精品解析：江西省南昌新民外语学校2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

新民学校2025—2026学年度第二学期第二次月考 高二生物试卷 时间：75分钟 分值：100分 一、单选题 1. 下列关于动物细胞培养的说法，错误的是（　　） A. 培养液和培养器皿均需进行灭菌处理 B. 在CO₂培养箱中培养细胞是为了维持培养液的pH值 C. 传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞 D. 动物细胞培养一般使用固体培养基以便于细胞附着 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养需要保证无菌无毒的环境，防止杂菌污染而导致培养失败，因此培养液和培养器皿均需进行灭菌处理，A正确； B、动物细胞培养的气体环境为95%空气加5%CO₂，其中CO₂的作用是维持培养液的pH稳定，B正确； C、贴壁生长的细胞增殖到出现接触抑制时，传代培养需要用胰蛋白酶处理，使细胞从培养瓶壁上脱离，制成细胞悬液后离心收集细胞，再分瓶培养，C正确； D、动物细胞培养一般使用液体培养基，便于细胞充分接触营养物质、排出代谢废物，固体培养基多用于植物组织培养、微生物分离纯化等场景，D错误。 2. 最初的诱导多能干细胞（iPS细胞）是用小鼠成纤维细胞直接转化得到的，科学家利用类似方法成功培育出了人类iPS细胞。这一系列成果极大地推动了动物细胞工程在理论和技术上的跨越式发展。下列相关叙述正确的是（　　） A. 培育iPS细胞时，一般用胰蛋白酶或胃蛋白酶将动物新鲜组织分散成单个细胞 B. 培养iPS细胞的液体培养基中需要添加血清、琼脂等天然成分 C. iPS细胞培养需在含5%CO2的培养箱中进行，以刺激细胞呼吸 D. 诱导转化生成iPS细胞的过程中可能发生了基因重组 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养的适宜pH为中性偏碱，胃蛋白酶的最适pH为酸性，该环境下胃蛋白酶会失活，因此分散动物组织只能用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，不能用胃蛋白酶，A错误； B、琼脂是固体/半固体培养基的凝固剂，液体培养基不需要添加琼脂，且琼脂不属于天然成分，B错误； C、细胞培养时加入5%CO2的作用是维持培养液的pH稳定，并非刺激细胞呼吸，C错误； D、诱导成纤维细胞转化为iPS细胞时，需要将诱导相关的外源基因导入受体细胞，该过程属于人工介导的基因重组，D正确。 3. 下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列说法正确的是（　　） A. X细胞是从脾脏中提取的已免疫的T淋巴细胞 B. 可采用高-高pH融合法诱导X、Y细胞融合 C. 筛选过程包括杂交瘤细胞的筛选和专一抗体阳性细胞的筛选 D. 分泌单克隆抗体的细胞在培养过程中会出现接触抑制现象 【答案】C 【解析】 【详解】A、单克隆抗体制备中，X是从脾脏提取的已免疫的B淋巴细胞（浆细胞），不是T淋巴细胞，A错误； B、诱导动物细胞融合常用的方法是：聚乙二醇（PEG）融合法、电融合法、灭活病毒诱导法；Ca2+法是用于处理原核细胞，使其处于感受态从而吸收外源DNA的方法，不用于动物细胞融合，B错误； C、单克隆抗体制备需要两次筛选：第一次筛选获得杂交瘤细胞，第二次筛选获得能产生专一抗体的阳性杂交瘤细胞，C正确； D、分泌单克隆抗体的是杂交瘤细胞，杂交瘤细胞整合了骨髓瘤细胞（癌细胞）无限增殖的特点，不会发生接触抑制，接触抑制是正常动物细胞培养的特点，D错误。 4. 体细胞核移植技术是动物克隆的核心手段，在濒危物种保护、医学研究等领域具有重要应用价值。下列相关叙述正确的是（　　） A. 核移植时，应将供体细胞核注入处于减数分裂Ⅰ中期的卵母细胞中 B. 重构胚的发育需要物理或化学方法激活，以启动细胞分裂进程 C. 克隆动物的遗传性状完全由供体细胞核决定，与受体卵母细胞无关 D. 核移植技术目前已完全克服物种间障碍，可任意进行不同物种的克隆 【答案】B 【解析】 【详解】A、体细胞核移植时，需将供体细胞核注入处于减数分裂Ⅱ中期（MⅡ期）的去核卵母细胞中，而非减数分裂Ⅰ中期的卵母细胞，A错误； B、重构胚构建完成后，需要通过物理（如电刺激）或化学方法激活，使其完成细胞分裂和发育进程，启动胚胎发育，B正确； C、克隆动物的细胞核遗传物质来自供体细胞核，但细胞质中的遗传物质（线粒体DNA）来自受体卵母细胞，因此其部分性状会受受体卵母细胞的细胞质基因影响，并非完全由供体细胞核决定，C错误； D、目前核移植技术尚未克服物种间障碍，不同物种间的核移植成功率极低，无法实现任意不同物种的克隆，D错误。 5. 克隆技术是人们关注的热点技术。除了利用核移植技术克隆动物，人们还利用诱导多能干细胞（iPS细胞）技术进行克隆研究，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①是诱导体细胞产生iPS细胞的过程，涉及基因选择性表达 B. 将经过过程①②得到的器官移植到小鼠甲体内，理论上可以避免免疫排斥反应 C. 经过过程③④获得的克隆小鼠与小鼠甲的性状完全相同 D. 过程⑤中，诱导重构胚分化的条件不同，得到的细胞不同 【答案】C 【解析】 【详解】A、过程①是将高度分化的小鼠甲体细胞诱导为具有分裂分化能力的iPS细胞的重编程过程，该过程中细胞内基因的表达情况发生改变，涉及基因选择性表达，A正确； B、过程①②得到的器官由小鼠甲自身的体细胞诱导而来，细胞表面的抗原与小鼠甲完全一致，理论上移植到小鼠甲体内不会发生免疫排斥反应，B正确； C、经过过程③④获得的克隆小鼠，细胞核基因来自小鼠甲，但细胞质基因来自提供去核卵母细胞的小鼠乙，同时性状还会受环境因素影响，因此与小鼠甲的性状不会完全相同，C错误； D、过程⑤诱导重构胚分化的实质是基因的选择性表达，不同的诱导条件会调控基因的表达情况不同，最终得到的细胞种类不同，D正确。 6. 下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述，错误的是（　　） A. 胚胎发育的场所是输卵管和子宫 B. 受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加 C. 在桑葚胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔 D. 囊胚的细胞逐渐分化 【答案】C 【解析】 【详解】A、哺乳动物受精过程在输卵管中完成，受精卵形成后先在输卵管中进行卵裂，之后移动到子宫中着床并继续发育，因此胚胎发育的场所是输卵管和子宫，A正确； B、受精卵早期分裂（卵裂期）时，细胞通过有丝分裂使数目不断增加，但此阶段胚胎总体积并不增加，甚至略有缩小，B正确； C、桑葚胚阶段的胚胎是实心细胞团，尚未出现空腔，胚胎内部出现含有液体的囊胚腔是在囊胚阶段，C错误； D、囊胚阶段细胞开始出现分化，可分化为内细胞团（将来发育成胎儿的各种组织）和滋养层细胞（将来发育成胎膜和胎盘），D正确。 7. 某同学对洋葱的DNA进行粗提取时，发现最终提取总量极少。复盘该同学的操作过程，不会造成该结果的是（　　） A. 所用的实验材料与实验器具都进行了高压蒸汽灭菌处理 B. 研磨液经过滤后，立即取滤液进行操作 C. 向上清液中加入等体积预冷的体积分数为95%酒精溶液 D. 用玻璃棒沿顺时针方向快速搅拌后再反向搅拌 【答案】C 【解析】 【详解】A、高压蒸汽灭菌的温度为121℃，会使实验材料洋葱中的DNA发生高温降解，破坏DNA结构，最终导致提取总量减少，A不符合题意； B、研磨使细胞破裂后，细胞内的DNA酶会释放到研磨液中，过滤后立即取滤液操作，DNA酶尚未失活会分解DNA，导致提取总量减少，B不符合题意； C、DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精，向上清液中加入等体积预冷的95%酒精是析出DNA的标准操作，可降低DNA溶解度、减少DNA降解，有利于DNA析出，不会造成提取总量极少，C符合题意； D、DNA为长链大分子，抗机械剪切能力弱，沿不同方向快速搅拌会造成DNA分子断裂成小片段，难以沉淀析出，导致提取总量减少，D不符合题意。 8. 基因工程需要使用多种工具酶，有4种限制酶的切割位点如下图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A. 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能识别特定核苷酸序列 B. 用限制酶SmaⅠ和EcoRⅤ切割后产生的均为平末端 C. 相应序列被PstⅠ切割后产生的黏性末端无法用DNA聚合酶补齐成平末端 D. 含有1个EcoRⅠ识别位点的环状DNA，被EcoRⅠ切割后可形成2个DNA片段 【答案】D 【解析】 【详解】A、限制酶主要从原核生物中分离纯化获得，其功能特点是能够识别特定的核苷酸序列，并切割特定位点的磷酸二酯键，A正确； B、由图可知，SmaⅠ和EcoRⅤ都在识别序列的对称轴位置切割双链DNA，切割后产生的均为平末端，B正确； C、PstⅠ切割后产生的是3'端突出的黏性末端，DNA聚合酶只能沿5'→3'方向合成DNA，需要游离的3'羟基作为延伸起点，无法对3'突出的黏性末端进行补齐得到平末端，C正确； D、仅含1个酶切位点的环状DNA被限制酶切割后，环状结构打开形成1个线性双链DNA片段，D错误。 9. 下列关于基因工程中载体的叙述，正确的是（　　） A. 具有一个至多个限制酶切割位点，以便目的基因的插入 B. 质粒都来自原核细胞 C. 质粒是常用的载体，有2个游离的磷酸基团 D. 载体质粒中必须有抗生素抗性基因，便于重组DNA分子的筛选 【答案】A 【解析】 【详解】A、基因工程的载体需要具有一个至多个限制酶切割位点，便于限制酶切割后插入目的基因，A正确； B、质粒并非都来自原核细胞，部分真核生物如酵母菌细胞内也存在质粒，B错误； C、质粒是小型环状双链DNA分子，不存在游离的磷酸基团，只有链状双链DNA才具有2个游离的磷酸基团，C错误； D、载体质粒上需要有标记基因便于重组DNA的筛选，但标记基因不一定是抗生素抗性基因，也可以是荧光蛋白基因等其他类型，D错误。 10. 番茄在较低温运输或储存时会被冻坏。科学家利用基因工程技术将抗冻基因AFPs插入表达载体（Ti质粒）后，通过农杆菌转化法导入番茄幼苗。下列叙述错误的是（　　） A. 用PCR扩增基因AFPs时添加的两种引物的碱基间不能互补配对 B. 构建重组Ti质粒时，需要将基因AFPs插入Ti质粒的T-DNA区域 C. 当农杆菌感染番茄细胞时，T-DNA会转移并整合到其染色体DNA上 D. 可通过抗原—抗体杂交技术检测农杆菌细胞中是否表达出抗冻蛋白 【答案】D 【解析】 【详解】A、PCR扩增目的基因时，若两种引物的碱基互补配对，会导致引物之间结合形成引物二聚体，无法与模板DNA结合完成扩增，因此两种引物碱基间不能互补配对，A正确； B、Ti质粒的T-DNA（可转移DNA）具备转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上的特性，因此构建重组Ti质粒时，必须将目的基因AFPs插入T-DNA区域，B正确； C、农杆菌感染植物细胞时，Ti质粒上的T-DNA会转移到受体植物细胞内，并且整合到受体细胞的染色体DNA上，这是农杆菌转化法的核心原理，C正确； D、本实验的目的是让抗冻基因在番茄细胞内表达，应通过抗原—抗体杂交技术检测番茄细胞中是否表达出抗冻蛋白，检测农杆菌细胞内是否表达抗冻蛋白无意义，D错误。 11. 下列关于Ti质粒的叙述正确的是（　　） A. 农杆菌转化法只适用于双子叶和裸子植物 B. T-DNA进入受体细胞后不能利用植物体内的酶进行转录和翻译 C. 将目的基因与Ti质粒整合的过程称为转化 D. Ti质粒上的T-DNA区段可整合到受体细胞的染色体上 【答案】D 【解析】 【详解】A、自然条件下农杆菌易感染双子叶植物和裸子植物，对多数单子叶植物感染力弱，但随技术发展，农杆菌转化法也可应用于部分单子叶植物，A错误； B、T-DNA进入受体细胞后，其上的序列可被植物细胞的酶系统识别，能利用植物体内的酶完成转录和翻译过程，实现目的基因的表达，否则基因工程的设计将无意义，B错误； C、转化是指目的基因进入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，将目的基因与Ti质粒整合属于构建基因表达载体的操作，不属于转化，C错误； D、Ti质粒上的T-DNA又称可转移DNA，可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞的染色体DNA上，这是农杆菌转化法的核心原理，D正确。 12. 转基因抗虫棉经棉铃虫饲喂实验，发现棉花植株并无抗虫性状，科学家提取棉花叶片细胞中的有关成分进行了如下检测，下列分析正确的是（　　） A. 对细胞中蛋白质进行抗原-抗体杂交检测，若无杂交带，说明Bt基因不能转录 B. 采用PCR技术检测细胞中mRNA，若无杂交带，说明Bt基因无法复制 C. 采用PCR技术检测Bt基因，若能测到结果，说明可能Bt基因反向插入T-DNA D. 采用PCR技术没有检测到Bt基因，说明Bt基因没有成功导入土壤农杆菌质粒中 【答案】C 【解析】 【详解】A、抗原-抗体杂交技术用于检测目的基因是否翻译出相应蛋白质，若无杂交带仅能说明Bt基因未表达出对应蛋白质，无法直接判断Bt基因是否不能转录，A错误； B、采用PCR技术检测细胞中mRNA时，一般先反转录为cDNA再扩增，该方法的检测目的是判断Bt基因是否完成转录，若无杂交带说明Bt基因未转录，与基因复制无关，B错误； C、若PCR技术检测到Bt基因，说明Bt基因已成功导入棉花细胞，若Bt基因反向插入T-DNA，会导致其无法在启动子的驱动下正常转录、翻译出抗虫毒蛋白，最终植株无抗虫性状，该情况合理，C正确； D、在棉花细胞中未检测到Bt基因，原因可能是Bt基因未导入土壤农杆菌质粒，也可能是农杆菌转化过程中，携带Bt基因的T-DNA未整合到棉花细胞的染色体DNA上，无法得出“Bt基因没有成功导入土壤农杆菌质粒”的结论，D错误。 二、多选题 13. 将目的基因导入植物细胞可培育出转基因植株。下列将目的基因导入受体植物细胞的操作，正确的是（ ） A. 用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房 B. 含有目的基因的DNA溶液借助花粉管通道进入胚囊 C. 用Ca2+处理棉花细胞，再将重组的基因表达载体导入其中 D. 将新鲜叶片与含重组质粒的农杆菌共培养 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、花粉管通道法的操作方式之一就是用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房，可实现目的基因导入受体细胞，A正确； B、花粉管通道法的原理是植物授粉后形成的花粉管通道可以让含目的基因的DNA溶液进入胚囊，进而转化受精卵或早期胚胎细胞，B正确； C、Ca2+处理仅能使原核微生物成为感受态细胞，便于重组载体导入，该方法不适用于植物细胞，C错误； D、农杆菌转化法常用叶盘法操作，将新鲜叶片（一般做伤口处理）与含重组质粒的农杆菌共培养，利用农杆菌的侵染特性将T-DNA整合到植物细胞的染色体DNA上，D正确。 14. 质粒K中含有两个标记基因，其中β-半乳糖苷酶基因编码的酶可分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色，X-gal在液体环境下对高温敏感。研究团队以该质粒为载体，将人源干扰素基因插到质粒的BamH Ⅰ酶切位点，实现了该基因在大肠杆菌中的高效表达。下列说法错误的是（　　） A. 人源干扰素基因应插入启动子和终止子之间，以便于复制 B. X-gal应待培养基经高压蒸汽灭菌并冷却后再加入 C. 用含卡那霉素和X-gal的选择性培养基筛选的白色菌落为目标菌株 D. 上述途径制备的干扰素与人体细胞分泌的干扰素结构相同 【答案】AD 【解析】 【详解】A、人源干扰素基因应插入启动子和终止子之间，目的是使目的基因能够被转录，而不是便于复制，A错误； B、因为X-gal在液体环境下对高温敏感，所以应待培养基经高压蒸汽灭菌并冷却后再加入X-gal，B正确； C、由于人源干扰素基因插到了质粒的BamHⅠ酶切位点，破坏了β - 半乳糖苷酶基因，使其不能编码产生有活性的β - 半乳糖苷酶，而含卡那霉素和X - gal的选择性培养基中，能在卡那霉素培养基上生存说明含有卡那霉素抗性基因（即含有质粒），菌落为白色说明β-半乳糖苷酶基因被破坏，插入了目的基因，所以白色菌落为目标菌株，C正确； D、大肠杆菌是原核生物，没有内质网和高尔基体等细胞器，不能对干扰素进行加工，所以上述途径制备的干扰素与人体细胞分泌的干扰素结构不同，D错误。 15. 研究人员将r28M基因（黑色素瘤抗体基因）导入山羊成纤维细胞，利用转基因成纤维细胞构建可生产黑色素瘤抗体的乳腺生物反应器。该过程中涉及的操作有（　　） A. 利用显微操作技术将山羊成纤维细胞注入去核卵母细胞 B. 用PCR技术对转化后的山羊成纤维细胞进行检测与鉴定 C. 诱导山羊B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞 D. 重构胚体外培养一段时间后移植入同期发情的受体母羊 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、利用转基因成纤维细胞构建乳腺生物反应器需要借助体细胞核移植技术，该过程可通过显微操作技术将转基因成纤维细胞注入去核卵母细胞构建重构胚，A正确； B、转化后的成纤维细胞需要鉴定目的基因是否成功导入，PCR技术可扩增目的基因，以此检测目的基因的存在，B正确； C、诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞是单克隆抗体的制备操作，本题通过转基因动物乳腺表达抗体，无需该步骤，C错误； D、核移植获得的重构胚需体外培养至桑椹胚或囊胚阶段，再移植到经过同期发情处理、生理状态适配的受体母羊体内继续发育，D正确。 16. 下列有关DNA结构及“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（ ） A. 磷酸基团与核糖交替排列构成DNA分子的基本骨架 B. 可用双缩脲试剂检测提取物中是否含有蛋白质 C. 二苯胺鉴定DNA需要沸水浴加热，冷却后出现显色反应 D. 完成本实验可以不使用离心设备 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、DNA的基本骨架是由磷酸基团和脱氧核糖交替连接构成的，而不是核糖。核糖是 RNA 的组成成分，A错误； B、双缩脲试剂与蛋白质（肽键）反应会呈现紫色，因此可以用来检测 DNA粗提取物中是否残留有蛋白质杂质，B正确； C、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，该反应需要加热，且冷却后蓝色会更稳定、明显，C正确； D、在 DNA 粗提取实验中，可以通过过滤代替离心来去除细胞碎片，也可以通过静置分层的方式分离上清液，因此并非必须使用离心设备，D正确。 三、解答题（除特殊标记外，每空1分） 17. CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。请回答下列问题： （1）上述单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有：__________。 （2）步骤①中与诱导植物原生质体融合不同的诱导方法是_________ （3）经过步骤③筛选后获得细胞丁的名称为_________，该步骤所依据的基本原理是_________。 （4）据题意，该实验的对照组应设置为________，该实验结果显示，实验组的巨噬细胞的吞噬指数高于对照组，理由是_________。 【答案】（1）动物细胞培养、动物细胞融合 （2）灭活的病毒诱导法 （3） ①. 能分泌抗CD47抗体的杂交瘤细胞 ②. 抗原-抗体特异性结合 （4） ①. 不加单克隆抗体（的巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系） ②. 具有抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，巨噬细胞的吞噬作用加强 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备的流程：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾中形成的B淋巴细胞融合；2用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【小问1详解】 单克隆抗体制备过程中需要培养杂交瘤细胞，需要将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合，因此涉及的细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合。 【小问2详解】 诱导植物原生质体融合的方法有物理法和化学法，步骤①中动物细胞融合的方法除物理法和化学法外，特有的方法是灭活的病毒诱导法。 【小问3详解】 经过步骤③抗体检测和克隆化培养筛选后获得细胞丁为能分泌抗CD47抗体的杂交瘤细胞，该步骤抗体检测所依据的基本原理是抗原-抗体特异性结合。 【小问4详解】 依据题干信息，实验的原理是抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，所以自变量应为是否含有抗CD47的单克隆抗体，因变量为巨噬细胞的吞噬指数。所以，当实验组为（具有抗CD47的单克隆抗体的）巨噬细胞+肿瘤细胞培养系，对照组为不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系，由于具有抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，所以实验组的巨噬细胞的吞噬作用加强，实验组的吞噬指数高于对照组。 18. 猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰以及胎盘发育异常，导致克隆成功率较低。我国科学家采用一定的技术手段对克隆胚胎进行处理，提高了克隆成功率，并在2024年获得了首个活到成年的克隆猴。操作流程如图所示，请分析回答下列问题： （1）培养杂种雌猴的成纤维细胞时，通常将细胞置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，培养过程中O2的作用是_________，培养过程中定期更换培养液的目的是 _________。 （2）成纤维细胞应注入去核的食蟹猴_______期卵母细胞，去核的实质是去除_______，去核的常用方法是 _____________。囊胚b是通过体外受精技术获得的胚胎，获得的恒河猴精子受精前要进行_____________处理。 （3）选取囊胚a的内细胞团的原因是___________，囊胚b的滋养层将发育为___________。 （4）从重组囊胚到克隆猴还需要进行的生物工程技术是_____________ ，该技术的实质是____________。 【答案】（1） ①. 为动物细胞呼吸提供氧气（细胞代谢所需） ②. 除去代谢废物并提供营养物质 （2） ①. MⅡ期/减数第二次分裂中 ②. 纺锤体-染色体复合物 ③. 显微操作法 ④. 精子获能 （3） ①. 内细胞团发育为胚胎的各种组织 ②. 胎盘和胎膜 （4） ①. 胚胎移植 ②. 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 【解析】 【分析】1、动物体细胞核移植技术是将动物的一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使重新组合的细胞发育成新胚胎，进而发育成动物个体的技术。 2、胚胎移植，又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。 【小问1详解】 培养杂种雌猴的成纤维细胞中​​​​O2的作用​​：提供细胞代谢所需的氧气（细胞进行有氧呼吸的必需条件）。定期更换培养液的目的​​：去除代谢废物（如乳酸、氨等），同时提供营养物质（如葡萄糖、氨基酸、生长因子等），维持细胞生长的适宜环境。 【小问2详解】 成纤维细胞应注入去核的食蟹猴 ​​MII期（减数第二次分裂中期）​​卵母细胞去核的实质​​是去除卵母细胞的纺锤体-染色体复合物。去核的常用方法​​是显微操作法​​（通过显微操作仪直接去除细胞核）。精子受精前的处理​​是恒河猴精子需进行获能处理​​（使精子获得受精能力）。 【小问3详解】 选取囊胚a内细胞团的原因是内细胞团具有全能性，可发育为胚胎的各种组织。囊胚b的滋养层将发育为胎盘和胎膜。 【小问4详解】 重组囊胚到克隆猴的生物工程技术​是​​胚胎移植​​（将重组囊胚移植到代孕母猴子宫内）。该技术的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。 19. 如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下列问题： （1）a代表的物质和质粒的化学本质相同，都是________，二者还具有其他共同点，如①________，②________(写出两条即可)。 （2）若质粒DNA分子的切割末端为，则与之连接的目的基因切割末端应为________；可使用________把质粒和目的基因连接在一起。 （3）氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为________，其作用是_________________________。 （4）下列常在基因工程中作为载体的是________。 A. 苏云金杆菌抗虫基因 B. 土壤农杆菌环状RNA分子 C. 大肠杆菌的质粒 D. 动物细胞的染色体 【答案】（1） ①. DNA ②. 能够自我复制 ③. 具有遗传效应 （2） ①. ②. DNA连接酶 （3） ①. 标记基因 ②. 用于重组DNA的鉴定和选择 （4）C 【解析】 【分析】作为载体必须具备的条件：①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制；②有多个限制性核酸内切酶切割位点；③有一定的标记基因，便于筛选。常用的载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等。 【小问1详解】 a代表的物质是大型环状DNA分子，质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核之外的小型环状DNA分子，两者都能自我复制，并蕴含遗传信息。 【小问2详解】 质粒DNA分子的切割末端和与其能够连接的目的基因切割末端之间能够发生碱基互补配对，若质粒DNA分子的切割末端为，则与之连接的目的基因切割末端应为可使用DNA 连接酶将它们连接在一起。 【小问3详解】 质粒DNA分子上的氨苄青霉素抗性基因可以作为标记基因，便于对重组DNA进行鉴定和筛选。 【小问4详解】 A、苏云金芽孢杆菌抗虫基因一般作为目的基因，A错误； B、土壤农杆菌环状RNA分子不容易在宿主细胞内保存，B错误； C、常用的载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等，C正确； D、动物细胞染色体的主要成分是DNA和蛋白质，不能被限制性核酸内切酶切割，因此不能用作载体，D错误； 故选C。 20. 科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草，培育过程如下图所示，图1中Sal I、Hind III、BamH I代表相关限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答下列问题。 （1）启动子是________酶的作用位点，转录沿DNA模板链的________（填“5′→3′”或“3′→5′”）方向进行。 （2）过程①构建重组质粒应选用________酶切割，酶切后通过DNA连接酶作用后获得重组质粒，以保证重组DNA序列的唯一性。 （3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用________技术。 （4）基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，图2表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基中除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有________、________。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是________（填图中数字）菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，需使用________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。 【答案】（1） ①. RNA聚合 ②. 3′→5′ （2）SalI、HindIII （3）植物组织培养 （4） ①. 氨苄青霉素 ②. 四环素 ③. 4和6 ④. 一定浓度的盐水浇灌烟草植株（将烟草植株移栽到盐碱地中） 【解析】 【小问1详解】 启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，作用是启动转录过程；转录时RNA沿5′→3′合成，因此转录沿DNA模板链的3′→5′方向进行。 【小问2详解】 质粒和含有目的基因（抗盐基因）的外源DNA分子上都含有Sal I、Hind III、BamH I三种限制酶切割位点，其中BamH I的切割位点位于目的基因内部，用该酶切割会破坏目的基因；若只用Sal I一种限制酶切割可能会导致目的基因与运载体反向连接，因此在构建重组质粒时，应选用Sal I和Hind III两种限制酶对质粒和抗盐基因进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。 【小问3详解】 将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用植物组织培养技术。 【小问4详解】 用Sal I和Hind III两种限制酶对质粒进行切割时，会破坏抗四环素基因，但不会破坏抗氨苄青霉素基因，因此导入重组质粒的农杆菌能在含有氨苄青霉素的培养基上生存，但不能在含有四环素的培养基上生存，所以培养基A和培养基B分别还含有氨苄青霉素、四环素；由图2可知，含目的基因的是4和6菌落中的细菌。除了从分子水平上进行检测，还可以从个体水平上进行鉴定，即用一定浓度的盐水浇灌烟草植株（或将烟草植株移栽到盐碱地中）来鉴定烟草的耐盐性。 21. 反刍动物的瘤胃中含有分解纤维素的微生物，科研小组从瘤胃中分离培养分解纤维素的微生物的流程如图 1 所示。回答下列问题： （1）筛选、培养纤维素分解菌需要以纤维素为唯一_____设计选择性培养基，配置好的培养基需要用_____灭菌。已知刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。结合已有信息，请你完善以下实验步骤： ①瘤胃提取物取样； ②_____； ③在适宜条件下培养一段时间； ④选取_____； ⑤重复多次②③④实验步骤，直至筛选出高效纤维素分解菌。 （2）分离出某真菌的 W 基因可编码一种可高效降解纤维素的酶，以图 2 中质粒为载体，进行转基因操作。为使大肠杆菌产生该酶，在质粒中插入 W 基因构建基因表达载体后，研究人员一般先用_____处理大肠杆菌细胞，使其处于能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态。 （3）①如图 3 所示，已知图中 W 基因转录方向是从右向左，W 基因转录的模板链是_____。利用_____技术对 W 基因进行扩增时，选取的引物为_____（用①②③④回答）。 ②结合图 2 及图 3，解释 EcoR I 酶不可用的原因：_____。 【答案】（1） ①. 碳源 ②. 高压蒸汽灭菌 ③. 梯度稀释后涂布到添加有刚果红的选择培养基 ④. 透明圈大的菌落（透明圈与菌落比值大） （2）Ca2+ （3） ①. 甲 ②. PCR ③. ②③ ④. 在质粒中EcoR I酶的识别序列在Hind Ⅲ识别序列的左侧，若用该酶切割，会导致目的基因反向连接 【解析】 【分析】一个基因表达载体的组成，除目的基因、标记基因外，还必须有启动子、终止子等。启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游紧挨转录的起始位点，它是RNA聚合酶识别和结合的部位。有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人类需要的蛋白质。 【小问1详解】 纤维素的元素组成为C、H、O，上图是科研小组从瘤胃中分离培养分解纤维素的微生物的流程，因此得到瘤胃提取物后，将其放入以纤维素为唯一碳源的选择培养基进行培养，配置好的培养基需要用高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）。 若要筛选出高效纤维素分解菌，首先在瘤胃提取物取样，梯度稀释后涂布到添加有刚果红的选择培养基，在适宜条件下培养一段时间，选取透明圈大的菌落（透明圈越大的菌落，菌分解纤维素的能力越强），重复多次②③④实验步骤，直至筛选出高效纤维素分解菌。 【小问2详解】 为使大肠杆菌产生该酶，在质粒中插入 W 基因构建基因表达载体后，研究人员一般先用Ca2+处理大肠杆菌细胞，使其处于能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态。 【小问3详解】 ①已知图中W基因转录方向是从右向左，mRNA链的合成方向为5'→3'，与甲链从右向左3'→5'互补，故W基因转录的模板链是甲链。利用PCR技术扩增目的基因的原理是DNA半保留复制，子链延伸方向为5'→3'，因此在扩增目的基因时选取的引物为②③。 ②题意显示“图中W基因转录方向是从右向左、“质粒启动子到终止子方向为顺时针”，故重组质粒的启动子应在W基因右侧，终止子应在W基因左侧，W基因右侧只能用HindⅢ切割，W基因左侧有BamHI、KpnI、EcoRI三种酶切位点，结合质粒情况及切割位点识别序列，应使用限制酶HindⅢ和KpnI切割图中质粒和W基因，以获得能正确表达W基因的重组质粒，结合图示可知，在质粒中EcoRI酶的识别序列在HindⅢ识别序列的左侧，若用该酶切割，会导致目的基因反向连接。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 新民学校2025—2026学年度第二学期第二次月考 高二生物试卷 时间：75分钟 分值：100分 一、单选题 1. 下列关于动物细胞培养的说法，错误的是（　　） A. 培养液和培养器皿均需进行灭菌处理 B. 在CO₂培养箱中培养细胞是为了维持培养液的pH值 C. 传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞 D. 动物细胞培养一般使用固体培养基以便于细胞附着 2. 最初的诱导多能干细胞（iPS细胞）是用小鼠成纤维细胞直接转化得到的，科学家利用类似方法成功培育出了人类iPS细胞。这一系列成果极大地推动了动物细胞工程在理论和技术上的跨越式发展。下列相关叙述正确的是（　　） A. 培育iPS细胞时，一般用胰蛋白酶或胃蛋白酶将动物新鲜组织分散成单个细胞 B. 培养iPS细胞的液体培养基中需要添加血清、琼脂等天然成分 C. iPS细胞培养需在含5%CO2的培养箱中进行，以刺激细胞呼吸 D. 诱导转化生成iPS细胞的过程中可能发生了基因重组 3. 下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列说法正确的是（　　） A. X细胞是从脾脏中提取的已免疫的T淋巴细胞 B. 可采用高-高pH融合法诱导X、Y细胞融合 C. 筛选过程包括杂交瘤细胞的筛选和专一抗体阳性细胞的筛选 D. 分泌单克隆抗体的细胞在培养过程中会出现接触抑制现象 4. 体细胞核移植技术是动物克隆的核心手段，在濒危物种保护、医学研究等领域具有重要应用价值。下列相关叙述正确的是（　　） A. 核移植时，应将供体细胞核注入处于减数分裂Ⅰ中期的卵母细胞中 B. 重构胚的发育需要物理或化学方法激活，以启动细胞分裂进程 C. 克隆动物的遗传性状完全由供体细胞核决定，与受体卵母细胞无关 D. 核移植技术目前已完全克服物种间障碍，可任意进行不同物种的克隆 5. 克隆技术是人们关注的热点技术。除了利用核移植技术克隆动物，人们还利用诱导多能干细胞（iPS细胞）技术进行克隆研究，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①是诱导体细胞产生iPS细胞的过程，涉及基因选择性表达 B. 将经过过程①②得到的器官移植到小鼠甲体内，理论上可以避免免疫排斥反应 C. 经过过程③④获得的克隆小鼠与小鼠甲的性状完全相同 D. 过程⑤中，诱导重构胚分化的条件不同，得到的细胞不同 6. 下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述，错误的是（　　） A. 胚胎发育的场所是输卵管和子宫 B. 受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加 C. 在桑葚胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔 D. 囊胚的细胞逐渐分化 7. 某同学对洋葱的DNA进行粗提取时，发现最终提取总量极少。复盘该同学的操作过程，不会造成该结果的是（　　） A. 所用的实验材料与实验器具都进行了高压蒸汽灭菌处理 B. 研磨液经过滤后，立即取滤液进行操作 C. 向上清液中加入等体积预冷的体积分数为95%酒精溶液 D. 用玻璃棒沿顺时针方向快速搅拌后再反向搅拌 8. 基因工程需要使用多种工具酶，有4种限制酶的切割位点如下图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A. 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能识别特定核苷酸序列 B. 用限制酶SmaⅠ和EcoRⅤ切割后产生的均为平末端 C. 相应序列被PstⅠ切割后产生的黏性末端无法用DNA聚合酶补齐成平末端 D. 含有1个EcoRⅠ识别位点的环状DNA，被EcoRⅠ切割后可形成2个DNA片段 9. 下列关于基因工程中载体的叙述，正确的是（　　） A. 具有一个至多个限制酶切割位点，以便目的基因的插入 B. 质粒都来自原核细胞 C. 质粒是常用的载体，有2个游离的磷酸基团 D. 载体质粒中必须有抗生素抗性基因，便于重组DNA分子的筛选 10. 番茄在较低温运输或储存时会被冻坏。科学家利用基因工程技术将抗冻基因AFPs插入表达载体（Ti质粒）后，通过农杆菌转化法导入番茄幼苗。下列叙述错误的是（　　） A. 用PCR扩增基因AFPs时添加的两种引物的碱基间不能互补配对 B. 构建重组Ti质粒时，需要将基因AFPs插入Ti质粒的T-DNA区域 C. 当农杆菌感染番茄细胞时，T-DNA会转移并整合到其染色体DNA上 D. 可通过抗原—抗体杂交技术检测农杆菌细胞中是否表达出抗冻蛋白 11. 下列关于Ti质粒的叙述正确的是（　　） A. 农杆菌转化法只适用于双子叶和裸子植物 B. T-DNA进入受体细胞后不能利用植物体内的酶进行转录和翻译 C. 将目的基因与Ti质粒整合的过程称为转化 D. Ti质粒上的T-DNA区段可整合到受体细胞的染色体上 12. 转基因抗虫棉经棉铃虫饲喂实验，发现棉花植株并无抗虫性状，科学家提取棉花叶片细胞中的有关成分进行了如下检测，下列分析正确的是（　　） A. 对细胞中蛋白质进行抗原-抗体杂交检测，若无杂交带，说明Bt基因不能转录 B. 采用PCR技术检测细胞中mRNA，若无杂交带，说明Bt基因无法复制 C. 采用PCR技术检测Bt基因，若能测到结果，说明可能Bt基因反向插入T-DNA D. 采用PCR技术没有检测到Bt基因，说明Bt基因没有成功导入土壤农杆菌质粒中 二、多选题 13. 将目的基因导入植物细胞可培育出转基因植株。下列将目的基因导入受体植物细胞的操作，正确的是（ ） A. 用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房 B. 含有目的基因的DNA溶液借助花粉管通道进入胚囊 C. 用Ca2+处理棉花细胞，再将重组的基因表达载体导入其中 D. 将新鲜叶片与含重组质粒的农杆菌共培养 14. 质粒K中含有两个标记基因，其中β-半乳糖苷酶基因编码的酶可分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色，X-gal在液体环境下对高温敏感。研究团队以该质粒为载体，将人源干扰素基因插到质粒的BamH Ⅰ酶切位点，实现了该基因在大肠杆菌中的高效表达。下列说法错误的是（　　） A. 人源干扰素基因应插入启动子和终止子之间，以便于复制 B. X-gal应待培养基经高压蒸汽灭菌并冷却后再加入 C. 用含卡那霉素和X-gal的选择性培养基筛选的白色菌落为目标菌株 D. 上述途径制备的干扰素与人体细胞分泌的干扰素结构相同 15. 研究人员将r28M基因（黑色素瘤抗体基因）导入山羊成纤维细胞，利用转基因成纤维细胞构建可生产黑色素瘤抗体的乳腺生物反应器。该过程中涉及的操作有（　　） A. 利用显微操作技术将山羊成纤维细胞注入去核卵母细胞 B. 用PCR技术对转化后的山羊成纤维细胞进行检测与鉴定 C. 诱导山羊B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞 D. 重构胚体外培养一段时间后移植入同期发情的受体母羊 16. 下列有关DNA结构及“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（ ） A. 磷酸基团与核糖交替排列构成DNA分子的基本骨架 B. 可用双缩脲试剂检测提取物中是否含有蛋白质 C. 二苯胺鉴定DNA需要沸水浴加热，冷却后出现显色反应 D. 完成本实验可以不使用离心设备 三、解答题（除特殊标记外，每空1分） 17. CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。请回答下列问题： （1）上述单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有：__________。 （2）步骤①中与诱导植物原生质体融合不同的诱导方法是_________ （3）经过步骤③筛选后获得细胞丁的名称为_________，该步骤所依据的基本原理是_________。 （4）据题意，该实验的对照组应设置为________，该实验结果显示，实验组的巨噬细胞的吞噬指数高于对照组，理由是_________。 18. 猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰以及胎盘发育异常，导致克隆成功率较低。我国科学家采用一定的技术手段对克隆胚胎进行处理，提高了克隆成功率，并在2024年获得了首个活到成年的克隆猴。操作流程如图所示，请分析回答下列问题： （1）培养杂种雌猴的成纤维细胞时，通常将细胞置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，培养过程中O2的作用是_________，培养过程中定期更换培养液的目的是 _________。 （2）成纤维细胞应注入去核的食蟹猴_______期卵母细胞，去核的实质是去除_______，去核的常用方法是 _____________。囊胚b是通过体外受精技术获得的胚胎，获得的恒河猴精子受精前要进行_____________处理。 （3）选取囊胚a的内细胞团的原因是___________，囊胚b的滋养层将发育为___________。 （4）从重组囊胚到克隆猴还需要进行的生物工程技术是_____________ ，该技术的实质是____________。 19. 如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下列问题： （1）a代表的物质和质粒的化学本质相同，都是________，二者还具有其他共同点，如①________，②________(写出两条即可)。 （2）若质粒DNA分子的切割末端为，则与之连接的目的基因切割末端应为________；可使用________把质粒和目的基因连接在一起。 （3）氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为________，其作用是_________________________。 （4）下列常在基因工程中作为载体的是________。 A. 苏云金杆菌抗虫基因 B. 土壤农杆菌环状RNA分子 C. 大肠杆菌的质粒 D. 动物细胞的染色体 20. 科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草，培育过程如下图所示，图1中Sal I、Hind III、BamH I代表相关限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答下列问题。 （1）启动子是________酶的作用位点，转录沿DNA模板链的________（填“5′→3′”或“3′→5′”）方向进行。 （2）过程①构建重组质粒应选用________酶切割，酶切后通过DNA连接酶作用后获得重组质粒，以保证重组DNA序列的唯一性。 （3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用________技术。 （4）基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，图2表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基中除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有________、________。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是________（填图中数字）菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，需使用________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。 21. 反刍动物的瘤胃中含有分解纤维素的微生物，科研小组从瘤胃中分离培养分解纤维素的微生物的流程如图 1 所示。回答下列问题： （1）筛选、培养纤维素分解菌需要以纤维素为唯一_____设计选择性培养基，配置好的培养基需要用_____灭菌。已知刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。结合已有信息，请你完善以下实验步骤： ①瘤胃提取物取样； ②_____； ③在适宜条件下培养一段时间； ④选取_____； ⑤重复多次②③④实验步骤，直至筛选出高效纤维素分解菌。 （2）分离出某真菌的 W 基因可编码一种可高效降解纤维素的酶，以图 2 中质粒为载体，进行转基因操作。为使大肠杆菌产生该酶，在质粒中插入 W 基因构建基因表达载体后，研究人员一般先用_____处理大肠杆菌细胞，使其处于能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态。 （3）①如图 3 所示，已知图中 W 基因转录方向是从右向左，W 基因转录的模板链是_____。利用_____技术对 W 基因进行扩增时，选取的引物为_____（用①②③④回答）。 ②结合图 2 及图 3，解释 EcoR I 酶不可用的原因：_____。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $