精品解析：辽宁沈阳市第一二0中学2025-2026学年高二下学期期中生物试卷

沈阳市第120中学2025-2026学年度下学期 高二年级期中考试 生物试题 满分：100分；时间：75分钟 一、单选择题（共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个正确选项，选错0分） 1. 青海互助青稞酒是产自青海省海东市互助土族自治县的国家地理标志保护产品，被誉为“中国青稞酒之源”，其传统酿造技艺被列入国家级非物质文化遗产名录。据了解，互助青稞酒是以岩木窖池为发酵容器，而多年反复利用的窖池内壁的窖泥中含有多种与酿酒有关的微生物。下列叙述错误的是（　　） A. 互助青稞酒的酿造是以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的 B. 窖池中的各种微生物会形成相对稳定的体系，从而不容易被杂菌污染 C. 酿酒原料以青稞为主，经发酵形成的酒糟中可分离出产淀粉酶的微生物 D. 若对分离出的酿酒酵母做扩大培养，则需在二氧化碳或氮气环境中进行 【答案】D 【解析】 【详解】A、青稞酒酿造主要依靠酿酒酵母，由于窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物，故互助青稞酒的酿造是以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的，A正确； B、多年反复使用的窖池中微生物群落经长期演替形成相对稳定的体系，种间相互制约可抑制外来杂菌的生长繁殖，因此不易被杂菌污染，B正确； C、青稞的主要有机物为淀粉，发酵过程中需要产淀粉酶的微生物将淀粉分解为单糖才能被酵母菌利用，因此酒糟中可分离出产淀粉酶的微生物，C正确； D、对酿酒酵母进行扩大培养时，需在有氧环境中培养，促进酵母菌通过有氧呼吸获得大量能量用于增殖，在二氧化碳或氮气环境中不利于酵母菌大量繁殖，D错误。 2. 土壤中有丰富的微生物，若要利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化，过程如图。下列相关叙述正确的是（　　） A. 若要筛选分解尿素的细菌，尿素可作为培养基中的唯一碳源 B. 理论上每毫升菌液中1号试管的活菌数是4号试管的1000倍 C. 4号试管的培养结果表明，每克土壤中的活菌数约为1.1×109个 D. 接种用的培养皿可用干热灭菌，可杀死微生物细胞和部分芽孢 【答案】B 【解析】 【详解】A、若要筛选分解尿素的细菌，应配制以尿素为唯一氮源的培养基，A错误； B、从图中可以看出，从1号试管依次到4号试管每稀释一次均稀释10倍，1号试管到4号试管是1000倍稀释，所以理论上每毫升菌液中1号试管的活菌数是4号试管的1000倍，B正确； C、4号试管进行了105倍稀释（5g土样加入45mL无菌水是10倍稀释，后续又进行了4次10倍稀释），且0.1 mL菌液中平均菌落数为(113+106+111)÷3=110个，那么每克土壤中的活菌数约为 110÷0.1×105=1.1×108个，C错误； D、接种用的培养皿常用干热灭菌法灭菌，干热灭菌可杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，D错误。 3. 白酒生产时常用国标法检测样品中的沙门氏杆菌数目。当样品中积累了过多乙醇、乳酸及抗菌肽等抑菌物质时，会干扰检测。科研人员在此基础上优化检测方法，大大提升检出率，两种方法如下图所示。下列叙述正确的是（　　） 注：BPW主要成分为蛋白胨、磷酸盐缓冲盐、氯化钠、水等。 A. 取样后直接用血细胞计数板在显微镜下计数活菌 B. 可采用划线法或稀释涂布法将待测液接种至选择培养基 C. 优化法中增加BPW用量的主要目的是提供更多营养物质 D. BPW培养液中的蛋白胨可为沙门氏杆菌提供碳源、氮源 【答案】D 【解析】 【详解】A、血细胞计数板在显微镜下计数不能区分死菌和活菌，无法直接统计活菌数目，A错误； B、平板划线法只能用于分离微生物，不能用于计数，要统计活菌数目只能用稀释涂布平板法，B错误； C、题干说明样品中原本过多的乙醇、乳酸、抗菌肽等抑菌物质会干扰检测，增加BPW用量的主要目的是稀释样品中的抑菌物质，降低其浓度，减小抑菌作用，不是为了提供更多营养，C错误； D、蛋白胨含有多种有机物，可为微生物（沙门氏杆菌）提供碳源、氮源，D正确。 4. 青霉素是人类发现的第一种抗生素，其工业化生产流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 由于青霉素的杀菌作用，④过程不需严格灭菌 B. 发酵罐中发酵是该工程的中心环节，需将pH值调到中性或弱碱性 C. 发酵过程中需从下方的充气口通入无菌空气以提高溶氧量 D. 过程⑤常用的方法是过滤和沉淀，可从分离出的菌种中提取到单细胞蛋白 【答案】C 【解析】 【详解】A、青霉素仅对细菌有杀菌作用，且发酵生产必须防止杂菌污染（杂菌会竞争营养、影响青霉素产量），培养基的④灭菌过程必须严格进行，A错误； B、发酵罐发酵是发酵工程的中心环节，但青霉菌（真菌）发酵适宜pH为微酸性，中性或弱碱性是细菌类发酵的适宜pH，B错误； C、青霉菌是异养需氧型微生物，发酵过程需要从下方通入无菌空气保证溶氧量，满足青霉菌的有氧呼吸需求，C正确； D、单细胞蛋白是单细胞微生物（酵母、细菌等）的菌体本身，青霉菌是多细胞真菌，且青霉素生产的目的产物是青霉素，分离得到的菌体不是用于提取单细胞蛋白，D错误。 5. 紫杉醇是从红豆杉中提取的一种高效抗肿瘤药物，通过抑制纺锤丝中微管蛋白解聚，导致纺锤丝僵化无法正常缩短，从而诱导肿瘤细胞凋亡。从植物中直接提取紫杉醇会严重消耗野生资源，科研人员尝试采用植物细胞培养技术获取紫杉醇，基本流程如图所示。以下叙述错误的是（ ） A. 红豆杉根尖组织培养前需要消毒，紫杉醇是红豆杉细胞的次生代谢物 B. 高效抗肿瘤药物紫杉醇阻滞癌细胞的细胞周期，从而诱导其凋亡 C. 通过植物细胞培养技术获取紫杉醇，其理论基础是植物细胞的全能性 D. ①过程通常使用固体培养基，需加入植物激素诱导细胞脱分化形成愈伤组织 【答案】C 【解析】 【详解】A、根据植物组织培养的基本操作，外植体（如根尖组织）需要先消毒，避免杂菌污染。同时，紫杉醇属于次生代谢产物，不是植物生长发育所必需的物质，A正确； B、根据题干，紫杉醇通过抑制纺锤丝中微管蛋白解聚，导致纺锤丝僵化无法正常缩短，这会影响有丝分裂后期染色体的分离，使细胞周期阻滞在M期，最终诱导肿瘤细胞凋亡，B正确； C、植物细胞全能性是指已分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能。然而，本题中仅将根尖组织脱分化为愈伤组织，并未将其再分化为完整植株，而是通过细胞培养获取代谢产物，C错误； D、①过程是脱分化，即将外植体（根尖组织）培养成愈伤组织，此过程需要在固体培养基上进行，且需添加生长素和细胞分裂素等植物激素，以诱导细胞脱分化，D正确。 6. 科学家利用马铃薯和西红柿叶片分离原生质体并进行细胞杂交，最终获得了杂种植株，相关过程如图所示。下列有关分析正确的是（　　） A. 对过程①获取的外植体需用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒 B. 可根据是否发生质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生 C. 过程①应将叶片下表皮向下，置于含纤维素酶和果胶酶的低渗溶液中 D. ⑤进行脱分化和再分化过程，杂种植株一定具有马铃薯和西红柿的优良性状 【答案】B 【解析】 【详解】A、外植体消毒需先用乙醇消毒30s，然后立即用无菌水冲洗2-3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次。二者为先后使用，而非混合液消毒，混合可能降低消毒效果或损伤外植体，A 错误； B、细胞壁是植物细胞发生质壁分离的结构基础。若杂种细胞再生细胞壁，在高渗溶液中会发生质壁分离；若未再生细胞壁，则不会发生质壁分离，因此可通过是否发生质壁分离鉴别细胞壁是否再生，B 正确； C、获取原生质体时，酶溶液需添加渗透压稳定剂（如甘露醇），维持原生质体形态，避免低渗溶液导致原生质体吸水破裂；且叶片下表皮应向下放置，便于酶液接触并分解细胞壁，C 错误； D、脱分化和再分化可培育出杂种植株，但由于基因互作、表达调控等因素，杂种植株不一定能同时表现马铃薯和西红柿的优良性状，可能出现性状丢失或不良性状，D 错误。 故选 B。 7. 细胞工程在治疗疾病和育种等领域应用十分广泛。为降低宫颈癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），以便精准治疗，其生理过程如图所示。以下叙述错误的是（ ） A. 小鼠的骨髓瘤细胞在培养过程中通常不会出现接触抑制现象 B. 过程①诱导细胞融合常用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等 C. 单克隆抗体特异性强、灵敏度高并可大量制备，能精确地定位宫颈癌细胞 D. 过程②筛选的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生所需的特异性抗体 【答案】D 【解析】 【详解】A、小鼠的骨髓瘤细胞是癌细胞，癌细胞的特点是失去接触抑制，能无限增殖，因此在培养过程中通常不会出现接触抑制现象，A正确； B、动物细胞融合（过程①）常用的诱导方法包括：PEG（聚乙二醇）融合法、电融合法、灭活病毒（如仙台病毒）诱导法等，这是单克隆抗体制备的标准操作，B正确； C、单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可大量制备，能精准识别并定位目标细胞，符合ADC精准治疗的原理，C正确； D、过程②是第一次筛选，筛选出的是杂交瘤细胞，其不一定产生所需的特异性抗体，需要经过过程③的克隆化培养和抗体检测，才能获得既能大量增殖、又能产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞，D错误。 8. 分散到水溶液中的磷脂分子会自发组装成充满液体的球状小泡，称为脂质体。研究人员在脂质体外包裹上聚乙二醇，形成一层保护层，能避免吞噬细胞的识别，并镶嵌上相应的抗体，制造出一种能定向运送药物的“隐形脂质体”（如下图）。目前这种“隐形脂质体”已在癌症治疗中得到应用。下列叙述错误的是（　　） A. 镶嵌在脂质体表面的抗体，可与靶细胞表面的特定抗原结合以实现精准送药 B. 若无聚乙二醇保护层，则脂质体易被吞噬细胞吞噬导致药物不能送至靶细胞 C. 药物B分布在磷脂双分子层之间，说明药物B分子中含有较多的亲水基团 D. “隐形脂质体”与靶细胞结合后，能与靶细胞膜融合 【答案】C 【解析】 【详解】A、抗体能与靶细胞表面特定抗原特异性结合，不能与其他细胞结合，从而实现药物精准递送，A正确； B、聚乙二醇保护层可避免吞噬细胞识别，若无此层，脂质体易被吞噬，药物无法到达靶细胞，B正确； C、磷脂双分子层内部是疏水端，药物B分布于此，说明其含较多疏水基团，C错误； D、“隐形脂质体”的主要成分是磷脂，“隐形脂质体”也是一种特殊的膜结构，因为膜具有一定的流动性，“隐形脂质体”与靶细胞结合后，能与靶细胞的细胞膜融合，D正确。 故选C。 9. 猪的生理特征、器官大小以及胚胎发育方面与人类具有很高的相似性，成为“种植”人类器官的热门动物。下图为我国科学家利用猪培育可用于移植的人源肾脏的相关过程。下列叙述正确的有（ ） A. 推测SIX1/SALL1两种基因是人源肾脏发育所必需的基因 B. 可用载体、聚乙二醇等化学方法激活重构胚 C. 注入人源干细胞的作用是使人源干细胞分化产生人的组织和器官 D. 这种肾脏中虽然有部分猪细胞，但移植给人不会引起免疫排斥 【答案】C 【解析】 【详解】A、根据SIX1/SALL1缺陷的早期胚胎发育成肾脏缺陷胚胎可知，这两个基因是猪肾脏发育必需的基因，A错误； B、用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B错误； C、注入人源干细胞的作用是为了让注入的人源干细胞分化为人源肾脏，C正确； D、这种肾脏中含有部分猪细胞，属于外来异物，依然会引起免疫排斥，D错误。 10. 母乳来源的胆盐激活酯酶(BSSL)是一种脂肪酶，具有广泛的底物水解活性，对乳脂消化吸收具有重要作用。因此，对胆盐激活酯酶的研究是“人乳化牛奶”计划的重要组成部分。下图表示含有BSSL基因的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，限制性内切核酸酶MspI、SmaI识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、CCC↓GGG。下列叙述错误的是（ ） A. 限制酶能识别双链DNA中特定核苷酸序列，并断开特定位置的磷酸二酯键 B. 若用MspI酶切割BSSL基因产生的黏性末端只能用E.coliDNA连接酶连接 C. 若要将外源基因导入细胞，可以用质粒、噬菌体、动植物病毒等作为载体 D. 若用限制酶Sma I完全切割图中DNA片段，其产物长度为339 bp、9844 bp、533 bp 【答案】B 【解析】 【分析】限制性核酸内切酶切断的化学键所处的具体部位是磷酸二酯键。 【详解】A、限制酶的作用是识别双链DNA中特定核苷酸序列，并断开特定位置的磷酸二酯键，A正确； B、MspI酶切割后，BSSL基因和质粒产生的黏性末端可以用E．coliDNA连接酶或T4DNA连接酶连接，平末端的连接只能用T4DNA连接酶连接，B错误； C、可以利用质粒、噬菌体、动植物病毒等作为载体将外源基因导入细胞，C正确； D、根据题意可知，SmaI的酶切位点CCC↓GGG，结合图示可知，若用限制酶Sma I完全切割图中DNA片段，其产物长度为339 bp、9844 bp、533 bp，D正确。 故选B。 11. PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如图所示，图中a、b、c表示3个步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A. a、b、c分别表示变性、复性、延伸，对应温度依次降低 B. c过程从引物的5＇端开始连接4种脱氧核苷酸 C. 高温能激活TaqDNA聚合酶，PCR反应体系中无须加入Mg2+ D. 若1个DNA进行6轮循环，则需要消耗63个引物Ⅰ 【答案】D 【解析】 【详解】A、PCR的3个步骤依次是a变性（高温，95℃左右，双链解旋）、b复性（退火，55℃左右，引物结合模板）、c延伸（72℃左右，Taq酶合成DNA），对应温度是先升高、再降低、再升高，不是依次降低，A错误； B、c是延伸过程，DNA聚合酶只能从引物的3'端延伸DNA链，B错误； C、TaqDNA聚合酶是耐热的DNA聚合酶，在PCR反应体系中需要加入Mg2+来激活该酶的活性，C错误； D、1个DNA进行n轮循环，最终得到2ⁿ个DNA分子，每个DNA复制时都需要2个引物（引物Ⅰ和引物Ⅱ），若1个DNA进行6轮循环，共合成26=64个DNA分子，其中只有最初的模板DNA分子不需要引物Ⅰ和引物Ⅱ，所以需要消耗引物Ⅰ和引物Ⅱ的数量都是64-1=63，D正确。 12. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述错误的是（ ） EcoRI BamHI KpnI MfeI HindIII 5′−G↓AATTC−3′ 3′− CTTAA↑G−5′ 5′−G↓GATCC−3′ 3′− CCTAG↑G−5′ 5′−G↓GTACC−3′ 3′−CCATG↑G −5′ 5′−C↓AATTG−3′ 3′−GTTAA↑C −5′ 5′−A↓AGCTT−3′ 3′−TTCGA↑A −5′ A. THP9基因有2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在5′端 B. 构建基因表达载体时，用MfeI、HindIII切割质粒，用EcoRI、HindIII切割目的基因 C. 利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4 D. 为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，需要在个体水平上检测其蛋白质含量 【答案】C 【解析】 【详解】A、THP9基因有2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在每一条链的5′端，A正确； B、构建基因表达载体时，用MfeⅠ、HindⅢ切割质粒时，形成的黏性末端分别是AATT-3'和AGCT-3'，用EcoRⅠ、HindⅢ切割目的基因时，形成的黏性末端分别是AATT-3'和AGCT-3'，形成的黏性末端对应相同，可以成功将目的基因插入质粒，同时避免目的基因自身环化和反向连接，B正确； C、利用PCR技术扩增基因时，引物从5'端朝向3'端延伸，故应与模板链3'端配对，故应选择引物2和引物3，C错误； D、利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种，为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，需要在个体水平上检测玉米蛋白质含量，D正确。 13. 慢病毒可有效感染人类肝细胞、肿瘤细胞以及鹌鹑胚胎细胞等多种细胞。科学家利用含有产生黑色素的基因的慢病毒侵染鹌鹑胚胎细胞，希望能使鹌鹑长出令人喜爱的黑皮肤。下列相关叙述错误的是（ ） A. 即使携带产生黑色素的基因的慢病毒成功侵染鹌鹑胚胎细胞，鹌鹑也不一定能表现为黑皮肤 B. 可以用 T2 噬菌体替代慢病毒，作为运载体转入黑色素基因 C. 使用皮肤细胞中特异性表达的启动子有利于得到此结果 D. 经过人工改造的慢病毒载体有望用于人体内的基因治疗 【答案】B 【解析】 【分析】T2 噬菌体是一种感染大肠杆菌的病毒。 【详解】A．慢病毒成功侵染后，黑色素基因需整合到宿主细胞基因组并正确表达，若未在皮肤细胞中表达或未整合，则性状不表现，A正确； B．T2噬菌体专一感染大肠杆菌，无法侵染真核生物（如鹌鹑胚胎细胞），不能作为运载体，B错误； C．皮肤细胞特异性启动子可使黑色素基因仅在皮肤细胞表达，避免其他组织表达，C正确； D．慢病毒经改造后可携带目的基因整合到宿主基因组，用于基因治疗（如遗传病），D正确； 故选B。 14. 利用蛋白质工程对干扰素进行改造，可在一定条件下延长其保存时间。下列叙述错误的是（　　） A. 天然蛋白质合成的过程按照中心法则进行，蛋白质工程与之相反 B. 利用蛋白质工程对干扰素进行改造时，操作对象是干扰素 C. 经改造后的干扰素基因能通过工程菌的繁殖实现遗传 D. 对干扰素的改造遇到的最大难题是干扰素的高级结构十分复杂 【答案】B 【解析】 【详解】A、天然蛋白质的合成遵循中心法则（DNA→RNA→ 蛋白质）；蛋白质工程是从预期蛋白质功能出发，反向推导基因序列（蛋白质→氨基酸序列→基因），与中心法则方向相反，A正确； B、蛋白质工程的操作对象是基因（通过修饰或合成基因来改造蛋白质），而非蛋白质（干扰素）本身。若直接操作蛋白质，无法实现可遗传的改造，B错误； C、经改造的干扰素基因可导入工程菌，工程菌繁殖时会复制该基因，从而实现基因的遗传（进而持续表达改造后的干扰素），C正确； D、蛋白质的高级结构（空间结构）十分复杂，而蛋白质工程需精准设计蛋白质的空间结构以实现预期功能，这是改造过程中面临的最大难题之一，D正确。 故选B。 15. 生物安全是指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康以及生态环境所产生的危害或潜在风险。下列相关叙述错误的是（ ） A. 消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面 B. 由于技术问题，生殖性克隆可能孕育出有严重生理缺陷的克隆动物 C. 为避免可能产生的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果 D. 从外来入侵害虫的原产地引入天敌进行治理，不会对入侵地造成生态影响 【答案】D 【解析】 【分析】生物安全在农业领域中，指遗传修饰生物（如转基因作物）对人体及生态系统造成的安全性问题；在生态领域中，指外来有害生物的引进和扩散，对人类生产和健康造成不利影响的各种传染病、害虫、真菌、细菌、线虫、病毒和杂草等。除此之外，生物安全还包括生物遗传资源流失、实验室生物安全、微生物耐药性、生物恐怖袭击等。生物安全是人的健康、动植物健康、生态环境健康三者安全统一的概念。 【详解】A、在生物恐怖威胁不断上升、全球传染病疫情频发的情况下，消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面，A正确； B、由于克隆技术尚不成熟，现在做克隆人很可能孕育出有严重生理缺陷的孩子。理由是重构胚胎成功率低，移植入母体子宫后胚胎着床率低、流产率高、胎儿畸形率高，出生后死亡率高等，正常的个体极少，B正确； C、为了尽力规避基因诊断的风险，避免可能产生的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果，C正确； D、从外来入侵害虫的原产地引入天敌进行治理，由于短期内天敌没有资源和空间等的限制，可能会对入侵地造成生态影响，D错误。 故选D。 16. 酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图Ⅰ所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，对瓶中酒精浓度和活菌数量的检测结果如图Ⅱ。下列说法正确的是（ ） A. 葡萄酒发酵过程中，缺氧酸性的环境及酵母菌产生的酒精等可抑制杂菌的繁殖 B. 用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为（6.8×109个·L-1），此数值可能低于实际的活菌数 C. 可用干热灭菌法对培养皿、培养基进行灭菌，菌种接种过程中的试管口、瓶口等需灼烧灭菌 D. 由图Ⅱ可知，丙瓶应为通气（O2）培养，丁瓶中的酵母菌产酒精能力比乙瓶的强 【答案】ABD 【解析】 【分析】果酒制作过程中的相关实验操作：材料的选择和处理→灭菌→榨汁→发酵。利用葡萄皮表面野生型酵母菌在缺氧的环境下发酵产酒精。若对菌液计数，需选取菌落数处于30~300的培养皿计数。平均菌落数除以涂布体积乘上稀释倍数求的是每毫升发酵液的微生物数量，还应该再乘10算每升发酵液的微生物数。 【详解】A、利用葡萄皮表面野生型酵母菌在缺氧的环境下发酵产酒精，大多数杂菌在缺氧酸性、有酒精的环境下无法繁殖，A正确； B、若对菌液计数，需选取菌落数处于30～300的培养皿计数。平均菌落数除以涂布体积乘上稀释倍数求的是每毫升发酵液的微生物数量，还应该再乘103算每升发酵液的微生物数，因此葡萄酒过滤液的活菌数为（62+68+74）÷3÷0.1×104×103=6.8×109（个·L-1），计数过程中两个或两个以上细胞连在一起，平板上观察到的只是一个菌落，所以数目偏小，B正确； C、培养基灭菌应采用湿热灭菌，不能用干热灭菌，接种过程中，试管口、瓶口等容易被污染的部位，可以通过火焰灼烧灭菌，C错误； D、据图Ⅱ可知，甲中没有酵母菌，为对照组，乙、丙、丁挑取不同的菌落培养，丙瓶与乙、丁瓶相同条件培养，但培养液没有酒精产生，且瓶内活菌数量较高，推测丙瓶是通气培养；丁瓶的活菌数少于乙瓶，但丁瓶中酒精浓度与乙瓶一致，说明丁组酵母菌产酒精能力比乙强，D正确。 故选ABD。 17. 下图为植物原生质体的“获取-纯化-活性检测”流程示意图。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程中需添加灭菌的纤维素酶和果胶酶溶液 B. ①过程后需加入无菌水稀释培养液以终止酶解反应 C. 通过两次离心操作可逐步分离纯化原生质体 D. 台盼蓝检测后应选择蓝色的原生质体继续培养 【答案】BD 【解析】 【详解】A、植物细胞有细胞壁，主要成分是纤维素和果胶。要获取原生质体，需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。为防止杂菌污染，这些酶溶液需要灭菌，所以①过程中需添加灭菌的纤维素酶和果胶酶溶液，A正确； B、若加入无菌水，会使原生质体吸水涨破，不能终止酶解反应。通常是加入等渗溶液来终止酶解反应，所以①过程后不能加无菌水稀释培养液以终止酶解反应，B错误； C、第一次离心可去除细胞壁等杂质，第二次离心能进一步纯化原生质体，通过两次离心操作可逐步分离纯化原生质体，C正确； D、台盼蓝能将死细胞染成蓝色，活细胞不能被染色，所以台盼蓝检测后应选择无色的（活的）原生质体继续培养，D错误。 故选BD。 18. 培养足量的圆形软骨细胞是构建软骨组织的基础，其贴壁培养和悬浮培养的部分结果如图。其中贴壁培养的软骨细胞逐渐变为长梭形，悬浮培养的软骨细胞保持圆形并形成细胞团块。下列叙述正确的是（ ） A. 两种方式均需5%CO2来刺激细胞呼吸为增殖供能 B. 两种方式进行传代培养时均用酶处理后再离心收集细胞 C. 与悬浮培养相比，贴壁培养更有利于快速构建软骨组织 D. 随时间延长，P0和P4软骨细胞的增殖速率均先增大后减小 【答案】BD 【解析】 【详解】A、无论是贴壁培养，还是悬浮培养，CO2的作用均是维持培养液的pH的相对稳定，而非刺激细胞呼吸为增殖供能，A错误； B、贴壁培养的细胞需用胰蛋白酶处理后收集，而悬浮培养形成的细胞团块，为了后续传代常需蛋白酶分解以分散成单个细胞，再离心收集，B正确； C、贴壁培养的软骨细胞逐渐变为梭形，表现出一定程度的“成纤维样”去分化，不利于保持软骨细胞的圆形表型；而悬浮培养能帮助细胞维持圆形并形成团块，更有利于构建软骨组织，C错误； D、据图可知，无论是原代培养(P0)还是传代四代(P4)，都表现出了典型的“增殖速率先增大后减小”的生长曲线规律，D正确。 故选BD。 19. 2018年中科院动物研究所科学家利用基因修饰和编辑技术，将雌性印记基因被敲除的孤雌单倍体胚胎干细胞注射进入卵母细胞，最终创造出完全正常的“孤雌生殖”小鼠，实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 本实验中，孤雌胚胎干细胞的功能相当于精子 B. 孤雌小鼠的性染色体组成可以是XX,也可以是XY C. ③过程是胚胎移植，移植前要对乙鼠进行发情处理 D. 在本实验中，使用的ES细胞可从雌性小鼠的早期胚胎中获取 【答案】ACD 【解析】 【分析】题图分析，从卵泡中取出卵母细胞，将经过基因修饰和基因编辑处理的孤雌胚胎干细胞注入卵母细胞，进行早期胚胎培养、胚胎移植等获得孤雌小鼠。 【详解】A、由图示可知，早期胚胎相当于卵母细胞与孤雌胚胎干细胞融合形成的，相当于精卵结合，孤雌胚胎干细胞的功能相当于精子，A正确； B、注入卵母细胞的孤雌胚胎干细胞的性染色体组成为X，卵母细胞的性染色体组成为X，因此孤雌小鼠的性染色体组成只能是XX，B错误； C、胚胎移植是在胚胎在相同生理条件下空间位置上的转移，因此移植前要对乙鼠进行发情处理，使其与供体处于相同的生理状态，C正确； D、ES细胞，即‌胚胎干细胞，是从早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，具有发育的全能性，因此在本实验中，使用的ES细胞可从雌性小鼠的早期胚胎中获取，D正确。 故选ACD。 20. 某科研团队为建立具有红色荧光的转基因小鼠，将红色荧光基因 R 插入表达载体中，构建基因表达载体。已知图中R基因转录形成的mRNA序列为5'-UGAACGCUA……(中间序列)……GUCGACUCG—3'，其转录方向为从左到右，几种限制酶的识别序列和切割位点见下表。下列相关叙述错误的是（ ） 限制酶 BamH l Mfe l EcoR l Hind Ⅲ 识别序列和切割位点 5'—G↓ GATCC-3' 5'—C↓AATTG-3' 5'—G↓ AATTC-3' A. 氨苄青霉素抗性基因的作用是鉴别和筛选含有质粒的受体细胞 B. 用限制酶EcoR Ⅰ和 Hind Ⅲ可切割含R基因的DNA片段和图中的质粒 C. 若用PCR方法对R基因进行检测，所用的2种引物序列的前6个碱基分别为5'-GCTCAG-3'、5'-ACTTGC-3' D. 若要改造R基因以提升荧光强度，可考虑蛋白质工程等 【答案】BC 【解析】 【详解】A、氨苄青霉素抗性基因是一种标记基因，其作用是鉴别和筛选含有质粒的受体细胞，A正确； B、BamH I会破坏启动子，EcoR I不在启动子和终止子之间，因此应该选择限制酶Mfe I、Hind Ⅲ切割质粒。若使用Mfe I切割含R基因的DNA片段，则会破坏目的基因，Mfe I的识别序列和EcoR I相同，故应选用EcoR I、Hind Ⅲ切割含R基因的DNA片段，B错误； C、已知mRNA的序列为5'—UGAACGCUA…(中间序列)…GUCGACUCG—3'，则模板链的序列为5'—CGAGTCGAC…(中间序列)…TAGCGTTCA—3'，互补链序列为5'—TGAACGCTA……(中间序列)…GTCGACTCG—3'。由于引物是根据目的基因两端的碱基序列设计的，且引物的延伸方向是5'端→3'端，所以PCR扩增时所需一对引物的前6个碱基序列为5'—TGAACG—3'、5'—CGAGTC—3'，C错误； D、蛋白质工程可改造现有蛋白质，从而提升荧光强度，D正确。 21. 某研究小组分离提纯葡萄皮上的野生酵母菌时，选取了从自然界中采集到的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中进行培养。请回答下列问题： （1）该研究小组成功分离出某品种的酵母菌后，取等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中,并分别置于转速为150 r/min、200 r/min、250 r/min的摇床上培养，检测结果如图1所示，摇床转速为250 r/min的酵母菌种群密度大的原因是____________。 （2）图2是采用血细胞计数板直接计数和稀释涂布平板法计数两种方法计数培养液中酵母菌数量时得到的结果，其中采用稀释涂布平板法计数得到的是曲线______，下列判断依据中正确的有______（填序号）。 ①稀释涂布平板法只计数活的酵母细胞，死细胞无法形成菌落 ②采用血细胞计数板直接计数时，可能会将死细胞与活细胞一起计数 ③采用稀释涂布平板法计数时，两个或多个细胞连在一起时，只能观察到一个菌落 ④采用稀释涂布平板法计数时，可能因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目 （3）通过如图3所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0.1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器______后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，其中某组的3个平板上菌落数分别为69个、52个、44个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为______个。计数一般要选取____________进行计数。 【答案】（1）摇床转速越高，提供的氧气越充足，酵母菌代谢旺盛，增殖快 （2） ①. 乙 ②. ①②③ （3） ①. 灼烧冷却 ②. 5.5×107 ③. 菌落数在30-300的平板 【解析】 【分析】1、酵母菌是兼性厌氧型的单细胞真菌，能够进行产酒精的无氧呼吸，酵母菌对青霉素不敏感，酵母菌在有氧条件下可以迅速增殖。进行酵母菌计数时需要将菌液进行梯度稀释。 2、微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 根据题意可知，摇床转速越高，提供的氧气越充足，从图中可看出摇床转速越高，酵母菌代谢旺盛，增殖快，因此繁殖的速度和总量越高，种群密度最大。 【小问2详解】 根据图2可知，由于稀释涂布平板法只计数活的酵母菌，血细胞计数板直接计数会将死细胞一起计数，且采用稀释涂布平板法计数时，两个或多个细胞连在一起时，只能观察到一个菌落，因此稀释涂布平板法获得的菌落数目比血细胞计数法计数时微生物数目少，采用稀释涂布平板法计数的是曲线乙，因此判断依据有①②③。 【小问3详解】 在培养基上进行涂布时，要将涂布器灼烧（杀死杂菌）冷却后（以免杀死菌种）才能进行操作；根据图解可知菌液被稀释了105倍（M），同时选择菌落数目在30-300的进行计数，所以每毫升含菌数为 （69+52+44）÷3÷0.1×105=5.5×107个。为保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。 22. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生代谢产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题。 （1）过程①中需将外植体经___________后接种于MS培养基上诱导形成愈伤组织。 （2）过程②中将愈伤组织加入经过滤灭菌处理的一定渗透压的无菌酶液中，离心后弃去___________(填“上清液”或“沉淀物”)，加入洗涤液多次洗涤后获得原生质体。多次洗涤的目的是___________。 （3）已知X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。分析上图，为培育能产生紫杉醇的柴胡，融合前对红豆杉和柴胡的原生质体分别进行的“A处理”、“B处理”依次为___________(填正确选项前的字母)。 a．X射线、X射线 b．X射线、碘乙酰胺 c．碘乙酰胺、X射线 d．碘乙酰胺、碘乙酰胺 （4）过程③常用的化学试剂是___________。经诱导融合后，再生细胞团只能来自于异源融合的原生质体，这是因为只有杂种细胞才具备___________能力。 （5）采用二乙酸荧光素(FDA)法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞膜，会留在细胞内发出荧光。据此方法选择有活性的原生质体用于融合。为监测原生质体密度，融合前需对原生质体用血细胞计数板计数。将培养液稀释100倍后，用25×16型(1mm×1mm×0.1mm)血细胞计数板计数5个中格中的原生质体数，理论上___________(填“有”或“无”)荧光的原生质体的个数应不少于___________，才能达到每毫升2×103个有活性原生质体的预期密度。 【答案】（1）消毒 （2） ①. 上清液     ②. 去除原生质体上残留的酶液/防止酶解过度 （3）b （4） ①. PEG##聚乙二醇  ②. 分裂 （5） ①. 有 ②. 4×10-4 【解析】 【小问1详解】 植物组织培养之前需要对外植体进行消毒，之后诱导脱分化形成愈伤组织。 【小问2详解】 酶解后原生质体密度较大，离心后沉淀在底部，因此弃去上清液。多次洗涤可去除原生质体上残留的酶液，避免酶持续作用破坏原生质体，同时洗净酶液、维持渗透压，保障原生质体的结构完整与活性。 【小问3详解】 根据不对称体细胞杂交的原理，红豆杉作为供体，需用X射线破坏染色质，仅保留部分遗传物质；柴胡作为受体，需用碘乙酰胺处理抑制自身分裂，使融合细胞仅依靠受体的分裂能力增殖，最终获得含柴胡全部遗传物质和红豆杉部分遗传物质的杂种细胞，因此A处理为X 射线，B处理为碘乙酰胺，对应选项 b。 【小问4详解】 植物原生质体融合常用的化学诱导剂是聚乙二醇 (PEG)。只有杂种细胞同时具备供体和受体的遗传物质，具备分裂能力，才能形成再生细胞团，未融合的原生质体因自身分裂被抑制，无法增殖。 【小问5详解】 FDA法中只有活的原生质体可分解FDA产生荧光，因此计数有荧光的原生质体。25×16型血细胞计数板由25个中方格组成，计数室体积为0.1mm3=1×10-4mL。设5个中格中的原生质体数至少为N个，则N×5÷10-4×100=2×103，计算得N为4×10-4。 23. 在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗适用于肿瘤晚期患者，主要分为单克隆抗体治疗和过继性细胞治疗两类。利用单克隆抗体和高效细胞毒类药物结合生产的药物ADC可以有效杀伤肿瘤细胞。ADC的作用机制和过继性细胞治疗相关过程如下图所示。回答下列问题。 （1）图1所示ADC（抗体—药物偶联物）模式图中，________（填“①”或“②”）表示抗体。临床上应用ADC治疗癌症的方法优于化疗，原因是________。 （2）在单克隆抗体制备过程中，初步筛选出来的杂交瘤细胞需经过________和抗体检测才可以获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。制备单克隆抗体的过程中用到的细胞工程技术有________。 （3）图2所示过继性细胞治疗中，从肿瘤患者体内获取的免疫细胞置于适宜环境下培养，培养一段时间后会出现细胞分裂受阻，其原因主要有________（答出2点） （4）过继性细胞治疗最后得到的能够特异性识别并处理肿瘤细胞的免疫细胞是________，这些细胞回输后能有效避免免疫排斥的原因是________。 【答案】（1） ①. ① ②. 疗效高、毒副作用小（答案合理即可） （2） ①. 克隆化培养 ②. 动物细胞培养、动物细胞融合 （3）细胞密度大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏等 （4） ①. 细胞毒性T细胞 ②. 这些免疫细胞来自患者自身，与患者细胞的组织相容性抗原相同 【解析】 【小问1详解】 ADC是抗体-药物偶联物，抗体的功能是特异性识别肿瘤细胞表面的抗原，图中①表示抗体。传统化疗无特异性，会同时杀伤肿瘤细胞和正常细胞，而ADC依靠单克隆抗体的特异性识别，能定向杀伤肿瘤细胞，疗效高、毒副作用小，因此疗效优于化疗。 【小问2详解】 单克隆抗体制备中，选择培养基初步筛选出杂交瘤细胞后，还需要经过克隆化培养和抗体阳性检测，才能得到能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞。制备过程中，需要通过动物细胞融合技术获得杂交瘤细胞，再通过动物细胞培养技术扩增细胞、获得抗体，因此用到的细胞工程技术是动物细胞融合技术和动物细胞培养技术。 【小问3详解】 动物细胞体外培养时，随培养时间延长，会因营养物质持续消耗、供应不足，无法满足细胞分裂的物质需求；同时细胞代谢产生的有害代谢物不断积累，对细胞产生毒性，且细胞密度增大引发接触抑制，最终导致细胞分裂受阻。 【小问4详解】 肿瘤细胞是机体内的变异靶细胞，特异性识别并裂解杀伤肿瘤细胞的是细胞免疫中的细胞毒性T细胞。该治疗的免疫细胞取自患者自身，与患者细胞的组织相容性抗原相同，不会被免疫系统识别为外来抗原，因此能有效避免免疫排斥。 24. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。 （1）图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用_____（填数字）。 （2）应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射_____，获得小牛的过程中使用了_____技术，最终获得的良种小牛性别为_____。 （3）供体1完成体内受精的场所在_____。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其_____，胚胎移植前需要对受体进行_____处理。 （4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过_____技术获得二分胚①和②，操作时需要注意_____，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【答案】（1）1、3  （2） ①. 促性腺激素 ②. 体细胞核移植 ③. 雌性 （3） ①. 输卵管 ②. 获能 ③. 同期发情 （4） ①. 胚胎分割 ②. 将内细胞团均等分割 【解析】 【小问1详解】 应用1采用了核移植技术，形成克隆动物，属于无性生殖；应用2采用体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，形成的是试管动物，属于有性生殖；应用4表示从早期胚胎中提取胚胎干细胞；应用3采用了胚胎分割技术，属于无性生殖，故图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的为应用1、3。 【小问2详解】 应用1中，为了大量获取细胞B，即卵母细胞，需要对供体2注射促性腺激素，使其超数排卵，使用动物体细胞核移植技术获得重组细胞，由于供体1是良种荷斯坦高产奶牛，其提供细胞核，所以最终获得的良种小牛为雌性。 【小问3详解】 供体1完成体内受精的场所是输卵管。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行获能处理，因为获能后的精子才具备与卵细胞受精的能力，得到的胚胎应该移植到和供体同种的、生理状态相同的雌性动物体内，因此受体雌性动物需要经过同期发情处理。 【小问4详解】 应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过胚胎分割技术获得二分胚①和②，对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 25. 水杨酸是常见的水体污染物，科学家利用基因工程构建智能工程菌，通过向大肠杆菌体内导入含特殊DNA序列的重组质粒，制备水杨酸生物传感器（如图1），为环境污染治理提供新方法。请回答下列问题： （1）基因工程中启动子与增强子都与基因转录有关，增强子可增强转录效率。启动子是______，其位于基因的上游，紧挨______。 （2）分析上图可知，当环境中存在水杨酸时，______可激活PS，最终使菌体发出红色荧光，据此可判定环境中的水杨酸浓度。 （3）研究人员欲通过改造重组质粒，实现在相同浓度的水杨酸条件下荧光强度增强为原来的2倍，从而提高传感器的灵敏度。可以选择激活能力更强的调控蛋白基因nahR1替代nahR，该改造过程需要用到的工具酶有______。 （4）水杨酸羟化酶可催化水杨酸转化为龙胆酸，龙胆酸可被细胞利用。若将水杨酸羟化酶基因与mrfp基因连接成融合基因，则工程菌可同时实现对水杨酸的______。现欲通过PCR判定融合基因已准确连接，应选择图2中的引物组合是______。选择这对引物后，PCR产物的长度等于水杨酸羟化酶基因和mrfp基因的长度之和，可通过______验证是否为预期大小。 （5）工程菌治理环境污染具有成本低、动态治理等优点，但菌株本身会造成水源安全隐患。科学家将ccdA、ccdB两个基因插入原有序列中，使水杨酸被耗尽时菌株即启动“自毁”。已知ccdB基因表达毒蛋白可使工程菌致死，ccdA基因表达抗毒素蛋白导致毒蛋白失效，则ccdA、ccdB分别插入图3中的______、______（填字母）位点。 【答案】（1） ①. 一段有特殊序列结构的DNA片段（RNA聚合酶识别结合部位） ②. 转录的起始位点 （2）水杨酸-调控蛋白复合物 （3）限制酶、DNA连接酶 （4） ①. （动态）检测和清除 ②. 引物1和引物3 ③. 琼脂糖凝胶电泳 （5） ①. C ②. B 【解析】 【小问1详解】 启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段是RNA聚合酶识别和结合的部位，启动子位于转录的起始位点上游，其作用是起始转录。 【小问2详解】 从图中可知，当环境中存在水杨酸时，水杨酸-调控蛋白复合物可激活Ps启动子，启动基因表达红色荧光蛋白，最终使菌体发出红色荧光，据此可判定环境中的水杨酸浓度。 【小问3详解】 改造重组质粒替换基因片段时，需要先用限制酶切割质粒切除原有基因，再用DNA连接酶连接新的基因片段，因此所需工具酶为限制酶和DNA连接酶。 【小问4详解】 水杨酸是常见的水体污染物，若将水杨酸羟化酶基因与mrfp基因连接成融合基因，则工程菌可同时实现对水杨酸的动态检测和清除。PCR技术要求引物与模板链的3'端互补配对，且DNA聚合酶从引物的3'端开始延伸子链。要判定水杨酸羟化酶基因与mrfp基因连接成的融合基因已准确连接，需要选择能扩增出融合基因的引物组合。引物1和引物3可以分别与融合基因中水杨酸羟化酶基因模板链的3'端和mrfp基因非模板链的3'端互补配对，从而扩增出融合基因，所以应选择的引物组合是引物1和引物3。PCR产物的大小可通过琼脂糖凝胶电泳验证。 【小问5详解】 ccdA基因表达抗毒素蛋白导致毒蛋白失效，为了保证在水杨酸存在时工程菌正常生存，ccdA应插入在Ps启动子之后终止子之前，即图中的C位点，这样在水杨酸存在时，Ps启动子启动，ccdA基因表达抗毒素蛋白；ccdB基因表达毒蛋白可使工程菌致死，当水杨酸被耗尽时，Ps启动子不再启动，此时要让工程菌启动“自毁”，ccdB应插入在Pc启动子控制的区域，所以应插入Pc启动子之后终止子之前，即图中的B位点。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 沈阳市第120中学2025-2026学年度下学期 高二年级期中考试 生物试题 满分：100分；时间：75分钟 一、单选择题（共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个正确选项，选错0分） 1. 青海互助青稞酒是产自青海省海东市互助土族自治县的国家地理标志保护产品，被誉为“中国青稞酒之源”，其传统酿造技艺被列入国家级非物质文化遗产名录。据了解，互助青稞酒是以岩木窖池为发酵容器，而多年反复利用的窖池内壁的窖泥中含有多种与酿酒有关的微生物。下列叙述错误的是（　　） A. 互助青稞酒的酿造是以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的 B. 窖池中的各种微生物会形成相对稳定的体系，从而不容易被杂菌污染 C. 酿酒原料以青稞为主，经发酵形成的酒糟中可分离出产淀粉酶的微生物 D. 若对分离出的酿酒酵母做扩大培养，则需在二氧化碳或氮气环境中进行 2. 土壤中有丰富的微生物，若要利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化，过程如图。下列相关叙述正确的是（　　） A. 若要筛选分解尿素的细菌，尿素可作为培养基中的唯一碳源 B. 理论上每毫升菌液中1号试管的活菌数是4号试管的1000倍 C. 4号试管的培养结果表明，每克土壤中的活菌数约为1.1×109个 D. 接种用的培养皿可用干热灭菌，可杀死微生物细胞和部分芽孢 3. 白酒生产时常用国标法检测样品中的沙门氏杆菌数目。当样品中积累了过多乙醇、乳酸及抗菌肽等抑菌物质时，会干扰检测。科研人员在此基础上优化检测方法，大大提升检出率，两种方法如下图所示。下列叙述正确的是（　　） 注：BPW主要成分为蛋白胨、磷酸盐缓冲盐、氯化钠、水等。 A. 取样后直接用血细胞计数板在显微镜下计数活菌 B. 可采用划线法或稀释涂布法将待测液接种至选择培养基 C. 优化法中增加BPW用量的主要目的是提供更多营养物质 D. BPW培养液中的蛋白胨可为沙门氏杆菌提供碳源、氮源 4. 青霉素是人类发现的第一种抗生素，其工业化生产流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 由于青霉素的杀菌作用，④过程不需严格灭菌 B. 发酵罐中发酵是该工程的中心环节，需将pH值调到中性或弱碱性 C. 发酵过程中需从下方的充气口通入无菌空气以提高溶氧量 D. 过程⑤常用的方法是过滤和沉淀，可从分离出的菌种中提取到单细胞蛋白 5. 紫杉醇是从红豆杉中提取的一种高效抗肿瘤药物，通过抑制纺锤丝中微管蛋白解聚，导致纺锤丝僵化无法正常缩短，从而诱导肿瘤细胞凋亡。从植物中直接提取紫杉醇会严重消耗野生资源，科研人员尝试采用植物细胞培养技术获取紫杉醇，基本流程如图所示。以下叙述错误的是（ ） A. 红豆杉根尖组织培养前需要消毒，紫杉醇是红豆杉细胞的次生代谢物 B. 高效抗肿瘤药物紫杉醇阻滞癌细胞的细胞周期，从而诱导其凋亡 C. 通过植物细胞培养技术获取紫杉醇，其理论基础是植物细胞的全能性 D. ①过程通常使用固体培养基，需加入植物激素诱导细胞脱分化形成愈伤组织 6. 科学家利用马铃薯和西红柿叶片分离原生质体并进行细胞杂交，最终获得了杂种植株，相关过程如图所示。下列有关分析正确的是（　　） A. 对过程①获取的外植体需用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒 B. 可根据是否发生质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生 C. 过程①应将叶片下表皮向下，置于含纤维素酶和果胶酶的低渗溶液中 D. ⑤进行脱分化和再分化过程，杂种植株一定具有马铃薯和西红柿的优良性状 7. 细胞工程在治疗疾病和育种等领域应用十分广泛。为降低宫颈癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），以便精准治疗，其生理过程如图所示。以下叙述错误的是（ ） A. 小鼠的骨髓瘤细胞在培养过程中通常不会出现接触抑制现象 B. 过程①诱导细胞融合常用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等 C. 单克隆抗体特异性强、灵敏度高并可大量制备，能精确地定位宫颈癌细胞 D. 过程②筛选的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生所需的特异性抗体 8. 分散到水溶液中的磷脂分子会自发组装成充满液体的球状小泡，称为脂质体。研究人员在脂质体外包裹上聚乙二醇，形成一层保护层，能避免吞噬细胞的识别，并镶嵌上相应的抗体，制造出一种能定向运送药物的“隐形脂质体”（如下图）。目前这种“隐形脂质体”已在癌症治疗中得到应用。下列叙述错误的是（　　） A. 镶嵌在脂质体表面的抗体，可与靶细胞表面的特定抗原结合以实现精准送药 B. 若无聚乙二醇保护层，则脂质体易被吞噬细胞吞噬导致药物不能送至靶细胞 C. 药物B分布在磷脂双分子层之间，说明药物B分子中含有较多的亲水基团 D. “隐形脂质体”与靶细胞结合后，能与靶细胞膜融合 9. 猪的生理特征、器官大小以及胚胎发育方面与人类具有很高的相似性，成为“种植”人类器官的热门动物。下图为我国科学家利用猪培育可用于移植的人源肾脏的相关过程。下列叙述正确的有（ ） A. 推测SIX1/SALL1两种基因是人源肾脏发育所必需的基因 B. 可用载体、聚乙二醇等化学方法激活重构胚 C. 注入人源干细胞的作用是使人源干细胞分化产生人的组织和器官 D. 这种肾脏中虽然有部分猪细胞，但移植给人不会引起免疫排斥 10. 母乳来源的胆盐激活酯酶(BSSL)是一种脂肪酶，具有广泛的底物水解活性，对乳脂消化吸收具有重要作用。因此，对胆盐激活酯酶的研究是“人乳化牛奶”计划的重要组成部分。下图表示含有BSSL基因的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，限制性内切核酸酶MspI、SmaI识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、CCC↓GGG。下列叙述错误的是（ ） A. 限制酶能识别双链DNA中特定核苷酸序列，并断开特定位置的磷酸二酯键 B. 若用MspI酶切割BSSL基因产生的黏性末端只能用E.coliDNA连接酶连接 C. 若要将外源基因导入细胞，可以用质粒、噬菌体、动植物病毒等作为载体 D. 若用限制酶Sma I完全切割图中DNA片段，其产物长度为339 bp、9844 bp、533 bp 11. PCR仪实际上是一个温控设备，能在每次循环的3个步骤间进行温度切换，主要过程如图所示，图中a、b、c表示3个步骤。下列相关叙述正确的是（　　） A. a、b、c分别表示变性、复性、延伸，对应温度依次降低 B. c过程从引物的5＇端开始连接4种脱氧核苷酸 C. 高温能激活TaqDNA聚合酶，PCR反应体系中无须加入Mg2+ D. 若1个DNA进行6轮循环，则需要消耗63个引物Ⅰ 12. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述错误的是（ ） EcoRI BamHI KpnI MfeI HindIII 5′−G↓AATTC−3′ 3′− CTTAA↑G−5′ 5′−G↓GATCC−3′ 3′− CCTAG↑G−5′ 5′−G↓GTACC−3′ 3′−CCATG↑G −5′ 5′−C↓AATTG−3′ 3′−GTTAA↑C −5′ 5′−A↓AGCTT−3′ 3′−TTCGA↑A −5′ A. THP9基因有2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在5′端 B. 构建基因表达载体时，用MfeI、HindIII切割质粒，用EcoRI、HindIII切割目的基因 C. 利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4 D. 为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，需要在个体水平上检测其蛋白质含量 13. 慢病毒可有效感染人类肝细胞、肿瘤细胞以及鹌鹑胚胎细胞等多种细胞。科学家利用含有产生黑色素的基因的慢病毒侵染鹌鹑胚胎细胞，希望能使鹌鹑长出令人喜爱的黑皮肤。下列相关叙述错误的是（ ） A. 即使携带产生黑色素的基因的慢病毒成功侵染鹌鹑胚胎细胞，鹌鹑也不一定能表现为黑皮肤 B. 可以用 T2 噬菌体替代慢病毒，作为运载体转入黑色素基因 C. 使用皮肤细胞中特异性表达的启动子有利于得到此结果 D. 经过人工改造的慢病毒载体有望用于人体内的基因治疗 14. 利用蛋白质工程对干扰素进行改造，可在一定条件下延长其保存时间。下列叙述错误的是（　　） A. 天然蛋白质合成的过程按照中心法则进行，蛋白质工程与之相反 B. 利用蛋白质工程对干扰素进行改造时，操作对象是干扰素 C. 经改造后的干扰素基因能通过工程菌的繁殖实现遗传 D. 对干扰素的改造遇到的最大难题是干扰素的高级结构十分复杂 15. 生物安全是指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康以及生态环境所产生的危害或潜在风险。下列相关叙述错误的是（ ） A. 消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面 B. 由于技术问题，生殖性克隆可能孕育出有严重生理缺陷的克隆动物 C. 为避免可能产生的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果 D. 从外来入侵害虫的原产地引入天敌进行治理，不会对入侵地造成生态影响 16. 酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图Ⅰ所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，对瓶中酒精浓度和活菌数量的检测结果如图Ⅱ。下列说法正确的是（ ） A. 葡萄酒发酵过程中，缺氧酸性的环境及酵母菌产生的酒精等可抑制杂菌的繁殖 B. 用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为（6.8×109个·L-1），此数值可能低于实际的活菌数 C. 可用干热灭菌法对培养皿、培养基进行灭菌，菌种接种过程中的试管口、瓶口等需灼烧灭菌 D. 由图Ⅱ可知，丙瓶应为通气（O2）培养，丁瓶中的酵母菌产酒精能力比乙瓶的强 17. 下图为植物原生质体的“获取-纯化-活性检测”流程示意图。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程中需添加灭菌的纤维素酶和果胶酶溶液 B. ①过程后需加入无菌水稀释培养液以终止酶解反应 C. 通过两次离心操作可逐步分离纯化原生质体 D. 台盼蓝检测后应选择蓝色的原生质体继续培养 18. 培养足量的圆形软骨细胞是构建软骨组织的基础，其贴壁培养和悬浮培养的部分结果如图。其中贴壁培养的软骨细胞逐渐变为长梭形，悬浮培养的软骨细胞保持圆形并形成细胞团块。下列叙述正确的是（ ） A. 两种方式均需5%CO2来刺激细胞呼吸为增殖供能 B. 两种方式进行传代培养时均用酶处理后再离心收集细胞 C. 与悬浮培养相比，贴壁培养更有利于快速构建软骨组织 D. 随时间延长，P0和P4软骨细胞的增殖速率均先增大后减小 19. 2018年中科院动物研究所科学家利用基因修饰和编辑技术，将雌性印记基因被敲除的孤雌单倍体胚胎干细胞注射进入卵母细胞，最终创造出完全正常的“孤雌生殖”小鼠，实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 本实验中，孤雌胚胎干细胞的功能相当于精子 B. 孤雌小鼠的性染色体组成可以是XX,也可以是XY C. ③过程是胚胎移植，移植前要对乙鼠进行发情处理 D. 在本实验中，使用的ES细胞可从雌性小鼠的早期胚胎中获取 20. 某科研团队为建立具有红色荧光的转基因小鼠，将红色荧光基因 R 插入表达载体中，构建基因表达载体。已知图中R基因转录形成的mRNA序列为5'-UGAACGCUA……(中间序列)……GUCGACUCG—3'，其转录方向为从左到右，几种限制酶的识别序列和切割位点见下表。下列相关叙述错误的是（ ） 限制酶 BamH l Mfe l EcoR l Hind Ⅲ 识别序列和切割位点 5'—G↓ GATCC-3' 5'—C↓AATTG-3' 5'—G↓ AATTC-3' A. 氨苄青霉素抗性基因的作用是鉴别和筛选含有质粒的受体细胞 B. 用限制酶EcoR Ⅰ和 Hind Ⅲ可切割含R基因的DNA片段和图中的质粒 C. 若用PCR方法对R基因进行检测，所用的2种引物序列的前6个碱基分别为5'-GCTCAG-3'、5'-ACTTGC-3' D. 若要改造R基因以提升荧光强度，可考虑蛋白质工程等 21. 某研究小组分离提纯葡萄皮上的野生酵母菌时，选取了从自然界中采集到的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中进行培养。请回答下列问题： （1）该研究小组成功分离出某品种的酵母菌后，取等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中,并分别置于转速为150 r/min、200 r/min、250 r/min的摇床上培养，检测结果如图1所示，摇床转速为250 r/min的酵母菌种群密度大的原因是____________。 （2）图2是采用血细胞计数板直接计数和稀释涂布平板法计数两种方法计数培养液中酵母菌数量时得到的结果，其中采用稀释涂布平板法计数得到的是曲线______，下列判断依据中正确的有______（填序号）。 ①稀释涂布平板法只计数活的酵母细胞，死细胞无法形成菌落 ②采用血细胞计数板直接计数时，可能会将死细胞与活细胞一起计数 ③采用稀释涂布平板法计数时，两个或多个细胞连在一起时，只能观察到一个菌落 ④采用稀释涂布平板法计数时，可能因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目 （3）通过如图3所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0.1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器______后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，其中某组的3个平板上菌落数分别为69个、52个、44个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为______个。计数一般要选取____________进行计数。 22. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生代谢产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题。 （1）过程①中需将外植体经___________后接种于MS培养基上诱导形成愈伤组织。 （2）过程②中将愈伤组织加入经过滤灭菌处理的一定渗透压的无菌酶液中，离心后弃去___________(填“上清液”或“沉淀物”)，加入洗涤液多次洗涤后获得原生质体。多次洗涤的目的是___________。 （3）已知X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。分析上图，为培育能产生紫杉醇的柴胡，融合前对红豆杉和柴胡的原生质体分别进行的“A处理”、“B处理”依次为___________(填正确选项前的字母)。 a．X射线、X射线 b．X射线、碘乙酰胺 c．碘乙酰胺、X射线 d．碘乙酰胺、碘乙酰胺 （4）过程③常用的化学试剂是___________。经诱导融合后，再生细胞团只能来自于异源融合的原生质体，这是因为只有杂种细胞才具备___________能力。 （5）采用二乙酸荧光素(FDA)法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞膜，会留在细胞内发出荧光。据此方法选择有活性的原生质体用于融合。为监测原生质体密度，融合前需对原生质体用血细胞计数板计数。将培养液稀释100倍后，用25×16型(1mm×1mm×0.1mm)血细胞计数板计数5个中格中的原生质体数，理论上___________(填“有”或“无”)荧光的原生质体的个数应不少于___________，才能达到每毫升2×103个有活性原生质体的预期密度。 23. 在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗适用于肿瘤晚期患者，主要分为单克隆抗体治疗和过继性细胞治疗两类。利用单克隆抗体和高效细胞毒类药物结合生产的药物ADC可以有效杀伤肿瘤细胞。ADC的作用机制和过继性细胞治疗相关过程如下图所示。回答下列问题。 （1）图1所示ADC（抗体—药物偶联物）模式图中，________（填“①”或“②”）表示抗体。临床上应用ADC治疗癌症的方法优于化疗，原因是________。 （2）在单克隆抗体制备过程中，初步筛选出来的杂交瘤细胞需经过________和抗体检测才可以获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。制备单克隆抗体的过程中用到的细胞工程技术有________。 （3）图2所示过继性细胞治疗中，从肿瘤患者体内获取的免疫细胞置于适宜环境下培养，培养一段时间后会出现细胞分裂受阻，其原因主要有________（答出2点） （4）过继性细胞治疗最后得到的能够特异性识别并处理肿瘤细胞的免疫细胞是________，这些细胞回输后能有效避免免疫排斥的原因是________。 24. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。 （1）图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用_____（填数字）。 （2）应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射_____，获得小牛的过程中使用了_____技术，最终获得的良种小牛性别为_____。 （3）供体1完成体内受精的场所在_____。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其_____，胚胎移植前需要对受体进行_____处理。 （4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过_____技术获得二分胚①和②，操作时需要注意_____，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 25. 水杨酸是常见的水体污染物，科学家利用基因工程构建智能工程菌，通过向大肠杆菌体内导入含特殊DNA序列的重组质粒，制备水杨酸生物传感器（如图1），为环境污染治理提供新方法。请回答下列问题： （1）基因工程中启动子与增强子都与基因转录有关，增强子可增强转录效率。启动子是______，其位于基因的上游，紧挨______。 （2）分析上图可知，当环境中存在水杨酸时，______可激活PS，最终使菌体发出红色荧光，据此可判定环境中的水杨酸浓度。 （3）研究人员欲通过改造重组质粒，实现在相同浓度的水杨酸条件下荧光强度增强为原来的2倍，从而提高传感器的灵敏度。可以选择激活能力更强的调控蛋白基因nahR1替代nahR，该改造过程需要用到的工具酶有______。 （4）水杨酸羟化酶可催化水杨酸转化为龙胆酸，龙胆酸可被细胞利用。若将水杨酸羟化酶基因与mrfp基因连接成融合基因，则工程菌可同时实现对水杨酸的______。现欲通过PCR判定融合基因已准确连接，应选择图2中的引物组合是______。选择这对引物后，PCR产物的长度等于水杨酸羟化酶基因和mrfp基因的长度之和，可通过______验证是否为预期大小。 （5）工程菌治理环境污染具有成本低、动态治理等优点，但菌株本身会造成水源安全隐患。科学家将ccdA、ccdB两个基因插入原有序列中，使水杨酸被耗尽时菌株即启动“自毁”。已知ccdB基因表达毒蛋白可使工程菌致死，ccdA基因表达抗毒素蛋白导致毒蛋白失效，则ccdA、ccdB分别插入图3中的______、______（填字母）位点。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $