山西省朔州市怀仁市6月月考2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

**基本信息** 以发酵工程、细胞工程、基因工程为核心，通过荔枝酒制作、石油降解菌株分离等真实情境，考查高二生物核心知识与实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/48分|传统发酵与现代发酵工程差异（1）、动物细胞培养原理（3）、基因工程工具酶（10）|结合“当归补血汤”中药配方考查体细胞杂交（7），通过PCR定点突变技术流程图考查科学思维（14）| |非选择题|5题/52分|荔枝酒发酵条件（17）、石油降解菌分离计数（18）、白菜-甘蓝杂种植株培育（19）|以克隆高产奶牛（20）、siRNA抑制细胞凋亡（21）为情境，体现生命观念与探究实践，注重实验分析与技术应用|

生物参考答案 一、单选（每空3分，共48分） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 D C A C A B D B D B 题号 11 12 13 14 15 16 答案 C B B A B B 二、解答题（除标注外每空1分，共52分） 17．（除标注外每空1分，总计10分） (1)避免除去枝梗时引起荔枝破损，防止杂菌污染 砂糖浓度过高，微生物失水死亡 (2)陈米酒中的酵母菌/陈米酒 酒精发酵属于厌氧发酵 适合酵母菌发酵的温度为18～30℃（或为发酵提供较适宜的温度）（2分） (3)通氧、温度设置为30～35℃（2分） (4)减小 酸性重铬酸钾溶液 18．（除标注外每空1分，总计10分） (1)只有能降解石油的微生物能正常生长繁殖（2分） 选择 (2)溶解氧 营养物质 (3)稀释涂布平板 血细胞计数板（或特定的细菌计数板） (4) 104 1．7×109（2分） 19．（除标注外每空1分，总计11分） (1)纤维素酶、果胶酶（2分） 基因的选择性表达 (2)B (3)植物的组织培养 细胞的全能性 由于培养细胞一直处于分生状态，易受外界因素的影响而发生突变（2分） 茎尖 (4)克服远缘杂交不亲和的障碍（2分） 20．（除标注外每空1分，总计10分） (1)减数第二次分裂中期（或MⅡ期） 显微操作 维特培养液的pH（2分） (2)桑葚胚或囊胚 同期发情 将内细胞团均等分割（2分） 犊牛的线粒体基因来自普通奶牛；表现型也受环境的影响；犊牛发育过程中可能发生了变异（2分） 21．（除标注外每空1分，总计11分） (1) EcoRⅠ、PstⅠ EcoRⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、EcoRⅤ（2分） 磷酸二酯键 (2)显微注射法 转录 翻译（2分） (3)逆转录 序列2（2分） 详解 1．D 【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身； 2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。(1)如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；(2)如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。 3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件； 4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。 【详解】A、菌种差异、代谢特点会影响发酵产品的风味，不同菌种之间的种间关系会影响发酵食品的营养成分，主要取决于优势菌种，A正确； B、现代发酵工业大多采用好氧、液体、深层、分批及单一纯种发酵的方式组合进行，这样是发酵产物实现产业化，B正确； C、为获得优质的发酵产物，选育优质、高产的菌种是发酵工业的前提条件，C正确； D、如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来，D错误； 故选D。 2．C 【分析】谷氨酸棒状杆菌属于好氧型细菌，在谷氨酸发酵生产过程中，获得谷氨酸的条件是有氧、中性或弱碱性条件。 【详解】谷氨酸发酵生产所用的菌种是谷氨酸棒状杆菌，为需氧型，在中性或弱碱性条件下会积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺。C符合题意。 故选C。 3．A 【分析】动物细胞培养原理是细胞增殖；细胞全能性指已分化细胞仍具发育成完整个体的潜能；培养动物细胞需定期换液，目的是提供营养并清除代谢废物；动物细胞培养液要加动物血清，血清含细胞生长和增殖必需的营养、激素和生长因子；CO2可调节细胞培养液酸碱平衡，维持pH相对稳定。 【详解】A、动物细胞培养的原理是细胞增殖，而细胞的全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能，动物细胞培养并没有发育成完整个体，所以不是细胞全能性，A错误； B、细胞培养过程中会产生代谢废物等，会影响细胞的生长环境，所以需要定期更换培养液，以提供细胞所需营养物质并清除代谢废物，B正确； C、动物细胞培养液中需要添加一定量的动物血清，因为血清中含有多种维持细胞生长和增殖所必需的营养成分、激素和生长因子等，C正确； D、CO2可以参与细胞培养液中酸碱平衡的调节，其作用是维持细胞培养液pH的相对稳定，D正确。 故选A。 4．C 【分析】细胞融合，是在自发或人工诱导下，两个不同.基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备、膜蛋白的研究。 【详解】（1）化学试剂聚乙二醇(PEG)可以促进动物细胞融合，但聚乙二醇不属于有机 “溶剂”分子，它是“溶质”，（1）错误； （2）病毒可使细胞融合，包膜病毒为了侵染细胞，一般表面都有促进膜融合的蛋白，如灭活的仙台病毒常用于细胞融合，（2）正确； （3）电刺激法是通过对细胞施加电脉冲在细胞膜上形成瞬时可逆的穿孔促进细胞的融合，（3）正确； （4）反复冻融指的是将细胞在低温下冷冻，然后在室温中融化多次反复，达到细胞破碎的目的，（4）错误。 故选C。 5．A 【分析】单倍体育种是植物育种手段之一。即利用植物组织培养技术（如花药离体培养等）诱导产生单倍体植株，再通过某种手段使染色体组加倍（如用秋水仙素处理），从而使植物恢复正常染色体数。 【详解】A、小麦为六倍体（6n=42），其单倍体由配子发育而来，含3个染色体组（3n=21），A错误； B、花药离体培养需通过脱分化形成愈伤组织，再分化成完整植株，符合植物组织培养流程，B正确； C、秋水仙素通过抑制有丝分裂中纺锤体的形成，使染色体复制后无法分离，导致染色体数目加倍，C正确； D、单倍体育种直接获得纯合体，而杂交育种需多代筛选，前者显著缩短育种年限，D正确。 故选A。 6．B 【分析】题图表示的是植物体细胞杂交的过程，①表示用纤维素酶和果胶酶处理形成原生质体，②表示经过诱导融合后形成的原生质体，③表示再生出细胞壁的杂种细胞，然后通过植物组织培养将其培养形成植株，并在高盐环境下筛选耐盐的植株。 【详解】A、①表示用纤维素酶和果胶酶处理形成原生质体，A正确； B、②为经过诱导融合后形成的原生质体，原生质体融合的原理是细胞膜的流动性（依赖膜的流动性实现两个细胞的融合），B错误； C、过程③涉及 “杂种细胞培育为杂种植株”，植物体细胞杂交中，融合后的杂种细胞需通过植物组织培养技术（脱分化形成愈伤组织，再分化形成植株）培育为完整植株，C正确； D、高冰草具有耐盐特征，其基因组中可能含有多个耐盐基因。通过体细胞杂交，高冰草的全部遗传物质（包括多个耐盐基因）可转移到杂种细胞中，因此培育出的耐盐小麦可能获得多个耐盐基因，D正确。 故选B。 7．D 【详解】A、过程①为去除细胞壁获得原生质体，需用纤维素酶和果胶酶去除；胰蛋白酶用于动物细胞培养，分解细胞间的蛋白质，使动物细胞分散，A错误； B、过程④是脱分化，⑤是再分化，植物组织培养中，这两个阶段所需的植物激素（生长素、细胞分裂素）种类相同，但比例不同，B错误； C、植物体细胞杂交成功的标志是杂种植株再生出细胞壁，并最终培育成完整的杂种植株。仅形成杂种细胞不代表杂交成功，还需经过植物组织培养过程，C错误； D、过程②为原生质体融合。诱导原生质体融合的方法包括：物理法（离心、振动、电激）和化学法（聚乙二醇PEG、高Ca2+-高pH），D正确。 8．B 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理： 1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精； 2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同； 3、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、提取植物细胞DNA时加入纤维素酶研磨，水解破坏细胞壁，提取DNA的效果更佳，A正确； B、家兔是哺乳动物，成熟的红细胞没有细胞核，不可作为提取 DNA 的材料，B错误； C、二苯胺试剂容易与空气中的氧气反应导致变质，因此要现配现用，C正确； D、DNA在2mol/L汇的NaCl溶液中溶解度大， 故溶解白 色丝状物DNA时需要加入2mol/L的NaCI溶液，D正确。 故选B。 9．D 【分析】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。 蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）→最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。 【详解】A、将蛋白质第356位的丝氨酸替换为缬氨酸， 是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，属于蛋白质工程，A正确； B、蛋白质工程是对基因进行修饰改造或重新合成，然后进行表达，须构建重组DNA分子，B正确； C、该过程的实质是对脂肪酶基因在分子水平上进行改造，C正确； D、蛋白质工程不是直接对氨基酸进行替换，而是从预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）→最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成，D错误。 故选D。 10．B 【分析】DNA连接酶：（1）根据酶的来源不同分为两类：E. coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 【详解】A、限制酶可切割特定核苷酸序列之间的磷酸二酯键，A错误； B、限制酶的识别序列大多数是由6个核苷酸组成的，少数是由4个、8个或其他数量的核苷酸组成，B正确； C、限制酶、DNA连接酶和质粒是基因工程常用的工具，其中限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，C错误； D、E. coliDNA连接酶连接黏性末端较高，D错误。 故选B。 11．C 【分析】植物基因工程的主要应用包括培育抗性植物和改善植物品质，动物基因工程主要用于动物品质改造、生物反应器的建立以及器官移植，此外还可以用于基因工程药物的生产和基因治疗。 【详解】A、在医药卫生方面，运用基因工程主要用于生产药物，如获取白细胞介素和溶血栓剂，A正确； B、基因工程在农业上主要用于培育高产、稳定、品质优良和具有抗逆性的农作物，B正确； C、基因工程技术在畜牧业上的应用主要是能产生人们所需要的各种优良品质动物，如具有抗病能力、高产仔率、高产奶率和高质量皮毛等品质的动物，而不是要求动物的体型巨大，C错误； D、可利用转基因细菌降解有毒有害的化合物，处理工业废水等，保护环境， D正确。 故选C。 12．B 【分析】1、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 2、基因表达载体的构建：用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体链接形成重组DNA分子。 【详解】A、培育转基因动物成为乳腺生物反应器，除采用基因工程技术外，还需要细胞工程技术（动物细胞培养）和胚胎工程技术（胚胎移植），A错误； B、转入的目的基因在乳腺中可以高效表达，利用乳腺可以分泌乳汁的特性，受体动物进入泌乳期就能大量产生人的生长激素，B正确； C、将重组质粒导入动物受精卵，常用显微注射法，C错误； D、构建重组质粒需要将人的生长激素基因与只在乳腺中表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，D错误。 故选B。 13．B 【分析】DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液．利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA； DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂． 【详解】A、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液，利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA，A正确； B、向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无氧环境，不能创造无菌环境，B错误； C、利用鸡血或鸭血细胞进行DNA的粗提取和鉴定，C正确； D、筛选最适的杂交瘤细胞培养，可以获得单克隆抗体，D正确。 故选B。 14．A 【分析】PCR技术的全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。PCR技术的原理是DNA复制；条件包括：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。 【详解】A、据图可知，该技术需要使用四种引物，即引物1－引物4，而非四条引物（引物的数量随PCR扩增次数增加而增加），A错误； B、引物2和3中若存在互补配对片段，置于同一反应系统时它们会发生结合而失去作用，引物2和3的突起处代表与模板链不能互补的突变位点，B正确； C、利用引物1和2需要进行三次PCR才可得到DNA片段A（两端等长的DNA片段）：经过1次循环后产生的两个DNA分子都不等长，在第2轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，C正确； D、该技术是设计含有非特异性配对碱基的引物，再通过PCR将突变位点引入产物中，该技术具有突变回收率高、可在任何位点引入突变的优点，D正确。 故选A。 15．B 【详解】A、“信号肽”序列是一段DNA分子，其基本单位是脱氧核苷酸，A错误； B、该转基因水稻相当于杂合子，根据基因分离定律，其后代中不一定检测到CPTI基因，B正确； C、CPTI基因的修饰除了需要限制性内切酶，还需要DNA连接酶，C错误； D、豇豆CPTI基因的表达会促使水稻产生抗性，D错误。 故选B。 16．B 【分析】分析题图：过程①是逆转录，②是获取目的基因（CarE基因），③是将构建的基因表达载体导入受体细胞（大肠杆菌细胞），④是通过筛选获得工程菌。 【详解】A、过程①表示通过逆转录合成相应的DNA，该过程是在生物体外进行的，不是在小菜蛾细胞的细胞核中进行的，A错误； B、过程②获取的CarE基因是以mRNA为模板通过逆转录合成的，因此CarE基因中不含有启动子和终止子，B正确； C、重组DNA技术的核心是构建含CarE基因的重组表达载体，C 错误； D、重组表达载体的制备过程中，需要限制酶切割含有CarE基因的DNA片段与载体，然后用DNA连接酶将CarE基因片段拼接到载体的切口处，D错误。 故选B。 17．(1) 避免除去枝梗时引起荔枝破损，防止杂菌污染 砂糖浓度过高，微生物失水死亡 (2) 陈米酒中的酵母菌/陈米酒 酒精发酵属于厌氧发酵 适合酵母菌发酵的温度为18～30℃（或为发酵提供较适宜的温度） (3)通氧、温度设置为30～35℃ (4) 减小 酸性重铬酸钾溶液 【分析】果酒的制作，选用的菌种为兼性厌氧型的酵母菌。酒精发酵是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，需要隔绝空气营造无氧环境，发酵温度是18～30℃。果醋的制作，需将培养温度控制在30～35℃范围内，使用的醋酸菌是一种好氧菌，当氧气、糖源都充足时能将糖分解成醋酸；当缺少糖源时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】（1）制作荔枝酒时，为了防止杂菌污染，避免因除去枝梗时引起荔枝的破损而增加被杂菌污染的机会，在制作过程中应先进行冲洗、后去除荔枝枝梗。酿制荔枝酒，选用的菌种主要是酵母菌。若向荔枝汁中加入的砂糖过多而使荔枝汁的浓度过高，则会导致微生物因细胞失水过多而死亡，所有不能达到“增加菌种数量”的预期目标。 （2）由题意“加入陈米酒”可知：该荔枝酒的菌种来源于陈米酒中的酵母菌（或陈米酒）。酵母菌在无氧条件下进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，由此可见，酒精发酵属于厌氧发酵，所以发酵装置需密封。因适合酵母菌发酵的温度为18～30℃，所以需要将发酵装置放于阴凉处，以便为发酵提供较适宜的温度。 （3）制作荔枝酒时，酒精发酵是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，需要隔绝空气营造无氧环境，发酵温度是18～30℃；制作荔枝醋，使用的醋酸菌是一种好氧菌，需将培养温度控制在30～35℃范围内。如果利用荔枝酒制作荔枝醋，需要改变的操作是：通氧、温度设置为30～35℃。 （4）荔枝酒制作过程中，酵母菌进行细胞呼吸产生的二氧化碳会溶解在发酵液中，导致发酵液的pH减小。橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应变成灰绿色，因此检测酒精的试剂是酸性重铬酸钾溶液。 18．(1) 只有能降解石油的微生物能正常生长繁殖 选择 (2) 溶解氧 营养物质 (3) 稀释涂布平板 血细胞计数板（或特定的细菌计数板） (4) 104 1．7×109 【分析】分析题图：图示是探索石油降解机制的实验过程，图甲中，首先用选择培养基从土壤中筛选菌种，再采用平板划线法分离出相应的菌种；图乙中：乙图用于测定石油降解率。生物的各种培养基配方一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养。 【详解】（1）选择培养基只允许特定种类的微生物生长，又要抑制或阻止其他种类微生物生长，因而必须以石油为唯一碳源只让目的菌株生存繁殖；这种培养基属于选择培养基； （2）振荡培养可以增加液体培养基的溶解氧的含量，促进好氧型微生物的生长；同时还能使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率； （3）图中检测土样中细菌含量采用的接种方法是稀释涂布平板法。若要测定培养液中微生物的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板（或特定的细菌计数板）直接计数； （4）丙图中10g土样加入无菌水定容至100mL，稀释了10倍，取1mL加入1号试管（含有9mL无菌水）又稀释了10倍，取1mL加入2号试管（含有9mL无菌水）又稀释了10倍，取1mL加入3号试管（含有9mL无菌水）又稀释了10倍，因此丙图中3号试管中样品液的稀释倍数为104倍；5号试管稀释了106倍，所以每克土壤中的活菌数为（168+175+167）÷3÷0.1×106=1．7×109。 【点睛】本题结合探究实验过程，考查微生物的培养和分离、探究实验等知识，要求考生识记培养基的成分、种类及作用﹔掌握分离微生物常用的两种方法及操作过程;掌握探究实验的原则，能结合图中信息知识答题是解答本题的关键。 19．(1) 纤维素酶、果胶酶 基因的选择性表达 (2)B (3) 植物的组织培养 细胞的全能性 由于培养细胞一直处于分生状态，易受外界因素的影响而发生突变 茎尖 (4)克服远缘杂交不亲和的障碍 【分析】1、图中A、B分别是表示原生质体A和原生质体B，C是原生质体融合，D是杂种植物细胞，E是愈伤组织，F是完整的杂种植株，C-D是再生细胞壁过程，D-E过程是脱分化过程，E-F过程是再分化过程。 2、去细胞壁的方法：酶解法，即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁．杂种原生质体再生出新的细胞壁标志着体细胞融合已经完成，此过程与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破． 【详解】（1）去细胞壁的常用方法是酶解法，即在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；“白菜—甘蓝”杂种植株具有白菜和甘蓝两种生物的全套遗传物质，通过基因的选择性表达，使杂种植物具有相应的生物性状。 （2）细胞质的流动是活细胞都具有的特征，因此获得原生质体后，需对其进行活力检查，最合适的检测实验是观察细胞质的流动，故选B。 （3）将离体的杂种细胞培育成杂种植株需要采用植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞具有全能性；由于培养细胞一直处于分生状态，易受外界因素的影响而发生突变，突变率增大，故在此过程中若进行诱变育种，易获得对人们有用的突变体；由于植物分生区附近（茎尖）病毒极少，甚至无病毒，故培育脱毒苗时，一般选取茎尖（或芽尖或根尖）作为材料进行培养。 （4）植物体细胞杂交技术能克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，故植物体细胞杂交技术在育种上具有重要意义。 【点睛】本题结合植物体细胞杂交过程示意图，考查植物体细胞杂交和单克隆抗体制备的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交的原理、具体过程及意义；识记单克隆抗体制备的原理及具体过程，能准确判断图中各步骤的名称，再结合所学的知识答题。 20．(1) 减数第二次分裂中期（或MⅡ期） 显微操作 维特培养液的pH (2) 桑葚胚或囊胚 同期发情 将内细胞团均等分割 犊牛的线粒体基因来自普通奶牛；表现型也受环境的影响；犊牛发育过程中可能发生了变异 【分析】将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】（1）动物细胞核移植时，应选用处于减数第二次分裂中期的细胞，因为处于减数第二次分裂的次级卵母细胞体积较大，便于操作，并且其中含有易于激发细胞核全能性体现的物质，因此过程①应选用处于减数分裂Ⅱ中期(或MⅡ期)的卵母细胞；减数分裂Ⅱ中期（MI期)卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，采用显微操作法去“核”；过程②③中所需气体主要有O₂和CO₂，其中二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH。 （2）胚胎移植的时期通常是桑葚胚或囊胚期；移植之前，需要对受体母牛进行同期发情处理，以使供受体处于相同的生理状态；由于内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，故对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割；由于犊牛的线粒体基因来自普通奶牛；表现型也受环境的影响；犊牛发育过程中可能发生了变异，故犊牛的表现型不完全与高产奶牛一致。 21．(1) EcoRⅠ、PstⅠ EcoRⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、EcoRⅤ 磷酸二酯键 (2) 显微注射法 转录 翻译 (3) 逆转录 序列2 【分析】基因工程的基本操作步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、 DNA 连接酶、运载体。 【详解】（1）限制酶EcoRⅠ和PstⅠ切割形成的是黏性末端，限制酶SmaⅠ和EcoRⅤ切割形成的是平末端，E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都能连接黏性末端，另外T4DNA连接酶还可以连接平末端，因此图中EcoRⅠ和PstⅠ切割后的DNA片段（具有黏性末端）可以用E.coliDNA连接酶连接，EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ和EcoRⅤ切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接。DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成磷酸二酯键。 （2）将重组质粒导入动物细胞常采用显微注射法，步骤④以DNA为模板合成RNA，为转录过程。mRNA是翻译的模板，据图1可知，基因沉默复合物作用于Caspase8 mRNA，抑制了基因表达的翻译过程，使Caspase8基因沉默。 （3）测定mRNA含量时，需提取细胞总RNA，经过逆转录过程得到cDNA，再进行PCR扩增，通过PCR产物的量间接反映细胞中相关基因的mRNA含量；据图3可知，在序列2作用下，PCR产物量最少，推测Caspase8的mRNA含量最低，表明其抑制效果最好，是最优序列。 学科网（北京）股份有限公司 $ ( ) 怀仁大地高中学校2025-2026学年下学期第二次月考 ( 贴条形码区 ) ( 姓 名 ________________ )高二生物·答题卡 ( 班 级 ) ( ________________ ) ( 注意事项 1．答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真检查监考员所粘贴的条形码。 2 ．请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 3 ．保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 4 ．正确填涂 ， 错误填涂 [ × ] [ √ ] [／] ) ( 选择题 （用2B铅笔填涂） ) ( 选择题（ 48分 ） ) ( 1 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 2 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 3 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 4 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 5 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 6 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 7 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 8 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 9 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 10 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 1 1 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 1 2 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 1 3 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 1 4 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 1 5 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 16 [ A ] [ B ] [ C ] [ D ] ) ( 选择题 （用2B铅笔填涂） ) ( 非选择题 （用0.5毫米的黑色墨水签字笔书写） ) ( 17 . （10分，除标注外，每空1分） （1） （2） （2分） （3） （2分） （4） ) ( 非选择题（共 55分 ） ) ( 请在各题目的答题区域内作答，超出 答题 区域的答案无效 ) ( 18. （10分，除标注外，每空1分） （ 1 ） （2分） （2） （3） （4） （2分） ) ( 请在各题目的答题区域内作答，超出 答题 区域的答案无效 ) ( 20. （10分，除标注外， 每空1分 ） （1） （2分） （2） （2分） （2分） ) ( 21. （11分，除标注外， 每空1分 ） （ 1 ） （2分） （2） （2分） （3） （2分） ) ( 19 . （ 11分，除标注外，每空1分 ） （1） （2分） （2） （3） （2分） （4） （2分） ) ( 请在各题目的答题区域内作答，超出 答题 区域的答案无效 ) 生物 第2页（共2页） 生物 第1页（共2页） 学科网（北京）股份有限公司 $ 绝密★启用前 怀仁大地高中学校2025-2026学年下学期第二次月考 高二生物 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名． 准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．考试结束后，将答题卡交回。 第Ⅰ卷 一． 选择题：本题共16个小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的 1．以下关于传统发酵与现代发酵工程的说法中，错误的是（    ） A．影响传统发酵食品风味的因素包括菌种差异、代谢特点以及种间关系 B．现代发酵工业大多采用好氧、液体、深层、分批及单一纯种发酵的方式组合进行 C．选育优质、高产的菌种是发酵工业的前提条件 D．如果发酵产品是微生物菌体，则可以采用吸附发酵进行产品的分离与提纯 2．谷氨酸发酵生产过程中，获得谷氨酸的条件是（    ） A．无氧、酸性条件 B．有氧、酸性条件 C．有氧、中性或弱碱性条件 D．无氧、中性或弱碱性条件 3．下列与动物细胞培养相关的叙述不正确的是（    ） A．动物细胞培养的原理是细胞的全能性 B．动物细胞培养过程中需定期更换培养液 C．动物细胞培养液中需要添加一定量的动物血清 D．CO2的作用是维持细胞培养液pH的相对稳定 4．可以诱导动物细胞融合的方法有（    ） （1）加有机溶剂    （2）使用病毒    （3）使用电刺激    （4）反复冻融 A．（1）（2） B．（3）（4） C．（2）（3） D．（2）（4） 5．我国科学家利用小麦（6n=42）花药离体培养获得单倍体植株，再经秋水仙素处理培育出抗病高产新品种。下列叙述错误的是（    ） A．单倍体植株的细胞中仅含1个染色体组 B．获得单倍体植株过程需脱分化和再分化 C．秋水仙素抑制纺锤体形成，使染色体数目加倍 D．与杂交育种相比，该方法可明显缩短育种年限 6．小麦抗盐能力较弱，高冰草具有耐盐特征。科研人员通过图示方法培育高产、耐盐小麦新品系。下列分析不正确的是（    ） A．①过程需使用纤维素酶和果胶酶 B．实现过程②不依赖膜的流动性 C．③过程需要借助组织培养技术 D．耐盐小麦可能获得多个耐盐基因 7．“当归补血汤”是出自《内外伤辨惑论》的中药配方，主要组成中药是当归和黄芪，具有一定的补气生血的功效。科研人员想利用现代生物技术将当归与黄芪进行体细胞杂交，培育过程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．过程①需要用纤维素酶或胰蛋白酶处理获得原生质体 B．过程④和⑤的培养基中植物激素的种类和比例相同 C．过程③结束后，形成杂种细胞代表植物体细胞杂交成功 D．过程②可以用聚乙二醇或高Ca2+-高pH溶液诱导融合 8．下列关于 DNA 的粗提取与鉴定实验，说法错误的是（    ） A．提取植物细胞DNA时加入纤维素酶研磨，提取的效果更佳 B．猪肝、草莓、家兔的血细胞均可作为提取 DNA 的材料 C．为了本实验的鉴定效果，所用的二苯胺试剂必须现配现用 D．将粗提取的DNA(白色丝状物) 溶解在2mol/L 的NaCl溶液中用来进行鉴定 9．Kampen等科学家为研究脂肪酶突变体对底物专一性的影响，将其蛋白质第356位的丝氨酸替换为缬氨酸，发现其活性降低为原来的1/12，下列叙述错误的是（　　） A．上述过程属于蛋白质工程 B．蛋白质工程需要构建重组DNA分子 C．该过程的实质是对脂肪酶基因在分子水平上进行改造 D．常用化学方法直接将脂肪酶第356位的丝氨酸替换为缬氨酸 10．下列关于基因工程工具酶的叙述，正确的是（    ） A．限制酶可切割特定核苷酸序列之间的氢键 B．大多限制酶的识别序列由6个核苷酸组成 C．DNA聚合酶和DNA连接酶都是构建重组DNA分子的关键酶 D．E.coli DNA连接酶连接平末端的效率较高 11．下列关于基因工程应用的概述错误的是     A．在医药卫生方面，运用基因工程获取白细胞介素和溶血栓剂 B．在农业上主要是培育高产、稳定、品质优良和具有抗性的农作物 C．在畜牧业上主要是培育体型巨大的动物 D．在环境保护方面，可利用转基因细菌降解有毒有害的化合物，处理工业废水等 12．动物基因工程可利用基因工程技术使哺乳动物成为乳腺生物反应器，以生产所需要的药品，如利用转基因动物生产人的生长激素。科学家培养转基因动物成为乳腺生物反应器时，下列说法正确的是（    ） A．仅仅利用了基因工程一项现代生物技术 B．需要进入泌乳期才能成为“批量生产药物的工厂” C．利用农杆菌转化法将人的生长激素基因导入受精卵中 D．构建基因表达载体时可以用血清蛋白基因的启动子 13．下列实验操作不能达到实验目的的是（    ） A．利用不同物质在酒精溶液中的溶解度差异粗提DNA B．向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无菌环境 C．利用鸡血或鸭血细胞进行DNA的粗提取和鉴定 D．筛选最适的杂交瘤细胞培养，获得单克隆抗体 14．PCR定点突变技术是最常用的基因定点突变技术，通过设计含有非特异性配对碱基的引物，再通过PCR将突变位点引入产物中。右图是PCR定点突变技术流程图，据图分析错误的是（    ） A．该技术需要使用四条引物 B．引物2和3的突起处代表与模板链不能互补的突变位点 C．利用引物1和2需要进行2次PCR可得到DNA片段A D．该技术具有突变回收率高、可在任何位点引入突变的优点 15．豇豆对多种害虫具有抗虫能力，根本原因是豇豆体内具有胰蛋白酶抑制剂基因（CPTI基因）．科学家将其转移到水稻体内后，却发现抗虫效果不佳，主要原因是CPTI蛋白质的积累量不足．经过在体外对CPTI基因进行了如图所示的修饰后，CPTI蛋白质在水稻中的积累量就得到了提高．下列分析合理的是（ ） A．“信号肽”序列的基本单位是氨基酸 B．该转基因水稻的后代中不一定检测到CPTI基因 C．CPTI基因的修饰只需限制性内切酶 D．水稻CPTI基因的表达会促使害虫产生抗性 16．下图是利用DNA重组技术生产能降解农药马拉硫磷的CarE制剂的流程。下列叙述正确的是（　　） A．过程①是在小菜蛾细胞的细胞核中进行的 B．过程②获取的CarE基因中不含有启动子和终止子 C．重组DNA技术的核心是将CarE基因导入受体细胞 D．重组表达载体的制备过程中需要限制酶和DNA聚合酶 第Ⅱ卷 二．非选择题：本大题共5个小题，共52分。 17．（10分）荔枝酒营养丰富，具有益气健脾、养血益肝等功效，其制作方法如下：首先将鲜荔枝冲洗、沥干、剥皮、去核、榨汁，然后将荔枝汁置于容器中，加入陈米酒，放于阴凉处，密封、浸泡7天后即成。回答下列问题： (1)制作过程中先进行冲洗、后去除荔枝枝梗，其原因是___________。有同学为增加菌种数量，向荔枝汁中加入砂糖，但没有达到预期目标，原因可能是___________。 (2)该荔枝酒的菌种来源于_________，发酵装置需密封的原因是_________，放于阴凉处发酵的原因是________。 (3)有同学欲利用荔枝酒制作荔枝醋，需要改变的操作是___________。 (4)荔枝酒制作过程中，发酵液的pH___________（填“增大”或“减小”），检测酒精的试剂是_________。 18．（10分）研究发现，土壤中某种微生物能降解石油。分离降解石油的菌株和探索其降解机制的实验过程如图所示。回答下列问题： (1)该实验所用的振荡培养的培养基只能以石油作为唯一碳源，其原因是_________________，这种培养基属于________培养基。 (2)振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，原因是振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。 (3)若要测定活菌数量，可选用______________法进行计数；若要测定培养液中微生物的菌体数，可在显微镜下用____________________直接计数。 (4)丙图中3号试管中样品液的稀释倍数为_______倍，5号试管的结果表明每克土壤中的活菌数为___________。 19．（11分）科学家利用细胞工程培育了“白菜—甘蓝”杂种植株，如下图所示，请根据图回答下列问题： (1)图中A、B的制备，需要去除细胞壁，此时要用到________________________酶；从本质上讲，“白菜—甘蓝”杂种植株具有的各种性状是____________________的结果。 (2)获得原生质体后，需要对其活力进行检查，下列 实验最合适。 A．观察原生质体的结构 B．观察细胞质的流动 C．观察细胞有丝分裂 D．质壁分离及其复原实验 (3)在利用杂种细胞培育成杂种植株的过程中，用到的技术手段是_______________，依据的原理是___________________；在此过程中若进行诱变育种，易获得对人们有用的突变体，原因是______________；如利用此技术培养脱毒苗，则可采用____________________作为材料进行培养。 (4)植物体细胞杂交技术在育种上有何重要意义？___________________。 20．（10分）利用体细胞核移植来克隆高产奶牛的大致流程如下图，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶。回答下列问题： (1)过程①应选用处于____的卵母细胞，可采用____法去核。在过程②③中所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是____。 (2)重构细胞经分裂、发育至____时期，可移植到受体母牛子宫中。移植之前，需要对受体母牛进行____处理。若要获得遗传性状完全相同的多只犊牛，可对囊胚阶段的胚胎进行分割，操作时要注意____，分割后进行移植。犊牛的表现型不完全与高产奶牛一致，原因可能是____（答2点）。 21．（11分）心脏移植是挽救终末期心脏病患者生命唯一有效的手段，然而心脏移植过程中会发生缺血再灌注损伤（IRI），可能导致心脏坏死。研究发现，IRI通过促进Caspase 8等一系列凋亡基因的表达，导致细胞凋亡最终引起器官损伤。根据Caspase 8基因合成的小干扰RNA（siRNA）可以使Caspase 8基因沉默，有效抑制IRI所致的器官损伤。图1是利用猪的心肌细胞开展siRNA作用研究的示意图，图2是此研究可能用到的4种限制酶及其切割位点，回答下列问题： (1)图1中步骤②构建重组质粒需要使用多种工具酶。常用的DNA连接酶有E.coli DNA连接酶和T4DNA连接酶，图2中_____酶切割后的DNA片段可以用E.coli DNA连接酶连接，图中_____酶切割后的DNA片段可以用T4 DNA连接酶连接。DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是_____。 (2)图1中步骤③将重组质粒导入猪的心肌细胞最常用的方法是_____。siRNA对应DNA序列在心肌细胞中表达产生siRNA的步骤④称为_____。siRNA与RISC组装形成基因沉默复合物，通过抑制基因表达的_____过程，使Caspase 8基因沉默，从而降低IRI引起的细胞凋亡。 (3)研究人员根据Caspase 8基因的碱基序列，设计了三种序列分别导入猪的心肌细胞，通过测定靶基因Caspase 8的mRNA含量来确定最优序列。测定mRNA含量时，需提取心肌细胞的总RNA，经过_____过程得到cDNA，再进行PCR扩增，测定PCR产物量，结果如图3所示，据此判断最优序列是_____。 生物试题 第3页（共4页） 生物试题 第4页（共4页） 学科网（北京）股份有限公司 $