精品解析：吉林省吉林市永吉县第四中学2025-2026学年高二下学期期中生物试卷

高二生物测试卷 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 随着人们对传统发酵的认识，发酵工程逐步形成，以下叙述正确的是（　　） A. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵 B. 腌制泡菜时，乳酸菌发酵产生了乳酸和二氧化碳 C. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 D. 制作果酒利用了酵母菌在无氧条件下产生酒精，制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生乙酸 2. 下列关于微生物培养的叙述，错误的是（　　） A. 获得纯培养物的关键是防止外来杂菌入侵 B. 划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落 C. 高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子和芽孢 D. 培养时应把接种微生物的培养皿和未接种的培养皿一起培养，作为对照 3. 发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的基本环节如图所示。下列说法正确的是（　　） A. 菌种的选育是发酵工程的中心环节，要严格控制发酵条件 B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在后发酵阶段完成 C. 发酵结束后，可通过过滤、沉淀等方法分离出微生物细胞本身 D. 乳酸菌的代谢产物井冈霉素可以用来生产微生物农药 4. 如图是通过植物体细胞杂交技术获得的“番茄—马铃薯”植株的技术流程图，下列说法正确的是（ ） A. 图中过程②表示再分化的过程 B. 植物体细胞融合完成的标志是原生质体融合 C. 已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄-马铃薯”属于三倍体 D. 过程④和过程⑤均需特定激素进行诱导 5. 紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁，成为世界上首例药用植物细胞工程产品。下列说法错误的是（ ） A. 紫草宁是紫草细胞的次生代谢物 B. 可以利用液体培养基进行工厂化生产 C. 紫草宁的工厂化生产需要先去除细胞壁 D. 紫草宁的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制 6. 科研人员培育的首只猫科克隆动物“平安”健康诞生。代孕母猫和“平安”的各项生理指标皆在正常范围内，实验流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 过程①采用了细胞工程中的胚胎细胞核移植技术 B. 过程②模拟了哺乳动物的早期胚胎发育的过程 C. 通常将重组细胞置于含95%O2和5%CO2的培养箱中进行培养 D. 胚胎移植的时期应选择囊胚或原肠胚阶段 7. 治疗性克隆有望解决供体器官短缺和器官移植出现的排异反应，下图表示治疗性克隆的部分过程。下列有关叙述正确的是（ ） A. 过程①表示细胞核移植 B. 细胞A常用受精卵 C. 过程②表示脱分化过程 D. 胚胎干细胞只分化不增殖 8. 下列关于“克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊”的说法，合理的是（　　） A. 它们的遗传物质都只来自一个亲本 B. 它们在形成过程中都需要用到胚胎移植技术 C. 它们是通过相同的生殖方式获得亲本的优良性状的 D. 在培育过程中，都用到了动物细胞培养技术、核移植技术和胚胎移植技术 9. 下列有关胚胎发育的叙述，错误的是（ ） A. 受精过程的结束即胚胎发育的开始 B. 胚胎发育的初期是在输卵管中进行的 C. 桑葚胚期的胚胎从透明带中伸展出来，称为孵化 D. 高等动物早期胚胎发育的顺序是受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚 10. 胚胎移植、胚胎分割过程中很多操作环节都需进行检查，下列叙述错误的是（ ） A. 体外受精后需检查受精状况和受精卵的发育能力 B. 进行胚胎移植前需要对供体和受体进行免疫检查 C. 胚胎移入受体母畜后需对其进行是否妊娠的检查 D. 胚胎分割时可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定 11. 下列生物工程的应用，不需要进行检测和筛选的是（ ） A. 制备单克隆抗体的过程 B. 对植物的茎尖进行组织培养，大规模培育优良品种 C. 利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜—甘蓝” D. 从土壤中分离分解尿素的细菌进而生产脲酶的过程 12. 如图为基因表达载体的模式图，下列叙述错误的是（ ） A. 构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶 B. 终止子位于基因的下游，使翻译在所需要的地方停止下来 C. 构建成功后可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代 D. 抗生素抗性基因作为标记基因，可检测受体细胞中是否导入了目的基因 13. 用质粒(图1)和含目的基因的DNA片段(图2)构建基因表达载体获得转基因大肠杆菌，下列叙述错误的是（ ） A. 若通过PCR技术获取该目的基因，应该选用引物甲和引物丙 B. 在受体细胞中，氨苄青霉素抗性基因和目的基因可同时表达 C. 若将基因表达载体导入受体细胞中，需先用Ca2＋处理大肠杆菌 D. 利用质粒和目的基因构建表达载体，应选用BclⅠ和HindⅢ剪切 14. 下列关于基因工程各种工具的叙述，错误的是（ ） A. E •coliDNA连接酶只能“缝合”黏性末端 B. 限制酶主要来自原核生物，限制酶一般不切割自身DNA C. 载体上有一至多个限制性内切核酸酶的切割位点 D. 限制酶断开磷酸二酯键，T4DNA连接酶能恢复磷酸二酯键 15. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是（　　） A. ②的构建需要有DNA聚合酶参与 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. ④的染色体上含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状 D. ⑤表现出抗虫性状表明植株发生了可遗传变异 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 科研人员利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗药性形成与环境的关系，实验过程如图所示。待3号培养基上长出菌落后，在2号培养基上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上操作。下列叙述正确的有（　　） A. 采用平板划线法将4号培养液中的大肠杆菌接种在相应的选择培养基上 B. 链霉素的选择作用导致大肠杆菌产生了抗链霉素的性状 C. 上述操作中重复实验的目的是进一步纯化抗链霉素的菌株及增大目的菌株的浓度 D. 在操作规范前提下，5号培养基中观察到的菌落数往往小于涂布时吸取的菌液中的活菌数量 17. 安巴韦单抗/罗米司韦单抗注射液是我国首个全人源抗新冠病毒特效药，下图是一种制备抗新冠病毒全人源单克隆抗体的主要技术流程。相关叙述正确的是（　　） A. 该过程中利用了细胞的全能性原理 B. 过程b中，常用选择培养基筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞 C. 过程c中，需要提供葡萄糖等营养物质、O2和CO2等气体 D. 使用全人源单抗治疗新冠可以大大降低异源抗体对人体的副作用 18. 普通水稻是二倍体，为快速培育抗除草剂的水稻，科研工作者采用下图所示方法进行育种。下列说法正确的是（　　） A. 经①获得的单倍体幼苗，其理论依据是细胞的全能性 B. 经①得到的幼苗和经④得到的幼苗，其染色体数目相同 C. 经②③获得的部分叶片保持绿色的幼苗，即为目标植株 D. 经④⑤获得的植株，具有稳定遗传的抗除草剂性状 19. 下列关于DNA片段的扩增及电泳鉴定的说法，错误的是（ ） A. PCR过程中，Taq DNA聚合酶只能将核苷酸添加到引物的3′端 B. 电泳鉴定可以通过DNA片段在凝胶中的迁移距离来判断其大小 C. 在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子的大小和构象等有关 D. 凝胶中的DNA分子通过染色，可以在红外灯下被检测出来 20. 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，如图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1-4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述正确的是（ ） A. 若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏4个磷酸二酯键 B. 若受体细胞为大肠杆菌，则需先用Ca2+处理，更利于实现转化 C. 若用PCR技术获取目的基因，则图中的1、4分别是2种引物结合的位置 D. 在PCR仪中根据选定的引物至少需经过6次循环才可获得32个符合要求的目的基因 三、非选择题：本题共5 小题，共55 分。 21. 图2表示苹果醋的简易制作装置和制作流程。发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图1所示，据图回答下列问题： （1）用图2装置酿酒结束后，若要直接转入果醋发酵，改变的环境条是_____。 （2）图1整个发酵过程的中心环节是_____。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH在灭菌_____（填“前”或“后”）调至酸性。 （3）对产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了_____法，其可以用来计数的原理为_____。 22. 某科研团队尝试利用植物体细胞杂交技术培育抗盐碱的番茄新品种（普通番茄和野生耐盐番茄均是二倍体生物）。以下是他们的实验流程模式图。回答下列问题： （1）普通番茄细胞和野生耐盐番茄细胞外面的细胞壁阻碍着细胞间的杂交。在进行体细胞杂交之前，先利用_____酶去除这层细胞壁，获得原生质体。制备原生质体的过程不能在无菌水中进行，这是为了防_____。 （2）④过程是_____，即失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成_____。之后经再分化，能重新分化成芽、根等器官。这两个过程中，植物激素中_____是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。 （3）植株G是_____倍体植物，获得植物体G的原理是_____。 23. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如下图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_____。 （2）步骤①常用方法包括_____融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。 （3）步骤②的细胞必须经过步骤③_____和_____才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。体外培养时，首先应保证其处于_____的环境。在使用合成培养基时通常需加入_____。 （4）单克隆抗体的优点是能_____、与特定抗原发生特异性结合、并且可大量制备。单克隆抗体是ADC中的_____（填“a”或“b”）部分。 （5）研究发现，ADC在患者体内的作用如下图2所示。    ①ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致_____。 ②ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖于_____原理。 24. 多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育转fat1基因猪，操作过程如图所示。图中GFP基因表达出绿色荧光蛋白。据图回答下列问题： （1）用PCR技术在体外扩增目的基因应用的是_____原理，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、_____（答出2点）等。 （2）由图可知，在构建基因表达载体时，为克服目的基因自身环化，即线性DNA的末端相互连接形成圆环，以及便于目的基因与载体的连接，切割含目的基因的DNA和载体的限制酶应选用_____和_____。 （3）构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是_____。除GFP基因外，未标注出的必需元件还有 _____。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物测试卷 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 随着人们对传统发酵的认识，发酵工程逐步形成，以下叙述正确的是（　　） A. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵 B. 腌制泡菜时，乳酸菌发酵产生了乳酸和二氧化碳 C. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 D. 制作果酒利用了酵母菌在无氧条件下产生酒精，制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生乙酸 【答案】D 【解析】 【详解】A、发酵工程与传统发酵技术均利用微生物进行发酵，A错误； B、乳酸菌为厌氧型微生物，其发酵过程仅产生乳酸，不产生二氧化碳，B错误； C、单细胞蛋白指微生物菌体本身（如酵母菌），可直接作为饲料或食品添加剂，无需从细胞中提取特定物质，C错误； D、酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵产生乙醇（酒精）；醋酸菌为好氧菌，需在有氧条件下将乙醇氧化为乙酸（醋酸），D正确。 故选D。 2. 下列关于微生物培养的叙述，错误的是（　　） A. 获得纯培养物的关键是防止外来杂菌入侵 B. 划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落 C. 高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子和芽孢 D. 培养时应把接种微生物的培养皿和未接种的培养皿一起培养，作为对照 【答案】B 【解析】 【分析】平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 【详解】A、获得纯净培养物的关键是无菌操作，防止外来杂菌入侵；A正确； B、划线分离是通过连续划线实现的，因而菌落在培养基上的分布是不均匀的，在划线的最后区域可以得到的单菌落，B错误； C、高温灭菌的目的是高温杀死一切微生物，包括芽孢和孢子，C正确； D、培养时应把接种微生物的培养皿和未接种的培养皿一起培养，作为对照，用于验证培养基是否合格，D正确。 故选B。 3. 发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的基本环节如图所示。下列说法正确的是（　　） A. 菌种的选育是发酵工程的中心环节，要严格控制发酵条件 B. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在后发酵阶段完成 C. 发酵结束后，可通过过滤、沉淀等方法分离出微生物细胞本身 D. 乳酸菌的代谢产物井冈霉素可以用来生产微生物农药 【答案】C 【解析】 【详解】A、发酵罐中发酵是发酵工程的中心环节，要严格控制发酵条件，A错误； B、啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在主发酵阶段完成，B错误； C、如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥得到产品，如果是代谢产物则不用过滤、沉淀的方法获取，C正确； D、井冈霉素并非由乳酸菌产生，而是由放线菌产生，D错误。 4. 如图是通过植物体细胞杂交技术获得的“番茄—马铃薯”植株的技术流程图，下列说法正确的是（ ） A. 图中过程②表示再分化的过程 B. 植物体细胞融合完成的标志是原生质体融合 C. 已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄-马铃薯”属于三倍体 D. 过程④和过程⑤均需特定激素进行诱导 【答案】D 【解析】 【详解】A、图中的过程②表示人工诱导原生质体融合，A错误； B、植物体细胞融合完成的标志是产生新的细胞壁，B错误； C、由于番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，因此植物体细胞杂交得到的“番茄－马铃薯”属于异源六倍体，C错误； D、④⑤过程为脱分化和再分化过程，需要细胞分裂素和生长素进行诱导，D正确。 故选D。 5. 紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁，成为世界上首例药用植物细胞工程产品。下列说法错误的是（ ） A. 紫草宁是紫草细胞的次生代谢物 B. 可以利用液体培养基进行工厂化生产 C. 紫草宁的工厂化生产需要先去除细胞壁 D. 紫草宁的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制 【答案】C 【解析】 【详解】A、紫草宁是紫草细胞通过次生代谢产生的物质，次生代谢物通常在细胞生长停滞期合成，A正确； B、植物细胞培养生产次生代谢物通常采用液体培养基（如细胞悬浮培养），便于物质交换和规模化生产，B正确； C、紫草宁的工厂化生产基于植物细胞培养技术，细胞壁未被去除，去除细胞壁是制备原生质体的步骤，C错误； D、工厂化生产通过人工控制环境条件，减少对自然资源的依赖，不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制，D正确。 故选C。 6. 科研人员培育的首只猫科克隆动物“平安”健康诞生。代孕母猫和“平安”的各项生理指标皆在正常范围内，实验流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 过程①采用了细胞工程中的胚胎细胞核移植技术 B. 过程②模拟了哺乳动物的早期胚胎发育的过程 C. 通常将重组细胞置于含95%O2和5%CO2的培养箱中进行培养 D. 胚胎移植的时期应选择囊胚或原肠胚阶段 【答案】B 【解析】 【分析】1、生物体通过无性繁殖所生成的群体或个体称为克隆，由动物体内一个细胞经过无性生殖过程进而发育形成的动物个体为克隆动物。 2、题图分析：流程图表示克隆猫诞生的实验过程，①表示细胞核移植技术，②表示早期胚胎培养技术。 【详解】A、过程①采用了动物细胞工程中的体细胞核移植技术，A错误； B、过过程②模拟了哺乳动物的早期胚胎发育的过程，将重组细胞培养成囊胚，B正确； C、通常将重组细胞置于含95%空气+5%CO2的培养箱中进行培养，C错误； D、胚胎移植的时期应选择桑椹胚或囊胚阶段，D错误。 故选B。 7. 治疗性克隆有望解决供体器官短缺和器官移植出现的排异反应，下图表示治疗性克隆的部分过程。下列有关叙述正确的是（ ） A. 过程①表示细胞核移植 B. 细胞A常用受精卵 C. 过程②表示脱分化过程 D. 胚胎干细胞只分化不增殖 【答案】A 【解析】 【分析】分析题图：图示表示治疗性克隆的过程，该过程利用了动物细胞核移植技术，该技术体现了动物细胞核的全能性；图中①表示细胞核移植，②过程表示胚胎干细胞的分裂和分化，由胚胎干细胞发育成组织。 【详解】A、据图可知，过程①表示细胞核移植，A正确； B、细胞A通常为去核的卵母细胞，B错误； C、过程②表示胚胎干细胞的分裂和分化过程，C错误； D、胚胎干细胞具有增殖和分化的能力，D错误。 故选A。 8. 下列关于“克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊”的说法，合理的是（　　） A. 它们的遗传物质都只来自一个亲本 B. 它们在形成过程中都需要用到胚胎移植技术 C. 它们是通过相同的生殖方式获得亲本的优良性状的 D. 在培育过程中，都用到了动物细胞培养技术、核移植技术和胚胎移植技术 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫“受体”。通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代 【详解】A、克隆羊是用核移植技术得到的，其遗传物质分别来自提供细胞核和去核的卵细胞的亲本，试管羊是借助试管动物技术获得的，需依次进行体外受精、早期胚胎的培养、胚胎移植等过程，其遗传物质来自有性生殖的两个亲本，转基因羊是基因工程的产物，其遗传物质来自有性生殖的两个亲本和提供目的基因的个体，A错误； D、通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代，B正确； C、克隆羊属于无性生殖范畴，试管羊和转基因羊的培育均是通过有性生殖获得，C错误； D、在培育试管羊和转基因羊的过程中，没有用到核移植技术，D错误。 故选B。 9. 下列有关胚胎发育的叙述，错误的是（ ） A. 受精过程的结束即胚胎发育的开始 B. 胚胎发育的初期是在输卵管中进行的 C. 桑葚胚期的胚胎从透明带中伸展出来，称为孵化 D. 高等动物早期胚胎发育的顺序是受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎发育的过程：受精卵→卵裂期→桑葚胚→囊胚→原肠胚→幼体。 【详解】AB、卵子和精子在输卵管完成受精后，发育也就开始了，因此胚胎发育的初期是在输卵管中进行的，AB正确； C、早期胚胎发育过程中，囊胚期由于细胞增殖使细胞数量增多，且出现了囊胚腔，因此体积进一步扩大，会从透明带中伸展出来，这一过程称孵化，C错误； D、高等动物早期胚胎发育的顺序是受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚，D正确。 故选C。 10. 胚胎移植、胚胎分割过程中很多操作环节都需进行检查，下列叙述错误的是（ ） A. 体外受精后需检查受精状况和受精卵的发育能力 B. 进行胚胎移植前需要对供体和受体进行免疫检查 C. 胚胎移入受体母畜后需对其进行是否妊娠的检查 D. 胚胎分割时可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体；用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、哺乳动物的精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力，A正确； B、代孕母体对移植的胚胎基本上不会发生排斥反应，不需要进行免疫检查，B错误； C、胚胎移植入子宫不代表妊娠成功，故需对其进行是否妊娠检查，C正确； D、滋养层细胞将来发育成胎膜胎盘，胚胎移植前，可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定，不会影响胚胎的发育，D正确。 故选B。 11. 下列生物工程的应用，不需要进行检测和筛选的是（ ） A. 制备单克隆抗体的过程 B. 对植物的茎尖进行组织培养，大规模培育优良品种 C. 利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜—甘蓝” D. 从土壤中分离分解尿素的细菌进而生产脲酶的过程 【答案】B 【解析】 【分析】现代生物技术的应用中，有许多技术是需要筛选和检测的，如制备单克隆抗体时，需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，还需要进行抗体阳性检测得到能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞；植物体细胞杂交过程中，需要筛选出杂种细胞进行组织培养；转基因技术中，需要筛选重组子和检测目的基因是否导入和表达。 【详解】A、将鼠的骨髓瘤细胞与经抗原刺激的B淋巴细胞融合，需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，还需进行抗体阳性检测，得出能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，A错误； B、对植物的茎尖进行组织培养，获得脱毒苗，大规模培育优良品种，不需要进行检测与筛选，B正确； C、利用植物细胞工程技术培育“萝卜-甘蓝”时，需要筛选出“萝卜-甘蓝”杂种细胞进行培养，C错误； D、从土壤中分离分解尿素的细菌时，需要用尿素作为唯一的碳源进行筛选，进而生产脲酶的过程，D错误。 故选B。 12. 如图为基因表达载体的模式图，下列叙述错误的是（ ） A. 构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶 B. 终止子位于基因的下游，使翻译在所需要的地方停止下来 C. 构建成功后可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代 D. 抗生素抗性基因作为标记基因，可检测受体细胞中是否导入了目的基因 【答案】B 【解析】 【分析】基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。 【详解】A、首先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子，A正确； B、终止子位于基因的下游，作用是使转录在相应的地方停止，不是使翻译在所需要的地方停止下来，B错误； C、基因表达载体的构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，C正确； D、抗生素抗性基因作为标记基因，标记基因便于目的基因的鉴定和筛选，可检测受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。 故选B。 【点睛】 13. 用质粒(图1)和含目的基因的DNA片段(图2)构建基因表达载体获得转基因大肠杆菌，下列叙述错误的是（ ） A. 若通过PCR技术获取该目的基因，应该选用引物甲和引物丙 B. 在受体细胞中，氨苄青霉素抗性基因和目的基因可同时表达 C. 若将基因表达载体导入受体细胞中，需先用Ca2＋处理大肠杆菌 D. 利用质粒和目的基因构建表达载体，应选用BclⅠ和HindⅢ剪切 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、根据图2中子链延伸方向，若通过PCR技术大量扩增该目的基因，应该选用引物甲和引物丙，A正确； B、在受体细胞中，插入目的基因时氨苄青霉素抗性基因被破坏，不能和目的基因同时表达，B错误； C、若将基因表达载体导入受体细胞大肠杆菌时，需用钙离子等处理，使其处于感受态，C正确； D、图1中BamH I同时破坏两种抗性基因，不能选用，故图2中目的基因左侧只能选Bcl I，而质粒上没有目的基因右侧Sau 3A的切点，两者都有Hind Ⅲ的切点，为了防止目的基因与质粒随意连接，故质粒和目的基因构建表达载体，应选用Bcl Ⅰ和Hind Ⅲ剪切，D正确。 故选B。 14. 下列关于基因工程各种工具的叙述，错误的是（ ） A. E •coliDNA连接酶只能“缝合”黏性末端 B. 限制酶主要来自原核生物，限制酶一般不切割自身DNA C. 载体上有一至多个限制性内切核酸酶的切割位点 D. 限制酶断开磷酸二酯键，T4DNA连接酶能恢复磷酸二酯键 【答案】A 【解析】 【详解】A、在基因工程操作中，DNA 连接酶主要有两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E•coliDNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来 的，称为T4DNA连接酶。这两类酶都能将双链DNA片段 “缝合”起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键，但E.coli DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于T4 DNA连接酶，A错误； B、限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，细胞内含有的限制酶一般不对自身DNA进行剪切，只切割外源DNA，这是在长期的进化过程中形成的一种保护，B正确； C、载体上有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段（基因）插入其中，C正确； D、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键，D正确。 15. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是（　　） A. ②的构建需要有DNA聚合酶参与 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. ④的染色体上含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状 D. ⑤表现出抗虫性状表明植株发生了可遗传变异 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程的工具酶包括限制酶和DNA连接酶，农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对大部分单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T﹣DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上．目的基因导入受体细胞后需要进行检测和鉴定，才能确定其是否导入或成功表达。 【详解】A、重组质粒的构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶参与，DNA聚合酶一般用于DNA复制过程，A错误； B、③侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到棉花细胞④的染色体上，B错误； C、如果受体细胞的染色体上若含抗虫基因，但不代表该基因就一定成功表达，因此不能确定⑤是否表现出抗虫性状，C错误； D、⑤只要表现出抗虫性状就表明该基因工程操作成功，基因工程的原理是基因重组，说明该植株发生了可遗传变异，D正确。 故选D。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 科研人员利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗药性形成与环境的关系，实验过程如图所示。待3号培养基上长出菌落后，在2号培养基上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上操作。下列叙述正确的有（　　） A. 采用平板划线法将4号培养液中的大肠杆菌接种在相应的选择培养基上 B. 链霉素的选择作用导致大肠杆菌产生了抗链霉素的性状 C. 上述操作中重复实验的目的是进一步纯化抗链霉素的菌株及增大目的菌株的浓度 D. 在操作规范前提下，5号培养基中观察到的菌落数往往小于涂布时吸取的菌液中的活菌数量 【答案】CD 【解析】 【详解】A、由图可知，4号培养液中的大肠杆菌接种在相应选择培养基上的方法是稀释涂布平板法，A错误； B、药物（链霉素）不能使细菌产生抗性，而只是将原已存在的抗性突变菌筛选保留下来，B错误； C、结合图示可知，11号培养基中菌落数远多于3号和7号，说明通过上述操作中重复实验的目的是进一步纯化抗链霉素的菌株及增大目的菌株的浓度，C正确； D、采用稀释涂布平板法将菌种接种在5号培养基上，由于相近的两个或多个细菌最终形成一个菌落，因此观察到的菌落数往往小于涂布时吸取的菌液中的活菌数量，D正确。 故选CD。 17. 安巴韦单抗/罗米司韦单抗注射液是我国首个全人源抗新冠病毒特效药，下图是一种制备抗新冠病毒全人源单克隆抗体的主要技术流程。相关叙述正确的是（　　） A. 该过程中利用了细胞的全能性原理 B. 过程b中，常用选择培养基筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞 C. 过程c中，需要提供葡萄糖等营养物质、O2和CO2等气体 D. 使用全人源单抗治疗新冠可以大大降低异源抗体对人体的副作用 【答案】CD 【解析】 【详解】A、该过程是单克隆抗体制备，原理为细胞膜的流动性、动物细胞的增殖，全程没有将细胞发育为完整个体，没有利用细胞全能性，A错误； B、过程b中，选择培养基仅能筛选出杂交瘤细胞；筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞，还需要进一步通过克隆化培养和抗原-抗体阳性筛选完成，B错误； C、过程c是杂交瘤细胞体外工厂化培养生产抗体，动物细胞培养需要葡萄糖等营养物质，同时需要O2满足细胞有氧呼吸需求，CO2维持培养液的pH，C正确； D、全人源单克隆抗体的序列完全来自人类，相对于异源抗体，大大降低了人体对异源抗体的免疫排斥等副作用，D正确。 18. 普通水稻是二倍体，为快速培育抗除草剂的水稻，科研工作者采用下图所示方法进行育种。下列说法正确的是（　　） A. 经①获得的单倍体幼苗，其理论依据是细胞的全能性 B. 经①得到的幼苗和经④得到的幼苗，其染色体数目相同 C. 经②③获得的部分叶片保持绿色的幼苗，即为目标植株 D. 经④⑤获得的植株，具有稳定遗传的抗除草剂性状 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、花粉细胞具有发育形成完整个体所需的全套遗传物质，因此经①获得的单倍体幼苗，其理论依据是细胞的全能性，A正确； B、经①得到的幼苗为单倍体幼苗，经γ射线照射后，可能会发生基因突变，经过除草剂筛选，获得了抗除草剂的幼苗，因此经④得到的幼苗，其染色体与经①得到的幼苗相同，B正确； C、诱变的目标植株应为可育植株，而经②③获得的部分叶片保持绿色的幼苗为单倍体幼苗，为不育植株，C错误； D、经过④形成的绿色幼苗为单倍体幼苗，经过⑤处理后可获得纯合可育的抗除草剂植株，因此经④⑤获得的植株，具有稳定遗传的抗除草剂性状，D正确。 19. 下列关于DNA片段的扩增及电泳鉴定的说法，错误的是（ ） A. PCR过程中，Taq DNA聚合酶只能将核苷酸添加到引物的3′端 B. 电泳鉴定可以通过DNA片段在凝胶中的迁移距离来判断其大小 C. 在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子的大小和构象等有关 D. 凝胶中的DNA分子通过染色，可以在红外灯下被检测出来 【答案】D 【解析】 【分析】DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。 【详解】A、PCR过程中，Taq DNA聚合酶只能将核苷酸添加到引物的3′端，即子链延伸的方向为5‘→3’，A正确； B、电泳鉴定可以通过DNA片段在凝胶中的迁移距离来判断其大小，因为DNA的迁移距离和其相对分子量有关，B正确； C、DNA分子在凝胶中的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子大小、电荷数和构象等有关，据此可对DNA做出鉴定，C正确； D、凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，D错误。 故选D。 20. 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，如图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1-4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述正确的是（ ） A. 若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏4个磷酸二酯键 B. 若受体细胞为大肠杆菌，则需先用Ca2+处理，更利于实现转化 C. 若用PCR技术获取目的基因，则图中的1、4分别是2种引物结合的位置 D. 在PCR仪中根据选定的引物至少需经过6次循环才可获得32个符合要求的目的基因 【答案】ABD 【解析】 【分析】由图可知，由于DNA聚合酶只能从5′→3′延伸子链，图中的磷酸基团为5'端，羟基为3′端，由于引物要延伸子链，子链和模板链反向平行，因此根据引物的延伸方向可知图中与引物结合的部位是2、3。 【详解】A、若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，DNA每条链上会破坏2个磷酸二酯键，共会破坏4个磷酸二酯键，A正确； B、自然条件下，细菌的转化效率很低，通过化学和物理方法的处理可以增强细菌捕获外源 DNA 的能力，成为感受态细胞。因钙离子能促进细菌摄取外源的 DNA，科学家常使用 CaCl2溶液制备所需细胞，进而转入外源DNA。若受体细胞为大肠杆菌，大肠杆菌常用的转化方法是：先用 Ca2+ 处理细胞，再将载体DNA分子溶于缓冲液中与此种细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，B正确； C、由于DNA聚合酶只能从5′→3′延伸子链，图中的磷酸基团为5'端，羟基为3′端，由引物3′端延伸子链，子链和模板链反向平行，因此根据引物的延伸方向可知图中与引物结合的部位是2、3，C错误； D、 如图所示，设X基因为目的基因。经过第一轮复制以亲代DNA的两条链做模板，可以得到①和②两种DNA；经过第二轮复制可以得到①和③、②和④；经过第三轮复制可以得到①和③、③和⑤、②和④、④和⑤；第四轮复制得到16个DNA分子，即①和③、2个③和2个⑤、②和④、2个④和2个⑤、第三轮的2个⑤得到4个⑤（统计为①、②、3个③、3个④、8个⑤）；第五轮复制得到32个DNA分子，即①和③、②和④、3个③和3个⑤、3个④和3个⑤、第四轮的8个⑤得16个⑤（统计为①、②、4个③、4个④、22个⑤；⑤为目的基因即还未获得32个目的基因），第六轮复制得64个DNA分子，即①和③、②和④、4个③和4个⑤、4个④和4个⑤、第五轮的22个⑤得44个⑤（统计为①、②、5个③、5个④、52个⑤；⑤为目的基因，即此时获得32以上符合条件的目的基因），综上所述，需要至少6次循环可获得32个符合要求的目的基因，D正确。 故选ABD。 三、非选择题：本题共5 小题，共55 分。 21. 图2表示苹果醋的简易制作装置和制作流程。发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图1所示，据图回答下列问题： （1）用图2装置酿酒结束后，若要直接转入果醋发酵，改变的环境条是_____。 （2）图1整个发酵过程的中心环节是_____。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH在灭菌_____（填“前”或“后”）调至酸性。 （3）对产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了_____法，其可以用来计数的原理为_____。 【答案】（1）通入无菌空气（或氧气），将温度从18～30℃提高到30～35℃ （2） ①. 发酵罐中发酵 ②. 前 （3） ①. 稀释涂布平板 ②. 当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的单个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌 【解析】 【小问1详解】 酿酒是酵母菌的无氧发酵，最适温度约18-30℃；果醋发酵的菌种醋酸菌是好氧菌，最适发酵温度为30-35℃，需要有氧环境，因此需要改变的条件为升高温度、通入氧气。 【小问2详解】 发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵，是控制条件获得目标产物的核心步骤；制备培养基时，需要在灭菌前调整pH，若灭菌后调pH会重新引入杂菌，导致灭菌失效，因此pH调整在灭菌前进行。 【小问3详解】 对产黄青霉菌进行分离纯化采用了稀释涂布平板法，该方法还可以用来计数，因为该接种方法中当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，因此可根据菌落数确定菌体的数目。 22. 某科研团队尝试利用植物体细胞杂交技术培育抗盐碱的番茄新品种（普通番茄和野生耐盐番茄均是二倍体生物）。以下是他们的实验流程模式图。回答下列问题： （1）普通番茄细胞和野生耐盐番茄细胞外面的细胞壁阻碍着细胞间的杂交。在进行体细胞杂交之前，先利用_____酶去除这层细胞壁，获得原生质体。制备原生质体的过程不能在无菌水中进行，这是为了防_____。 （2）④过程是_____，即失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成_____。之后经再分化，能重新分化成芽、根等器官。这两个过程中，植物激素中_____是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。 （3）植株G是_____倍体植物，获得植物体G的原理是_____。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 原生质体在无菌水中吸水膨胀甚至破裂 （2） ①. 脱分化 ②. 愈伤组织 ③. 生长素和细胞分裂素 （3） ①. 四 ②. 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 【解析】 【小问1详解】 植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性，可利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁，获得原生质体。若仅在无菌水中操作，由于缺乏适宜的渗透压环境，原生质体易吸水破裂，故制备原生质体的过程不能在无菌水中进行，主要是为了防止原生质体在无菌水中吸水膨胀甚至破裂。 【小问2详解】 ④过程是失去其特有的形态结构和功能转变成未分化的细胞，形成愈伤组织的过程，表示脱分化，之后经再分化，能重新分化成芽、根等器官。这两个过程中，生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的使用顺序和比例等都会影响植物细胞的发育方向。 【小问3详解】 由于普通番茄和野生耐盐番茄均为二倍体，两者融合后形成的杂种是四倍体，即植株G是四倍体植物，获得植物体G的原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全能性，这是植物体细胞杂交技术的原理。 23. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如下图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_____。 （2）步骤①常用方法包括_____融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。 （3）步骤②的细胞必须经过步骤③_____和_____才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。体外培养时，首先应保证其处于_____的环境。在使用合成培养基时通常需加入_____。 （4）单克隆抗体的优点是能_____、与特定抗原发生特异性结合、并且可大量制备。单克隆抗体是ADC中的_____（填“a”或“b”）部分。 （5）研究发现，ADC在患者体内的作用如下图2所示。    ①ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致_____。 ②ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖于_____原理。 【答案】（1）人的乳腺癌细胞 （2）聚乙二醇##PEG （3） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测 ③. 无菌、无毒 ④. 血清##动物血清 （4） ①. 能准确识别抗原的细微差异 ②. a （5） ①. 癌细胞凋亡 ②. 抗原-抗体特异性结合 【解析】 【小问1详解】 ADC要治疗的是人的乳腺癌，所以给小鼠注射的特定抗原应取自人的乳腺癌细胞。 【小问2详解】 步骤①是诱导动物细胞融合，诱导融合的方法包括聚乙二醇（PEG）融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。 【小问3详解】 步骤②是筛选出杂交瘤细胞，步骤③是筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测经多次筛选，才能获得足够数量的符合要求的杂交瘤细胞。在体外培养细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是95%的空气与5%二氧化碳的混合气体。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。 【小问4详解】 单克隆抗体优点是能准确地识别抗原的细微差异、与特定抗原发生特异性结合、并且可以大量制备。由图1可知，a是单克隆抗体，b是治疗乳腺癌细胞的药物。 【小问5详解】 ①由图2可知，ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致癌细胞裂解死亡，即发生了癌细胞凋亡。 ②ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，实现了对乳腺癌细胞的选择性杀伤，利用了抗原—抗体特异性结合原理。 24. 多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育转fat1基因猪，操作过程如图所示。图中GFP基因表达出绿色荧光蛋白。据图回答下列问题： （1）用PCR技术在体外扩增目的基因应用的是_____原理，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、_____（答出2点）等。 （2）由图可知，在构建基因表达载体时，为克服目的基因自身环化，即线性DNA的末端相互连接形成圆环，以及便于目的基因与载体的连接，切割含目的基因的DNA和载体的限制酶应选用_____和_____。 （3）构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是_____。除GFP基因外，未标注出的必需元件还有 _____。 【答案】（1） ①. DNA半保留复制 ②. 引物、4种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶 （2） ①. EcoRⅠ ②. BamHⅠ （3） ①. 使相关细胞发出绿色荧光，方便筛选（标记基因） ②. 复制原点 【解析】 【小问1详解】 PCR技术体外扩增目的基因的原理是DNA半保留复制；用PCR技术在体外扩增目的基因时，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、引物、4种脱氧核苷酸（原料）、耐高温的DNA聚合酶等。 【小问2详解】 据题图可知，运载体有三种限制酶位点可供选择，目的基因fat1两侧有EcoRI和BamHI两种限制酶酶切位点，正好运载体上也有这两种限制酶位点，为防止目的基因自身环化使用双酶切，可选用EcoRI和BamHI切割含目的基因的DNA和载体。 【小问3详解】 构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是标记基因（使相关细胞发出绿色荧光方便进行筛选）。基因表达载体必需具备的元件有目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点；所构建的重组基因表达载体中未标注出的必需元件除了标记基因还有复制原点。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $