吉林长春市南关区长春市第二实验中学2025-2026学年高二下学期期中生物试卷

**基本信息** 2025-2026下学期高二生物期中试题，聚焦发酵工程、基因工程等核心内容，结合“太空造血”“新冠RT-PCR检测”等科技前沿与“甘蔗霉变”“啤酒生产”等生活情境，突出科学思维与探究实践能力考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|20题/45分|微生物培养（如灭菌消毒）、发酵工程（果醋制作）、细胞工程（干细胞分化）|以“克隆猴”“VIGS技术”等情境考查生命观念，基础判断与原理分析结合| |非选择题|5题/55分|发酵工程（啤酒生产流程）、微生物筛选（瘤胃细菌计数）、细胞工程（单克隆抗体制备）、基因工程（工程菌构建）|综合题如22题微生物培养计数，体现探究实践；25题重组质粒设计，考查科学思维与态度责任|

null2025-2026学年度下学期期中考试 长春市为：宝影中学 高二生物试题 CHANGCHUN SECOND EXPERIMENTAL HIGH SCHOOL 本试卷分选择题题和非选择题两部分，共25小题，共100分，共6页。考试时间为75分钟。 考试结束后，只交答题卡。 第I卷选择题 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符 合题目要求的。 1.为充分利用地方特色水果资源，科研人员以杨梅为原料制作杨梅果醋，工艺流程如下：新鲜杨梅 →清洗→去核、榨汁、过滤、酶解→调糖→加入活化酵母菌→I酒精发酵→加入醋酸菌进行Ⅱ醋酸 发酵→过滤灭菌→灌装→杨梅果醋。下列叙述正确的是() A.酶解步骤加入的主要酶是蛋白酶和脂肪酶 B.从I阶段到Ⅱ阶段需降低温度并持续通气 C.醋酸菌在Ⅱ阶段可直接将葡萄糖转化为醋酸 D.I、Ⅱ两个发酵阶段培养液的pH均会下降 2.2026年清明节过后，广西玉林甘蔗仍滞销，许多蔗农都发出公告，免费送甘蔗，但有民间俗语 “清明蔗，毒过蛇”让很多市民望而却步。其实这句俗语并非指所有甘蔗都有毒，而是特指霉变的 甘蔗。某兴趣小组为了弄清楚霉变的甘蔗中含有哪种霉菌，要进行实验培养，首先要对实验室进行 严格的灭菌和消毒。下列说法正确的是() A.消毒和灭菌仅是为了获得纯净的微生物培养物 B.灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子 C.灼烧法灭菌的对象是金属器具，不能是玻璃器具 D.无菌操作时，要对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行清洁和消毒 3.马丁氏培养基配方如下：葡萄糖10g、蛋白胨5g、KHP041g、MgS04·7H00.5g、琼脂15~ 20g,定容前加入3.3mL质量分数为1%的孟加拉红水溶液。孟加拉红能抑制大多数细菌的生长。 高二生物试题 下列相关叙述正确的是() A.该培养基中的碳源只有葡萄糖，氮源只有蛋白胨 B.制备培养基时，应先加入孟加拉红溶液，再灭菌并定容 C.倒平板后应待培养基冷却凝固，再将平板倒置培养 D.该培养基属于鉴别培养基，可用于区分真菌和细菌 4.下列有关发酵工程应用的叙述，不合理的是() A.利用发酵工程生产的微生物农药，作为生物防治的重要手段来防治害虫 B.某些疫苗、动物激素是利用基因改造或转基因的酵母菌发酵生产的 C.利用微生物在发酵过程中的代谢产物生产单细胞蛋白、农药、饲料等 D.嗜热菌可以用来生产洗涤剂，嗜低温菌有助于提高热敏性产品的产量 5.从胰岛素依赖型糖尿病患者的骨髓中分离骨髓间充质干细胞SC),诱导分化成胰岛样细 胞，再导入该患者体内。放射性免疫分析结果表明诱导的胰岛样细胞团可以正常分泌胰岛素， 患者的血糖恢复正常。下列说法正确的是( A.培养骨髓间充质干细胞的培养液通常需加入血清 B.在体外连续培养时，利用胃蛋白酶将接触抑制的骨髓间充质干细胞分开 C.在功能上，骨髓间充质干细胞具有发育的全能性 D.治疗成功后，康复者的血型有可能发生改变 6.“神舟十五”飞船带回了在太空微重力环境下进行的多能干细胞向早期造血干细胞分化的 研究样品，首次实现了人类干细胞“太空造血”。在太空培养的干细胞呈现出优于地面的生 长方式，在微重力环境中干细胞的体外培养更接近于胚胎内干细胞的增殖与分化。下列有关 干细胞的说法错误的是() A.随着干细胞传代次数的增加，细胞全能性逐渐升高 B.多能干细胞分化的实质是基因的选择性表达，使细胞种类增多 C.自体细胞诱导的干细胞在器官移植和再生上可有效避免免疫排斥反应 D.太空的微重力环境能为增强干细胞诱导分化效率提供新途径 7.我国科学家经过反复实验，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍，能在10s之内对 卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞内。2017年，世界上首 例体细胞克隆猴“中中”、“华华”的诞生，标志着我国的克隆技术走在了世界前列。培育 第1页共6页 体细胞克隆猴的简要流程如下图，相关分析正确的是( TSA 取出 用灭活的仙台 胎猴 体细胞 病毒短暂处理 融合 重构胚 胚胎、 代孕生出 培养 母猴 克隆猴 移植 母猴 采集 卵母细胞 去核 去核卵 母细胞 Kdm4d的 mRNA A.供卵母猴的卵母细胞“去核”是指通过显微操作去掉MⅡ期的染色体 B.重构胚的激活，除用图中TSA、Kdm4d的mRNA外，还可用Ca+等处理 C.“中中”“华华”与胎猴长的最像，性别为一雌一雄有利于繁衍后代 D.若用遗传背景相同的“中中”“华华”进行药物研发实验，能更好地控制无关变量 8.辣椒素作为一种生物碱，广泛用于食品保健、医药工业等领域。通过植物组织培养技术快速繁 殖高产辣椒植株并提取辣椒素，是目前工业化生产的重要途径。其获得途径如下，下列说法正确的 是() 外植体① 愈伤组织 根、芽 脱毒苗 果实 细胞分离 辣椒 单细胞 高产细胞系 细胞培养物 A.过程①受外源激素的调控，过程②受内源激素的调控 B.辣椒素是次生代谢物，通过细胞培养获得辣椒素的过程可不需要实现植物细胞的全能性 C.获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病能力 D.实现过程①的条件是外植体细胞发生基因突变 9.马铃薯通常是用无性繁殖的方式进行繁殖的，它们感染的病毒很容易传给后代，随着病毒在作物 体内逐渐积累而导致作物减产，品质变差。实验人员为此研究了不同大小的茎尖对诱导分化苗和脱 毒苗的影响，结果如图所示。下列分析合理的是( 大于0.6 0.3~0.5 小于0.3 024681012 ☑脱毒苗数/苗☐分化苗数苗 高二生物试题 A.在诱导茎尖形成幼苗的不同阶段，培养基中激素的比例不变 B.该实验中的茎尖越大，诱导形成的幼苗的脱毒效果越好 C.在诱导茎尖脱分化过程中一般不需要光照，而再分化时需要光照 D.该实验中茎尖大小为0.30.5m时，其茎尖诱导形成分化苗的效果最佳 1O.“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的 是() A.裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质 B.分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等 C.沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度 D.鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色 11.下列有关电泳的叙述，不正确的是（) A.电泳是指带电分子在电场的作用下发生迁移的过程 B.待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率 C.进行电泳时，带电分子会向着与其所带电荷相同的电极移动 D.PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定 12.人乳铁蛋白(LF)是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，具有抑菌、抗肿瘤等多 种生理功能，被认为是一种极具开发潜力的食品添加剂。某科研团队将人乳铁蛋白(LF) 基因转入到山羊体内，从山羊的乳液中获得LF,可以解决天然乳铁蛋白资源短缺的问题， 下列有关叙述错误的是（) A.可用PCR直接扩增乳铁蛋白的基因转录产物 B.重组载体中人乳铁蛋白基因的启动子是乳腺蛋白基因启动子 C.将目的基因导入山羊受精卵中一般应用的技术是显微注射法 D.可通过PCR等技术检测人乳铁蛋白基因是否成功转录出mRNA 13.实时荧光RT-PCR用于新冠病毒核酸检测的原理如下：在PCR复性过程中探针会先与DNA 的一条模板链结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，在新链延伸过 程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进 行核酸检测的相关过程如下图，下列相关叙述错误的是() 第2页共6页 T m 咽拭子 山→mmm.写物 ♪引物、 采样 山44 病毒RNA CDNA荧光基团淬灭基团 实时荧光RT-PCR A.若检测结果是有强烈荧光信号发出，则说明被检测者可能感染了病毒 B.进行RT-PCR扩增需要的酶有逆转录酶、解旋酶和耐高温的DNA聚合酶 C.还可以通过检测病毒感染后产生的蛋白来检测，其原理是抗原一抗体杂交 D.PC反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，必须控制好循环温度和时间 14.科学家们已通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等。采用蛋白质工程技术制 造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是() ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列 ②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列 ③蓝色荧光蛋白基因的合成 ④表达出蓝色荧光蛋白 A.①②③④ B.②①③④ C.②③①④ D.④②①③ 15.下列对于生物武器和生物技术安全性的说法，错误的是( A.生物武器可通过吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等侵入人体 B.将生物毒素分子的基因与流感病毒的基因拼接在一起，是对病毒进行了基因重组 C.通过“设计试管婴儿”与“试管婴儿”生殖，实质上都属于有性生殖 D.我国对农业转基因生物实行标识制度，要求警示性注明产品可能的危害 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项 是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。 16、下列关于生物工程相关知识的叙述，正确的有() ①在基因工程操作中为了获得重组质粒，可以用不同的限制性内切酶切割质粒和目的基因，但露出 的黏性末端必须相同 ②只要B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，就能产生单克隆抗体 ③蛋白质工程的目标是通过基因重组，合成生物体本来没有的蛋白质 ④生态农业使废物资源化，提高能量的传递效率，减少了环境污染 ⑤诱导细胞融合之前，需将抗原反复注射给实验小鼠，目的是获得产生单一抗体的浆细胞。 高二生物试题 A.① B.①⑤ C.①④⑤ D.①②④⑤ 17.研究者用M病毒膜蛋白对小鼠进行免疫，分离小鼠脾细胞并将其与S细胞融合，通过筛选 获得单个稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。下列相关叙述正确的是() A.用动物细胞培养液培养M病毒，通过离心可获得膜蛋白作为抗原 B.可用M病毒膜蛋白多次免疫小鼠，以获得更多的浆细胞 C.杂交瘤细胞细胞应具备产生抗体和无限增殖的能力 D.体外培养单个杂交瘤细胞获得大量抗体体现了细胞的全能性 18.蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。下图为蛛丝蛋白基因对应的 DNA片段结构示意图，其中1~4表示DNA上引物可能结合的位置，下列叙述正确的是() 2 ® OH 蛛丝蛋白基因 HO 3 4 A.若受体细胞为大肠杆菌，则蛛丝蛋白需要进一步加工才具有相应的功能 B.若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏2个磷酸二酯键 C.若用PCR技术获取目的基因，则图中的2、3分别是2种引物结合的位置 D.选择图中适宜引物进行PCR扩增，经过5次循环可获得32个等长的蛛丝蛋白基因 19.研究人员发现高强度光照下，番茄会通过PQ(一种光保护机制)散失过多热能，避免高 强度光照造成损伤。为研究V基因对PQ的作用机制，科研人员利用病毒诱导基因沉默技 术(VIGS技术)特异性地使V基因沉默，发现高强度光照下番茄叶片的损伤明显增强。技术 原理如图所示。下列叙述错误的是( 目的基因 烟草 病毒载体 TRV 重组病毒载体 转录V基因的非模板链 TRV2 TRV2 十 导入 剪切 小分子RNA mRNA切割酶 Ti TRV2 转化 番茄细胞 mRNA降解 与基因的mRNA结合 特殊农杆菌 A.本实验中的目的基因应选用V基因，该基因可通过PCR技术获得 B.该过程中目的基因整合到特殊农杆菌的T-DNA上 第3页共6页 C.该过程中VIGS技术通过降解V基因的RNA进而抑制V基因的表达 D.V基因的表达可能促进了PQ机制的活化 20.研究者对绿色荧光蛋白进行改造，将其第203位苏氨酸替换为酪氨酸，使改造后的蛋白质在特定 光激发后发射橙色光，称为橙色荧光蛋白。关于橙色荧光蛋白的构建，以下说法错误的是() A.不能用蛋白酶直接处理绿色荧光蛋白获得目标产物 B.设计定点突变PCR获得橙色荧光蛋白基因 C.PCR扩增获得的产物激发后可以发橙色荧光 D.绿色荧光蛋白基因发生的突变类型为碱基缺失 第Ⅱ卷 非选择题 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21.(8分)吉安啤酒厂生产的燕京啤酒色泽纯正、风味独特，深受人们喜爱。啤酒是以大麦为主 要原料经酵母菌发酵制成的，工业化生产流程如图所示。回答下列问题： 大麦 碾磨 蒸煮 烘焙 成麦 糖化 冷却 发酵 过滤 过滤 发芽 调节 芽粉 加啤 消毒 分装 酒花 (1)用于生产啤酒的酵母菌属于 (填代谢类型)菌，在 条件下能够分解葡萄糖 产生酒精和二氧化碳。 (2)在啤酒的工业化生产过程中，所用的原料一般为大麦，让大麦发芽的目的是 对大麦进行烘焙的目的是 (3)啤酒的发酵过程中酵母菌的繁殖及酒精的生成分别发生在 阶段和 阶段。 (填“主发酵”或“后发酵”) (4)啤酒发酵过程中必须严格控制好pH、溶解氧等发酵条件，当pH发生偏离时可采取的调节措 施有 (答出一点即可)：不同品牌的啤酒生产工艺、所选材料基本一致， 但啤酒的风味却有差别，其原因可能是 (答出一点即可)。 22.(11分)牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从 瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了如下实验。请分析并回答下列问题：实验步骤： I、取样：从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。 高二生物试题 Ⅱ、培养基的配制和灭菌：全营养LB固体培养基的配方：水、蛋白胨、酵母提取物、NaC1、 琼脂糖（一种凝固剂）。尿素固体培养基的配方：水、葡萄糖、NaC1、KHPO4、尿素、琼脂 糖。 Ⅲ、制备瘤胃稀释液并接种，如图1所示。 V、在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。 9mL无菌水 1mL 1mL ImLImL 瘤胃的 99m 0.ImL ① ② ④ 无菌水 胃液样品 68个菌落·一® 图2 75个菌落←一® 图1 67个菌落←一® (1)全营养LB固体培养基和尿素固体培养基都含有微生物生长所需的基本营养物质，除水 外还有 。（至少答两点) (2)该小组采用 法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。为检测该 培养基灭菌是否彻底，应采用的方法是 本实验在 (“18~25℃”或“25~30℃”或“30~37℃”)的恒温培养箱 中需培养1-2，每隔2-4h统计一次菌落数目，选择菌落数日稳定时的记录作为结果，其 目的是 (3)若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养，培养后平板上出现的 菌落数如图1所示，则5mL瘤胃样品中含有目标活菌数约为 个。该方法统 计获得的菌落数比实际的活菌数少的原因是 23.(8分)三白草和鱼腥草是不同属的两种药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常 被用作“药对”。科研人员欲将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生 长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。 三白草 ① 三白草叶肉细 的幼叶 胞的原生质体 ③ ④ ② 杂种原 煎 代谢 鱼腥草 ① 鱼腥草幼根细 生质体 组织 立物 的幼根 胞的原生质体 图1 第4页共6页 (1)过程③、④所用的培养基中 (含有/不含有)有机碳源。 (2)用红色荧光标记鱼腥草原生质体，在显微镜下观察融合的活细胞中有 (结构)存 在且带有红色荧光，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 (③)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是保持 的完整性。原生质体经过 再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。 (4)图1获得代谢产物的过程属于细胞产物的工厂化生产，主要应用的技术是 (填“植物组织培养”或“植物细胞培养”)。 (⑤)进一步研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。由图2 可知，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度约为 10叶 传699 4 Lr 1×105 1×1061×1071×108原生质体 图2 密度/（个mL) 注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞。 (6)通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体 对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组 三白草和鱼腥草杂种愈伤 三白草和鱼腥草直接混 蒸馏水 实验 组织的蒸馏水提取物 合后的蒸馏水提取物 处理 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的 表格中实验处理后，应检测各组小鼠的 若实验结果为A、B两组基本相 同且都 (大于/等于/小于)C组，则支持利用原生质体融合技术可将复方的配 高二生物试题 伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 24.(14分)人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(cTnT), 肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC),其中cInI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指 标。为制备抗cTI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题： 注射 cTnl- 小鼠+浆细胞一 台甲z②丙分逃，抗单 克隆抗体 骨髓瘤细胞 (1)动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入 一定量的 以满足动物细胞培养的营养需要。浆细胞需要与骨髓瘤细胞融 合的原因是 (2)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 为了防止 有害代谢物的积累，可采用 的方法，以便清除代谢物。 (3)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其日的是 最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化 学诱导因素是 (4)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是 ②过程表示将乙细胞接种 到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其 目的是筛选获得 (⑤)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 催 检测 合化，#产物 根◇0抗原 酶标 抗体 特定 抗体 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不 同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 可通过测定 来判 断待测抗原量。 第5页共6页 25.(14分)科研团队通过转基因得到了一种大肠杆菌工程菌，成为监测残留在生物组织或环境中 的四环素水平的“报警器”，其原理如图1所示，天然大肠杆菌不具备图1中所示基因。 GFP蛋白 Tet蛋白 四环素 ○（绿色荧光蛋白） 图注： → 促进！ 启动子1Tet基因 启动子2GFP基因 抑制 图1 (1)在上述研究中，需导入天然大肠杆菌的基因有 (选填序号) ①四环素合成相关基因②GFP基因 ③TETR基因④RNA聚合酶基因 (2)基因工程中最核心的步骤是 既要使目的基因在受体细胞 中 又要使目的基因能 够 (3)图1中，当环境中不含四环素时，该大肠杆菌工程菌 (选填“能”或“不 能”)发光：环境中四环素水平越高，该种大肠杆菌工程菌的荧光 (选填“越强”或“越弱”)。 (4)图2是2个DNA片段、质粒及其上限制酶识别识别序列的分布情况：其中质粒上的AmpR代表 青霉素抗性基因。表为相关限制性内切酶的识别序列与切割位点。 Xba I EcoR I EcoR I DNA Xba I 片段1 启动子1 Tet基因 Amp 质粒 Spe I BamH I DNA 片段2 ori 启动子2GFP基因 BamH I 图2 高二生物试题 限制酶 EcoR I Xba I 识别序列及 5…G↓AATT C3'5…T↓CTAG A3' 切割位点 3'.C TTAA↑G…5 3'.…A GATC↑T5 限制酶 Spe I BamH I 识别序列及 5'.…A↓CTAG T-3' 5'..G↓GATC C3' 切割位点 3'.…T GATC↑A…5 3.…C CTAG↑G5 若想要拼接DNA片段1和DNA片段2和上中信息，结合图2和上表中信息，两者拼接处对 DNA片段1应使用 酶切，对DNA片段2应使用 酶切，拼 接后得到的碱基序列为 (5’→3’方向)。 (5)研究人员设计了一个同时含DNA片段1和2的重组质粒的拼接方案，结合相关信息， 最终建构成功的重组质粒示意图最合理的是 A. EcoR I Tet基因 B. EcoR I Tet基因 启动子1 启动子1 <Xba I AmpR AmpR 质粒 GFP基因 质粒 GFP基因 ori 启动子2 ori 启动子2 BamH I BamH I C. EcoR I Te基因 D EcoR I Tet基因 启动子1 启动子1 -Xba I AmpR 启动子2 AmpR 启动子2 质粒 质粒 GFP基因 GFP基因 on ori BamH I BamH I 第6页共6页 2025-2026学年度下学期期中考试 高二生物答案及评分标准 一、选择题：1-20题 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 D D C C A A D B C D 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 C A B B D B BC AC ABC CD 2、 非选择题： 21.（8分，8个空）【答案】 （1）异养兼性厌氧 无氧 （2）释放淀粉酶 加热杀死种子胚，但不使淀粉酶失活 （3）主发酵 主发酵 （4）加缓冲液/加酸或者碱/补加营养物质 所选择的酵母菌品种不同、发酵的时间不同、发酵的温度不同 22.（11分，7个空）【答案】 （1）碳源、氮源、无机盐 （2）（稀释）涂布平板； 将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养，检验是否有菌落产生；（2分） 30～37℃； 为了防止培养时间不足导致菌落遗漏（2分） （3）3.5×1010（2分）； 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（2分） 23.（8分，8个空）【答案】 (1) 含有 (2) 叶绿体 (3) 原生质体 细胞壁 (4) 植物细胞培养 (5) 1×106个/mL (6) 免疫器官的重量 大于 24.（14分，10个空）【答案】 (1) 血清 浆细胞不能无限增殖，融合后获得的杂交瘤细胞兼具两者特性 (2) 抗生素 定期更换培养液 (3) 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞（2分） 聚乙二醇(PEG) (4) 乙和丙 能产生(特异性强，灵敏度高的)抗cTnI抗体的杂交瘤细胞（2分） (5) 与待测抗原结合，催化抗原分解（2分） 酶促反应的产物量（2分） 25.（14分，10个空）【答案】 （1） ②③ （2） 基因表达载体的构建 稳定存在并遗传给下一代， 表达和发挥作用 XbaI酶（2分）、SpeI酶（2分） （3） 不能 增强 （4） 5’-TCTAGT-3’（2分） （5） D（2分） 1 学科网（北京）股份有限公司 $a 2025-2026学年度下学期期中考试 高二生物答题卡 姓名： 班级： 座号： 考场： 注意事项 1,答题前请将姓名、班级、考场、座位号和准考证号填写清楚 2客观题答题，必须使用2B铅笔填涂，修改时用橡皮擦干净 3.主观题必须使用黑色签字笔书写 贴条形码区 4必须在题号对应的答题区域内作答，超出答题区域书写无效 (正面朝上，切勿贴出虚线方框) 5.保持答卷清洁完整 正确填涂■ 缺考标记☐ 选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1[A][B][C][D]6[A][B][C][D] I[A][B][C][D] 2【A][B][C][D]7[AJ[B][C][D] 12[A][B][C][D] 3[A][B][C][D]8[A][B][C][D] 13[A][B][C][D] 4[A][B][C][D] 9[A][B][C][D] 14[A][B][C][D] 5【A][B][C][D] 10【A][B][C][D]5[A][B][C][D] 二、 选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求 的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。 16[A][B][C][D] 7[A][B][C]D] 18[A][B][C][D] 9[A][B][C][D] 20[A][B][C][D] 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21(8分)1) (2) (3) (4) a 22(11分)(1) (2) (2分) (2分)(3) (2分) (2分) 23(8分)1) (2) (3) (4) (5) (6) 24(14分)(1) (2) (3) (2分) (4) (2分)】 (5) (2分) (2分) 25(14分)(1) (2) (3) (4 (2分) (2分) (2分) (5)(2分) 2025-2026学年度下学期期中考试 高二生物试题 本试卷分选择题题和非选择题两部分，共25小题，共100分，共6页。考试时间为75分钟。考试结束后，只交答题卡。 第Ⅰ卷 选择题 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1.为充分利用地方特色水果资源，科研人员以杨梅为原料制作杨梅果醋，工艺流程如下：新鲜杨梅→清洗→去核、榨汁、过滤、酶解→调糖→加入活化酵母菌→Ⅰ酒精发酵→加入醋酸菌进行Ⅱ醋酸发酵→过滤灭菌→灌装→杨梅果醋。下列叙述正确的是（　　） A．酶解步骤加入的主要酶是蛋白酶和脂肪酶 B．从Ⅰ阶段到Ⅱ阶段需降低温度并持续通气 C．醋酸菌在Ⅱ阶段可直接将葡萄糖转化为醋酸 D．Ⅰ、Ⅱ两个发酵阶段培养液的pH均会下降 2.2026年清明节过后，广西玉林甘蔗仍滞销，许多蔗农都发出公告，免费送甘蔗，但有民间俗语“清明蔗，毒过蛇”让很多市民望而却步。其实这句俗语并非指所有甘蔗都有毒‌，而是特指‌霉变的甘蔗‌。某兴趣小组为了弄清楚霉变的甘蔗中含有哪种霉菌，要进行实验培养，首先要对实验室进行严格的灭菌和消毒。下列说法正确的是(　　) A．消毒和灭菌仅是为了获得纯净的微生物培养物 B．灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子 C．灼烧法灭菌的对象是金属器具，不能是玻璃器具 D．无菌操作时，要对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行清洁和消毒 3.马丁氏培养基配方如下：葡萄糖 10 g、蛋白胨 5 g、KH2PO₄1 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、琼脂 15～20 g，定容前加入 3.3 mL 质量分数为 1% 的孟加拉红水溶液。孟加拉红能抑制大多数细菌的生长。下列相关叙述正确的是（　） A. 该培养基中的碳源只有葡萄糖，氮源只有蛋白胨 B. 制备培养基时，应先加入孟加拉红溶液，再灭菌并定容 C. 倒平板后应待培养基冷却凝固，再将平板倒置培养 D. 该培养基属于鉴别培养基，可用于区分真菌和细菌 4.下列有关发酵工程应用的叙述，不合理的是（　　） A. 利用发酵工程生产的微生物农药，作为生物防治的重要手段来防治害虫 B. 某些疫苗、动物激素是利用基因改造或转基因的酵母菌发酵生产的 C. 利用微生物在发酵过程中的代谢产物生产单细胞蛋白、农药、饲料等 D. 嗜热菌可以用来生产洗涤剂，嗜低温菌有助于提高热敏性产品的产量 5．从胰岛素依赖型糖尿病患者的骨髄中分离骨髓间充质干细胞(MSC)，诱导分化成胰岛样细胞，再导入该患者体内。放射性免疫分析结果表明诱导的胰岛样细胞团可以正常分泌胰岛素，患者的血糖恢复正常。下列说法正确的是(　　) A．培养骨髄间充质干细胞的培养液通常需加入血清 B．在体外连续培养时，利用胃蛋白酶将接触抑制的骨髄间充质干细胞分开 C．在功能上，骨髓间充质干细胞具有发育的全能性 D．治疗成功后，康复者的血型有可能发生改变 6.“神舟十五”飞船带回了在太空微重力环境下进行的多能干细胞向早期造血干细胞分化的研究样品，首次实现了人类干细胞“太空造血”。在太空培养的干细胞呈现出优于地面的生长方式，在微重力环境中干细胞的体外培养更接近于胚胎内干细胞的增殖与分化。下列有关干细胞的说法错误的是（  ） A．随着干细胞传代次数的增加，细胞全能性逐渐升高 B．多能干细胞分化的实质是基因的选择性表达，使细胞种类增多 C．自体细胞诱导的干细胞在器官移植和再生上可有效避免免疫排斥反应 D．太空的微重力环境能为增强干细胞诱导分化效率提供新途径 7.我国科学家经过反复实验，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍，能在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞内。2017年，世界上首例体细胞克隆猴“中中”、“华华”的诞生，标志着我国的克隆技术走在了世界前列。培育体细胞克隆猴的简要流程如下图，相关分析正确的是（　　） A．供卵母猴的卵母细胞“去核”是指通过显微操作去掉MⅡ期的染色体 B．重构胚的激活，除用图中TSA、Kdm4d的mRNA外，还可用Ca2+等处理 C．“中中”“华华”与胎猴长的最像，性别为一雌一雄有利于繁衍后代 D．若用遗传背景相同的“中中”“华华”进行药物研发实验，能更好地控制无关变量 8．辣椒素作为一种生物碱，广泛用于食品保健、医药工业等领域。通过植物组织培养技术快速繁殖高产辣椒植株并提取辣椒素，是目前工业化生产的重要途径。其获得途径如下，下列说法正确的是(　　) A．过程①受外源激素的调控，过程②受内源激素的调控 B．辣椒素是次生代谢物，通过细胞培养获得辣椒素的过程可不需要实现植物细胞的全能性 C．获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病能力 D．实现过程①的条件是外植体细胞发生基因突变 9.马铃薯通常是用无性繁殖的方式进行繁殖的，它们感染的病毒很容易传给后代，随着病毒在作物体内逐渐积累而导致作物减产，品质变差。实验人员为此研究了不同大小的茎尖对诱导分化苗和脱毒苗的影响，结果如图所示。下列分析合理的是(　　) A．在诱导茎尖形成幼苗的不同阶段，培养基中激素的比例不变 B．该实验中的茎尖越大，诱导形成的幼苗的脱毒效果越好 C．在诱导茎尖脱分化过程中一般不需要光照，而再分化时需要光照 D.该实验中茎尖大小为0.3～0.5 mm时，其茎尖诱导形成分化苗的效果最佳 10.“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的是（ ） A. 裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质 B. 分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等 C. 沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度 D. 鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色 11.下列有关电泳的叙述，不正确的是(　　) A．电泳是指带电分子在电场的作用下发生迁移的过程 B．待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率 C．进行电泳时，带电分子会向着与其所带电荷相同的电极移动 D．PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定 12.人乳铁蛋白（hLF）是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，具有抑菌、抗肿瘤等多种生理功能，被认为是一种极具开发潜力的食品添加剂。某科研团队将人乳铁蛋白（hLF）基因转入到山羊体内，从山羊的乳液中获得hLF，可以解决天然乳铁蛋白资源短缺的问题，下列有关叙述错误的是（     ） A．可用PCR直接扩增乳铁蛋白的基因转录产物 B．重组载体中人乳铁蛋白基因的启动子是乳腺蛋白基因启动子 C．将目的基因导入山羊受精卵中一般应用的技术是显微注射法 D．可通过PCR等技术检测人乳铁蛋白基因是否成功转录出mRNA 13.实时荧光RT­PCR用于新冠病毒核酸检测的原理如下：在PCR复性过程中探针会先与DNA的一条模板链结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，在新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT­PCR进行核酸检测的相关过程如下图，下列相关叙述错误的是(　　) A.若检测结果是有强烈荧光信号发出，则说明被检测者可能感染了病毒 B.进行RT­PCR扩增需要的酶有逆转录酶、解旋酶和耐高温的DNA聚合酶 C.还可以通过检测病毒感染后产生的蛋白来检测，其原理是抗原—抗体杂交 D.PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，必须控制好循环温度和时间 14.科学家们已通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等。采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（  ） ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列 ②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列 ③蓝色荧光蛋白基因的合成 ④表达出蓝色荧光蛋白 A.①②③④ B．②①③④ C．②③①④ D．④②①③ 15.下列对于生物武器和生物技术安全性的说法，错误的是(　　 ) A．生物武器可通过吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等侵入人体 B．将生物毒素分子的基因与流感病毒的基因拼接在一起，是对病毒进行了基因重组 C．通过“设计试管婴儿”与“试管婴儿”生殖，实质上都属于有性生殖 D．我国对农业转基因生物实行标识制度，要求警示性注明产品可能的危害 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。 16、下列关于生物工程相关知识的叙述，正确的有(　　) ①在基因工程操作中为了获得重组质粒，可以用不同的限制性内切酶切割质粒和目的基因，但露出的黏性末端必须相同 ②只要B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，就能产生单克隆抗体 ③蛋白质工程的目标是通过基因重组，合成生物体本来没有的蛋白质 ④生态农业使废物资源化，提高能量的传递效率，减少了环境污染 ⑤诱导细胞融合之前，需将抗原反复注射给实验小鼠，目的是获得产生单一抗体的浆细胞。 A.①　　　B．①⑤　　　C．①④⑤　　　D．①②④⑤　 17.研究者用M病毒膜蛋白对小鼠进行免疫,分离小鼠脾细胞并将其与S细胞融合,通过筛选获得单个稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。下列相关叙述正确的是(　　) A.用动物细胞培养液培养M病毒,通过离心可获得膜蛋白作为抗原 B.可用M病毒膜蛋白多次免疫小鼠,以获得更多的浆细胞 C.杂交瘤细胞细胞应具备产生抗体和无限增殖的能力 D.体外培养单个杂交瘤细胞获得大量抗体体现了细胞的全能性 18.蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。下图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1~4表示DNA上引物可能结合的位置，下列叙述正确的是（    ） A．若受体细胞为大肠杆菌，则蛛丝蛋白需要进一步加工才具有相应的功能 B．若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏2个磷酸二酯键 C．若用PCR技术获取目的基因，则图中的2、3分别是2种引物结合的位置 D．选择图中适宜引物进行PCR扩增，经过5次循环可获得32个等长的蛛丝蛋白基因 19.研究人员发现高强度光照下，番茄会通过NPQ(一种光保护机制)散失过多热能，避免高强度光照造成损伤。为研究 V基因对NPQ的作用机制，科研人员利用病毒诱导基因沉默技术(VIGS技术)特异性地使V基因沉默，发现高强度光照下番茄叶片的损伤明显增强。技术原理如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．本实验中的目的基因应选用V基因，该基因可通过 PCR 技术获得 B．该过程中目的基因整合到特殊农杆菌的 T-DNA 上 C．该过程中 VIGS技术通过降解 V 基因的 mRNA 进而抑制 V 基因的表达 D．V基因的表达可能促进了NPQ机制的活化 20.研究者对绿色荧光蛋白进行改造,将其第203位苏氨酸替换为酪氨酸,使改造后的蛋白质在特定光激发后发射橙色光,称为橙色荧光蛋白。关于橙色荧光蛋白的构建,以下说法错误的是(　　) A.不能用蛋白酶直接处理绿色荧光蛋白获得目标产物 B.设计定点突变PCR获得橙色荧光蛋白基因 C.PCR扩增获得的产物激发后可以发橙色荧光 D.绿色荧光蛋白基因发生的突变类型为碱基缺失 第Ⅱ卷 非选择题 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. （8分）吉安啤酒厂生产的燕京啤酒色泽纯正、风味独特，深受人们喜爱。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，工业化生产流程如图所示。回答下列问题： （1）用于生产啤酒的酵母菌属于_________(填代谢类型)菌，在_________条件下能够分解葡萄糖产生酒精和二氧化碳。 （2）在啤酒的工业化生产过程中，所用的原料一般为大麦，让大麦发芽的目的是________________，对大麦进行烘焙的目的是____________________________________。 （3）啤酒的发酵过程中酵母菌的繁殖及酒精的生成分别发生在_________阶段和_________阶段。(填“主发酵”或“后发酵”) （4）啤酒发酵过程中必须严格控制好pH、溶解氧等发酵条件，当pH发生偏离时可采取的调节措施有_________________________(答出一点即可)；不同品牌的啤酒生产工艺、所选材料基本一致，但啤酒的风味却有差别，其原因可能是______________________________(答出一点即可)。 22．（11分）牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了如下实验。请分析并回答下列问题：实验步骤： Ⅰ、取样：从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。 Ⅱ、培养基的配制和灭菌：全营养LB固体培养基的配方：水、蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂糖（一种凝固剂）。尿素固体培养基的配方：水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂糖。 Ⅲ、制备瘤胃稀释液并接种，如图1所示。 Ⅳ、在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。 （1）全营养LB固体培养基和尿素固体培养基都含有微生物生长所需的基本营养物质，除水外还有 。（至少答两点） （2）该小组采用　 　 法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。为检测该培养基灭菌是否彻底，应采用的方法是　 　 。本实验在　 　 　（“18～25℃”或“25～30℃”或“30～37℃”）的恒温培养箱中需培养1﹣2d，每隔2﹣4h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果，其目的是　　　　　　　　　　　　　　 　。 （3）若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养，培养后平板上出现的菌落数如图1所示，则5mL瘤胃样品中含有目标活菌数约为　 　个。该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数少的原因是 　。 23．（8分）三白草和鱼腥草是不同属的两种药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。科研人员欲将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。 (1)过程③、④所用的培养基中_________（含有/不含有）有机碳源。 (2)用红色荧光标记鱼腥草原生质体，在显微镜下观察融合的活细胞中有____________（结构）存在且带有红色荧光，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 (3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是保持__________的完整性。原生质体经过______________再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。 (4)图1获得代谢产物的过程属于细胞产物的工厂化生产，主要应用的技术是__________________（填“植物组织培养”或“植物细胞培养”）。 (5)进一步研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。由图2可知，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度约为___________。 (6) 通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半随机均分为三组，实验处理如下表。 表格中实验处理后，应检测各组小鼠的______________________，若实验结果为A、B 两组基本相同且都_________________（大于/等于/小于）C 组，则支持利用原生质体融合技术可将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 24.（14分）人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(cTnT)，肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC)，其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题： (1)动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的 ，以满足动物细胞培养的营养需要。浆细胞需要与骨髓瘤细胞融合的原因是 。 (2)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 。为了防止有害代谢物的积累，可采用 的方法，以便清除代谢物。 (3)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是 ，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是 。 (4)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是 ，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得 。 (5)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 ，可通过测定 来判断待测抗原量。 25.（14分）科研团队通过转基因得到了一种大肠杆菌工程菌，成为监测残留在生物组织或环境中的四环素水平的“报警器”，其原理如图1所示，天然大肠杆菌不具备图1中所示基因。 （1）在上述研究中，需导入天然大肠杆菌的基因有          （选填序号） ①四环素合成相关基因 ②GFP基因 ③TETR基因 ④RNA聚合酶基因 （2）基因工程中最核心的步骤是             ，既要使目的基因在受体细胞中 ，又要使目的基因能够 。 （3） 图1中，当环境中不含四环素时，该大肠杆菌工程菌         （选填“能”或“不能”）发光；环境中四环素水平越高，该种大肠杆菌工程菌的荧光                （选填“越强”或“越弱”）。 （4） 图2是2个DNA片段、质粒及其上限制酶识别识别序列的分布情况；其中质粒上的AmpR代表青霉素抗性基因。 表为相关限制性内切酶的识别序列与切割位点。 若想要拼接DNA片段1和DNA片段2和上中信息，结合图2和上表中信息，两者拼接处对DNA片段1应使用 酶切，对DNA片段2应使用         酶切，拼接后得到的碱基序列为        （5’→3’方向）。 （5）研究人员设计了一个同时含DNA片段1和2的重组质粒的拼接方案，结合相关信息，最终建构成功的重组质粒示意图最合理的是      。 高二生物试题 第 1 页 共 2 页 学科网（北京）股份有限公司 $