生物试题-【鱼跃龙门卷】2026年高二5月试卷（辽宁专版）

5月高二生物学 本试卷共8页，满分100分，考试时间75分钟。 注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号等填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用 橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上 无效。 3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目 要求。 1.山楂果酸甜可口，用山楂果酿造的山楂醋果香鲜爽，其生产流程是先生产山楂酒再生产山楂醋。 下列叙述错误的是 A,接种酵母菌时，应优先选择耐酸型酵母菌 B.发酵产酒阶段，温度应控制在18~30℃且需及时排气 C.接种醋酸菌时，若山楂酒的酒精浓度过高，则需稀释后再接种 D.酒精发酵和醋酸发酵过程中，发酵装置均需保持密封状态 2.某同学制作泡菜时发现坛内液体表面出现白膜，检测亚硝酸盐含量显著升高。下列分析错误 的是 A.白膜由产膜酵母菌形成，需氧条件下繁殖 B.亚硝酸盐含量升高可能与杂菌污染有关 C.延长腌制时间可完全消除白膜和亚硝酸盐 D.腌制泡菜利用了乳酸菌无氧发酵能够产生乳酸的特性 3.LB培养基是微生物学实验室中最常用的基础培养基之一，广泛用于大肠杆菌等细菌的培养，其 配方如表所示。下列叙述错误的是 成分 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 琼脂 含量(g·L1) 10.0 5.0 10.0 15.0 A.该培养基属于固体培养基 B.蛋白胨可以提供碳源、氨源和维生素等 C.一般培养基应先进行灭菌处理再调节pH D.培养基中营养物质浓度过高可能不利于微生物的生长 4.下列关于微生物培养技术及应用的叙述，正确的是 A.利用以尿素为唯一氨源的选择培养基可从土壤中分离分解尿素的细菌 B.稀释涂布平板法和平板划线法均可用于微生物的分离和计数 C.平板划线时最后一次划线要与第一次划线相连，以便统计菌落数 D.接种后需立即倒置以避免皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染 高二·生物学第1页（共8页） 5.发酵工程的基本流程如图所示，其中①~④代表不同的过程。下列叙述错误的是 A.①过程除了从自然界分离菌种，还可用基因工程从自然界分离的菌种 ↓① 或人工诱变选育菌种 原料 生产用菌种 B.啤酒发酵时②过程中需进行焙烤、糖化等步骤，是 ↓② 发酵罐 发酵工程的中心环节 扩大培养- 接种 内发酵 ③一培养基配制 C.④过程中可用过滤、沉淀等方法分离出微生物菌体 ④ D.发酵工程中的培养基和发酵设备都必须经过严格 的灭菌 微生物菌体 代谢产物 6.大花蕙兰微型繁殖过程中使用的几种培养基配方如表所示（注：N。和MS为两种基本培养基， NAA、6-BA和GA3分别为生长素、细胞分裂素和赤霉素类调节剂，IBA为生长素)。下列说法正 确的是 培养基 基本培养基 基本培养基上添加的植物激素 作用 ① Ne GA3 2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L 产生愈伤组织 ② Ne 6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L 分化出丛状芽 ③ MS IBA1.2 mg/L+NAA0.05 mg/L 分化出根 A.使用三种培养基的先后顺序是①→③→② B.使用培养基②和③过程中均需提供适宜强度和时间的光照 C.生长素与细胞分裂素的用量比值大于1时促进丛状芽的分化 D.大花惠兰微型繁殖时诱导形成试管苗后可直接移栽入土 7.红薯病毒病是危害红薯最严重的病害。生产中培养脱毒红薯苗常用的方法是 A.人工诱导基因突变 B.进行远缘植物体细胞杂交 C.选择优良品种杂交 D.取茎尖进行植物组织培养 8.2025年，我国科学家自主研发出全球首款XS228细胞注射液。XS228细胞是指健康异体的皮肤 或血细胞，经重编程转化为诱导多能干细胞(PSC),在实验室定向分化成的脊髓神经祖细胞 (spNPC),可用于修复以脊髓损伤为代表的中枢神经损伤。下列说法错误的是 A.iPSC的全能性高于spNPC B.上述PSC的产生过程类似于再分化过程 C.PSC定向分化成spNPC的根本原因是基因选择性表达 D.用XS228细胞治疗时，需监测患者给药后的免疫排斥反应 9.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的说法，错误的是 A.预冷的体积分数为95%的酒精可用于析出DNA B.DNA溶液与二苯胺试剂混匀后呈蓝色 C.若引物设计过短，PCR扩增时可能会出现多条条带 D.电泳过程中，DNA分子越大，迁移速率越慢 10.PCR可用于快速扩增目的基因。下列有关PCR的叙述，错误的是 A.预变性可确保在酶的作用下DNA双链完全解聚 B.复性时需将温度调至50℃左右利于引物与模板结合 C.TagDNA聚合酶沿着模板链3'端向5'端进行移动 D.PCR扩增后的产物常采用琼脂糖凝胶电泳进行鉴定 高二·生物学第2页（共8页） 11.为研究人参基因WOX参与调控人参皂苷生物合成的机制，研究人员利用基因WOX和Ti质 粒，构建了如图所示的重组Ti质粒，将重组Ti质粒导人人参毛状根体系，最终成功获得WOX 高表达的转基因毛状根。下列叙述错误的是 T-DNA T-DNA 左边界 启动子 基因WOX 潮霉素抗性基因 右边界 卡那霉素抗性基因 A.图中启动子的基本结构单位是脱氧核苷酸 B.构建重组Ti质粒时需用到限制酶和DNA连接酶 C.Ti质粒上的T-DNA可整合到人参毛状根细胞的染色体DNA上 D.理论上，两种抗生素抗性基因均能进入成功转化WOX基因的毛状根中 12.有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(MAD2)参与有丝分裂纺锤 MAD2基因 引物2 EGFP基因引物4 体检查点复合物的形成。研究人员利用重叠延伸 PCR技术将绿色荧光蛋白基因EGFP和MAD2基引物1 引物3 PCRI PCR2 因连接在一起，构建成MAD2-EGFP融合基因。两 个基因及所用引物如图所示。下列叙述错误的是 A.引物2和引物3二者的5′端应存在碱基互补 PCR3 序列 n次PCR B.PCR1和PCR2二者可以在同一反应体系中同时 MAD2-EGFP融合基因 进行 C.PCR3中，两条DNA单链既作为模板又作为引物参与反应 D.MAD2-EGFP融合基因经n次扩增共需(2m+1一2)个引物 13.研究人员将耐寒基因VhMYB15与质粒载体构建成重组质粒，并进一步导入番茄细胞中，培育 出转基因耐寒番茄新品种。图中①链为VhMYB15基因转录的模板链。目的基因、质粒载体和 限制酶如图所示。下列叙述错误的是 终止子 限制酶识别序列及切割位点 启动子 BamH I EcoR I 5-GAATTC-3 氨苄青霉素 Mfe I 抗性基因 EcoR I BamH I 5-G'GATCC-3 BamH I EcoR I Hind lll Mfe I Hind l 启动子 链霉素抗 1 Kpn I 5-G GTACC-3 ①5 性基因 Kpn I ②3 质粒载体 终止子 Mfe I 5'-C'AATTG-3 RI hMYBI5基因 R2 EcoR I Kpn I HindΠ 5-AAGCTT-3 A.图中的VhMYB.15基因转录的方向是从右往左 B.PCR扩增VhMYB15基因时，可选用F2、R1作为引物 C.构建重组质粒时，应用EcoR I、HindⅢ分别切割质粒和目的基因 D.含空质粒的农杆菌能生长在含链霉素的培养基上，含重组质粒的不能 高二·生物学第3页（共8页） 14.如图表示蛋白质工程的操作过程，下列相关说法错误的是 DNA合成 分子设计 ←预期功能 基因 氨基酸序列 蛋白质 DNA mRNAH 多肽链 b 折叠 三维结构 →生物功能 A.图中的a、b过程分别是转录、翻译 B.蛋白质工程中对蛋白质分子结构的设计是非常关键的工作 C.蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术 D.蛋白质工程中可能构建出一种全新的基因 15.现代生物技术有着巨大的应用前景，但会涉及生物安全问题。下列叙述错误的是 A.消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面 B.我国禁止一切与生殖性克隆和治疗性克隆有关的研究 C.我国对农业转基因生物实行标识制度 D.基因污染可能对生物多样性、生态环境和人体健康造成潜在威胁 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合 题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16.为筛选高效降解餐厨废油的微生物，科研人员配制以餐厨废油为唯一碳源的培养基，分离得到 M菌和N菌，并设置单菌培养、两菌等比例混合培养三组实验，定期检测剩余废油浓度，实验结 果如图所示。下列分析正确的是 A.可从食堂下水道污泥中分离得到高效降解餐厨 废油的微生物 60 一M菌 ----N菌 B.三组实验应确保废油浓度、pH、溶解氧等相同 400 ---混合菌 且适宜 C. 两菌混合培养时，废油的降解速率始终高于任 55 10 15 20 25 一单菌 受 培养时间/d D.图示说明M菌与N菌在降解废油时可能存在协同作用 17.研究人员利用植物体细胞杂交技术，培育“甘蓝型油菜一羽衣甘蓝”杂种植株的过程如图所示。 下列说法错误的是 羽衣甘蓝 羽衣甘蓝 ① 原生质体 ② ③ ④ 杂种细胞 愈伤组织 甘蓝型油菜一羽衣甘蓝 杂种植株 甘蓝型油菜 甘蓝型油菜 原生质体 A.过程①需用纤维素酶或胰蛋白酶处理获得原生质体 B.过程②可用聚乙二醇或高Ca2+一高pH溶液诱导融合 C.过程②两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 D.过程③④的培养基均需添加蔗糖以提供碳源和氮源 高二·生物学第4页（共8页) 18.西藏特有牛种樟木牛颜临灭绝，研究人员采用体细胞核移植技术开展抢救性保护，获得健康克 隆樟木牛，流程如图所示。下列相关说法正确的是 o8g①loooo③ 886 细胞培养 ④ 樟木牛 去核」 成纤维细胞 D)② 重构胚 樟木克隆牛 采集卵母细胞 A.体外培养的大多数动物细胞具有贴壁生长的现象 B.过程②实际去除的是MⅡ期卵母细胞的细胞核 C.过程④可用Ca2+载体激活重构胚，促其完成细胞分裂和发育进程 D.克隆樟木牛的过程涉及体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术 19.2026年4月，科学家首次用小鼠多能干细胞诱导出睾丸类器官，能产生与正常精子相似的功能 性精子，该精子通过体外受精获得早期胚胎，最终发育成健康可育小鼠。如图表示早期胚胎在 代孕小鼠子宫内的发育过程。下列说法正确的是 A.代孕小鼠子宫对植入的胚胎一般不会发生免疫排斥 B.胚胎①为桑葚胚，其含有的细胞已发生分化 C.胚胎②中的乙处为滋养层细胞，将来发育成胎膜和胎盘 ② D.受精前精子和卵母细胞需分别进行成熟培养和获能处理 20.以下是限制性内切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述正确的是 5-CTGCA-3' ① @5-G '-G 3'-CTGCA-5' A.①②两个黏性末端是由同一种限制酶切割后产生的 B.①②两个黏性末端，不能用DNA连接酶直接连接 -CTGCAG- C.上述两个黏性末端连接后形成的DNA序列是 -GACGTC- D.限制酶切割磷酸二酯键，DNA连接酶能催化磷酸二酯键形成 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21.(11分)磷是植物生长的重要元素，施人土壤中的磷，大多数会与Ca2+等阳离子结合形成难溶性 磷酸盐。科研人员从贡柑果园土壤中筛选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效 解磷菌，主要流程如图1所示。回答下列问题： 0.5mL0.5mL0.1mL 振荡 20 min 0.5mL 品 取果园 土壤10g 90mL无菌水 土壤悬浮液 4.5mL无菌水 ① ② ③ ④ ⑤ 图1 高二·生物学第5页（共8页） (1)步骤③在最后一次稀释后，在3个平板上分别滴入0.1mL稀释液，经适当培养后，得到的结 果分别是39、38、37，据此计算，每克土样中的活菌数为 个。运用这种方法统计的 菌落数往往比活菌实际数目 (填“少”或“多”)，原因是 (2)步骤④中待菌落长好后，应挑选菌落溶磷圈直径与菌落直径比值 (填“较大”或“较 小”)的菌落，进行下一步平板划线操作。 (3)步骤⑤中的接种方法中接种环需灼烧 次。 (4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的曾40 0-B3-5-6 -0-M-3-01 能力，研究人员将它们接种到特定的培养基中，并30 △-T1-4-01 在37℃、200r·min1摇床培养，定期取上清液，20 测定溶液中可溶性磷含量，得到图2曲线。实验中 用摇床进行培养的优点是 (答出两点)。 0b8n合=合合A 0122436486072120168216264312 本实验结果表明最优良的解磷菌株是 时间h 22.(11分)黄精作为一种传统的药食同源植物，其次级代 图2 谢产物一一甾体皂苷具有抗炎、调节血脂之功效。科研人员以黄精茎段为实验材料，利用植物 细胞培养技术，实现黄精多糖的工厂化生产，大致流程如图所示。回答下列问题。 优化悬浮 茎段 特①，@伤一②浮③→细胞培彩 细胞 ④→笛体皂苷 体系 (1)过程①为 过程，该过程接种前需对黄精茎段按照以下流程进行 处理：流水 冲洗→酒处理精30s→无菌水冲洗→ 处理30min→无菌水冲洗。 (2)进程过程③前，为优化悬浮细胞培养体系，研究人员对培养液中生长素类调节剂2,4-D浓度 进行筛选，结果如表所示。注：生长速率=每天每升培养基中增加的细胞干重克数。 2,4-D质量浓度(mg/L) 细胞生长速率(g·L1·d1) 单位质量细胞中甾体皂苷含量(%) 0 0.18 0.031 0.5 0.24 0.028 1.0 0.32 0.027 1.5 0.33 0.015 2.0 0.31 0.009 2.5 0.28 0.006 由表中数据可知，随着2,4-D浓度的增大，黄精悬浮细胞的生长速率和其甾体皂苷合成量的 变化趋势分别是 和 ,工厂化生产过程中，可选用浓度为 mg/L时 的2,4-D溶液，以获得较高的经济效益。 (3)与从天然植株中提取相比，利用植物细胞培养技术生产甾体皂苷的优点在于 (答出 两点)。 23.(11分)激动型抗体是一类能特异性结合细胞表面受体，主动激活受体下游信号通路，从而触发 细胞增殖、活化等生物学效应的单克隆抗体。YδT细胞是一类独特的T细胞亚群，能够直接识 别肿瘤细胞并快速启动免疫应答。BTN2A1蛋白在YδT细胞中高表达，可提高Y8T细胞的免 疫应答。研究人员利用杂交瘤细胞技术制备靶向BTN2A1的激动型抗体(4F9),以增强Y8T细 胞的抗肿瘤活性。回答下列问题。 高二·生物学第6页（共8页）》 小鼠B淋巴细胞一多种③杂交瘤④抗体阳性的 BTN2A1 激动型单抗 骨髓瘤细胞→杂交细胞 细胞 杂交瘤细胞 (4F9) (1)过程①需每隔2周用BTN2A1蛋白作为 注射到小鼠体内，共注射4次，再从脾中 分离出相应的B淋巴细胞。先后注射4次的目的是 (2)过程②中，诱导融合的方法中，与植物原生质体融合不同的是可用 诱导法。 (3)过程③需用特定的选择培养基进行筛选，该过程的筛选原理是：该培养基上， 的细 胞会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长。过程④需对获得的多种杂交细胞进行 并经多次筛选，就可获得足够数量的抗体阳性的杂交瘤细胞。 (4)4F9在后续研究中可用于 (答出一点即可)。 24.(11分)BDE47是多溴联苯醚类持久性有机污染物，广泛存在于水体、大气、土壤等环境中。研 究人员将来自GB-2菌株的高效降解BDE-47的相关基因AntABC导入细菌WT-G中，构建工 程菌，以加快BDE-47污染土壤的修复。质粒P、AntABC基因、限制酶识别及切割位点如图所 示。回答下列问题。 Nhe I Sph I BamH I 启动子 质粒P 终止子 AntABC基因 注： Tet:四环素抗性基因 →启动子 终止子Amp:氨卡青霉素抗性基因 限制酶识别序列和切割位点： AmpR Nco I 5'-CCATGG-3 3 GATC Sph I 5'-GCATG C-3' t。4▣ GTAC5 重组质粒 … Nhe I 5'-GGATCC-3' AntABC基因 3 (AntABC-P) BamH I 5'-GCTAGC-3 经限制酶切割后的AntABC基因 (1)重组质粒中启动子的作用是 ;从重组质粒必备结构分析，图中AntABC-P中的序列 X最可能是 的序列。 (2)已知AntABC基因编码链（与模板链互补）两端的碱基序列为5'一ATCAATGCGCTC一… 一CAGTGAGTAGCG一3'，为确保AntABC基因的扩增成功及后期正确插入质粒P中，设 计的上游引物序列应为5’一 (写出12个碱基序列)一3'；下游引物序列应为5′一 (写出12个碱基序列)-3'。 (3)PCR扩增AntABC基因过程中，需向反应体系中添加Mg2+,目的是 。PCR技术 的原理是 (4)为筛选出成功转化AntABC-P的WT-G,应首先将导入后的WTG接种在添加 (填“氨苄青霉素”或“四环素”)的培养基上；再将平板上长出的菌落通过影印平板法（使一系 列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)接种到添加四环素的平板培 养基上继续培养，然后在相应平板培养基上即能挑取出目的菌株，目的菌株是能在添加 的培养基上生长不能在添加 的培养基上生长的菌株。 高二·生物学第7页（共8页） 25.(11分)研究人员将BLOC1S1基因通过慢病毒载体介导法导入山羊早期胚胎内，培育出 BLOC1S1基因过表达山羊，提高山羊抗布鲁氏菌的能力。BLOC1S1基因和载体质粒（转移质 粒)的结构、限制酶识别序列及切割位点等如图所示。回答下列问题。 复制起点 5'端LTR AmpR 转移质粒 RRE←SmaI 注：Amp是氨苄青霉素抗性基因； RRE、cPPT/CTS等组件能提高外源 3端LTR Pst I 重组质粒 基因整合到受体细胞的效率； cPPT/CTS 慢病毒 5'-LTR组件主要是启动子和增强子： BamH I SpeI ↓① 3-LTR主要是终止子。 山羊早期胚胎 限制酶的识别序列及切割位点： BamH I ↓② SmaI 5'-CCCGGG-3' BLOCISI过 BamH I 5'-G GATCC-3' A侧 5B侧 表达山羊 Pst I 5'-CTGCAG-3' 转录方向 Spe I 5'-ACTAGT-3' BLOCIS1基因 Bcl I 5'-TGATCA-3 (1)该5'端LTR序列和3'端LTR序列能将两段之间的基因插入受体细胞基因组中，并且是慢 病毒基因组表达和整合进入宿主细胞基因组的必要条件。据图分析，构建重组质粒前应用 限制酶 (两种)切割转移质粒。 (2)为将BLOC1S1基因正确连接到图中的转移质粒上，应在设计的A侧和B侧PCR扩增引物 的 (填“5”或“3'”)端分别添加限制酶 的识别序列，扩增后通过DNA连接 酶将BLOC1S1基因与转移质粒进行连接。 (3)过程①需利用显微注射法，将含有重组质粒的慢病毒注入受精卵的透明带间隙，置于含有 的CO2培养箱培养至囊胚期进行移植。过程①进行前，需要对受体母羊进行 处理。为获得多个遗传背景相同的BLOC1S1基因过表达山羊，若过程②进行前 对移植的囊胚进行胚胎分割，分割胚胎时需注意事项是 (4)研究人员以获得的羔羊耳组织DNA为模板，设计针对BLOC1S1基因的引物，进行PCR鉴 定，结果如图所示。据图可知，BLOC1S1基因成功导入待检个体中 号山羊体内。 若要进一步检查BLOC1S1基因过表达山羊是否培育成功，还需要进行 的鉴定。 M12345678910111213141516 bp bp 2000 1000 750 5001 442 250 100 注：M,Marker:1,阴性对照：2，空白对照；3，阳性质粒对照：4~16，待检个体 高二·生物学第8页（共8页）5月高二生物学 5月高二 生物学 答案第1页 共 6 页 学科网（北京）股份有限公司 1.D【解析】山楂果含有机酸，pH较低，选择耐酸型酵母菌可保证其在酸性环境中正常发酵产酒。醋酸菌对酒精浓度敏感，过高浓度的酒精会抑制其生长，稀释山楂酒可降低酒精浓度以利于醋酸发酵。酒精发酵依赖酵母菌的无氧呼吸，需要密封装置；而醋酸发酵的菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，必须持续通入无菌空气才能将酒精转化为醋酸，因此醋酸发酵阶段装置不能密封。 2.C【解析】亚硝酸盐含量随腌制时间延长会先升高后下降，但只能降低到较低水平，无法完全消除，且延长腌制时间也不能完全消除白膜。 3．C【解析】该培养基中含有琼脂（凝固剂），属于固体培养基。蛋白胨能够为微生物提供碳源、氮源和维生素等营养物质。一般培养基应先调节pH，再进行灭菌处理。如果先灭菌再调节pH，会重新引入杂菌。培养基中营养物质浓度过高会使外界渗透压高于微生物细胞内渗透压，导致微生物失水抑制其生长，因此浓度过高不利于微生物生长。 4．A【解析】稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数（通过菌落数计算活菌数），但平板划线法仅用于微生物的分离（纯化菌种），无法精确计数（因菌落重叠或未分散）。为了得到单菌落，平板划线时最后一次划线不能与第一次划线相连，平板划线不能作菌落统计。接种后待菌液被培养基吸收后，再将平板倒置，不是立即倒置。 5．B【解析】发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵。发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种，一旦有杂菌污染，可能导致产量大大下降，因此，培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。 6.B【解析】植物组织培养的流程是脱分化（①培养基，产生愈伤组织）→再分化形成芽（②培养基，分化出丛状芽）→再分化形成根（③培养基，分化出根），所以使用顺序是①→②→③；使用培养基②过程为诱导丛芽生成过程，需提供适宜强度和时间的光照，③过程中为诱导生根的过程，也需适宜强度和时间的光照，利于幼芽的光合作用；由表可知，②为诱导丛芽生成过程，该培养基中生长素与细胞分裂素用量比值小于1。 7.D【解析】培育脱毒红薯苗利用的是植物组织培养技术，选取茎尖分生组织（病毒极少甚至无病毒）进行离体培养，从而获得无病毒植株。 8.B【解析】iPSC是由高度分化的皮肤细胞或血细胞经重编程，恢复为类似胚胎干细胞的多能状态，本质与植物细胞的脱分化高度相似。XS228是异体通用型细胞，来源于健康供体，即使经过基因编辑降低免疫原性，仍存在引发患者免疫排斥的风险，因此治疗过程中必须全程监测免疫反应。 9.B【解析】DNA溶液与二苯胺试剂混匀后，沸水加热5 min，试管冷却后溶液呈现蓝色。PCR中引物过短可能导致非特异性结合，产生非目标扩增产物，导致电泳出现多条带。电泳中DNA迁移速率与分子大小成反比，大分子阻力大迁移慢。 10.A【解析】预变性是将温度提高到90 ℃以上使DNA双链完全解聚，不需要酶的参与。 11.D【解析】启动子是目的基因上游的一段脱氧核苷酸序列，基本单位是脱氧核苷酸；农杆菌侵染受体细胞时，只能将重组Ti质粒中的T-DNA整合到宿主细胞染色体DNA上，因此只能将潮霉素抗性基因转化到毛状根中。 12.B【解析】根据题图可知，引物2末端序列对应DNA片段和引物3末端序列对应DNA片段互补，则二者能连接形成局部双链，再以两条链互为模板便可继续扩增出融合基因，能使EGFP和MAD2基因成功连接，因此引物2和引物3二者的5'端应存在碱基互补序列；为防止扩增时引物2与引物3之间进行配对，需将其置于不同反应系统中；PCR3中，两条DNA单链既作为模板又作为引物参与反应；MAD2-EGFP融合基因经n次扩增共产生2n个DNA分子，共需（2n+1-2）个引物。 13.C【解析】图中①链为VhMYB15基因转录的模板链；转录时RNA聚合酶沿模板链移动方向与转录方向相反，VhMYB15基因转录的方向是从右往左；PCR扩增VhMYB15基因时，F2、R1作为引物，可以结合在模板链的3′端；构建重组质粒时，应用KpnⅠ、HindⅢ分别切割质粒和目的基因，这样既能将VhMYB15基因切割下来，又能保证启动子和VhMYB15基因的完整性，还能保证VhMYB15基因和载体正确连接，保证转录方向正确；含质粒的农杆菌能生长在含链霉素的培养基上，重组质粒的链霉素抗性基因被破坏，不能在含链霉素的培养基上生长。 14．C【解析】蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。 15．B【解析】我国明确禁止生殖性克隆人实验，但允许治疗性克隆研究（如干细胞研究）。 16．ABD【解析】食堂下水道中含餐厨废油，可分离得到高效降解餐厨废油的微生物。本实验的自变量是微生物种类（M菌、N菌、混合菌），因此废油浓度、pH、溶解氧等无关变量应保持相同且适宜，遵循单一变量原则。从曲线可以看出：初期混合菌的废油降解速率低于N菌。后期混合菌组的剩余废油浓度低于M菌和N菌单菌组，说明M菌与N菌在降解废油时可能存在协同作用，共同提高了降解效率。 17.ACD【解析】过程①为获得原生质体过程，植物细胞去除细胞壁常用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体；过程②为诱导原生质体融合，形成杂种细胞过程，常用物理法或化学法诱导融合，物理法有电融合法或离心法等，化学法包括聚乙二醇或高Ca2+—高pH融合法等；过程②两个原生质体融合可能有同种细胞融合情况，不一定为杂种细胞；过程③为脱分化，过程④为再分化，培养基均需添加蔗糖，蔗糖可提供碳源，但不能提供氮源。 18.ACD【解析】体外培养的大多数动物细胞具有贴壁生长的现象；过程②为卵母细胞去核过程，实际去除的是MⅡ期卵母细胞中纺锤体和染色体的复合物。 19.AC【解析】胚胎①为桑葚胚，其含有的细胞未发生分化；受精前精子需要获能处理，卵母细胞需进行成熟培养。 20.BD【解析】据图可知，形成①的限制酶识别序列为5′−CTGCAG−3′，形成②的限制酶识别序列为5′−GACGTC−3′；①的黏性末端为5′−TGCA−3′，②的黏性末端为5′−ACGT−3′，并不相同，所以不可以用DNA连接酶直接连接；限制酶的作用是断裂核苷酸之间的磷酸二酯键，DNA连接酶的作用是催化磷酸二酯键的形成。 21．（11分）（1）3.8×106（2分） 少（1分） 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（2分） （2）较大（1分） （3）4（2分） （4）增加培养液中的溶氧量；使菌株与营养物质充分接触（2分，答出一点给1分，合理即可） M-3-01（1分） 【解析】（1）图中共将土壤悬浮液稀释了104倍。（39+38+37）÷3÷0.1×104=3.8×106个。由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此该数值与活菌的实际数目相比偏低。 （2）溶磷圈直径与菌落直径比值较大，说明细菌分解磷酸盐的能力较强，所以选择溶磷圈直径与菌落直径比值较大的菌落。 （3）步骤⑤中划线3次，接种环需灼烧4次。 （4）摇床培养是实验室培养需氧微生物的常用方法，使用摇床培养，不仅可以增大培养液中的溶氧量，促进微生物的有氧呼吸，而且能够增加菌体与培养液的接触，有利于物质交换，提高营养物质的利用率。根据实验曲线图可知，M-3-01实际溶解磷能力最强。 22.（11分） （1）脱分化（1分） 消毒（1分） （5%）次氯酸钠（1分） （2）先增大后减小（2分） 逐渐下降（2分） 1.0（2分） （3）不占用耕地、不受季节和气候限制、对环境无污染、保护黄精资源、提高甾体皂苷产量（2分，答出一点给1分，合理即可） 【解析】（1）过程①为脱分化过程，该过程接种前需对黄精茎段按照以下流程进行消毒处理：流水冲洗→酒处理精30 s→无菌水冲洗→（5%）次氯酸钠处理5 min→无菌水冲洗。 （2）由表中数据可知，随着2,4-D浓度增大，黄精悬浮细胞的生长速率先增大后减小；甾体皂苷合成量的变化趋势是逐渐下降；工厂化生产过程中，需选用浓度为1 mg/L时的2,4-D溶液，此浓度下有较高的细胞生长速率和甾体皂苷合成量，以获得较高的经济效益。 （3）与从天然植株中提取相比，利用植物细胞培养技术生产甾体皂苷的优点在于不占用耕地、不受季节和气候限制、对环境无污染、保护黄精资源、提高甾体皂苷产量等。 23.（11分） （1）抗原（1分） 使小鼠产生大量能产生抗BTN2A1抗体的B淋巴细胞（2分） （2）灭活病毒（2分） （3）未融合的亲本细胞和融合的具同种核（2分） 克隆化培养和抗体检测（2分） （4）BTN2A1的表达检测、BTN2A1功能研究、BTN2A1靶向药物开发（答出1点即可，2分） 【解析】（1）过程①为用BTN2A1蛋白作为抗原免疫小鼠，并从该小鼠的脾中分离出相应的B淋巴细胞。多次注射的目的是产生大量能产生抗BTN2A1抗体的B淋巴细胞。 （2）动物细胞融合与植物原生质体融合不同的是可用灭活病毒诱导法。 （3）过程③为用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞，筛选原理是：未融合的亲本细胞和融合的具同种核的细胞会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能在选择培养基上生长。过程④需对获得的多种杂交细胞进行克隆化培养和抗体检测，并经多次筛选，就可获得足够数量的抗体阳性的杂交瘤细胞。 24.（11分） （1）被RNA聚合酶识别和结合后，驱动转录（或RNA聚合酶识别和结合位点）（1分） 复制原点（1分） （2）GGATCCATCAAT（2分） CCATGGCGCTAC（2分） （3）激活耐高温的DNA聚合酶（1分） DNA半保留复制（1分） （4）氨苄青霉素（1分） 氨芐青霉素（1分） 四环素（1分） 【解析】（1）启动子的作用是被RNA聚合酶识别和结合后，驱动转录；重组质粒必备结构有启动子、终止子、目的基因、抗性基因和复制原点，则图中AntABC-P中的序列X最可能是复制原点的序列。 （2）引物设计规则：引物与模板链3′端互补配对，方向5′→3′。 引物5′端需添加限制酶识别序列 （NcoⅠ：5′-CCATGG-3′；NheⅠ：5′-GGATCC-3′），方便后续酶切连接。已知AntABC基因编码链序列：5′-ATCAATGCGCTC……CAGTGAGTAGCG-3′；上游引物（正向）：5′端加NheⅠ位点（GGATCC）+正向序列 → GGATCCATCAATGCGCTC；下游引物（反向）：5′端加NcoⅠ位点（CCATGG）+反向互补序列 → CCATGGCGCTACTCACTG。 （3）PCR技术扩增AntABC基因过程中，需向反应体系中添加Mg2+的目的是激活耐高温的DNA聚合酶。PCR 技术的原理是DNA半保留复制。 （4）为筛选出成功转化AntABC-P的WT-G，应首先将导入后的WT-G接种在添加氨芐青霉素的培养基上，再将平板上长出的菌落通过影印平板法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）接种到添加四环素的平板培养基上继续培养，然后在相应平板培养基上即能挑取出目的菌株。未接种质粒的WT-G不含抗四环素和氨芐青霉素基因，在含四环素或氨芐青霉素的培养基上不能生长；含普通质粒的WT-G含氨芐青霉素抗性基因和四环素抗性基因，能生长在含氨苄青霉素或四环素的培养基上；含重组质粒的WT-G含氨苄青霉素抗性基因，不含四环素抗性基因，能生长在含青霉素的培养基上，在含四环素的培养基上不能生长。 25.（11分） （1）BamHⅠ和SpeⅠ（2分） （2）5′（2分） SpeⅠ和BclⅠ（2分） （3）95%空气和5%CO2（1分） 同期发情（1分） 将内细胞团均等分割（1分） （4）7 、9、10、12、15 、16（1分） 个体生物学水平（1分） 【解析】（1）由图可知，RRE上含有SmaⅠ识别位点，不能选SmaⅠ，还需进行双酶切，因此不能用PstⅠ，否则切去了结构cPPT/CTS，因此只能选BamHⅠ和SpeⅠ。 （2）由图可知，BLOC1S1基因的转录方向为A侧→B侧，结合基因两条链方向，推知基因下面的链为转录模板链，同时转移质粒5′端LTR序列含有启动子和增强子，3′端LTR序列含有终止子成分，且5′端LTR序列和3′端LTR序列能将两段之间的基因插入到受体细胞基因组中，并且是慢病毒基因组表达和整合进入宿主细胞基因组的必要条件，因此需将BLOC1S1基因的A侧连接到5′端LTR序列侧，B侧连接到3′端LTR序列侧，同时BLOC1S1基因含有BamHⅠ识别序列，不能用此酶切割，但图中给定的限制酶BclⅠ切割出的黏性末端相同，因此设计的A侧和B侧PCR扩增BLOC1S1基因引物时，应在其5′端分别添加限制酶SpeⅠ和BclⅠ的识别序列。 （3）过程①需利用显微注射法，将含有重组质粒的慢病毒注入受精卵的透明带间隙，置于含有95%空气和5% CO2的CO2培养箱培养至囊胚期进行移植。过程①进行前，需要对受体母羊进行同期发情处理。为获得多个遗传背景相同的BLOC1S1基因过表达山羊，若过程②进行前对移植的囊胚进行胚胎分割，分割胚胎时需注意事项是将内细胞团均等分割。 （4）PCR鉴定结果显示，其中7 、9、10、12、15 、16号共6只山羊DNA扩增出442 bp条带，与阳性质粒条带大小一致，阴性对照和空白对照均无条带，因此，BLOC1S1基因成功导入到7 、9、10、12、15 、16号共6只山羊体内，若要进一步检查BLOC1S1基因过表达山羊是否培育成功，还需要进行个体生物学水平的鉴定。 2025—2026下学期第一次教学质量检测——高二年级命题要素细目表 考试范围 选必三 易中难占比7:2:1 题目序号 题型 分值 考查知识 难度 1 单选题 2 果酒果醋的制作 较易 2 单选题 2 泡菜发酵过程中白膜和亚硝酸盐的分析 较易 3 单选题 2 培养基的配制及其应用 较易 4 单选题 2 微生物培养技术与计数 较易 5 单选题 2 发酵工程 适中 6 单选题 2 植物组织培养 适中 7 单选题 2 植物细胞工程的应用 较易 8 单选题 2 动物细胞培养 较易 9 单选题 2 DNA的粗提取与鉴定；DNA 片段的扩增及电泳鉴定 适中 10 单选题 2 PCR扩增的原理 较易 11 单选题 2 基因表达载体的构建 较易 12 单选题 2 PCR扩增的中引物的设计及有关计算 较易 13 单选题 2 基因工程的应用 较难 14 单选题 2 蛋白质工程 适中 15 单选题 2 生物技术的安全性与伦理问题 较易 16 多选题 3 微生物的分离及培养实验分析 适中 17 多选题 3 植物体细胞杂交技术 适中 18 多选题 3 动物细胞培养及克隆技术 较难 19 多选题 3 胚胎工程 适中 20 多选题 3 基因工程 适中 21 非选择题 11 微生物的分离与计数 适中 22 非选择题 11 植物细胞培养的应用 适中 23 非选择题 11 单克隆抗体的制备 适中 24 非选择题 11 基因工程 较难 25 非选择题 11 胚胎工程、基因工程综合 较易 $