山东省济宁学院附属高级中学2025-2026学年高二下学期4月考试生物试题

济宁学院附属高中2024级2025-2026学年度 第二学期阶段性学情调研生物试题 一、选择题（共15个题，每题2分，只有一个选项符合题意） 1. 下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 限制酶只能特异性地识别6个核苷酸序列 B. 限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团 C. 用做分子运输车的质粒常有特殊的抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选 D. DNA连接酶能连接双链DNA片段互补的黏性末端或平末端，从而恢复被限制酶切开的氢键 2. 下图表示基因工程中目的基因的获取示意图，下列叙述错误的是（ ） A. ③表示PCR技术，用来获取和扩增目的基因 B. 若获取的目的基因相同，则图中基因组文库小于cDNA文库 C. 要从基因文库中得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息来获取 D. 若基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以直接通过人工合成的方法获取 3. 下列关于将目的基因导入受体细胞的说法中，错误的是（ ） A. 将目的基因导入动物细胞采用最多的方法是显微注射技术 B. 植物的受体细胞只能是受精卵细胞 C. 利用农杆菌转化法时Ti质粒上T-DNA可以实现目的基因定点插入受体细胞 D. 将某种药用蛋白基因导入动物受精卵中即可获得乳腺生物反应器 4. 下列关于“基因探针”的叙述，正确的是 A. 基因探针既可以检测某一特定的DNA，也可检测RNA B. 基因探针是一小段具有随机脱氧核苷酸序列的单链DNA C. 基因探针既可以检测核酸分子，又可以检测特定的蛋白质 D. 基因探针以其双链形式发挥作用，其放射性和荧光标记便于检测 5. 农杆菌中的Ti质粒是植物基因工程中常用的载体，下列有关叙述正确的是（ ） A. Ti质粒是能够自主复制的单链DNA B. Ti质粒要有限制酶的识别位点和标记基因 C. 目的基因应插入T-DNA片段外，以防止破坏T-DNA D. Ti质粒上的基因可全部整合到受体细胞染色体上 6. 下图是某兴趣小组PCR产物琼脂糖凝胶电泳的结果。有关分析正确的是（　　） A. 凝胶加样孔应在A端，且A端应连接电源的正极 B. 1号和2号泳道的PCR产物具有相同的碱基排列顺序 C. 若两个PCR产物分子质量接近，可延长电泳时间以区分条带 D. 琼脂糖熔化并稍冷却后，倒入模具让其完全凝固，再加入适量核酸染料 7. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”、“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的叙述，错误的是（　　） A. 将洋葱研磨过滤，将滤液在4℃冰箱中静置后，DNA主要分布在上清液中 B. 将丝状物溶于2mol/LNaCl，再加入二苯胺试剂沸水浴，冷却后观察颜色变化 C. 将PCR产物和电泳缓冲液混合后，需用微量移液器将混合液缓慢注入加样孔 D. 待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时停止电泳，取出凝胶置于紫外灯下观察 8. 蛛丝蛋白是一种特殊纤维蛋白，有强度高、韧性大等特点，在纺织、医疗、军工等多领域具有广阔的应用前景。利用PCR技术扩增蛛丝蛋白基因，可用于蛛丝蛋白的规模化生产。下列叙述正确的是（　　） A. 耐高温的DNA聚合酶在PCR扩增的复性和延伸阶段发挥作用 B. PCR扩增蛛丝蛋白基因时，子链的延伸方向是3'→5' C. 为使PCR产物能被特定限制酶切割，可在引物的5'端添加对应识别序列 D. 限制酶破坏一个PCR产物中的两个磷酸二酯键，可获得两端为黏性末端的蛛丝基因片段 9. 研究人员欲将某动物体内基因X导入大肠杆菌的质粒中保存，质粒含有抗性基因与酶切位点，目的基因两端酶切位点如下图所示，下列叙述错误的是（　　） A. 使用HindⅢ和XbaI进行酶切能避免基因X与质粒反向连接 B. 目的基因X与质粒连接可使用E.coliDNA连接酶 C. Ca2+处理大肠杆菌能降低细胞膜通透性，有利于重组质粒导入受体细胞 D. 含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长 10. 下图为利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述正确的是（ ） A. 基因工程的原理是基因重组 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. 农杆菌转化法是指上图中的②→③的过程 D. 基因工程的操作程序中核心步骤是目的基因的筛选与获取 11. 研究者将含有铁蛋白肽基因和人干扰素基因的DNA片段分别制成探针，与从转基因奶牛的乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞中提取的mRNA分别进行杂交，结果如下表所示。下列叙述正确的是（ ） 探针 乳腺细胞 口腔上皮细胞 蹄部细胞 乳铁蛋白肽基因探针 出现杂交带 未现杂交带 未现杂交带 人干扰素基因探针 出现杂交带 出现杂交带 出现杂交带 A. 乳铁蛋白肽基因可在转基因奶牛的多种体细胞中表达 B. 人干扰素基因可在转基因奶牛的多种体细胞中表达 C. 表中两种基因探针所含的脱氧核苷酸的序列相同 D. 乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因都是mRNA片段 12. 我国国产的转基因抗虫棉种植面积已经超过抗虫棉种植面积的95%。将抗虫基因导入棉花细胞的方法主要是农杆菌转化法，以下相关操作及结果的叙述，错误的是（ ） A. 需用相同的限制酶切割Bt毒蛋白基因和农杆菌的Ti质粒 B. 限制酶和DNA连接酶分别催化磷酸二酯键的水解和形成 C. 用放射性同位素标记的Bt毒蛋白基因作探针检测抗虫基因导入是否成功 D. 抗虫基因转移至受体细胞染色体DNA上获得抗虫棉属于染色体变异 13. 玉米人工驯化过程中丢失了一个控制高蛋白含量的优良基因THP9基因，现利用基因工程技术将THP9基因重新转到玉米细胞内。下列相关叙述正确的是（ ） A. 若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则第n次复制共需要引物2n-1个 B. PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+用于激活RNA聚合酶 C. 利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4 D. 构建重组质粒时用MfeI、HindⅢ切割质粒 14. 人组织纤溶酶原激活物htPA是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得，生产流程如下图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. 构建重组表达载体时需要用DNA聚合酶和DNA连接酶 B. 检测目的基因是否已转录出mRNA，可采用PCR等技术 C. PCR产物电泳鉴定时，应使用蒸馏水配制琼脂糖凝胶 D. 若在母羊的体细胞中检测到htPA基因，说明目的基因成功表达 15. 2024诺贝尔化学奖颁给“AI蛋白质设计和结构预测”，利用AI算法快速模拟、预测和优化的蛋白质结构与已知的蛋白质完全不同，但它们与天然蛋白质同样具有活性，并且最终设计出的蛋白质，是通常需要数百年才能进化出来的高活性蛋白质。下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是（ ） A. 进行蛋白质工程研究的原因是基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质 B. 蛋白质工程是基因水平上对蛋白质进行改造或制造 C. 大肠杆菌常用于蛋白质工程中产物的生产，这离不开其繁殖速度快，能对分泌蛋白进行复杂加工、遗传背景清晰等生理特点 D. “AI蛋白质设计和结构预测”解决了蛋白质工程中，序列-结构-功能关系难以准确预测的问题 二、不定项选题（共5个题，每题3分，少选得1分，错选不得分） 16. 研究人员利用PCR扩增转基因植物基因组中的某段外源基因片段，并通过琼脂糖凝胶电泳对产物进行鉴定。下列相关叙述正确的是（　　） A. PCR反应体系中需加入模板DNA、引物、耐高温的DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸等 B. PCR复性温度与引物的GC含量有关，一般后者含量越高则复性温度越低 C. 若将已知长度的DNA标准品加入同一凝胶中，可用于估算其他扩增产物的分子大小 D. 3号泳道中的亮度较低，说明样本2植物不含有该基因或该植株为相关基因的杂合子 17. CRISPR/Cas9系统由向导RNA和Cas9蛋白组成，由向导RNA（gRNA）引导Cas9蛋白在特定的基因位点进行切割，从而完成基因的编辑过程，过程如图所示。现欲用CRISPR/Cas9编辑技术对轮状病毒（双链RNA病毒）进行编辑，下列相关叙述错误的是（ ） A. 若向导RNA的序列为5'—UCACAUC—3'，则其识别的基因靶序列为3'—AGTGTAG—5' B. Cas9类似于基因工程中的限制酶，其作用位点是磷酸二酯键 C. 向导RNA的碱基序列越短，则其在基因上出现定位错误的概率越低 D. 可以根据目标基因的碱基序列人工设计向导RNA 18. 融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析正确的是（　　） A. 上述过程中使用的引物P2和P3的碱基需要完全互补配对 B. 设计引物的目的是为了能够从其3'端开始连接脱氧核苷酸 C. 融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物 D. 若融合PCR的第二步获得128个融合基因，理论上该过程消耗了254个引物 19. 双向启动子可同时结合两个RNA聚合酶来驱动下游基因的表达，研究人员构建了如图所示的表达载体，以检测双向启动子作用效果。下列分析不正确的是（ ） A. 表达载体中GUS基因和LUC基因转录时使用T-DNA的不同DNA单链为模板 B. 为连入GUS基因，需用Sal I和Sph I酶切已整合了双向启动子及LUC基因的质粒 C. 在培养基中添加壮观霉素可初步筛选出成功导入表达载体的微生物细胞 D. 可通过观察是否出现荧光和蓝色物质确认双向启动子的作用 20. 将编码四种不同酶的基因OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR与叶绿体转运肽基因连接，搭载到农杆菌Ti质粒的T-DNA 片段构建多基因表达载体，最终在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列说法错误的是（ ） A. 图中表达载体中的T-DNA插入外源基因后将使农杆菌失去侵染能力 B. 四种基因最终都在水稻叶绿体内进行转录、翻译 C. 应选用含潮霉素的培养基筛选转化成功的水稻细胞 D. 可用抗原-抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达 三、非选择题（共5题，55分） 21. 干扰素是动物体内的一种蛋白质，可以用于治疗病毒的感染和癌症，但在体外保存相当困难。如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可在-70℃下保存半年，给广大患者带来福音。回答下列问题： （1）蛋白质工程是在分子水平上对______直接进行操作，定向改变分子结构。天然蛋白质合成的过程是按照克里克提出的中心法则进行的，而蛋白质工程却与之_____（填“相同”或“相反”）。依据蛋白质工程原理，设计实验流程，让动物生产可以保存的干扰素，其基本途径是：预期蛋白质的功能→设计_____→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。 （2）上述过程设计的脱氧核苷酸序列______（填“是”或“不是”）唯一的，原因是_____。该方法获得的干扰素基因与细胞内干扰素基因相比，结构上不同之处有____。 22. 科研人员用现代生物技术来大量生产人的血清蛋白（HSA）。图1为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，其中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。目前通过基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的三条途径如图2所示。回答下列问题。 （1）在构建基因表达载体时，选择限制酶_______切割质粒和目的基因。 （2）将基因表达载体导入农杆菌前，需用Ca2+处理农杆菌，其目的是______。为排除未导入质粒受体细胞的干扰，需将农杆菌置于含______的培养基中进行培养，然后用筛选出来的农杆菌去侵染水稻细胞。 （3）相比于转基因酵母菌，利用转基因大肠杆菌产生的rHSA没有活性，原因可能是_____。 （4）若选用山羊作为受体动物，用乳腺生物反应器来大量生产HSA，可将HSA基因与_____等调控组件重组在一起，通过_____方法将目的基因导入山羊的受精卵中，然后使其发育成转基因山羊。 23. 牛乳铁蛋白肽（LF）具有很强的抗菌性。使用增强型荧光蛋白基因（EGFP）与LF基因构建重组表达载体然后将其导入到毕赤酵母中可解决LF分子量小而难以提纯的问题，最终实现LF的高效生产与提纯。 （1）通过PCR得到EGFP基因及构建基因表达载体的过程需要使用的酶有____。除图3中标出的结构外，作为载体还需具备的结构有____。 （2）为构建基因表达载体，已通过PCR在EGFP基因的两端引入相应的限制酶识别序列。为将EGFP 基因定向的插入图3所示载体中，据图分析不能选择限制酶组合____（填编号）（①BamHI、EcoRI ②BgtII、BamHI、③BgtⅡ、EcoRI）限制酶切割质粒，理由是____。 （3）提取到融合蛋白后需要将EGFP蛋白去除才能得到生产所需的LF，为方便除去EGFP蛋白，可引入甲酸裂解位点（天冬氨酸—脯氨酸，对应的mRNA序列为：5＇-GAC-CCA-3＇PCR扩增EGFP基因时需将甲酸裂解位点的对应序列引入到____（填“引物1”或“引物2”）的____端，甲酸裂解位点在引物中对应的序列为5'-____3'。 24. 地衣芽孢杆菌产生的胞外多糖（EPS）通过促进大粒径土壤团聚体形成以改良土壤。研究者利用EPS合成酶基因（H基因）和含木糖诱导型启动子的p质粒（二者结构如图1所示）构建重组载体，以改造地衣芽孢杆菌并获取高产菌株。 （1）图1中H基因以a链为转录模板链，由此可以推测H基因的转录是从其______（填“左侧”或“右侧”）开始的。H基因上的一段序列为：5'-ATCTCGAGCGGG-3′中包含Xho识别序列（含有6个核苷酸），则这6个核苷酸序列是_____。构建重组质粒时，为保证H基因与p质粒正确连接，p质粒位点1和2的所对应的酶分别是______，酶切后加入______酶使它们形成重组质粒。 （2）将构建好的重组质粒转入经Ca2+处理后的地衣芽孢杆菌，经PCR等方法筛选获得到转基因地衣芽孢杆菌，在PCR前需对枪头、微量离心管进行______处理。对其进行工业培养时，添加木糖获取更多EPS的机理是______。 （3）质粒在细菌细胞中遗传不稳定，易丢失，研究者尝试将重组质粒进行改造，利用同源区段互换的方法将H基因插入地衣芽孢杆菌的拟核DNA中，得到整合型地衣芽孢杆菌F。若将三种地衣芽孢杆菌进行培养，结果如图2。其中D菌为不含有H基因的地衣芽孢杆菌，E菌含有H基因，但H基因没有整合到地衣芽孢杆菌的拟核DNA中。据图判断______最适宜改良土壤生产胞外多糖（EPS），请阐明理由______。 25. 幽门螺杆菌（Hp）是慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，该菌的Ipp20基因能合成其特有的蛋白质，据此，研究者利用基因工程制备Hp疫苗。已知Ipp20基因表达时，双链DNA的一条链是编码链，另一条链是模板链，如图1；四种限制酶及其识别序列如图2；三种质粒如图3；箭头表示限制酶的切割位点；操作步骤如图4。回答下列问题： （1）Ipp20基因终止子序列位于图1中的_____区段，该基因转录时，编码起始密码子的序列位于图1中的_____区段。 （2）若通过PCR技术大量扩增Ipp20基因的编码区段，则需要设计一对引物，引物的作用是_____，其中结合到编码链上的引物序列是_____（方向为5′→3′，写出5'端8个碱基序列）。 （3）据图1、2、3分析，构建基因表达载体时，应选用的限制酶是_____，最适合用作载体的质粒是_____。 （4）图4中为筛选出含有目的基因的大肠杆菌，通常采用影印法（使用无菌的线毡布压在培养基A的菌落上，带出少许菌种，平移并压在培养基B上、结果如图所示）。培养基A、B中应分别添加_____，符合实验要求的菌落是_____（填写数字），判断依据是_____。 济宁学院附属高中2024级2025-2026学年度 第二学期阶段性学情调研生物试题 一、选择题（共15个题，每题2分，只有一个选项符合题意） 【1题答案】 【答案】B 【2题答案】 【答案】B 【3题答案】 【答案】BC 【4题答案】 【答案】A 【5题答案】 【答案】B 【6题答案】 【答案】C 【7题答案】 【答案】C 【8题答案】 【答案】C 【9题答案】 【答案】C 【10题答案】 【答案】A 【11题答案】 【答案】B 【12题答案】 【答案】D 【13题答案】 【答案】D 【14题答案】 【答案】B 【15题答案】 【答案】C 二、不定项选题（共5个题，每题3分，少选得1分，错选不得分） 【16题答案】 【答案】AC 【17题答案】 【答案】AC 【18题答案】 【答案】BCD 【19题答案】 【答案】BC 【20题答案】 【答案】AB 三、非选择题（共5题，55分） 【21题答案】 【答案】（1） ①. 基因 ②. 相反 ③. 预期的蛋白质结构 （2） ①. 不是 ②. 因为密码子具有简并性 ③. 该方法获得的干扰素基因不含内含子、启动子和终止子 【22题答案】 【答案】（1）EcoR Ⅰ和Pst Ⅰ （2） ①. 使农杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态 ②. 新霉素 （3）大肠杆菌为原核生物，无内质网和高尔基体，不具备加工rHSA的能力 （4） ①. 乳腺中特异性表达的基因的启动子 ②. 显微注射 【23题答案】 【答案】（1） ①. 耐高温的DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶)、限制酶、DNA连接酶 ②. 标记基因(和复制原点) （2） ①. ② ②. BgtII与BamHI会产生相同的黏性末端而无法防止目的基因反向连接(反向连接、BgtII与BamHI会产生相同的黏性末端) （3） ①. 引物2 ②. 5' ③. TGGGTC 【24题答案】 【答案】（1） ①. 右侧 ②. 5'-CTCGAG-3′ ③. Xho I、Bsa I ④. DNA连接 （2） ①. 灭菌 ②. p质粒上是木糖诱导型启动子，在培养基中需要添加木糖，才能诱导H基因表达出产物胞外多糖（EPS） （3） ①. F菌 ②. D菌不能产生胞外多糖（EPS），F菌比E菌生长迅速，胞外多糖（EPS）产量高，H基因整合到细菌DNA上，不易丢失 【25题答案】 【答案】（1） ①. 非编码区2 ②. 编码区 （2） ①. 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 ②. 5′-TCTAGAGG（5′-TCTAGAGG--3′） （3） ①. XbaI、XhoI ②. 质粒Z （4） ①. 潮霉素、氯霉素 ②. 3、5 ③. 菌落3、5在含潮霉素培养基中能生长，但在含氯霉素培养基中不能生长，说明含有因插入目的基因而丢失氯霉素抗性基因的重组质粒 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $