1.2.2 微生物的培养技术与应用2课件-2025-2026学年高二生物下学期人教版选择性必修3

该高中生物学课件聚焦微生物的基本培养技术，涵盖无菌技术（消毒与灭菌）、纯培养方法（平板划线法、稀释涂布平板法）及实验操作。通过“问题探讨”导入，结合李兰娟院士实例引发思考，从概念辨析到实验步骤，构建从理论到实践的学习支架。 其亮点在于融合科学思维（对比消毒灭菌本质区别）、探究实践（详细倒平板、划线操作及结果分析）和态度责任（联系实际消毒应用）。采用表格归纳、快问快答及实战演练，强化知识应用。学生能提升实验能力与科学思维，教师可借助清晰结构高效教学。

微生物的培养技术和应用 1.2.2 微生物的培养技术和应用 第一章 发酵工程 ——微生物的基本培养技术（2） 杂菌很多怎么办？ 无菌技术！！！ 例如李兰娟院士在记者会上透露，只有75%酒精消毒才能有效消灭细菌和活病毒！ 75%乙醇 95%乙醇 ￭ 问题探讨 一、无菌技术 旁栏：还有什么目的？ 无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染 ！！！ 采用强烈的理化方法 杀死物体内外所有微生物（包括芽孢和孢子） 采用相对较为温和物理、化学或生物方法， 杀死物体表面或内部一部分微生物 1 概念： 无菌操作泛指在培养微生物的操作中防止杂菌污染的方法。 2 类型： 包括 消毒 灭菌 -----与消毒最本质区别 芽孢是某些细菌在营养条件缺乏时，在菌体内形成的含水量低、抗逆性强的休眠体； 孢子是脱离亲本后能直接或间接发育成新个体的生殖细胞。 类型 适用范围 操作方法 家庭餐具等生活用品 牛奶等不耐高温的液体 生物活体（皮肤、伤口）、水源等 接种室、接种箱，超净工作台 接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等 耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等 培养基及多种器材和物品 煮沸消毒 巴氏消毒 化学药剂 紫外线 灼烧灭菌 干热灭菌 湿热灭菌 强烈的理化方法，杀死所有微生物。 较为温和理化方法，杀死部分微生物。 消 毒 灭 菌 100℃煮沸5～6min 62～65℃煮30min或80-90℃煮30s-1min 擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源 紫外线照射30min 直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 （迅速彻底） 物品放入干热灭菌箱,160～170℃,加热2～3h 高压蒸汽灭菌锅内,100kPa,温度121 ℃, 15～30min ——请阅读教材P11资料卡, 完成下列表格 一、无菌技术 一、无菌技术 4 无菌的范围： ①实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒 ②培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌 ③实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触 注意： 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台 并在酒精灯火焰附近进行。 二、 微生物的纯培养 在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。 培养物 该菌落是纯培养物吗？ 由单一个体繁殖所获得的微生物群体（≈单菌落） 不是 二、 微生物的纯培养 1 纯培养的概念： 获得纯培养物的过程就是纯培养。 2 纯培养的常用方法： 包括 平板划线法 稀释涂布平板法 包括制备培养基（包括配制培养基、灭菌、倒平板）、接种、分离和培养等步骤。 平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落。 稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，最后得到单菌落。 1.学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板。 2.学会进行无菌操作。 3.尝试通过平板划线 （稀释涂布）操作来获得纯化的酵母菌菌落。 材料：酵母菌培养液、 试剂：马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、琼脂、蒸馏水、 仪器：天平、小刀、纱布、烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸（或报纸）、皮筋、培养皿、接种环（涂布器）、酒精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱和恒温培养箱等。 材料用具: 目的要求： 二、 微生物的纯培养 —— 酵母菌的纯培养 3 方法步骤： 制备培养基 接种 分离 培养 马铃薯琼脂培养基（PDA） 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作， 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。 经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右（培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异）的恒温培养箱中培养24~48h。 二、 微生物的纯培养 配置培养基 灭菌 倒平板 空白对照 —— 酵母菌的纯培养 干热灭菌箱 高压蒸汽灭菌锅 160-170 ℃下 加热2-3h 100kPa、121 ℃下 维持15-30min 灭 菌 13 1．拔出锥形瓶的棉塞。 2．将瓶口迅速通过火焰。 3．用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养皿（10～20mL）倒入培养皿，立即盖上盖子。 4．等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。 翻转 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 不要完全打开，以免杂菌污染培养基 防止培养基蒸发到皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 过高：烫手 过低：培养基凝固 快问快答 1、培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？在哪倒？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2、在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 不要用 ！防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。 在酒精灯火焰附近倒平板。 （酒精灯周围5厘米处为无菌区） 会导致划线不均匀，划破处的细胞会形成一个条状的菌落， 分离单菌落目的失败。 快问快答 ——划线的注意事项 1、第一步和每次划线前都需要灼烧接种环和冷却吗？它们的作用是什么？ 每次都要，灼烧是杀灭残留杂菌 ，冷却是避免高温杀死菌种。 2、每一次都需要蘸取菌液吗？ 只有第一次灼烧冷却后需要蘸取菌液。 3、划线时动作要轻，如果不小心划破？ 1．将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红。 2．在火焰旁冷却接种环。同时，拔出装出酵母菌培养液的棉塞。 3．将试管口通过火焰。 4．在火焰附近用接种环蘸取一环菌液。 5．将试管口 通过火焰，并塞上棉塞。 6．在火焰旁打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划3～5条平行线，盖上盖子。 7．灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。 杀灭残留杂菌 避免高温杀死菌种 杀灭瓶口残留菌 无菌区 使菌种分散，容易得到单菌落。 杀死上次划线残留的菌种，使下一次划线时菌种来自上一次划线末端 二、 微生物的纯培养 在未接种的培养基表面应该没有菌落生长，如果有，说明培养基被杂菌污染 —— 操作不合格。 4 结果分析与评价： 1、在未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有，说明了什么？ 2、在接种酵母菌的培养基上，你是否观察到了单菌落？这些菌落的颜色、大小是否一致？如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗？ 如果观察到了不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因引起的。 课堂小结 微生物的基本培养技术 培养基的配置 微生物的纯培养 无菌技术 成分 类型 灭菌 消毒 物理性质 化学成分 用途 较为温和、杀死一部分微生物 强烈、杀死所有微生物 一、概念检测 1. 微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。判断下列相关表述是否正确。 1）培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利。 （ ） 2）消毒和灭菌的杀菌程度存在差异。 （ ） 3）微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物。 （ ） × √ × ￭ 实战演练 一、概念检测 2.日常生活中保存食品的方法有哪些？这些方法是如何阻止或抑制微生物生长的？ ￭ 实战演练 3、 下列实验室培养过程中的操作属于灭菌的是（　　） A. 接种前用酒精棉球擦拭双手和工作台面 B. 倒培养基时灼烧刚打开的锥形瓶的瓶口 C. 牛奶在80℃下煮15min以杀死其中的微生物 D. 通过紫外光或者喷洒石炭酸溶液处理实验室 B ￭ 实战演练 4、 下列关于平板划线的操作，正确的是（ ） A. 每次划线前都要蘸取菌液 B. 接种前，要将菌种试管口通过火焰 C. 平板划线操作时划出了五个区域菌落数逐渐增多 D. 灼烧接种环后，要立即用接种环接种 5、平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是（ ） A. 都要将菌液进行一系列的梯度稀释 B. 都要使用接种针进行接种 C. 稀释涂布平板法是将不同w度的菌液倒入液体培养基进行培养 D. 都会在培养基表面形成单个的菌落 ￭ 实战演练 B D Lavf58.51.100 接种和分离酵母菌 jasmine $