四川广安市加德学校2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

广安加德学校2025-2026学年下期高二半期考试 生物 考试时间：75分钟满分：100分 第I卷（选择题） 一、单选题（共20小题，共60分） 1.图1为生态系统的组成成分之间的关系，图2为某生态系统的食物网。下列相关叙述错误的是 B ( ) ,食虫鸟 A.与图1相比，图2中没有非生物的物质和能量以及分解 ,植食性昆虫→食虫昆虫 者 植物 蛙蛇 B.图1中的成分B主要是由营腐生生活的细菌和真菌构成 老鼠 图1 图2 C.图2中的生态系统中共有8条食物链，鹰占有4个营养 级 D.若其他生物不变，蛇灭绝，一段时间后，鹰的数量不变 2.为了掌握牛蛙在草海湿地的种群分布现状，研究小组对牛蛙种群、本地蛙种群数量变化进行了跟 踪调查，获得了调查数据并建立了相关的数学模型，如题图、b、c所示。下列分析不合理的是 ( ) 60… 60 K=438B ·50 40 …40 30… …30 20 20… 10 0 t时间 图：牛蛙、本地蛙种种群数量变化图：牛蛙成体解剖食物组成（体积百分比）图c本地蛙类成体解剖食物组成（体积百分比） A.牛蛙入侵当地初期由于缺少天敌制约，其种群数量变化类似于图a中的曲线A B.本地蛙类种群数量变化如曲线B,则在t时刻本地蛙类种群的年龄组成可能是稳定型 C.为保护本地蛙类资源，并能获得最大捕捉量，应使本地蛙类种群数量保持在约为219 D.结合图b、c判断，本地蛙类与牛蛙之间的关系仅为种间竞争 3.实验小组用不同浓度的NAA(生长素类似物)溶液处理玉米种子，几天后测量萌发种子的根长和 芽长，求平均值，结果如图。由图可知正确的是 ) 5000* 芽 长 A.根生长的最适NAA浓度高于芽 6 (cm) B.高浓度NAA抑制根和芽生长 C.对根产生抑制的NAA浓度仍能促进芽生长 030.60.91215 NAA浓度(mg·L-1) D.不添加NAA时根和芽的生长不受激素调节 4.小鼠注射某药物造成肾功能异常，尿中出现大量蛋白质，血浆蛋白减少。下列叙述错误的是 试卷第1页，共8页 ( A.血浆蛋白丢失可造成血液中抗体减少，机体免疫力下降 B.注射该药物还会导致小鼠出现组织水肿的症状 C.血浆蛋白形成的渗透压高于血浆Na和CI形成的渗透压 D.尿素属于细胞外液的成分，可由肾脏形成尿液排到体外 5.T细胞的受体蛋白PD-1有调控T细胞增殖、活化和细胞免疫等功能。肿瘤细胞膜上的PD-L1蛋白 与T细胞的受体PD-1结合引起的一种作用如图所示。下列叙述错误的是( ) 肿瘤细胞 T细胞 肿瘤细胞 T细胞 PD-L1 PD-1 PD-L1 PD-1 干扰素十 干扰素 A. PD-L1与PD-1的识别和结合体现了细胞膜的信息交流功能 B.PD-L1蛋白可使肿瘤细胞逃脱T细胞的细胞免疫 C.PD-L1与PD-1的结合增强T细胞的肿瘤杀伤功能 D.细胞毒性T细胞识别和清除肿瘤细胞体现了免疫系统的免疫监视功能 6.某同学按照如图所示的滤膜法测定某处水中大肠杆菌的含量，生长在伊红-亚甲蓝培养基(EMB培 养基)中的大肠杆菌呈现深紫色。下列叙述正确的是( 无菌 滤膜上的菌落 滤杯 无菌镊子 镊子 待测样品 滤膜 滤膜 37℃培养 装滤膜 过滤 24h 222 EMB培养基 滤瓶 培养后的平板 A.实验用到滤膜和水样都需要提前灭菌处理 B.与稀释涂布平板法相比，滤膜法更适用于浓度过高的菌液的计数 C.过滤后的滤膜需紧贴在EB培养基上，以完成大肠杆菌的接种操作 D.用滤膜法检测被动物粪便严重污染的水体中大肠杆菌数量，结果最可能偏大 7.下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是( A.利用乳酸菌制作泡菜过程中，先通气培养，后密封发酵 B.家庭制作果酒、果醋通常都不是纯种发酵 C.果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反 D.酵母菌中只存在一种与蛋白质合成有关的细胞器一一 核糖体 8.酿造米酒以其独特的风味和丰富的营养受到消费者的青睐。传统酿造工艺生产米酒是利用酒曲作 为糖化发酵剂，由于酒曲质量不稳定造成了米酒产品品质差异大，质量稳定性差。为了优化其发酵条 件，科技工作者以米曲霉及酿酒酵母为发酵菌株，采用两步发酵法制备酒，流程如图所示。下列说法 试卷第2页，共8页 错误的是( 米曲霉 酿酒酵母扩大培养 大米→浸泡→蒸煮→制曲·米曲第一步发酵一水 水 大米→浸泡→蒸煮→熟米第二步发酵 ·发醪液·过滤·米酒 A.米曲中微生物分泌的酶可将大米中的淀粉转变成单糖等，会使米酒具有甜味 B.将米曲霉和酿酒酵母分别培养使两菌株处于优势地位 C.待熟米冷却至35℃时即可加入第一次发酵产物并在该温度下进行二次发酵 D.相对传统工艺，两步发酵法能有效提高产酒的能力 9.防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，下列关于微生物的基本培 养技术的叙述，错误的是() A.蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源和维生素等营养物质 B.普通培养基中只要有对应所需的营养物质，就可以培养任何微生物 C.在对接种室进行紫外线消毒前，适量喷洒苯酚溶液，可以加强消毒效果 D.培养某些微生物时需要添加特殊营养物质是因为其自身不能合成该种物质 10.紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的二萜类生物碱类化合物，是一种有效的抗癌药物，传统生产 方法是从红豆杉树皮和树叶中提取，下图为利用植物细胞工程生产紫杉醇的流程图，相关叙述正确的 是() 红豆杉 ① ② 愈伤组织 根、芽等 完整 外植体 植 提取、检 测紫杉醇 单个细胞 细胞悬浮液震荡培养 A.紫杉醇是植物代谢活动产生的，属于初生代谢物 B.①②过程通常采用液体培养基，需要适当强度的光照 C.可利用传代培养的动物癌细胞来检测紫杉醇的效果 D.植物细胞培养的原理是植物细胞具有全能性 11.非对称细胞融合技术是指：利用射线照射某原生质体，去除其细胞核：用蕊香红6G处理另一原 生质体，使其细胞质失活，然后诱导两原生质体融合。研究者通过该技术，利用野生雄性不育稻(2=24， 雄性不育基因为细胞质基因)和优良水稻(2=24)来培育优良水稻雄性不育系己获得成功。下列说 法错误的是() A.应用射线照射优良水稻原生质体，用蕊香红6G处理野生雄性不育稻原生质体 B.需在等渗或微高渗环境下用纤维素酶和果胶酶处理两种植物细胞获得原生质体 C.可用聚乙二醇融合法诱导原生质体融合，成功融合的细胞染色体组成为2=24 试卷第3页，共8页 D.原生质体融合成功的标志是形成新的植物细胞壁，该过程与高尔基体有关 12.下列关于植物组织培养、微生物培养、动物细胞培养过程的描述，正确的是() A.马铃薯琼脂培养基的碳源一般是马铃薯滤液和葡萄糖，MS培养基的碳源通常是蔗糖 B.哺乳动物细胞培养的温度在36.5℃左右，多数动物细胞生存的适宜pH为7.1-7.4 C.纯化微生物、植物组织培养和动物细胞培养所用的都是固体培养基 D.植物组织培养过程中，愈伤组织细胞的代谢类型为自养需氧型 13.下图1为某单克隆抗体的制备流程，图2为图1过程②的具体操作。下列相关叙述错误的是( 模型 制备成细 小鼠 胞悬液 B淋巴细胞 融合 ① 杂交瘤 ② 阳性克隆 细胞 细胞 大培养 骨髓瘤细胞 养 图1 L多孔玻璃板 b L性上山L士（细胸森） 阳性反应 道IKLL11ELLH山 图2 A.图1中制备细胞悬液时可采用机械方法或用胰蛋白酶处理 B.过程②中筛选出的杂交瘤细胞还需要抗原刺激才能产生特异性抗体 C.用多孔玻璃板培养和筛选杂交瘤细胞时，每个孔中尽量只接种1个细胞 D.出现阳性反应的原因是抗原与抗体发生了特异性的结合 14.随着动物细胞工程和胚胎工程的迅猛发展，用引进的良种奶牛大量、快速繁殖满足了我国对奶类 的大量需求。下图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，相关分析错误的是( ) 方法1 公牛(A牛) 精子 受精卵 →胚胎 +E牛 激素一卵子 处理 良种奶生《B生 母牛子宫 方法Ⅱ 峁撐细胞拨……D洋) 细胞 去核卵母细胞 →重构胚 +F牛 良种奶牛(C牛)→乳腺细胞+细胞核 A.通过方法I、Ⅱ培育优良种牛E和F的本质都是有性生殖 B.方法I中B牛的卵子需培育到MⅡ期才具备与精子受精的能力 C.在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体可作为受精的标志 D.方法I、Ⅱ获得的胚胎通常需培养至囊胚阶段再移植入D牛的子宫内 15.体细胞核移植技术是将供体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，培养一段时间后，再把发育中 的重构胚移植到动物体内的方法。下列相关叙述错误的是() 试卷第4页，共8页 A.体细胞核移植技术可培育转基因克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 B.体细胞核移植技术得到的克隆动物拥有供体、受体和代孕母体三亲的遗传物质 C.核移植得到的绝大多数克隆动物存在健康问题，许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷 D.非人灵长类动物体细胞核移植技术困难的原因之一是供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能 完全恢复其分化前的功能状态 16.2023年11月，我国科研人员利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干细胞高贡献的活体嵌合猴，该研 究部分过程如图所示，由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度嵌合于受体胚胎，使得后代 活体嵌合猴的各种组织中，高达90%的细胞来源于供体胚胎干细胞。下列有关叙述正确的是（) 胚胎移植 分娩 3 显微注在外梦○ 8 GFP+供体猴ES细胞受体猴桑葚胚嵌合囊胚 代孕雌猴 活体嵌合猴 (注：GP指表达绿色荧光标记蛋白基因，可监测供体干细胞的存活情况以及其在嵌合体不同组织 中的分化、分布情况。) A.代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促性腺激素的饲料进行同期发情处理 B.图示过程中涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等工程技术 C.具有清晰GFP信号的囊胚才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴 D.由图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质的一半来源于代孕雌猴 17.下表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。如图是酶切后 产生的几种末端。下列说法正确的是( 限制酶 AluI BamHI SmaI Sau3AI AG↓CT G↓GATCC CCC↓GGG ↓GATC 识别序列切割位点 TC↑GA CCTAG↑G GGG↑CCC CTAG↑ A -ACTAG ④ ⑤ A.BamHI和A1uI切割的是相应识别序列中的所有磷酸二酯键 B.Sau3AI和BamHI切割产生的片段能够相连，连接后的片段两者都能再切割 C.②④⑤对应的识别序列均能被Sau3AI识别并切割 D.T4DNA连接酶既能连接①③，也能连接②⑤，但前者连接效率高 18.基因工程需要用到多种酶，通常还需要用人工改造的质粒作为载体。下列相关叙述正确的是( A.限制酶主要是从真核生物中分离纯化出来的，具有特异性 B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应 C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 试卷第5页，共8页 D.DNA连接酶、RNA聚合酶和DNA聚合酶都能催化磷酸二酯键的形成 19.关于聚合酶链式反应，模板DNA两条链分别为a和B链，下列有关叙述错误的是() A.设计引物时需要参考被扩增片段的部分脱氧核苷酸序列 B.若引物②与α链结合，则PCR仪中引物①的数量等于引物②的数量 C.经PCR扩增后，可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定得到的DNA D.在PCR反应缓冲液中需加入Mg2+、解旋酶、耐高温的DNA聚合酶等物质 20.目的基因A含有100对碱基，其中腺嘌呤占30%，现利用目的基因A片段两侧的特异性序列设计 引物I、引物IⅡ，用PCR技术扩增该目的基因，结构如下图所示。PCR扩增共循环50次。下列说法错 误的是( 引物1 引物Ⅱ 目的基因A A.PC仪实质上是一台温度自动调控仪器，循环50次理论上复制50代 B.含目的基因A的DNA片段经PCR循环50次，需要两种引物共2°个 C.PCR过程与体内DNA复制的方式相同，但是只需要一种酶的参与 D.若只考虑目的基因A,经PCR循环50次需要鸟嘌呤(2°-1)×40个 第II卷（非选择题） 二、解答题（共4题，共40分） 21.某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段，制备相应的单克隆抗体，增加 其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。N蛋白胞外段抗原制备流程如图1，分析回答下列问题： N蛋白胞外段基因脂质体 病毒包组装 收集 感染海拉病毒N蛋白胞外段 6 重组慢病毒质粒 导入 装细胞释放 病毒 表达、纯化 图1 图2 (1)用脂质体（如图2）将重组慢病毒质粒导入病毒包装细胞，质粒被包在脂质体 (填“a”或 “b”)处。 (2)质粒在包装细胞内组装出由2种组分组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、 纯化N蛋白胞外段。 (3)N蛋白胞外段单克隆抗体制备流程如图3，分析回答下列问题： 试卷第6页，共8页 N蛋白胞外段 免疫小鼠 骨髓瘤细胞 取脾组织 B淋巴细胞悬液 融合 多种杂交细胞 选择性 培养基 扩大培养 N蛋白胞外段抗体 单克隆杂交瘤细胞株 96孔板 杂交瘤细胞 图3 用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用 酶处理，制成细胞悬液，置于含 有混合气体的中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，利用了细胞膜 的结构特点。 (4)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行克隆化培养。 用原理检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细 胞株，将其进行扩大培养，扩大培养的方法有哪些，经扩大培养后，提取单克隆抗体。 (5)利用此方法获得的单克隆抗体的优点是 (答出任意两点)。 22.科学家成功培育出番茄一一马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色 荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如下图所示。请据图回 答下列问题： 9 番茄细胞 a 移栽 杂种植 D 马铃薯细胞b (1)番茄 马铃薯植株的培育过程采用的是 技术。过程①常用的酶是 与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器是 :过程⑤依据的生物学原理是 (2)在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面的荧光可观察到 种不同的原生 质体（只考虑细胞两两融合的情况），当观察到 时可 判断该原生质体是由番茄原生质体和马铃薯原生质体融合而成的。植物体细胞融合完成的标志是 0 (3)若番茄细胞内含m条染色体，马铃薯细胞内含条染色体，则“番茄一一马铃薯”杂种植株的体 细胞内含 条染色体；若由杂种细胞培育成的“番茄一一马铃薯”植株为四倍体，则此杂 种植株的花粉经离体培养得到的植株为几倍体？ 23.羊乳中的B-乳球蛋白(BLG)是人体主要过敏原。为解决奶制品过敏问题，科研人员利用基因编 辑技术敲除山羊细胞中的BLG基因，同时转入人乳铁蛋白(hLF)基因。下图是制备转基因山羊的流 程图，请据此回答： 试卷第7页，共8页 sgBLG/Cas9 sgBLG/Cas9 复合物1 复合物2 BG基因 hF基因☐ 注：sgBLG/Cas9复合物中，sgBLG是能准确识别山羊DNA 母羊甲的 ① 某条DNA片段 hLF基因 特定序列的RNA,并引导Cas9蛋白对DNA进行切割。 母羊乙成纤维细胞 2 (1)Cas9蛋白类似于基因工程中常用到的 酶，能断 (S 开 键，但Cas9蛋白特性与该酶的区别是 母羊丁子宫 母羊丙卵细胞 转基因山羊 (2)图中复合物1识别的DNA序列为5'-TATACTGGC-3',则sgBLG序列为 A.5′-AUAUGACCG-3' B.5′-GCCAGTATA-3' C.5′-ATATGACCG-3' D.5′-GCCAGUAUA-3' (3)过程③中，作为受体细胞的“母羊丙卵细胞”实际是培养成熟的 (时期)卵母细胞，在 对其去核时，还应同时去除位于 内的第一极体。 (4)过程④体外培养重构胚时，须提供适宜的营养物质、创造 的环境、适宜的 和适 宜的气体环境。过程⑤一般选择培养发育到桑葚胚或囊胚阶段的胚胎移植到母羊丁子宫中。 (5)正常胚胎发育初期会发生染色质重塑：DNA去甲基化和染色体上组蛋白的乙酰化。重构胚中来自 体细胞的染色质会抵抗这种重塑。有研究表明用去甲基化酶(K)处理核移植得到的胚胎，可提高胚 胎发育率。科研人员用K和T（去乙酰化酶抑制剂)处理重构胚后再进行胚胎移植，检测并计算出发 育成囊胚的比例（囊胚率=囊胚数/重构胚），结果如图，T+K处理的结果明显高于T单独处理。下列 相关推测不合理的有 501 17/38 40 A.对照组与实验组重构胚的核DNA序列不同 B.K、T分别降低了DNA甲基化与组蛋白乙酰化程度 430 5/31 10 C.K、T可能通过类似方式提高重构胚的囊胚率 0 对照 T处理T+K处理 D.K、T通过改变重构胚中DNA的碱基排序提高囊胚率 24.葡萄被人们视为珍果，被誉为世界四大水果之首，它营养丰富、用途广泛、色美、气香、味甜， 是果中佳品，可鲜食又可酿制葡萄酒、葡萄醋，为了进一步提高经济效益，某葡萄园的技术员准备对 葡萄进行深加工及相应的研究。回答下列问题： (1)用传统发酵技术制作葡萄酒，将葡萄汁装入发酵瓶时，要留大约1/3的空间，目的是便于发酵初 期酵母菌进行 （填“有氧呼吸”或“无氧呼吸”)快速繁殖，以及防止发酵过程中产生的 造成发酵液溢出。 (2)在葡萄酒发酵的基础上，技术员又准备进行葡萄醋的发酵，接下来的操作应该是打开瓶盖，盖上 一层纱布，将温度控制在 ℃：用葡萄酒制作葡萄醋的反应简式为 (3)为了缩短发酵时间，确保品质稳定，工业上大规模生产时，通常会先通过微生物培养技术获得单 一酵母菌菌种，再将它们接种到物料中进行发酵。培养酵母菌的培养基一般含有水、无机盐、 和氮源，氮源进入细胞后，可参与 和核酸等生物大分子的合成：培养基需用 法灭菌； 判断配制的培养基是否被杂菌污染，实验思路是 试卷第8页，共8页 《2025-2026学年度高中生物5月月考卷》参考答案 题号 y 2 4 5 6 8 9 10 答案 ) D C C B 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 A A B A B O D 0 ⊙ 1.D 【详解】A、图1中代表的是物质循环过程，其中包含了生态系统的各个组分，与图1相比， 图2中只有生产者和消费者，其中没有非生物的物质和能量以及分解者，A正确： B、图1中的成分B为分解者，主要是由营腐生生活的细菌和真菌构成，能将动植物遗体以 及粪便中的有机物分解成无机物，B正确： C、食物链起点为生产者（该图的植物），终点为不流向其他消费者的营养级（该图的鹰）， 因此图2中的生态系统中共有8条食物链，鹰占有4个营养级，分别是第三、四、五和六营 养级，C正确： D、若其他生物不变，蛇灭绝，则鹰的营养级会有所下降，因此，一段时间后，鹰的数量可 能增多，D错误。 故选D。 2.D 【分析】分析题图可知，图中曲线A为“”型曲线（理想条件下），曲线B为S型曲线（环 境条件有限条件下)。在环境条件不受破坏的情况下，一定空间中所能维持的种群最大数量 称为环境容纳量，又称K值。 【详解】A、牛蛙入侵初期缺少天敌、资源充足，种群呈'型增长（图a曲线A),A正确： B、曲线B为S”型，在t1时刻达环境容纳量K,种群数量稳定，年龄组成可能为稳定型，B 正确： C、“S”型曲线中，K/2(438÷2=219)时增长速率最快，故为保护本地蛙类资源，并能获得 最大捕捉量，应使本地蛙类种群数量保持在约为219左右，C正确： D、图b、c显示牛蛙与本地蛙食性有重叠（如均捕食昆虫类），存在种间竞争；但无法排除 捕食关系（如牛蛙捕食本地蛙幼体，题目未明确否定），故“仅为种间竞争的结论过于绝对， D错误。 故选D。 3.C 答案第1页，共14页 【分析】由人工合成的，对植物的生长、发育有调节作用的化学物质，称为植物生长调节剂。 植物生长调节剂具有原料广泛、容易合成、效果稳定等优点，在农林园艺生产上得到广泛的 应用。 【详解】A、根对生长素敏感，生长的最适NAA浓度低于芽，A错误： B、据图可知，与对照相比，实验范围内的NAA浓度对于芽都是促进而无抑制作用，B错 误： C、图示0.6-1.5的浓度范围内，NAA抑制根的生长，但仍促进芽生长，C正确： D、植物自身能合成并调节生长的激素，不添加NAA时根和芽的生长仍受到激素调节，D 错误。 故选C。 4.C 【分析】内环境的理化性质主要包括温度、pH和渗透压： (1)人体细胞外液的温度一般维持在37℃左右。 (2)正常人的血浆接近中性，pH为7.35~7.45，血浆的pH之所以能够保持稳定，与它含 有的缓冲物质有关。 (3)血浆渗透压的大小主要与无机盐、蛋白质的含量有关。在组成细胞外液的各种无机盐 离子中，含量上占有明显优势的是Na和CI,细胞外液渗透压的90%来源于Na和CI。 【详解】A、抗体是机体重要的免疫活性物质，为专门应对抗原的蛋白质，分布于血浆和组 织液等。该小鼠的肾脏功能异常造成的血浆蛋白流失可引起血浆中抗体减少，机体免疫功能 降低，A正确： B、分析题意，注射该药物导致尿液中的蛋白质增多，血浆中的渗透压降低，更多的水进入 组织液引起组织水肿，B正确： C、渗透压的大小主要取决于单位体积溶液中溶质微粒的数日，血浆中Na和Cl的数目远多 于血浆蛋白的数目，其形成的渗透压远高于血浆蛋白形成的渗透压，C错误； D、尿素是体内含氮物质（如蛋白质）代谢的终产物，可以通过血液运输排到体外，属于内环 境的成分，D正确。 故选C。 5.c 【分析】据图可知，当肿瘤细胞膜上的PD-L1蛋白与T细胞的受体PD-1结合时，T细胞 不能产生干扰素，不能对肿瘤细胞起作用，使肿瘤细胞逃脱T细胞的细胞免疫：当肿瘤细 答案第2页，共14页 胞膜上的PD-L1蛋白与T细胞的受体PD-1不结合时，T细胞产生干扰素对肿瘤细胞起免 疫作用，杀伤肿瘤细胞。 【详解】A、当PD-L1与PD-1结合后，细胞毒性T细胞可识别正常细胞，该过程体现了 细胞膜进行细胞间信息交流的功能，A正确； B、肿瘤细胞膜上的PD-L1蛋白可以与T细胞的受体PD1结合，导致T细胞不能产生干扰 素，使肿瘤细胞逃脱T细胞的细胞免疫，B正确： C、PD-L1与PD-1的结合，导致T细胞不能产生干扰素，因此PD-L1与PD-1的结合会降 低T细胞的肿瘤杀伤功能，C错误； D、免疫监视是机体识别和清除突变的细胞、防止肿瘤发生的功能，D正确。 故选C。 6.C 【分析】1、伊红美蓝培养基通常用于鉴别大肠杆菌，其原理是大肠杆菌能分解乳糖产生大 量的混合酸，菌体带，故菌落被染成黑色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。 2、由题图信息分析可知，滤膜法是检测水样中大肠杆菌群的方法。将一定量水样注入已灭 菌的微孔薄膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于(EB培养基)上， 经培养后计数和鉴定滤膜上生长的大肠杆菌菌落，依据过滤水样体积计算每升或每100毫升 水样中的大肠杆菌菌群数。该方法操作简单、快速，主要适用于杂质较少的水样。 【详解】A、实验用到滤膜需要提前灭菌处理，水样不能灭菌，A错误； B、与稀释涂布平板法相比，滤膜法更适用于浓度过低的菌液的计数，B错误： C、过滤后的滤膜需紧贴在EMB培养基上，以完成大肠杆菌的接种操作，C正确： D、用滤膜法检测被动物粪便严重污染的水体，由于大肠杆菌的数量过多，从而使一个或多 个细菌长到一起，进而导致大肠杆菌数量可能比实际值偏小，D错误。 故选C。 7.B 【分析】利用酵母菌进行酒精发酵，先通空气使其在有氧环境下有氧呼吸，从而获得大量能 量进行繁殖，再隔绝氧气进行发酵，酒精发酵的最适温度是在18℃~25℃，pH弱酸性。利 用醋酸菌进行醋酸发酵，因为醋酸菌是好氧细菌，始终通空气，当缺少糖源时和有氧条件下， 可将乙醇（酒精）氧化成醋酸，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸， 醋酸菌生长的最佳温度是在30℃~35℃。利用乳酸菌进行乳酸发酵，乳酸菌是厌氧型细菌， 全程在无氧条件下进行，乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖等分解为乳酸。 答案第3页，共14页 【详解】A、乳酸菌是厌氧型细菌，利用乳酸菌制作泡菜过程中，始终要密封发酵，A错误； B、纯种发酵指用单一菌种发酵，家庭制作果酒、果醋利用的是果皮上附着的野生菌种，野 生菌种有很多种类，不是单一菌种，所以通常都不是纯种发酵，B正确： C、果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中产生二氧化碳，与水作用生成碳 酸，发酵液pH也逐渐降低，C错误： D、酵母菌是真核生物，其细胞种含有与蛋白质合成有关的细胞器有：核糖体（氨基酸脱水 缩合为肽链)、内质网和高尔基体（肽链的盘曲折叠及加工运输）、线粒体（进行有氧呼吸为 蛋白质合成提供能量)等，D错误。 故选B。 8.C 【分析】1、多糖：由多个单糖缩合而成，是生物体内糖绝大多数的存在形式，必需水解为 单糖后才可被吸收，最常见的是淀粉，作为植物细胞内的储能物质存在于细胞中。另外还有 糖原作为动物细胞的储能物质存在于动物细胞中。纤维素是构成植物细胞壁的主要成分之一。 2、温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，28℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将 温度控制在1830C。 【详解】A、淀粉本身是多糖，无甜味，在米曲中微生物分泌的酶作用下分解为单糖葡萄糖， 使米酒具有甜味，A正确： B、米曲霉和酿酒酵母一起培养会存在种间竞争，分开培养可以使两菌株处于优势地位，B 正确： C、温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，28℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将 温度控制在18~30℃，该发方法是采用两步发酵法制备酒，所以不能在35C条件下进行，C 错误； D、两步发酵法利用了米曲霉和酿酒酵母的扩大培养，相比于传统工艺，两步发酵法能有效 提高产酒的能力，D正确。 故选C。 9.B 【分析】消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法 杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的 微生物，包括芽孢和孢子。消毒方法包括煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外 线消毒法：常用的灭菌方法包括干热灭菌法、灼烧灭菌法、湿热灭菌法（如高压蒸汽灭菌法）。 答案第4页，共14页 【详解】A、蛋白胨是含C、的有机物，可以为微生物的生长提供碳源、氮源和维生素等， A正确： B、满足微生物生长除需要所需的营养物质，还需要适宜的pH、氧气的要求、特殊营养物 质等，如厌氧菌的培养需要在无氧的环境下培养，培养细菌一般p为中性或碱性条件，B 错误； C、用紫外线照射30s,可以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒苯酚等 消毒液，可以加强消毒效果，因此在对接种室进行紫外线消毒前，适量喷洒苯酚溶液，可以 加强消毒效果，C正确： D、在培养微生物时，往往都要在培养基中添加水、碳源、氨源和无机盐等营养物质，同时 还需添加微生物生长所需要的特殊物质，添加特殊营养物质是因为其自身不能合成该种物质， D正确。 故选B。 10.c 【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈 伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。 【详解】A、次生代谢物是生物体产生的一大类并非生长发育所必需的小分子有机化合物， 紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种复杂的次生代谢物，A错误： B、①@过程主要是外植体诱导愈伤组织及其分化，一般先在固体培养基上进行，且愈伤组 织诱导常不需强光，B错误： C、紫杉醇具有抗癌作用，能够阻止癌细胞的增殖。通过利用传代培养的动物癌细胞进行检 测，可以有效地评估紫杉醇的抗癌活性，C正确： D、全能性是指细胞发育成个体的潜能，植物细胞培养的原理是细胞增殖，没有体现植物细 胞的全能性，D错误。 故选C。 11.A 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用 植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。在进行植物体细胞杂交时需要使用纤 维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质 体融合，不能用灭活的病毒诱导。可根据植物细胞的质壁分离和复原鉴定杂种细胞是否再生 细胞壁，从而确定原生质体融合是否完成。 答案第5页，共14页 【详解】A、野生雄性不育稻中含雄性不育基因，故应利用射线照射野生雄性不育稻，破坏 其细胞核，用蕊香红6G处理优良水稻原生质体，使其细胞质失活，原生质体融合后就可得 优良水稻雄性不育系（雄性不育基因控制）的新品种，A错误： B、植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性可用纤维素酶和果胶酶进行处 理，得到原生质体，但在低渗环境下植物细胞会吸水涨破，需在等渗或微高渗环境下操作， B正确： C、聚乙二醇融合法、电刺激等方法都可以诱导原生质体融合，利用野生雄性不育稻的染色 体在融合前被去除，仅留下细胞质基因，故融合后的细胞染色体组成为2=24，C正确： D、原生质体融合成功的标志是形成新的植物细胞壁，高尔基体与细胞壁形成有关，D正确。 故选A。 12.A 【分析】1、动物细胞培养在培养过程中要求一定的培养条件：(1)无菌、无毒的环境：① 消毒、灭菌，®添加一定量的抗生素，®定期更换培养液，以清除代谢废物：(2)营养物质： 糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；(3)适 宜的温度和PH;(4)气体环境。 2、植物组织培养培养条件：①在无菌条件下进行人工操作。®保证水、无机盐、碳源（常 用蔗糖)、氮源（含氮有机物）、生长因子（维生素）等营养物质的供应。®需要添加一些植 物生长调节物质，主要是生长素和细胞分裂素。©愈伤组织再分化到一定阶段，形成叶绿体， 能进行光合作用，故需光照。 3、微生物培养基一般都含有水、碳源、氨源、无机盐，此外还要满足微生物生长对H、特 殊营养物质以及氧气的要求。 【详解】A、马铃薯琼脂培养基常用于真菌的培养，其碳源一般是马铃薯滤液和葡萄糖： MS培养基是植物组织培养常用的培养基，其碳源通常是蔗糖，A正确： B、微生物细胞培养的温度因微生物种类不同而有所差异，并不都是在36.5℃左右；多数动 物细胞生存的适宜p为7.2-7.4，B错误； C、纯化微生物所用的是固体培养基，以便于分离单菌落：植物组织培养所用的一般是固体 培养基：但动物细胞培养所用的是液体培养基，因为动物细胞在液体环境中才能更好地生长 和代谢，C错误： D、植物组织培养过程中，愈伤组织细胞没有叶绿体，不能进行光合作用，其代谢类型为异 养需氧型，而不是自养需氧型，D错误。 答案第6页，共14页 故选A。 13.B 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏 中获取已经免疫的B淋巴细胞：诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂 交瘤细胞：进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞：进行克隆化培养，即用培 养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、图中制备细胞悬液时可采用机械方法或用胰蛋白酶（胶原蛋白酶）处理将组织 分散成单个细胞，A正确： B、图1中@为第二次筛选，筛选出的细胞具有既能无限增殖、又能产生特异性抗体的特征， 无需抗原刺激就能产生特异性抗体，B错误： C、为筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞，具体做法是：将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多 孔的细胞玻璃板上，尽量使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖，C正确： D、图2表示过程@，取一定稀释倍数的杂交瘤细胞悬液加入到多孔玻璃板中，在适宜条件 下培养，然后利用抗原与抗体特异性结合的原理进行抗体检测，出现阳性反应的原因是抗原 与抗体发生了特异性的结合，D正确。 故选B。 14.A 【分析】图示是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法。方法是采用体外受精技术获 得试管牛E的过程，因此试管牛E属于有性生殖产物：方法Ⅱ是采用核移植技术获得克隆牛 F的过程，因此克隆牛F属于无性生殖产物。 【详解】A、方法I是试管牛由受精卵发育而来，为有性生殖；方法Ⅱ为克隆牛通过核移植 方式培育而来，为无性生殖，A错误 B、卵母细胞需培养到减数第二次分裂中期(MⅢ中期)才能与精子结合，B正确； C、卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到两个极体，C正确； D、方法I、Ⅱ获得的胚胎通常需培养至桑葚胚或囊胚阶段再移植入D牛的子宫内，D正确。 故选A。 15.B 【分析】体细胞核移植技术的应用：(1)畜牧业：可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜 群繁育。(2)保护濒危物种：可望利用体细胞核移植技术增加濒危动物的存活数量。(3)医 药卫生：转基因克隆动物可作为生物反应器，生产珍贵医用蛋白；转基因克隆动物细胞、组 答案第7页，共14页 织和器官可作为异种移植的供体；人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化，形成相应的组织、 器官后，可用于组织器官的移植。(4)其他领域：研究克隆动物和克隆细胞可使人类深入了 解胚胎发育及衰老过程，用克隆动物做疾病模型能使人们更好追踪研究疾病的发展过程和治 疗疾病。 【详解】A、体细胞核移植技术可以先将目的基因导入供体细胞，然后将含有目的基因的供 体细胞核移植到去核卵细胞中，培育出转基因克隆动物。这些转基因克隆动物可以作为生物 反应器，生产医用蛋白，A正确： B、体细胞核移植技术得到的克隆动物的细胞核遗传物质来自供体，细胞质遗传物质来自受 体（去核卵细胞），代孕母体只是为胚胎发育提供场所和营养等条件，并不提供遗传物质。 所以克隆动物拥有供体和受体两亲的遗传物质，而不是三亲，B错误； C、目前核移植得到的绝大多数克隆动物存在健康问题，许多克隆动物表现出遗传和生理缺 陷，这是核移植技术面临的现实情况，C正确： D、非人灵长类动物体细胞核移植技术困难的原因之一就是供体细胞核在去核卵细胞中不能 完全恢复其分化前的功能状态，影响了胚胎的正常发育等过程，D正确。 故选B。 16.C 【分析】胚胎干细胞（简称E$细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何 一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 【详解】A、促性腺激素是蛋白质，饲喂含促性腺激素的饲料时促性腺激素会被消化，失去 其功能，A错误； B、据图可知，图示过程没有涉及体外受精技术，B错误： C、具有清晰GP信号的囊胚，说明此囊胚被成功导入供体猴S细胞，才能被转移至代孕 雌猴体内，否则难以获得嵌合猴，C正确： D、据图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中既有供体猴的细胞、也有受体猴的细胞，故 细胞中的核遗传物质源于受体猴或源于供体猴，D错误。 故选C。 17.C 【分析】限制性内切核酸酶，简称限制酶：(1)来源：主要从原核生物中分离纯化出来；(2) 特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两 个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂：(3)结果：形成黏性末端或平末端。 答案第8页，共14页 【详解】A、限制酶切割的是特定识别序列中特定的磷酸二酯键，并非所有磷酸二酯键。以 BamⅡ为例，它识别的是G)GATCC,只切割箭头处的磷酸二酯键，并非识别序列中的所有 磷酸二酯键，A错误； B、Su3AI识别序列是LGATC,BamHI识别序列是GIGATCC,它们切割后产生相同的黏性 末端。连接后片段的两端不一定都能被再次切割，比如Sau3AI和BamIⅡ切割后的片段连接， 连接后可能不再是BanⅡ的完整识别序列，不能被切割，B错误： C、Sau3AI识别序列是LGATC。@的末端是-GATC-,④的末端是-GATC-,⑨的末端是 -CTAG-(其互补链为-GATC),所以@@⑤对应的识别序列均能被Sau3AI识别并切割， C正确； D、T4DNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端。但连接平末端的效率比连接黏性 末端的效率低，D错误。 故选C。 18.D 【分析】基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，需要多种酶的参与，如限制 酶、DA连接酶等，同时常用人工改造的质粒作为载体来携带目的基因进入受体细胞。 【详解】A、限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，A错误； B、PCR反应中温度的周期性改变是为了变性、复性和延伸，而不是为了DA聚合酶催 化不同的反应，B错误： C、载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，C错误： D、DNA连接酶能将DNA片段之间连接形成磷酸二酯键，RNA聚合酶能催化核糖核苷酸 之间形成磷酸二酯键合成RNA,逆转录酶能催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键合成 DNA,它们都能催化磷酸二酯键的形成，D正确。 故选D。 19.D 【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中 游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA 链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA 的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链。 【详解】A、引物需要与被扩增的DNA两端的模板链互补，因此设计引物时需要参考被扩 增片段的部分脱氧核苷酸序列，A正确： 答案第9页，共14页 B、若引物@与链结合，则引物@延伸的单链与α链互补，本实验目的是获得大量的α链， 故引物@延伸的单链数量应该较少，而引物O延伸的子链与α链的遗传信息相同，故PC 仪中引物①的数量要大于引物®，才能保证引物@被消耗完，在引物▣的作用下扩增出的是 a链，B正确： C、该实验目的是通过PCR技术获得目的基因的其中一条单链DNA片段(a链)，因此经 PCR扩增后，可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定得到的单链DNA,C正确； D、PCR技术扩增DNA时不需要解旋酶，D错误。 故选D。 20.B 【分析】PCR技术：(1)概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定 DNA的核酸合成技术。(2)原理：DNA复制。(3)前提条件：要有一段已知目的基因的核 苷酸序以便合成一对引物。(4)条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA 聚合酶(Taq酶)。(5)过程：①高温变性：DNA解旋过程(PCR扩增中双链DNA解开不 需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开)；@低温复性：引物结合到互补链DNA上；© 中温延伸：合成子链。 【详解】A、PCR的实质是DNA的半保留复制，该过程需经过高温变性、低温复性、中温 延伸，PCR仪实质上是一台温度自动调控仪器，循环50次理论上复制50代，A正确： B、含目的基因A的DNA片段经PCR循环50次，产生250个子代DNA,每个DNA分子 需要2个引物，亲本DNA除外，故需要两种引物共21-2个，B错误： C、PCR过程与体内DNA复制的方式相同，都是半保留复制，但是只需要耐高温聚合酶的 参与，C正确： D、由题意可知，目的基因A含有100对碱基，其中腺嘌呤占30%，则G占20%，为40个， 若只考虑目的基因A,经PCR循环50次需要鸟嘌呤(201)×40个，D正确。 故选B。 21.(1)b (2)蛋白质外壳和含N蛋白胞外段基因的核酸 (3) 胰蛋白酶或胶原蛋白 C02培养箱 一定流动性 (4) 抗原与抗体杂交特异性结合 体外培养或在小鼠腹腔中培养 (⑤)能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠 答案第10页，共14页 脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选 出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即 用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养：最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 2、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）：@筛选出 能够产生特异性抗体的细胞群。 3、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。 【详解】(1)重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞需要依赖膜融合，故质粒被包在 脂质体双分子层中，即b层处。 (2)由于目的基因为N蛋白胞外段基因，在包装细胞内组装出由蛋白质外壳和含有N蛋白 胞外段基因的核酸组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化、蛋白胞 外段。 (3)进行动物细胞培养时，需要取小鼠脾组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，制成细胞悬 液，置于含有95%空气和5%的C02混合气体的C02培养箱中培养，利用了细胞膜一定流动 性的结构特点。 (4)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进 行克隆化培养和抗体检测。用抗原抗体杂交技术检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白 胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，扩大培养的方法有体 外培养或在小鼠腹腔中培养，经扩大培养后，提取单克隆抗体。 (5)利用此方法获得的单克隆抗体的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发 生特异性结合，并且可以大量制备。 22.(1)） 植物体细胞杂交 纤维素酶和果胶酶 高尔基体 植物细胞的全能 性 (2) 3/Ξ 融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光 杂种细胞再生出细胞壁 (形成新的细胞壁) (3) m+n 单倍体 【分析】据图示可知：利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物细胞，具体过程包括诱导植物 细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程。过程①是通过酶解法去除 细胞壁获得原生质体ā和b,过程@通过物理或化学方法（如聚乙二醇试剂）诱导原生质体 融合成c,过程®是再生细胞壁形成杂种细胞d,过程④是脱分化过程形成愈伤组织e,过 程©是再分化生成完整植株，过程©和⑤是植物组织培养技术培育完整植株。 答案第11页，共14页 【详解】(1)图示番茄一马铃薯植株的培育过程采用的是植物体细胞杂交过程，该过程以植 物组织培养技术为基础。植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，过 程①可使用纤维素酶和果胶酶处理细胞以除去细胞壁。过程®是细胞壁的再生过程，与此过 程密切相关的具有单层膜结构的细胞器为高尔基体。离体的杂种细胞通过©⑤植物组织培养 技术可培育成为杂种植株，此过程的原理是植物细胞的全能性。 (2)植物原生质体融合过程常利用化学试剂聚乙二醇（或PEG),融合后有3种（番茄与 番茄、番茄与马铃薯、马铃薯与马铃薯)不同类型的原生质体，由于科学家利用红色荧光和 绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，故二者融合所形成的细胞的细胞 膜表面既有红色荧光又有绿色荧光标记。植物体细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞 壁（形成新的细胞壁）。 (3)若番茄细胞内含m条染色体，马铃薯细胞中含n条染色体，则“番茄一马铃薯'细胞内 染色体数为两细胞染色体数之和，即+n条染色体。杂种植株的花粉（生殖细胞）经离体 培育得到的植株属于单倍体植物。 23.(1) 限制/限制性内切核酸 磷酸二酯 Cas9蛋白没有限制酶具有专一识别 DNA分子特定核苷酸序列的特性 (2)D (3) MⅡ期/减数分裂Ⅱ中期/减数第二次分裂中期 透明带 (4) 无菌、无毒 温度、pH、渗透压 (5)ABD 【详解】(1)图注表明：Cas9蛋白可以切割DNA分子，所以与限制酶作用类似，作用是断 开磷酸二酯键。sgBLG能准确识别图中山羊DNA特定序列的RNA,并引导Cs9蛋白对 DNA进行切割，说明Cs9蛋白没有限制性内切核酸酶具有专一识别DNA分子特定核苷酸 序列的特性。 (2)sgBLG为能准确识别图中山羊DNA特定序列的RNA,转录的方向是从DNA模板的 3到5'，因此转录产生的RNA序列是5'-GCCAGUAUA-3',D正确。 (3)在核移植技术中，作为受体细胞的卵母细胞需要培养到减数分裂Ⅱ中期(MⅡ期)，此 时的卵母细胞才具有较高的全能性。在对卵母细胞去核时，还应同时去除位于透明带内的第 一极体。 (4)培养重构胚时，须提供适宜的营养物质，创造无菌、无毒环境，适宜的温度、pH、渗 透压和适宜的气体环境。 答案第12页，共14页 (5)A、DNA去甲基化和染色体上组蛋白的乙酰化不影响DNA序列，所以对照组与实验 组重构胚的核DNA序列相同，A错误： B、由题干可知：去甲基化酶(K)处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率，由图可知， T(去乙酰化酶抑制剂)处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率，K(去甲基化酶)降 低了DNA甲基化，T(去乙酰化酶抑制剂)阻碍去乙酰化，即T提高组蛋白乙酰化程度，B 错误； C、由题干可知：去甲基化酶(K)处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率，由图可知， T(去乙酰化酶抑制剂)处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率，K、T可能通过影响 基因的表达这一途径提高重构胚的囊胚率，C正确； D、DNA去甲基化和染色体上组蛋白的乙酰化不影响碱基排序，所以K、T不改变重构胚中 DNA的碱基排序，D错误。 24.(1) 有氧呼吸 C03 (2) 30-35 C2HOH+O2→酶→CH3COOH+HO+能量 (3) 碳源 蛋白质 湿热灭菌 将未接种的培养基放入适宜温度的恒温箱中 培养2448h,观察有无菌落生长 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当 氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变 为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】(1)用传统发酵技术制作葡萄酒，将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约13的空间， 目的是便于发酵初期酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，防止发酵过程中产生的CO2造成发酵 液溢出。 (2)在葡萄酒发酵的基础上进行葡萄醋的发酵，接下来的操作应该是打开瓶盖，盖上一层 纱布，将温度控制在3035℃；用葡萄酒制作葡萄醋的反应简式为 C,H,OH+0,酶→CH,C0OH+H,O+能量。 (3)培养酵母菌的培养基一般含有水、无机盐、碳源和氮源，氮源进入细胞后，可参与蛋 白质和核酸等生物大分子的合成：培养基需用湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）法灭菌：判断配制 的培养基是否被杂菌污染，实验思路是将未接种（或接种等量无菌水）的培养基放入适宜温 度的恒温箱中培养24~48，观察有无菌落生长。 答案第13页，共14页