞和诱导机体免疫应答过程中发挥重要作用。回答下列问题:
(1)制备特定抗原
获取基因A,构建重组质粒(该质粒的部分结构如图所示)。重组质粒的必备元件包括目的基因、限制酶切割位点、标记基因、启动子、复制原点和______;为确定基因A已连接到质粒中且插入方向正确,应选用图中的一对引物______对待测质粒进行PCR扩增,预期扩增产物的片段大小为______bp。
(2)制备抗蛋白A单克隆抗体
用蛋白A对小鼠免疫后,将免疫小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时,用______来诱导,该方法是动物细胞融合特有的。选择培养时,对杂交瘤细胞进行克隆化培养和______,多次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。体外培养或利用小鼠大量生产的抗蛋白A单克隆抗体,可用于非洲猪瘟的早期诊断。
21. 通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制合成的酶能破坏细胞壁使番茄软化,不耐储存。科学家将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞,获得耐储存番茄,作用机理如图。回答下列问题。
(1)基因工程中,抗多聚半乳糖醛酸酶基因称为______。
(2)科学家用Ti质粒将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞的______上。
(3)抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞后,通过______技术培育出转基因番茄植株。转基因番茄耐储存的机理是多聚半乳糖醛酸酶基因表达的______过程受阻。如果在转基因番茄中采用PCR技术检测到了抗多聚半乳糖醛酸酶基因,但番茄果实依然软化不耐储存,则最可能的原因是_____。
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创新高级中学2026年上学期创高杯考试高二
生物试题
第I卷
一、选择题:本题共12小题,每题2分,共24分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。
1. 制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物,常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是( )
A. 食用醋的酸味主要来源于乙酸 B. 醋酸菌不适宜在无氧条件下生存
C. 醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶 D. 葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内
【答案】D
【解析】
【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌,其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理:当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、食用醋的酸味主要来自醋酸,醋酸学名乙酸,A正确;
B、醋酸菌是好氧型细菌,不适宜在无氧的条件下生存,B正确;
C、在制醋时,缺失原料的情况下,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸,因此醋酸菌体内含有催化乙醇氧化成乙酸的酶,C正确;
D、醋酸菌属于细菌,没有核膜包被的细胞核和众多细胞器,因此没有线粒体,D错误。
故选D。
2. 下列有关无菌技术的说法,其中正确的是( )
①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物
②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子
③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭,所以不能在常温长期保存
④用紫外线消毒前,适量喷洒苯酚或煤酚皂,可以加强消毒效果
⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌
⑥培养皿、吸管可用干热灭菌法灭菌
A. ①②③⑤ B. ①③④⑤ C. ③④⑤⑥ D. ②③⑤⑥
【答案】C
【解析】
【详解】①无菌技术的核心是防止杂菌污染,而非杀灭实验室中所有微生物,①错误;
②煮沸消毒法100℃煮沸5-6分钟仅能杀死微生物的营养细胞,无法杀灭全部芽孢和孢子,②错误;
③巴氏消毒法只能杀灭绝大多数有害微生物,剩余少量耐热微生物或芽孢会在常温下繁殖,因此处理后的食品不能在常温长期保存,③正确;
④紫外线消毒前适量喷洒苯酚或煤酚皂等消毒剂,可使微生物蛋白质变性,能有效加强消毒效果,④正确;
⑤酒精灯火焰充分燃烧层(外焰)温度最高,接种环在此处灼烧可迅速彻底灭菌,⑤正确;
⑥培养皿、吸管等玻璃器皿耐高温且需保持干燥,可使用干热灭菌法灭菌,⑥正确;
故选C。
3. 谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0,通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述正确的是( )
A. 发酵工程的菌种只能直接来自自然界
B. 发酵初期控制pH为7.0,后调为5.6,有利于提高L-谷氨酰胺产量
C. 必须要借助显微镜观察才能初步判断发酵过程中是否发生球状细菌污染
D. 发酵结束后,采用过滤、沉淀的方法即可获得产品
【答案】B
【解析】
【详解】A、发酵工程的菌种除了直接来自自然界,还可通过人工诱变育种、基因工程育种等方式人工改造获得,并非只能来源于自然界,A错误;
B、谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0,谷氨酰胺合成酶的最适pH为5.6,因此发酵初期控制pH为7.0,有利于增加谷氨酸棒状杆菌的数量,后调为5.6,有利于提高谷氨酰胺合成酶的活性,进而提高L-谷氨酰胺产量,B正确;
C、不同微生物的菌落有特定的形态、大小、颜色等特征,可通过观察菌落特征初步判断是否被球状细菌污染,不需要必须借助显微镜,C错误;
D、L-谷氨酰胺是微生物分泌到发酵液中的代谢产物,需要用蒸馏、萃取、离子交换等方法提取;过滤、沉淀是分离收集菌体的方法,通过该方法无法获得该代谢产品,D错误。
4. 嵌合体是指由两种或两种以上不同核型的细胞系组成的个体,包括同源嵌合体和异源嵌合体两类。如图表示构建嵌合体小鼠的实验,下列叙述错误的是( )
A. 嵌合体幼鼠的一个细胞中同时有白鼠和黑鼠的基因
B. 胚胎在囊胚阶段开始分化,其中的滋养层细胞将发育成胎膜和胎盘
C. 卵裂期的细胞数目不断增加,但胚胎总体积并不增加
D. 可以从囊胚的内细胞团分离出胚胎干细胞
【答案】A
【解析】
【详解】A、嵌合体是由两种不同核型的细胞系组成的个体,其单个细胞仅携带白鼠或黑鼠其中一方的遗传物质,不会同时含有二者的基因,皮毛黑白相间是不同细胞分别表达对应毛色基因的结果,A错误;
B、胚胎发育到囊胚阶段时开始出现细胞分化,可分为内细胞团和滋养层细胞,其中滋养层细胞将来会发育成胎膜和胎盘,B正确;
C、卵裂期细胞进行有丝分裂,细胞数目不断增加,但该阶段胚胎的总体积并不增加,甚至略有减小,C正确;
D、胚胎干细胞可从早期胚胎(囊胚的内细胞团)或原始性腺中分离得到,因此可以从囊胚的内细胞团分离出胚胎干细胞,D正确。
5. 某醋厂生产的老陈醋风味独特,这源于其采用的独特分层固体发酵法——该方法使得成品中乳酸含量较高,从而形成了与众不同的风味特征。如图1是分层固体发酵法示意图,图2为发酵过程中检测的醋酸杆菌密度。酒醅是经蒸煮糊化后的粮食原料拌入糖化剂(如曲粉)和酒曲,正在进行酒精发酵的固态物料。醋醅是含有酒精的液态或固态物料(通常由酒醅发酵后的酒液等)拌入疏松材料(如谷壳、麸皮)和醋酸菌种后,正在进行醋酸发酵的固态物料。下列说法错误的是( )
A. 发酵过程中,接种醋酸杆菌后,需将发酵缸置于30-35℃条件下培养
B. 发酵过程中,发酵缸中上层醋醅有利于乳酸菌繁殖和发酵,积累乳酸
C. 据图2分析,A、B层颠倒后B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是氧气浓度
D. 分层固体发酵过程中氧气分布差异显著影响了醋酸菌在不同层次的生长状况
【答案】B
【解析】
【详解】A、醋酸杆菌是好氧细菌,在醋酸发酵阶段需要充足的氧气,醋酸杆菌发酵的适宜温度是30 - 35℃,接种醋酸杆菌后,需将发酵缸置于30-35℃条件下培养,A正确;
B、乳酸菌是厌氧菌,发酵缸中上层氧气含量高,不利于乳酸菌繁殖和发酵,B错误;
C、醋酸杆菌是好氧菌,A、B层颠倒后,B层由下层变为上层,氧气浓度增加,所以B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是氧气浓度,C正确;
D、分层固体发酵过程中,不同层次的氧气分布差异显著(上层氧气多,下层氧气少 ),而醋酸菌是好氧菌,氧气分布差异显著影响了醋酸菌在不同层次的生长状况,从图2中A、B层颠倒后醋酸杆菌密度的变化也可以看出这一点,D正确。
6. 花椰菜(2n=18)种植时容易遭受病菌侵害形成病斑,紫罗兰(2n=14)具有一定的抗病性。科研人员用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白,结果如图2所示。下列叙述正确的是( )
A. 花椰菜和紫罗兰的原生质体能融合,说明两种植株间不存在生殖隔离
B. 图1培育出的杂种植株减数分裂时的细胞中最多含有64条染色体
C. 图1培育杂种植株所用的技术体现了细胞膜具有一定流动性原理、染色体变异和植物细胞具有全能性原理
D. 可将病菌悬浮液均匀喷施于图2中的1和5植株叶片上,一段时间后,测定病斑面积占叶片总面积的百分比,筛选出抗病性强的杂种植株
【答案】C
【解析】
【详解】A、生殖隔离的定义是:不同物种之间在自然状态下不能相互交配,或交配后不能产生可育后代。花椰菜(2n=18)和紫罗兰(2n=14)属于不同物种,自然状态下存在生殖隔离,A错误;
B、花椰菜体细胞染色体数为18,紫罗兰体细胞染色体数为14,经植物体细胞杂交获得的杂种细胞染色体数为18+14=32。减数分裂过程中,染色体数目变化为:间期复制后染色体数仍为32(2n),减数第一次分裂结束后子细胞染色体数变为16(n),减数第二次分裂后期着丝点分裂,染色体数暂时恢复为16,随后末期又变为8。因此减数分裂时细胞中最多含有32条染色体,而非64条,B错误;
C 图1为植物体细胞杂交过程:步骤①为原生质体融合,体现细胞膜具有一定流动性的原理;杂种细胞的染色体数为两个物种体细胞染色体数之和,属于染色体数目变异; 步骤②为植物组织培养,将杂种细胞培育成完整植株,体现植物细胞具有全能性的原理,C正确;
D、根据图谱分析4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质,是杂种植株,可将病菌悬浮液均匀喷施于4、5号杂种植株叶片上,一段时间后,测定病斑面积占叶片总面积的百分比,筛选出抗病性强的杂种植株,但图2中的1植株为花椰菜,不是杂种植株,D错误。
7. 某科研团队利用mRNA工程技术改造来源于骨髓的异体间充质干细胞(MSC),在肿瘤治疗中展现出良好应用前景。下列关于MSC的生物学特性及培养的叙述,正确的是( )
A. MSC体外培养过程中会出现接触抑制现象,细胞铺满培养皿底后会停止分裂增殖
B. 体外培养MSC时需通入5%CO2+95%氧气,通入CO2的目的是刺激细胞呼吸
C. 培养MSC时需要定期更换培养液以清除代谢物,同时倒置培养皿以减少水分蒸发
D. MSC可诱导分化为多种类型的细胞,因此具备极高的临床应用潜力
【答案】A
【解析】
【详解】A、MSC属于正常的动物体细胞,体外培养时具有接触抑制的特性,当细胞铺满培养皿底、细胞间相互接触后,就会停止分裂增殖,A正确;
B、体外培养MSC的气体环境是5%CO2+95%空气,并非95%氧气,通入CO2的作用是维持培养液的pH,而非刺激细胞呼吸,B错误;
C、培养MSC时定期更换培养液是为了清除代谢废物,防止代谢产物积累损伤细胞,但动物细胞培养不需要倒置培养皿,倒置是微生物培养的操作,目的是避免冷凝水滴落污染培养基,动物细胞倒置会使底部贴壁细胞无法接触培养液,C错误;
D、MSC虽可诱导分化为多种类型的细胞,但异体MSC存在免疫排斥、潜在致瘤性等问题,本身并不具备极高的临床应用潜力,题干中也是经过mRNA工程改造后才展现出良好应用前景,该选项因果关系不成立,D错误。
8. 下列关于单克隆抗体制备的正确叙述是( )
A. 将抗原反复注入小鼠体内,从小鼠血清中可分离出单克隆抗体
B. 与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的是浆细胞
C. 选择培养基筛选出的杂交瘤细胞均能稳定分泌所需抗体
D. 进行亲子鉴定时利用的单克隆抗体能识别DNA特定序列
【答案】B
【解析】
【详解】A、单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的,将抗原反复注入小鼠体内,从小鼠血清中获得的是多种抗体的混合物,不是单克隆抗体,A错误;
B、在单克隆抗体制备过程中,与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞的是经过特定抗原免疫的浆细胞,B正确;
C、选择培养基筛选出的杂交瘤细胞,还需要进行克隆化培养和抗体检测,才能筛选出能稳定分泌所需抗体的杂交瘤细胞,C错误;
D、进行亲子鉴定时利用的是DNA分子杂交技术,是依据DNA分子碱基互补配对原则,D错误。
9. 基因工程中常用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。某科研团队拟将抗除草剂基因导入某双子叶植物,以培育抗除草剂植株。下列有关分析错误的是( )
A. PCR扩增的产物常通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定
B. 要将抗除草剂基因插入农杆菌Ti质粒内
C. 可用抗原-抗体杂交法来检测抗除草剂基因是否表达出蛋白质
D. 将抗除草剂基因导入植物时,常用受精卵作为受体细胞
【答案】D
【解析】
【详解】A、PCR扩增的产物为DNA片段,不同长度的DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速率不同,因此常通过琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物,A正确;
B、农杆菌Ti质粒的T-DNA可转移至植物受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上,因此需要将抗除草剂基因插入Ti质粒的T-DNA区域(属于Ti质粒内部),B正确;
C、目的基因表达的蛋白质可作为抗原与对应的特异性抗体发生特异性结合,因此可用抗原-抗体杂交法检测抗除草剂基因是否表达出蛋白质,C正确;
D、植物体细胞具有全能性,将目的基因导入双子叶植物时,通常以体细胞作为受体细胞,经植物组织培养即可获得完整转基因植株,不需要使用受精卵作为受体,D错误。
10. 关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验,下列叙述正确的是( )
A. PCR扩增DNA片段时DNA双链的解聚原理与细胞内相同
B. 耐高温的DNA聚合酶可直接在模板链的3′端从头合成子链
C. 电泳可鉴定不同长度的DNA分子是因为它们在凝胶中的迁移速率不同
D. 染色后的凝胶条带的位置可以反映DNA分子碱基序列的组成
【答案】C
【解析】
【详解】A、细胞内DNA双链解聚依赖解旋酶断裂氢键,PCR扩增时DNA双链解聚依赖高温使氢键断裂,二者原理不同,A错误;
B、耐高温的DNA聚合酶不能从头合成子链,只能从引物的3′端开始延伸子链,反应体系中需要加入引物才能启动子链合成,B错误;
C、DNA分子带负电,在电场作用下向正极迁移,不同长度的DNA分子在凝胶中的迁移速率不同(分子量越小迁移速率越快),因此可通过电泳分离鉴定不同长度的DNA分子,C正确;
D、染色后的凝胶条带的位置仅反映DNA分子的分子量(长度)大小,无法反映DNA分子的碱基序列组成,D错误。
11. 下列有关细胞内DNA的复制与PCR的相关叙述,错误的是( )
A. 都需要DNA聚合酶和解旋酶进行催化
B. 都需要以亲代DNA的两条链分别作为模板
C. 都需要四种脱氧核苷酸作为原料
D. 都遵循相同的碱基互补配对方式
【答案】A
【解析】
【详解】A、细胞内DNA复制需要解旋酶催化DNA双链解开,同时需要DNA聚合酶催化子链合成;PCR技术通过高温(90~95℃)使DNA双链变性解旋,不需要解旋酶,仅需要耐高温的DNA聚合酶,因此二者并非都需要解旋酶,A错误;
B、细胞内DNA复制为半保留复制,以亲代DNA的两条链分别作为模板;PCR过程中DNA解旋后,同样以两条母链为模板各自合成子链,B正确;
C、二者的产物都是DNA,合成DNA的原料均为四种脱氧核苷酸,C正确;
D、二者进行碱基互补配对时都遵循A与T配对、G与C配对的规则,碱基互补配对方式相同,D正确。
12. 载体是基因工程中携带外源DNA片段(目的基因)进入受体细胞的重要运载工具,常见的载体类型主要有基因克隆载体和基因表达载体。下图是利用细菌生产人胰岛素的基本流程示意图,下列相关叙述正确的是( )
A. 重组载体A、重组载体B分别是基因表达载体和基因克隆载体
B. 载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因
C. 必须把目的基因插入重组载体A的启动子和终止子之间
D. 培养细菌A和细菌B的培养基在营养成分和功能上没有明显差异
【答案】B
【解析】
【分析】分析题图:图中重组载体A导入受体菌后随着受体菌的繁殖而扩增,因此是基因克隆载体,而重组载体B导入受体菌后,表达产生胰岛素,因此是基因表达载体。
【详解】A、重组载体A导入受体菌后随着受体菌的繁殖而扩增,因此是基因克隆载体,而重组载体B导入受体菌后,表达产生胰岛素,因此是基因表达载体,A错误;
B、作为运载体必须要具备的条件:含有限制酶的切割位点(便于目的基因的插入)、复制原点(便于目的基因的扩增)及标记基因(便于筛选含有目的基因的受体细胞)等,因此载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因,B正确;
C、培养细菌A的目的是扩增目的基因,不需要获得表达产物,因此目的基因不一定要插入重组载体A的启动子和终止子之间,C错误;
D、培养细菌A的目的是扩增目的基因,培养细菌B的目的是获得胰岛素,因此培养两者的培养基在营养成分和功能上有明显差异,D错误。
故选B。
二、不定项选择题(共4道小题,每题4分,共16分。每题有一个或多个选项符合题目要求,全选对得4分,选对但不全得2分,有错选得0分。)
13. 天然胰岛素易形成多聚体,导致皮下注射后起效缓慢。为获得速效胰岛素,科研人员采用易错PCR技术(通过提高PCR中的碱基错配率,从而得到随机突变的多种基因)对胰岛素基因进行改造并定向筛选,最终利用大肠杆菌生产出不易聚合的速效胰岛素。下列叙述正确的是( )
A. 易错PCR技术可以定向改造胰岛素基因
B. 该技术操作过程中需要耐高温的解旋酶
C. 速效胰岛素的研发运用了蛋白质工程技术
D. 大肠杆菌生产速效胰岛素时不遵循中心法则
【答案】C
【解析】
【详解】A、易错PCR的原理是提高碱基错配率获得随机突变的基因,基因突变具有不定向性,因此该技术不能定向改造胰岛素基因,后续的定向筛选才是定向获得目的性状的环节,A错误;
B、PCR技术利用高温使DNA双链解旋,不需要解旋酶,仅需要耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)参与延伸过程,B错误;
C、蛋白质工程的核心是通过改造或合成基因,对现有蛋白质进行改造以获得符合人类需求的蛋白质,该过程通过改造胰岛素基因获得不易聚合的速效胰岛素,属于蛋白质工程的应用,C正确;
D、大肠杆菌生产速效胰岛素时,需要经过胰岛素基因的转录、翻译过程,该过程属于中心法则的核心内容,遵循中心法则,D错误。
14. 成纤维细胞生长因子20(FGF20)可作为肿瘤标记物,为制备抗FGF20单克隆抗体以用于癌症早期诊断筛查,科研人员设计的流程如图所示。下列分析不正确的是( )
A. 抗原甲为FGF20,一般从正常人体细胞的细胞表面获取
B. ①过程获得的B淋巴细胞均能合成抗FGF20抗体
C. ②过程促进细胞融合可用PEG但不能用灭活的病毒
D. 将抗FGF20单克隆抗体与抗原甲进行杂交,可以用于检测该单克隆抗体的特异性
【答案】ABC
【解析】
【详解】A、若要制备抗FGF20单克隆抗体,需要给小鼠注射的抗原甲为FGF20,但FGF20是肿瘤标记物,主要由肿瘤细胞合成,正常人体细胞中该物质含量极低甚至不含有,因此无法从正常人体细胞表面获取抗原甲,A错误;
B、①过程提取的是免疫小鼠体内的B淋巴细胞,由于小鼠体内存在多种识别不同抗原的B淋巴细胞,仅受FGF20刺激分化形成的浆细胞可以合成抗FGF20抗体,并非所有B淋巴细胞都具备该能力,B错误;
C、②是动物细胞融合过程,聚乙二醇(PEG)、电融合法、灭活的病毒都可作为动物细胞融合的诱导方法,因此该过程可以使用灭活的病毒促进细胞融合,C错误;
D、抗原和抗体的结合具有特异性,将制备的抗FGF20单克隆抗体与抗原甲进行杂交,若能发生特异性结合,即可证明该单克隆抗体的特异性,D正确。
15. 尿素是一种重要的农业肥料,尿素分解菌可合成脲酶,利用以尿素为唯一氮源的选择培养基可从土壤中分离尿素分解菌并进行计数,科研人员取0.1 g土壤分别稀释103~107倍,将0.1 mL不同稀释倍数的土壤稀释液接种在固体培养基上,
在相同的培养条件下得到如表数据。下列叙述正确的是( )
稀释倍数
103
104
105
106
107
菌落
数/个
1号平板
478
367
270
26
5
2号平板
496
354
268
20
8
3号平板
509
332
272
29
3
A. 利用稀释涂布平板法可将稀释液中的菌体完全分离,一个菌落对应一个菌体
B. 每克土壤中尿素分解菌的数量是2.7×108个
C. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌均为尿素分解菌
D. 若在显微镜下利用细菌计数板直接计数,则统计结果一般比实际活菌数多
【答案】BD
【解析】
【详解】A、利用稀释涂布平板法不能将稀释液中的菌体完全分离,可能会出现两个或多个菌体连在一起,A错误;
B、为减小误差一般统计菌落数为30~300的平板,该实验中稀释倍数为105的平板最适合用来统计活菌数,则每克土壤中尿素分解菌的数量=(270+268+272)÷3÷0.1×105=2.7×108个,B正确;
C、以尿素为唯一氮源的选择培养基上,能生长的菌大多为尿素分解菌,但并非全部,少数固氮微生物可利用空气中的氮气作为氮源,也能在该培养基上生长,C错误;
D、若在显微镜下利用细菌计数板直接计数,不能区分活菌和死菌,则统计结果一般比实际活菌数多,D正确。
16. 查尔酮异构酶(CHI)普遍存在于高等植物中,有助于提高植物的耐盐碱性。科研人员构建了CHI基因与质粒的重组表达载体,并将其导入酿酒酵母中,使酿酒酵母的耐盐碱性大大提高,下列叙述错误的是( )
注:EcoRⅠ、KpnⅠ和PstⅠ是三种限制酶,箭头表示酶的切割位点。
A. 图示质粒上的卡那霉素抗性基因可作为标记基因
B. 构建重组表达载体时,选择的限制酶是KpnⅠ和PstⅠ
C. 启动子作为DNA聚合酶识别和结合的部位,驱动CHI基因转录
D. 可用适宜浓度的Mg2+溶液处理酿酒酵母,以提高转化效率
【答案】CD
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。
(4)目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、导入含有卡那霉素抗性基因质粒的微生物可以在含有卡那霉素的培养基中生长,所以卡那霉素抗性基因可作为标记基因,A正确;
B、构建基因表达载体,需要利用相同的限制酶来切割含有目的基因的DNA分子和载体质粒,由于含有CHI基因的DNA分子和载体质粒上都具有Kpn I 、PstⅠ酶的切割位点,选择的限制酶是KpnⅠ和PstⅠ(不能选EcoR I,切点在启动子之前),B正确;
C、启动子作为RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动CHI基因转录,C错误;
D、为了提高基因表达载体导入酵母细胞的转化效率,常采用的方法是 用Ca2+( CaCl2溶液)处理酵母细胞,D错误。
故选CD。
第II卷
三、非选择题(共60分)
17. 下图为果酒与果醋发酵装置示意图,请据图回答下列问题。
(1)酿造葡萄酒时,在榨汁前,要先对葡萄进行_____(填“先去除枝梗后清洗”“先清洗后去除枝梗”),该步骤可以避免去除枝梗时引起葡萄破损,增加被污染的机会。
(2)用体积分数为_____的酒精对上述装置进行消毒后,再装入葡萄汁,将发酵装置放在18~30 的环境中,每天拧开气阀b多次,排出发酵过程产生的大量气体。装置中排气口设计成弯曲形状的目的_____。
(3)10d之后,利用酸性条件下的_____对出料口c 取样的物质进行检验。若呈_____色,则说明产生了酒精。
(4)产生酒精后,在发酵液中加入醋酸菌,然后将装置所处的环境温度适当_____(填升高或降低),并适时打开气阀向发酵液中充气。充气的原因是_____。
【答案】(1)先清洗后去除枝梗
(2) ①. 70% ②. 防止排气时空气中杂菌污染
(3) ①. 重铬酸钾 ②. 灰绿色
(4) ①. 升高 ②. 醋酸菌是好氧菌且酒精转变为乙酸需要氧气
【解析】
【小问1详解】
若先去除枝梗,会造成葡萄表皮破损,杂菌更容易侵入葡萄汁引发污染,因此需要先清洗葡萄,再去除枝梗。
【小问2详解】
体积分数为70%的酒精对发酵装置的消毒效果最优,既能杀灭表面微生物,也不会因浓度过高使菌体表面蛋白快速凝固、阻碍酒精渗入灭菌;弯曲的排气口可以防止排气时空气中微生物的污染(防止杂菌污染)。
【小问3详解】
酸性条件下的重铬酸钾可与酒精发生特征性显色反应,颜色从橙色变为灰绿色,是检验酒精的常用试剂。
【小问4详解】
醋酸菌的最适发酵温度为30~35℃,高于酵母菌酒精发酵的18~30℃,因此需要升高温度;醋酸菌是好氧菌且酒精转变为乙酸需要氧气,因此要适时向发酵装置中充气,需要打开气阀通入空气。
18. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉,其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限,难以满足市场化需求。因此,目前一般通过植物细胞工程进行培养,具体过程如图所示,其中的数字序号代表处理或生理过程。请回答下列相关问题。
(1)进行①过程前要对狼爪瓦松植株甲幼嫩的叶进行消毒处理,所用的试剂为酒精和质量分数为5%左右的_____溶液。图中通过②③培养获得植株乙所利用技术的细胞学原理是_____,选用植株甲幼嫩的叶进行过程②③的原因是_____。过程②③的接种操作必须在_____旁进行。
(2)⑤过程需要用_____酶进行处理,通过植物细胞工程对狼爪瓦松培养,获得药物黄酮类化合物,下列相关叙述错误的是_____。
A. 过程③通常先在生长素与细胞分裂素比例高的培养基中培养
B. 过程④用射线处理后,经筛选可能获得目的植株
C. 所得三种植株中丙的遗传信息与甲相同
【答案】(1) ①. 次氯酸钠 ②. 植物细胞的全能性 ③. 幼嫩的叶细胞分化程度低,全能性高 ④. 酒精灯火焰
(2) ①. 纤维素酶、果胶酶 ②. AC
【解析】
【小问1详解】
进行外植体消毒时,常用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液。过程②③是植物组织培养,原理是植物细胞的全能性(细胞包含发育成完整植株的全套遗传物质)。选用幼嫩的叶是因为其细胞分化程度低,全能性高,易培养。接种操作需在酒精灯火焰旁进行,每次使用后的器械都要灭菌,避免杂菌污染。
【小问2详解】
⑤表示去除细胞壁获得原生质体,该过程需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。
A、生长素与细胞分裂素比值高时,利于生根,该比值低时,利于生芽。过程③是再分化,需先生芽再生根,所以需要先在生长素与细胞分裂素比例低的培养基中培养,A错误;
B、过程④(诱变处理)用射线等处理愈伤组织,经筛选可能获得高产黄酮类化合物的目的植株,B正确;
C、植株丙是诱变得到的,遗传信息与甲不同,C错误。
19. 类胡萝卜素具有预防、改善夜盲症和延缓衰老的功能。番茄红素β-环化酶(LCYB)是类胡萝卜素生物合成途径中的关键酶,在桂花中该酶的含量较高。某科研团队将“堰虹桂”(桂花品种)的LCYB基因转入烟草,获得了高产类胡萝卜素烟草。下表是扩增LCYB基因的引物序列,和XhoI和SmaI的识别序列及酶切位点。回答下列问题:
引物名称
引物序列(5'~3')
LCYB-F
ATGGATACTTTGCTGAAAACTCAT
LCYB-R
TCATTCTTATCCTGTACTAAATTG
(1)LCYB基因克隆。提取“堰虹桂”的总RNA,经_______得到cDNA,利用PCR技术扩增LCYB基因,若在PCR反应体系中加入1个LCYB基因和其他充足的原料,经过4个循环,共有_____个引物参与LCYB基因的合成。经该方法获得的目的基因片段缺乏______,因此不能直接在受体细胞中表达。
(2)构建基因表达载体。将扩增的目的基因插入质粒的XhoI和SmaI酶切位点之间,为保证目的基因与质粒准确连接,应对目的基因进行的操作是______。选用两种限制酶分别处理质粒和含目的基因的DNA片段的目的是_____(答两点)。
SmaI
XhoI
-CCCGGG-
-GGGCCC-
-CTCGAG-
-GAGCTC-
(3)将目的基因导入受体细胞。为获得LCYB基因的烟草,应选择______法完成目的基因导入,该方法须将目的基因连接在Ti质粒的______片段上。
【答案】(1) ①. 逆转录 ②. 30 ③. 启动子和终止子
(2) ①. 在PCR引物5'端分别引入与载体对应的Sma I和Xho I酶识别序列 ②. 使目的基因两端产生不同末端,实现定向连接,并降低载体自连、目的基因自连、目的基因与载体反向连接的概率
(3) ①. 农杆菌转化 ②. T-DNA
【解析】
【小问1详解】
以RNA为模板合成cDNA的过程为逆转录,由逆转录酶催化完成;PCR扩增时每条新合成的子链都需要1个引物,4次循环共得到24=16个双链DNA分子,总单链数为32,减去初始的2条模板母链,共需要30个引物;cDNA由成熟mRNA逆转录得到,仅包含编码区序列,缺少启动子、终止子等转录必需的调控序列,因此无法直接在受体细胞中表达。
【小问2详解】
构建基因表达载体时要将扩增的目的基因插入质粒的Xho I和Sma I酶切位点之间,为保证目的基因与质粒准确连接,需要在PCR引物5'端分别引入与载体对应的Sma I和Xho I酶识别序列。双酶切会使目的基因两端产生不同末端,实现定向连接,并降低载体自连、目的基因自连、目的基因与载体反向连接的概率。
【小问3详解】
农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法;农杆菌Ti质粒上的T-DNA片段可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上,因此需将目的基因插入T-DNA片段中,才能随其整合到烟草基因组中稳定表达。
20. 非洲猪瘟病毒是一种双链DNA病毒,可引起急性猪传染病。基因A编码该病毒的主要结构蛋白A,其在病毒侵入宿主细胞和诱导机体免疫应答过程中发挥重要作用。回答下列问题:
(1)制备特定抗原
获取基因A,构建重组质粒(该质粒的部分结构如图所示)。重组质粒的必备元件包括目的基因、限制酶切割位点、标记基因、启动子、复制原点和______;为确定基因A已连接到质粒中且插入方向正确,应选用图中的一对引物______对待测质粒进行PCR扩增,预期扩增产物的片段大小为______bp。
(2)制备抗蛋白A单克隆抗体
用蛋白A对小鼠免疫后,将免疫小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时,用______来诱导,该方法是动物细胞融合特有的。选择培养时,对杂交瘤细胞进行克隆化培养和______,多次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。体外培养或利用小鼠大量生产的抗蛋白A单克隆抗体,可用于非洲猪瘟的早期诊断。
【答案】(1) ①. 终止子 ②. P1和P3 ③. 782
(2) ①. 灭活的病毒 ②. 抗体检测
【解析】
【小问1详解】
重组质粒的必备元件包括目的基因、限制酶切割位点、标记基因、启动子和终止子,复制原点等,终止子能终止转录过程。 要确定基因A已连接到质粒中且插入方向正确,应选用引物P1和P3。因为P1与基因A下游的非编码区互补配对,P3与基因A上游且靠近启动子的区域互补配对,这样扩增的片段大小为200+582=782bp。
【小问2详解】
诱导动物细胞融合的常用方法有聚乙二醇(PEG)融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等,其中灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的。选择培养时,对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测,多次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
21. 通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制合成的酶能破坏细胞壁使番茄软化,不耐储存。科学家将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞,获得耐储存番茄,作用机理如图。回答下列问题。
(1)基因工程中,抗多聚半乳糖醛酸酶基因称为______。
(2)科学家用Ti质粒将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞的______上。
(3)抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞后,通过______技术培育出转基因番茄植株。转基因番茄耐储存的机理是多聚半乳糖醛酸酶基因表达的______过程受阻。如果在转基因番茄中采用PCR技术检测到了抗多聚半乳糖醛酸酶基因,但番茄果实依然软化不耐储存,则最可能的原因是_____。
【答案】(1)目的基因
(2)染色体(或细胞核)DNA
(3) ①. 植物组织培养 ②. 翻译 ③. 抗多聚半乳糖醛酸酶基因没有转录出mRNA2
【解析】
【小问1详解】
本实验的目的是获得耐储存番茄,所以抗多聚半乳糖醛酸酶基因是目的基因。
【小问2详解】
Ti质粒上的T-DNA片段有转移的能力,可借助T-DNA将目的基因导入番茄细胞的染色体(细胞核DNA)上。
【小问3详解】
将植物细胞培育成植株需要用到植物组织培养技术;从图中看出抗多聚半乳糖醛酸酶基因产生的mRNA2和多聚半乳糖醛酸酶基因产生的mRNA1结合,从而阻止了翻译过程;检测目的基因是否导入细胞常采用的方法是DNA分子杂交,如果检测到了抗多聚半乳糖醛酸酶基因(说明目的基因已导入细胞),但番茄果实依然软化不耐储存,则最可能的原因是没有产生mRNA2(或抗多聚半乳糖醛酸酶基因没有转录)。
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