云南省德宏州高二年级下学期阶段测试（人教版选择性必修三）

**基本信息** 德宏州2026年高二生物期中试卷，以传统发酵技术（如浆水、酒醋）和现代生物科技（如iPS细胞、基因编辑猪）为情境，原创题占比高，注重实验探究与科学思维，覆盖发酵工程、细胞工程等核心知识。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/48分|发酵技术（1-5题）、无菌操作（6题）、细胞工程（10-13题）|结合传统食品制作（如1题酿酒、2题浆水），考查结构与功能观等生命观念| |非选择题|5题/52分|发酵工程流程（17题）、微生物实验设计（18题）、体细胞杂交（19题）、动物细胞工程（20-21题）|创设科研情境（如21题基因编辑猪克隆），通过TSA浓度实验分析等突出科学思维与探究实践|

德宏州2026年春季学期高二生物学试卷 考试时间：75分钟 满分：100分 第I卷（选择题） 一、单项选择题（本题共16道题，每题只有一个最佳选项，每题3分，共48分） 1．（原创）人类很早就认识到发酵现象,几千年以前就已经利用发酵技术酿酒，下列关于传统发酵技术应用的叙述，不正确的是（        ） A．在葡萄酒的酿制过程，发酵液产生了气泡是因为酵母菌呼吸作用产生了CO2 B．豆腐中的蛋白质经过毛霉等微生物的分解作用变成了肽和氨基酸 C．果醋制作过程中发酵液pH逐渐下降，果酒制作过程中pH逐渐基本不变 D．在家制作腐乳，酱油，醋，泡菜，豆豉都是利用传统发酵技术制作的食品 2．浆水是西北地区的传统饮品，常以蔬菜和面汤为原料，主要利用乳酸菌自然发酵而成，味道微酸爽口，有解暑开胃之效。传统发酵过程如下图，发酵工程则多采用人工接种，在现代发酵罐内进行大规模生产。下列分析错误的是（    ） A．两种发酵过程中，乳酸菌都是先无丝分裂快速增殖，再进行无氧发酵产生酸味物质 B．传统发酵时的热烫处理起到消毒作用，发酵工程则须对原料和发酵设备进行严格灭菌 C．发酵工程中接种扩大培养的优良纯种菌液，相当于传统发酵过程中的加“引子” D．为监测发酵进程，利用细菌计数板进行菌种计数的结果通常高于稀释涂布平板法 3．（原创）自古以来便有“酒醋同源”的说法，醋与酒的历史源远流长，数千年来深深扎根于中华传统文化的沃土之中。下列叙述正确的是（  ） A．果酒，啤酒，白酒，泡菜等都是利用酵母菌等微生物在无氧条件下发酵产生的 B．制作葡萄酒前一般先去除枝梗，再使用70%酒精冲洗水果1～2次 C．果酒制作完成后，打开瓶盖，盖上纱布，适当提高温度即可进行果醋发酵 D．醋酸菌在氧气和糖源不充足时也能进行醋酸发酵 4．下列有关发酵工程及微生物利用的相关叙述，正确的有（　　） ①腐乳的发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是曲霉 ②实验室中常用的灭菌方法有紫外线灭菌法、湿热灭菌法、灼烧灭菌法等 ③微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 ④在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等 ⑤通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 ⑥当氧气和糖源不足时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再转化为乙酸 ⑦微生物农药（如井冈霉素）是化学防治的重要手段 A．一项 B．二项 C．三项 D．四项 5．（改编）啤酒生产的简要流程如图所示，制麦时用赤霉素溶液浸泡大麦种子，糖化主要将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子。下列说法错误的是(　　) A.在整个发酵过程中，要始终保持严格的无菌、厌氧环境 B.用赤霉素溶液浸泡大麦种子，目的是促进α－淀粉酶合成 C.在接种酵母菌前进行冷却处理，是为了避免杀死酵母菌菌种 D.包装后放置的啤酒变酸且产生表面菌膜，一般可从菌膜中分离得到醋酸菌 6．防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，实验室进行微生物培养时常利用无菌技术防止杂菌污染，主要包括消毒和灭菌，下列关于无菌技术的说法正确的是（  ） A．无菌操作中，检测培养基和培养皿可分别采用湿热灭菌和干热灭菌 B．倒平板时，应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C．微生物的培养基中都必须加入碳源、氮源、无机盐、水及特殊营养物质 D．湿热灭菌就是高压蒸汽灭菌，可用于培养基的灭菌 7．美国科学家布鲁克从热泉中筛选到水生耐热细菌Taq，并从中分离得到了耐高温的TaqDNA聚合酶，解决了体外DNA大量复制的技术问题。下列微生物筛选原理，除哪项外都与之相似（　　） A．从加工糖果、蜂蜜的土壤环境中寻找耐渗透压酵母菌 B．从油田土环境中筛选石油分解菌 C．到富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌 D、去酸性土壤中去分离得到高淀粉酶产量的细菌 8．自新冠疫情暴发以来，“勤洗手”已成为全民共识。为验证洗手的重要性，实验者将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的培养基上轻轻按一下，然后用“七步洗手法”洗手后，再将5个手指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下，最后将这两个培养皿放入恒温培养箱中，经过37°C、24h培养后发现贴有“洗手后”标签的培养基上的菌落较少。下列叙述错误的是（    ） A．“将手指尖在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养中的“接种” B．该实验需增设一组未接种的培养基，以判断培养基是否被污染 C．培养结束后可根据肉眼观察到的菌落特征判断培养基上的菌体类型 D．由实验结果可以看出实验者在“七步洗手法”后可以直接进行无菌操作 9．（原创）发酵工程在农牧业、食品工业、医药工业等方面均有广泛的应用。下列关于发酵工程的叙述，正确的是（　　） A．发酵工程的中心环节是菌种的选育，在发酵之前还需进行扩大培养 B．利用发酵工程技术生产微生物蛋白所用的菌种可以是一种或多种菌种 C．啤酒的工业化生产中，酵母菌的繁殖和酒精的生成分别在主发酵阶段和后发酵阶段完成 D．单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，一般不含其他成分 10．（原创）下图为利用植物组织培养技术繁殖菊花的示意图。相关叙述正确的是（　　） A．脱分化形成的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B．外植体培育愈伤组织时，培养基中需添加生长素和细胞分裂素 C．再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 D．脱分化与再分化过程需要提供95%的空气和5%的CO2 11．大豆是我国四大主要粮食作物之一，而野生大豆产量低但却具有喜光耐湿、耐盐碱、耐阴，抗旱、抗病、耐瘠薄等优良性状，因此可将耐旱强的野大豆与高产栽培大豆进行体细胞杂交培育高产耐旱大豆新品种，过程如图所示。下列说法错误的是（　　） A．过程①可在一定浓度的蔗糖溶液中使用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B．过程③体现了细胞具有全能性，需要生长素和细胞分裂素参与而实现 C．过程②完成的标志是两细胞核成功融合，体现了膜具有一定的流动性 D．可以通过电融合法、高Ca2＋—高pH融合法等诱导原生质体A与B融合 12．（原创）下列关于植物细胞工程的应用，说法错误的是（ ） ①脱毒草莓、白菜——甘蓝杂种植株的培育都利用了植物组织培养技术 ②利用植物组织培养得到的脱毒马铃薯不会感染病毒 ③利用花药离体培养得到的单倍体植株可直接用于农田种植 ④“白菜——甘蓝”的培育只利用了植物体细胞杂交技术 ⑤首例药用植物细胞工程产品紫草宁是一种次生代谢物 ⑥脱分化与再分化过程均与细胞中基因的选择性表达有关 ⑦在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化、染色体变异或基因突变，不可能发生基因重组 A．五项 B．四项 C．三项 D．二项 13．（原创）如图为诱导多能干细胞（iPS细胞）示意图，下列相关叙述错误的是（　　） A．诱导iPS细胞具有组织特性性，其分化的实质是动物细胞核具有发育的全能性 B．利用iPS细胞分化获得肠上皮组织体现了基因的选择性表达 C．高度分化的T细胞，B细胞等均可可以诱导形成iPS细胞 D．图上形成的iPS细胞来源于病人，因此分化后得到的器官组织理论上可避免器官 排斥现象 14．为实现肺癌的精准治疗，科研人员将单克隆抗体与化疗药物相结合，构建了抗体-药物偶联物（ADC），制备流程如下图所示，①②③④表示不同过程。下列相关叙述不正确的是（    ） A．实验中向小鼠注射的特定抗原可以是完整的肺癌细胞或是肺癌细胞部分结构 B．①过程仅考虑两个细胞融合，融合后杂种细胞类型有3种 C．②过程使用选择培养基的目的是筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 D．④过程通过接头将单克隆抗体与特定药物偶联，可减少药物对正常细胞的损伤 15．荷斯坦奶牛因产奶量高成为饲养数量最多的奶牛品种。科研人员通过动物细胞工程和胚胎工程实现了荷斯坦奶牛的快速繁殖，部分培育过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．为获得小牛3应去除细胞A中的纺锤体—染色体复合物 B．胚胎移植前需对受体牛进行同期发情处理以防止发生免疫排斥反应 C．胚胎移植前可取样囊胚的内细胞团细胞进行小牛的性别鉴定 D．小牛1和小牛3可以看作通过动物无性繁殖获得的 16．利用生物技术培育新品种、制备生物产品时都需要进行筛选或检测。下列说法错误的是（   ） A．单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞 B．用 96 孔板筛选所需杂交瘤细胞时，每个孔中尽量只接种一个细胞 C．为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定染色体组数的体细胞才能进行组织培养 D．用植物体细胞杂交培育作物新品种时，需对杂种细胞和杂种植株进行筛选 第Ⅱ卷（非选择题） 二、非选择题（本题共5道大题，共52分） 17．(原创 12分)发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。如图1所示为发酵工程生产产品的流程图, 图2表示苹果醋的简易制作装置和制作流程。据图回答下列问题： (1)若高产青霉素菌种是通过②培育的，②应该是___________________________。 (2)图1整个发酵过程的中心环节是___________________________。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH在灭菌_____（填“前”或“后”）调至酸性。在青霉素生产过程中_________________________________________________（答出两点）都必须经过严格的灭菌。在该时期要随时取样检测培养基中的________等。同时，要严格控制________________等发酵条件，因为环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物________的形成。 (3)用图2装置酿酒结束后，若要直接转入果醋发酵，改变的环境条件是__________________________________________________________________。 (4)发酵产品分离、提纯时要根据产品的类型不同选择合适的方法。如果发酵产品是单细胞蛋白，常常采用________等方法分离、提纯； 18.（10分）材料1:有国外期刊撰文指出“手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多18倍”。为了验证该说法的正确性，A、B两组研究人员分别进行实验调查。A、B两组的实验操作流程和实验结果如图。下表是2种可供选择的培养基配方。 培养基名称 配方（/L） 培养基1 蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，琼脂15g 培养基2 葡萄糖10g，KH2PO40.2g，MgSO40.2g，NaCl0.2g，CaSO45g，蒸馏水1000mL，琼脂15g (1)从物理性质上看，上述两种培养基属于________培养基。培养基2中提供碳源的物质是_________。 (2)根据实验目的，应选择培养基_____（1或2），理由是: 。 本实验中分离微生物的方法是 (3)在取样环节，合理的操作应包括________。（编号选填） ①用无菌棉拭子取样 ②用无菌接种环取样 ③在不同样品表面任选5个点取样 ④在不同样品表面选固定面积的区域内取样 ⑤在取样部位反复涂抹5次 ⑥将采集到的样本置于无菌试管内封闭备用 (4)研究人员欲通过菌落计数的方法，比较手机屏幕和马桶按钮的细菌污染情况。正确的操作是______。（编号选填） ①操作I可将待测样本放入无菌生理盐水 ②接种时用接种环进行划线 ③接种时用涂布器进行涂布 ④不同的培养基平板需在皿盖上做好记号 ⑤接种后的培养基平板需倒置放在恒温箱中培养2-3天 (5) A、B两组各自完成了实验，但实验结果却截然不同。请对这一结果作出合理的分析 （答出两点） 19．（11分）科学家通过植物体细胞杂交的方法，培育出第一个杂种植物：番茄—马铃薯（番茄2N=24，马铃薯4N=48）。虽然这种植株并没有像科学家预料的那样，地上结番茄，地下结马铃薯，但却为植物体细胞杂交在生产实践中的应用拉开了帷幕。以下为番茄和马铃薯体细胞杂交的步骤： 回答下列问题： (1)植物体细胞杂交技术的原理是_________________________________：此过程用到的植物细胞工程的基本技术是__________________________________；番茄—马铃薯植株染色体数目是_________。 (2)步骤①常用含有 酶的 溶液处理离体细胞，既能获得2种植物细胞的原生质体，又能避免原生质体因过度吸水而破裂。 (3)植物体细胞融合完成的标志是_______________________________________；过程②得到的融合细胞有______种（只考虑两两融合）。与过程④相比，过程⑤______（填“需要”或是“不需要”）提供光照，原因是________________________________________________________________ 。 (4)上述过程是在生物育种方面的意义是：_________________________________________________________________________ 。 20．（8分）2018年3月，世界上最后一头雄性北方白犀牛死亡，该物种仅剩下两头雌性，在此之前，研究人员设法保存了北方白犀牛的精子。多个研究团队试图通过多种技术手段繁育该物种。请回答下列（一）（二）两小题。 （一）一个研究团队试图培育试管北方白犀牛，其主要流程如下图1。 (1)①过程需要对雌性北方白犀注射促性腺激素，目的是________________。取自雌性北方白犀牛体内的卵母细胞需要培养至________（时期）才能与获能的精子受精。 (2)研究团队将体外受精得到的受精卵移植至南方白犀牛的子宫中孕育，为了使受体生理状态更适合胚胎移植，应对其进行____________处理以提高成功率。 (3)利用该技术培育新个体的繁殖方式属于_____________（有性/无性）繁殖。 （二）另一个团队试图培育克隆北方白犀牛，其主要流程如下图2。 (4)进行核移植之前需要从北方白犀牛身上取少量细胞以获得足够量的供体细胞，为了保证培养过程不被杂菌污染往往需要向培养液中加_____________。通常还会将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入培养瓶中，目的是_______________以增加培养的细胞数量。 (5)该团队获得的克隆北方白犀牛的性别为____________（雌性/雄性/雌性或雄性）。 （6）保护北方白色犀牛的最根本措施是借助____________使白犀牛被破坏的生态环境得到恢复。 21．（11分）异种器官移植是解决人类供体器官短缺的核心途径。我国科学家于2025年成功培育出无特 定病原体的10基因编辑猪，并利用体细胞核移植技术克隆10基因编辑猪，为异种器官移 植提供安全供体，主要技术操作流程如图所示。回答下列问题： (1)过程②常用__________方法对卵母细胞进行“去核”，“去核”实际上去除的是__________。 (2)过程③形成的重构胚还需用物理或化学方法激活，其目的是_________________________ ______________。通常将早期胚胎培养到__________阶段再移植入代孕母猪体内。 (3)重构胚成活率低是限制核移植成功的主要因素之一、研究人员探究了不同浓度的TSA（组蛋白去乙酰化酶抑制剂）对猪重构胚发育成囊胚的影响，结果如下表所示： TSA浓度（nM） 0 20 40 60 囊胚的形成率（%） 13% 22.8% 35.7% 21% 由上表可知，选用浓度为_______的TSA处理更有利于提高囊胚的形成率，由此推测TSA的作用是_________________________________________________________________________________________ (4)为提高基因编辑猪细胞核移植的成功率，可以用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植，原因是_______________________________________________________________________ 。 (5)为减弱异种器官移植时猪的抗原蛋白引发的免疫排斥，从抗原决定基因的角度，提出一种解决方法：_____________________________________________________________ （写出一点即可）。 ( 1 ) 学科网（北京）股份有限公司 $ 德宏州2026年春季学期高二生物学试卷答案及解析 考试时间：75分钟 满分：100分 第I卷（选择题） 一、单项选择题（本题共16道题，每题只有一个最佳选项，每题3分，共48分） 1．C 解析:酿酒利用了酵母菌的无氧呼吸作用，生成了酒精和CO2，在葡萄酒的酿制过程，发酵液产生了气泡是因为酵母菌呼吸作用产生了CO2 ，A正确; 豆腐中的蛋白质经过毛霉产生的蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质分解变成了肽和氨基酸，B正确,果醋制作是利用醋酸菌呼吸作用，产生醋酸过程中发酵液pH逐渐下降，果酒制作过程中，酵母菌在无氧条件下生成CO2，CO2溶于水，发酵液的pH下降，C错误；D．在家制作腐乳，酱油，醋，泡菜，豆豉都是利用传统发酵技术制作的食品，D正确. 2．A 解析:A、乳酸菌是原核生物，增殖方式为二分裂；无丝分裂是真核细胞的分裂方式，原核生物不能进行无丝分裂，A错误； B、传统发酵的热烫处理可以杀死原料中部分杂菌，起到消毒作用；现代发酵工程需要避免杂菌污染，因此必须对原料和发酵设备进行严格灭菌，B正确； C、传统发酵的“引子（旧浆水）”含有发酵所需的乳酸菌，发酵工程接种扩大培养的优良纯种，本质都是引入发酵菌种，作用类似，C正确； D、细菌计数板会计数所有菌体（包括死菌和活菌），而稀释涂布平板法计数时，两个或多个细菌连在一起只会统计为一个菌落，计数结果偏小，因此细菌计数板的计数结果通常高于稀释涂布平板法，D正确。 3.C 解析:A．果酒，啤酒，白酒，都是利用酵母菌等微生物在无氧条件下发酵产生的，泡菜发酵利用的是乳酸菌；B．制作葡萄酒前先用清水冲洗水果1-2次，洗去水果表面的杂质和灰尘即可，葡萄酒的发酵需要用水果表面的野生型酵母菌，不能用酒精清洗；C．醋酸菌可在有氧条件下将酒精变成乙酸，醋酸菌的最适温度稍微高于酵母菌，因此要适当提高温度。D．醋酸菌在氧气和糖源不充足时也能进行醋酸发酵，醋酸菌是好氧型细菌，化学反应必须在有氧条件下进行。 4．A 解析:①腐乳发酵过程中起主要作用的微生物是毛霉，而非曲霉，该叙述错误； ②紫外线只能杀灭物体表面和空气中的部分微生物，无法消灭芽孢和孢子，属于消毒方法，不属于灭菌方法，实验室常用灭菌方法为灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌，该叙述错误； ③微生物的纯培养物是指仅由单一物种微生物繁殖形成的培养物，和是否含有代谢废物无关，该叙述错误； ④发酵过程中需要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等指标，以及时调整发酵条件保障发酵效率，该叙述正确； ⑤单细胞蛋白指发酵获得的微生物菌体本身，不需要从微生物细胞中提取，该叙述错误； ⑥醋酸菌是好氧菌，发酵全程需要充足氧气，只有氧气充足、糖源不足时，醋酸菌才能将乙醇转化为乙醛再转化为乙酸，氧气不足时醋酸菌无法存活，该叙述错误； ⑦微生物农药属于生物防治的手段，不属于化学防治，该叙述错误。 综上只有1项叙述正确，故选A。 5．A 解析:A、酵母菌是兼性厌氧微生物，在整个发酵过程中，要先通气使酵母菌大量繁殖，然后保持严格的无菌、厌氧环境，使其无氧呼吸进行发酵，A错误； B、用赤霉素溶液浸泡大麦种子，可以让大麦种子无需发芽便能产生更多的α-淀粉酶，降低生产成本，B正确； C、高温会杀死酵母菌种，在接种酵母菌前进行冷却处理，是为了避免高温杀死酵母菌种，C正确； D、包装后放置的啤酒变酸且产生表面菌膜，这是醋酸菌在有氧条件下将酒精转化为醋酸的结果，一般可从菌膜中分离得到醋酸菌，D正确。 6. A 解析:无菌操作中，检测培养基和培养皿可分别采用湿热灭菌和干热灭菌，A正确，倒平板时，不能将打开的培养皿盖放到一边，可能会造成污染，B错误 ,根据培养微生物的代谢类型分自养和异养，异养型微生物的培养基中都必须加入碳源、氮源、无机盐、水，自养型微生物不用加入碳源，C错误；湿热灭菌是一种利用沸水，流通蒸汽或是高压蒸汽进行灭菌的方法，其中高压蒸汽灭菌效果最好，D错误 7.D 解析:A、酵母菌呼吸作用的底物主要是葡萄，所以富含糖果、蜂蜜的土壤环境中容易找到酵母菌，且这些酵母菌是耐渗透压的酵母菌，A正确；B、油田土环境中富含石油，容易筛选出石油分解菌，B正确；C、纤维素分解菌可以降解纤维素，到富含纤维素的环境中可以找到纤维素分解菌，C正确；D、培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，要得到细菌需要到中性或微酸性土壤条件，D错误。 8.D 解析:由题意可知，实验是为了探究洗手的重要性，“将手指尖在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养中的“接种”，A正确；为判断培养基是否被污染，可增设一组未接种的培养基，若未接种的培养基上没有菌落长出，则培养基没有被污染，B正确；不同微生物形成的菌落的大小、颜色、形状不同，故可根据肉眼观察到的菌落特征判断培养基上的菌体类型，C正确；虽然实验者在“七步洗手法”后手上微生物较少，但进行无菌操作前依然要进行消毒，D错误。 9.B 解析:发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵，不是菌种选育，A错误；利用发酵工程技术生产微生物蛋白所用的菌种可以是一种或多种菌种，B正确；啤酒的工业化生产中，酵母菌的繁殖和酒精的生成都发生在主发酵阶段，后发酵阶段主要是在低温密闭的条件下形成啤酒独特的口感，C错误；单细胞蛋白就是微生物本身；不需要再提取。D错误 10.B 解析:脱分化形成的愈伤组织是排列不规则的薄壁组织团块，A错误。外植体培育愈伤组织时，培养基中需添加生长素和细胞分裂素，不同的培养基，二者的比例不同，B正确。再分化过程，愈伤组织细胞分化时发生的是有丝分裂，可能会发生基因突变，不会发生基因重组，C错误。植物组织培养过程不需要提供95%的空气和5%的CO2，动物细胞培养才需要合适的气体条件，D错误 11.C 解析:过程①是去除细胞壁获得原生质体的过程，需要用酶解法在等渗的蔗糖溶液中进行，用于维持细胞的形态，可在一定浓度的蔗糖溶液中使用纤维素酶和果胶酶处理细胞，A正确; 过程③是杂种细胞长成杂种植株的过程，体现了细胞具有全能性，需要生长素和细胞分裂素参与而实现，B正确;过程②代表的是植物体细胞融合的过程，完成的标志是长出新的细胞壁，所用生物学原理是膜具有一定的流动性，C错误 可以通过电融合法、高Ca2＋—高pH融合法，PEG等诱导原生质体A与B融合，D正确 12.C 解析:①脱毒草莓、白菜——甘蓝杂种植株的培育都属于植物细胞工程，脱毒草莓利用了植物组织培养技术，属于无性生殖，白菜——甘蓝杂种植株的培育属于植物体细胞杂交技术，二者都利用了植物组织培养,正确;②脱毒马铃薯是指取自病毒少或是不含病毒的植物组织，不是抗病毒，故错误;③利用花药离体培养得到的单倍体植株高度不育，需用秋水仙素加倍后才可用于农田种植，故错误;④“白菜——甘蓝”的培育利用了植物体细胞杂交技术和植物组织培养，故此说法错误;⑤首例药用植物细胞工程产品紫草宁是一种次生代谢物，正确； ⑥脱分化与再分化过程均与细胞中基因的选择性表达有关，正确;⑦在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，属于细胞增殖过程，只涉及植物的有丝分裂，可能会发生细胞脱分化、染色体变异或基因突变，没有减数分裂过程，不可能发生基因重组，正确; ②③④错误 13.A 解析:A．诱导iPS细胞属于干细胞，能分化为各类细胞，不具有组织特性性，其分化的实质是基因的选择性表达，A错误;利用iPS细胞分化获得肠上皮组织体现了基因的选择性表达，B正确 高度分化的T细胞，B细胞等均可可以诱导形成iPS细胞, C正确;图上形成的iPS细胞来源于病人，因此分化后得到的器官组织理论上可避免器官排斥现象, D正确; 14.D 解析:制备针对肺癌的单克隆抗体时，向小鼠注射的抗原可以是肺癌相关的特定抗原蛋白，不需要必须是完整的肺癌细胞，A错误；仅考虑两个细胞融合，所有融合细胞共有3种（B淋巴细胞-B淋巴细胞、骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、B淋巴细胞-骨髓瘤细胞），但“杂种细胞”是指两种不同细胞融合的产物，只有杂交瘤细胞1种，B错误；②过程使用选择培养基的目的是筛选得到杂交瘤细胞，筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞是后续③过程的目的，C错误；单克隆抗体可以特异性识别结合肺癌细胞的抗原，将化疗药物定向带到癌细胞处，因此能减少药物对正常细胞的损伤，D正确。 15.D 解析:①过程常用促性腺激素处理母牛使其超数排卵，不用性激素，A错误；体外受精前，从荷斯坦奶牛体内采集的精子需要培养在人工配制的获能液中获能，才能与成熟的卵子完成受精，B错误；在胚胎移植前应取滋养层细胞进行性别鉴定和质量检测，C错误；胚胎能在受体内存活的生理学基础在于受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，D正确。 16.A 解析:①基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，将酶切产物用DNA连接酶连接，由于连接产物存在目的基因和目的基因的连接体、运载体和运载体的连接体以及目的基因和运载体的连接体，为了保证成功率，需将获得的产物导入受体细胞，然后对受体细胞再进行筛选，即选择出导入重组质粒的受体细胞再继续培养，①错误； ②③单克隆抗体制备的过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞，去除了未融合的细胞和自身融合的细胞，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞，即第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，②③正确； ④为了快速繁殖无子西瓜，可采用植物组织培养的方法，不需要筛选特定染色体组数的体细胞就能进行组织培养，④错误。 第Ⅱ卷（非选择题） 二、非选择题（本题共5道大题，共52分） 17, （12分，除特殊标注外，每空1分） 答案: (1)诱变育种 (2)发酵罐中发酵 前 培养基、发酵设备，操作工具（2分，答出两点） 微生物数量、产物浓度（2分，答出两点）　溶氧量、pH和温度（答不全不得分）　 代谢物　 (3)通入无菌空气（或氧气），将温度从18～30℃提高到30～35℃（2分，答出一点得1分） (4)过滤、沉淀（答不全不得分）　 【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】（1）发酵工程的菌种可以是基因工程获得的菌种、自然选择的目标菌种或是通过诱变选择的菌种；高产青霉素菌种是通过②诱变培育的。 （2）发酵过程是图示整个过程的中心环节，培养基的PH调节在灭菌之前进行，同时要对操作工具发酵设备等严格灭菌，同时在该时期要随时取样检测培养基中的微生物数量、产物浓度等，以便随时调整发酵罐中营养基质的加入速度，同时，要严格控制溶氧量、pH和温度等发酵条件，从而保证所需产品的获得。 18.（10分，除特殊标注外，每空1分） 答案: (1) 固体 葡萄糖 (2)1 培养基1属于通用培养基，可满足多种微生物的营养需要（或写培养基2是无氮培养基，不能满足多种微生物生长的需要） 稀释涂平板法 (3) ①④⑤⑥(答不全或是错答均不得分) (4) ①③⑤(答不全或是错答均不得分) (5) ACD(答不全或是错答均不得分) (6) ①取样部位不同，其细菌的种类和数量有较大差异； ②个人卫生习惯和取样环境等因素不同，会使细菌的种类和数量有较大差异，可能造成不同的结果； ③样本数量太少也可能造成结果的差异；（2分，答出一点得1分） 【分析】1、原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核。 2、微生物实验室分离中配制培养基的操作步骤：计算→称量→溶解→调pH→灭菌步骤。 【详解】（1）上述培养基中含有琼脂，属于固体培养基。培养基2中葡萄糖可以提供碳源。 （2）培养基1属于通用培养基，可满足多种微生物的营养需要，故应该选择培养基1。 （3）①用无菌棉拭子取样，可以避免杂菌污染，①正确；②不能用接种环取样，②错误；③在不同样品表面任选5个点取样，可能误差较大，③错误；④在不同样品表面选固定面积的区域内取样，可以减小误差，④正确；⑤在取样部位反复涂抹5次，增加细菌数目，⑤正确；⑥将采集到的样本置于无菌试管内封闭备用，避免杂菌污染，⑥正确。故选①④⑤⑥。 （4）①操作I可将待测样本放入无菌生理盐水，避免杂菌污染，①正确；②接种时用涂布器进行接种，②错误；③接种时用涂布棒进行涂布，使微生物分散开来，③正确；④不同的培养基平板需在皿底上做好记号，④错误；⑤接种后的培养基平板需倒置放在恒温箱中培养2-3天，⑤正确。 故选①③⑤。 （5）取样部位不同，其细菌的种类和数量有较大差异，可能造成不同的结果，样本数少，偶然性较大，影响实验结果可信度，可能会造成截然相反的结果；个人卫生习惯和取样环境等因素不同，会使细菌的种类和数量有较大差异，可能造成不同的结果。 19．（11分，除特殊标注外，每空1分） 答案： (1) 细胞膜具有一定的流动性和植物细胞的全能性（2分，答出一点得1分）植物体细胞杂交技术 72 (2) 纤维素酶（或果胶酶） 等渗溶液 (3)细胞壁的形成 3 需要 再分化产生幼苗的过程需要长芽，叶绿素的合成需要光照 (4)能够打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育作物新品种方面展示出独特的优势 【分析】题图分析：过程①是通过酶解法去除细胞壁获得原生质体a和b；过程②通过物理或化学方法（如聚乙二醇试剂）诱导原生质体融合成c；过程③是再生细胞壁形成杂种细胞d；过程④是脱分化过程形成愈伤组织e；过程⑤是再分化生成完整植株。 【详解】（1）植物体细胞杂交包括植物细胞融合和植物组织培养两个阶段，因此其原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全能性；番茄—马铃薯植株是将马铃薯细胞和番茄细胞融合形成，染色体数目是两者之和，即染色体数目为24+48=72条。 （2） 过程①用酶解法除去了植物细胞的细胞壁，该操作是根据植物细胞壁的成分主要是果胶和纤维素设计的，酶解后得到的结构是原生质体；需在等渗溶液中维持细胞形态。 （3）植物体细胞融合完成的标志是细胞壁的形成；过程②得到的融合细胞，若只考虑两两融合则有番茄细胞相互融合、马铃薯细胞相互融合、番茄-马铃薯融合3种融合细胞，其中番茄-马铃薯融合细胞是符合要求的；过程④是脱分化形成愈伤组织的过程，该过程使细胞失去了原有的结构和功能。与过程④相比，过程⑤再分化产生幼苗的过程需要长芽，叶绿素的合成需要光照。 （4）植物体细胞杂交技术能够打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育作物新品种方面展示出独特的优势。 20．（8分，除特殊标注外，每空1分） 答案： (1) 使其超数排卵 MⅡ（减数分裂Ⅱ中期或减数第二次分裂中期） (2)同期发情 (3)有性 (4)抗生素 增大细胞贴壁生长的附着面积，防止过早出现接触抑制现象 (5)雌性 (6)生态工程 【分析】1、哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等几个主要步骤。 【详解】（1）促性腺激素本质为蛋白质，口服后会被消化而失去作用，因此为了获得更多的卵母细胞，应该给雌性个体注射促性腺激素，使其超数排卵。取自雌性北方白犀牛体内的卵母细胞需要培养至MⅡ（减数分裂Ⅱ中期或减数第二次分裂中期）才能与获能的精子受精。 （2）要对受体牛进行同期发情处理，使其生理状态具备受孕状态才能提高成功率。 （3）利用该技术培育新个体用到了精子和卵细胞的融合，则该繁殖方式属于有性繁殖。 （4）在进行动物细胞的培养时可以在培养基中加入抗生素，防止培养过程被杂菌污染。由于动物细胞具有贴壁生长、接触抑制的现象，所以将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入培养瓶中增大细胞贴壁生长的附着面积，防止过早出现接触抑制现象以增加培养的细胞数量。 （5）获得的克隆北方白犀牛，其细胞核遗传物质来源于雌性北方白犀牛，因此其性别与提供细胞核的供体相同，为雌性。 （6）保护北方白色犀牛的最根本措施是借助生态工程使白犀牛被破坏的生态环境得到恢复。 21．（11分，除特殊标注外，每空1分） 答案: (1) 显微操作 纺锤体—染色体复合物 (2) 使其完成细胞分裂和发育进程 桑葚胚或囊胚 (3)40nM （没有单位不得分） 抑制组蛋白去乙酰化酶的活性，从而使组蛋白乙酰化程度升高，促进重构胚的发育（2分） (4)胚胎细胞分化程度低，全能性容易恢复（2分） (5)在猪的基因组中导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术培育出可用于移植的猪器官（2分） 【详解】（1）过程②常用显微操作方法对卵母细胞进行“去核”，实际上去除的是纺锤体一染色体复合物，这是由于在减数分裂过程中，遗传物质主要集中在纺锤体牵引的染色体上，去除这一复合物可以确保后续植入的体细胞核能够成为新细胞的遗传控制中心。 （2）重构胚在形成后，其细胞周期可能处于停滞状态，通过物理或化学方法对重构胚进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程。通常将早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚阶段再移植入代孕母猪体内。 （3）由表中数据可知，当为40 nM时，囊胚形成率 达到最高的35.7%，因此选用40 nM的TSA处理更有利于提高囊胚的形成率。TSA作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂，其作用是抑制组蛋白去乙酰化酶的活性，从而使组蛋白乙酰化程度升高，由此可推测组蛋白乙酰化程度的升高会促进重构胚的发育。 （4）胚胎细胞分化程度低，全能性更容易恢复，因此，为提高基因编辑猪细胞核移植的成功率，可以用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植。 （5）免疫排斥是机体对移植物通过特异性免疫应答使其破坏的过程，一般是指移植术后，受体可识别移植物抗原并产生应答，改造方案为：在猪的基因组中导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术培育出可用于移植的猪器官。 学科网（北京）股份有限公司 $Sheet1 双向细目表 题号 题型 分值 考 点 难度系数（预估） 1 单选题 3 发酵技术的发展及传统发酵技术的应用 0.75 2 单选题 3 乳酸菌在发酵技术的应用 0.75 3 单选题 3 果酒，果醋的制作过程及注意事项 0.75 4 单选题 3 泡菜制作原理及注意事项 0.75 5 单选题 3 啤酒的生产及制作工艺 0.65 6 单选题 3 微生物工程中的无菌操作技术 0.75 7 单选题 3 微生物的筛选原理考察 0.75 8 单选题 3 微生物接种方法的应用 0.75 9 单选题 3 发酵工程在农牧业、食品工业、医药工业等方面的应用 0.65 10 单选题 3 植物组织培养技术原理及操作要点 0.65 11 单选题 3 植物体细胞杂交技术原理及技术操作要点 0.65 12 单选题 3 植物细胞工程的应用 0.65 13 单选题 3 诱导多能干细胞（iPS细胞）的基础知识 0.65 14 单选题 3 单克隆抗体的制备过程及应用 0.65 15 单选题 3 动物细胞工程和胚胎工程的原理及技术操作要点 0.55 16 单选题 3 生物技术培育新品种、制备生物产品的筛选或检测 0.65 17 解答题 12 发酵工程（菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等） 0.55 18 解答题 10 微生物的具体操作过程 0.45 19 解答题 11 植物体细胞杂交技术在生产实践中的应用 0.55 20 解答题 8 克隆动物的过程图解 0.55 21 解答题 11 体细胞核移植技术原理及操作要点 0.55 Sheet2 Sheet3 $