辽宁省丹东市第一中学2025—2026学年高二下学期期中考试生物试题

**基本信息** 2024级高二下学期期中生物试卷，以发酵工程、细胞工程、基因工程等现代生物技术为核心，结合食醋酿造、幽门螺杆菌检测等真实情境，通过基础判断与实验设计题，考查生命观念与科学思维。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选|15/30|发酵技术、微生物培养、胚胎工程|如第1题以传统发酵食品考代谢类型，第14题结合抗虫棉培育考基因工程步骤| |不定项|5/15|细胞学说、支原体特性、酶切电泳|如17题联系支原体肺炎考细胞结构，20题通过酶切图谱分析实验操作| |非选择|5/55|尿素分解菌筛选、单克隆抗体制备、基因定点突变|21题设计选择培养基验证筛选功能，25题通过RFP融合基因探究启动子调控，体现探究实践|

2024级高二下学期期中考试 生物试题 考试时间：75分钟 满分：100分 命题人 一、单项选择题：共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求 1. 食醋和黄酒是我国传统的日常调味品，均通过发酵技术生产。下列叙述错误的是（     ） A. 醋酸的发酵是好氧发酵，而酒精的发酵是厌氧发酵 B. 食醋和黄酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高 C. 以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，伴有pH下降和气体产生 D. 使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一 2. 幽门螺杆菌（含有脲酶）感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。下列有关叙述正确的是（     ） A．配制鉴别幽门螺杆菌的培养基应采用干热灭菌法进行灭菌 B．若空白对照组长出了菌落，则应将实验组的菌落数减去空白对照组的菌落数 C．对幽门螺杆菌进行分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法 D．分离纯化幽门螺杆菌时可以使用以尿素为唯一氮源的培养基 3. 发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的基本环节如图所示。下列说法正确的是（     ） A．通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白，用来生产微生物饲料 B．啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生和积累主要在主发酵阶段完成 C．主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，需要在高温，密闭的环境下储存一段时间后进行发酵 D．菌种的选育是发酵工程的中心环节，要严格控制发酵条件 4. 研究人员用花椰菜（BB，2n=18）根与黑芥（CC，2n=16）叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是（     ） A. 再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 B. 两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 C. 植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 D. 花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 5.下列关于动物细胞培养及干细胞的应用的叙述，正确的是（     ） A. 动物细胞培养时，可以用胃蛋白酶将组织分散成单个细胞 B. 动物细胞培养需要CO₂ ，CO₂ 的主要作用是刺激细胞呼吸 C.iPS细胞可在适当诱导条件下定向分化，iPS细胞类似胚胎干细胞 D. 人体内的干细胞有ES细胞、成体干细胞、iPS细胞三类 6.我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（     ） A. ③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合 B. 组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程 C. 用电刺激、Ca²⁺载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 D. ①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞突变为iPS细胞 7.通过体外受精、核移植或转基因等方法获得的早期胚胎，经胚胎移植给受体甲后可以产生后代。下列叙述正确的是（     ） A. 经胚胎移植产生的后代，其遗传特性都与受体甲保持一致 B. 通过体外受精、核移植或转基因等方法获得后代的生殖方式都属于无性生殖 C. 不同方法获得的早期胚胎，都需要MⅡ期的去核卵母细胞 D. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 8.下列有关胚胎工程理论基础的叙述，正确的是（     ） A. 在透明带内的卵裂过程，细胞数目不断增多，但胚胎总体积基本不变 B. 孵化是指原肠胚细胞突破卵细胞的过程 C. 胚胎分割时通常分离内细胞团细胞做DNA分析，鉴定性别 D. 囊胚期的细胞开始出现了分化，透明带发育成胎盘和胎膜 9.实验中常用碱裂解法提取质粒DNA，在碱性条件下，拟核DNA与质粒DNA均会变性；在中性条件下，质粒DNA可以复性，而拟核DNA不能复性并会聚集成不可溶的网状聚合物，基本流程如图所示。下列叙述错误的是（     ） A. 碱性试剂2可使细胞膜中的某些蛋白质变性 B.DNA不溶于酒精，用冷酒精处理可使DNA析出 C. 大肠杆菌中拟核DNA的主要载体为染色体 D. 质粒DNA的变性和复性涉及氢键的断裂与形成 10.下列关于现代生物技术及生物学实验的叙述，正确的是（     ） A. 琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的过程中，琼脂糖融化后应立即加入核酸染料，以免凝胶凝固导致染料分布不均 B.DNA粗提取实验中，研磨液中的EDTA（蛋白质变性剂）可抑制DNA酶活性，防止研磨过程中DNA被水解 C.PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Ca2+用于激活DNA聚合酶 D. 凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 11.基因PCR定点突变是蛋白质工程的重要技术，该技术需要设计含有非特异性配对碱基的引物，再通过PCR将突变位点引入到产物中。重叠延伸PCR是发展最早的定点突变技术，其操作流程如下图所示。下列分析错误的是（     ） A. 步骤⑤中如果完成6轮循环一共需要消耗63个引物1 B. 蛋白质工程可以创造新的、自然界中不存在的蛋白质 C. 步骤④使用DNA聚合酶可对杂交分子甲和乙进行延伸 D. 应将引物1、2与引物3、4置于两个独立的反应体系中 12.对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的。下列有关蛋白质工程的说法，正确的是（     ） A. 基本思路首先是推测氨基酸序列，再设计预期蛋白质的结构 B. 需要在分子水平对蛋白质中的氨基酸进行操作 C. 需充分考虑蛋白质的空间结构，确保改造后能正确折叠 D. 蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术 13.下列关于生物技术的安全性与伦理问题的说法，正确的是（     ） A. 可导入α-淀粉酶基因使花粉失去活性，防止基因污染 B. 只要有证据表明产品有害，就应该禁止转基因技术的应用 C. 治疗性克隆主要用于治疗疾病，不存在伦理问题 D. 为维持人类和平，可在一定程度上发展生物武器 14.Bt基因是培育转基因抗虫棉较为合适的目的基因，筛选Bt基因后可以利用PCR技术对其进行大量扩增， 下图为抗虫棉的培育过程，下列相关叙述错误的是（     ） A．检测目的基因是否成功表达所用的分子水平上的方法可以为 抗原—抗体杂交 B．以上导入目的基因的方法是农杆菌转化法，农杆菌中Ti质粒 上的T - DNA可转移 C．如果把目的基因整合到线粒体DNA或叶绿体DNA上，可能 导致后代目的基因丢失 D．Bt基因的筛选与获取是基因工程的核心步骤 15.根据图示判断下列有关显微镜操作的实验的叙述，错误的是（     ） A. 若将图②中的细胞移到视野中央，应将装片向右下方移动 B.若图①镜头由a转换成b，则视野中观察到的细胞数目增多 C. 若将图④中图像再放大4倍，则最多只能看到2个完整细胞 D.高倍镜下观察到的图③中细胞质实际流动方向也是逆时针 二．不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，选对 但不全的得1分，有选错的得0分。 16.《选择健康》一书中提出：“人类并无成百上千种疾病，人类的疾病只有一种，那就是细胞病。”从细胞 学说角度来理解这一观点，说法不正确的是（     ） A. 细胞学说使千变万化的生物界通过细胞这一共同结构统一起来，体现了细胞多样性 B. 细胞学说揭示了动物与植物的统一性，使人们认识到细胞是动植物生命活动的基本单位 C. 细胞学说认为细胞分为原核细胞与真核细胞 D.一切生物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成 17.支原体肺炎是由肺炎支原体引起的急性肺部感染性疾病。青霉素和头孢菌素类抗生素作为广谱抗菌药通 过抑制病原体细胞壁的形成达到杀菌效果。下列叙述正确的是（     ） A. 支原体自身的蛋白质均在宿主细胞的核糖体上合成 B. 支原体与流感病毒最本质的区别在于有无细胞结构 C. 支原体在生命系统的结构层次中属于两个结构层次 D. 临床上可以用青霉素和头孢菌素类抗生素来治疗支原体肺炎 18.为解决农业玉米秸秆资源化利用问题，科研人员从农田土壤中筛选高效纤维素降解菌（属于细菌），下列叙述不正确的是（     ） A. 培养基以纤维素为唯一碳源，属于鉴别培养基，可直接筛选区分降解菌与杂菌 B. 为加速菌株筛选，可将培养基pH调至酸性，促进纤维素分解菌的快速繁殖 C. 培养基加入刚果红染液后灭菌倒平板，纤维素降解菌落周围会出现透明圈 D. 接种操作在超净工作台进行，应完全打开培养皿盖，快速完成接种 19. 猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是一种对猪群具有高度传染性的病毒。GP3蛋白是PRRSV的重要抗原之一，能够诱导宿主产生特异性的免疫应答。为了对PRRSV进行快速检测，科研人员制备了PRRSV - GP3蛋白的单克隆抗体，过程如图所示。下列分析不正确的是（     ） 小鼠骨髓瘤细胞 GP3蛋白注射小鼠→细胞甲 ① 细胞乙 第1次筛选 细胞丙 第2次筛选 细胞丁 扩大培养 单克隆抗体 A. 将GP3蛋白注射到小鼠体内是为了获取能分泌抗GP3蛋白抗体的B细胞 B. 培养细胞乙的培养基通常是加入了血清等天然成分和糖类、氨基酸等的固体培养基 C. 细胞丙中有融合的具有同种核的细胞和能合成抗GP3蛋白抗体的杂交瘤细胞 D. 第2次筛选可用多孔板对单个的杂交瘤细胞进行培养及抗体检测 20.科学家对某质粒用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶进行酶切后，再利用琼脂糖凝胶电泳得到下图所示图谱（其中1号泳道是标准DNA样品的电泳结果，2号、3号、4号泳道分别是用EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果）。下列说法正确的是（     ） A．DNA片段的扩增及电泳鉴定时，接通电源后，看到DNA条带迁移至凝胶边缘时，停止电泳 B．在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换 C．由图可知该载体DNA分子中两种限制酶的酶切位点共有两个 D．在凝胶中DNA分子迁移的速率与凝胶浓度和DNA分子大小有关 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21.（12分，除注明外每空2分）尿素含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用，某科研小组为了将土壤中分解尿素的细菌纯化培养，进行了如下操作，请回答相关问题： 成分 葡萄糖 尿素 琼脂 含量（g） 1.4 2.1 0.2 10.0 1.0 15.0 操作将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000毫升 （1）上表是尿素分解菌的选择培养基配方，选择培养基是指            。本实验中有两组对照，一组是未接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板，另一组是已接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板。设置前一组的平板上如果            （1分），说明培养基在使用前未被杂菌污染；后一组的平板上如果 ______，可以说明选择培养基具有选择作用。 （2）将5g土壤溶于45mL无菌水，再稀释倍，按图[ ]______（填数字及名称）接种方式将0.1mL样品接种到3个培养基上，统计菌落数目为134、131、137，据此可得出每克土壤中的尿素分解菌活菌数约为______个。 （3）分解尿素的细菌能合成脲酶，催化尿素分解产生的可以作为细菌生长的氮源。如果培养基中加入了酚红指示剂，尿素分解的产物会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，根据功能划分该培养基属于______（1分）培养基。 （4）土壤中的某些固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源（如圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化为），请设计实验进一步确定平板上分离得到的细菌是否是固氮菌。（写出简要思路及预期结果）______。 22.（10分，每空一分）Ⅰ、下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。 Ⅱ、银杏的次生代谢产物，如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖，扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片中取得，但传统栽植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好地满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。请回答下列相关问题： 外植体愈伤组织试管苗植株 （1）利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的根本原因是______。 （2）人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法，其中化学法包括PEG融合法和______。 （3）“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种细胞融合成功的标志是______，植物体细胞杂交技术的重要意义是______。 （4）外植体的选择不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在______（灭菌/消毒）时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用______多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。为获得银杏的次生代谢产物，______（需要/不需要）走完上述流程图的全过程。 （5）此外，研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是______胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 （6）学习了植物组培技术后，同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养，结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时，忘记添加NAA（NAA：萘乙酸，为生长素类似物），结果与添加NAA的生根培养基中的菊花幼苗相比，无添加NAA培养基中的菊花幼苗也有生根，其原因可能是            。不过其生根数量较少且根长较短，可能的原因是            。 23.（12分，除注明外每空2分）单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得的，而多克隆抗体通常是从动物血清中获得，由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合，所以称为多克隆抗体。如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题： （1）图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有            （填写抗体的名称）（1分）的混合物，这种方法制备的抗体的缺点是            。 （2）仅以Ab1单克隆抗体制备为例，图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有            种类型（1分）。 （3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出            ，筛选出的细胞具有的特点是            ，筛选②的目的是筛选出             （4）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是            。 24.（8分，每空一分）Ⅰ.科研人员为获得可用于生产基因工程的疫苗，将病毒外壳蛋白基因导入猪体细胞中，然后通过核移植技术培育转基因猪，具体操作过程如图所示。回答下列问题： （1）在收集A细胞时需要用            处理1号猪，在体外培养到            时期。为了使胚胎能够成功移植到2号猪子宫内，需要对2号猪进行            处理。 （2）该转基因猪的培育过程运用了动物细胞培养、            和            等技术。 （3）若想要对移植的胚胎进行分割，应选择            期进行操作。 Ⅱ、（4）随着试管婴儿技术的发展，世界各地诞生的试管婴儿数量迅速增长，试管婴儿技术中有时需要对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效、准确的方法是SRY—PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个            （填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎性别为            。 25.（13分，除注明外每空2分）研究发现，双斑蟋蟀中的Gbdsx基因对雄性发育至关重要，且只在雄性中表达。为验证Gbdsx基因在雄性中的特异性表达与其启动子受雄性中存在的物质X的调控，科研人员构建了含有Gbdsx - RFP融合基因的转基因大肠杆菌，Gbdsx基因和质粒部分结构如图所示。 启动子 终止子 RFP为红色荧光蛋白基因； Ampr为氨苄青霉素抗性基因； F₁、F₂、R₁、R₂表示引物； （1）可利用PCR特异性地快速扩增Gbdsx基因，据图分析，需选择            作为本实验的引物，引物的作用是            。 （2）为目的基因能够与质粒正确相连，需要在引物的            （填“3’端”或“5’端”）（1分）添加限制酶识别序列，在F引物添加的序列所对应的限制酶是            ，在R引物添加的序列所对应的限制酶是            。 （3）将重组质粒转入大肠杆菌过程中，一般选用            处理大肠杆菌（1分）。科研人员用含有氨苄青霉素的培养基接种处理后的大肠杆菌，            （填“能”或“不能”）（1分）筛选出导入重组质粒的大肠杆菌。 若要证明实验目的，还应进行的操作和实验结果分别是：            。 高二生物 ，共8页 第（ 9 ）页 试卷答案 一、单项选择题（共15小题，每小题2分，共30分） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 B D B A C C D A C B 11 12 13 14 15 A C A D B 二、不定项选择题（共5小题，每小题3分，共15分。选对但不全得1分，选错得0分） 16.ACD 17.BC 18.ABD 19.B 20.BD 三、非选择题（共5小题，共55分） 21.（12分，除注明外每空2分） （1） 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基；没有菌落生长（1分）；牛肉膏蛋白胨培养基平板上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数 （2） 图1稀释涂布平板法； （3） 鉴别（1分） （4） 实验思路：将分离得到的细菌接种到无氮源的培养基上，在适宜条件下培养，观察菌落生长情况（2分）。预期结果：若培养基上有菌落生长，说明该细菌是固氮菌；若无菌落生长，说明该细菌不是固氮菌（2分） 22.（10分，每空1分） Ⅰ. （1） 矮牵牛的茎尖分生组织细胞中含有发育成完整矮牵牛植株的全套遗传信息 （2） 高 高pH融合法、聚乙二醇融合法 （3） 杂种细胞再生出细胞壁；克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，实现了不同物种间的遗传物质交流，培育作物新品种 （4） 消毒；无菌水；不需要 （5） 缺氧（低氧） （6） 菊花幼苗的芽等自身可以产生生长素；幼苗自身产生的生长素的量有限，不足以满足生根的最佳需求 23.（12分，除注明外每空2分） （1）Ab1、Ab2、Ab3、Ab4（1分）；特异性差、纯度低、灵敏度低、反应速度慢，可与多种抗原表位结合，不适合作为诊断试剂或靶向药物 （2）3（1分） （3） 杂交瘤细胞；既能无限增殖，又能产生抗体；能产生所需特异性（抗Ab1）抗体的杂交瘤细胞 （4）95%空气加5%CO 的混合气体 24.（8分，每空1分） Ⅰ. （1）促性腺激素；减数分裂Ⅱ中期（MⅡ期）；同期发情 （2）动物细胞核移植；胚胎移植 （3）桑葚胚或囊胚 Ⅱ. （4）滋养层；雄性 25.（13分，除注明外每空2分） （1）F和R ；作为DNA复制的起点，引导DNA聚合酶从引物的端开始连接脱氧核苷酸，合成子链DNA （2）端（1分）；BamH Ⅰ；Xho Ⅰ （3） （或 ）（1分）；不能（1分）；操作：将导入重组质粒的大肠杆菌平均分为两组，一组添加物质X，另一组不添加，在相同且适宜的条件下培养（2分）；实验结果：添加物质X的组出现红色荧光，未添加物质X的组不出现红色荧光（2分），说明Gbdsx基因的启动子受物质X的调控，该基因在雄性中特异性表达。 学科网（北京）股份有限公司 $