云南省德宏州高二年级下学期阶段测试（人教版选择性必修三）2

**基本信息** 这份高二生物学期末试卷以基因编辑猪肾移植、新冠疫苗研发等科技前沿为情境，覆盖基因工程、细胞工程等核心知识，通过实验分析与逻辑推理考查科学思维和探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/48分|微生物发酵、胚胎移植、PCR技术等|结合乳酸菌食品应用、抗生素抑菌实验等情境，考查结构与功能观| |非选择题|5题/52分|基因表达载体构建、植物组织培养等|以胰岛素生产、紫色小麦培育为载体，通过限制酶选择、甲基化调控等问题，培养科学探究与社会责任|

Sheet1 双向细目表 题号 题型 分值 考 点 难度系数（预估） 1 单选题 3 乳酸菌在发酵技术的应用 0.75 2 单选题 3 微生物的具体操作过程 0.75 3 单选题 3 微生物的筛选原理考察 0.75 4 单选题 3 植物组织培养和植物细胞培养的具体操作 0.65 5 单选题 3 胚胎移植技术的过程及应用 0.65 6 单选题 3 动物细胞融合及单克隆抗体的应用 0.65 7 单选题 3 基因编辑技术结合转基因动物器官培育 0.65 8 单选题 3 胚胎干细胞结合动物细胞工程的操作 0.55 9 单选题 3 动物细胞工程和胚胎工程的原理及技术操作要点 0.65 10 单选题 3 农杆菌转化法的具体操作要点 0.5 11 单选题 3 限制性核酸内切酶识别特点 0.5 12 单选题 3 转基因动物的培育流程 0.65 13 单选题 3 乳腺生物反应器的制备及特点分析 0.65 14 单选题 3 DNA相关实验的具体问题 0.65 15 单选题 3 PCR的相关知识考察 0.5 16 单选题 3 生物技术的安全性及伦理问题 0.65 17 解答题 10 传统发酵技术的应用 0.65 18 解答题 9 单克隆抗体的制备及应用 0.65 19 解答题 12 基因工程的具体操作过程 0.55 20 解答题 11 基因工程结合基因编辑技术 0.55 21 解答题 10 基因工程结合孟德尔的遗传定律 0.45 Sheet2 Sheet3 $ 德宏州2026年春季学期高二生物学试卷 考试时间：75分钟 满分：100分 第I卷（选择题） 1、 单项选择题（本题共16道小题，每题3分，共48分） 1.（原创）乳酸菌是定居在人和某些动物肠道中的有益菌群，可以促进钙镁，蛋白质等物质的吸收，产生B族维生素等有益物质，基于其重要的功能，人们已经将其广泛应用于食品，保健品，饲料等，下列关于乳酸菌的说法错误的是（  ） A．乳酸菌可用于发酵制作酸奶，泡菜，奶酪等食品 B．绝大部分乳酸菌属于厌氧微生物，在无氧条件下产生乳酸和CO2 C．乳酸菌可以生产单细胞蛋白可以作为食品添加剂，增强机体的免疫力 D．在青贮饲料中添加乳酸菌可以提高饲料品质，使饲料保鲜 2．在涂有细菌的固体培养基上，不同区域贴上浸有不同种类（或浓度）抗生素的滤纸片，培养一段时间后测量抑菌圈大小，从而评估受试菌株对药物的敏感性。某次实验结果如图。下列叙述正确的是（　　） A．在图示固体培养基上接种病原菌的方法是平板划线法 B．出现抑菌圈说明细菌在接触抗生素后发生了抗性变异 C．未出现抑菌圈可能是病原菌对该种抗生素并不敏感 D．抑菌圈直径越大，说明该细菌对抗生素的抗性越强 3．刚果红可与纤维素形成红色复合物，某同学以纤维素为唯一碳源制作的培养基中添加了刚果红，然后用如右图的方法进行接种纤维素分解菌，下列说法正确的是（    ） A．该接种方法既能分离提纯微生物，还能对微生物进行计数 B．从用途的角度分，该培养基既是选择培养基，又是鉴别培养基 C．该过程中需对接种环进行灼烧灭菌，且灭菌次数为4次 D．划线区域形成的菌落周围显红色，且红色区域直径越大，说明纤维素分解菌的分解能力越强 4．从紫草细胞内提取到的紫草宁具有抗炎、抑制癌细胞增殖的作用。下图表示获得紫草宁的两种工艺途径，下列说法错误的是（    ）    A．为防止培养过程中出现病毒污染，可选择紫草的茎尖作为外植体 B．推测经紫草植株途径所得的紫草宁提取量小于经细胞培养物途径所得的紫草宁提取量 C．细胞培养物途径不占用耕地，不受季节天气限制，生产更灵活 D．紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和色素，属于紫草细胞的初生代谢物 5．我国在胚胎移植领域的成果已处于国际前沿，尤其在异种器官移植和高效繁育技术上。2025年3月，基因编辑猪肾脏成功移植到终末期肾病患者体内（技术流程见下图），术后血肌酐恢复正常，成为亚洲首例活体异种肾移植案例。下列相关叙述错误的是（    ） ①从猪耳提取体细胞→②基因编辑→③构建胚胎→④移植至代孕母猪体内→培育出无病原体供体 A．步骤①获得的体细胞培养时，为保证细胞正常增殖，往往要加入动物血清 B．步骤②基因编辑的目标之一是消除猪细胞表面引发人免疫排斥的关键抗原 C．步骤③构建胚胎，需要利用体细胞核移植技术、电融合以及早期胚胎培养 D．为提高步骤④成功率，应对代孕母猪进行同期发情处理，使用免疫抑制剂 6．人外周血淋巴细胞（N23）和小鼠骨髓瘤细胞杂交后得到人-鼠杂交瘤（NJ84）可用于制备单克隆抗体。N23和人纤维母细胞（CRL）均可释放白细胞介素6（IL-6）。为研究不同来源的IL-6对NJ84克隆化能力及抗体分泌的影响，科研人员进行了相关实验，部分结果如表所示。下列叙述不正确的是（    ） 培养细胞 条件培养液 细胞生长孔数/细胞培养孔数 抗体分泌量（pg/mL） NJ84 不含IL-6 12/48 11 NJ84 含CRL-IL-6 21/48 48 NJ84 含N23-IL-6 25/48 45 注：CRL-IL-6、N23-IL-6分别来源于对CRL、N23培养72小时后的上清液 A．N23和NJ84具有既能体外大量增殖又能产生特定抗体的特点 B．IL-6属于细胞因子，能介导细胞间的信号传导 C．在NJ84培养过程中，可添加不同来源的IL-6以提高生产效率 D．单克隆抗体既可用于癌症的靶向治疗，又可作为诊断试剂检测疾病 7．转基因猪器官移植的存活时间出现新纪录，为解决人体器官移植供体短缺的医学难题迈出了关键一步。研究人员敲除SIXI和SALLI基因，构建了肾脏发育缺陷的猪胚胎，并将过量表达MYCN和BCL2基因的人诱导多能干细胞（iPSCs）注入猪的桑葚胚或囊胚后，培育出含有人源化肾脏组织的人－猪嵌合胚胎，用于人体器官移植。下列叙述正确的是（　　） A．对卵母细胞去核时，除显微操作外还可采用梯度离心和紫外线长时间照射等方法 B．在使用限制酶对猪胚胎进行SIXI基因敲除时，破坏四处磷酸二酯键 C．注入的人iPSCs与胚胎干细胞均能分化成各种类型的细胞 D．接受该种肾脏移植的患者，其后代可能携带部分猪的染色体 8．我国科研工作者将可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，形成嵌合胚胎，并最终得到嵌合体猴，过程如下图所示。相关叙述正确的是（    ） A．4CL干细胞注入后仅能于受体胚胎中发育成上皮组织 B．桑葚胚阶段注入的4CL干细胞会与其他胚胎细胞发生融合 C．通过观察嵌合原肠胚的外观，能准确推断4CL干细胞的占比情况 D．嵌合体猴可能通过有性生殖将4CL干细胞的遗传信息遗传给后代 9．近年来由于人类活动使得亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内受精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如图。以下说法正确的是（    ） A．胚胎工程一般采用外源性激素处理A使其超数排卵 B．D需要与A和B同期发情处理，使体内的生理环境一致从而提高胚胎的存活率 C．过程②可通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，过程③可通过电刺激完成 D．E后代遗传物质来源于A和C，F后代遗传物质来源于A和B 10．天然 Ti质粒的结构如图所示，T-DNA 上的基因只能在植物细胞中表达。vir基因表达产物可在 T-DNA左右边界序列中产生切口，并复制出单链T-DNA进入植物细胞。生长素基因和细胞分裂素基因的表达产物可促进植物细胞增殖成瘤状物但不分化出植物幼苗。冠瘿碱是农杆菌感染植物细胞后生长必需的有机物。关于将天然 Ti质粒改造为基因表达载体的说法错误的是（　　） A．vir基因表达产物具有限制酶和DNA 聚合酶活性，需保留 B．生长素基因和细胞分裂素基因不能使植物细胞表现全能性，可删除 C．删除冠瘿碱合成基因可减少已转化的植物细胞在培养过程中发生农杆菌的污染 D．在T-DNA 中插入复制原点可利于其在植物细胞染色体中复制 11．以下是限制性内切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述错误的是（    ） ① ② A．大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成 B．①②两个黏性末端，不能用DNA连接酶直接连接 C．以上DNA片段是由2种限制酶切割后产生的 D．上述连接两个黏性末端，其连接后形成的DNA序列是 12．乳糖不耐症是由于乳糖酶（LCT）分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。科研工作者利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛新品种，给患乳糖不耐症患者带来福音。下图为转基因低乳糖奶牛的培育流程，下列说法正确的是（　　） A．若想得到更多转基因低乳糖奶牛，可在胚胎发育任何阶段利用胚胎分割技术将胚胎进行分割 B．扩增目的基因时，目的基因在PCR仪中经过4次循环，需要32个引物 C．从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是核酸分子杂交技术 D．在转基因低乳糖奶牛泌乳期的乳腺细胞中，可检测到的物质有LCT基因、LCTmRNA、LCT 13．红细胞生成素（EPO）是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO。下列说法错误的是（    ） A．用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的乳腺细胞中，可得到乳腺生物反应器 B．构建基因表达载体时，需将EPO基因与乳腺蛋白基因的启动子重组在一起 C．该转基因羊中的EPO基因可在羊的乳腺细胞中表达 D．可通过PCR技术检测EPO基因是否插入山羊基因组 14．下面有关DNA相关实验的描述正确的有（　　） ①新鲜的洋葱、香蕉、菠菜、鸡血、猪血都是提取DNA的理想实验材料 ②DNA粗提取实验中洋葱研磨液可直接放入塑料离心管进行离心以便加速DNA沉淀 ③在DNA粗提取实验中，向白色丝状物中直接加入二苯胺试剂进行DNA的鉴定 ④PCR实验中，微量离心管、枪头和移液器等在使用前均须消毒处理 ⑤DNA电泳鉴定实验中，具有相同碱基数量的环状DNA和链状DNA迁移速率不同 ⑥DNA电泳鉴定实验中，加样时加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察 ⑦DNA电泳鉴定实验中，DNA的迁移速率与其分子量（大小）成正比 A．1项 B．2项 C．3项 D．4项 15．将足量的长度分别为41个碱基、63个碱基的DNA单链（如图所示）、适量Taq DNA聚合酶、4种脱氧核苷酸、扩增缓冲液和H2O加入微量离心管中，离心后控制温度等条件，一段时间后得到双链DNA产物。下列相关分析正确的是（    ） A．经过变性、复性、延伸三个步骤才能得到双链DNA B．双链DNA由84对碱基组成，形成1个DNA需消耗32个嘌呤碱基 C．形成图中所对应的n个双链DNA产物共需要另外添加2n-2个引物 D．双链DNA产物的分子数与图示两种DNA单链的添加量有关 16．利用生物工程改造生物特性，从而生产人类所需的产品。下列关于生物工程的相关知识，叙述正确的是 （ ） ①若要生产转基因抗病水稻，可将目的基因先导入到大肠杆菌中，再转入水稻细胞中 ②植物体细胞杂交，能克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出的新品种一定不是单倍体 ③基因治疗主要是对具有缺陷的体细胞进行全面修复 ④利用基因突变原理培育成生产人干扰素的酵母菌 ⑤利用基因工程手段培育成生产人胰岛素的大肠杆菌 ⑥利用细胞工程技术培育成生产单克隆抗体的细胞系 A．①③④ B．②⑤⑥ C．①②⑤⑥ D．①②③④⑥ 第Ⅱ卷（非选择题） 二、非选择题（本题共5道大题，共52分） 17．1965年中国科学家人工合成了具有生物活性的结晶牛胰岛素，摘取了人工合成蛋白质的桂冠。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的方法，实现基因重组人胰岛素的工业化生产，用于糖尿病的治疗。回答下列问题。 注：图中数值代表到复制原点的距离， AmpR氨苄青霉素抗性基因，NeoR新霉素抗性基因。 (1)基因工程中，目的基因的获取方法有多种，如从基因文库中获取、人工合成等。如果用逆转录方法合成人胰岛素基因，需要从人体___________细胞中提取RNA，得到的人胰岛素基因不含内含子，更适合在___________(填“原核”或“真核”)生物中表达。 (2)基因工程的核心步骤是___________。图 1中的载体___________不能作为基因表达载体，原因是___________________________________________________________。 (3)大肠杆菌内的目的基因转录时，转录的模板是___________(填“a链”或“b链”)，为保证目的基因与载体的正向连接，在设计PCR引物时，应在与b链相结合的引物上添加限制酶___________(填种类)的识别序列。 (4)将目的基因导入受体前，通常先用___________将受体细胞处理成感受态，即容易吸收周围环境中DNA分子的生理状态。为鉴定导入的人胰岛素基因是否成功表达，可以用___________技术进行检测。 18．柑橘树生长过程中易受某种革兰氏阴性菌感染，严重危害柑橘产量。科研人员将M基因转入柑橘中，该基因控制合成的酶可抑制该种革兰氏阴性菌的生长与繁殖。如图是培育转基因柑橘的过程示意图。 回答下列问题。 (1)在重组质粒构建过程中，为了防止M基因和载体自身环化以及反向连接，应使用_____________酶对M基因和质粒进行切割。为了获得更多M基因可利用PCR扩增技术，在PCR扩增仪中不断被消耗的物质有____________和____________。 (2)图中将目的基因导入柑橘细胞的方法是__________。为了筛选出含重组质粒的农杆菌，将农杆菌置于含____________培养基中培养，此时导入空质粒和重组质粒的农杆菌均可存活。 (3)图中柑橘细胞经过________________________过程发育为转基因柑橘幼苗，此过程运用技术的原理是____________________________。 (4)为检测转基因柑橘幼苗是否可以抵抗革兰氏阴性菌的感染，需要进行个体生物学水平的鉴定，操作方法是_______________________________________________________________________________ ______________________________________________________。 19．接种疫苗是控制新冠肺炎的重要措施之一，新冠病毒疫苗有多种，我国科学家团队研发的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗（重组疫苗）是一种基因工程疫苗。图是构建含新冠病毒S蛋白（抗原）基因的重组腺病毒表达载体的过程，箭头表示NcoI、SphI、NheI、BamHI的酶切位点（四种酶的识别序列详见下表），请回答下列问题： 限制酶 NcoI SphI NheI BamHI 识别序列和切割位点 C↓CATGG CCATG↓C G↓GATCC G↓CTAGC (1)新冠病毒是RNA病毒，一般先通过逆转录得到________，再经PCR技术获得大量的S蛋白基因，PCR技术扩增S蛋白基因依据的原理是________。 (2)为保证PCR技术扩增S蛋白基因正常进行，该反应体系的主要成分除了有缓冲液、耐高温的DNA聚合酶、模板DNA，还包含______________________________（要求答2点）。通过PCR扩增获取S蛋白基因时，组成一轮PCR循环包括变性、复性、_______三个步骤，其中复性的作用是_____________ _____________。 (3) 作为载体的质粒除目的基因、标记基因、复制原点外，还必须含有____________________________ ________________________等。根据图表可知，重组质粒时，需要选择的限制酶是_________________，理由是___________________________________________________________________________。 (4)构建重组质粒需要使用DNA连接酶。下列属于DNA连接酶底物的是（单选）______。 20．普通小麦籽粒为白色，不合成花青素。玉米中ZmC1和ZmR基因编码的蛋白形成复合体，可激活花青素合成通路。科研人员利用农杆菌转化法将ZmC1基因和ZmR基因导入普通小麦，获得了紫色籽粒的转基因小麦。 回答下列问题： (1)利用PCR技术扩增ZmC1基因和ZmR基因，在PCR的反应体系中，DNA聚合酶需要________激活，引物的作用是______________________________________________________。 (2)为使目的基因能定向插入T-DNA中，需在基因两端添加限制酶识别序列，由图可知，目的基因A、B端分别添加的限制酶是________、________。 (3)研究发现，ZmC1-ZmR复合体需结合靶基因启动子区的MRE（花青素响应元件，序列为5'-CCTACC-3'）才能激活转录。若将MRE突变为5'-CCTGCC-3'，复合体结合力下降50%；若突变为5'-CCTACG-3'，结合力下降90%。据此推测，复合体与MRE的作用特点是_________________________。若某小麦品种启动子区天然存在5'-CCTGCC-3'序列，直接导入ZmC1和ZmR后籽粒颜色较浅，为获得紫色籽粒，改良方案是_________________________________________________________________。若ZmR基因发生突变导致其编码的蛋白无法进入细胞核，则转基因小麦籽粒颜色可能表现为________（填“紫色”或“白色”）。 (4)若要将该紫色小麦品种进行商业化推广，除产量和花青素含量外，还需研究的问题有_____________________________________________________________________________（答出1点）。 21．正常成人的血红蛋白主要是HbA（由2条α肽链和2条β肽链组成），而HbF（由2条α肽链和2条γ肽链组成）占极少量。α肽链基因（用A表示）位于16号染色体，β和γ肽链基因（分别用B、D表示）都位于11号染色体。β地中海贫血是B基因突变致α/β肽链比例失衡引起的遗传性贫血。正常人出生后D基因关闭表达而B基因开始表达，DNA甲基转移酶（DNMT）在此过程发挥关键作用，该酶的作用过程如图1所示，图2为相关研究结果。回答下列问题： (1)A、B基因的遗传遵循基因的自由组合定律的依据是______________________________________ _________________。B基因突变致使a/β肽链比例失衡引起β地中海贫血，这体现了基因通过__________________________控制生物性状。 (2) 据图1分析DNMT基因的表达产物调控D基因关闭表达的机制是_______________________________________________________________________________。 (3)在有关β地中海贫血人群的胚胎中，只要是来自父方的B、b基因均不会被甲基化，来自母方的B、b基因均被甲基化（不考虑其他基因的影响），一对夫妇均是β地中海贫血携带者（Bb），预测他们生一个患有β地中海贫血男孩的概率是__________。 (4)β地中海贫血患者甲的症状明显比其他患者轻，研究人员对此开展研究，结果如图2所示。分析患者甲的症状明显较轻的具体原因是______________________________________________________ ______________________，从而缓解因β肽链异常导致的贫血症状。 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 $ 德宏州2026年春季学期高二生物学试卷答案及解析 1.C 【详解】:A．乳酸菌是常见的制作传统发酵食品的微生物，可用于发酵制作酸奶，泡菜，奶酪等食品，A 正确；B．绝大部分乳酸菌属于厌氧微生物，在无氧条件下产生乳酸和CO2，B 正确；C．乳酸菌可以生产单细胞蛋白可以作为食品添加剂，增强机体的免疫力，单细胞蛋白是菌体本身，不需要再次提取，C错误； D．在青贮饲料中添加乳酸菌可以提高饲料品质，使饲料保鲜，D正确 2．C 【详解】A、该实验需要病原菌在培养基上均匀分布，所用接种方法为稀释涂布平板法，A错误； B、细菌的抗性变异是不定向的，且在接触抗生素之前就已经产生，抗生素仅起到选择作用，B错误； C、若病原菌对该种抗生素不敏感，该抗生素无法抑制病原菌生长，就不会出现抑菌圈，C正确； D、抑菌圈直径越大，说明该抗生素的抑菌效果越强，细菌对抗生素的抗性越弱，D错误。 3．B 【详解】A、该接种方法为平板划线法，不能对微生物进行计数，A 错误； B、从用途的角度分，该培养基既是选择培养基，可以起到选择作用，又因为加入了刚果红试剂，又是鉴别培养基，B 正确； C、该过程中需对接种环进行灼烧灭菌，但灭菌次数为 5 次，C错误； D、纤维素分解菌将纤维素分解掉了，该区域刚果红不能与纤维素形成红色复合物，故划线区域形成的菌落周围显白色，不是红色，D 错误。 故选B。 4．D 【详解】A、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，因而可选择紫草的茎尖作为外植体获得无毒苗，A正确； B、高产细胞培养物生产紫草宁的效率更高，因为细胞增殖速度较快，因而产生的紫草宁更多，B正确； C、细胞产物的工厂化生产具有不占用耕地，不受季节天气限制，生产更灵活等优点，C正确； D、紫草宁不是初生代谢物，而是次生代谢物，D错误。 故选D。 5. D 【详解】A、在动物细胞培养过程中，由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养时，通常需要在培养基中加入动物血清等天然成分，以保证细胞的正常增殖。所以步骤①获得的体细胞培养时，为保证细胞正常增殖，往往要加入动物血清，A正确； B、异种器官移植面临的主要问题之一是免疫排斥反应，猪细胞表面存在一些引发人免疫排斥的关键抗原。基因编辑的目标之一就是对这些关键抗原进行改造或消除，从而降低免疫排斥反应的发生，提高移植的成功率。所以步骤②基因编辑的目标之一是消除猪细胞表面引发人免疫排斥的关键抗原，B正确； C、构建用于异种器官移植的胚胎，需要利用体细胞核移植技术将供体体细胞的细胞核移植到去核卵细胞中，形成重组细胞；然后通过电融合等方法激活重组细胞使其分裂发育；最后进行早期胚胎培养，使其发育到一定阶段。所以步骤③构建胚胎，需要利用体细胞核移植技术、电融合以及早期胚胎培养，C正确； D、为提高步骤④代孕的成功率，应对代孕母猪进行同期发情处理，使代孕母猪的子宫生理状态与供体胚胎相适应，为胚胎植入创造良好的条件。但代孕母猪不会对移植的胚胎产生免疫排斥反应，D错误。 故选D。 6．A 【详解】A、N23是人外周血淋巴细胞（浆细胞），属于高度分化的细胞，不具备体外大量增殖的能力，仅杂交瘤细胞NJ84同时具有体外大量增殖和产生特定抗体的特点，A错误； B、IL-6是白细胞介素，属于细胞因子，作为信息分子可介导细胞间的信号传导，B正确； C、据表格数据可知，与不含IL-6的对照组相比，添加两种来源IL-6的实验组，NJ84细胞生长孔占比更高、抗体分泌量显著提升，因此添加不同来源的IL-6可提高单克隆抗体的生产效率，C正确； D、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，既可作为诊断试剂检测疾病，也可与抗癌药物结合制成“生物导弹”用于癌症的靶向治疗，D正确。 7．B 【详解】A 、卵母细胞去核方法：梯度离心、紫外短时间照射、显微操作均可，但紫外线长时间照射会损伤卵母细胞的细胞质和遗传物质，导致细胞失活，不能用于去核， A 错误； B 、敲除一个基因，需要限制酶在基因两侧各切一个切口，一个切口断裂2 个磷酸二酯键，两个切口一共断裂4 处磷酸二酯键，B 正确； C 、胚胎干细胞具有发育全能性，能分化为多种组织细胞；题干信息表明注入的人诱导多能干细胞（iPSCs） 并不能分化为各种类型细胞， C 错误； D、人 — 猪嵌合胚胎只在肾脏组织含人源化细胞，患者移植的是体细胞肾脏，生殖细胞没有掺入猪的染色体； 生殖细胞基因型未改变，后代不会携带猪的染色体， D 错误。 8．D 【详解】A、4CL干细胞在功能上，具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织和器官，A错误； B、4CL干细胞不会与其他胚胎细胞发生细胞融合，4CL干细胞会与其他细胞共同发育，B错误； C、原肠胚是胚胎发育的一个阶段，外观上难以直接量化不同来源细胞的占比，绿色荧光蛋白可用于标记4CL干细胞，但外观观察（如荧光分布）只能定性或半定量判断嵌合情况，无法“准确”推断占比，C错误； D、若嵌合体猴的原始生殖细胞中含有4CL干细胞的遗传信息，可以通过有性生殖将4CL干细胞的遗传信息遗传给后代，D正确。 故选D。 9．D 【详解】A、胚胎工程一般采用外腺促性腺激素处理A使其超数排卵，A错误； B、D受体雌性接受来自动物园亚洲黑熊雌A体内的胚胎，所以必须和动物园亚洲黑熊雌A同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而野生亚洲黑熊雌B只需要提供体细胞，所以不需要同期发情处理，B错误； C、过程②显微操作去核中去除的实际上是纺锤体—染色体复合物，过程③为激活重构胚，可通过电刺激完成，C错误； D、由图可知，E后代遗传物质来源于A和C，F后代遗传物质来源于A和B，D正确。 故选D。 10．D 【详解】A、vir基因表达产物可在 T-DNA左右边界序列中产生切口，并复制出单链T-DNA进入植物细胞，说明vir基因表达产物具有限制酶和DNA 聚合酶活性，需保留，A正确； B、生长素基因和细胞分裂素基因的表达产物可促进植物细胞增殖成瘤状物但不分化出植物幼苗，说明生长素基因和细胞分裂素基因不能使植物细胞表现全能性，可删除，B正确； C、冠瘿碱是农杆菌感染植物细胞后生长必需的有机物，删除冠瘿碱合成基因可减少已转化的植物细胞在培养过程中发生农杆菌的污染，C正确； D、将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，把目的基因整合到植物细胞染色体的DNA上，使目的基因随植物细胞染色体的复制而复制，D错误。 故选D。 11．D 【详解】A、大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成，A正确； BC、①②两个黏性末端并不相同，由两种限制酶切割后产生，①②两个黏性末端不能用DNA连接酶直接连接，BC正确； D、上述两个黏性末端不同，不能连接在一起，D错误。 12．D 【详解】A、若想得到更多转基因低乳糖奶牛，可在胚胎发育到桑葚胚或囊胚利用胚胎分割技术将胚胎进行分割，A错误； B、PCR技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为2n+1-2，因此若一个该DNA分子在PCR仪中经过4次循环，需要25-2=30个引物，B错误； C、LCT基因表达产生的乳糖酶（LCT）为蛋白质，故从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是抗原-抗体杂交，C错误； D、由于通过基因工程把LCT基因导入牛胎儿成纤维细胞，再通过胚胎工程获得了转基因低乳糖奶牛，故牛胎儿成纤维细胞以及转基因低乳糖奶牛乳腺细胞都含有LCT基因，但是由于基因的选择性表达，只是在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中含有LCTmRNA与LCT，在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中，可检测到的物质有LCT基因、LCT mRNA和LCT，D正确。 13．A 【详解】A、用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的受精卵中，可得到乳腺生物反应器，A错误； B、在构建基因表达载体时，需要将EPO基因和乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这样才能使目的基因只在乳腺组织中表达，B正确； C、EPO基因与乳腺蛋白基因的启动子重组在一起，可以在羊的乳腺细胞中表达，其他细胞中不表达，C正确； D、目的基因进入受体细胞后，是否稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。可通过PCR技术检测EPO基因是否插入山羊基因组，D正确。 14．B 【详解】① 新鲜洋葱、香蕉、幼嫩菠菜的组织细胞DNA含量较高，鸡血（鸟类红细胞有细胞核，DNA丰富）、猪肝（肝细胞含大量细胞核）也属于DNA含量高的材料，均适合作为提取DNA的实验材料，但猪血中主要是成熟的红细胞，不含DNA，不能作为提取DNA的实验材料，①错误； ② 洋葱研磨后需要先经纱布过滤去除未破碎的组织残渣，取滤液才能进行离心操作，不能直接用研磨液离心，②错误； ③ 二苯胺鉴定DNA需要将白色丝状物先溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后还需沸水浴加热才能出现显色反应，不能直接加试剂鉴定，③错误； ④ PCR实验中微量离心管、枪头需要高压蒸汽灭菌，移液器不需要消毒处理，仅需使用无菌枪头即可，④错误； ⑤ 碱基数量相同的DNA，迁移速率受构型影响：环状DNA迁移速率>链状DNA>开环环状DNA，因此二者迁移速率不同，⑤正确； ⑥ DNA电泳鉴定实验中，配制琼脂糖时加入的核酸染料能嵌入DNA的碱基对中，在紫外灯照射下可发出荧光，便于观察电泳的DNA条带，⑥错误； ⑦ DNA电泳时，DNA分子量越大，在凝胶中受到的阻力越大，迁移速率越慢，二者成反比，⑦错误。 综上正确的叙述有⑤共2项，故选B。 15．D 【详解】A、据题意可知，得到双链DNA不需要经过变性，A错误； BC、观察可知，两条单链通过20个碱基互补配对结合，然后发挥各自引物和模板作用，不再另外需要引物，得到的双链DNA片段的碱基对数目为21+20+43=84，形成1个双链DNA，需合成一个长度为21个碱基的DNA单链片段和一个长度为43个碱基的DNA单链片段，即需消耗64个碱基，由于这两条DNA单链不完全互补，故其中的嘌呤碱基数不一定占到一半（32个），B、C错误； D、只有图示DNA单链部分碱基互补结合后，才能合成出双链DNA，因此DNA单链的添加量会影响得到的DNA分子数，D正确。 16．B 【详解】严格管理好目的基因和控制好目的基因的表达部位，则转基因食品的安全性可以得到保障， A正确；生殖性克隆需将细胞核移植到去核卵母细胞中构建形成重组细胞，需借助动物细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术，B正确； 物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，C正确；设计试管婴儿实质是选择性移植体外受精形成的胚胎，应正确判断其利与弊，有利方面包括：解决了不育问题，提供骨髓中造血干细胞救治患者等，但通过试管婴儿这种技术出生的人口占比较小，并不能保证人口正常的性别比例，D错误。 17. 参考答案：(1)细胞质基质 酵母菌内与果酒发酵相关的酶活性高，发酵速度快 (2)无菌氧气（无菌空气） 2C2H5OH+ O22CH3COOH（醋酸）+H2O+能量。 (3)此阶段酵母菌主要进行有氧呼吸，大量增殖 营养物质消耗殆尽，高浓度的酒精和代谢废物会抑制酵母菌的代谢而影响发酵 (4) 乳酸菌 在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸 食盐用量 腌制时间 【分析】酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在18~25℃。醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸：当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃ 【详解】（1）酵母菌是真核生物，其无氧呼吸产生酒精的场所是细胞质基质；利用酵母菌进行发酵时，应将温度控制在18～30℃，在此温度条件下，酵母菌内与果酒发酵相关的酶活性高，发酵速度快，因而发酵时间短。 （2）醋酸菌是一种好氧细菌，故杨梅醋的发酵过程中，除去必需的营养物质外，需要向发酵液中持续通入无菌氧气（无菌空气），化学反应式为2C2H5OH+ O22CH3COOH（醋酸）+H2O+能量。 （3）图中显示，随着发酵的进行，发酵液的糖度逐渐降低，酒精度逐渐升高然后保持相对稳定。发酵前24 h，酵母菌主要进行有氧呼吸，大量增殖，消耗葡萄糖较少，因此糖度变化很小，酒精度上升很慢；随着发酵的进行，酵母菌进行无氧呼吸消耗葡萄糖产生酒精，96 h后，营养物质消耗殆尽，高浓度的酒精和代谢废物会抑制酵母菌的代谢而影响发酵，导致酒精度和糖度的变化都趋于平缓。 （4）泡菜制作利用的主要微生物是乳酸菌。泡菜制作的原理是在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸 。因为乳酸菌是厌氧菌，在无氧环境中能够进行无氧呼吸产生乳酸。 泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有温度、食盐用量和腌制时间等。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，都会导致亚硝酸盐含量增加。 18．(1)乳腺癌细胞表面抗原（或乳腺癌细胞） (2)灭活病毒 (3)抗体检测 无菌、无毒 95%空气 (4)特异性强、灵敏度高 a (5) DNA复制受阻（或染色体断裂、细胞凋亡） 抗原-抗体特异性结合 【详解】（1）ADC要治疗的是人的乳腺癌，所以给小鼠注射的特定抗原应取自人的乳腺癌细胞。 （2）步骤①是诱导动物细胞融合，诱导融合的方法包括聚乙二醇（PEG）融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。 （3） 步骤②是筛选出杂交瘤细胞，步骤③是筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测经多次筛选，才能获得足够数量的符合要求的杂交瘤细胞。在体外培养细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是95%的空气与5%二氧化碳的混合气体，二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH。 （4）单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，即特异性强，灵敏度高、与特定抗原发生特异性结合、并且可以大量制备。由图1可知，a是单克隆抗体，b是治疗乳腺癌细胞的药物 （5） ②由图2可知，ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致癌细胞裂解死亡，即可能引发DNA复制受阻，染色体断裂等，最终发生了癌细胞凋亡。③ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，实现了对乳腺癌细胞的选择性杀伤，利用了抗原—抗体特异性结合原理。 19．(1) cDNA DNA半保留复制（DNA热变性） (2) 脱氧核苷酸（dNTP）、引物 延伸 使引物与模板链结合 (3) 启动子、终止子、一个或多个限制酶切位点 NcoⅠ和NheⅠ 这两种酶切割后产生的末端分别与目的基因两端的黏性末端相同 (4)④ 【详解】（1）新冠病毒的遗传物质是RNA，由RNA得到cDNA的过程是逆转录过程；PCR技术是根据体内DNA半保留复制原理进行体外DNA复制的多聚酶链式反应，可用于扩增目的基因。 （2）PCR过程中，其反应体系的主要成分有模板DNA、脱氧核苷酸、引物、耐高温的DNA聚合酶。一轮 PCR 三步：变性→复性→延伸，复性的作用：降温，使引物结合到单链 DNA 的互补序列上 （3）完整的基因表达载体除目的基因、标记基因、复制原点外，还必须含有启动子（启动转录）和终止子（终止转录）。据图可知，S蛋白基因分子的两端的碱基序列及黏性末端(GATC—、—GTAC)可知，NcoI识别序列和切割位点为C↓CATGG，产生的黏性末端为CATG—、—GTAC，SphI识别序列和切割位点为CCATG↓C，产生的是—CATG，NheI识别序列和切割位点为G↓GATCC，产生的黏性末端为GATC—、—CTAG，BamHI识别序列和切割位点为G↓CTAGC，产生的黏性末端为CTAG—、—GTAC，为使重组质粒构建过程顺利进行，质粒切割后的末端应该分别与目的基因两端的黏性末端相同，即质粒应该产生—CTAG和CATG—黏性末端，因此需先使用限制酶NcoⅠ和NheⅠ。 （4））DNA链中，5'端携带磷酸基团（P），3'端携带羟基（OH），DNA双链反向平行，酶切断开后，切口的结构为：上方5'→3'链的断点处左为3'OH、右为5'P；下方3'→5'链的断点处左为5'P、右为3'OH，符合该结构的是④，DNA连接酶催化连接3'-OH和5'-P形成磷酸二酯键，因此底物为④。 20．(1) Mg2+（或“镁离子”） 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 (2) Hind Ⅲ EcoRⅠ (3) 复合体对MRE序列的识别具有高度特异性 利用定点突变（或基因编辑）技术将启动子区的CCTGCC修正为CCTACC（或更换含天然CCTACC序列的小麦品种作为受体等） 白色 (4)转基因小麦的食品安全性（或对不同环境的适应性，花粉漂移对生态环境的影响，种子生产成本等合理答案） 【详解】（1）PCR过程中需要用Mg2＋激活DNA聚合酶，引物的作用是使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。 （2）由题图可知，目的基因内部含有BamHⅠ、SacⅠ和NotⅠ三种酶的酶切位点，所以为了避免破坏目的基因，可选择的限制酶只有EcoRⅠ和HindⅢ，观察质粒的结构可知HindⅢ更靠近终止子，EcoRⅠ更远离终止子，由于目的基因的转录从启动子开始，所以目的基因的A端应添加HindⅢ，B端应添加EcoRⅠ，这样才能保证目的基因插入方向正确，便于成功转录。 （3）花青素响应元件MRE在突变前后均可与复合体结合，但突变后与复合体的结合力下降，且突变结果不同，结合力下降程度显著不同，说明复合体对MRE序列的识别具有高度特异性。 由题目所给信息可知，当花青素合成通路被激活后，小麦籽粒可呈现紫色，该小麦启动子区天然存在的序列是“复合体结合力下降50%”时MRE的序列，因此若要获得紫色籽粒的小麦，可以利用定点突变技术，将启动子区域的序列改为“5′-CCTACC-3′”，也可更换含有“CCTACC”序列的小麦品种作为受体。若ZmR基因编码的蛋白质无法进入细胞核，则花青素响应元件MRE无法与复合体结合，导致小麦无法启动花青素合成通路，则籽粒为白色。 （4）该紫色小麦属于转基因食品，将转基因食品进行商业化推广之前，不仅需要研究其产量和花青素含量，还应评估其食品安全性、对不同环境的适应性和生产成本，以及这种小麦产生的花粉漂移对生态环境的影响等。 21．(1) 两对基因分别位于11号和16号染色体上 控制蛋白质的结构直接 (2)DNMT基因表达出DNMT，DNMT催化D基因的启动子发生甲基化过程，导致启动子甲基化，从而阻止D基因表达 (3)1/4 (4)D基因表达量增加，使表达出的γ肽链增多；而α肽链可以和γ肽链结合形成正常的血红蛋白 【分析】1、DNA分子中由于碱基对的增添、缺失和替换而导致基因结构的改变叫做基因突变。 2、表观遗传是指在基因的DNA序列没有发生改变的情况下，基因功能发生了可遗传的变化，并最终导致了表型的变化。 【详解】（1）由题意可知，A基因位于16号染色体、B基因位于11号染色体上，因此A、B基因的遗传遵循基因的自由组合定律。B基因突变致使a/β肽链比例失衡引起的遗传性贫血，体现了基因通过控制蛋白质的结构直接控制生物性状。 （2）从图看出，DNMT基因表达出DMMT，催化胎儿D基因的启动子发生甲基化过程，导致启动子甲基化，从而阻止D基因表达，使D基因沉默。 （3）一对夫妇均是β地中海贫血携带者（Bb），说明β地中海贫血病是一种隐性遗传病，即β地中海贫血是隐性性状，父母都是杂合子Bb，只要是来自父方的B、b基因均不会被甲基化，来自母方的B、b基因均被甲基化，设被甲基化的基因分别表示为B'、b'，基因被甲基化后会抑制其表达，因此二者后代的基因型为：1BB'：1B'b：1Bb'：1bb'，故生一个患有β地中海贫血男孩的概率=（1/4B'b+1/4bb'）×1/2=1/4。 （4）从图2看出，患者甲的D基因表达量增加，可以表达出更多γ肽链，而α肽链可以和γ肽链结合形成正常的血红蛋白，因此甲的症状明显较轻。 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $