精品解析：黑龙江绥化市青冈县哈尔滨师范大学青冈实验中学校2025—2026学年度4月份考试高二生物试题

哈师大青冈实验中学2025—2026学年度4月份考试高二生物试题 一、单选题（1-10题，每题1分，11-20题，每题2分，共计30分） 1. 某兴趣小组尝试在马铃薯琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。下列操作顺序合理的是（　　） A. 配制培养基→灭菌→倒平板→接种分离→培养 B. 配制培养基→倒平板→灭菌→接种分离→培养 C. 配制培养基→灭菌→接种分离→倒平板→培养 D. 配制培养基→接种分离→倒平板→灭菌→培养 【答案】A 【解析】 【详解】配制培养基后先通过高压蒸汽灭菌去除培养基内的杂菌，灭菌后倒平板获得固体培养基，再对酵母菌进行接种分离，最后恒温培养即可得到酵母菌纯培养物，即配制培养基→灭菌→倒平板→接种分离→培养，A正确，BCD错误。 故选A。 2. 中国饮食文化源远流长，发酵技艺更是先民智慧的结晶。千百年来，果酒、果醋、腐乳和泡菜等传统发酵食品不仅丰富了百姓餐桌，更成为中华饮食文明的重要符号。下列相关叙述正确的是（　　） A. 利用葡萄制作果酒时，需每隔12小时打开瓶盖一次，以排出酵母菌无氧呼吸产生的CO2 B. 在果醋发酵过程中，通过控制发酵温度并持续通入无菌空气，可促进醋酸菌将乙醇直接氧化成乙酸 C. 腐乳制作过程中，毛霉等多种微生物产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 D. 泡菜发酵后期，亚硝酸盐含量先下降后上升，应在发酵早期食用以避免中毒 【答案】C 【解析】 【详解】A、制作果酒时，每隔12小时应拧松瓶盖（不是打开瓶盖）排出CO2，打开瓶盖会引入杂菌，导致发酵失败，A错误； B、果醋发酵时，通过控制发酵温度并持续通入无菌空气，醋酸菌先将乙醇转化为乙醛，再将乙醛氧化为乙酸，B错误； C、腐乳制作过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶，能将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，这个过程可以提升腐乳的风味和营养价值，C正确； D、泡菜发酵过程中，亚硝酸盐含量先上升后下降，发酵后期亚硝酸盐含量较低，此时食用更安全，D错误。 3. 在探究受多聚联苯（PCBs）污染的土壤修复实验中，研究人员首先获得红球菌、假单胞菌的纯培养物，然后分别设置了单独接种红球菌、单独接种假单胞菌以及混合接种两组菌的实验组，培养15天后测定PCBs残留率与关键降解基因bphA、bphB的表达量，实验结果如表所示。下列叙述错误的是（ ） 实验组 PCBs残留率/% bphA表达量相对值 bphB表达量相对值 单独接种红球菌 42.1 1.00 0.05 单独接种假单胞菌 68.5 0.10 1.00 混合接种红球菌和假单胞菌 18.3 1.85 1.92 A. 红球菌的纯培养物是由一个红球菌繁殖所获得的微生物群体 B. 基因bphA、bphB分别在红球菌、假单胞菌的细胞中高效表达 C. 单独接种时，与红球菌相比，假单胞菌降解PCBs的效率较高 D. 推测红球菌与假单胞菌在降解PCBs的过程中具有协同作用 【答案】C 【解析】 【详解】A、纯培养物是指由单一个体繁殖所获得的微生物群体，所以红球菌的纯培养物是由一个红球菌繁殖所获得的微生物群体，A正确； B、依据表格信息可知，bphA在红球菌中的表达量相对值大于假单胞菌，bphB在假单胞菌中的表达量相对值大于红球菌，说明基因bphA、bphB分别在红球菌、假单胞菌的细胞中高效表达，B正确； C、单独接种时，与红球菌相比，假单胞菌的PCBs残留率较高，说明其降解率较低，C错误； D、混合接种红球菌和假单胞菌组的PCBs残留率小于单独接种红球菌组和单独接种假单胞菌组，说明红球菌与假单胞菌在降解PCBs的过程中具有协同作用，D正确。 4. 某科学小组探索长寿花组织培养过程中外植体的消毒条件，实验结果如下表。下列分析错误的是（　　） 次氯酸钠处理时间（min） 8 10 12 酒精处理时间（min） 20 30 40 20 30 40 20 30 40 污染率（%） 25.6 21.1 13.3 22.2 16.7 12.2 20 15.8 8.9 褐化率（%） 0 0 8.9 0 5.6 14.4 7.8 16.7 16.7 注：褐化是指培养材料在组培过程中向培养基中释放褐色物质，并变褐死亡的现象。 A. 消毒处理时间越长，组织培养成功率越高 B. 消毒处理时间越长，外植体的污染率越低 C. 诱导培养外植体脱分化为愈伤组织的过程中一般不需要光照 D. 组织培养过程中提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根 【答案】A 【解析】 【分析】表格分析：本实验的自变量为次氯酸钠处理时间和酒精处理时间，因变量为污染率和褐化率。 【详解】A、由表格信息可知，消毒处理时间越长褐化率越高，死亡率越高，组织培养成功率越低，A错误； B、表中数据显示消毒处理时间越长，外植体的污染率越低，B正确； C、诱导愈伤组织形成过程中一般不需要光照，因为光可以诱导产生微管组织，不利于愈伤组织形成，C正确； D、生长素和细胞分裂素的比值大时有利于根的形成，因此提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根，D正确。 故选A。 5. 海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是（ ） A. 利用的原理均是细胞的全能性 B. 使用的培养基均需添加葡萄糖和血清 C. 培养时的温度和pH均相同 D. 产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力 【答案】D 【解析】 【分析】(1)植物组织培养利用了植物细胞具有全能性的原理，其流程是：外植体（离体的植物器官、组织或细胞）经脱分化形成愈伤组织，经再分化形成胚状体，长出芽和根，进而形成完整植株。(2)制备单克隆抗体的流程为：①向小鼠体内注射特定的抗原，使其发生免疫，然后从小鼠脾内获得能产生特定抗体的B淋巴细胞。②将小鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。③克隆化培养和抗体检测，从而筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。④将最终筛选出的杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠的腹水中提取单克隆抗体。 【详解】A、利用植物组织培养技术获得海南龙血树，利用的原理是细胞的全能性；制备单克隆抗体使用了动物细胞培养技术和细胞融合技术，这两种技术利用的原理分别是细胞的增殖和细胞膜的流动性，A错误； B、利用植物组织培养技术获得海南龙血树，使用的培养基中添加的是蔗糖，不需添加葡萄糖和血清，B错误； C、由于植物细胞和动物细胞生长所需的适宜温度和pH存在差异，所以培养时的温度和pH均不相同， C错误； D、愈伤组织是外植体（离体的植物器官、组织或细胞）经脱分化形成的，杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合后形成的，因此产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力，D正确。 故选D。 6. 下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（ ） A. 卵裂期细胞的体积随分裂次数增加而不断增大 B. 囊胚的滋养层细胞可发育成动物体的任何组织器官 C. 通过转基因、核移植、体外受精等方式获得的胚胎，必须经胚胎移植才能获得后代 D. “试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 【答案】C 【解析】 【详解】A、卵裂期细胞通过有丝分裂增殖，但细胞体积随分裂次数增加而逐渐减小，总体积不变，A错误； B、囊胚的滋养层细胞将发育为胎膜和胎盘，内细胞团细胞才能发育成动物体的各种组织器官，B错误； C、转基因、核移植、体外受精获得的胚胎均需移植到受体子宫内才能继续发育为后代，C正确； D、“试管婴儿”主要应用体外受精和胚胎移植技术，遗传学诊断技术（如PGD）属于第三代试管婴儿的附加技术，并非所有情况均需使用，D错误。 故选C。 7. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显提高。下列相关叙述正确的是（　　） A. 向发酵罐内接种前一般需要对纯化的优良单一菌种进行扩大培养 B. 发酵条件变化会影响微生物的生长繁殖，但不影响微生物的代谢途径 C. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可利用微生物来进行发酵 D. 通过发酵工程可以获得大量的微生物菌体，从菌体中提取单细胞蛋白 【答案】A 【解析】 【详解】A、工业发酵罐的体积一般为几十到几百立方米，接入的菌种总体积需要几立方米到几十立方米。所以，向发酵罐内接种前一般需要对纯化的优良单一菌种进行扩大培养，以获得足够数量的菌体用于大规模发酵罐接种，该操作可提高发酵效率，A正确； B、发酵条件（如温度、pH、溶氧量等）变化，不仅会影响微生物的生长繁殖，也可能会影响微生物的代谢途径（如酵母菌在有氧时进行有氧呼吸，无氧时进行酒精发酵），B错误； C、传统发酵技术（如制作泡菜、果酒）利用天然存在的菌种，发酵工程通常会利用通过微生物培养技术获得的单一菌种，两者最大区别在于发酵工程采用纯种培养和人工控制发酵条件，实现工业化、标准化生产，C错误； D、单细胞蛋白指的是通过发酵获得的大量微生物菌体，无需“从菌体中提取”，D错误。 故选A。 8. 诺贝尔生理学奖获得者发现，利用逆转录病毒将0ct4等4个关键基因导入已分化的体细胞中并表达，可使这个细胞成为类似干细胞的诱导多能干细胞（iPS细胞）。下图为该技术在人体细胞中的实验示意图。下列相关叙述不正确的是（ ） A. iPS细胞核移植比胚胎干细胞核移植更容易表现全能性 B. iPS细胞的诱导过程无需破坏胚胎，还可以避免免疫排斥 C. 导入的4个关键基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力 D. ①②③利用iPS获得各种器官组织时应加入分化诱导因子 【答案】A 【解析】 【分析】分析题图：图示表示将4个关键基因移植入已分化的体细胞中并表达，使这个细胞成为具有类似干细胞的诱导多能干细胞（iPS细胞）。图中@②③表示细胞分化，其实质是基因的选择性表达。用该技术得到的新生器官替换供体病变器官，属于自体移植，不发生免疫排斥反应，这可以大大提高器官移植成功率。 【详解】A、结合题意“iPS细胞是类似干细胞的诱导多能干细胞”，而胚胎干细胞属于全能干细胞，故胚胎干细胞核移植更容易表现全能性，A错误； B、iPS技术不使用胚胎细胞或卵细胞，只需对体细胞进行操作及适当的培养即可，无需破坏胚胎，由于该技术属于自体移植，还可以避免免疫排斥，B正确； C、根据题文，导入的基因能促使已分化的体细胞成为诱导多能干细胞（iPS细胞），已分化体细胞无分裂能力或分裂能力较弱，而干细胞是一类有分裂能力的细胞，故导入的基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力，C正确； D、iPS可分化为多种细胞，加入分化诱导因子才能获得相应的组织或器官，D正确。 故选A。 9. 为拯救濒危物种，科学家进行异种体细胞核移植研究。将牛桑葚胚细胞作为供核细胞，分别移植到羊、水牛和田鼠的去核卵母细胞中，结果发现只有牛—羊和牛—水牛之间的异种重构胚体外培养可以发育到囊胚。下列叙述错误的是（　　） A. 牛—田鼠重构胚不能发育可能是因为牛与田鼠的亲缘关系较远 B. 通常取囊胚期内细胞团细胞对异种重构胚进行DNA分析 C. 异种重构胚可能含有来自供体细胞和受体细胞的两种线粒体 D. 进行胚胎移植前，通常不需要对供体和受体进行免疫检查 【答案】B 【解析】 【详解】A、牛与羊、水牛的亲缘关系更近，与田鼠亲缘关系更远，异种重构胚的发育能力与供核细胞和受体卵母细胞的亲缘关系远近相关，因此牛 — 田鼠重构胚不能发育至囊胚，可能是因为二者亲缘关系较远，A正确； B、囊胚期的内细胞团细胞将来会发育成胎儿的各种组织，若取其进行 DNA 分析，会破坏胚胎的正常发育。实际操作中，通常取囊胚期的滋养层细胞进行 DNA 分析，B错误； C、核移植时，供体细胞会带入少量细胞质，其中含线粒体，受体卵母细胞的细胞质中也含线粒体，因此重构胚可含有两种线粒体，C正确； D、在胚胎移植前，受体子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，因此通常不需要对供体和受体进行免疫检查，D正确。 10. 紫草宁是从紫草愈伤组织细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁是世界上首例药用植物细胞工程产品。下列关于植物细胞工程的说法，正确的是（ ） A. 植物细胞培养的目的主要是获得植物生长和生存所必需的次生代谢产物 B. 植物组织培养时，应对外植体进行灭菌处理以防止培养基及愈伤组织污染 C. 在培养愈伤组织时加入细胞融合的诱导剂，可直接获得染色体加倍的细胞 D. 叶肉细胞往往带病毒且细胞的全能性较低，故培育脱毒植物适宜选茎尖而不选叶片 【答案】D 【解析】 【分析】1.植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2.植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、植物细胞培养的主要目的是通过大规模的细胞培养，以获得人类所需的细胞次生代谢产物，细胞次级代谢产物不是植物细胞生长所必须得，A错误； B、植物组织培养时，应对外植体进行消毒处理，培养基需要进行灭菌处理，这样可以防止杂菌污染，B错误； C、在培养愈伤组织时加入细胞融合的诱导剂，不能直接获得染色体加倍的细胞，因为植物细胞具有细胞壁，阻止了原生质体的融合，C错误； D、叶肉细胞往往带病毒且细胞的全能性较低，而茎尖不仅不带毒，而且全能性较高，故培育脱毒植物适宜选茎尖而不选叶片，D正确。 故选D。 11. 活性黑5是一种低毒性、难褪色的含氮染料。现欲利用微生物处理染料废水中的活性黑5，具体操作流程如图：从染料废水堆积池的污泥中采集样液，通过培养基Ⅰ和Ⅱ的培养获得优势菌群，然后采用浓度梯度驯化法，进一步培养获得具备强分解活性黑5能力的假单胞杆菌，并进行基因表达分析。下列相关叙述错误的是（　　） 注：BVU5是一种分解活性黑5的氧化还原酶 A. 培养基Ⅰ从用途上属于选择培养基 B. 假单胞杆菌中，BVU5蛋白分解活性黑5的场所最可能为溶酶体 C. 将细菌从培养基Ⅰ转移到Ⅱ的目的是进一步分离纯化细菌 D. 驯化后的假单胞杆菌可能增强了BVU5基因的转录和翻译 【答案】B 【解析】 【详解】A、本实验的目的是筛选能分解活性黑5的微生物，培养基Ⅰ可以筛选出能分解活性黑5的目的菌，从用途上属于选择培养基，A正确； B、假单胞杆菌是原核生物，仅含有核糖体一种细胞器，不存在溶酶体，BVU5分解活性黑5的场所是细胞质基质，B错误； C、由图可知，培养基Ⅱ上进行平板划线法分离纯化相应的菌落，故将细菌从培养基Ⅰ转移到培养基Ⅱ的目的是进一步分离纯化细菌，C正确； D、BVU5是分解活性黑5的酶，驯化逐步提高活性黑5的浓度，筛选出的强分解能力的假单胞杆菌，可能增强了BVU5基因的转录和翻译，使BVU5的表达量升高，D正确。 12. 体细胞克隆猴培育过程中，组蛋白甲基化不利于胚胎的发育率和妊娠率。为提高胚胎发育率，科研人员将Kdm4d的mRNA注入了重构胚。具体培育流程如图所示，下列有关叙述正确的是（ ） A. 从母猴卵巢中采集的卵母细胞可以直接作为核移植的受体 B. 使用免疫抑制剂处理代孕母猴才能保证移入的胚胎能在子宫中发育 C. 胚胎分割需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. KDm4d的mRNA翻译产生的蛋白质可能会催化组蛋白的去甲基化 【答案】D 【解析】 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、从卵巢中取出的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期，才能做核移植的受体细胞，A错误； B、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，因此不需要注射免疫抑制剂，B错误。 C、胚胎分割，需均等分割囊胚的内细胞团，以免影响胚胎发育，C错误； D、科学家将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂处理重构胚，这样可降低组蛋白的甲基化水平，提高组蛋白的乙酰化水平，D正确。 故选D。 13. 生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一头野驴刚死亡，以下提供的“复生”野驴个体的方法中能够成功的是（ ） A. 将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体 B. 将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体 C. 将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育成新个体 D. 取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体 【答案】D 【解析】 【分析】动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。 【详解】A、将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成的个体还是家驴，不是“复生”野驴个体，A错误； B、将野驴的体细胞两两融合，培育不成新个体，因为动物体细胞的全能性受到限制，目前技术条件下不可能实现。另外，假设将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体，这样的个体遗传物质发生了改变，不再是“复生”野驴个体，B错误； C、由于动物细胞的全能受到限制，利用动物细胞培养技术不能培育成新个体，C错误； D、取出野马的体细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中，经孕育培育成新个体，这属于核移植技术，是目前较成熟的技术，较易成功“复生”野驴，体现了细胞核具有全能性，D正确。 故选D。 14. 中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如下图所示。下列分析正确的是（　　） A. 培养卵细胞时需要定期更换培养液，目的是保证无菌、无毒的环境 B. 过程①类似脱分化过程，存在基因的选择性表达 C. 过程②在透明带内进行，此过程不存在细胞分化 D. 过程③胚胎移植前需要对母体进行免疫检查 【答案】B 【解析】 【分析】卵细胞激活转化成phFSC，通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC，其与卵细胞结合获得甲，从而得到孤雌小鼠。 【详解】A、培养卵细胞时需要定期更换培养液，目的是保证无毒（清除次生代谢产物）环境，A错误； B、过程①由高度分化的细胞获得干细胞，类似脱分化过程，存在基因的选择性表达，B正确； C、过程②（受精卵发育为囊胚）在透明带内进行，此过程存在细胞分化，C错误； D、胚胎移植过程中受体对外来胚胎一般不存在排斥反应，不需要进行免疫检查，D错误。 故选B。 15. 通过支架培养生成的人工肌肉组织，可用于创伤或手术后的肌肉修复。科研人员利用大鼠骨骼肌细胞生成三维肌束结构的培养流程如下图所示。培养过程中非成肌细胞贴壁速度快(0.5-2小时)，而成肌细胞（目标细胞）贴壁较慢（数小时），三维培养阶段需加入胶原支架使细胞贴附，同时促进细胞三维排列。下列叙述正确的是（ ） A. 用机械的方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理肌肉组织将其分散成单个细胞 B. 原代培养2小时左右可倒掉培养液，然后轻柔收集贴壁细胞用于传代培养 C. 传代培养时通过定期更换培养液、加入抗生素和血清维持无菌、无毒环境 D. 三维培养阶段胶原支架为细胞提供更大附着面积，避免细胞出现接触抑制 【答案】A 【解析】 【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。 （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。 （3）温度和 pH：36.5℃±0.5℃；适宜的 pH：7.2～7.4。 （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的 CO2（维持培养液的 pH）。 【详解】A、动物细胞培养过程中，可以用机械的方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理肌肉组织将其分散成单个细胞，A正确； B、传代培养需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，再用离心法收集细胞，而不是直接倒掉培养液，B错误； C、传代培养时加入血清是为了给细胞提供营养，而不是为了维持无菌、无毒环境，C错误； D、三维培养阶段胶原支架为细胞提供更大附着面积，可以培养更多的细胞，但还是会出现接触抑制，D错误。 故选A。 16. 花椰菜（2n=18）易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥（2n=16）对黑腐病等多种常见病害具有抗性。科研人员用射线照射处理黑芥叶肉原生质体后与花椰菜根原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株甲、乙、丙，它们均含有花椰菜的全部染色体。下列叙述错误的是（ ） 植株 花椰菜 黑芥 杂合新植株甲 杂合新植株乙 杂合新植株丙 染色体数目 18 16 34 24 58 A. 可以利用是否含有叶绿体作为初步筛选融合原生质体的依据 B. 杂合新植株甲的单倍体的细胞中有2个染色体组，因而可育 C. 杂合新植株丙可能是由多个原生质体经PEG诱导融合而成 D. 获得的杂种细胞需要经过脱分化和再分化才能培育成新植株 【答案】B 【解析】 【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞在一定条件下融合成为杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的方法。其原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性，去除细胞壁后诱导原生质体融合的方法有离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导，其典型优势是克服远缘杂交不亲和的障碍。 【详解】A、融合成功的杂种细胞，可形成叶绿体，所以可以利用是否含有叶绿体作为初步筛选融合原生质体的依据，A正确； B、杂合新植株甲的单倍体的细胞中有2个染色体组，但来源不同，因而不可育，B错误； C、由于细胞融合具有随机性，所以杂合新植株丙可能是由多个原生质体经PEG诱导融合而成，C正确； D、获得的杂种细胞需要经过脱分化形成愈伤组织，然后再分化生芽、生根，才能培育成新植株，D正确。 故选B。 17. 我国科学家结合单倍体育种技术成功培育出玉米新品种，部分育种过程如图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①包含脱分化和再分化，不同阶段激素含量及光照条件不同 B. 过程②需用秋水仙素或低温诱导处理单倍体的种子以获得二倍体 C. 过程③可从个体水平上进行筛选，从而获得稳定遗传的优良品种 D. 该培育过程涉及的生物学原理有植物细胞的全能性和染色体变异 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。 【详解】A、过程①包含脱分化和再分化，不同阶段的细胞分裂素和生长素的比例不同，脱分化不需要光，再分化需要光，A正确； B、过程②需用秋水仙素或低温诱导处理单倍体的幼苗，不是处理种子，B错误； C、过程③可从个体水平上进行筛选，观察玉米的性状，从而获得稳定遗传的优良品种，C正确； D、该过程植物组织培养技术，涉及植物细胞的全能性，由单倍体到纯和二倍体运用了染色体数目变异，D正确。 故选B。 18. 人肌红蛋白(Myo)是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗 Myo 的单克隆抗体， 科研人员通过细胞工程技术获得杂交瘤细胞进行动物细胞培养，获取上清液进行抗体阳性检测，检测原理如图所示。以下说法错误的是（ ） A. 将能表达 Myo 基因的细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，用于制备抗 Myo 的单克隆抗体 B. 单克隆抗体的制备解决了血清抗体产量低、纯度低、特异性差的问题 C. 抗体检测过程中，将人肌红蛋白作为抗原固定 D. 根据是否显色来判断是否有抗 Myo 的单克隆抗体产生 【答案】A 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体，表达Myo基因的细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，不能制备抗Myo的单克隆抗体，A错误； B、单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备，B正确； C、而抗原和抗体的结合具有特异性，故利用人肌红蛋白作为抗原固定来检测抗体，C正确； D、酶标抗体可与待检测抗体结合，且携带的酶可与相应底物反应显色，因此根据是否显色来判断是否有抗 Myo 的单克隆抗体产生，D正确。 故选A。 （24-25高二下·山东聊城·期中） 19. HER-2蛋白主要在胎儿期表达，成年以后只在极少数组织内低水平表达。由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成的抗体—药物偶联物T-DMI，对HER-2有很强的靶向性，可用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。下列叙述正确的是（ ） A. 给小鼠反复注射HER-2蛋白，以便在血清中获取曲妥珠单抗 B. 用选择培养基可筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞 C. DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键 D. 用灭活的病毒诱导细胞融合时细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、制备单克隆抗体时，需向小鼠多次注射抗原（HER-2），以激活B淋巴细胞，但免疫后的B淋巴细胞应从小鼠的脾脏中获取，而非血清（血清中含多克隆抗体，而非B细胞），A错误； B、选择培养基（如HAT培养基）的作用是筛选出杂交瘤细胞（融合的B细胞与骨髓瘤细胞），但无法直接筛选出分泌特定抗体的细胞。分泌抗体的杂交瘤细胞需通过后续的抗体检测进一步确认，B错误； C、根据题意信息可知，T-DMI中，曲妥珠单抗（抗体）负责特异性结合HER-2，而DMI是连接的细胞毒药物。特异性靶向的关键在于抗体部分，而非DMI，C错误； D、灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面的糖蛋白促使细胞膜融合。此过程依赖细胞膜的流动性，导致膜蛋白和脂质分子重新排布，D正确。 故选D。 20. 比考扎霉素可用于治疗细菌性腹泻，该抗生素是由精氨酸合成缺陷型灰色浅灰链霉菌 (属于细菌)产生。为筛选出能产比考扎霉素的菌种，科研工作者对采自土壤的灰色浅灰链霉菌进行诱变与选育，实验的部分流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 含有琼脂的培养基为②③④，含有精氨酸的培养基为④ B. 配制培养基①时应先将pH调至酸性再进行高压蒸汽灭菌 C. 进行原位影印操作时必须先将无菌绒布转印至培养基③，再转印至培养基④ D. 由培养结果推断，应挑取乙菌落进一步鉴定其是否能产生比考扎霉素 【答案】C 【解析】 【详解】A、②③④为固体培养基，固体培养基需要加入琼脂作为凝固剂，该灰色浅灰链霉菌是精氨酸合成缺陷型，自身不能合成精氨酸，要筛选产比考扎霉素的菌株，需在培养基中添加精氨酸，这样缺陷型放线菌才能生长，所以含有精氨酸的培养基为①②④，A错误； B、配制该灰色浅灰链霉菌（细菌）培养基时应先将pH调至中性或弱碱性再进行高压蒸汽灭菌，B错误； C、为了防止将特定营养成分带入培养基，故进行原位影印操作时，先将无菌绒布转印至培养基③（缺乏精氨酸的培养基），再转印至培养基④（含有精氨酸的培养基），C正 确； D、甲菌落在③中不能生存，在④中可以生存，说明甲菌落只能生活在完全培养基中， 不能生活在缺精氨酸的完全培养基中，即甲菌落是精氨酸合成缺陷型，可能会产生比考扎霉素，而乙菌落在③④中均能生存，即这种微生物有无精氨酸均可生存，所以乙菌落不是精氨酸合成缺陷型，不能产生比考扎霉素，故应挑取甲菌落进一步鉴定其是否能产生比考扎霉素，D错误。 二、不定项（错答不得分，漏答得1分，答全得3分，共计15分） 21. 葡萄酒中酒精度过高易引起消费者对健康风险的担忧。为检测不同非酿酒酵母在葡萄酒酿造中降低酒精度的应用潜力，研究人员以本土酵母（Hu）与酿酒酵母（Sc）为材料，检测不同接种方式下酒精度的变化情况，结果如下图所示。下列相关叙述正确的有（　　） A. 果酒制作的过程中酿酒酵母的最适生长温度约为35℃ B. 发酵过程中发酵液pH逐渐上升，可通过检测pH变化了解发酵情况 C. 接种Sc后发酵速率显著加快，说明Sc在酒精发酵过程中起主导作用 D. 根据曲线分析可知Hu能有效降低发酵过程中的酒精含量 【答案】CD 【解析】 【详解】A、果酒制作过程中，酿酒酵母的最适生长温度约为18-25℃，不是 35℃，A错误； B、发酵过程中，酵母菌会产生二氧化碳，二氧化碳溶于水会形成碳酸，使发酵液的 pH 逐渐下降，而不是上升，B错误； C、从曲线可以看出，单独接种 Sc（酿酒酵母）时，酒精度上升最快；而单独接种 Hu 时酒精度上升较慢。同时接种或先接种 Hu 再接种 Sc 时，酒精度也低于 Sc 单独接种的情况，说明 Sc 在酒精发酵过程中起主导作用，C正确； D、对比 Sc 单独接种和 “同时接种 Sc 和 Hu”“先接种 Hu 再接种 Sc” 的曲线，后者的酒精度均低于前者，说明 Hu 能有效降低发酵过程中的酒精含量，D正确。 故选CD。 22. 除草剂莠去津是一种含氮的有机物，长期使用易对土壤造成污染。研究人员从土壤中筛选莠去津降解菌的过程如下图所示（含过量莠去津的固体培养基不透明）。下列叙述正确的是（　　） A. 从A瓶到C瓶的目的是逐步稀释培养液中的目的菌 B. 选择固体培养基甲中出现的有透明带菌落进行再纯化 C. 图中进行再纯化的接种过程至少需要灼烧6次接种环 D. 整个实验过程中需设置未接种的选择培养基作为空白对照 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、从A、B、C 瓶是在无氮培养液中进行的富集培养，其主要目的是增加目的菌的浓度，而不是单纯的稀释，A错误； B、固体培养基甲中含有过量莠去津，不透明。能降解莠去津的细菌会在菌落周围分解莠去津，形成透明带，因此，应选择有透明带的菌落进行再纯化，B正确； C、图乙展示的是平板划线法纯化菌种，划线 5 次，每次划线前都要灼烧接种环，最后一次划线结束后也要灼烧接种环，共需要灼烧 5+1=6 次，C正确； D、整个实验过程中，需设置未接种的选择培养基作为空白对照，以检验培养基是否被污染，D正确。 23. 利用幼嫩的菊花茎段，经过组织培养可以获得完整的菊花幼苗。相关说法正确的是（ ） A. 将茎段菊花换成芽原基能加快形成菊花幼苗的速度 B. 菊花茎段经脱分化可直接形成含有根和芽的胚状体 C. MS培养基中的琼脂可为外植体提供营养物质 D. 蔗糖替代葡萄糖除提供能量外，还能调节细胞的渗透压 【答案】AD 【解析】 【分析】植物组织培养技术利用的是细胞的全能性，分裂能力强的细胞全能性更强。植物组织培养包括脱分化和再分化两个过程，脱分化形成愈伤组织，再分化可形成丛芽和胚状体。 【详解】A、分裂能力旺盛的细胞全能性更强，将茎段菊花换成芽原基能加快形成菊花幼苗的速度，A正确； B、菊花茎段经脱分化形成的是愈伤组织，B错误； C、MS培养基中的琼脂不能被外植体利用，C错误； D、蔗糖替代葡萄糖除提供能量外，还能调节细胞的渗透压，D正确。 故选AD。 24. 第三代试管婴儿俗称PGD/PGS，指在试管婴儿（IVF-ET）的胚胎移植前，取胚胎的遗传物质进行分析，诊断是否有异常，筛选健康胚胎移植。其过程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 采卵的过程中可以给母亲注射性激素，促进卵细胞的生成，使其排出更多成熟的卵子 B. 采集的精子需置于人工配制的肝素溶液中获取能量，与卵细胞膜接触后阻止后续的精子进入透明带 C. 受精过程中精子核膜破裂形成雄原核，卵子排出第二极体形成雌原核，二者融合完成受精作用 D. 胚胎发育过程中，原肠胚进一步扩大会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，称为孵化 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫“受体”。通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代。 【详解】A、采卵的过程中可以给母亲注射促性腺激素，促进卵细胞的生成，使其排出更多成熟的卵子，A错误； B、采集的精子需置于人工配制的肝素溶液中获能是获得受精的能力，但不是获得能量，B错误； C、受精的过程中精子核膜破裂，形成雄原核，卵细胞排出第二极体形成雌原核，二者融合形成受精卵，完成受精作用，C正确； D、胚胎发育过程中，囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，称为孵化，D错误。 故选C。 25. 首例体细胞克隆顶级种用藏羊“青青”在青海诞生。科研人员利用3只优良欧拉型良种公羊和1只母羊作为供体通过体细胞克隆技术实现了优秀种质的快速复原保存，开启了良种藏羊高效繁育的新篇章。下图是：克隆藏羊“青青”的培育过程，有关叙述正确的是（　　） A. 用胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理欧拉羊的组织后，离心获得①中的供体细胞 B. ②常用显微操作去核，目的是除去MⅡ期的卵母细胞内由纺锤体—染色体—核膜组成的细胞核 C. 将供体细胞注入去核的卵母细胞，用高Ca2+—高pH诱导获得重组细胞 D. ③可用乙醇、蛋白酶合成促进剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 【答案】A 【解析】 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。 【详解】A、①中供体细胞是从欧拉型良种公羊体内获取的组织用胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理后离心，去掉酶液获得，A正确； B、②去核常用显微操作去核，是除去MⅡ期的卵母细胞内由纺锤体--染色体组成的复合物，B错误； C、重组细胞的获得是将供体细胞注入去核的卵母细胞，用灭活的病毒、聚乙二醇等方法诱导二者融合获得的，高Ca2+--高pH是诱导植物原生质体融合的方法，C错误； D、③可用电刺激、Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等处理重组细胞，使其可以顺利完成细胞分裂和发育的进程，不是蛋白酶合成促进剂，D错误。 故选A。 三、非选择题（5个小题，共55分） 26. 结合所学知识，回答下列问题： 图1表示苹果醋的简易制作装置和制作流程。发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图2所示据图回答下列问题： （1）用图1装置酿酒结束后，若要直接转入果醋发酵，改变的环境条件是___________。该过程进行的反应简式是__________。 （2）图2整个发酵过程的中心环节是___________。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH在灭菌___________（填“前”或“后”）调至酸性。如果污染了杂菌，某些杂菌会产生___________将青霉素分解掉。 （3）欲从土壤中分离出能产生纤维素酶的纤维素分解菌，可用加入_________作为唯一碳源制成的选择培养基进行分离。若将样品接种到分离纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是_________，通过观察是否产生________来筛选纤维素分解菌。 （4）对产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了_________法，其可以用来计数的原理为_________。为了避免混淆，本实验纯化菌种时使用的平板需要在培养皿的__________（“皿盖”或“皿底”）做好标记。然后在恒温培养箱中需培养1—2d，每隔24h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果，其目的是___________。 （5）若某次检测时采用图甲所示规格的血细胞计数板进行计数，检测时将发酵液稀释100倍，经过一系列操作，检测四角中方格的酵母菌数量分别为22、26、24、28个，则此时发酵液中酵母菌的种群密度约为___________个/mL。 【答案】（1） ①. 通入无菌空气（氧气）、升高温度 ②. C2H5OH+O2CH3COOH+H2O （2） ①. 发酵罐中发酵 ②. 前 ③. 分解青霉素的酶 （3） ①. 纤维素 ②. 刚果红 ③. 透明圈 （4） ①. 稀释涂布平板 ②. 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌 ③. 皿底 ④. 为了防止培养时间不足导致菌落遗漏 （5）4×108个/mL 【解析】 【分析】 【小问1详解】 酿酒过程需要在无氧条件下进行，果醋发酵需要在有氧条件下发生，酿酒的适宜温度大约在25~30℃，而果醋酿造的适宜温度大约是30~35℃，因此用图1装置酿酒结束后，若要直接转入果醋发酵，改变的环境条件是通入无菌空气（氧气）、升高温度。果醋发酵过程进行的反应简式是：C2H5OH+O2CH3COOH+H2O。 【小问2详解】 图2整个发酵过程的中心环节是发酵罐中发酵。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH在灭菌前调至酸性。在青霉素生产过程中培养基、发酵设备都必须经过严格的灭菌。如果污染了杂菌，某些杂菌会产生分解青霉素的酶将青霉素分解掉。 【小问3详解】 欲从土壤中分离出能产生纤维素酶的纤维素分解菌，可用加入纤维素作为唯一碳源制成的选择培养基进行分离，这样只有能分解利用纤维素的细菌才能在该培养基上生长。在分离纤维素分解菌的培养基中需要加入的特殊染料是刚果红。刚果红能与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红 - 纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，所以通过观察是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 【小问4详解】 产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了稀释涂布平板法，其可以用来计数的原理为当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。为了避免混淆，本实验纯化菌种时使用的平板需要在培养皿的皿底做好标记，原因是若在皿盖上做标记影响微生物的观察。然后在恒温培养箱中需培养1—2d，每隔24h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果，其目的是为了防止培养时间不足导致菌落遗漏，影响数据的准确性。 【小问5详解】 大方格：25 个中方格 计数原则：计四个角 + 正中间共 5 个中方格（本题给四角 4 个中方格数据） 计数板体积：1 个大方格体积 =0.1 mm3=10−4 mL，稀释倍数：100 倍。 平均数=(22+26+24+28)÷4=25个，种群密度约为25×16÷10−4 ×100=4×108个/mL。 27. 结合所学知识，回答下列问题： 猕猴桃因果实营养丰富，维生素C含量极高，药食两用，风味特异而被称为“水果之王”。如图是以猕猴桃为原料发酵制作果酒和果醋的过程简图。结合所学知识，回答下列问题： （1）酿制果酒时，一般要先通气的目的是__________。 （2）酒精发酵过程中必须严格控制好__________（答出3点）等发酵条件，使发酵过程处于最佳状态；同时要随时检测培养液中的___________（答出2点）等，以了解进程。 （3）醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖源__________（填“充足”或“不足”）。为鉴定果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、尝、嗅之外，还可以通过检测__________作进一步的鉴定。果酒和果醋发酵中都没有进行严格的消毒灭菌，但杂菌却不能正常生长繁殖，原因是___________。 （4）酿制成功的果酒如果暴露在空气中会逐渐出现酸味，气温高的夏天更易如此，其原因是___________。 【答案】（1）让酵母菌在有氧条件下大量繁殖 （2） ①. 温度、pH、溶解氧 ②. 酵母菌数量、酒精浓度 （3） ①. 不足 ②. 发酵前后的pH ③. 酵母菌及醋酸菌大量的代谢产物如酒精及醋酸抑制了其他杂菌的生长繁殖 （4）醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为30~35℃（夏天温度较高），导致醋酸菌大量生长产生醋酸 【解析】 【小问1详解】 制作果酒时，一般要先通气后密封，其中先通气的目的是让酵母菌在有氧条件下大量繁殖。 【小问2详解】 酒精发酵过程中必须严格控制好温度、pH、溶解氧、罐压、营养物质等发酵条件，使发酵全过程处于最佳状态，同时定期检测微生物数量（酵母菌数量）、产物浓度（酒精浓度）等，以了解发酵进程，实施终止发酵或更换发酵液。 【小问3详解】 醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖源不足，在糖源和氧气都充足的情况下，醋酸菌将葡萄糖直接发酵成醋酸。醋酸产生会导致发酵液pH变化，鉴定果醋的常用方法是检测发酵液前后的pH变化。酵母菌及醋酸菌大量的代谢产物如酒精及醋酸会抑制其他杂菌的生长繁殖，因此通常不需要进行严格的消毒灭菌处理。 【小问4详解】 醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为30~35℃，夏天温度较高，所以酿制成功的果酒如果暴露在空气中会导致醋酸菌大量生长产生醋酸，逐渐出现酸味。 28. 结合所学知识，回答下列问题： 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： （1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是__________，过程②选用的骨髓瘤细胞________（选填“能”或“不能”）在HAT培养基（选择培养基）上生长。 （2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行__________和___________，才能筛选出足够量的既能无限增值又能___________的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是__________（答出两点）。 （3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是____________。 （4）杂交瘤细胞在体外培养时与植物组织培养的主要区别是培养基要用________培养基，培养基中除了添加必要的营养物质外还需加入含天然成分的____________；生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是____________。 （5）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是__________，体现的是双特异性单克隆抗体在运载药物方面的用途。 【答案】（1） ①. 灭活病毒诱导法 ②. 不能 （2） ①. 克隆化培养 ②. （专一）抗体检测 ③. 产生特异性抗体 ④. 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 （3）刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞 （4） ①. 液体 ②. 动物血清 ③. B淋巴细胞不能在体外无限增殖 （5）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞（合理即可） 【解析】 【小问1详解】 诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒），与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是灭活的病毒；小鼠B淋巴细胞在HAT培养基上可正常存活，但不能繁殖，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，骨髓瘤细胞与B淋巴细胞之间形成的融合细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖。 【小问2详解】 HAT 培养基只能筛选出 “杂交瘤细胞”，但不能保证杂交瘤细胞能分泌所需特异性抗体。因此筛选出杂交瘤细胞后，还需进行克隆化培养和专一抗体阳性检测，最终筛选出既能无限增殖、又能产生特异性（所需）抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，并且可大量制备。 【小问3详解】 图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞。 【小问4详解】 动物细胞培养用液体培养基；植物组织培养用固体（半固体）培养基。动物细胞培养基必须额外添加天然成分动物血清（血清含细胞生长未知营养因子、激素、贴壁因子等，植物培养基不需要）。不能直接培养 B 淋巴细胞生产抗体的原因：B 淋巴细胞（浆细胞）高度分化，不能在体外无限增殖，只能存活短暂时间，无法大量生产抗体。 【小问5详解】 双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，对人体的副作用更小，这是利用单克隆抗体治疗疾病，体现的是双特异性单克隆抗体在治疗疾病（运载药物）方面的用途。 29. 中国科学家率先成功地应用体细胞进行克隆，获得两只克隆猴—“中中”和“华华”。科研人员从供体猴胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。 （1）传代培养时，选择图中______（填“①”或“②”）时期的细胞进行分装培养更合理。图中细胞数目增长进入平台期的原因有_____（答出两点即可）。 （2）科研人员对供体成纤维细胞与受体去核的卵母细胞进行诱导融合，形成重构胚，移入代孕母猴体内。“去核”指的是去除卵母细胞中的________，目前常用的去核方法是_____。 （3）研究发现，对灵长类动物的体细胞来说，单靠核移植本身并不足以使重构胚顺利发育成存活个体。研究表明，表观遗传修饰，尤其是组蛋白乙酰化和甲基化水平，在核移植胚胎发育过程中起着关键作用。科研人员认为提高组蛋白乙酰化水平的同时降低组蛋白甲基化水平能显著提高重构胚的发育率。欲通过实验来验证上述观点，请简要写出实验思路并预期结果。供选择的试剂为：组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、生理盐水。 实验思路：___________。 预期结果：___________。 【答案】（1） ①. ② ②. 细胞密度过大、细胞出现接触抑制（细胞接触抑制必答、细胞密度过大、有害代谢物积累、） （2） ①. 纺锤体-染色体复合物 ②. 显微操作法 （3） ①. 将生理状况相同的重构胚均分为甲、乙、丙、丁四组，分别注入等量的组蛋白去乙酰化酶抑制剂、组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰化酶抑制剂和组蛋白去甲基化酶的mRNA、等量生理盐水。一段时间后分别检测各组的胚胎发育率 ②. 各组的胚胎发育率结果为丙组>甲组≈乙组>丁组 【解析】 【分析】动物细胞培养：将动物组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞，制成细胞悬液后进行原代培养，当细胞贴壁生长出现接触抑制时，进行传代培养。 【小问1详解】 传代培养应选择细胞增殖旺盛、代谢活跃的时期。图中①为延迟期（细胞适应新环境，分裂缓慢），②为指数增长期（细胞处于对数增殖期，分裂能力强、代谢旺盛）。因此，选择②时期的细胞进行分装培养更合理，原因是该时期细胞增殖能力强，传代后能更快进入分裂状态，保证培养效率。细胞数目增长进入平台期的主要原因包细胞密度过大、细胞出现接触抑制。 【小问2详解】 “去核”指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物。由于处于减数第二次分裂中期（MⅡ期）的卵母细胞核靠近极体，便于操作，因此通常选择该时期的卵母细胞进行去核。目前常用的去核方法是显微操作法，即借助显微操作仪，用微吸管将细胞核和部分细胞质一并吸出。  【小问3详解】 实验目的是验证“提高组蛋白乙酰化水平同时降低甲基化水平可提高重构胚发育率”。供选试剂中：组蛋白去甲基化酶的mRNA可翻译产生去甲基化酶，降低组蛋白甲基化水平；组蛋白去乙酰化酶抑制剂可抑制去乙酰化酶活性，提高组蛋白乙酰化水平；生理盐水作为对照。实验设计需遵循对照原则，实验思路如下：将生理状况相同的重构胚均分为甲、乙、丙、丁四组，分别注入等量的组蛋白去乙酰化酶抑制剂、组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰化酶抑制剂和组蛋白去甲基化酶的mRNA、等量生理盐水。一段时间后分别检测各组的胚胎发育率。根据实验假设，同时处理（丙组）可显著提高重构胚发育率，因此预期结果为：各组的胚胎发育率结果为丙组>甲组≈乙组>丁组。   30. 结合所学知识，回答下列问题： 细胞融合技术有着广泛应用。如图为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题。 （1）若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr的两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将它们的花粉除去细胞壁，然后诱导其融合，再将这些融合细胞培育出玉米新品种。 ①这两个品种的花粉可用化学诱导剂____________诱导融合，共可产生____________种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合），这些融合细胞经过脱分化形成_____________。 ②若想培育出基因型为yyRR的玉米植株，也可直接用基因型为____________（填“yyRr”或“YYrr”）的植株的花粉进行离体培养，得到单倍体植株后再经过____________处理并筛选获得，这种方法叫作______________。 （2）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，请据图回答：①在“番茄—马铃薯”的培育过程中，运用了植物细胞工程中的____________技术，植物体细胞融合完成的标志是__________________。此种育种方式的优点是________。②a、b细胞融合之前，要用_____________处理，得到有活力的___________。 【答案】（1） ①. 聚乙二醇##PEG ②. 6 ③. 愈伤组织 ④. yyRr ⑤. 染色体加倍/或秋水仙素 ⑥. 单倍体育种 （2） ①. 植物体细胞杂交 ②. 杂种细胞再生出细胞壁 ③. 打破生殖隔离，实现远缘杂交 ④. 纤维素酶和果胶酶 ⑤. 原生质体 【解析】 【小问1详解】 ①诱导细胞融合时可用的化学诱导剂是聚乙二醇（PEG）；a基因型为yyRr，产生yR、yr两种配子，b的基因型为YYrr，产生Yr一种配子，故花粉有3种，即yR、yr、Yr，两两融合共可产生6种基因型的融合细胞，即yyRR、yyrr、YYrr、YyRr、Yyrr、yyRr。这些融合的细胞经过诱导脱分化形成愈伤组织。 ②若想培育出基因型为yyRR的玉米植株，也可直接用能产生yR花粉的植株（yyRr），进行花药离体培养获得单倍体幼苗（yR），再经过染色体加倍（秋水仙素处理）并筛选获得（yyRR），故可选用yyRr的植株，这种方法叫做单倍体育种。 【小问2详解】 在“番茄-马铃薯的培育过程中，运用了植物细胞工程中的植物体细胞杂交技术（包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程）；细胞膜融合只是原生质体融合完成；再生细胞壁，才代表杂种细胞正式形成，植物体细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞壁。该育种方式优点：打破生殖隔离（远缘杂交不亲和障碍），实现远缘物种间杂交。a、b均为植物细胞，都有细胞壁，植物细胞壁的主要成分是果胶和纤维素，所以a、b细胞融合之前，要用果胶酶和纤维素酶处理，得到有活力的原生质体。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 哈师大青冈实验中学2025—2026学年度4月份考试高二生物试题 一、单选题（1-10题，每题1分，11-20题，每题2分，共计30分） 1. 某兴趣小组尝试在马铃薯琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。下列操作顺序合理的是（　　） A. 配制培养基→灭菌→倒平板→接种分离→培养 B. 配制培养基→倒平板→灭菌→接种分离→培养 C. 配制培养基→灭菌→接种分离→倒平板→培养 D. 配制培养基→接种分离→倒平板→灭菌→培养 2. 中国饮食文化源远流长，发酵技艺更是先民智慧的结晶。千百年来，果酒、果醋、腐乳和泡菜等传统发酵食品不仅丰富了百姓餐桌，更成为中华饮食文明的重要符号。下列相关叙述正确的是（　　） A. 利用葡萄制作果酒时，需每隔12小时打开瓶盖一次，以排出酵母菌无氧呼吸产生的CO2 B. 在果醋发酵过程中，通过控制发酵温度并持续通入无菌空气，可促进醋酸菌将乙醇直接氧化成乙酸 C. 腐乳制作过程中，毛霉等多种微生物产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 D. 泡菜发酵后期，亚硝酸盐含量先下降后上升，应在发酵早期食用以避免中毒 3. 在探究受多聚联苯（PCBs）污染的土壤修复实验中，研究人员首先获得红球菌、假单胞菌的纯培养物，然后分别设置了单独接种红球菌、单独接种假单胞菌以及混合接种两组菌的实验组，培养15天后测定PCBs残留率与关键降解基因bphA、bphB的表达量，实验结果如表所示。下列叙述错误的是（ ） 实验组 PCBs残留率/% bphA表达量相对值 bphB表达量相对值 单独接种红球菌 42.1 1.00 0.05 单独接种假单胞菌 68.5 0.10 1.00 混合接种红球菌和假单胞菌 18.3 1.85 1.92 A. 红球菌的纯培养物是由一个红球菌繁殖所获得的微生物群体 B. 基因bphA、bphB分别在红球菌、假单胞菌的细胞中高效表达 C. 单独接种时，与红球菌相比，假单胞菌降解PCBs的效率较高 D. 推测红球菌与假单胞菌在降解PCBs的过程中具有协同作用 4. 某科学小组探索长寿花组织培养过程中外植体的消毒条件，实验结果如下表。下列分析错误的是（　　） 次氯酸钠处理时间（min） 8 10 12 酒精处理时间（min） 20 30 40 20 30 40 20 30 40 污染率（%） 25.6 21.1 13.3 22.2 16.7 12.2 20 15.8 8.9 褐化率（%） 0 0 8.9 0 5.6 14.4 7.8 16.7 16.7 注：褐化是指培养材料在组培过程中向培养基中释放褐色物质，并变褐死亡的现象。 A. 消毒处理时间越长，组织培养成功率越高 B. 消毒处理时间越长，外植体的污染率越低 C. 诱导培养外植体脱分化为愈伤组织的过程中一般不需要光照 D. 组织培养过程中提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根 5. 海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是（ ） A. 利用的原理均是细胞的全能性 B. 使用的培养基均需添加葡萄糖和血清 C. 培养时的温度和pH均相同 D. 产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力 6. 下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（ ） A. 卵裂期细胞的体积随分裂次数增加而不断增大 B. 囊胚的滋养层细胞可发育成动物体的任何组织器官 C. 通过转基因、核移植、体外受精等方式获得的胚胎，必须经胚胎移植才能获得后代 D. “试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 7. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显提高。下列相关叙述正确的是（　　） A. 向发酵罐内接种前一般需要对纯化的优良单一菌种进行扩大培养 B. 发酵条件变化会影响微生物的生长繁殖，但不影响微生物的代谢途径 C. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可利用微生物来进行发酵 D. 通过发酵工程可以获得大量的微生物菌体，从菌体中提取单细胞蛋白 8. 诺贝尔生理学奖获得者发现，利用逆转录病毒将0ct4等4个关键基因导入已分化的体细胞中并表达，可使这个细胞成为类似干细胞的诱导多能干细胞（iPS细胞）。下图为该技术在人体细胞中的实验示意图。下列相关叙述不正确的是（ ） A. iPS细胞核移植比胚胎干细胞核移植更容易表现全能性 B. iPS细胞的诱导过程无需破坏胚胎，还可以避免免疫排斥 C. 导入的4个关键基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力 D. ①②③利用iPS获得各种器官组织时应加入分化诱导因子 9. 为拯救濒危物种，科学家进行异种体细胞核移植研究。将牛桑葚胚细胞作为供核细胞，分别移植到羊、水牛和田鼠的去核卵母细胞中，结果发现只有牛—羊和牛—水牛之间的异种重构胚体外培养可以发育到囊胚。下列叙述错误的是（　　） A. 牛—田鼠重构胚不能发育可能是因为牛与田鼠的亲缘关系较远 B. 通常取囊胚期内细胞团细胞对异种重构胚进行DNA分析 C. 异种重构胚可能含有来自供体细胞和受体细胞的两种线粒体 D. 进行胚胎移植前，通常不需要对供体和受体进行免疫检查 10. 紫草宁是从紫草愈伤组织细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁是世界上首例药用植物细胞工程产品。下列关于植物细胞工程的说法，正确的是（ ） A. 植物细胞培养的目的主要是获得植物生长和生存所必需的次生代谢产物 B. 植物组织培养时，应对外植体进行灭菌处理以防止培养基及愈伤组织污染 C. 在培养愈伤组织时加入细胞融合的诱导剂，可直接获得染色体加倍的细胞 D. 叶肉细胞往往带病毒且细胞的全能性较低，故培育脱毒植物适宜选茎尖而不选叶片 11. 活性黑5是一种低毒性、难褪色的含氮染料。现欲利用微生物处理染料废水中的活性黑5，具体操作流程如图：从染料废水堆积池的污泥中采集样液，通过培养基Ⅰ和Ⅱ的培养获得优势菌群，然后采用浓度梯度驯化法，进一步培养获得具备强分解活性黑5能力的假单胞杆菌，并进行基因表达分析。下列相关叙述错误的是（　　） 注：BVU5是一种分解活性黑5的氧化还原酶 A. 培养基Ⅰ从用途上属于选择培养基 B. 假单胞杆菌中，BVU5蛋白分解活性黑5的场所最可能为溶酶体 C. 将细菌从培养基Ⅰ转移到Ⅱ的目的是进一步分离纯化细菌 D. 驯化后的假单胞杆菌可能增强了BVU5基因的转录和翻译 12. 体细胞克隆猴培育过程中，组蛋白甲基化不利于胚胎的发育率和妊娠率。为提高胚胎发育率，科研人员将Kdm4d的mRNA注入了重构胚。具体培育流程如图所示，下列有关叙述正确的是（ ） A. 从母猴卵巢中采集的卵母细胞可以直接作为核移植的受体 B. 使用免疫抑制剂处理代孕母猴才能保证移入的胚胎能在子宫中发育 C. 胚胎分割需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. KDm4d的mRNA翻译产生的蛋白质可能会催化组蛋白的去甲基化 13. 生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一头野驴刚死亡，以下提供的“复生”野驴个体的方法中能够成功的是（ ） A. 将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体 B. 将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体 C. 将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育成新个体 D. 取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体 14. 中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如下图所示。下列分析正确的是（　　） A. 培养卵细胞时需要定期更换培养液，目的是保证无菌、无毒的环境 B. 过程①类似脱分化过程，存在基因的选择性表达 C. 过程②在透明带内进行，此过程不存在细胞分化 D. 过程③胚胎移植前需要对母体进行免疫检查 15. 通过支架培养生成的人工肌肉组织，可用于创伤或手术后的肌肉修复。科研人员利用大鼠骨骼肌细胞生成三维肌束结构的培养流程如下图所示。培养过程中非成肌细胞贴壁速度快(0.5-2小时)，而成肌细胞（目标细胞）贴壁较慢（数小时），三维培养阶段需加入胶原支架使细胞贴附，同时促进细胞三维排列。下列叙述正确的是（ ） A. 用机械的方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理肌肉组织将其分散成单个细胞 B. 原代培养2小时左右可倒掉培养液，然后轻柔收集贴壁细胞用于传代培养 C. 传代培养时通过定期更换培养液、加入抗生素和血清维持无菌、无毒环境 D. 三维培养阶段胶原支架为细胞提供更大附着面积，避免细胞出现接触抑制 16. 花椰菜（2n=18）易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥（2n=16）对黑腐病等多种常见病害具有抗性。科研人员用射线照射处理黑芥叶肉原生质体后与花椰菜根原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株甲、乙、丙，它们均含有花椰菜的全部染色体。下列叙述错误的是（ ） 植株 花椰菜 黑芥 杂合新植株甲 杂合新植株乙 杂合新植株丙 染色体数目 18 16 34 24 58 A. 可以利用是否含有叶绿体作为初步筛选融合原生质体的依据 B. 杂合新植株甲的单倍体的细胞中有2个染色体组，因而可育 C. 杂合新植株丙可能是由多个原生质体经PEG诱导融合而成 D. 获得的杂种细胞需要经过脱分化和再分化才能培育成新植株 17. 我国科学家结合单倍体育种技术成功培育出玉米新品种，部分育种过程如图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①包含脱分化和再分化，不同阶段激素含量及光照条件不同 B. 过程②需用秋水仙素或低温诱导处理单倍体的种子以获得二倍体 C. 过程③可从个体水平上进行筛选，从而获得稳定遗传的优良品种 D. 该培育过程涉及的生物学原理有植物细胞的全能性和染色体变异 18. 人肌红蛋白(Myo)是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗 Myo 的单克隆抗体， 科研人员通过细胞工程技术获得杂交瘤细胞进行动物细胞培养，获取上清液进行抗体阳性检测，检测原理如图所示。以下说法错误的是（ ） A. 将能表达 Myo 基因的细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，用于制备抗 Myo 的单克隆抗体 B. 单克隆抗体的制备解决了血清抗体产量低、纯度低、特异性差的问题 C. 抗体检测过程中，将人肌红蛋白作为抗原固定 D. 根据是否显色来判断是否有抗 Myo 的单克隆抗体产生 （24-25高二下·山东聊城·期中） 19. HER-2蛋白主要在胎儿期表达，成年以后只在极少数组织内低水平表达。由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成的抗体—药物偶联物T-DMI，对HER-2有很强的靶向性，可用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。下列叙述正确的是（ ） A. 给小鼠反复注射HER-2蛋白，以便在血清中获取曲妥珠单抗 B. 用选择培养基可筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞 C. DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键 D. 用灭活的病毒诱导细胞融合时细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布 20. 比考扎霉素可用于治疗细菌性腹泻，该抗生素是由精氨酸合成缺陷型灰色浅灰链霉菌 (属于细菌)产生。为筛选出能产比考扎霉素的菌种，科研工作者对采自土壤的灰色浅灰链霉菌进行诱变与选育，实验的部分流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 含有琼脂的培养基为②③④，含有精氨酸的培养基为④ B. 配制培养基①时应先将pH调至酸性再进行高压蒸汽灭菌 C. 进行原位影印操作时必须先将无菌绒布转印至培养基③，再转印至培养基④ D. 由培养结果推断，应挑取乙菌落进一步鉴定其是否能产生比考扎霉素 二、不定项（错答不得分，漏答得1分，答全得3分，共计15分） 21. 葡萄酒中酒精度过高易引起消费者对健康风险的担忧。为检测不同非酿酒酵母在葡萄酒酿造中降低酒精度的应用潜力，研究人员以本土酵母（Hu）与酿酒酵母（Sc）为材料，检测不同接种方式下酒精度的变化情况，结果如下图所示。下列相关叙述正确的有（　　） A. 果酒制作的过程中酿酒酵母的最适生长温度约为35℃ B. 发酵过程中发酵液pH逐渐上升，可通过检测pH变化了解发酵情况 C. 接种Sc后发酵速率显著加快，说明Sc在酒精发酵过程中起主导作用 D. 根据曲线分析可知Hu能有效降低发酵过程中的酒精含量 22. 除草剂莠去津是一种含氮的有机物，长期使用易对土壤造成污染。研究人员从土壤中筛选莠去津降解菌的过程如下图所示（含过量莠去津的固体培养基不透明）。下列叙述正确的是（　　） A. 从A瓶到C瓶的目的是逐步稀释培养液中的目的菌 B. 选择固体培养基甲中出现的有透明带菌落进行再纯化 C. 图中进行再纯化的接种过程至少需要灼烧6次接种环 D. 整个实验过程中需设置未接种的选择培养基作为空白对照 23. 利用幼嫩的菊花茎段，经过组织培养可以获得完整的菊花幼苗。相关说法正确的是（ ） A. 将茎段菊花换成芽原基能加快形成菊花幼苗的速度 B. 菊花茎段经脱分化可直接形成含有根和芽的胚状体 C. MS培养基中的琼脂可为外植体提供营养物质 D. 蔗糖替代葡萄糖除提供能量外，还能调节细胞的渗透压 24. 第三代试管婴儿俗称PGD/PGS，指在试管婴儿（IVF-ET）的胚胎移植前，取胚胎的遗传物质进行分析，诊断是否有异常，筛选健康胚胎移植。其过程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 采卵的过程中可以给母亲注射性激素，促进卵细胞的生成，使其排出更多成熟的卵子 B. 采集的精子需置于人工配制的肝素溶液中获取能量，与卵细胞膜接触后阻止后续的精子进入透明带 C. 受精过程中精子核膜破裂形成雄原核，卵子排出第二极体形成雌原核，二者融合完成受精作用 D. 胚胎发育过程中，原肠胚进一步扩大会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，称为孵化 25. 首例体细胞克隆顶级种用藏羊“青青”在青海诞生。科研人员利用3只优良欧拉型良种公羊和1只母羊作为供体通过体细胞克隆技术实现了优秀种质的快速复原保存，开启了良种藏羊高效繁育的新篇章。下图是：克隆藏羊“青青”的培育过程，有关叙述正确的是（　　） A. 用胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理欧拉羊的组织后，离心获得①中的供体细胞 B. ②常用显微操作去核，目的是除去MⅡ期的卵母细胞内由纺锤体—染色体—核膜组成的细胞核 C. 将供体细胞注入去核的卵母细胞，用高Ca2+—高pH诱导获得重组细胞 D. ③可用乙醇、蛋白酶合成促进剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 三、非选择题（5个小题，共55分） 26. 结合所学知识，回答下列问题： 图1表示苹果醋的简易制作装置和制作流程。发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图2所示据图回答下列问题： （1）用图1装置酿酒结束后，若要直接转入果醋发酵，改变的环境条件是___________。该过程进行的反应简式是__________。 （2）图2整个发酵过程的中心环节是___________。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH在灭菌___________（填“前”或“后”）调至酸性。如果污染了杂菌，某些杂菌会产生___________将青霉素分解掉。 （3）欲从土壤中分离出能产生纤维素酶的纤维素分解菌，可用加入_________作为唯一碳源制成的选择培养基进行分离。若将样品接种到分离纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是_________，通过观察是否产生________来筛选纤维素分解菌。 （4）对产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了_________法，其可以用来计数的原理为_________。为了避免混淆，本实验纯化菌种时使用的平板需要在培养皿的__________（“皿盖”或“皿底”）做好标记。然后在恒温培养箱中需培养1—2d，每隔24h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果，其目的是___________。 （5）若某次检测时采用图甲所示规格的血细胞计数板进行计数，检测时将发酵液稀释100倍，经过一系列操作，检测四角中方格的酵母菌数量分别为22、26、24、28个，则此时发酵液中酵母菌的种群密度约为___________个/mL。 27. 结合所学知识，回答下列问题： 猕猴桃因果实营养丰富，维生素C含量极高，药食两用，风味特异而被称为“水果之王”。如图是以猕猴桃为原料发酵制作果酒和果醋的过程简图。结合所学知识，回答下列问题： （1）酿制果酒时，一般要先通气的目的是__________。 （2）酒精发酵过程中必须严格控制好__________（答出3点）等发酵条件，使发酵过程处于最佳状态；同时要随时检测培养液中的___________（答出2点）等，以了解进程。 （3）醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖源__________（填“充足”或“不足”）。为鉴定果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、尝、嗅之外，还可以通过检测__________作进一步的鉴定。果酒和果醋发酵中都没有进行严格的消毒灭菌，但杂菌却不能正常生长繁殖，原因是___________。 （4）酿制成功的果酒如果暴露在空气中会逐渐出现酸味，气温高的夏天更易如此，其原因是___________。 28. 结合所学知识，回答下列问题： 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： （1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是__________，过程②选用的骨髓瘤细胞________（选填“能”或“不能”）在HAT培养基（选择培养基）上生长。 （2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行__________和___________，才能筛选出足够量的既能无限增值又能___________的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是__________（答出两点）。 （3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是____________。 （4）杂交瘤细胞在体外培养时与植物组织培养的主要区别是培养基要用________培养基，培养基中除了添加必要的营养物质外还需加入含天然成分的____________；生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是____________。 （5）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是__________，体现的是双特异性单克隆抗体在运载药物方面的用途。 29. 中国科学家率先成功地应用体细胞进行克隆，获得两只克隆猴—“中中”和“华华”。科研人员从供体猴胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。 （1）传代培养时，选择图中______（填“①”或“②”）时期的细胞进行分装培养更合理。图中细胞数目增长进入平台期的原因有_____（答出两点即可）。 （2）科研人员对供体成纤维细胞与受体去核的卵母细胞进行诱导融合，形成重构胚，移入代孕母猴体内。“去核”指的是去除卵母细胞中的________，目前常用的去核方法是_____。 （3）研究发现，对灵长类动物的体细胞来说，单靠核移植本身并不足以使重构胚顺利发育成存活个体。研究表明，表观遗传修饰，尤其是组蛋白乙酰化和甲基化水平，在核移植胚胎发育过程中起着关键作用。科研人员认为提高组蛋白乙酰化水平的同时降低组蛋白甲基化水平能显著提高重构胚的发育率。欲通过实验来验证上述观点，请简要写出实验思路并预期结果。供选择的试剂为：组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、生理盐水。 实验思路：___________。 预期结果：___________。 30. 结合所学知识，回答下列问题： 细胞融合技术有着广泛应用。如图为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题。 （1）若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr的两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将它们的花粉除去细胞壁，然后诱导其融合，再将这些融合细胞培育出玉米新品种。 ①这两个品种的花粉可用化学诱导剂____________诱导融合，共可产生____________种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合），这些融合细胞经过脱分化形成_____________。 ②若想培育出基因型为yyRR的玉米植株，也可直接用基因型为____________（填“yyRr”或“YYrr”）的植株的花粉进行离体培养，得到单倍体植株后再经过____________处理并筛选获得，这种方法叫作______________。 （2）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，请据图回答：①在“番茄—马铃薯”的培育过程中，运用了植物细胞工程中的____________技术，植物体细胞融合完成的标志是__________________。此种育种方式的优点是________。②a、b细胞融合之前，要用_____________处理，得到有活力的___________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $