3.2 基因工程的基本操作程序课件-2025-2026学年高二下学期生物人教版选择性必修3

该高中生物学课件聚焦基因工程基本工具与操作程序，以新疆棉病虫害防治案例导入，衔接重组DNA工具知识，通过“目的基因如何获取”等问题链搭建学习支架，引导学生逐步掌握技术流程。 其亮点在于问题驱动与探究实践深度融合，如分析PCR原理、设计农杆菌转化流程，融入科学思维与探究实践素养，含线上模拟实验及高考题练习，助力学生提升探究能力，为教师提供系统教学资源与多样化活动支持。

复习巩固 重组DNA操作的基本工具 1. 重组DNA技术的基本工具有哪些？作用是什么？ 2. DNA粗提取的原理？鉴定的原理？ “分子手术刀” “分子缝合针” “分子运输车” ：限制性内切核酸酶 ：DNA连接酶 ：载体 准确切割DNA分子 将DNA片段再连接起来 1.DNA不溶于酒精溶液 2.DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 鉴定原理： 提取原理： DNA+二苯胺 蓝色物质 沸水浴 将体外重组好的DNA分子导入受体细胞 第2节 基因工程的基本程序 第3章 基因工程 1.重组DNA技术所需的三种基本工具是什么？它们的作用分别是什么？基因工程的基本操作程序主要包括哪几个步骤？ 2.基因工程操作的每一步涉及的技术和方法有哪些？ 人教版选择性必修2 本节聚焦： 人教版选必修3 从社会中来 【资料1】新疆是我国最大的优质棉生 产基地，具有得天独厚的条件。不过 在种植过程中也存在诸多制约因子， 例如病虫害。棉花的害虫有多种， 如棉铃虫、棉蚜、棉盲蝽等。 课本P76 思考： 1.根据前面所学知识，我们有什么方法防治病虫害？ 机械防治、化学防治、生物防治 思考：1.已知Bt抗虫蛋白中第5号螺旋中部疏水，两端亲水， 从细胞膜结构的角度分析，第5号螺旋能够贯穿细胞膜的磷 脂双分子层。原因是_____________________________________ ____________________________________________。  2.Bt抗虫蛋白对哺乳动物没有影响的原因是：哺乳动物的消化系统环境呈____性,且肠道细胞表面没有____________________________。 从社会中来 【资料2】科学家发现，苏云金杆菌产生Bt抗虫蛋白能杀死棉铃虫。作用机理：Bt抗虫蛋白在昆虫肠道的碱性环境中被分解为多肽后，与肠道细胞膜上的特异性蛋白结合，导致细胞膜穿孔而死亡。 课本P77 细胞膜的磷脂双分子层的内部是疏水端，两侧是 亲水端与第5号螺旋结构特点相似，所以第5号螺旋能够贯穿于细胞膜　 特异性受体（Bt抗虫蛋白受体） 酸 从社会中来 课本P77 3.在防治时，科学家们想将Bt抗虫蛋白导入棉花，培养有抗虫能力的棉花来解决棉铃虫害问题，培育转基因抗虫棉一般需要哪些步骤？ 1.目的基因的筛选与获取 2. 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定 探索新知 基因工程（P76-82） 第一步：目的基因的筛选与获取 【任务1】同学们阅读教材P76-77，回答下列问题： 1.什么是目的基因？ 2.如何筛选目的基因？ 3.明确目的基因后，该如何获得它？ 从相关的已知结构和功能清晰的基因进行筛选 探索新知 基因工程（P76-82） 1.什么是目的基因？ 改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因。主要指的是编码蛋白质的基因，如生物抗逆性、生产药物、毒物降解和工业用酶。 2.如何筛选目的基因？ 测序技术 序列数据库 序列比对工具 3.明确目的基因后，该如何获取？ ①人工合成 ③从基因文库中获取（P82第5段第1、2行) ②利用PCR获取和扩增目的基因（常用） 重难点 PCR（P77-78） 1.中文全称： 2.原理： 3.目的： 4.操作环境： 5.过程： 6.PCR鉴定： DNA半保留复制 对目的基因的核苷酸序列进行大量复制 聚合酶链式反应 体外环境 琼脂糖凝胶电泳 变性 复性 延伸 【任务2】同学们阅读教材P77-79，回答问题： 知识回顾 DNA半保留 (2)条件: 4种游离的脱氧核苷酸 DNA的两条链 DNA解旋酶、DNA聚合酶等 ATP 其他条件: 引物 能量： 模板： 原料： 酶： 半保留复制 边解旋边复制 (1)特点: 解旋酶 DNA聚合酶 母链(模板链) 子链(新合成的链) 四种脱氧核苷酸 3’ 3’ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 5’ 体内DNA复制 参与的组分 在DNA复制中的作用 体外PCR 参与的组分 重难点 PCR（P77-78） PCR在体外扩增时，要提供哪些条件？ 使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸 4种脱氧核苷酸 耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶） （2种）引物 PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行； 一般添加Mg2+激活DNA聚合酶。 打开DNA双链 提供DNA复制的模板 合成DNA子链的原料 催化合成DNA子链 解旋酶 DNA母链 4种脱氧核苷酸 DNA聚合酶 引物 高温(90℃以上)代替 含目的基因的DNA片段 重难点 PCR（P77-78） 5.PCR过程： 耐高温的DNA聚合酶(Taq酶） 4种脱氧核苷酸（DNTP） 2种引物 待扩增的DNA片段（模板） 5’ 5’ 变性 复性 延伸 温度上升到90℃以上，双链DNA解聚为单链 当温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 温度上升到72℃左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下合成新的DNA链。 重难点 PCR（P77-78） 思考： 1.PCR技术获取目的基因时至少要经过______次循环才能分离出目的基因。 2.以一个DNA为模板，循环n次后获得的子代DNA数目为______个，共需要引物数量为___________个。 3.用PCR可以扩增RNA吗？ RNA不可以直接扩增，需要将它逆转录成DNA再进行扩增。 2n 2n＋1－2 3 重难点 PCR（P77-78） 5’ 3’ 5’ 5’ 第一次循环 第二次循环 3’ 5’ 第三次循环 3’ 3’ 一、实验原理 PCR利用了DNA的_______原理来控制DNA双链解聚与结合。 DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团 可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷_______的电极移动，这个过程就是电泳。 PCR的产物一般通过________________来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与________________________________等有关。 凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为300nm的_______下被检测出来。 探究●实践 DNA片段的扩增及电泳鉴定 热变性 相反 琼脂糖凝胶电泳 凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象 紫外灯 （DNA分子量越小移动越快，从而可将不同大小的DNA片段鉴定与纯化。） 二、实验步骤 探究●实践 DNA片段的扩增及电泳鉴定 【任务3】 （1）同学们完成金版学案P81中的探究过程，并在书中划上相应的线； （2）自主阅读实验的注意事项。 （3）线上模拟实验file:///F:/%E9%AB%98%E4%B8%AD%E7%94%9F%E7%89%A9/%E6%96%B0%E6%95%99%E6%9D%90%E8%AF%BE%E4%BB%B6/%E9%80%89%E6%8B%A9%E5%BF%85%E4%BF%AE%E4%B8%89/%E7%94%A8%E4%BA%8E%E9%89%B4%E5%AE%9APCR%E4%BA%A7%E7%89%A9%E7%9A%84%E7%94%B5%E6%B3%B3.html （4）做金版学案P82实验评价第2、10题 （5）结果分析与评价 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 【24衡水卷】用PCR检测某转基因植株是否导入目的基因时，电泳鉴定时发现扩增出多条条带，其原因最可能是（    ） A．引物长度过短 B．引物之间发生配对 C．体系中Mg2+浓度过低 D．电泳时凝胶浓度过高 A 探索新知 基因工程（P76-82） Bt(目的)基因 普通棉花 氨苄青霉素抗性基因 目的基因插入位点 复制原点 质粒结构模式图 获取了足够量的Bt基因后，可以直接转入受体细胞？ 让Bt基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；同时，使Bt基因能够表达和发挥作用，这就需要构建基因表达载体。 （核心工作） 探索新知 基因工程（P76-82） 第二步：基因表达载体的构建 思考：  1.载体有一个或多个切割位点，便于_____________________。 2.启动子位于目的基因上游，其作用是________________________________________。在载体中人工构建诱导型启动子，当诱导物存在时，可以___________目的基因的表达。 目的基因的插入 RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动目的基因转录出mRNA 激活或抑制 载体 探究·实践 探究·实践 探究·实践 拓 展 诱导型启动子 以大肠杆菌的乳糖操纵子为例，操纵子（包括调节基因、启动子、操纵基因、结构基因） 无诱导物存在时                                        有诱导物存在时 无诱导物（乳糖）存在时，调节基因合成           与             结合，阻止RNA聚合酶的转录，结构基因            (填开启或关闭)。 有诱导物（乳糖）存在时，          与阻遏蛋白结合后，改变了              ，使其不能与操纵基因结合，RNA聚合酶转录结构基因(LacZ、Y、A)，合成吸收与分解乳糖所需要的酶，所以大肠杆菌可以利用乳糖。 阻遏蛋白 操纵基因 关闭 乳糖 阻遏蛋白的结构 探索新知 基因工程（P76-82） 第二步：基因表达载体的构建 思考：  3._________在基因的下游，停止基因______。 4.复制原点保证基因表达载体在___________ 5.标记基因的作用：_____________________ 6.简述基因表达载体的构建过程： 7.切割载体与目的基因的限制酶选择要求： 载体 用于筛选含重组DNA分子的细胞 受体细胞中能自我复制，并遗传下一代 （1）要使用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶 （2）不能破坏目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点。 终止子 转录 易混名词 项目 启动子 终止子 起始密码子 终止密码子 本质 DNA DNA mRNA mRNA 位置 目的基因 上游 目的基因 下游 mRNA 首端 mRNA 尾端 功能 RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA 使转录在所需要的地方停下来 翻译的起始信号(编码氨基酸) 翻译的结束信号(不编码氨基酸) 探究·实践 探究·实践 重难点 将目的基因导入受体细胞需构建基因表达载体,图甲、乙表示质粒及目的基因所在DNA片段,图中箭头表示相关限制酶的酶切位点。  (1)用图中的质粒和DNA构建基因表达载体时,不能使用SmaⅠ切割,原因是　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　 _____________ 　。  SmaⅠ会破坏质粒的抗生素抗性基因和目的基因 启动子 限制酶的选择 探究·实践 探究·实践 探究·实践  (2)选用EcoRⅠ同时切割质粒和DNA,产物用DNA连接酶进行连接后，会出现怎样的连接？ 启动子 【活动1】同学们用EcoRⅠ同时切割目的基因、质粒，尝试不同的连接情况 重难点 限制酶的选择 5’ 5’ 3’ 3’ 目的基因 质粒 目的基因 载体 使切口的黏性末端都相同 自身环化 片段间的连接 目的基因自连 质粒自连 目的基因与质粒连接 目的基因与目的基因连接 质粒与质粒连接 正向连接 反向连接 1 2 2’ 1’ 2 2’ 1’ 1 重难点 限制酶的选择 探究·实践 探究·实践 探究·实践  (2)选用EcoRⅠ同时切割质粒和DNA,产物用DNA连接酶进行连接后，会出现连接方式有_______________________________________________________ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　______　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 (3)避免以上现象出现,应使用 　　 两种限制酶。 启动子 重难点 限制酶的选择 目的基因自身环化、质粒的自身环化、目的基因—质粒连接（正向/反向连接）、目的基因—目的基因连接、质粒—质粒连接。 BamHⅠ和HindⅢ EcoRI和HindⅢ 双酶切 双酶切可避目的基因自身环化、质粒的自身环化、目的基因—质粒连接的反向连接、目的基因—目的基因连接、质粒—质粒连接，但依可能有目-目的反向连接、质-质的反向连接 探索新知 基因工程（P76-82） 普通棉花 构建好的基因表达载体，如何进入棉花（受体）细胞？ 目的基因 启动子 标记基因 复制原点 终止子 若受体细胞是动物也是用此方法吗？ 受体细胞是原核生物呢？ 探索新知 基因工程（P76-82） 第三步：将目的基因导入受体细胞 2.将目的基因导入细胞的方法 1.转化：是指目的基因 受体细胞内，并在受体细胞内＿＿＿＿ ＿＿＿＿＿＿＿＿的过程。 进入 维持稳定和表达 导入植物细胞 导入动物细胞 导入微生物细胞 方法1：花粉管通道法 方法2：农杆菌转化法 显微注射法 Ca2+处理: 探索新知 基因工程（P76-82） 方法1：花粉管通道法 我国独创将Bt基因导入棉花细胞的方法 子房 花粉 柱头 花粉管 精子 卵细胞 胚囊 重难点 农杆菌转化法（P81） 农杆菌特点： a.能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物；随后在单子叶植物也取得突破。 b.农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA（可转移的DNA）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。 操作方法： 1）可以将新鲜的从叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养， 然后筛选转化细胞，并再生成植株； 2）可以将花序直接浸没在含有农杆菌的溶液中一段时间， 然后培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定等。 重难点 农杆菌转化法（P81） 【任务3】同学们根据示意图，写农杆菌转化法流程图： Ti质粒 目的基因 构建基因表达载体 含目的基因的重组Ti质粒 转入 农杆菌 导入 植物细胞 目的基因插入染色体DNA中 植物细胞 表现出新性状的植株 植物组织培养 重难点 农杆菌转化法（P81） Ti质粒 目的基因 构建基因表达载体 含目的基因的重组Ti质粒 转入 农杆菌 导入 植物细胞 目的基因插入染色体DNA中 植物细胞 表现出新性状的植株 植物组织培养 （1）目的基因必须插入到T-DNA，原因是________________________________ __________________________________。 （2）两次拼接和两次导入 T-DNA能转移并将其整合到受体细胞的染色体DNA 探索新知 基因工程（P76-82） 显微注射法 (2)操作程序： (1)受体细胞： 构建基因表达载体并提纯 动物的受精卵中 显微注射 早期胚胎 获得具有新性状的动物 胚胎移植 受精卵 雌性动物输卵管或子宫 ①受精卵全能性高，易培养成完整个体。 ②个体大，易操作。 显微注射技术 探索新知 基因工程（P76-82） 在基因工程操作中，常用 作为受体 细胞，其中以 最广泛。 (3)原理过程: (1)受体细胞： 原核生物 大肠杆菌 多为单细胞，遗传物质相对较少，繁殖快，易培养。 (2)原核细胞作为受体细胞的优点： Ca2+处理: Ca2+处理细菌 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收重组DNA 增加细胞膜的通透性，使细胞处于一种能吸收外源DNA的生理状态。 制备 热激 探索新知 基因工程（P76-82） 将表达载体导入受体细胞后，如何判断导入是否成功？ 导入成功，是否说明转基因抗虫棉实验成功？ 探索新知 基因工程（P76-82） 第四步：目的基因的检测与鉴定 类型 步骤 检测内容 方法 分子检测 第一步 转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 PCR等技术 第二步 目的基因是否转录出mRNA PCR等技术 第三步 目的基因是否翻译形成蛋白质 抗原-抗体杂交技术 个体水平鉴定 如抗虫棉的个体水平鉴定： 取等量、生长状况相似的抗虫棉和普通棉接种（饲喂）棉铃虫，一段时间后观察棉铃虫的生长/每株棉铃数 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 转基因生物 鉴定方法 成功标志 抗虫植物 抗病毒植物 抗盐植物 抗除草剂植物 获取目的基因产物的转基因生物 抗虫棉的叶片饲喂害虫 害虫死亡 病毒感染植物 （病毒接种实验） 未出现病斑 盐水浇灌植物 (植物种植在盐碱地） 正常生长 植物喷洒除草剂 正常生长 提取细胞产物与天然产品进行功能活性比较 功能、活性正常 个体生物学水平的鉴定 拓 展 DNA分子杂交技术 a.首先取出转基因生物的基因组DNA； b.将含目的基因的DNA片段用放射性同位素等做标记，以此做探针； c.使探针和转基因生物的基因组DNA杂交，若显示出杂交带，表明目的基因已插入染色体DNA中。 是一段带有检测标记（荧光或同位素标记），且顺序已知的，与目的基因能互补的DNA序列。 基因探针 变性 变性 转基因生 物的DNA 15N 15N 基因探针 碱基互补配对 原理： 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 小 结 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 2 3 4 1 目的基因的筛选与获取 常用PCR获取和扩增 目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点 花粉管通道法、农杆菌转化法、显微注射法、 Ca2+处理 分子检测：是否插入、转录、翻译 个体水平：是否具有抗性以及抗性强度等。 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 课本P83 1.在实际种植过程中，棉铃虫是否对转Bt基因的抗虫棉产生了严重的抗性？证据是什么？ 2.科研工作者在没有发现棉铃虫出现抗性之前，就应该想办法应对。他们想出的延缓棉铃虫对Bt抗虫蛋白产生抗性的措施有哪些？这些措施的原理是什么？有效吗？ 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 【22年湛江】为提高转基因抗虫棉的抗虫持久性，可采取两个方面的策略：①基因策略——提高杀虫基因的表达量，向棉花中转入多种杀虫基因等；②田间策略——主要是为棉铃虫提供庇护所。例如我国新疆棉区，在转基因棉田周围种植一定面积的非转基因棉花，为棉铃虫提供专门的庇护所。关于上述基因策略和田间策略，下列叙述错误的是（    ） A．提高Bt基因的表达量，可降低抗虫棉种植区的棉铃虫种群密度 B．转入棉花植株的两种Bt基因的遗传不一定遵循基因的自由组合定律 C．转基因棉田周围种植非抗虫棉，可降低棉铃虫抗性基因的突变率 D．为棉铃虫提供庇护所，可使敏感棉铃虫在种群中维持一定比例，从而使棉铃虫种群抗性基因频率增速放缓 C 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 课本P83 一、概念检测 1.研究人员将一种海鱼的抗冻蛋白基因afp整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，然后用它侵染番茄细胞，获得了抗冻的番茄品种。判断下列相关表述是否正确。 （1）afp基因是培育抗冻番茄用到的目的基因。 （ ） （2）构建含有afp基因的Ti质粒需要限制酶、DNA连接酶和核酸酶（ ） （3）只要检测出番茄细胞中含有afp基因，就代表抗冻番茄培育成功（ ） 2.利用PCR既可以快速扩增特定基因，也可以检测基因的表达。下列有关PCR的叙述错误的是（ ） A. PCR用的DNA聚合酶是一种耐高温酶 B. 变性过程中双链DNA的解开不需要解旋酶 C. 复性过程中引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则 D. 延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP和4种核糖核苷酸 √ × × D 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 课本P83 1.研究人员在研究转基因烟草中外源卡那霉素抗性基因的遗传稳定性时，发现44株转基因烟草中有4株该基因的遗传不符合孟德尔遗传规律，在它们的自交后代中出现了较多的没有卡那霉素抗性的植株。请查找相关资料，尝试对这个问题作出解释。 外源基因插入基因组中可能为单位点插入，或者同一染色体多位点插入，或者不同染色体多位点插入。 大多数情况下，插入的位点难以做到定点插入；插入的拷贝数也是随机的。因此，外源基因在转基因植物中的遗传是很复杂的。 部分植株的染色体DNA中整合了多个拷贝的目的基因，从而导致目的基因失活；除此之外，目的基因也可能丢失、基因重排等。 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 (2023·广东卷)种子大小是作物重要的产量性状。研究者对野生型拟南芥(2n=10)进行诱变,筛选到一株种子增大的突变体。通过遗传分析和测序,发现野生型DA1基因发生一个碱基G到A的替换,突变后的基因为隐性基因,据此推测突变体的表型与其有关,开展相关实验。 回答下列问题。 (1)拟采用农杆菌转化法将野生型DA1基因转入突变体植株,若突变体表型确实由该突变造成,则转基因植株的种子大小应与　　　　植株的种子大小相近。  (2)用PCR反应扩增DA1基因,用限制性内切核酸酶对PCR产物和 　　　　　进行切割,用DNA连接酶将两者连接。为确保插入的DA1基因可以正常表达,其上下游序列需具备　　　　　 　　。  野生型 载体/质粒 启动子和终止子 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 (3)转化后,T-DNA(其内部基因在减数分裂时不发生交换)可在基因组单一位点插入也可以同时插入多个位点。在插入片段均遵循基因分离及自由组合定律的前提下,选出单一位点插入的植株,并进一步获得目的基因稳定遗传的植株,用于后续验证突变基因与表型的关系。 ①农杆菌转化T0代植株并自交,将T1代种子播种在选择培养基上,能够萌发并生长的阳性个体即表示其基因组中插入了　 。 ②T1代阳性植株自交所得的T2代种子按单株收种并播种于选择培养基,选择阳性率约　　　_%的培养基中幼苗继续培养。 ③将②中选出的T2代阳性植株　　　　(填“自交”“与野生型杂交”或“与突变体杂交”)所得的T3代种子按单株收种并播种于选择培养基,阳性率达到　　%的培养基中的幼苗即为目标转基因植株。   DA1基因/DA1基因和卡那霉素抗性基因 75 自交 100 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 为便于在后续研究中检测该突变,研究者利用PCR扩增野生型和突变型基因片段,再使用限制性内切核酸酶X切割产物,通过核酸电泳即可进行突变检测,相关信息见下图,在答题卡电泳图中将酶切结果对应位置的条带涂黑。 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 课本P98 1.（1）应选择用相同的限制酶或切割能产生相同末端的限制酶 并且注意限制酶的切割位点不能破坏目的基因，质粒的启动子、终止子、标记基因、复制原点等结构。 （2）加入DNA连接酶 重组质粒 (重组DNA分子） 空质粒 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 课本P98 （3）该质粒便于进行双标记筛选。 标记基因AmpR基因可用于检测质粒是否导入了大肠杆菌。（一般只有导入质粒的大肠杆菌才能在添加青霉素的选择培养基生长） LacZ基因的效应，含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色，含有空质粒的大肠杆菌菌落呈蓝色。 （4）白色。因为目的基因的插入破坏LacZ基因结构，使其不能形成β-半乳糖苷酶，底物X-gal不会被分解。 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 评价P37 实时荧光RT-PCR技术可快速检测RNA病毒的核酸。检测原理如图所示,探针是含荧光基团并有特定序列的DNA单链。下列说法错误的是    A.逆转录和杂交DNA扩增所需的原料相同 B.逆转录、扩增和分子杂交中碱基配对情况相同 C.病毒RNA的遗传信息通过逆转录传递给单链DNA D.逆转录和杂交DNA扩增所需酶种类不同 B 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 评价P38 9.(2025·广东卷)Solexa测序是一种将PCR与荧光检测相结合的高通量测序技术。为了确保该PCR过程中,DNA聚合酶催化一个脱氧核苷酸单位完成聚合反应后,DNA链不继续延伸,应保护底物中脱氧核糖结构上的 (　　) A.1'-碱基    B.2'-氢        C.3'-羟基     D.5'-磷酸基团 C 探究·实践 探究·实践 探究·实践 探究·实践 练习与应用 （23年广，21）（农杆菌）基因工程与遗传联系 → （24年省一模，20）、(24年广三模，21)、（25年河北，23）T-DNA、（25河南，20）、（25年安徽，19）、（25年山东，22） （24年广，21）光控工程菌染色，通用型、特异性启动子 → （25深一模21）光控，乳糖操纵子 （25年广，21）工程菌调控→（26年深一模21）工程菌释放药、（26年佛一模21）基因工程改造细菌，激活免疫细胞 （24年深一模，19）双价抗虫 （24省二模，19）纳米抗体 （24江一模，20）异种移植 （24佛二模21）融合蛋白 （25佛二模21）逻辑基因线路 （25深二模21）噬菌体表面展示技术 （23年江苏，21）融合基因表达 （25山东，25）、（25陕、山宁、青，21）、（25年河南，21）选限制酶 （25年北京，21）微卫星DNA （25年安徽20）、（25年江一模，16）同源区段交换探究及载体 重难点 农杆菌转化法（P81） 农杆菌转化具体如何操作？根据受体植物不同，所用转化方法有所区别： 含重组Ti质粒的农杆菌 导入植物细胞 （转化） 方法2：可将花序直接浸没在农杆菌溶液中，培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定。 方法1：从新鲜叶片取圆形小片与农杆菌共培养，筛选出转化细胞，并再生成植株。 Lavf58.76.100 1440.0 Lavf59.27.100 Bilibili VXCode Swarm Transcoder v1.0.5 Lavf57.71.100 Bilibili VXCode Swarm Transcoder r0.2.61(gap_fixed:False) Lavf58.29.100 Lavf58.29.100 Bilibili VXCode Swarm Transcoder v0.7.64 Lavf58.29.100 Bilibili VXCode Swarm Transcoder v0.3.39 $