河北省衡水市枣强中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

高二年级下学期期末一考试生物学学科试题 9 命题要素一贤表 注： 1.能力要求： I.理解能力Ⅱ.实验与探究能力 Ⅲ，获取信息的能力Ⅳ，综合运用能力 2.核心素养： ①生命观念 ②理性思维③科学探究 ④社会责任 双 知识点 能力要求 核心素养 预估难度 题号 题型 值 (主题内容) ①②③ ④ 档次 系数 1 选择题 1 传统发酵技术的应用综合 易 0.95 2 选择题 1 发酵工程的基本环节 易 0.85 选择题 1 植物细胞培养 易 0.95 选择题 植物组织培养技术综合 易 0.90 选择题 动物细胞培养技术 中 0.65 动物细胞融合与单克隆抗体的 6 选择题 1 中 0.65 制备 7 选择题 1 动物细胞工程 易 0.90 8 选择题 1 动物的体外受精 中 0.65 选择题 1 DNA重组技术的基本工具 易 0.95 10 选择题 1 筛选、获取合适的目的基因 0.85 11 选择题 将目的基因导入受体细胞 易 0.85 12 选择题 限制酶 中 0.65 13 选择题 1 DNA的粗提取及鉴定 易 0.85 14 选择题 转基因生物安全性 易 0.85 15 选择题 1 生物技术中的伦理问题 中 0.65 16 选择题 2 泡菜的腌制 易 0.85 17 选择题 2 动物细胞培养技术 中 0.65 18 选择题 2 精子和卵子的发生、体内受精 易 0.90 19 选择题 2 目的基因的检测与鉴定 易 0.85 20 选择题 2 PCR扩增的原理与过程 中 0.65 21 选择题 2 电泳鉴定 中 0.65 22 选择题 2 禁止生物武器 易 0.85 23 选择题 2 蛋白质工程原理及操作流程 中 0.65 1 扫描全能王 (生物学) 24 选择题 PCR扩增的原理与过程 易 0.85 25 选择题 2 植物体细胞杂交技术 中 0.65 26 选择题 3 其他微生物的分离与计数 中 0.55 27 选择题 3 胚胎工程 的 0.55 28 选择题 3 反向PCR 中 0.55 29 选择题 3 影响植物组织培养的因素 中 0.45 30 选择题 抗体一药物偶联物 中 0.55 31 非选择题 12 微生物培养计数 易 0.85 32 非选择题 12 核移植技术 / / 易 0.75 33 非选择题 16 基因工程 中 0.50 34 非选择题 10 蛋白质工程 易 0.75 ·2· cS扫描全能王 参考答案及解析 ·高二生物学· 参考答案及解析 高二生物学 一、单项选择题 次生代谢物的总产量，D错误。 1.D【解析】传统发酵通常利用自然环境中的混合茵 :4.B【解析】单倍体玉米的培育需要进行花药离体培 种，发酵形式以固体发酵及半固体发酵为主，A正确； 养，将离体的花粉（雄配子）培育为单倍体植株，属于 制作腐乳时，毛霉等微生物产生的蛋白酶可将豆腐中 植物组织培养技术的应用，A不符合题意；嫁接是将 的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，是腐乳风味形成 植物的接穗（芽/枝）接到砧木上，依靠接穗和砧木的 的重要原因，B正确；泡菜腌制的原理是乳酸菌在无 愈合形成完整植株，属于无性生殖中的营养生殖，未 氧条件下进行乳酸发酵，产生乳酸使泡菜具有独特风 经过离体组织/细胞培养发育为植株的过程，不涉及 味，C正确；醋酸菌是好氧细菌，制作果醋需要在有氧 植物组织培养技术，B符合题意；香蕉脱毒苗是利用 条件下才能将糖或乙醇转化为乙酸，无氧条件下醋酸 几乎不带病毒的香蕉茎尖等分生区细胞进行植物组 菌代谢受抑制甚至死亡，无法产生乙酸，D错误。 织培养获得的，培育过程涉及植物组织培养技术，C 2.B【解析】大麦发芽过程中，胚产生的赤霉素可诱导 不符合题意；基因工程培育抗虫棉时，将成功导入目 糊粉层细胞合成α淀粉酶，A正确；焙烤的目的是杀 的基因的棉花受体细胞培育为完整的抗虫棉植株，需 死大麦种子的胚，避免胚继续发芽消耗营养物质，同 要利用植物组织培养技术，D不符合题意。 时需要保留α淀粉酶的活性，若进行高温灭菌会导致 5.B【解析】该技术仅实现胚胎一母体双向通讯，未培 α淀粉酶变性失活，影响后续糖化过程，因此焙烤不 育出完整个体，无法体现细胞全能性，A错误：动物细 属于灭菌操作，B错误；通过基因工程改造的啤酒酵 胞培养时需要提供5%左右的CO2,作用是维持培养 母可获得发酵效率更高、耐酒精能力更强等优良性 液的pH稳定，该共培养系统属于动物细胞培养范 状，能够加速发酵过程，缩短发酵周期，C正确：糖化 畴，需要提供CO2,B正确；该技术仅模拟体内胚胎着 工序中，利用种子产生的α淀粉酶将淀粉分解为麦芽 床的微环境，未对胚胎的遗传物质进行修饰，不会改 糖等可发酵糖，为后续酵母菌发酵提供底物，D正确。 变胚胎的遗传特性，C错误；胚胎一母体的双向通讯 3.A【解析】植物细胞培养技术是在无菌、人工控制的 是通过细胞间的信号分子识别、信息传递实现的，不 环境条件下进行的，因此通过图中过程生产雪莲次生 会发生细胞融合现象，D错误。 代谢物儿乎不受季节和天气等自然条件的限制，A正： 6.B【解析】原生质体无细胞壁保护，若在低渗溶液中 确；细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有 会大量吸水涨破，应在等渗或略高渗溶液中保存，A 产生完整有机体或分化为其他各种细胞的潜能和特 错误：诱导动物细胞融合的方法包含灭活病毒诱导 性。利用雪莲茎尖获得雪莲次生代谢物的过程中，并 法，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合属于动物细胞融 没有发育成完整的个体，所以没有体现细胞的全能 合，可利用灭活病毒诱导，B正确；正常动物细胞体外 性，B错误；①为愈伤组织，它是一种未分化的细胞 培养时，大多数具有贴壁生长的特点，但并非所有细 团，细胞内无叶绿体，即使在适当条件下给予适宜光 胞都如此，如淋巴细胞可悬浮生长，“都具有”表述绝 照，也不能进行光合作用，C错误；植物细胞培养技术 对，C错误；动物克隆过程中，核移植的受体细胞通常 是通过大量培养植物细胞来获得次生代谢物，提高了 是去核的减数第二次分裂中期的卵母细胞，其细胞质 扫描全能王 ·高二生物学· 参考答案及解析 含有诱导细胞核全能性表达的物质，并非卵原细胞， 获取目的基因的常用方法包括人工合成法、从构建 D错误。 的基因文库或cDNA文库中获取等，B正确；基因序 7,C【解析】核移植技术中，将供体细胞核与受体卵细 列数据库存储了大量已知基因的序列信息，可帮助 胞融合时，可采用电融合法等物理方法促使细胞融 研究者更高效筛选、定位所需目的基因，为找到合适 合，A正确：体外受精技术搭配胚胎移植，可大幅缩短 的目的基因提供更多机会，C正确：PCR扩增目的基 良种家畜的繁殖周期，充分发挥良种家畜的繁殖潜 因时，模板DNA会随扩增次数增加呈指数式增多， 力，实现良种快速繁殖，B正确；若a为核移植，发育 只有引物会在反应过程中不断被消耗而数量减少， 成个体仅证明动物细胞核具有全能性；若b为体外受 D错误。 精、c为胚胎分割，发育成个体是受精卵或分割后的 11,D【解析】农杆菌转化法是将目的基因导入双子叶 胚胎正常发育的结果，不能证明动物细胞具有全能 植物细胞的常用方法，棉花属于双子叶植物，可通过 性，C错误：进行胚胎分割时，囊胚的内细胞团需均等 该方法导入目的基因，A正确：显微注射法是将目的 分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和后续发育，D 基因导入动物细胞的专用方法，小鼠受精卵作为动 正确。 物受体细胞，常用该方法完成目的基因导入，B正 8.C【解析】人工授精过程中，精子需要进行获能处理 确；将目的基因导入原核微生物细胞时，常用Ca2 才能具备受精能力，是有性生殖胚胎操作的必要步 处理法使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中 骤，A不符合题意；为了获得更多的卵母细胞，通常会 DNA分子的状态，提高其吸收外源DNA的能力，C 对雌性个体进行超数排卵处理，提高繁殖效率，B不 正确；花粉管通道法是导入植物细胞的特有方法，酵 符合题意；卵母细胞去核是核移植（克隆动物）技术的 母菌不属于植物细胞，不能用该方法导入目的基因， 特有操作步骤，本过程为精卵结合的有性杂交，不需 D错误。 要进行核移植，因此无需对卵母细胞去核，C符合题 12.C【解析】限制酶的化学本质是蛋白质，酶的活性 意；早期胚胎需经检查筛选出发育正常的个体，再移 受温度、pH等外界环境因素的影响，A错误；限制 植到受体母鹿子宫内完成后续发育，这是胚胎工程培 酶的作用是切割DNA分子中的磷酸二酯键，不破 育动物的必要步骤，D不符合题意。 坏碱基对之间的氢键，B错误；该限制酶的切割位点 9.B【解析】限制酶大多特异性识别6个核苷酸的序 位于识别序列的中轴线处，切割后DNA两条链的 列，但也存在识别4个、5个或8个核苷酸序列的限 末端没有单链突出，形成平末端，C正确；沙雷氏菌 制酶，A错误；限制酶的作用是切割DNA分子特定 自身的DNA分子中该限制酶的识别序列会经过甲 部位的磷酸二酯键，因此处理目的基因和载体的过程 基化等修饰，不会被自身的SmaI切割破坏，D 必然涉及磷酸二酯键的断裂，B正确；酶的专一性是 错误。 指酶可催化一种或一类化学反应，T4DNA连接酶连 13.C【解析】新鲜洋葱、猪肝细胞中DNA含量丰富， 接黏性末端或平末端，本质都是催化DNA片段间磷 适合作为DNA粗提取的实验材料，A正确；预冷的 酸二酯键的形成，仍具有专一性，C错误；DNA连接 体积分数为95%酒精可降低DNA溶解度，还能抑 酶的功能是连接两个DNA片段形成磷酸二酯键，不 制核酸酶活性减少DNA降解，能加快DNA析出、 需要模板，以DNA一条链为模板连接单个脱氧核苷 提高DNA纯度，B正确；DNA在0.14mol/L NaCl 酸是DNA聚合酶的功能，D错误。 溶液中溶解度最低，在2mol/L NaCl溶液中溶解度 10.D【解析】目的基因主要指编码蛋白质的结构基 很高，C错误；DNA鉴定遵循对照原则，实验组（含 因，也可以是具有调控作用的非编码序列，A正确： DNA的溶液)和对照组（不含DNA的空白溶液）都 ·2· 扫描全能王 参考答案及解析 ·高二生物学· 需加入二苯胺试剂并沸水浴加热，通过颜色对比验 载体表面繁殖到单层后就会因接触抑制而停止增 证DNA的显色反应，D正确 殖，无法形成多层，B错误；动物细胞培养时需要O 14.B【解析】合法上市的转基因食品均经过严格的安 进行细胞呼吸，也需要CO2来维持培养液的pH稳 全性评估，目前没有科学证据证明其对人体有害，应 定，C错误；当悬浮培养系统中的细胞传代培养时， 理性看待转基因技术，不能盲目禁止食用，A错误； 可用胰蛋白酶处理，胰蛋白酶使它们分散成单个细 我国对克隆技术的管理原则为禁止生殖性克隆人， 胞，使细胞从微载体上脱离下来，便于传代培养，D 坚持“不赞成、不允许、不支持、不接受”任何生殖性 正确。 克隆人实验，但允许开展治疗性克隆研究用于疾病 18.A【解析】过程②常用显微操作去核，A正确；使用 治疗等医疗用途，B正确：设计试管婴儿若用于定制 外源促性腺激素诱发牦牛a进行超数排卵，B错误； “完美婴儿”会严重违背伦理道德，存在巨大伦理风 重构胚通常培养至桑葚胚或囊胚阶段，再进行胚胎 险，我国仅允许用于救治患病子女等特殊医疗场景 移植，C错误；后代e是体外受精的产物，遗传物质 的设计试管婴儿，且有严格审批流程，禁止推广用于 来自牦牛a(母本)和牦牛b(父本)：后代f的核遗传 非医疗用途，C错误；我国明确禁止研发、使用任何 物质来自牦牛c,细胞质遗传物质来自牦牛a,D 形式的生物武器，D错误。 错误。 15,C【解析】我国明确禁止非医疗目的的胚胎性别鉴 19.D【解析】基因表达载体包括启动子、终止子、标记 定，使用该技术调控人群性别比例会造成性别比例 基因及目的基因等，起始密码子位于RNA上，不 失衡，引发严重社会问题，因此应禁止该行为，A正 属于载体结构，A错误：构建重组质粒需限制酶切 确；非医疗目的的胚胎筛选会引发基因歧视、公平性 割、DNA连接酶连接，B错误；基因工程的核心是构 失衡等问题，违背生命伦理的基本规范，B正确：胚 建基因表达载体，而非将基因导入受体细胞，C错 胎筛选必须严格符合国家法律法规和伦理规范，仅 误；抗冻性状的出现表明afp基因成功导入并在番 可用于医疗目的（如排查严重遗传病），并非父母双 茄细胞内表达，D正确。 方知情同意就可开展，尤其是非医疗目的的筛选是 20.A【解析】PCR所用的Tag DNA聚合酶是从嗜热 被明令禁止的，C错误；人体的性状不仅受基因控制 菌中分离出的耐高温的DNA聚合酶，Mg2+能够激 还受环境影响，且多基因调控的性状表达更复杂，因 活DNA聚合酶，A正确；细胞内DNA复制的引物 此胚胎筛选存在不确定性，D正确 为RNA,但PCR技术中所用引物是人工合成的单 16.C【解析】亚硝酸盐含量过高不利于身体健康，泡 链DNA片段，并非RNA,引物与模板的互补特异性 菜发酵过程中亚硝酸盐的含量会先升高后降低，可 决定扩增的特异性，B错误；PCR过程中，温度降至 通过在第5天后检测亚硝酸盐含量确定泡菜取食时 50℃左右（复性阶段）时，引物通过碱基互补配对与 间，A正确；泡菜“咸而不酸”，可能的原因是食盐浓 单链DNA结合，72C左右是延伸阶段，此时耐高温 度过高，发酵温度过低导致乳酸菌繁殖慢，乳酸积累 DNA聚合酶催化合成子链，C错误；图示PCR扩增 少，B正确；亚硝酸盐含量第3天较低，但此时乳酸 的是DNA中的基因，PCR循环中，第一次循环产物 含量也较低，影响口感，所以此时并不是取食泡菜的 都是一端固定、另一端超出目的片段，第二次循环产 最佳时间，C错误：泡菜制作过程中加入的“陈泡菜 物中所有双链仍然至少有一条链长于目的片段，直 水”可提供乳酸菌，不能进行灭菌处理，D正确。 到第三次循环才会出现双链等长的目的DNA片 17.D【解析】微载体为细胞提供附着位点，细胞贴壁 段，D错误。 生长后仍然会出现接触抑制现象，A错误；细胞在微：21.D【解析】DNA的带电状态会受缓冲液酸碱度影 ·3 扫描全能王 ·高二生物学· 参考答案及解析 响，进而改变迁移方向与速率，A错误；相同大小的 否成功时，应选择的引物组合为F1和R2(或F2和 DNA若构象不同（如线状、环状），迁移速率可能不 R),C错误；根据扩增引物可知，PCR扩增产物的 同，B错误；凝胶载样缓冲液中的指示剂作用是指示 碱基对数量为300+911=1211，应为图2中3号泳 电泳的进程，避免样品跑出凝胶，DNA需要经过染 道的条带，D错误。 色并在紫外灯下观察才能确定其所在位置，C错误； 25.B【解析】植物细胞去除细胞壁可获得原生质体， 待分离的DNA片段较小时，在电泳过程中迁移的 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，常用纤维 速度会加快，因而需要配制较高浓度的琼脂糖溶液， 素酶和果胶酶去除细胞壁。使用蜗牛消化道提取液 D正确。 能达到处理效果，推测蜗牛消化道提取液中可能含 22.C【解析】生物武器的致病成分多为高致病性的微 有纤维素酶、果胶酶，A正确；“甲→乙”过程是脱分 生物或生化毒剂，具有致病能力强、攻击范围广的特 化过程，“乙→试管苗”过程是再分化过程，脱分化和 点，A正确：生物武器危害性极大且违背人道主义原 再分化所需的营养物质和植物微素的比例不同，所 则，彻底销毁生物武器是全世界爱好和平的人民的 以需要更换培养基，B错误；甲细胞是融合后的杂种 共同期望，B正确；生物武器的种类包括致病菌类、 细胞，杂种细胞具有全能性，能够发育成完整的植 病毒类、生化毒剂类、基因重组的致病菌等，毒品类 株，C正确：因为要培育兼具野生大豆耐盐碱特性的 不属于生物武器范畴，C错误；生物武器的传播侵入 植株，所以“乙→目的植株”的培养过程应在一定浓 途径较多，可通过吸入、误食、接触带菌物品、被带菌 度的高盐碱环境下进行，以筛选出具有耐盐碱特性 昆虫叮咬等方式侵入人体，D正确。 的植株，D正确。 23.B【解析】基因表达载体的构建需要乳腺组织特异 二、多项选择题 性启动子，以驱动外源基因在乳腺中表达，A错误： 26,ABC【解析】伊红一亚甲蓝琼脂培养基可用来鉴 大肠杆菌为原核生物，缺乏内质网、高尔基体等加工 别大肠杆菌，生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈 系统，无法对真核生物的蛋白质进行正确折叠和修 深紫色，此培养基为鉴别培养基，A错误：培养基应 饰，而动物乳腺细胞为真核细胞，能完成这些加工， 先高压蒸汽灭菌，再在无菌超净台的酒精灯火焰旁 故蛋白活性更高，B正确；乳腺细胞生物反应器是转 倒平板（分装到培养皿）。若先分装再灭菌，会导致 基因动物，外源基因导入对象是受精卵，由此发育成 培养基沸腾溢出、培养皿破裂，且分装过程的非无菌 的动物，全身细胞中都含有外源基因，C错误；速效 环境会增加污染概率，B错误：检验某品牌冰激凌中 胰岛素类似物是蛋白质工程产物，其制备思路应从 大肠杆菌含量是否超标，应使用稀释涂布平板法，C 预期蛋白质功能出发，D错误。 错误；检测中应设置一个不接种的平板作为阴性对 24.B【解析】PCR技术扩增目的DNA片段时需通过 照，以此来检验培养基灭菌是否彻底，D正确 控制温度使DNA解开双链，A错误；若电泳结果中 27.ABD【解析】卵裂球是早期胚胎（卵裂期）的细胞， 5号泳道内出现两条电泳条带，原因可能是①样品 而囊胚阶段才出现滋养层和内细胞团的分化。早期 被污染，扩增出非目的基因：②复性过程温度过低： 胚胎（卵裂球阶段）未形成囊胚，不存在“去除滋养 ③引物特异性不强，扩增出非目的基因片段，B正 层”的操作，A错误；细胞融合会形成杂种细胞（单 确；基因编辑后与原来的染色体相比发生了倒位，若 核、染色体数加倍)，但嵌合体只是两种细胞“拼在一 使用F1F2或RR2则无法进行PCR扩增，若使用 起”，细胞本身并未融合，未体现细胞膜的流动性，B F1R1或F2R2,则无论是否基因编辑成功都可以扩 错误；过程③是胚胎移植，对代孕母鼠进行同期发情 增出目的基因，因此利用PCR技术鉴定基因编辑是 处理，可以让供体和受体的生理环境保持一致，为胚 ·4 扫描全能王 参考答案及解析 ·高二生物学· 胎移入受体提供相同的生理环境，从而显著提升胚 物带到病灶部位，即抗体通过发挥靶向运输作用，有 胎移植的成功率，C正确：黑白嵌合体鼠的体内，同 效降低药物对正常细胞的伤害，A正确：接头应在血 时存在两种细胞，来自白鼠的二倍体细胞(2个染色 液循环中维持稳定，避免药物过早脱落，否则会对正 体组)和来自黑鼠的二倍体细胞(2个染色体组)两 常细胞造成伤害，B正确：溶酶体中储存的酸性水解 种细胞只是共存，并未融合，D错误。 酶是在核糖体上合成的，C错误；放射性同位素释放 28.BD【解析】过程①酶切后需要DNA片段自身环 的射线可以杀伤肿瘤细胞，因此理论上可以将放射 化，若用不同限制酶切割获得不同黏性末端，末端无 性同位素偶联到ADC上，作为杀伤肿瘤的药物，D 法互补配对，不能完成自身环化：过程①通常用同一 正确。 种限制酶切割，获得相同黏性末端才能环化，A错 三、非选择题 误；反向PCR的引物设计，是在已知序列(K基因) 31.(12分) 上，向两侧未知序列的方向延伸，也就是引物的3'端 (1)稀释涂布平板(1分)①③④(2分) 朝向未知区域。图中引物1和引物4的3端方向， (2)均无菌落生长(2分)相同稀释度下LB培养基 正好朝向环化DNA中K基因两侧的未知序列区 上的菌落数显著多于选择培养基(2分) 域，可以扩增出包含上下游未知序列的片段。引物 (3)3.5×101°(2分) 2和引物3的方向是朝向K基因内部的，无法扩增 (4)将平板上分离得到的细菌接种到无氮源的培养 出两侧的未知序列，B正确；PCR根据引物特异性扩 基上培养一段时间后，观察是否出现菌落。若能长 增，产物直接就是所需的融合片段N,不需要再经限 出菌落，说明该菌为固氮菌，否则不是固氮菌(3分) 制酶切割，C错误；本实验仅已知K基因的序列，启 【解析】(1)据图可知，接种后平板上培养出了菌落， 动子是K基因上游的未知序列，获得融合片段N 且菌落可用于计数，故接种方法为稀释涂布平板法。 后，需要对其测序，结合已知的K基因序列分析，才 稀释涂布平板法的接种工具是涂布器（④），需要用 能得到启动子的碱基序列，D正确。 酒精灯（①）灼烧灭菌，将菌种接种在装有培养基的 29.AB【解析】根据题干信息，大剂量紫外线能破坏 培养皿中（③）。 染色体结构使细胞不再分裂，碘乙酰胺(IOA)可使 (2)为检测该培养基灭菌是否彻底，需要将未接种的 细胞质中某些酶失活从而抑制细胞分裂。结合图 LB培养基与未接种的选择培养基放在恒温培养箱 示，Ⅱ处理应是适量的IOA处理（抑制普通小麦细 中培养，检验是否有菌落产生，若均无菌落生长，则 胞分裂)，I处理应是大剂量紫外线处理（破坏山羊 说明培养基灭菌彻底（未被杂菌污染）。为判断选择 草染色体结构使其细胞不再分裂)，该选项中工、Ⅱ 培养基是否具有选择作用，可将已接种的LB培养 处理的对应关系颠倒，A错误；过程①去除植物细胞 基平板与已接种的选择培养基作对照，如果同一稀 壁，需用纤维素酶和果胶酶，盐酸会杀死细胞，不能 释度下，LB培养基上的菌落数显著多于选择培养 用于去壁，B错误；过程③为植物组织培养，利用了 基，则可证明选择培养基具有选择作用。 植物细胞的全能性原理；培养过程中需在不同阶段 (3)5号试管的稀释倍数为10,5mL瘤胃样品中含 调整生长素和细胞分裂素的浓度比例，诱导脱分化 有目标活菌数=(68+75十67)÷3÷0.1×10×5= 和再分化，C正确；过程④可利用PCR技术扩增纹 3.5×101°（个）。 枯病抗性基因进行分子水平筛选；最终需用纹枯病 (4)土壤中的某些固氮菌可以利用空气中的氮气作 菌感染植株，进行个体生物学水平的鉴定，D正确。 为氮源，设计实验时用到的是无氮源培养基，然后检 30.ABD【解析】抗体能特异性识别肿瘤抗原并把药 测是否有固氨菌即可。故可将平板上分离得到的细 ·%5· 扫描全能王 ·高二生物学· 参考答案及解析 菌接种到无氮源的培养基上培养，若能生长，说明该 限制酶的识别序列及切割位点，可知，需要用BamH 菌为固氮菌，否则不是固氮菌。 I、EcoR I切割载体，用BamH I的同尾酶BglI和 32.(12分) EcoR I切割S基因，故PCR扩增S基因时需在上游 (1)促性腺(2分)细胞质基因（线粒体基因或线粒 引物添加的碱基序列是5'-AGAT℃T-3'。 体)(2分) (3)T-DNA属于可转移DNA,用携带S基因的农杆 (2)纺锤体一染色体复合物(2分)有性(2分)观 菌侵染栽培马铃薯愈伤组织时，基因表达载体中 察到两个极体（或者雌、雄原核）(2分) T-DNA进入愈伤组织细胞，将S基因整合到栽培马 (3)细胞核移植、胚胎移植、体外受精技术（早期胚胎 铃薯愈伤组织细胞的染色体DNA上，抗性基因1位 培养)(2分) 于TDNA外部，用于筛选含有重组载体的农杆菌， 【解析】(1)常用促性腺激素促进排卵，增加卵子的 而抗性基因2位于T-DNA内部，可用于筛选成功 数量。由于母亲的细胞质中含有致病基因，故需要 转化的愈伤组织。该愈伤组织经再分化形成芽、根， 捐献者提供卵母细胞的细胞质基因，防止婴儿从母 继续培育可获得抗寒能力显著增强的马铃薯植株。 亲获得线粒体DNA上的致病基因。 34.(10分) (2)去核指去除纺锤体一染色体复合物，体外受精有 (1)高级(1分) 两性生殖细胞的结合，属于有性生殖，受精的标志是 (2)①③②④(1分) 在卵细胞膜和透明带之间可以观察到两个极体。 (3)a和b(1分)引入定点突变的位点(1分)引 (3)图中涉及的技术有核移植技术、体外受精、胚胎 物b和引物c中分别含有引起基因定点突变的一小 移植等。 段碱基序列，这两段序列的碱基能互补配对(2分) 33.(16分) a和d(1分) (1)4种脱氧核苷酸(2分)延伸(2分) (4)纤维素酶具有十分复杂的空间结构，而纤维素酶 (2)5'端(2分)AGATCT(2分)BamH I、EcoR 基因的结构相对简单，更容易改造；纤维素酶改良基 I(2分) 因（改造后的纤维素酶基因）可以遗传给下一代，而 (3)栽培马铃薯愈伤组织细胞的染色体DNA上(2 突变型纤维素酶不能遗传（写1点且合理即可） 分)2(2分)再分化(2分) (2分) 【解析】(I)PCR扩增目的基因时，需要模板DNA、 (5)①食物安全：转基因食品可能引起过敏、营养成 引物、4种脱氧核苷酸、含Mg2+的缓冲液和耐高温 分改变；②生物安全：转基因生物可能成为入侵物 的DNA聚合酶。PCR一般分为变性、复性和延伸 种，威胁本地生物多样性；③环境安全：转基因生物 三步，其中DNA聚合酶在PCR的延伸步骤中起 可能改变生态系统的营养结构，影响生态平衡（答出 作用。 任意一点即可)(1分) (2)为了使目的基因能够正确插入载体，扩增目的基 【解析】(1)基因工程原则上只能生产自然界中已存 因时，需要在引物的5'端添加限制酶的识别序列。 在的蛋白质，而蛋白质工程可以改造现有蛋白质，或 结合图表分析，在载体的启动子和终止子之间有 制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需 BamHI、EcoR I和XbaI的识别序列，而S基因内 求。蛋白质工程实施的难度很大，是因为蛋白质发 部含有XbaI、NdeI和BamH I的识别序列，要用 挥功能必须依赖于正确的高级结构，研究蛋白质结 BamH I、EcoR I或XbaI切割载体，又不能用 构与功能的关系难度非常大。 XbaI、VdeI或BamH I切割S基因，再根据各种 (2)蛋白质工程的一般过程是：从预期蛋白质的功能 ·%6 扫描全能王 参考答案及解析 ·高二生物学· 出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸 杂交后选取通过引物b和引物c延伸形成的两条链 序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列或合成 杂交在一起的片段，它们能杂交在一起。分析题图， 新的基因→获得所需要的蛋白质，故获得优良的突 根据产物的扩增方向，PCR3扩增需要的引物是引 变型纤维素酶的正确顺序是①纤维素酶功能分析和 物a和引物d。 结构设计→③设计纤维素酶蛋白氨基酸序列和基因 (4)在获取优良的突变型纤维素酶的过程中，科学家 序列→②借助定点突变改造纤维素酶基因序列→④ 是通过对基因的操作来实现的，而不是直接对天然 利用基因工程技术合成突变型纤维素酶。 的纤维素酶进行操作，主要原因有纤维素酶具有十 (3)分析题图可知，根据引物的扩增方向，PCR1过 分复杂的空间结构，而纤维素酶基因的结构相对简 程中的产物AB是依赖引物a和引物b扩增的结 单，更容易改造；纤维素酶改良基因（改造后的纤维 果。引物b和引物c中含有非特异性配对的碱基， 素酶基因)可以遗传给下一代，而突变型纤维素酶不 这是为了在扩增过程中引入与正常序列不同的碱 能遗传。 基，也就是引入突变位点，以达到特定的实验目的。 (5)①食物安全：转基因食品可能引起过敏、营养成 由图可知，引物b与引物c与纤维素酶基因的同一 分改变；②生物安全：转基因生物可能成为入侵物 部位互补，故引物b和引物c分别含有引起基因定 种，威胁本地生物多样性；③环境安全：转基因生物 点突变的一小段碱基序列，这两段序列的碱基是能 可能改变生态系统的营养结构，影响生态平衡。 互补配对的，因此合成的DNA分子经混合、变性、 。7· CS扫描全能王高二年级下学期期末一考试生物学学科试题 本试卷共12页，34题。全卷满分100分。考试用时75分钟。 注意事项： 1.答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在 答题卡上的指定位置。 2.选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂 黑。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。 3.非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草 稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。 4.考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。 一、单项选择题：本题共25小题，1~15每小题1分，共15分；16~25每小题2分，共20 分。在每个小题给出的四个选项中，只有一个是符合题目要求的。 1.下列关于一些传统发酵食品制作的叙述，错误的是 A.传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 B.制作腐乳利用了毛霉等产生的蛋白酶 C.腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸发酵 D.制作果醋利用了醋酸菌在无氧条件下产生乙酸 2.啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过 滤、调节、分装。下列叙述错误的是 A.大麦经过发芽，可产生a淀粉酶 B.焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌 C.使用基因工程改造的啤酒酵母，可以加速发酵过程，缩短啤酒的发酵周期 D.糖化的目的是利用种子中的α淀粉酶将淀粉分解成麦芽糖 3.研究发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养 技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如图。下 雪莲茎尖]诱导①☐细胞分离单细胞或小细胞团 列叙述正确的是 (外植体) 悬浮培养 A.通过图中过程生产雪莲次生代谢物几乎不 次生代谢物 收集 提取 细胞培养物 受季节和天气等的限制 B.利用雪莲茎尖获得雪莲次生代谢物时体现了细胞全能性 C.在适当条件下给予适宜光照，①愈伤组织能进行光合作用 D.植物细胞培养技术提高了单个细胞中次生代谢物的含量 生物学试题第1页（共12页) 4.下列应用中不涉及植物组织培养技术的是 A.单倍体玉米的培育 B.利用嫁接技术繁育果树 C.香蕉脱毒苗的培育 D.基因工程培育抗虫棉 5.某研究团队以干细胞为实验材料建立了早期胚胎与子宫内膜类器官的三维共培养系 统，在体外实现了胚胎一母体双向通讯。推测该技术 A.可以体现细胞的全能性 B.在培养时需要提供CO。 C.改变了胚胎的遗传特性 D.可观察到细胞融合现象 6.细胞工程在社会生产中的应用日益广泛。下列相关技术和方法正确的是 A.原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡 B.可利用灭活病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 C.正常细胞体外培养时，都具有贴壁生长的特点 D.动物克隆过程中，核移植的受体细胞通常是去核的卵原细胞 7.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，、b、c表示现代生物工程技术，①、②、 ③分别表示其对应的结果，下列叙述错误的是 动物细胞培养 胚胎移植 ① ② ③ A.若a为核移植，可用电融合法使细胞融合 B.若b为体外受精，可用于良种家畜快速繁殖 C.①②③发育为个体，证明动物细胞具有全能性 D.若c为胚胎分割，囊胚的内细胞团需均等分割 生物学试题第2页（共12页） CS扫描全能王 8.梅花鹿和马鹿的杂交后代被称为花马杂交鹿，其生命力强、茸质好。自然杂交很难完 成，通过人工授精和应用胚胎工程技术可提高繁殖率。繁殖花马杂交鹿时，不会用到的 技术是 A.精子获能处理 B.超数排卵处理 C.卵母细胞去核 D.胚胎检查和移植 9.下列关于基因工程中相关酶的叙述，正确的是 A.限制酶只能特异性识别6个核苷酸序列 B.用限制酶处理目的基因和载体的过程涉及磷酸二酯键的断裂 C.T4DNA连接酶可以连接黏性末端或平末端，故其不具有专一性 D.DNA连接酶以DNA的一条链为模板，将单个脱氧核苷酸连接起来 10.下列有关获取目的基因的叙述，错误的是 A.目的基因主要是指编码蛋白质的基因 B.可人工合成目的基因或通过构建基因文库来获取目的基因 C.序列数据库等的应用为找到合适的目的基因提供了更多的机会 D.PCR扩增目的基因的过程中，模板和引物的数量逐渐减少 11.将目的基因导入不同受体细胞时，需采用不同的方法。下列导人方法与受体细胞的对 应关系错误的是 A.农杆菌转化法一棉花细胞 B.显微注射法一小鼠受精卵 C.Ca+处理法一大肠杆菌细胞 D.花粉管通道法—酵母菌细胞 12.科研人员从粘质沙雷氏菌中分离获得了限制酶SmaI,其识别并切割的DNA序列为 5'-CCCY GGG一3'。下列叙述正确的是 A.限制酶的活性不受外界温度影响 B.该限制酶可破坏磷酸二酯键和氢键 C.该限制酶切割DNA分子后形成平末端 D.沙雷氏菌中的限制酶SnaI可破坏自身DNA分子 生物学试题第3页（共12页） 13.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是心 A.选择新鲜洋葱或猪肝等作为实验材料 B.加入预冷的体积分数为95%的酒精能加快DNA的析出 店海 C.DNA在2mol/L NaCl溶液中溶解度低 D.鉴定时实验组和对照组都需加人二苯胺 14.生物技术是一把双刃剑，既可以造福人类也可以给人带来危害，在社会上引起了广泛 的争论。下列有关叙述正确的是 A.转基因食品是不安全的，应该禁止食用 B.我国禁止生殖性克隆人，但是允许治疗性克隆 C.设计试管婴儿可以制造完美婴儿，应该推广此项技术 儿天界本：阻数单， D.新冠病毒的传染性强，可用于制造生物武器 西泡出洪小个县酒。 15.“AI辅助试管婴儿胚胎筛选”技术可对胚胎基因进行检测分析。某些生殖中心利用该 技术进行非医疗目的胚胎筛选，引发广泛伦理争议。下列叙述错误的是 A.应禁止使用该技术调控人群的性别比例 师件得修味 B.非医疗目的的胚胎筛选违背了生命伦理的规范 。诗过 C,经过父母双方知情同意，即可开展胚胎筛选 护，过1帆时'长}若 D.由于人体某些性状受多基因调控，胚胎筛选存在不确定性 ·中31 16.某同学在制作泡菜前，查阅资料得知，可以向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”。在制作泡菜 时，他在不同时间测定了泡菜中的亚硝酸盐含量，结果如图所示。下列有关叙述错误的是 357911131 发酵时间/d A.泡菜发酵过程中亚硝酸盐的含量会先升高后降低，可通过在第5天后检测亚硝酸盐 含量确定泡菜取食时间 相 B.该同学制作出的泡菜“咸而不酸”，可能的原因是食盐浓度过高、发酵温度过低等 C.第3天亚硝酸盐含量较低，此时是泡菜的最佳取食时间 D.泡菜制作过程中加入的“陈泡菜水”不需要进行灭菌处理木件， 生物学试题第4页（共12页) CS 扫描全能王 17.微载体是一种直径在60~250m的微小颗粒，通常由天然葡聚糖或各种合成聚合物 组成。它们能够作为载体，使贴壁依赖性细胞在其表面附着生长，常应用于悬浮培养 系统，培养装置局部如图。下列叙述正确的是 A.培养液中的微载体为细胞提供附着位点，使细胞能贴壁 培养细胞 微载体 生长但不会发生接触抑制 B.操作中需要通过搅动使微载体始终保持悬浮状态，细胞 会与培养液充分接触，在载体表面繁殖多层 C.培养环境需要O2,不需要CO2 D.图中悬浮培养系统中的细胞传代培养时，可用胰蛋白酶处理 18.世界首例克隆牦牛在西藏诞生，突破高原动物克隆技术瓶颈。目前利用现代生物技术 救助牦牛较为常见的方法主要有两种，如图所示，其中①、②代表过程，一f代表个体。 下列叙述正确的是 牦牛a 牦牛c A.过程②常用显微操作去核 超数排卵②. 牦牛b古3① 无核卵母细胞体细胞核 B.使用性激素诱发牦牛a进行超数排卵 恐唯性·③重构胚 ⑧d受体 C.重构胚通常培养至原肠胚等早期胚胎阶段，再进行 妊娠分娩妊娠分娩 胚胎移植 e后代 诟代 D.牦牛e的遗传物质来自牦牛a和牦牛b,牦牛f的遗传物质只来自牦牛c 19.研究人员利用DNA重组技术将一种海鱼的抗冻蛋白基因afp整合到土壤农杆菌的 T质粒上，然后用它侵染番茄细胞，获得了抗冻的番茄品种。下列相关叙述正确的是 A.一个基因表达载体的组成包括目的基因、起始密码子、终止子等 B.构建含有afp基因的Ti质粒需要限制酶、DNA连接酶和核酸酶 C.“afp基因通过农杆菌转化进入受体细胞”是该过程的核心工作 D.若转基因番茄表现出抗冻性状，则说明afp基因成功导入并表达 20.聚合酶链式反应(PCR)是一种在体外快速扩增特定DNA片段的技术。研究人员设计 了F1、F2、R1、R2四种引物用于扩增DNA上的某基 -TCCGCCAG 2凹 AGGCGGTC 因，引物的位置如图所示。下列叙述正确的是 RI:R2 A.PCR所用的酶是一种耐高温的DNA聚合酶，其激 目的基因 活一般需要Mg2 B.引物是一段与DNA母链互补的RNA,其序列决定扩增特异性 C.当温度下降到72℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合 D.图示PCR第2次循环的产物中出现双链等长的DNA片段 生物学试题第5页（共12页) 21.下列关于琼脂糖凝胶电泳技术的叙述，正确的是 A.DNA迁移的方向主要取决于电场，而与缓冲液的酸碱度基本无关 B.向两个加样孔内加入分子大小相同的DNA样品，样品迁移速率一定相同 C.凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是标注DNA所在位置 D.待分离的DNA片段较小时，配制的琼脂糖溶液的浓度应该适当提高 22.下列关于生物武器的叙述，错误的是 A.生物武器具有致病能力强、攻击范围广的特点 B.彻底销毁生物武器是全世界爱好和平的人民的共同期望 C.生物武器的种类包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类和毒品类等 D.生物武器可通过吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等侵人人体 23.乳腺生物反应器是通过转基因技术，将外源基因导入动物（如牛、羊）基因组中，并使其 在乳腺组织特异性表达，利用动物乳腺高效合成、分泌蛋白的能力，在乳汁中生产药用 蛋白或其他高价值产品的生物技术体系。下列叙述正确的是 A.在构建基因表达载体时，需要将药物蛋白基因和该基因原来的启动子等重组在一起 B.与利用转基因大肠杆菌生产人干扰素相比，乳腺生物反应器得到的产物活性更高 C.乳腺生物反应器中，只有乳腺组织细胞才含有外源基因 D.若需要利用乳腺生物反应器生产速效胰岛素类似物，应从设计蛋白质的氨基酸序列出发 24.除草剂氟草啶(FCD)能抑制植物细胞中原卟啉原IX氧化酶的活性以达到除草效果。 科研人员利用基因编辑技术使水稻2号染色体上的PPO1基因（编码原卟啉原IX氧 化酶)与CP12基因结构改变（如图1所示），从而赋予水稻对FCD的耐受性，并利用 PCR技术结合电泳对转基因水稻进行鉴定，结果如图2所示。下列叙述正确的是 911kb (碱基对)1号2号3号4号5号 后动PPO■ ■CPI2■K 强动 两个切割位 点之间反转 300kb 911kb 300kb 911 A链 R 1211 ■动CP2T PPO1K强启动 1511 F2 注：F1、F2、R1、R2代表引物 图1 图2 A.PCR技术扩增经基因编辑后的DNA片段时，需用解旋酶打开DNA双链 B.电泳结果中5号泳道内出现两条电泳条带可能是因为引物特异性不强 C.利用PCR技术鉴定基因编辑是否成功时，可选用引物组合为F1和R] D.若基因编辑成功，PCR扩增产物的电泳结果应为图2中的2号泳道 生物学试题第6页（共12页) CS扫描全能王 25.野生大豆(A)具有耐盐碱特性，栽培大豆(B)具有产量高的优势。研究人员通过植物 细胞工程技术培育兼具野生大豆和栽培大豆特性的优良植株，实验流程如图。在进行 “处理1”时，可使用蜗牛消化道提取液。下列叙述错误的是 一A细胞、处理/原生质体A高C高叫甲细胞乙程→试管苗祥 培养 分裂 。目的植株 B细胞 原生质体B 诱导 A.推测蜗牛消化道提取液中可能含有纤维素酶、果胶酶 B.“甲乙”过程和“乙→试管苗”过程不需要更换培养基 C.通过高Ca+一高pH诱导形成的甲细胞具有全能性 D.“乙→目的植株”的培养过程应在一定浓度的高盐碱环境下进行 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每个小题给出的四个选项中，有 两个或两个以上是符合题目要求的，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错 的得0分。 26.我国卫生部门规定饮用水标准，1mL自来水检出的菌落总数不可以超过100个，不得 检出总大肠菌群。为检验某品牌冰激凌中大肠杆菌含量是否超标，研究小组利用配制 的伊红一亚甲蓝琼脂培养基（该培养基上大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽）进行 检测。下列有关叙述错误的是 A.伊红一亚甲蓝琼脂培养基是选择培养基 B.将培养基分装于培养皿中后再灭菌，可明显降低培养基被污染的概率 C.检测中用到的接种方法为平板划线法，每次划线前后都需将接种环放在酒精灯火焰 上灼烧 D.检测中应设置一个不接种的平板作为对照 27.科研人员利用二倍体白鼠和二倍体黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合体鼠的简要流程如 图所示。下列相关叙述错误的是 白鼠早期胚胎卵裂球 一一→我 >分焕 d （路〉 嵌合胚胎 囊胚 卵裂球 黑白嵌合体鼠 黑鼠早期胚胎 A.过程①去除了囊胚的滋养层，从中分离出黑鼠和白鼠的卵裂球 B.过程②中黑鼠和白鼠卵裂球的细胞彼此融合，利用了细胞膜的流动性 C.对代孕母鼠进行同期发情处理可提升过程胚胎移植的成功率 D.黑白嵌合体鼠体内的细胞均含4个染色体组 生物学试题第7页（共12页) 28.为研究K基因（序列已知）的启动子，研究人员利用反向PCR技术获取了K基因两侧 的DNA片段，具体操作如图。下列叙述正确的是 上游序列 K基因 下游序列 3①酶切 ②环化 引物1 。③PCR 物训引物3 引物2 融合片段N A.过程①通常用不同限制酶来切割，以获得不同的黏性末端 B.利用反向PCR扩增获得目的基因时，应选择引物1和引物4 C.③PCR扩增后的产物需经限制酶切割后才能获得融合片段N D.需对融合片段N进行测序并分析，才能获得启动子碱基序列 29.大剂量的紫外线能随机破坏染色体结构，使其发生断裂和部分消除，导致细胞不再分 裂。碘乙酰胺(IOA)可使细胞质中某些酶失活，从而抑制细胞分裂。如图所示，科研 人员将普通小麦与具有纹枯病抗性基因的野生山羊草（抗性基因位于染色体上）进行 体细胞杂交，获得了抗病小麦新品种。下列叙述错误的是 A.I处理和Ⅱ处理分别代表适量的 1处理 IOA处理和大剂量紫外线处理 供体 ① 叶肉细胞 山羊草幼叶 原生质体 B.过程①需要利用盐酸溶液去除 ② 杂种 ③ 杂种④抗病 细胞 植株 植株 受体 ① 根细胞 细胞壁，过程②会再生成新的 小麦幼根 原生质体 细胞壁 Ⅱ处理 C.③过程利用了细胞的全能性原理，该过程需在不同培育阶段改变激素的浓度和比例 D.④过程可利用PCR技术进行筛选，最后还需用纹枯病菌感染进行进一步鉴定 30.抗体一药物偶联物(ADC)可对肿瘤细胞进行选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物 (如细胞毒素)三部分组成，其作用机制如图。 ADC被细胞吞噬 下列关于ADC相关结构的叙述，正确的是 抗体 药物 A.抗体发挥靶向运输作用，有效降低药物 接头 放 细胞死亡 对正常细胞的伤害 溶酶体裂 B.接头应在血液循环中维持稳定，避免药 物过早脱落 C.药物的释放，需要溶酶体合成的酸性水解酶参与 D.理论上，放射性同位素也可作为ADC偶联的药物 生物学试题第8页（共12页） cS扫描全能王 三、非选择题：共4小题，共50分。 31.(12分) 牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从 瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计如下实验。请分析并回答下列问题： 实验步骤： I.取样：从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装人事先灭过菌的锥形瓶中。 Ⅱ.培养基的配制和灭菌： 配制全营养LB固体培养基的配方：水、蛋白胨、酵母提取物、NCl、琼脂。 配制选择培养基的配方：水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂。 Ⅲ.制备瘤胃稀释液并接种，如图1所示。 V.在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。 9mL无菌水 1 mL 1mL1mL1mL 1 mL mL 瘤胃的 99m 0.1mL 胃液样品 无菌水 68个菌落。 75个菌落。一到 67个菌落◆一恩 ① ② ④ 图1 图2 (1)该小组采用 法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条 件下，利用该方法进行分离计数时，需要用到图2中的实验器材有 (填序号)。 (2)本实验设置两组对照：一组为未接种的LB培养基（通用培养基，适合大多数常见 细菌生长)平板与上述选择培养基平板，另一组为已接种的LB培养基平板与上述选择培 养基平板。设置前一组对照的目的是检测培养基是否灭菌合格，若未接种的两组平板上 ,则说明培养基灭菌彻底（未被杂菌污染）；后一组对照中，若 ,则可证明选择培养基具有选择作用。 (3)若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养，培养后平板上出 现的菌落数如图1所示，则5mL瘤胃样品中含有目标活菌数约为 个。 (4)自然环境中也存在某些固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源（如圆褐固氮菌能 将大气中的氮气转化为NH3),请设计实验进一步确定平板上分离得到的细菌是否为固氮 菌（写出简要思路及预期结果）》 生物学试题第9页（共12页) 32.(12分) 为了避免母亲把缺陷的线粒体基因遗传给孩子，利用“三亲婴儿”技术获得了正常的 婴儿。回答下列问题： 去核 卵母细胞 捐赠者卵 核移植 体外培养 母细胞 体外 重组细胞 受精 三亲婴 取核 父亲精子 受精卵 母亲卵母细胞 (1)为了获得足量的卵母细胞，图中捐献者在取卵前通常需要注射 激 素，捐献者实质上给婴儿捐献的是卵母细胞的 (2)图中去核操作实际上去除的是 。 图中父亲精子与重组卵细胞进行 体外受精过程属于 (填“有性”或“无性”)生殖，受精的标志是 (3)三亲婴儿培育过程中用到的生物工程技术有 (答出两个即可)。 生物学试题第10页（共12页) CS扫描全能王 33.(16分) 马铃薯作为重要农作物，提高其冷耐受性可拓展优质马铃薯的种植区域。我国科研 人员发现，野生马铃薯中S基因的表达与其冷耐受性调控有关，将该基因导入栽培马铃薯 中可显著增强其抗寒能力。回答下列问题： BamH I EcoR I Xba I 限制酶 识别序列及切割位点 3 限酶 5终止子启动子 Bglll 5'-AGATCT-3 3-TCTAGA-5 纺割苍点 启动子 T-DNA 抗性基因2 Nde I 5'-CATATG-3 3'-GTATAC-5 终止子 Xbo I 5-CTCGAG-3' 载体 3-GAGCTC-5' EcoR I 5-GAATTC-3' 3'-CTTAAG-5 抗性基因1 复制原点 BamH I B.CGAAGG3 S基因转录方向 Sal I 5-GTCGAC-3' Xba I Nde I BamH I 3'-CAGCTG-5' 5' 3 3 S基因 Xba l A8:3引 (I)PCR扩增目的基因时，需要模板DNA、引物 、含Mg2+的缓冲液和 耐高温的DNA聚合酶。DNA聚合酶在PCR的 步骤中起作用。 (2)图中标识了载体和S基因中限制酶的切割位点。为将S基因正确插入载体，PCR 扩增S基因时需在引物的 (填“5端”或“3'端”)添加限制酶识别序列，结合上 表分析，上游引物应添加的碱基序列是5'一 一3'，切割载体时应选用的两种 限制酶是 ,PCR扩增产物和载体分别被限制酶切割后，经纯化和连接，获得 含S基因的表达载体并导人农杆菌。 (3)用携带S基因的农杆菌侵染栽培马铃薯愈伤组织时，基因表达载体中T-DNA进 入愈伤组织细胞，将S基因整合到 ,抗性基因 (填“1”或“2”)可 用于筛选成功转化的愈伤组织。该愈伤组织经 形成芽、根，继续培育可获得 抗寒能力显著增强的马铃薯植株。 生物学试题第11页（共12页） 34.(10分) 。公山，醒生，芳 PCR定点突变技术是常用的基因定点突变技术，通过设计含有非特异性配对碱基的 引物，再通过PCR将突变位点引人产物中。如图为利用重叠延伸PCR技术进行定点突 变，实现对纤维素酶基因（最终获得优良的突变型纤维素酶）进行改造的过程。回答下列 问题： 、甲士大引物a引物c X●X 00x PCRI引物 引物d ,本， PCR2 产物AB 产物CD AB上链 CD下链 ·#许 突变位点 突变产物AD 技.明米计， IPCR3 大量突变产物AD (1)上述研究属于蛋白质工程的范畴，蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的 第二代基因工程。蛋白质工程实施的难度很大，原因是蛋白质发挥功能必须依赖于正确 的 结构。 (2)获得优良的突变型纤维素酶的正确顺序是 (填序号)。 ①纤维素酶功能分析和结构设计 ②借助定点突变改造纤维素酶基因序列 ③设计纤维素酶蛋白氨基酸序列和基因序列 ④利用基因工程技术合成突变型纤维素酶 (3)结合图示分析，PCR1过程中的产物AB是依赖引物 扩增的结果。 引物b和引物c中含有非特异性配对的碱基，其作用是 。合成的DNA分子 经混合、变性、杂交后选取通过引物b和引物℃延伸形成的两条链杂交在一起的片段，它 们能杂交在一起的原因是 ,最后 利用引物 进行PCR3扩增，得到大量含有突变位点的DNA片段(AD)。 (4)在获取优良的突变型纤维素酶的过程中，科学家是通过对基因的操作来实现的， 而不是直接对天然的纤维素酶进行操作，主要原因是 (答 出1点即可)。 (⑤)转基因技术的安全性问题一直备受关注，主要表现在哪些方面 (答出1点即可)。 生物学试题第12页（共12页) 扫描全能王