精品解析：四川省南充市西充中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

四川省西充中学2025-2026学年度下学期期中考试高2024级生物试题 时间：75分钟；满分：100分 一、单项选择题（每小题只有一个正确答案，每小题2分，共50分） 1. 在果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作中，用到的微生物分别是（ ） A. 酵母菌、酵母菌、毛霉、乳酸菌 B. 酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌 C. 毛霉、醋酸菌、乳酸菌、酵母菌 D. 酵母菌、乳酸菌、毛霉、醋酸菌 【答案】B 【解析】 【分析】1、与酒与醋的生产有关的微生物，分别是酵母菌（真菌）和醋酸菌（细菌），它们各有不同的菌种，菌种的不同，所产生的酒和醋的风味也不同。酿酒所用的原料是葡萄或其它果汁，酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖进行酒精发酵；果醋的制作是以果酒为原料，利用醋酸菌，将酒精氧化成醋酸的过程。 2、腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。 【详解】参与果酒制作的微生物是酵母菌；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌能将糖源或酒精转变成醋酸；参与腐乳制作的微生物有多种，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要是毛霉；参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，B正确，ACD错误。 故选B。 2. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（　　） A. 该方法的原理是醋酸菌在缺少糖源时可将乙醇最终转化为乙酸 B. 加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死酵母菌 C. “衣”位于变酸的酒表面，是由醋酸菌大量繁殖形成的 D. 挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧 【答案】B 【解析】 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧性，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其代谢类型是异养需氧型，参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型。 【详解】A、当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为乙酸，A正确； B、加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死醋酸菌，B错误； C、醋酸菌为好氧菌，“衣”位于变酸的酒表面，是由醋酸菌大量繁殖形成的，C正确； D、醋酸菌为好氧菌，挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧，有利于发酵过程，D正确。 故选B。 3. 为了从土壤中筛选对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生物，研究人员利用土壤浸出液进行了如图所示操作。下列说法错误的是（　　） A. 在X培养基上接种的方法为平板划线法 B. X培养基含有淀粉和抗生素，Y培养基是不含琼脂的液体培养基 C. 菌落①可能是硝化细菌，因不能产生淀粉酶所以无透明圈 D. 图中降解淀粉最高效的是菌落⑤，可根据菌落特征初步判断微生物类型 【答案】A 【解析】 【详解】A、X培养基上得到了均匀分散的单菌落，符合稀释涂布平板法的接种结果；平板划线法得到的菌落会沿划线轨迹分布，不会呈现这种均匀分散的状态，因此接种方法不是平板划线法，A错误； B、本实验目的是筛选“对抗生素有抗性、能高效降解淀粉”的微生物：因此X培养基需要添加淀粉（作为降解底物，筛选降解淀粉的微生物）和抗生素（筛选具有抗生素抗性的微生物）；Y培养基是用于扩大培养目标菌的液体培养基，液体培养基不需要添加凝固剂琼脂，B正确； C、硝化细菌是化能自养型微生物，不需要利用淀粉，也不能产生淀粉酶分解淀粉，因此无法降解培养基中的淀粉，滴加碘液后不会出现透明圈；若该硝化细菌具有抗生素抗性，即可在该培养基上形成菌落，C正确； D、碘液遇淀粉会变蓝，淀粉被分解，蓝色消失，图中⑤的透明圈最大，说明菌体⑤降解淀粉的能力最强，不同菌体形成的菌落特征不同，因此可根据菌落特征初步判断微生物类型，D正确。 4. 传统食醋酿造过程中，发酵液表面产生的凝胶状膜主要为细菌纤维素，研究人员通过 实验研究了细菌纤维素生产过程中各种指标的变化情况，获得的参数曲线如下图。下列有 关叙述正确的是 （ ） A. 食醋酿造过程中的主要菌种为醋酸菌，能在缺少糖源和氧气时将酒精转化为醋酸 B. 传统食醋酿造过程中，发酵液表面的细菌纤维 素来自细菌的高尔基体 C. 菌体的密度检测用的是抽样检测法 D. 随着发酵的进行，发酵液pH 下降，后期应只有醋酸菌在繁殖 【答案】C 【解析】 【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。 【详解】A、食醋酿造过程中的主要菌种为醋酸杆菌，为好氧菌，当氧气、糖源都充足时，醋酸杆菌能将葡萄糖转化为醋酸，在氧气充足，缺少糖源时可将酒精转化为醋酸，A错误； B、细菌为原核生物，没有高尔基体，B错误； C、显微镜直接计数是测定细菌数量的常用方法，菌体的密度检测用的是抽样检测的方法，并结合显微镜直接计数法使用，C正确； D、随着发酵的进行，菌液的pH下降会抑制菌种的生长，后期可能存在醋酸菌和乳酸菌等，D错误。 故选C。 5. 灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　） A. 动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行 B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C. 为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌 D. 可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌 【答案】D 【解析】 【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。 【详解】A、动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行，A错误； B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物的培养不能加入抗生素，B错误； C、一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染，C错误； D、可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。 故选D。 6. 为了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，某研究小组进行了相关药敏实验，图 1 为部分实验器材。将含有相同浓度的抗生素 I～Ⅳ四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的平板上，实验结果如图 2。下列相关叙述正确的是（ ） A. 为获得长满测试菌的平板，需要使用图 1 中器材①②③ B. 图 2 中 II 形成的抑菌圈较小，可能是病原微生物对药物较敏感 C. 图 2 抑菌圈中的菌落可能是在抗生素 IV 作用下产生了突变株 D. 不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果 【答案】D 【解析】 【分析】1、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养；在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、分析题图：抑菌圈越大，说明病原微生物对抗生素越敏感，抗性越弱，则对抗生素Ⅳ最敏感，但其中出现了菌落，可能是发生了突变。 【详解】A、为获得长满测试菌的琼脂平板，需要采用稀释涂布平板法，该方法需要使用图1中①酒精灯（操作需要在酒精灯火焰旁进行，酒精灯对涂布器进行灼烧灭菌）、④涂布器和③培养基， ②为接种环(接种工具)，是平板划线法接种时需要使用的接种工具，用平板划线法不能获得长满测试菌的平板，A错误； B、图2中II处透明圈最小，说明此处微生物对该药物敏感度最低，B错误； C、突变株的出现不是在抗生素的作用下产生的，抗生素只能起选择作用，C错误； D、不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果中抑菌圈的大小 ，D正确。 故选D。 7. 菌株甲为大肠杆菌的甲硫氨酸（Met）营养缺陷型，菌株乙为苏氨酸（Thr）营养缺陷型，分别受 a、 b 基因控制，在基本培养基（M）上不能生长，但可在添加相应氨基酸的培养基上生长。将上述 两菌株的菌液混合一段时间后，从中筛选出 4 种菌株，4 种菌株在不同培养基上的培养结果见表。下列分析不合理的是（ ） 菌株 培养基 M M＋Met M＋Thr M＋Met＋Thr 菌株Ⅰ － ＋ － ＋ 菌株Ⅱ － － － ＋ 菌株Ⅲ － － ＋ ＋ 菌株Ⅳ ＋ ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示能生长，“－”表示不能生长。 A. 菌株甲可能缺少合成甲硫氨酸的酶 B. 菌株Ⅰ和菌株Ⅲ分别为菌株甲和菌株乙 C. 菌株Ⅳ可能来自菌株甲或菌株乙的基因突变但不可能发生基因重组 D. 菌株Ⅱ和菌株Ⅳ的基因型可能分别为 ab、AB 【答案】C 【解析】 【分析】分析表格可知：菌株Ⅰ在基本培养基上不能生长，只有在加入Met或加入Met和Thr的基础培养基上可生长，菌株Ⅰ为甲硫氨酸（Met）营养缺陷型；菌株Ⅱ在基本培养基上不能生长，只有在同时加入Met和Thr的基础培养基上可生长，菌株Ⅱ为甲硫氨酸（Met）和苏氨酸（Thr）营养缺陷型；菌株Ⅲ在基本培养基上不能生长，只有在加入Thr或加入Met和Thr的基础培养基上可生长，菌株Ⅲ为苏氨酸（Thr）营养缺陷型；菌株Ⅳ在基本培养上能生长，说明菌株Ⅳ体内可以合成甲硫氨酸和苏氨酸。 【详解】A、菌株甲为大肠杆菌的甲硫氨酸（Met）营养缺陷型，菌株乙为苏氨酸（Thr）营养缺陷型，一般情况下，各营养缺陷型缺少合成相应氨基酸的酶，A正确； B、从表格中看出，菌株Ⅰ为甲硫氨酸（Met）营养缺陷型，菌株Ⅲ为苏氨酸（Thr）营养缺陷型，B正确； C、菌株Ⅳ可能来自菌株甲或菌株乙的基因突变，但也可能是菌株甲和菌株乙菌液混合后，通过结合发生基因重组，C错误； D、菌株甲和菌株乙菌液混合后，通过结合发生基因重组，形成了新的菌株Ⅱ（基因型为ab）和菌株Ⅳ（基因型为AB）,也可能发生了基因突变，但基因突变的概率很小，D正确。 故选C。 8. 甘蔗榨糖后的废弃液——糖蜜中含有较多蔗糖，为了提高甘蔗的整体利用价值，中国科学家运用生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌，以糖蜜为原料，通过发酵工程生产 PHA 等新型高附加值可降解材料。嗜盐单胞菌产生的PHA在营养物质丰富时会贮存在细胞中，营养物质不足则被分解以维持细胞代谢。以下说法正确的是（　　） A. 用于发酵工程的菌种，可以从自然界中筛选，也可以通过单倍体育种获得 B. 选育好的菌种需要经扩大培养后再接种至发酵罐中 C. 发酵过程糖蜜浓度越高越有利于嗜盐单胞菌的生长繁殖 D. 直接将培养液过滤即可以从滤液中获得PHA 【答案】B 【解析】 【详解】A、单倍体育种的原理是染色体变异，适用于能进行有性生殖的真核生物，而发酵工程所用的微生物多为原核生物（如本题的嗜盐单胞菌），无染色体，无法进行单倍体育种，A错误； B、选育后的菌种需先经过扩大培养，获得足够数量的菌种后再接种到发酵罐，可缩短发酵周期、提高发酵效率，B正确； C、糖蜜浓度过高时，外界溶液渗透压远高于嗜盐单胞菌的细胞内渗透压，会导致细胞失水抑制生长，甚至造成菌体死亡，并非浓度越高越利于生长繁殖，C错误； D、由题干可知PHA是嗜盐单胞菌的胞内储存物，不会分泌到细胞外，直接过滤的滤液中无PHA，需先破碎细胞后再提取，D错误。 9. 巴氏杀菌乳是以生牛（羊）乳为原料，经巴氏杀菌等工序制得的液体产品，根据国家标准（GB19645-2010）每毫升合格巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50 000个。某兴趣小组进行了新鲜牛奶合适的消毒温度的探究，下列相关实验操作不合理的是（ ） A. 配制牛肉膏蛋白胨培养基并在121 ℃、100 kPa条件下处理15～30 min B. 将等量的新鲜牛奶分别置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒温水浴锅中处理15 min C. 对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用稀释涂布平板法接种在平板上并在30～37 ℃下培养1～2 d D. 统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度作为最适消毒温度 【答案】D 【解析】 【分析】配置培养基一般需要碳源、氮源、水和无机盐等。灭菌方法包括高压蒸汽灭菌法（一般培养基）和灼烧灭菌法（涂布棒等玻璃器皿）等等。 【详解】A、培养基配置好后必须高压蒸汽灭菌（在121 ℃、100 kPa条件下处理15～30 min），将培养基彻底灭菌，以避免培养基上的微生物影响实验结果，A正确； B、新鲜牛奶应使用巴氏消毒法消毒，为了探究新鲜牛奶合适的消毒温度，可将等量的新鲜牛奶分别置于60℃、70℃、80℃、90℃恒温水浴锅中处理15min，并检测不同温度处理下的牛奶中微生物的数量进行比较，B正确； C、若要统计消毒后的牛奶中微生物的数量，可用稀释涂布平板法接种，所以可对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在37℃下培养1～2 d，C正确； D、由于温度过高会影响蛋白质的结构，进而破坏牛奶中的营养成分，所以菌落数最少的组对应的温度不一定是最适的消毒温度，最适的消毒温度应保证每毫升合格巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50000个，同时还得保证牛奶的营养价值不被破坏，D错误。 故选D。 10. 如图所示亲本植株体细胞染色体数为2n，甲、乙、丙、丁表示以亲本植株为材料进行的四种人工与育种过程。下列叙述错误的是（　　） A. 四种人工育种过程都用到了植物组织培养技术 B. 子代植株基因型与亲本基因型相同的是乙、丙 C. 过程①培养基中生长素与细胞分裂素比值较小时，有利于根的分化 D. 与传统的杂交育种相比，丁过程的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍 【答案】C 【解析】 【分析】据图分析，甲过程是花药离体培养得到单倍体植株，所以代表单倍体培养；乙过程经历了胚状体阶段，所以是组织培养；丙过程的先芽后根，代表悬浮细胞培养；丁过程具有去壁后原生质体，所以属于原生质体培养。 【详解】A、甲过程是花药离体培养得到单倍体植株，乙过程经历了胚状体阶段，所以是组织培养；丙过程的先芽后根，代表悬浮细胞培养；丁过程具有去壁后原生质体，四种方法最终都得到了完整植株，故都用到了植物组织培养技术，A正确； B、甲过程得到的是单倍体，丁过程形成的是多倍体，乙、丙过程为植物组织培养和细胞培养，所以得到的乙、丙植株基因型与亲本基因型相同，B正确； C、过程①为组织培养过程，外植体需经过脱分化再分化才能形成胚状体；植物激素的配比不同会导致器官发生和形态构建的不同，培养基中生长素与细胞分裂素比值较大时，有利于根的分化，反之，有利于芽的分化，C错误； D、丁过程为植物体细胞的杂交，与传统的杂交育种相比，其优点是克服远缘杂交不亲和的障碍（打破生殖隔离），D正确。 故选C。 11. 中药材怀菊含有多种活性物质，具有清热、明目等功效。植物组织培养技术可用于怀菊的脱毒和快速繁殖。下列叙述正确的是（ ） A. 怀菊中含有的次生代谢物通常是怀菊基本生命活动所必需的 B. 怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传 C. 利用怀菊的茎段作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗 D. 生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的小 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、怀菊中含有的初生代谢物通常是怀菊基本生命活动所必需的，而次生代谢物不是怀菊基本生命活动所必需的，A错误； B、怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传，该过程的原理是植物细胞的全能性，B正确； C、利用怀菊的茎尖作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗，因为茎尖中几乎不带毒，C错误； D、生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的大，进而促进生芽，生长素偏多时有利于生根，D错误。 故选B。 12. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，让其与未经射线照射的受体细胞融合成杂种细胞的技术。所得融合细胞含受体的全部遗传物质及供体的部分遗传物质。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，期望培育能产生紫杉醇的柴胡。科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如下： 后代植株类型 染色体数目及形态 DNA分子标记鉴定 甲 12，与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段 乙 12，与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段 下列叙述错误的是（ ） A. 红豆杉与柴胡融合前需进行细胞去壁处理，且需对柴胡的原生质体进行射线处理 B. 可用高Ca2+--高pH融合法、离心法等方法诱导原生质体融合 C. 后代乙类型一定不是所需植株，后代甲和丙类型不一定能够产生紫杉醇 D. 红豆杉亲本的遗传物质可能是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组 【答案】A 【解析】 【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。 【详解】A、红豆杉能产生紫杉醇，若培育能产生紫杉醇的柴胡，则供体为红豆杉，受体为柴胡，因此需要对去壁后的红豆杉进行射线处理，A错误； B、诱导原生质体融合的化学方法有聚乙二醇融合法和高Ca2+-高pH融合法，物理方法有电融合法、离心法，B正确； CD、由于红豆杉才能产生紫杉醇，故培育成功的柴胡细胞内应含有红豆杉的DNA片段，乙类型植株中无红豆杉DNA片段，说明其不是杂种植株，因此一定不是所需植株，甲、丙类型植株与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的DNA片段，说明甲、丙植株属于杂种植株，它们的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成，红豆杉亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以遗传物质重组的方式整合进柴胡的基因组，但由于不同生物体内的基因相互作用，因此甲和丙类型不一定能够产生紫杉醇，CD正确。 故选A。 13. 下列关于细胞工程的相关“检测”的叙述，正确的是（　　） A. “作物脱毒”是否成功可以接种一定的病毒来检测 B. 传代培养的成纤维细胞是否癌变可通过核中的染色体分析而确定 C. 植物体细胞杂交过程中“去壁”过程是否充分，可取样用低渗溶液鉴定 D. 单克隆抗体制备获得的杂交瘤细胞是否满足生产需求，可用HAT选择培养基鉴定 【答案】C 【解析】 【详解】A、作物脱毒是获得本身不含病毒的植株，并未使植株获得抗病毒性状，接种病毒会使脱毒成功的植株也被感染，应直接检测植株内是否存在目标病毒判断脱毒是否成功，A错误； B、细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生基因突变，基因突变是分子水平的变异，无法通过观察染色体的形态、数目检测到，B错误； C、植物细胞壁具有支持和保护作用，若去壁不充分，细胞壁可避免细胞在低渗溶液中吸水涨破；若去壁充分得到原生质体，在低渗溶液中会吸水涨破，因此可用低渗溶液鉴定去壁是否充分，C正确； D、HAT选择培养基的作用仅为筛选出杂交瘤细胞，筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生所需的特异性抗体，还需进行抗体阳性检测才能确定是否满足生产需求，D错误。 14. 细胞悬浮培养是将细胞接种于液体培养基中并保持良好分散状态的培养方式，细胞悬浮培养常在发酵罐等生物反应器中进行。下列叙述错误的是（ ） A. 在动物细胞的悬浮培养过程中，可以适当添加抗生素来保持无菌的培养环境 B. 利用发酵罐生产单细胞蛋白时，可以直接对细胞悬液进行过滤、离心得到产品 C. 细胞产物的工厂化生产中，植物细胞培养也属于细胞悬浮培养 D. 悬浮培养的动物细胞在传代培养过程中需用胰蛋白酶处理 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【详解】A、抗生素具有抑菌或杀菌作用，培养基内加入适量的抗生素抑制细菌生长，能形成无菌的培养环境，A正确； B、单细胞蛋白是通过发酵获得了大量的微生物菌体，发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品，B正确； C、植物细胞培养是在离体条件下，将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中进行震荡培养，得到分散成游离的悬浮细胞，通过继代培养使细胞增殖，从而获得大量细胞群体的一种技术。植物细胞培养属于细胞悬浮培养，C正确； D、进行传代培养时，悬浮培养的动物细胞可直接用离心法收集后，然后分瓶培养，D错误。 故选D。 15. 科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（　　） A. 利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒 B. 体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体 C. 将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 D. 将纯化的核衣壳反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体 【答案】A 【解析】 【分析】1、效应B细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。2、该杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，并且单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。 【详解】A、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，因此利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，A正确； B、单个效应B细胞有产生抗体的能力，但没有无限增殖的本领，因此在体外培养单个效应B细胞不可能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，B错误； C、将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，C错误； D、用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，使其产生免疫反应，以获得相应的B细胞，从小鼠血清中分离的抗体数量少，不是单克隆抗体，D错误。 故选A。 16. 胚胎工程技术的迅速发展实现了优良家畜品种的大量繁殖，能显著提高畜产品质量改善人民生活，还可以解决濒危动物繁育的问题。下列有关哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是（　　） A. 体外受精需加入聚乙二醇等诱导精卵结合 B. 在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，标志着卵子受精 C. 卵裂在透明带内进行，此时胚胎细胞数量和总体积不断增加 D. 排卵就是排出成熟卵细胞的过程，采用胚胎分割技术不可对囊胚或桑葚胚进行无限次分割 【答案】B 【解析】 【详解】A、聚乙二醇是诱导细胞融合的试剂，体外受精时获能的精子和成熟的卵细胞可自主识别结合，无需添加聚乙二醇诱导，A错误； B、卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体（第一极体和减数第二次分裂产生的第二极体），B正确； C、卵裂在透明带内进行，此时期胚胎细胞数量不断增加，但细胞只分裂不生长，胚胎总体积不变甚至略有减小，并非不断增加，C错误； D、排卵是指卵子从卵泡中排出的过程，排出的卵子未完全成熟，通常为次级卵母细胞，并非成熟卵细胞；胚胎分割不能对桑椹胚或囊胚进行无限次分割，分割次数越多胚胎成活率越低，但选项前半部分表述错误，D错误。 17. 某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊，为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代，该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操作。下列叙述正确的是（　　） A. 采集到的精子需用高浓度的ATP溶液进行获能处理 B. 在雌性个体饲料中添加促性腺激素有利于超数排卵 C. 产生的受精卵在原肠胚阶段会发生有丝分裂和细胞分化 D. 分割体外受精得到的胚胎所产生的子代表型完全相同 【答案】C 【解析】 【详解】A、精子获能通常采用培养法（在专用获能培养液中培养）或化学诱导法（用一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液处理），不需要用高浓度ATP溶液处理，A错误； B、促性腺激素的化学本质是糖蛋白，若添加在饲料中饲喂，会被动物消化道的蛋白酶分解而失去活性，超数排卵需通过注射方式施用促性腺激素，B错误； C、原肠胚阶段的胚胎细胞会通过有丝分裂增加细胞数量，同时发生细胞分化，逐步形成外、中、内三个胚层，为后续组织器官的形成奠定基础，C正确； D、胚胎分割得到的子代基因型相同，但表型由基因型和环境共同决定，且发育过程中可能发生基因突变等变异，因此子代表型不会完全相同，D错误。 18. 首次实现哺乳动物体外受精：从兔子的子宫回收获能的精子在体外同卵子结合，然后根据同步化的原理，将早期胚胎移植到另一只假孕雌兔的子宫中，经过“借体怀胎”繁殖出世界上第一只通过体外受精培育成功的仔兔。下列叙述错误的是（　　） A. 为防止受体对移植的胚胎发生免疫排斥，供体和受体要进行同期发情处理 B. 由桑葚胚到囊胚期细胞的核质比逐渐增大 C. 囊胚期透明带会破裂，胚胎从中伸展出来的过程叫孵化 D. 在自然条件下，哺乳动物的受精过程和早期胚胎的发育均在输卵管中完成 【答案】A 【解析】 【详解】A、同期发情处理的作用是使供体、受体生殖器官的生理变化同步，为移入胚胎提供相同的生理环境；受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥是胚胎移植的固有生理学基础，并非同期发情处理的目的，A错误； B、桑葚胚到囊胚期细胞进行卵裂，细胞数量增加但胚胎总体积基本不变，单个细胞体积不断减小，因此核质比逐渐增大，B正确； C、囊胚期胚胎持续扩张，会导致透明带破裂，胚胎从透明带中伸展出来的过程称为孵化，C正确； D、自然条件下，哺乳动物的受精在输卵管中完成，早期胚胎发育至桑葚胚或囊胚阶段才移动到子宫着床，因此受精过程和早期胚胎发育均在输卵管中完成，D正确。 19. 精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，下图表示用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述正确的是（ ） A. ①过程需将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理 B. ②采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质来自于父母双方 C. ②③过程所用培养液的成分相同且都加入动物血清 D. 上述过程中，需要对代孕母鼠用相关激素进行同期发情处理 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：图示表示培育转基因鼠的基本流程，其中①是筛选获得导入外源基因的精子的过程，②是体外受精过程，③是早期胚胎培养过程，④是胚胎移植过程。 【详解】A、①过程需将成熟的精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导精子获能，A错误； B、②采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质来自于父母双方和外源基因，B错误； C、②为体外受精过程，③为早期胚胎培养过程，前者在获能溶液或专用的受精溶液中进行，后者在发育培养基中进行，这两个过程所用培养液的成分不完全相同，C错误； D、胚胎移植时，需对供体和受体使用激素进行同期发情处理，以保证胚胎移植入相同的生理环境，D正确。 故选D。 20. Leigh氏综合征患者中20%~25%是由线粒体基因突变导致的。一位母亲约有1/4的线粒体携带这种线粒体突变基因，她的前两个孩子因患有该病而死亡。她的第三个孩子因为接受了另一名女性捐赠的健康基因而成为全球首个拥有“三个父母”的男婴。下图表示该男婴的孕育过程，下列说法错误的是（ ）。 A. 该健康男婴孕育过程中使用了动物细胞培养、核移植、体外受精、早期胚胎培养和 胚胎移植等技术 B. 图示过程中代表该母亲卵母细胞的是卵母细胞A C. 若卵母细胞B的提供者是红绿色盲患者，则这个男婴一定是红绿色盲患者 D. 体外受精获得的早期胚胎，可培养至桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植 【答案】B 【解析】 【分析】体外受精的原理：人工模拟体内环境（包括营养、温度、pH等），使初级卵母细胞成熟和精子获能，最终完成受精和胚胎保存。 【详解】A、结合图示可以看出，该健康男婴孕育过程中使用了动物细胞培养、核移植、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，A正确； B、由于该母亲的线粒体基因异常，但其核基因正常，因此只需要捐赠者提供细胞质，融合细胞具有卵母细胞A提供的细胞质和卵母细胞B提供的细胞核，因此代表该母亲卵母细胞的是卵母细胞B，B错误； C、红绿色盲是伴X隐性遗传病，若卵母细胞B的提供者是红绿色盲患者（XbXb），则这个男婴一定是红绿色盲患者，C正确； D、体外受精获得的早期胚胎，可培养至桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植，因为此时的胚胎处于游离状态，且具有发育的全能性，D正确。 故选B。 21. 下列关于基因表达载体构建的描述，正确的是（ ） A. 构建基因表达载体需要限制酶和DNA聚合酶 B. 基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止密码子、标记基因等组件 C. 培育膀胱生物反应器应将药物蛋白基因与乳腺细胞特异表达的启动子等控件重组构建表达载体 D. 标记基因的作用是便于重组DNA分子的筛选 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法； （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、构建基因表达载体需要限制酶和DNA连接酶，A错误； BD、基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等组件，标记基因的作用是便于重组DNA分子的筛选，B错误，D正确； C、培育膀胱生物反应器应将药物蛋白基因与膀胱细胞特异表达基因的启动子等控件重组构建表达载体，C错误。 故选D。 22. 下列关于生物工程相关知识的叙述，正确的项数是（　　） ①植物组织培养过程中愈伤组织的代谢类型是自养需氧型 ②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，在聚乙二醇的诱导下，融合成的细胞只有杂交瘤细胞 ③基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的 ④PCR技术需要利用限制性核酸内切酶打开DNA双链 ⑤牛早期胚胎发育的历程是：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚 ⑥利用植物茎尖培养脱毒苗时，全程都需要光照 A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 【答案】A 【解析】 【详解】①愈伤组织是植物细胞脱分化形成的无定形薄壁细胞，不含叶绿体，无法自行合成有机物，代谢类型为异养需氧型，①错误； ②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经聚乙二醇诱导融合后，会产生B细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞三类融合细胞，并非只有杂交瘤细胞，②错误； ③基因治疗的概念就是将健康的外源正常基因导入存在基因缺陷的细胞中，通过该基因的表达产物发挥功能，达到治疗疾病的目的，③正确； ④PCR技术通过90~95℃高温加热使DNA双链的氢键断裂实现解旋，无需限制性核酸内切酶，限制酶的作用是切割DNA的磷酸二酯键，④错误； ⑤哺乳动物早期胚胎发育的正确顺序为受精卵→卵裂期→桑葚胚→囊胚→原肠胚，题干表述顺序正确，⑤正确； ⑥利用茎尖培养脱毒苗时，脱分化形成愈伤组织的阶段需要避光，再分化形成植株的阶段才需要光照，并非全程需要光照，⑥错误。 综上所述，①②④⑥错误，③⑤正确。正确的叙述共2项，A正确，BCD错误。 23. 下图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图（↓表示切点）。下列相关分析错误的是（　　） A. 这三种限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端 B. 不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同 C. 能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割 D. 同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等 【答案】D 【解析】 【分析】由图可知，三种限制酶的识别序列均不同，但限制酶1和3切割后产生的黏性末端相同。 【详解】A、据图可知，这三种限制酶切割位点均位于中轴线一侧，切割出的DNA片段末端都是黏性末端，A项正确； B、DNA经限制酶1和限制酶3分别切割，所得的DNA片段黏性末端相同，B项正确； CD、能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割，但能被限制酶1切割的DNA不一定能被限制酶3切割，故同一个DNA经限制酶Ⅰ和限制酶3分别切割后所得片段数不一定相等，C项正确，D项错误。 故选D。 【点睛】 24. 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列说法正确的是（　　） 限制酶 BamHI HindⅢ EcoRI SmaI 识别序列及切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G A↓AGCTT TTCGA↑A G↓AATTC CTTAA↑G CCC↓GGG GGG↑CCC A. 一个图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别含有1、2个游离的磷酸基团 B. 若对图中质粒进行改造，插入的SmaI酶切位点越多，质粒的热稳定性越低 C. 与只使用EcoRI相比较，使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒和外源DNA可以防止质粒和含目的基因的DNA自身环化 D. 为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在只含蔗糖的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、该质粒为环状，在没有经过SmaⅠ切割前，其不含游离的磷酸基团；当被SmaⅠ酶切割后该质粒变成以一条DNA分子，含有两条单链，而在每条单链的5′端会都含有一个游离的磷酸基团，所以含有2个游离的磷酸基团，A错误； B、对该质粒进行改造是只插入SmaⅠ酶切位点，SmaⅠ酶切位点中含有很多的C-G碱基对，含有的C-G碱基对越多，则所含的氢键越多，因此热稳定性越高，B错误； C、因为如果只使用同一种限制性内切酶，则形成的黏性末端都相同，质粒可以和目的基因进行重组，同时质粒也可以与质粒重组、目的基因也可与目的基因重组，这样就达不到试验的目的，因此使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制性核酸内切酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，C正确； D、将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体后，含有重组质粒的个体才能吸收蔗糖，因此可利用蔗糖作为唯一碳源的培养基进行培养受体细胞，含有重组质粒的细胞才能存活，不含有重组质粒的因不能获得碳源而死亡，从而达到筛选出目的基因的目的，D错误。 故选C。 25. 通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5′端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述正确的是（　　） A. 在PCR反应体系中还需要加入4种游离脱氧核糖核苷酸、ATP、Taq DNA聚合酶等 B. 第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4 C. 引物中设计两种限制酶识别位点有利于DNA聚合酶识别和结合 D. 第2轮PCR，引物2能与图中模板结合并且形成两条链等长的突变基因 【答案】B 【解析】 【分析】PCR的原理是DNA双链复制，步骤包括高温变性、复性、延伸。该过程需要耐高温的DNA聚合酶催化，需要四种游离的脱氧核苷酸做原料。根据图中可得，由于引物的一个碱基在不影响与模板链整体配对的前提下不与目的基因配对，再利用PCR技术实现了目的基因的定点诱变。其技术原理是碱基互补配对原则。 【详解】A、在PCR反应体系中还需要加入4种游离脱氧核苷酸、TaqDNA聚合酶等，但不需要加入ATP，A错误； B、在第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA有2个，总DNA分子共8个，所以比例为1/4，B正确； C、引物中设计两种限制酶识别位点，可以配合载体的限制酶识别位点，帮助目的基因定向定点插入运载体，避免发生自身环化，C错误； D、第2轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链不等长的突变基因，其中②较长，D错误。 故选B。 二、非选择题 26. 聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题： （1）方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺（一种磷脂类物质）为唯一碳源制备_____培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有_____（答三种）等营养物质。 （2）方法2采用_____技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要_____、_____、_____等“分子工具”。 （3）除了上述2种方法之外，还可以通过_____技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。 【答案】（1） ①. 选择 ②. 氮源 （2） ①. 转基因（或重组DNA或基因工程） ②. 限制酶 ③. DNA连接酶 ④. 载体 （3）诱变育种 【解析】 【小问1详解】 方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺为唯一碳源制备选择培养基，在该培养基中只有能利用磷脂酰乙醇胺的微生物能生长，其他微生物的生长被抑制，进而获得筛选出所需要的微生物，为了提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有水分、无机盐和氮源等营养物质，同时还需要提供微生物生长所需要的外界环境条件。 【小问2详解】 方法2采用基因工程技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因，即目的基因外，该技术还需要限制酶、DNA连接酶和载体（或质粒）等“分子工具”，进而可以实现目的基因表达载体的构建。 【小问3详解】 除了上述2种方法之外，还可以通过诱变育种技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物，该技术的原理是基因突变，由于基因突变具有不定向性，因而该技术具有盲目性。 27. “苹果酸/天冬氨酸穿梭”途径（MAS）广泛存在于动物细胞中，影响着细胞的能量代谢。MAS抑制剂抑制MAS途径进而抑制细胞增殖，为癌症的治疗提供了新思路。下表为研究MAS抑制剂对黑色素瘤细胞增殖影响的实验步骤和操作过程，请完成表格： 实验步骤 简要操作过程 配制动物细胞培养液 用蒸馏水、无机盐、葡萄糖、氨基酸及维生素等制备合成培养基，还需添加适量的（1）_____等天然成分，按配方经计算、称量、溶解等步骤配制动物细胞培养液 防止培养时杂菌污染 动物细胞培养液要添加适量的（2）_____ 配制不同浓度MAS抑制剂溶液 用（3）_____作溶剂，配制具有一定浓度梯度的MAS抑制剂溶液 （4）_____ 将黑色素瘤细胞接种到动物细胞培养液中，在适宜条件下培养，获取处于对数生长期的细胞 将细胞培养至分裂高峰 将培养瓶置于96孔培养板中培养24小时，水平晃动培养瓶，使（5）_____，再继续培养48小时 对照组处理 将黑色素瘤细胞适度稀释后接种到96孔培养板中，培养24h后观察到正常贴壁，弃去原培养液，加入新鲜培养液 实验组处理 （6）_____ 实验结果统计 在培养24、48和72h后，分别统计各组黑色素瘤细胞的增殖率 【答案】 ①. 动物血清 ②. 抗生素 ③. 动物细胞培养液 ④. 黑色素瘤细胞的培养 ⑤. 细胞与培养液充分接触 ⑥. 按照对照组方法处理，弃去原培养液后分别加入等量的不同浓度MAS抑制剂 【解析】 【详解】细胞在体外培养时，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。 在体外培养细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的，即需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。防止培养过程中杂菌污染，动物细胞培养液要添加适量的抗生素。 将细胞培养至分裂高峰：将培养瓶置于96孔培养板中培养24小时，以保持培养液pH相对稳定，水平晃动培养瓶，使细胞与培养液充分接触，再继续培养48小时。 为了保持无关变量的一致，需要用动物细胞培养液作溶剂，配制具有一定浓度梯度的MAS抑制剂溶液。实验步骤：黑色素瘤细胞的培养是将黑色素瘤细胞接种到动物细胞培养液中，在适宜条件下培养，获取处于对数生长期的细胞。为了探究MAS抑制剂对黑色素瘤细胞增殖影响，实验组的处理是按对照组方法处理，弃去原培养液后分别加入等量的不同浓度MAS抑制剂溶液。 28. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_____。 （2）步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和_____才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在采用体外培养时，首先应保证其处于_____的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是_____与5%二氧化碳的混合气体。在使用合成培养基时通常需加入血清，血清的作用是_____。 （3）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。 ①单克隆抗体是ADC中的_____（填“a”或“b”）部分。单克隆抗体除了运载药物外，还有_____等作用。 ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致_____。 ③ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖于_____原理。 【答案】（1）人的乳腺癌细胞 （2） ①. 抗体检测 ②. 无菌无毒 ③. 95%空气 ④. 为动物细胞培养提供未知生长因子 （3） ①. a ②. 作为诊断试剂 ③. 癌细胞凋亡 ④. 抗原--抗体特异性结合 【解析】 【小问1详解】 为获得治疗乳腺癌的抵抗力抗体，给小鼠注射的特定抗原应取自人的乳腺癌细胞。 【小问2详解】 获得的杂交瘤细胞必须进行③克隆化培养和抗体检测，才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞。动物细胞培养的关键是无菌操作，故体外培养时，首先应保证其处于无菌无毒的环境； 动物细胞培养的气体条件是95%的空气和5％二氧化碳的混合气体，其中二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH； 在动物细胞体外培养过程中，由于血清等含有一些未知的成分，在使用合成培养基时通常需加入血清等天然成分，为动物细胞培养提供未知生长因子，利于细胞生长。 【小问3详解】 ①ADC药物是利用单克隆抗体的导向作用，对应图中的a部分。 ADC中的单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，让药物作用于乳腺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低乳腺癌治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应，可以有效地治疗疾病；单克隆抗体还可以作为诊断试剂，如检测相关基因有没有表达成蛋白质，或检测抗原的有无，故单克隆抗体除了运载药物外，还有作为诊断试剂、治疗疾病等应用。 ②由图2可知，ADC进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将ADC水解，释放出的药物进入细胞质基质，最终作用于细胞核，引起乳腺癌细胞凋亡。 ③单克隆抗体能与细胞表面的抗原特异性结合，能精确地定位乳腺癌细胞，原理是抗原--抗体特异性结合。 29. CRISPR/Ces9是一种高效的基因编辑技术，通过切割DNA双链以敲除目标基因或插入新的基因。科学家构建了如图所示的两种质粒，并包埋于脂质体中，然后将脂质体加入含受体细胞的培养皿中，实现了基因转移。回答下列问题： （1）研究发现CRISPR-Cas9系统广泛存在于细菌细胞内，类似限制酶，不会破坏自身DNA，原因：_____。CRISPR-Cas系统中Cas9蛋白具有内切酶活性，水解目标DNA的_____（填化学键）。 （2）实验中利用脂质体能实现基因转移的原理_____。24h后在培养皿中添加_____筛选并进行单细胞培养，经检测后即可得到基因编辑后的细胞。此过程须在37℃，气体环境为95%空气+5%CO2的装置中进行。 （3）转染好的细胞用裂解液消化后，使用RNA提取试剂盒提取总RNA，使用反转试剂盒进行逆转录，最终得到_____，再进行PCR。进行PCR时，a个双链DNA经过n轮扩增，理论上至少需要的引物数量为_____。 【答案】（1） ①. 细菌DNA 上没有该限制酶的识别序列 ②. 磷酸二酯键 （2） ①. 生物膜具有一定的流动性 ②. 抗生素G418和嘌呤霉素 （3） ①. cDNA ②. （2n+1-2）a 【解析】 【小问1详解】 细菌的CRISPR-Cas9系统不会破坏自身DNA的原因是细菌DNA没有该限制酶的识别序列（或细菌自身DNA的靶序列被甲基化修饰，Cas9蛋白无法识别切割）。CRISPR-Cas9系统中Cas9蛋白具有内切酶活性，通过切割DNA双链以敲除目标基因或插入新的基因，故功能类似于限制性内切酶，将DNA中的磷酸二酯键破坏。 【小问2详解】 包埋DNA的脂质体结构能与细胞实现融合，能实现基因转移的原理是生物膜具有一定的流动性，由于该质粒上具有G418抗性基因和嘌呤霉素抗性基因，故24h后可通过添加抗生素G418和嘌呤霉素筛选并进行单细胞培养即可得到基因编辑成功后的细胞。动物细胞培养的气体环境为95%空气加5%CO2的混合气体的细胞培养箱。 【小问3详解】 反转录试剂盒以提取的总RNA作为模板，根据碱基互补配对原则合成其互补DNA即cDNA。DNA复制时，每个DNA的两条模板链需要两种不同的引物，由此可知，进行n次DNA复制，第一次需要2个，第二次需要4个，第三次需要8个...第n次需要2n个，则一共需要（2+4+8……+2n）=（2n+1-2）个。而a个双链DNA经过n轮扩增，理论上至少需要的引物数量为（2n+1-2）a个。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 四川省西充中学2025-2026学年度下学期期中考试高2024级生物试题 时间：75分钟；满分：100分 一、单项选择题（每小题只有一个正确答案，每小题2分，共50分） 1. 在果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作中，用到的微生物分别是（ ） A. 酵母菌、酵母菌、毛霉、乳酸菌 B. 酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌 C. 毛霉、醋酸菌、乳酸菌、酵母菌 D. 酵母菌、乳酸菌、毛霉、醋酸菌 2. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（　　） A. 该方法的原理是醋酸菌在缺少糖源时可将乙醇最终转化为乙酸 B. 加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死酵母菌 C. “衣”位于变酸的酒表面，是由醋酸菌大量繁殖形成的 D. 挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧 3. 为了从土壤中筛选对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生物，研究人员利用土壤浸出液进行了如图所示操作。下列说法错误的是（　　） A. 在X培养基上接种的方法为平板划线法 B. X培养基含有淀粉和抗生素，Y培养基是不含琼脂的液体培养基 C. 菌落①可能是硝化细菌，因不能产生淀粉酶所以无透明圈 D. 图中降解淀粉最高效的是菌落⑤，可根据菌落特征初步判断微生物类型 4. 传统食醋酿造过程中，发酵液表面产生的凝胶状膜主要为细菌纤维素，研究人员通过 实验研究了细菌纤维素生产过程中各种指标的变化情况，获得的参数曲线如下图。下列有 关叙述正确的是 （ ） A. 食醋酿造过程中的主要菌种为醋酸菌，能在缺少糖源和氧气时将酒精转化为醋酸 B. 传统食醋酿造过程中，发酵液表面的细菌纤维 素来自细菌的高尔基体 C. 菌体的密度检测用的是抽样检测法 D. 随着发酵的进行，发酵液pH 下降，后期应只有醋酸菌在繁殖 5. 灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　） A. 动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行 B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C. 为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌 D. 可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌 6. 为了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，某研究小组进行了相关药敏实验，图 1 为部分实验器材。将含有相同浓度的抗生素 I～Ⅳ四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的平板上，实验结果如图 2。下列相关叙述正确的是（ ） A. 为获得长满测试菌的平板，需要使用图 1 中器材①②③ B. 图 2 中 II 形成的抑菌圈较小，可能是病原微生物对药物较敏感 C. 图 2 抑菌圈中的菌落可能是在抗生素 IV 作用下产生了突变株 D. 不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果 7. 菌株甲为大肠杆菌的甲硫氨酸（Met）营养缺陷型，菌株乙为苏氨酸（Thr）营养缺陷型，分别受 a、 b 基因控制，在基本培养基（M）上不能生长，但可在添加相应氨基酸的培养基上生长。将上述 两菌株的菌液混合一段时间后，从中筛选出 4 种菌株，4 种菌株在不同培养基上的培养结果见表。下列分析不合理的是（ ） 菌株 培养基 M M＋Met M＋Thr M＋Met＋Thr 菌株Ⅰ － ＋ － ＋ 菌株Ⅱ － － － ＋ 菌株Ⅲ － － ＋ ＋ 菌株Ⅳ ＋ ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示能生长，“－”表示不能生长。 A. 菌株甲可能缺少合成甲硫氨酸的酶 B. 菌株Ⅰ和菌株Ⅲ分别为菌株甲和菌株乙 C. 菌株Ⅳ可能来自菌株甲或菌株乙的基因突变但不可能发生基因重组 D. 菌株Ⅱ和菌株Ⅳ的基因型可能分别为 ab、AB 8. 甘蔗榨糖后的废弃液——糖蜜中含有较多蔗糖，为了提高甘蔗的整体利用价值，中国科学家运用生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌，以糖蜜为原料，通过发酵工程生产 PHA 等新型高附加值可降解材料。嗜盐单胞菌产生的PHA在营养物质丰富时会贮存在细胞中，营养物质不足则被分解以维持细胞代谢。以下说法正确的是（　　） A. 用于发酵工程的菌种，可以从自然界中筛选，也可以通过单倍体育种获得 B. 选育好的菌种需要经扩大培养后再接种至发酵罐中 C. 发酵过程糖蜜浓度越高越有利于嗜盐单胞菌的生长繁殖 D. 直接将培养液过滤即可以从滤液中获得PHA 9. 巴氏杀菌乳是以生牛（羊）乳为原料，经巴氏杀菌等工序制得的液体产品，根据国家标准（GB19645-2010）每毫升合格巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50 000个。某兴趣小组进行了新鲜牛奶合适的消毒温度的探究，下列相关实验操作不合理的是（ ） A. 配制牛肉膏蛋白胨培养基并在121 ℃、100 kPa条件下处理15～30 min B. 将等量的新鲜牛奶分别置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒温水浴锅中处理15 min C. 对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用稀释涂布平板法接种在平板上并在30～37 ℃下培养1～2 d D. 统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度作为最适消毒温度 10. 如图所示亲本植株体细胞染色体数为2n，甲、乙、丙、丁表示以亲本植株为材料进行的四种人工与育种过程。下列叙述错误的是（　　） A. 四种人工育种过程都用到了植物组织培养技术 B. 子代植株基因型与亲本基因型相同的是乙、丙 C. 过程①培养基中生长素与细胞分裂素比值较小时，有利于根的分化 D. 与传统的杂交育种相比，丁过程的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍 11. 中药材怀菊含有多种活性物质，具有清热、明目等功效。植物组织培养技术可用于怀菊的脱毒和快速繁殖。下列叙述正确的是（ ） A. 怀菊中含有的次生代谢物通常是怀菊基本生命活动所必需的 B. 怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传 C. 利用怀菊的茎段作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗 D. 生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的小 12. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，让其与未经射线照射的受体细胞融合成杂种细胞的技术。所得融合细胞含受体的全部遗传物质及供体的部分遗传物质。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，期望培育能产生紫杉醇的柴胡。科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如下： 后代植株类型 染色体数目及形态 DNA分子标记鉴定 甲 12，与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段 乙 12，与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段 下列叙述错误的是（ ） A. 红豆杉与柴胡融合前需进行细胞去壁处理，且需对柴胡的原生质体进行射线处理 B. 可用高Ca2+--高pH融合法、离心法等方法诱导原生质体融合 C. 后代乙类型一定不是所需植株，后代甲和丙类型不一定能够产生紫杉醇 D. 红豆杉亲本的遗传物质可能是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组 13. 下列关于细胞工程的相关“检测”的叙述，正确的是（　　） A. “作物脱毒”是否成功可以接种一定的病毒来检测 B. 传代培养的成纤维细胞是否癌变可通过核中的染色体分析而确定 C. 植物体细胞杂交过程中“去壁”过程是否充分，可取样用低渗溶液鉴定 D. 单克隆抗体制备获得的杂交瘤细胞是否满足生产需求，可用HAT选择培养基鉴定 14. 细胞悬浮培养是将细胞接种于液体培养基中并保持良好分散状态的培养方式，细胞悬浮培养常在发酵罐等生物反应器中进行。下列叙述错误的是（ ） A. 在动物细胞的悬浮培养过程中，可以适当添加抗生素来保持无菌的培养环境 B. 利用发酵罐生产单细胞蛋白时，可以直接对细胞悬液进行过滤、离心得到产品 C. 细胞产物的工厂化生产中，植物细胞培养也属于细胞悬浮培养 D. 悬浮培养的动物细胞在传代培养过程中需用胰蛋白酶处理 15. 科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（　　） A. 利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒 B. 体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体 C. 将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 D. 将纯化的核衣壳反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体 16. 胚胎工程技术的迅速发展实现了优良家畜品种的大量繁殖，能显著提高畜产品质量改善人民生活，还可以解决濒危动物繁育的问题。下列有关哺乳动物胚胎工程的叙述，正确的是（　　） A. 体外受精需加入聚乙二醇等诱导精卵结合 B. 在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，标志着卵子受精 C. 卵裂在透明带内进行，此时胚胎细胞数量和总体积不断增加 D. 排卵就是排出成熟卵细胞的过程，采用胚胎分割技术不可对囊胚或桑葚胚进行无限次分割 17. 某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊，为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代，该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操作。下列叙述正确的是（　　） A. 采集到的精子需用高浓度的ATP溶液进行获能处理 B. 在雌性个体饲料中添加促性腺激素有利于超数排卵 C. 产生的受精卵在原肠胚阶段会发生有丝分裂和细胞分化 D. 分割体外受精得到的胚胎所产生的子代表型完全相同 18. 首次实现哺乳动物体外受精：从兔子的子宫回收获能的精子在体外同卵子结合，然后根据同步化的原理，将早期胚胎移植到另一只假孕雌兔的子宫中，经过“借体怀胎”繁殖出世界上第一只通过体外受精培育成功的仔兔。下列叙述错误的是（　　） A. 为防止受体对移植的胚胎发生免疫排斥，供体和受体要进行同期发情处理 B. 由桑葚胚到囊胚期细胞的核质比逐渐增大 C. 囊胚期透明带会破裂，胚胎从中伸展出来的过程叫孵化 D. 在自然条件下，哺乳动物的受精过程和早期胚胎的发育均在输卵管中完成 19. 精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，下图表示用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述正确的是（ ） A. ①过程需将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理 B. ②采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质来自于父母双方 C. ②③过程所用培养液的成分相同且都加入动物血清 D. 上述过程中，需要对代孕母鼠用相关激素进行同期发情处理 20. Leigh氏综合征患者中20%~25%是由线粒体基因突变导致的。一位母亲约有1/4的线粒体携带这种线粒体突变基因，她的前两个孩子因患有该病而死亡。她的第三个孩子因为接受了另一名女性捐赠的健康基因而成为全球首个拥有“三个父母”的男婴。下图表示该男婴的孕育过程，下列说法错误的是（ ）。 A. 该健康男婴孕育过程中使用了动物细胞培养、核移植、体外受精、早期胚胎培养和 胚胎移植等技术 B. 图示过程中代表该母亲卵母细胞的是卵母细胞A C. 若卵母细胞B的提供者是红绿色盲患者，则这个男婴一定是红绿色盲患者 D. 体外受精获得的早期胚胎，可培养至桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植 21. 下列关于基因表达载体构建的描述，正确的是（ ） A. 构建基因表达载体需要限制酶和DNA聚合酶 B. 基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止密码子、标记基因等组件 C. 培育膀胱生物反应器应将药物蛋白基因与乳腺细胞特异表达的启动子等控件重组构建表达载体 D. 标记基因的作用是便于重组DNA分子的筛选 22. 下列关于生物工程相关知识的叙述，正确的项数是（　　） ①植物组织培养过程中愈伤组织的代谢类型是自养需氧型 ②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，在聚乙二醇的诱导下，融合成的细胞只有杂交瘤细胞 ③基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的 ④PCR技术需要利用限制性核酸内切酶打开DNA双链 ⑤牛早期胚胎发育的历程是：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚 ⑥利用植物茎尖培养脱毒苗时，全程都需要光照 A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 23. 下图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图（↓表示切点）。下列相关分析错误的是（　　） A. 这三种限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端 B. 不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同 C. 能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割 D. 同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等 24. 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列说法正确的是（　　） 限制酶 BamHI HindⅢ EcoRI SmaI 识别序列及切割位点 G↓GATCC CCTAG↑G A↓AGCTT TTCGA↑A G↓AATTC CTTAA↑G CCC↓GGG GGG↑CCC A. 一个图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别含有1、2个游离的磷酸基团 B. 若对图中质粒进行改造，插入的SmaI酶切位点越多，质粒的热稳定性越低 C. 与只使用EcoRI相比较，使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒和外源DNA可以防止质粒和含目的基因的DNA自身环化 D. 为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在只含蔗糖的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测 25. 通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5′端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述正确的是（　　） A. 在PCR反应体系中还需要加入4种游离脱氧核糖核苷酸、ATP、Taq DNA聚合酶等 B. 第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4 C. 引物中设计两种限制酶识别位点有利于DNA聚合酶识别和结合 D. 第2轮PCR，引物2能与图中模板结合并且形成两条链等长的突变基因 二、非选择题 26. 聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题： （1）方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺（一种磷脂类物质）为唯一碳源制备_____培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有_____（答三种）等营养物质。 （2）方法2采用_____技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要_____、_____、_____等“分子工具”。 （3）除了上述2种方法之外，还可以通过_____技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。 27. “苹果酸/天冬氨酸穿梭”途径（MAS）广泛存在于动物细胞中，影响着细胞的能量代谢。MAS抑制剂抑制MAS途径进而抑制细胞增殖，为癌症的治疗提供了新思路。下表为研究MAS抑制剂对黑色素瘤细胞增殖影响的实验步骤和操作过程，请完成表格： 实验步骤 简要操作过程 配制动物细胞培养液 用蒸馏水、无机盐、葡萄糖、氨基酸及维生素等制备合成培养基，还需添加适量的（1）_____等天然成分，按配方经计算、称量、溶解等步骤配制动物细胞培养液 防止培养时杂菌污染 动物细胞培养液要添加适量的（2）_____ 配制不同浓度MAS抑制剂溶液 用（3）_____作溶剂，配制具有一定浓度梯度的MAS抑制剂溶液 （4）_____ 将黑色素瘤细胞接种到动物细胞培养液中，在适宜条件下培养，获取处于对数生长期的细胞 将细胞培养至分裂高峰 将培养瓶置于96孔培养板中培养24小时，水平晃动培养瓶，使（5）_____，再继续培养48小时 对照组处理 将黑色素瘤细胞适度稀释后接种到96孔培养板中，培养24h后观察到正常贴壁，弃去原培养液，加入新鲜培养液 实验组处理 （6）_____ 实验结果统计 在培养24、48和72h后，分别统计各组黑色素瘤细胞的增殖率 28. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_____。 （2）步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和_____才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在采用体外培养时，首先应保证其处于_____的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是_____与5%二氧化碳的混合气体。在使用合成培养基时通常需加入血清，血清的作用是_____。 （3）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。 ①单克隆抗体是ADC中的_____（填“a”或“b”）部分。单克隆抗体除了运载药物外，还有_____等作用。 ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致_____。 ③ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖于_____原理。 29. CRISPR/Ces9是一种高效的基因编辑技术，通过切割DNA双链以敲除目标基因或插入新的基因。科学家构建了如图所示的两种质粒，并包埋于脂质体中，然后将脂质体加入含受体细胞的培养皿中，实现了基因转移。回答下列问题： （1）研究发现CRISPR-Cas9系统广泛存在于细菌细胞内，类似限制酶，不会破坏自身DNA，原因：_____。CRISPR-Cas系统中Cas9蛋白具有内切酶活性，水解目标DNA的_____（填化学键）。 （2）实验中利用脂质体能实现基因转移的原理_____。24h后在培养皿中添加_____筛选并进行单细胞培养，经检测后即可得到基因编辑后的细胞。此过程须在37℃，气体环境为95%空气+5%CO2的装置中进行。 （3）转染好的细胞用裂解液消化后，使用RNA提取试剂盒提取总RNA，使用反转试剂盒进行逆转录，最终得到_____，再进行PCR。进行PCR时，a个双链DNA经过n轮扩增，理论上至少需要的引物数量为_____。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $