精品解析：云南迪庆州藏文中学2025—2026学年（下）2027届高二年级期中考试生物 试题卷

迪庆州藏文中学2025—2026学年（下） 2027届高二年级期中考试 生物试题卷 （全卷2个大题，共21个小题，共7页；满分100分，考试时间75分钟） 注意事项： 1．答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将答题卡交回。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 党的二十大报告指出，中华优秀传统文化源远流长、博大精深，是中华文明的智慧结晶。传统发酵技术是我国传统文化中的精髓，利用该技术制作的食品种类繁多。下列关于泡菜、果酒和果醋的制作过程的叙述，错误的是（　　） A. 制作泡菜时应该将泡菜坛装满以制造无氧环境 B. 制作泡菜时应先加入蔬菜和香辛料再加入盐水 C. 制作果醋时应打开瓶盖，保证O2供应 D. 制作果酒和果醋可以用同一装置完成 2. 若在固体培养基上用稀释涂布法培养细菌，看到的结果不可能是 A. B. C. D. 3. 下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，正确的是（ ） A. 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 B 培养尿素分解菌时应将培养基调至酸性 C. 筛选分解尿素的细菌时，应以尿素作为培养基中唯一的营养物质 D. 尿素施入土壤后可被植物直接吸收 4. 下图表示啤酒工业化生产的简要流程。下列说法正确的是（ ） A. 制麦需密闭处理，以诱导麦芽进行无氧呼吸产生酒精 B. 酿酒的原理是酵母菌将淀粉直接转化为酒精和CO2 C. 酒精的产生与积累主要在后发酵阶段完成 D. 选育优良菌种，有助于提高啤酒的产量和品质 5. 离体的植物器官通过脱分化和再分化发育成完整的植株。在此过程中，需要添加的调节物质是（　　） A. 维生素和酶 B. 细胞分裂素和生长素 C. 蔗糖和琼脂 D. 氨基酸和核苷酸 6. 动物细胞工程常用的技术不包括（　　） A. 动物细胞融合 B. 动物细胞核移植 C. 体外受精 D. 动物细胞培养 7. 动物细胞融合的结果是（ ） A. 获得新个体 B. 获得杂交细胞 C. 获得新物种 D. 获得多倍体种群 8. 在克隆哺乳动物过程中，通常作为核移植受体细胞的是去核的（ ） A. 卵原细胞 B. 初级卵母细胞 C. 次级卵母细胞 D. 卵细胞 9. 下列有关受精作用及胚胎工程叙述，正确的是（ ） A. 精子需要在曲细精管中获能后才具备受精能力 B 精子入卵后会形成雄原核，同时开始进行有丝分裂 C. 卵裂时期，细胞的体积减小，物质交换效率降低 D. 可采用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 10. 科研人员利用植物体细胞杂交技术培育矮牵牛新品种，技术流程示意图如下。 下列叙述正确的是（　　） A. 愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的 B. 获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状 C. 可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合和细胞壁再生 D. 用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体 11. 下列操作能达到灭菌目的的是（ ） A. 用免洗酒精凝胶擦手 B. 制作泡菜前用开水烫洗容器 C. 在火焰上灼烧接种环 D. 防疫期间用石炭酸喷洒教室 12. 下列关于重组DNA技术的基本工具的叙述，错误的是（ ） A. E．coliDNA连接酶既能“缝合”黏性末端，也能“缝合”平末端 B. 限制性内切核酸酶主要来自原核生物，一般不切割自身DNA C. 载体上要有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入 D. DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键 13. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的说法，正确的是（ ） A. 以洋葱为实验材料进行该实验必须在无菌条件下进行 B. 对研磨液进行离心是为了加速DNA的沉淀 C. 与家兔血相比，洋葱更适合用于DNA的粗提取与鉴定 D. 加入预冷酒精溶液后离心，取上清液备用 14. 1997年，我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉，下列关于用Bt基因培育转基因抗虫棉四个主要步骤的说法，正确的是（　　） A. 这四个步骤中均可用到碱基互补配对的原则 B. 基因表达载体中的终止密码子能够使基因停止转录 C. 若利用PCR技术检测目的基因是否转录出mRNA，则不能根据目的基因的启动子和终止子序列设计引物 D. 成功将两个Bt基因转入棉花的染色体DNA中，则自交后代一定具有抗虫特性 15. PCR和琼脂糖凝胶电泳是基因工程中常用的两种技术，下列对其中所用试剂和操作的叙述正确的是（ ） A. PCR扩增时加入的各物质中仅有脱氧核苷酸会被消耗 B. 在PCR过程中，变性、复性、延伸三个阶段的温度依次降低 C. 琼脂糖凝胶电泳需要将DNA和含有指示剂的电泳缓冲液混合后加入点样孔 D. 当DNA分子较大时可适当降低凝胶浓度或增大电压以提高电泳速度 16. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现，用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺，可以提高它的抗凝血活性。在这项替换研究中，目前可行的直接操作对象是（ ） A 基因 B. 氨基酸 C. 多肽链 D. 蛋白质 二、非选择题：（本题共5小题，共52分。） 17. 酵母菌与人们的日常生活密切相关，也是现代生物技术研究常用的生物。 （1）利用酵母菌发酵产生酒精的过程中，要先充气后闭气，原因是_____。 （2）利用玉米秸秆生产酒精时，水解秸秆所用的纤维素酶可来自微生物，分离产生该酶的微生物时，所需要的培养基为_____（按功能分），培养基中的碳源为_____。 （3）虽然不同的生物对营养物质的需求不同，但是培养这些微生物的培养基，一般都含有四大营养成分，即_____、_____、_____和碳源。培养基灭菌的常用方法为_____。 （4）接种微生物常用的两种方法是_____、_____。实验室接种微生物时，常在酒精灯火焰旁进行，这样操作的目的是_____。 18. 如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程，请回答下列问题。 （1）①②过程所用的酶是________________，③过程完成所依据的原理是____________。 （2）图示技术名称是____________________；由⑤⑥⑦培育成植株的过程运用的技术手段是__________________，其依据的原理是______________。 （3）过程③称为___________________，④过程成功的标志是______________。 （4）过程__________属于脱分化，过程__________属于再分化，细胞发生分化的根本原因是 _____________。 （5）若番茄细胞内含A个染色体，马铃薯细胞内含B个染色体，则“番茄－马铃薯”细胞内含_____个染色体；若采用杂交育种方法成功的话，得到的后代含个 ____染色体，必须用_______________来处理幼苗，才能得到可育的“番茄－马铃薯”，其中含有_____个染色体。植物体细胞杂交方法的优点是 ________________。 19. 克隆技术又称生物放大技术，为探究克隆技术能否用于人帕金森病的治疗，科研人员利用“人帕金森病模型鼠”进行了如图所示实验。请回答下列问题： （1）去核前应保证采集的卵母细胞在体外培养至________期才能用于动物体细胞核移植。在动物体细胞核移植技术中，通常选择卵母细胞作为受体细胞，原因有________等。（答2点） （2）体外培养早期胚胎时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入________等一些天然成分。 （3）若想在过程①前获得更多的卵母细胞，一般注射________（激素名称）使雌鼠超数排卵，若用胚胎分割技术分割囊胚阶段的胚胎时，应注意________，否则会影响胚胎的恢复和进一步的发育。 （4）过程⑤中是否需要对人帕金森病模型鼠注射相应的免疫抑制剂以避免发生免疫排斥反应，回答并说明理由：________，________。 20. 埃博拉病毒(EBoV)衣壳外有包膜，包膜上有多种棘突蛋白，其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞识别。如图为制备抗埃博拉病毒单克隆抗体的过程。回答下列问题： （1）制备抗埃博拉病毒单克隆抗体时，需要用灭活的EBoV对小鼠进行多次注射的目的是___________ （2）细胞融合的原理是___________。诱导动物细胞融合常用的方法除了电融合和___________外，还可以用灭活的病毒进行诱导。 （3）单克隆抗体制备过程中要经过两次筛选。第一次筛选出杂交瘤细胞，再对杂交瘤细胞进行___________，经多次筛选后可获得足够数量的单克隆抗体。 （4）体外培养杂交瘤细胞的培养液中营养物质种类要齐全，比例要合适，此外为补充细胞生长所需的未知营养物质还需要添加___________。 21. 番茄不耐寒，冬季容易冻坏，难以储藏。我国科研人员从某植物中提取了一种抗冻基因AtCOR15a，经过一系列过程获得转基因的抗冻番茄新品种，操作流程如图。回答下列问题： （1）用PCR技术扩增AtCOR15a基因时需要添加引物，引物的作用是_____。 （2）如果要将AtCOR15a基因与质粒正确构建成重组质粒，一般采用双酶切法，选用双酶切法的优势是______。 （3）图中是采用_____法将目的基因转移到番茄细胞中，并将其整合到该细胞的_____上。 （4）为了提高AtCOR15a基因的表达能力，可将AtCOR15a基因与外源强启动子连接，如下图所示。 利用PCR检测上述连接是否正确，可选择的引物组合是_______，该PCR反应体系中需加入_______酶。 （5）为了进一步提高番茄的储藏时间，可从该植物体内提取Ers1基因（乙烯受体基因），按照下图流程将Ers1基因重新导回该植物，致使该植物原有Ers1基因翻译受抑制。已知限制酶EcoRI和XhoI、BanHI切割后露出的黏性末端碱基序列不同，据图分析，提取的目的基因A、B两端需分别添加________的识别序列。推测该方法提高番茄储藏时间的分子机理是_________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 迪庆州藏文中学2025—2026学年（下） 2027届高二年级期中考试 生物试题卷 （全卷2个大题，共21个小题，共7页；满分100分，考试时间75分钟） 注意事项： 1．答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3．考试结束后，将答题卡交回。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 党的二十大报告指出，中华优秀传统文化源远流长、博大精深，是中华文明的智慧结晶。传统发酵技术是我国传统文化中的精髓，利用该技术制作的食品种类繁多。下列关于泡菜、果酒和果醋的制作过程的叙述，错误的是（　　） A. 制作泡菜时应该将泡菜坛装满以制造无氧环境 B. 制作泡菜时应先加入蔬菜和香辛料再加入盐水 C. 制作果醋时应打开瓶盖，保证O2供应 D. 制作果酒和果醋可以用同一装置完成 【答案】A 【解析】 【详解】A、制作泡菜时蔬菜只需装至泡菜坛八成满，无氧环境通过坛盖边沿水封实现，若将坛装满，发酵过程中产生的气体会导致发酵液溢出，易引发杂菌污染，A错误； B、制作泡菜的操作顺序为先加入蔬菜和香辛料，再加入煮沸冷却的盐水，保证盐水完全没过食材，B正确； C、果醋发酵的菌种为醋酸菌，属于好氧菌，发酵过程需要持续供给氧气，因此需打开瓶盖（或盖纱布）保证O2供应，C正确； D、制作果酒和果醋可使用同一装置，先密闭装置进行酵母菌无氧发酵产果酒，之后调整温度、通入氧气即可进行醋酸发酵产果醋，D正确。 2. 若在固体培养基上用稀释涂布法培养细菌，看到的结果不可能是 A. B. C. D. 【答案】D 【解析】 【分析】常用的微生物分离方法有平板划线法，稀释涂布法。 一、平板划线分离法： 由接种环从菌液中沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。 二、稀释涂布平板法： 稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。 【详解】A、B、C选项的固体培养基上所形成的是一个个的单个菌落，是用稀释涂布法培养细菌得到的结果，D选项的固体培养基上所形成的不是单菌落，是平板划线分离得到的结果。 故选D。 3. 下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，正确的是（ ） A. 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 B. 培养尿素分解菌时应将培养基调至酸性 C. 筛选分解尿素的细菌时，应以尿素作为培养基中唯一的营养物质 D. 尿素施入土壤后可被植物直接吸收 【答案】A 【解析】 【分析】培养基的概念及营养构成 （1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质； （2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。 【详解】A、尿素的分解需要脲酶的催化，据此可推测，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，A正确； B、尿素分解菌属于细菌，需要将培养基调至中性或弱碱性，B错误； C、筛选分解尿素的细菌时，采用的是以尿素为唯一氮源的选择培养基，而不是唯一的营养物质，C错误； D、尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再转化为NO3-、NH4+等被植物吸收，D错误。 故选A。 4. 下图表示啤酒工业化生产简要流程。下列说法正确的是（ ） A. 制麦需密闭处理，以诱导麦芽进行无氧呼吸产生酒精 B. 酿酒的原理是酵母菌将淀粉直接转化为酒精和CO2 C. 酒精的产生与积累主要在后发酵阶段完成 D. 选育优良菌种，有助于提高啤酒的产量和品质 【答案】D 【解析】 【分析】发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 【详解】A、分析图形可知，制麦是指大麦必须经过发芽过程将内含的难溶性淀粉转化为用于酿造工序的可溶性糖类，该过程不需要密闭处理，A错误； B、酵母菌不能直接把淀粉发酵，酿酒的原理是在酵母菌作用下将葡萄糖发酵生成酒精并且产生二氧化碳的过程，B错误； C、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，主发酵结束后再低温、密闭环境下储存一段时间属于后发酵，因此酒精主要在主发酵阶段产生积累，C错误； D、选育性状优良的菌种，有助于提高啤酒的产量和品质，是保证啤酒质量的关键，D正确。 故选D。 5. 离体植物器官通过脱分化和再分化发育成完整的植株。在此过程中，需要添加的调节物质是（　　） A. 维生素和酶 B. 细胞分裂素和生长素 C. 蔗糖和琼脂 D. 氨基酸和核苷酸 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养的条件： ①细胞离体和适宜外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）； ②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。 【详解】植物离体组织器官通过脱分化和再分化发育成完整的植株。在此培养过程中，需要添加的调节物质是细胞分裂素和生长素，B正确。 故选B。 6. 动物细胞工程常用的技术不包括（　　） A. 动物细胞融合 B. 动物细胞核移植 C. 体外受精 D. 动物细胞培养 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞工程常用技术包括动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。 【详解】动物细胞工程常用的技术包括动物细胞融合、动物细胞核移植和动物细胞培养，体外受精属于胚胎工程，C符合题意。 故选C。 7. 动物细胞融合的结果是（ ） A. 获得新个体 B. 获得杂交细胞 C. 获得新物种 D. 获得多倍体种群 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞融合又叫细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。 【详解】根据上述分析可知，动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合的结果是获得杂交细胞。动物细胞融合最大的用途是单克隆抗体的制备，综上分析，B正确，ACD错误。 故选B。 8. 在克隆哺乳动物过程中，通常作为核移植受体细胞的是去核的（ ） A. 卵原细胞 B. 初级卵母细胞 C. 次级卵母细胞 D. 卵细胞 【答案】C 【解析】 【分析】体细胞核移植过程： 【详解】在克隆哺乳动物过程中，通常选择减数第二次分裂中期的去核卵母细胞作为受体细胞，即次级卵母细胞。 故选C。 9. 下列有关受精作用及胚胎工程的叙述，正确的是（ ） A. 精子需要在曲细精管中获能后才具备受精能力 B. 精子入卵后会形成雄原核，同时开始进行有丝分裂 C. 卵裂时期，细胞的体积减小，物质交换效率降低 D. 可采用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 【答案】D 【解析】 【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电刺激等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。 【详解】A、精子获能的场所是雌性动物的生殖道，而不是曲细精管，A错误； B、精子入卵后，形成雄原核，此时卵子完成减数第二次分裂，形成雄原核，二者相互融合形成受精卵，受精过程完成，受精卵开始进行有丝分裂，B错误； C、卵裂时期，细胞不断分裂，细胞体积减小，相对表面积增大，物质交换效率提高，C错误； D、可采用电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，D 正确。 故选D。 10. 科研人员利用植物体细胞杂交技术培育矮牵牛新品种，技术流程示意图如下。 下列叙述正确的是（　　） A. 愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的 B. 获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状 C. 可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合和细胞壁再生 D. 用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：首先用酶解法去壁，一般使用纤维素酶和果胶酶处理；然后诱导原生质体融合，采用的方法一般包括物理法（离心、振荡、电激）、化学法（用聚乙二醇处理）；培养融合的原生质体再生出新的细胞壁，形成杂种细胞。然后杂种细胞经过植物组织培养技术可以培养形成杂种植株。 【详解】A、愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞脱分化形成的，A错误； B、由于基因的选择性表达和基因间的互作效应，获得的杂种植株不一定能够表现亲本的优良性状，B错误； C、可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合，但不能诱导细胞壁的再生，C错误； D、由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，故可以用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体，D正确。 故选D 11. 下列操作能达到灭菌目的的是（ ） A. 用免洗酒精凝胶擦手 B. 制作泡菜前用开水烫洗容器 C. 在火焰上灼烧接种环 D. 防疫期间用石炭酸喷洒教室 【答案】C 【解析】 【分析】灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。 【详解】A、用免洗酒精凝胶擦手属于消毒，A错误； B、制作泡菜前用开水烫洗容器属于消毒过程，B错误； C、在火焰上灼烧接种环能达到灭菌目的，C正确； D、防疫期间用石炭酸喷洒教室，属于消毒，D错误。 故选C。 12. 下列关于重组DNA技术的基本工具的叙述，错误的是（ ） A. E．coliDNA连接酶既能“缝合”黏性末端，也能“缝合”平末端 B. 限制性内切核酸酶主要来自原核生物，一般不切割自身DNA C. 载体上要有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入 D. DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键 【答案】D 【解析】 【分析】DNA连接酶：（1）根据酶的来源不同分为两类：E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。 【详解】A、E.coli DNA连接酶能连接具有互补黏性末端的DNA片段，也能“缝合”平末端，A正确； B、限制性内切核酸酶主要来自原核生物，一般不切割自身DNA，B正确； C、载体上要有一个至多个限制酶切割位点，便于切割后与外源DNA片段进行连接，C正确； D、DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键，D错误。 故选D。 13. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的说法，正确的是（ ） A. 以洋葱为实验材料进行该实验必须在无菌条件下进行 B. 对研磨液进行离心是为了加速DNA的沉淀 C. 与家兔血相比，洋葱更适合用于DNA的粗提取与鉴定 D. 加入预冷酒精溶液后离心，取上清液备用 【答案】C 【解析】 【分析】DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的。 【详解】A、细胞生物中都含有DNA，DNA的粗提取不需要在无菌条件下进行，A错误； B、离心研磨液的目的是加速沉淀，离心能够加速细胞膜、细胞器、一些较大杂质的沉淀，而不是DNA的沉淀，B错误； C、家兔为哺乳动物，成熟红细胞不含细胞核和细胞器，而洋葱中DNA含量较高，因此与家兔血相比，洋葱更适合用于DNA的粗提取与鉴定，C正确； D、DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精，因此加入预冷酒精溶液后静置2-3分钟，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA，D错误。 故选C。 14. 1997年，我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉，下列关于用Bt基因培育转基因抗虫棉四个主要步骤的说法，正确的是（　　） A. 这四个步骤中均可用到碱基互补配对的原则 B. 基因表达载体中的终止密码子能够使基因停止转录 C. 若利用PCR技术检测目的基因是否转录出mRNA，则不能根据目的基因的启动子和终止子序列设计引物 D. 成功将两个Bt基因转入棉花的染色体DNA中，则自交后代一定具有抗虫特性 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。其中核心步骤为基因表达载体的构建，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。 【详解】A、基因工程的四个步骤中不都用到碱基互补配对的原则，如将目的基因导入到受体细胞不会涉及碱基互补配对原则，A错误； B、基因表达载体中的终止子能够使基因停止转录，B错误； C、当使用PCR技术检测目的基因是否转录出mRNA时，通常是通过逆转录PCR进行的。需以mRNA为模板，通过逆转录酶合成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增，则引物的设计需要根据cDNA的两端设计，cDNA不包含目的基因的启动子和终止子序列，C正确； D、若两个基因插入同一条染色体上，则该转基因棉花相当于杂合子，其自交后代会出现分离，因而自交后代未必一定具有抗虫特性，D错误。 故选C。 15. PCR和琼脂糖凝胶电泳是基因工程中常用的两种技术，下列对其中所用试剂和操作的叙述正确的是（ ） A. PCR扩增时加入的各物质中仅有脱氧核苷酸会被消耗 B. 在PCR过程中，变性、复性、延伸三个阶段的温度依次降低 C. 琼脂糖凝胶电泳需要将DNA和含有指示剂的电泳缓冲液混合后加入点样孔 D. 当DNA分子较大时可适当降低凝胶浓度或增大电压以提高电泳速度 【答案】D 【解析】 【分析】DNA分子的琼脂糖凝胶电泳 ：DNA分子中具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。 【详解】A、在PCR过程中，引物也会被消耗，成为新合成的DNA的一部分，A错误； B、变性、复性、延伸三个阶段的温度依次为90℃以上、50℃左右、72℃左右，并不是依次降低，B错误； C、与DNA混合的是含指示剂的载样缓冲液，不是电泳缓冲液，C错误； D、电泳过程中，DNA分子移动速度与凝胶浓度、DNA分子大小和构象、电压等有关，故当DNA分子较大时可适当降低凝胶浓度或增大电压以提高电泳速度，D正确。 故选D。 16. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现，用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺，可以提高它的抗凝血活性。在这项替换研究中，目前可行的直接操作对象是（ ） A. 基因 B. 氨基酸 C. 多肽链 D. 蛋白质 【答案】A 【解析】 【分析】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。 【详解】通过题干信息可知，可通过蛋白质工程技来完成，蛋白质工程直接改造的是相应的基因，A正确。 故选A。 二、非选择题：（本题共5小题，共52分。） 17. 酵母菌与人们的日常生活密切相关，也是现代生物技术研究常用的生物。 （1）利用酵母菌发酵产生酒精的过程中，要先充气后闭气，原因是_____。 （2）利用玉米秸秆生产酒精时，水解秸秆所用的纤维素酶可来自微生物，分离产生该酶的微生物时，所需要的培养基为_____（按功能分），培养基中的碳源为_____。 （3）虽然不同的生物对营养物质的需求不同，但是培养这些微生物的培养基，一般都含有四大营养成分，即_____、_____、_____和碳源。培养基灭菌的常用方法为_____。 （4）接种微生物常用的两种方法是_____、_____。实验室接种微生物时，常在酒精灯火焰旁进行，这样操作的目的是_____。 【答案】（1）先充气有利于酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，当酵母菌繁殖到一定数量后，需要闭气造成无氧环境，让酵母菌进行无氧呼吸产生酒； （2） ①. 选择培养基 ②. 纤维素 （3） ①. 水 ②. 无机盐 ③. 氮源 ④. 高压蒸汽灭菌法 （4） ①. 平板划线法 ②. 稀释涂布平板法 ③. 避免周围环境中的微生物的污染 【解析】 【分析】1、培养基的种类及用途：（1）按物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。（2）按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴别培养基。 2、灭菌（1）灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。（2）灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌。①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱 ；③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅 。 【小问1详解】 利用酵母菌发酵产生酒精的过程中，要先充气后闭气，原因是酵母菌是兼性厌氧菌，因此果酒发酵时先通气使酵母菌大量繁殖，后闭气使酵母菌进行酒精发酵。 【小问2详解】 利用玉米秸秆生产酒精时，水解秸秆所用的纤维素酶可来自微生物，由于该培养基以秸秆（纤维素）为唯一碳源，原则上，只有能分解纤维素的微生物才能在该培养基上生存，因此按功能分，该培养基属于选择培养基。 【小问3详解】 虽然不同的生物对营养物质的需求不同，但是培养这些微生物的培养基，一般都含有 水、无机盐、碳源、氮源 （基本成分）和生长因子等。培养基灭菌的常用方法为高压蒸汽灭菌法。 【小问4详解】 分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。实验室接种微生物时，常在酒精灯火焰旁进行，这样操作的目的是酒精灯火焰旁存在无菌区域，可以避免周围环境中的微生物的污染。 18. 如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程，请回答下列问题。 （1）①②过程所用的酶是________________，③过程完成所依据的原理是____________。 （2）图示的技术名称是____________________；由⑤⑥⑦培育成植株的过程运用的技术手段是__________________，其依据的原理是______________。 （3）过程③称为___________________，④过程成功的标志是______________。 （4）过程__________属于脱分化，过程__________属于再分化，细胞发生分化的根本原因是 _____________。 （5）若番茄细胞内含A个染色体，马铃薯细胞内含B个染色体，则“番茄－马铃薯”细胞内含_____个染色体；若采用杂交育种方法成功的话，得到的后代含个 ____染色体，必须用_______________来处理幼苗，才能得到可育的“番茄－马铃薯”，其中含有_____个染色体。植物体细胞杂交方法的优点是 ________________。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 细胞膜的流动性 （2） ①. 植物体细胞杂交技术 ②. 植物组织培养 ③. 植物细胞的全能性 （3） ①. 诱导原生质体融合 ②. 再生出新的细胞壁 （4） ①. ⑤ ②. ⑥ ③. 基因的选择性表达 （5） ①. A+B ②. （A+B)/2 ③. 秋水仙素或低温 ④. 4 ⑤. 克服远远杂交不亲和的障碍 【解析】 【分析】1、植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。植物组织培养的技术是植物细胞具有全能性。2、植物体细胞杂交技术是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植株的技术。 【小问1详解】 过程①②为去掉植物细胞壁获得原生质体的过程，植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，利用酶的专一性，选用纤维素酶和果胶酶进行去壁处理；过程③为诱导原生质体融合，利用了细胞膜具有流动性的特点。 【小问2详解】 图示过程为将不同来源的植物体细胞，通过诱导细胞融合、植物组织培养获得含有不同物种遗传物质的杂种新植株的技术，属于植物体细胞杂交技术；⑤为杂种细胞脱分化形成愈伤组织，⑥为再分化为胚状体；⑦为培养为植株，整个过程将杂交细胞培育为完整植株，属于植物组织培养技术，利用了植物细胞具有全能性的原理。 【小问3详解】 过程③之前为两个原生质体，之后为二者融合形成一个原生质体，指诱导原生质体融合；④过程之后生出了新的细胞壁，标志着细胞融合成功，即④过程成功的标志为再生出新的细胞壁。 【小问4详解】 由图可知，④过程属于脱分化，⑤过程属于再分化，细胞分化的根本原因是基因的选择性表达。 【小问5详解】 若番茄细胞内含A个染色体，马铃薯细胞内含B个染色体，“番茄－马铃薯”细胞含有两种杂种细胞的染色体，故含有A＋B个染色体；若采用杂交育种方法成功，杂交属于有性繁殖，后代是由两种植株的配子结合形成受精卵发育而来的，故得到的后代含（A＋B）/2个染色体，由于后代细胞中没有同源染色体，减数分裂形成配子过程中联会紊乱，无法形成可育配子，故必须用秋水仙素或低温处理幼苗，才能得到可育的“番茄－马铃薯”。植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离，实现远源杂交育种，培育植株新品种等方面展示出独特的优势，植物体细胞杂交技术的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍。 19. 克隆技术又称生物放大技术，为探究克隆技术能否用于人帕金森病的治疗，科研人员利用“人帕金森病模型鼠”进行了如图所示实验。请回答下列问题： （1）去核前应保证采集的卵母细胞在体外培养至________期才能用于动物体细胞核移植。在动物体细胞核移植技术中，通常选择卵母细胞作为受体细胞，原因有________等。（答2点） （2）体外培养早期胚胎时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入________等一些天然成分。 （3）若想在过程①前获得更多的卵母细胞，一般注射________（激素名称）使雌鼠超数排卵，若用胚胎分割技术分割囊胚阶段的胚胎时，应注意________，否则会影响胚胎的恢复和进一步的发育。 （4）过程⑤中是否需要对人帕金森病模型鼠注射相应的免疫抑制剂以避免发生免疫排斥反应，回答并说明理由：________，________。 【答案】（1） ①. MⅡ ②. 卵母细胞的体积大、易操作、营养物质含量丰富，同时还含有促进细胞核全能性表达的物质 （2）血清 （3） ①. 促性腺激素 ②. 将内细胞团均等分割 （4） ①. 不需要 ②. 该过程中移植的神经元的遗传物质主要来自该小鼠，不会发生免疫排斥反应 【解析】 【分析】题图分析：图中①为核移植过程，②是早期胚胎培养过程，③是获取胚胎干细胞的过程，④是诱导胚胎干细胞分化形成神经元的过程，⑤是器官移植过程。 【小问1详解】 从卵巢中采集的卵母细胞需在体外培养至MⅡ期才能用于体细胞核移植；在动物体细胞核移植过程中，通常选择卵母细胞作为受体细胞，原因有卵母细胞的体积大、易操作、营养物质含量丰富，同时还含有促进细胞核全能性表达的物质等。 【小问2详解】 体外培养重构胚时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入动物血清等一些天然成分。 【小问3详解】 胚胎工程中一般采用促性腺激素处理雌鼠使其超数排卵，以便获得更多的卵子，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 【小问4详解】 利用图示方法对人帕金森病模型鼠进行治疗时不需要给小鼠注射相应的免疫抑制剂，因为该过程中移植的神经元的遗传物质主要来自该小鼠，不会发生免疫排斥反应。 20. 埃博拉病毒(EBoV)衣壳外有包膜，包膜上有多种棘突蛋白，其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞识别。如图为制备抗埃博拉病毒单克隆抗体的过程。回答下列问题： （1）制备抗埃博拉病毒单克隆抗体时，需要用灭活的EBoV对小鼠进行多次注射的目的是___________ （2）细胞融合的原理是___________。诱导动物细胞融合常用的方法除了电融合和___________外，还可以用灭活的病毒进行诱导。 （3）单克隆抗体制备过程中要经过两次筛选。第一次筛选出杂交瘤细胞，再对杂交瘤细胞进行___________，经多次筛选后可获得足够数量的单克隆抗体。 （4）体外培养杂交瘤细胞的培养液中营养物质种类要齐全，比例要合适，此外为补充细胞生长所需的未知营养物质还需要添加___________。 【答案】（1）刺激小鼠产生更多已免疫的B淋巴细胞(细胞A)        （2） ①. 细胞膜具有一定的流动性 ②. 聚乙二醇(PEG)诱导法   （3）克隆化培养和抗体检测    （4）动物血清  【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 小问1详解】 制备单克隆抗体时，用抗原对小鼠进行免疫，使小鼠产生免疫的B淋巴细胞，此过程需要多次免疫小鼠以便获得更多免疫的B淋巴细胞。 【小问2详解】 诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有一定的流动性；在体外融合时需要诱导，动物细胞融合可以用电融合法、聚乙二醇(PEG)融合法、灭活病毒诱导法。 【小问3详解】 单克隆抗体制备过程中要经过两次筛选，第一次用选择培养基筛选，目的是获得杂交瘤细胞，再对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后最终得到的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体。 【小问4详解】 为补充细胞生长所需的未知营养物质，需要在培养液中添加动物血清。 21. 番茄不耐寒，冬季容易冻坏，难以储藏。我国科研人员从某植物中提取了一种抗冻基因AtCOR15a，经过一系列过程获得转基因的抗冻番茄新品种，操作流程如图。回答下列问题： （1）用PCR技术扩增AtCOR15a基因时需要添加引物，引物的作用是_____。 （2）如果要将AtCOR15a基因与质粒正确构建成重组质粒，一般采用双酶切法，选用双酶切法的优势是______。 （3）图中是采用_____法将目的基因转移到番茄细胞中，并将其整合到该细胞的_____上。 （4）为了提高AtCOR15a基因的表达能力，可将AtCOR15a基因与外源强启动子连接，如下图所示。 利用PCR检测上述连接是否正确，可选择的引物组合是_______，该PCR反应体系中需加入_______酶。 （5）为了进一步提高番茄的储藏时间，可从该植物体内提取Ers1基因（乙烯受体基因），按照下图流程将Ers1基因重新导回该植物，致使该植物原有Ers1基因翻译受抑制。已知限制酶EcoRI和XhoI、BanHI切割后露出的黏性末端碱基序列不同，据图分析，提取的目的基因A、B两端需分别添加________的识别序列。推测该方法提高番茄储藏时间的分子机理是_________。 【答案】（1）使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 （2）可防止目的基因和质粒的自身环化，确保目的基因与质粒正向连接 （3） ①. 农杆菌转化 ②. 染色体DNA （4） ①. ①+③ ②. 耐高温的DNA聚合 （5） ①. XhoⅠ和EcoRⅠ ②. Ers1基因反向插入质粒，该基因导入植物细胞后转录形成的RNA可与内源Ers1基因转录形成的mRNA结合，乙烯受体合成减少，从而无法正常识别乙烯信号，进而延缓成熟 【解析】 【小问1详解】 用PCR技术扩增AtCOR15a基因时需要添加引物，引物是已知一段目的基因的核苷酸序列，其作用是使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始复制。 【小问2详解】 采用一种限制酶切割目的基因两端和质粒会产生四个相同的黏性末端，在通过DNA连接酶连接目的基因和质粒是会发生目的基因和质粒的自身环化，以及目的基因和质粒 的反向连接，采用双酶切法切割目的基因和质粒，目的基因两端的黏性末端不相同，质粒上也保留了两个不同但与目的基因两端相同的黏性末端，可避免目的基因与质粒自身环化，确保目的基因与质粒正向连接。 【小问3详解】 将目的基因转移到植物细胞常使用农杆菌转化法，利用农杆菌转化法将目的基因转移到番茄细胞中，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。 【小问4详解】 利用PCR检测连接是否成功，应当将强启动子和AtCOR15a基因都扩增出来，所以可选择的引物组合是①+③，PCR反应一般包括变性、复性、延伸三个步骤，需使用耐高温的DNA聚合酶。 【小问5详解】 利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，能进入细胞的是携带目的基因的T-DNA片段，LB、RB分别是T-DNA的左边界和右边界，因此Ers1基因(乙烯受体基因)应反向插入LB和RB之间，故提取的目的基因A、B两端需分别添加XhoI和EcoRI。推测该方法提高番茄储藏时间的机理是Ers1基因反向插入质粒，该基因导入植物细胞后转录形成的RNA可与内源Ers1基因转录形成的mRNA结合，乙烯受体合成减少，从而无法正常识别乙烯信号，进而延缓成熟。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $