湖北省荆州中学2025-2026学年高二下学期5月月考生物试卷

**基本信息** 荆州中学高二生物月考试卷以微生物培养、基因工程等核心技术为载体，融入基因编辑猪肾移植、单克隆抗体AK0610等科技前沿情境，全面考查科学思维与探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|18题|微生物培养（第1题分解尿素细菌计数）、基因工程（第3题DNA分子杂交）、细胞工程（第7题单克隆抗体制备）|结合科研案例（如第2题基因编辑猪肾移植），考查实验分析能力| |非选择题|4题|单克隆抗体制备（19题）、蛋白质工程（20题）、异种杂合干细胞（21题）、卡拉胶降解菌筛选（22题）|以完整技术流程为情境（如22题基因工程构建表达载体），突出科学探究与创新应用|

5月月考生物答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 A D D C D C C D B B 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 答案 B B C D D D C C 19．（1）体外培养的骨髓瘤细胞分裂旺盛，DNA复制频繁，更易发生突变（1分）。 （2）DNA复制和转录（1分）；避免骨髓瘤细胞恢复为正常表型（1分）；随机性和不定向性（1分）。 （3）机械手段/胰蛋白酶/胶原蛋白酶（1分）；集中分布（1分）。 （4）单个空斑可能由多个不同种类杂交瘤细胞聚集形成（需答出 “不同种类”）；稀释（可多答抗原-抗体杂交）。 （5）B（1分）、E（1分）、G（1分）；可对抗体进行定向改造/抗体纯度更高/操作周期更短/抗体基因可长期保存，稳定性更高（合理即可）（3分） 20．(1) DNA序列 COXⅣ位于线粒体内膜，它的肽链序列X能引导GFP 定位到线粒体，从而通过GFP来观察线粒体的形态变化 (2) B B位于启动子下游与终止子上游，目的基因插入B点才可能转录 (3) 外植体 染色体DNA 生长素和细胞分裂素 21．(1)血清 95%空气和5%的CO2 (2) MⅡ卵母细胞的细胞核/纺锤体-染色体复合物 精子 内细胞团 (3)带有Y染色体的孤雄细胞无活性(或带有X染色体的孤雄单倍体干细胞有活性) cd (4) 41 22．(1) 在富含卡拉胶的环境中，存在能够分解卡拉胶的微生物的可能性较大 (2) BamHI SmaI、EcoRV Spe1、Xba1（顺序可颠倒） (3) 使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态 卡拉胶 四环素 (4) 44 该位点的氨基酸空间上离半胱氨酸更近，容易形成二硫键，而且保守度低，替换后对酶功能的影响较小 学科网（北京）股份有限公司 $ 荆州中学2025-2026学年高二下学期5月月考 生物试题 一、单选题 1．某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法错误的是（　　） A．图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物都能合成脲酶 B．若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7，5号试管共稀释了106倍 C．图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的 D．若仅以4号试管接种培养至少涂3个平板，该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目低 2．我国科学家敲除猪的糖抗原合成基因（β4GalNT2），转入相应的调节基因后，将基因编辑猪的单个肾移植给猕猴，同时切除猕猴的自体双肾，最终移植肾存活184天。在移植成功5个月内，猕猴的移植肾功能完全正常，之后出现逐渐加重的蛋白尿。下列说法错误的是（    ） A．基因编辑猪的成功培育，不能证明已分化的动物体细胞具有全能性 B．出现蛋白尿可能与猕猴肾小球通透性增强有关 C．敲除β4GalNT2能改变膜蛋白种类，减少猕猴免疫系统对移植肾的免疫排斥反应 D．猪和猕猴肾脏的差异是基因的选择性表达的结果 3．DNA分子杂交技术可用于分析不同生物DNA序列的相似性。两种生物的DNA单链中，互补碱基序列会配对形成杂合双链区，未互补区域则为游离单链区。现获取噬热菌（甲）、耐冷藻（乙）、嗜盐古菌（丙）三种微生物编码某抗氧化酶的基因片段部分序列如下。研究人员让c′链与a链、b′链与a链分别混合，发现出现了杂合双链区。下列相关叙述正确的是（    ） A．游离单链区的出现说明两种DNA单链中所含的碱基种类不完全相同 B．杂合双链区的形成过程中，有磷酸二酯键的断裂与重新形成 C．根据杂交结果可推断，嗜盐古菌与噬热菌的亲缘关系比耐冷藻与噬热菌的远 D．理论上DNA分子杂交技术也可以用来检测DNA转录的产物 4．L-天冬酰胺酶是一种重要的抗癌药物，临床上常用于治疗急性淋巴细胞白血病。下图是利用大肠杆菌发酵生产该酶的工艺流程。下列叙述错误的是（    ） A．加入玉米浆进行菌种培养时应使用液体培养基 B．加丙酮后加压过滤所得的干菌体为单细胞蛋白 C．通气搅拌发酵罐培养时，pH需控制在3.4～4.2 D．L-天冬酰胺酶其热稳定性和耐酸性都比较强 5．某校三位高中生在路边摊买鲜榨苹果汁，饮用后都出现了腹泻现象，于是怀疑果汁中大肠杆菌超标。他们打算利用所学知识对果汁进行检测，通过查阅文献了解到在伊红—亚甲蓝（EMB）琼脂培养基上大肠杆菌菌落呈深紫色并有金属光泽，可用滤膜法测定大肠杆菌数目。下列分析正确的是（　　） A．滤膜的孔径应大于大肠杆菌 B．EMB琼脂培养基属于选择培养基 C．该方法统计的结果可能比实际值偏高 D．应设置不接种的空白对照组和接种大肠杆菌的阳性对照组 6．研究人员将绿色荧光蛋白（GFP）基因导入小香猪体细胞并进行克隆猪的研究，其基本流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．过程①可用胃蛋白酶将取出的小香猪组织分散成单个细胞，进行原代培养 B．可采用显微操作法，直接对猪卵巢采集到的卵母细胞进行去核 C．采用物理或化学方法，如电刺激、蛋白酶合成抑制剂等，激活转基因重构胚胎 D．代孕母猪生出转基因克隆小香猪的过程属于有性生殖 7．我国科研团队利用单克隆抗体技术，研发了一款能预防呼吸道合胞病毒（RSV）感染的单克隆抗体AK0610，该抗体能特异性识别病毒表面的关键蛋白。下列叙述正确的是（　　） A．灭活病毒可用于①诱导细胞融合，也可用于植物原生质体融合 B．培养骨髓瘤细胞时，CO2的主要作用是促进细胞呼吸 C．②的目的是筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞 D．AK0610能特异性识别RSV病毒表面的关键蛋白，因此能直接杀灭RSV病毒 8．科研人员利用植物体细胞杂交技术获得了新型甘蓝型油菜，又结合其他技术进一步培育出DH系甘蓝型油菜，如图所示，A和C表示不同物种的染色体组。下列说法错误的是（    ） A．培育新型甘蓝型油菜时，可用高Ca2+-高pH融合法诱导原生质体融合 B．杂种植株培育和花粉离体培养均需调整植物激素比例调控脱分化与再分化 C．图中“幼苗”体细胞中含2个染色体组，但不含等位基因 D．两种甘蓝型油菜的培育都涉及染色体数目变异，均为四倍体纯合植株 9．科学家将c-Myc、KIf4、Sox2和Oct-3/4这四个关键基因转入高度分化的小鼠成纤维细胞内，细胞在一定条件下转变成iPS细胞，在适当条件诱导下，iPS细胞可以定向分化成各种细胞。下列叙述错误的是（    ） A．图示过程运用了转基因技术和动物细胞培养技术 B．iPS细胞分化成各种组织细胞过程中DNA序列有不同的改变 C．iPS细胞的分裂、分化能力比造血干细胞强 D．小鼠成纤维细胞转变成iPS细胞与植物组织培养的脱分化过程类似 10．抗体—药物偶联物（ADC）是新一代“生物导弹”，由单克隆抗体、接头和细胞毒性药物三部分组成。下列叙述错误的是（　　） A．ADC的优点是能减少抗癌药物对正常细胞的损伤 B．ADC通过主动运输的方式进入肿瘤细胞，该过程需要消耗ATP C．制备单克隆抗体时，通常从小鼠的脾中获取免疫后的B淋巴细胞 D．同位素标记的单克隆抗体可通过放射性成像定位肿瘤病灶 11．孕酮具有促进子宫内膜增生，为受精卵着床做准备的作用。某奶牛场发现一头高产奶量母牛生产两胎后重复配种均未成功妊娠，该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛。为获得该母牛的后代，下列说法正确的是（　　） A．运用体外受精或人工授精技术可提高该牛的妊娠率 B．同期发情处理使供体牛与受体牛子宫处于相同生理状态 C．体外受精或人工授精后形成受精卵移植到健康受体可提高存活率 D．使用该牛MⅡ期卵母细胞的细胞核进行核移植可获得可育后代 12．梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决此难题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是（    ） A．人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输入雌性生殖道 B．超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂 C. 胚胎移植过程只需进行一次检查即胚胎检查 D．母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础 13．下列高中生物学实验的部分操作，正确的是（    ） 选项 实验名称 实验操作 A 探究抗生素对细菌的选择作用 涂菌前，需将抗生素均匀涂抹在培养基平板上 B 制作果酒和果醋 当葡萄酒制作完成后，需拧紧瓶盖，促进葡萄醋的发酵 C 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 稀释土壤样品时，每个梯度稀释时都需更换移液器枪头 D DNA片段的扩增及电泳鉴定 接通电源后，看到DNA条带迁移至凝胶边缘时，停止电泳 A．A B．B C．C D．D 14．琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1～4的电泳结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述错误的是（    ） A．配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲溶液 B．该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷 C．甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量可能不同 D．据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物 15．如图为免疫PCR技术的主要原理。利用该技术检测血样中微量淀粉样蛋白(Aβ)的核心流程包括：①用固定化的抗体1捕获Aβ并洗涤；②加入DNA标记的抗体2与Aβ结合并洗涤；③进行PCR扩增并对产物进行鉴定。下列叙述正确的是（　　） A．检测技术中抗体1和抗体2的作用相同 B．③中进行PCR时还需要加入TaqDNA聚合酶、原料、模板DNA、引物等 C．通常将DNA与核酸染料混合后加样并在紫外线下对PCR产物进行鉴定 D．免疫PCR可以将少量抗原“信号”放大为大量DNA“信号”，以提高检测的灵敏度 16．桑格双脱氧链终止法的核心原理为：在PCR扩增体系中，分别加入少量4种双脱氧核苷酸（ddNTP），子链延伸时，若掺入双脱氧核苷酸，子链延伸立即终止；若掺入普通脱氧核苷酸（dNTP），子链可继续延伸。利用该方法测定某疾病患者的一段序列，扩增产物电泳后条带位置如图。下列说法正确的是（　　） A．在PCR反应体系中ddNTP与dNTP均可作为DNA延伸的原料 B．PCR体系中一般加入激活耐高温的DNA连接酶 C．据图可知该段子链延伸的序列为5′-TAGTGCCCATC-3′ D．若PCR体系中获得大量的非特异性条带，可适当提高复性的温度 17．关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”(实验I)和“DNA的粗提取与鉴定”(实验Ⅱ)的实验操作，下列相关叙述正确的是（    ） A．实验I中，PCR实验所需的移液器、枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理 B．实验I中，将扩增得到的PCR产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源 C．实验Ⅱ中，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA D．实验Ⅱ中，将白色丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定DNA 18．在PCR反应体系中加入与某条链互补的荧光探针，可定量检测样本中DNA含量，用于病毒检测。当耐高温的聚合酶催化子链延伸至探针处，会对探针进行切割，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图）。通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值（荧光信号达到设定阈值时所经历的循环次数）。下列说法错误的是（　　） A．PCR循环过程中的复性是为了引物和模板结合 B．耐高温的聚合酶在该反应中可以水解磷酸二酯键 C．荧光探针可以直接发出荧光信号并被接收 D．Ct值越大表示患者感染病毒的风险越小 二、非选择题（除标注外，每空2分） 19．绵羊红细胞（SRBC）表面存在多种特异性抗原，可刺激动物免疫系统产生SRBC抗体。SRBC抗体的核心作用是结合 SRBC 进而导致溶血，是免疫学实验中最经典的工具抗体之一。下面是SRBC单克隆抗体的制备过程。 （1）HGPRT 酶缺陷（HGPRT⁻ ）骨髓瘤细胞的筛选 HGPRT⁻ 骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上存活。为便于后续筛选杂交瘤细胞，需先用化学诱变剂处理正常骨髓瘤细胞以获得 HGPRT⁻ 细胞。在体外培养条件下进行诱变处理容易获得缺陷型细胞，原因是：____ __。 （2）HGPRT⁻ 骨髓瘤细胞的培养 将诱变处理后的细胞置于含 8AG（鸟嘌呤类似物）的培养液中，正常骨髓瘤细胞在 ______ 过程中会将 8AG 掺入核酸分子，进而中毒死亡。筛选出的 HGPRT⁻ 骨髓瘤细胞在传代培养时仍需添加 8AG，目的是 ，这是因为基因突变具有 ______ 的特点。 （3）特异性 B 淋巴细胞的获取 多次用绵羊红细胞免疫小鼠，一定时间后取小鼠脾脏，采用 ______ 处理获得脾细胞悬液。选择脾脏作为取材器官，是因为它是免疫细胞 ______ 的主要场所，且更易从小鼠体内分离。 （4）杂交瘤细胞的制备与筛选 用 PEG 诱导 HGPRT⁻ 骨髓瘤细胞与B细胞融合，用HAT培养基进行筛选。将杂交瘤细胞、液态琼脂及 SRBC 混匀后倒平板（过程如图）。培养一段时间后，挑取周围出现溶血空斑的细胞团。此时获得的细胞不一定是单克隆细胞，理由是：______。后续还需进行 ______ 操作，才能确保获得真正的单克隆细胞株。 （5）基因工程技术制备单克隆抗体 随着研究发展，可通过基因工程方法直接获取 SRBC 单克隆抗体。请从下列选项中选择最合适的并填在横线上。 →构建表达载体→ → →抗原-抗体特异性结合检测表达情况 A. 获取浆细胞中表达特定抗体的基因序列 B. 获取浆细胞中表达特定抗体的 mRNA 并反转录为 cDNA C. 钙离子诱导法 D. 农杆菌转化法 E. 显微注射法 F. 将表达载体导入大肠杆菌细胞 G. 将表达载体导入哺乳动物细胞 对比杂交瘤细胞制备与基因工程的流程和特点，阐述利用基因工程生产单克隆抗体的优势：______（一点即可）。 20．番茄细胞中线粒体形态与其自身功能密切相关，并影响番茄果实的成熟过程。研究者将决定蛋白质在细胞内定位的特定肽链“嫁接”到绿色荧光蛋白（GFP）上，控制GFP在番茄细胞内的分布，从而在显微镜下观察线粒体的形态变化。回答下列问题： (1)根据蛋白质工程原理，一般不会直接拼接肽链，而是将两段肽链对应的______拼接在一起完成“嫁接”，细胞色素c氧化酶Ⅳ（COXⅣ）参与有氧呼吸生成水的过程。COXⅣ的一段肽链序列X决定了COXⅣ在细胞内的分布，研究者选择将X与GFP拼接，理由是______。 (2)拼接好的序列应插入下图中农杆菌T-DNA的______（填下图字母）处。理由是______。 (3)选择番茄幼嫩子叶进行离体培养，这些培养的器官、组织或细胞被称为______。农杆菌侵染后有一定几率将目的基因整合到番茄细胞的______中，番茄组织培养过程中，芽诱导期需在培养基中添加的植物激素是______。 21．某研究团队利用大鼠（2N=42）、小鼠（2N=40）两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs），为研究进化中不同物种间性状差异的分子机制提供了工具。该团队首先探索获得单倍体胚胎干细胞的研究路径（见图1），据图回答问题。 (1)培养细胞的培养液中通常加入________等天然成分，且需要在含有________混合气体的CO2培养箱中培养。 (2)孤雄单倍体胚胎培养过程中，需要将MⅡ卵母细胞的________________除去，然后注入________________。孤雌单倍胚胎干细胞取自孤雌囊胚中的________。 (3)若诱导孤雄单倍体胚胎干细胞与卵细胞融合得到的半克隆小鼠均为雌性，说明_____________。若将孤雌单倍体干细胞替代精子，注射入卵细胞，获得两个雌性亲本的后代小鼠，该过程涉及的技术有______（填字母）。 a．体细胞核移植    b．体外受精    c．动物细胞培养    d．胚胎移植 (4)该团队进一步尝试利用单倍体胚胎干细胞研究物种间杂交，过程如图2。将两种单倍体干细胞进行融合，得到的AdESCs中染色体数目为________。 22．卡拉胶是一类源于海洋红藻的大分子多糖，可被某些细菌降解为具有多种应用前景的卡拉胶寡糖。某研究小组拟筛选具有高活性卡拉胶酶（CG）的菌种用于生产卡拉胶寡糖。回答下列问题： (1)选择海藻和海泥作为样本筛选卡拉胶降解菌的原因是______。 (2)为构建携带cg（CG的编码基因）的大肠杆菌表达载体（图1），对cg的PCR扩增产物和质粒进行双酶切，随后用E.coliDNA连接酶连接。为保证连接准确性和效率，cg转录模板链的5'端最好含有______酶切位点。另有两组同学选用了各不相同的双酶切组合和T4DNA连接酶重复上述实验，获得的部分重组质粒分子大小符合预期，但均无法使用各自构建表达载体的双酶切组合进行切割，他们选择的酶组合分别是______和 。    限制酶的识别序列和切割位点如下： (3)为将构建好的表达载体转入大肠杆菌，需要先用Ca2+处理大肠杆菌细胞，目的是______，随后在含______和__________的培养基中培养一段时间后，根据菌落周围有无水解透明圈筛选目的菌株。 (4)已知空间上邻近的两个半胱氨酸易形成二硫键，从而提升蛋白质的耐热性。为提高CG的耐热性，研究人员分析了五个氨基酸位点的空间距离和保守度（保守度值越大表明该位点对酶的功能越关键），如图2所示。根据分析结果，选择第______位的氨基酸替换成半胱氨酸最合适，原因是______。    高二下学期5月月考 生物试卷 第8页（共10页） 高二下学期5月月考 生物试卷 第7页（共10页） 学科网（北京）股份有限公司 $