精品解析：江苏苏州市昆山市花桥高级中学2025 ～ 2026学年高三第二学期期中复习·考前押题卷 生物

2025～2026学年第二学期高二期中复习·考前押题卷 生物 2026.04 一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项符合题意。 1. 油炸臭豆腐是我国一些地方的风味小吃。传统臭豆腐制作时需将豆腐浸入含乳酸菌、芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵。下列叙述错误的是（ ） A. 乳酸菌和芽孢杆菌存在种间竞争关系 B. 豆腐中的蛋白质在微生物作用下形成短肽和氨基酸 C. 微生物发酵产生不同代谢产物使臭豆腐具特殊味道 D. 为防止杂菌污染，陈卤汁需经过灭菌后才能再利用 【答案】D 【解析】 【分析】多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。 【详解】A、卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌存在竞争关系，共同争夺空间和食物，A正确； B、微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，使味道鲜美，B正确。 C、微生物发酵产生了不同的代谢物使得该臭豆腐具有特殊的味道，C正确； D、若对陈卤汁进行灭菌，则会杀死陈卤汁中的微生物，达不到制作臭豆腐的目的，因此利用陈卤汁不需要经过灭菌处理，D错误。 故选D。 2. 消毒和灭菌是生物学实验中的常规操作。下列叙述正确的是（ ） A. 涂布器及实验者的衣物、手等无需进行灭菌，消毒即可 B. 人工配制的培养基，通常在分装灭菌后调节pH C. 在火焰附近敞开皿盖，将培养基倒入培养皿，立即盖上皿盖 D. 实验结束后，对实验室喷洒石炭酸同时配合紫外线照射 【答案】D 【解析】 【分析】微生物实验室的培养的关键是无菌操作，无菌操作主要包括：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。 【详解】A、涂布器需要进行灭菌处理，而实验者的衣物、手等进行消毒即可，A错误； B、人工配制的培养基，应在分装前调节pH，然后再进行灭菌，若在分装灭菌后调节pH，会导致培养基被污染，B错误； C、在火焰附近，应打开皿盖的一条缝隙，将培养基倒入培养皿，然后立即盖上皿盖，而不是敞开皿盖，C错误； D、实验结束后，对实验室喷洒石炭酸可以进行化学消毒，同时配合紫外线照射进行物理消毒，能有效地杀灭实验室中的微生物，D正确。 故选D。 3. 深海具有高压、黑暗等极端环境特征。我国科考船在南海采集到深海冷泉沉积物，从中分离培养出罕见的微生物。科学家分离培养深海微生物过程如图。下列叙述错误的是（ ） A. 步骤Ⅰ培养基添加的DNA可为微生物生长提供碳源和氮源 B. 步骤Ⅱ应将试管在冰水混合物中迅速滚动，模拟冷泉环境 C. 与步骤Ⅰ相比，步骤Ⅱ中的①所用培养基中还需要添加琼脂 D. 步骤Ⅲ从群落、个体和分子水平对微生物种类进行鉴定 【答案】D 【解析】 【分析】微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 【详解】A、DNA 的组成元素有 C、H、O、N、P 等，其中含有的碳元素可作为微生物生长的碳源，含有的氮元素可作为氮源，A正确； B、深海冷泉环境温度低，步骤Ⅱ将试管在冰水混合物中迅速滚动，能够模拟冷泉环境，B正确； C、步骤Ⅰ是液体培养基用于富集培养微生物，步骤Ⅱ中的①要获得单菌落，所用培养基应为固体培养基，固体培养基需要添加琼脂，C正确； D、步骤Ⅲ观察菌落特征是从种群水平对微生物种类进行鉴定，电子显微镜观察是从细胞水平对微生物种类进行鉴定，基因鉴定是从分子水平对微生物种类进行鉴定，并没有从群落水平进行鉴定，D错误。 故选D。 4. 赖氨酸营养缺陷型大肠杆菌在科研领域中具有广泛的应用价值。下图为科研人员利用野生型大肠杆菌诱变、纯化赖氨酸缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，a和b代表菌落。下列叙述错误的是（ ） A. ④是基本培养基，①②③与其成分存在的差异是赖氨酸 B. 影印时应将细菌原位先后转印至③④上，顺序不能颠倒 C. 从③中挑取a菌落进行纯化培养，可获得所需的突变株 D. 长期保存菌种时，可将其与甘油混匀后置于-70℃环境中 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图：图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用影印法将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基、完全培养基；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而赖氨酸缺陷型突变株由于发生基因突变而无法合成赖氨酸只能在完全培养基上生长，据此利用培养基的种类，可以选择出赖氨酸缺陷型突变株。 【详解】A、野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸缺陷型突变株无法合成赖氨酸，只能在完全培养基上生长，根据题意和题图信息分析可知，①②③为完全培养基，要添加赖氨酸，④为基本培养基，不能添加赖氨酸，因此①②③与④成分存在的差异是赖氨酸，A正确； B、在③中生长的a菌落不能在④中生长，说明④中没有添加赖氨酸，为基本培养基，影印时应将细菌原位先后转印至④③上，顺序不能颠倒，B错误； C、a菌落在培养基④中无法生长，在培养基中③可生长，说明a菌落是赖氨酸缺陷型菌落，故经过原位影印及培养后，可从③中挑取a菌落进行纯化培养，可获得所需的突变株，C正确； D、长期保存菌种时，可将其与甘油混匀后置于-70℃环境中，保藏时间一般为2～4年左右，D正确。 故选B。 5. 研究人员筛选出4种能降解木质素的假单胞杆菌，培养结果如图1所示；选出高效菌株进一步探究木质素降解率和木质素添加量之间的关系，结果如图2所示。下列叙述正确的是（ ） A. 将一个未接种的平板与接种后的平板立即倒置，恒温培养 B. 假单胞杆菌能吸收秸秆中的木质素，作为直接能源物质 C. 可选择图1中的c菌落进一步探究其降解木质素的能力 D. 木质素浓度过高可能会抑制细菌生长，导致降解率下降 【答案】D 【解析】 【分析】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 【详解】A、未接种的平板，其主要用于对照，检测培养基是否被污染，接种后的平板需要等菌液干燥再恒温培养，A错误； B、假单胞杆菌可降解木质素，但木质素不是其直接能源物质，细胞生命活动的直接能源物质是ATP，B错误； C、图1中b菌落的直径明显大于其他菌落，说明b菌株的生长速度快或代谢活性强等，在降解木质素方面可能更具优势，应选择b菌落进一步探究其降解木质素的能力，而不是c菌落，C错误； D、从图2可以看出，随着木质素添加量的增加，木质素降解率先上升后下降。当木质素浓度过高时，可能会对细菌的生长环境产生不良影响，如渗透压改变、某些物质积累对细菌产生毒害等，从而抑制细菌生长，导致其降解木质素的能力下降，最终使得降解率降低，D正确。 故选D。 6. 下列关于发酵工程及其应用的叙述，正确的是（ ） A. 通过发酵工程可从微生物细胞中提取单细胞蛋白制成微生物饲料 B. 菌种选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可从自然界筛选出来 C. 通过发酵工程生产的苏云金杆菌可制成微生物农药，防治多种农林虫害 D. 谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，应将pH控制在中性和弱酸性条件下 【答案】C 【解析】 【分析】发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。 【详解】A、单细胞蛋白是指利用发酵工程生产的微生物菌体本身，而不是从微生物细胞中提取出来的，A错误； B、发酵工程的中心环节是发酵过程，而不是菌种选育，B错误； C、苏云金杆菌能产生伴孢晶体和毒素，对多种农林害虫有特异性的毒杀作用。通过发酵工程可以大量生产苏云金杆菌，将其制成微生物农药，用于防治多种农林虫害，这种生物防治方法具有环保等优点，C正确； D、谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，当发酵液pH呈中性和弱碱性时，谷氨酸棒状杆菌会积累谷氨酸；而当pH呈酸性时，谷氨酸棒状杆菌会生成乙酰谷氨酰胺。所以应将pH控制在中性和弱碱性条件下，而不是中性和弱酸性条件，D错误。 故选C。 7. 植物细胞悬浮培养技术在生产中已得到应用。某兴趣小组尝试利用该技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素，设计了以下实验流程和培养装置（如图），请同学们进行评议。下列评议不合理的是（ ） A. 实验流程中应该用果胶酶等处理愈伤组织，制备悬浮细胞 B. 装置中的充气管应置于液面上方，该管可同时作为排气管 C. 装置充气口需要增设无菌滤器，用于防止杂菌污染培养液 D. 细胞培养需要适宜的温度，装置需增设温度监测和控制设备 【答案】B 【解析】 【分析】植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，欲利用愈伤组织制备悬浮细胞，可用纤维素酶和果胶酶进行处理愈伤组织，A正确； B、装置中的充气管应置于液面下方，以利于培养液中的溶氧量的增加，该管不能同时作为排气管，B错误； C、为了防止杂菌污染培养液，装置充气口需要增设无菌滤器，C正确； D、细胞培养时需要保证适宜的温度，因此装置需增设温度监测和控制设备，D正确。 故选B。 8. 葛根素是一种具有药用价值的植物活性成分，传统葛根素的提取依赖葛根块根，产量低且资源消耗大。科研团队利用生物技术，获得了能产生葛根素合成关键酶的酵母菌，下图展示了部分技术路线。相关叙述正确的是（ ） A. 过程①为脱分化过程，利用了植物细胞的全能性 B. 过程②和过程③均以dNTP为原料合成脱氧核苷酸链 C. 过程④通过高Ca2+-高pH处理法将目的基因导入酵母菌 D. 对酵母菌进行鉴定和筛选是发酵工程的中心环节 【答案】B 【解析】 【详解】A、过程①为脱分化，仅使高度分化的植物叶片细胞恢复分裂能力形成愈伤组织，未发育为完整植株，未体现植物细胞的全能性，A错误； B、过程②为逆转录，以RNA为模板合成cDNA，过程③为PCR扩增目的基因，合成子代DNA链，二者合成的产物均为脱氧核苷酸链，原料均为脱氧核苷三磷酸，B正确； C、将目的基因导入酵母菌等微生物细胞时，采用高Ca2+-低pH的处理方法制备感受态细胞，C错误； D、发酵工程的中心环节是发酵过程，D错误。 9. 组蛋白乙酰化水平异常是制约异种体细胞核移植（iSCNT）效率的关键因素，下表为组蛋白去乙酰化酶抑制剂（Sc）对iSCNT胚胎发育效率的影响结果。下列相关叙述正确的是（　　） 组别 克隆胚胎数 卵裂率（%） 4-细胞期率（%） 8-细胞期率（%） 对照组 95 9.47±1.70 6.32±1.07 5.26±0.85 Sc处理组 91 23.08±2.94 18.68±3.25 9.89±1.95 A. 体细胞核移植中的“去核”就是将卵母细胞的细胞核去除 B. 体细胞与去核卵母细胞融合时膜上蛋白质和脂质分子重新排布 C. 提高组蛋白去乙酰化水平能提高胚胎发育效率 D. Sc对iSCNT胚胎发育效率的影响程度随发育进程的推进而增强 【答案】B 【解析】 【详解】A、卵母细胞中的“核”其实是纺锤体-染色体复合物，去核操作其实是去除卵母细胞中的染色体-纺锤体复合物，A错误； B、体细胞与去核卵母细胞融合依赖细胞膜的流动性，融合时膜蛋白和磷脂分子发生重新排布，该过程符合膜的结构特点，B正确； C、由题干可知，组蛋白去乙酰化酶抑制剂（Sc）处理可提高胚胎发育效率，而Sc会抑制去乙酰化反应，即提高组蛋白乙酰化水平，能提高胚胎发育效率，C错误； D、对比表格数据，Sc处理组卵裂率提升13.61%（23.08%-9.47%=13.61%），4-细胞期率提升12.36%（18.68%-6.32%=12.36%），8-细胞期率提升4.63%（9.89%-5.26%=4.63%），提升幅度递减，说明Sc的影响程度随发育进程减弱，D错误。 故选B。 10. 动物细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。相关叙述正确的是（　　） A. 培养动物细胞的第一代（即第一次细胞增殖）称为原代培养 B. 体外诱导小鼠成纤维细胞获得的iPS细胞可用于治疗小鼠的镰状细胞贫血 C. 将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 D. 通常将精子培养在人工配制的获能液中使其获得能量后才能进行体外受精 【答案】B 【解析】 【详解】A、原代培养是动物组织经处理后的初次培养，不是指培养动物细胞的第一代，A错误； B、iPS细胞（诱导多能干细胞）可以定向分化为造血干细胞，再分化为正常红细胞， 可用于治疗小鼠的镰状细胞贫血，B正确； C、融合后有多种融合细胞， 必须经过筛选才能得到杂交瘤细胞，C错误； D、获能液的作用是让精子获得受精能力， 不是获得能量，D错误。 11. 科研人员研究了猪精子经不同处理后，对ICSI（单个精子直接注入卵母细胞完成受精的技术）胚胎早期发育的影响，结果如图。下列相关叙述错误的是（　　） A. 使用新鲜断尾精子，会降低ICSI胚胎的卵裂率 B. 使用新鲜不断尾精子，无法显著提高ICSI胚胎的囊胚发育率 C. ICSI可用于治疗少精、弱精导致的雄性不育，助力濒危动物繁衍 D. ICSI可使精子绕过透明带和卵细胞膜的屏障，利于形成优质胚胎 【答案】D 【解析】 【详解】A、从图中黑色柱（卵裂率）可以看出： 新鲜不断尾精子、冷冻断尾和冷冻不断尾的卵裂率均大于新鲜断尾精子的卵裂率，说明新鲜断尾精子会降低卵裂率，A正确； B、从白色柱（囊胚率）可以看出： 四组的囊胚率都在10% 左右，差异极小，B正确； C、ICSI是直接将单个精子注入卵母细胞，不需要精子自行完成顶体反应、穿越透明带等过程，因此即使是少精、弱精的精子也能完成受精，可用于治疗雄性不育，也能用于濒危动物的人工繁育，C正确； D、ICSI确实是人工将精子直接注入卵母细胞，绕过了透明带和卵细胞膜的自然屏障； 但从图中数据可知，不同处理的精子ICSI后，囊胚率都仅约10%，说明 ICSI并不利于形成优质胚胎，D错误。 12. 澳洲美利奴细毛羊的毛质好、产量高。我国育种工作者利用胚胎移植技术以小尾寒羊为胚胎受体，快速繁殖澳洲美利奴细毛羊。相关叙述错误的是（　　） A. 通过注射促性腺激素实现澳洲美利奴细毛羊的超数排卵 B. 在澳洲美利奴细毛羊母羊发情期，多次人工授精可提高受精率 C. 对小尾寒羊同期发情处理可实现批次化与集中化管理 D. 这种快速繁殖技术产生的小羊能保持母本性状，属于无性生殖 【答案】D 【解析】 【详解】A、促性腺激素可促进供体（澳洲美利奴细毛羊）卵巢排卵，实现超数排卵以获取更多卵母细胞，A正确； B、胚胎移植中，澳洲美利奴细毛羊是供体母羊，在发情期多次授精可以增加精子与卵子结合的机会，从而提高受精成功率，B正确； C、对受体小尾寒羊进行同期发情处理，使其生理状态与供体同步，便于集中移植胚胎，实现批次化管理，C正确； D、该技术通过有性生殖（精卵结合）形成受精卵，再移植至受体子宫，后代遗传物质来自双亲，属于有性生殖。虽性状与母本相似，但本质并非无性生殖，D错误； 故选D。 13. 关于基因工程的工具，下列叙述正确的是（ ） A. 限制酶具有特异性，不同限制酶识别的核苷酸序列都不同 B. TaqDNA聚合酶的浓度过低会引起非特异性扩增产物量增加 C. E．coli DNA连接酶只能连DNA片段互补的黏性末端，而不能连平末端 D. 为使目的基因准确插入，可将天然质粒上重复的限制酶识别位点删除 【答案】D 【解析】 【分析】1、基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：根据酶的来源不同分为两类：E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4 DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（3）运载体：常用的运载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等。 2、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因）；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。 【详解】A、限制酶具有特异性，不同的限制酶识别的核苷酸序列和切割位点一般不同，但也存在识别序列相同的限制酶，如不同的限制酶可能都识别相同的回文序列，A错误； B、Taq DNA聚合酶是PCR技术中常用的DNA聚合酶。在PCR反应中，引物的浓度过低会引起非特异性扩增产物量增加，而不是Taq DNA聚合酶的浓度过低。Taq DNA聚合酶浓度过低主要会影响扩增效率等，而不是导致非特异性扩增产物量增加，B错误； C、E.coli DNA连接酶能连接DNA片段互补的黏性末端，也能连接平末端，只是对于平末端连接效率极低，C错误； D、在质粒上引入含有多种限制酶切割位点的多克隆位点，以便外源基因的重组。一 般还要删除重复的限制酶切割位点，使环状的质粒经限制酶处理后只在一处断裂,从而保证外源基因的准确插入，D正确。 故选D。 14. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A. 构建表达载体时需要在目的基因前加上起始密码子 B. 基因工程在分子水平上进行操作，属于基因重组 C. 标记基因中不能有限制酶的识别位点以防止其被破坏而失去作用 D. 导入人胰岛素基因的大肠杆菌可直接生产出有活性的人胰岛素 【答案】B 【解析】 【详解】A、构建基因表达载体时，需要在目的基因前加入的是启动子，是RNA聚合酶识别和结合、启动转录的序列；起始密码子位于mRNA上，A错误； B、基因工程的操作水平为DNA分子水平，原理是定向基因重组，能够定向改造生物的遗传性状，B正确； C、标记基因中也有限制酶的识别位点，但不能用该限制酶切割质粒，以防止其被破坏而失去作用，C错误； D、导入人胰岛素基因的大肠杆菌，因没有内质网和高尔基体，不能对胰岛素进行加工，所以不能直接生产出有活性的人胰岛素，D错误。 二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选、或不答的得0分。 15. 某兴趣小组进行实验探究新鲜牛奶的合适消毒温度。下列相关实验操作合理的有（ ） A. 将配置好的牛肉膏蛋白胨培养基置于121℃、100kPa条件下处理15～30min B. 等量新鲜牛奶分别置于50℃、60℃、70℃、80℃恒温水浴锅中处理30min C. 将处理后的牛奶进行梯度稀释后，接种于平板上置于37℃下培养24h D. 统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度即为最适消毒温度 【答案】AC 【解析】 【分析】1、高压蒸汽灭菌的原理：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在100kPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 2、巴氏消毒指的是在63~65℃消毒30min或72~76℃处理 15 s或80~85℃处理10~15s；巴氏消毒既能杀死生牛（羊）乳中的微生物，还不会破坏牛（羊）乳中的营养成分。 【详解】A、配制牛肉膏蛋白胨培养基需要采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，即在121℃、100kPa条件下处理15～30min，A正确； B、新鲜的牛奶应该采用巴氏消毒法进行消毒，将等量的新鲜牛奶分别置于50℃、60℃、70℃、80℃、90℃恒温水浴锅中处理15s，可对新鲜牛奶合适的消毒温度进行探究，B错误； C、对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在37℃下培养24h，C正确； D、由于温度过高会影响蛋白质的结构，进而破坏牛奶中的营养成分，所以菌落数最少的组对应的温度不一定是最适的消毒温度，D错误。 故选AC。 16. 花高同学为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了相关实验。下列叙述正确的有（ ） A. 能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长的微生物都能合成脲酶 B. 土壤样液先在锥形瓶内进行富集培养，再等比稀释后涂布计数 C. 甲组中a培养基上的菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的 D. 应以乙组计数，5g土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×109个 【答案】CD 【解析】 【详解】A、本实验是探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，因此图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，但在此培养基中能生长的微生物不一定都能合成脲酶，固氮菌也能在该培养基上生存，A错误； B、土壤样液先溶解在锥形瓶无菌水中，未进行富集培养，B错误； C、甲组中a培养基上的菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的，菌液未分散开，C正确； D、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30 - 300的平板进行计数，乙组中三个平板的菌落数分别为275、285、280，均在30 - 300之间，应以乙组计数。 计算5g土壤中含分解尿素菌的估算数目时，应根据公式：每克样品中的菌株数 = （C÷V）×M（其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积，M代表稀释倍数）。5g该土壤含分解尿素的细菌数是（275+285+280）÷3÷0.1×105×5=1.4×109，D正确。 17. 以新鲜洋葱为材料进行“DNA粗提取与鉴定”实验时，所用研磨液的成分主要有Tris（缓冲作用）、SDS（去污剂，可使蛋白质线性化）、EDTA（蛋白质变性剂）、NaCl等。下列说法正确的是（ ） A. Tris可维持研磨液的pH，防止DNA被破坏 B. SDS可破坏细胞膜的结构，有利于核物质的释放 C. EDTA可抑制DNA酶的活性，防止研磨过程中DNA被水解 D. 研磨、过滤后取沉淀物进行下一步提纯操作 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、Tris是缓冲剂，可调节溶液中的pH，防止DNA被破坏，A正确； B、SDS是蛋白质变性剂，它能够破坏细胞膜的结构，使得细胞更容易破裂，从而有利于核物质（包含DNA）的释放，B正确； C、EDTA是蛋白质变性剂，DNA酶本质是蛋白质，EDTA使DNA酶变性失活，进而抑制DNA酶的活性，防止研磨过程中DNA被DNA酶水解，C正确； D、在DNA粗提取与鉴定实验中，研磨、过滤后，DNA溶解在滤液中，应取滤液进行下一步提纯操作，而不是沉淀物，D错误。 故选ABC。 18. 蓝莓产生的酚类化合物具有抗衰老、抗癌等功效。科研人员研究不同浓度的2，4-D对蓝莓茎段脱分化形成愈伤组织及产酚类化合物的影响，结果如下图。相关叙述错误的是（　　） A. 茎段培养前可用70%酒精和5%次氯酸钠消毒 B. 实验过程中各实验组细胞分裂素与2，4-D的比值应相等 C. 2，4-D对愈伤组织产酚的影响表现为低浓度促进、高浓度抑制 D. 根据实验结果，建议添加0.7mg·L-1的2，4-D对茎段进行诱导 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、植物组织培养中，外植体（如茎段）需严格消毒以避免杂菌污染。70%酒精可快速去除外植体表面杂质并初步消毒，5%次氯酸钠能进一步杀灭残留微生物，是外植体消毒的常规组合，A正确； B、本实验自变量是2，4-D浓度，其他影响实验结果的变量（如细胞分裂素）属于无关变量。实验设计需遵循“单一变量原则”，即无关变量需保持一致，否则无法确定实验结果是由自变量（2，4-D浓度）引起的。因此各组细胞分裂素相等，随2，4-D浓度增大，比值逐渐发生变化，B错误； C、图中经2，4-D处理后，总酚含量均低于对照组，因此2，4-D对愈伤组织产酚的影响表现为抑制，C错误； D、实验需同时考虑“愈伤组织诱导率”和“总酚含量”两个指标，折线图显示，2，4-D浓度大于0.3mg·L-1时，诱导率已维持在较高水平且不再变化；总酚含量柱状图显示，2，4-D处理后，总酚含量均低于对照组。 故建议添加0.3mg·L-1的2，4-D对茎段进行诱导，此时愈伤组织诱导率和总酚含量均较高，D错误。 三、非选择题：共5题，共60分。 19. 我国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，发酵生产一种新型可降解材料PHA（功能与塑料相似），期望提高甘蔗的整体利用价值。请回答下列问题： （1）为得到对蔗糖的耐受能力强和利用效率高的菌株H，可在液体培养基中将蔗糖作为______，并不断提高其浓度，经多次传代培养获得目标菌株。培养过程中定期取样并用______的方法对活菌进行接种并计数，评估菌株增殖状况。 （2）发酵工程中获得纯净发酵产物的关键是防止杂菌污染，常采用______对培养液进行灭菌。菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，能在未灭菌的开放式发酵系统（如图1）中正常持续发酵60d以上。该系统可不灭菌的原因有_______。生活中嗜盐菌、嗜热菌也常用于生产_______。 （3）在适宜温度、pH等条件下进行扩大培养时，发现菌株H细胞增殖及PHA产量均未达到预期，且产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中______可能是高密度培养的限制因素。为解决该问题，研究人员尝试将透明颤菌血红蛋白基因（vgb）转入嗜盐单胞菌。 ①图2是人工合成的vgb基因，Pvgb是vgb的启动子，其作用是________。 ②构建基因表达载体时，用DNA连接酶可作用于图3中的______（填“A”或“B”或“A和B”），vgb基因能够接入载体是因为其与载体含有_______。 （4）甘蔗榨糖后的甘蔗渣含有大量纤维素。为高效降解甘蔗渣废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行甘蔗渣降解实验，结果如下表。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株______，理由是______。 菌株 甘蔗渣总重（g） 甘蔗渣残重（g） 蔗渣失重（%） 纤维素降解率（%） 甲 2.00 151 24.50 16.14 乙 2.00 1.53 23.50 14.92 丙 2.00 1.42 29.00 23.32 【答案】（1） ①. （唯一）碳源       ②. 稀释涂布平板 （2） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 盐浓度为 60g/L的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡；pH为10的条件下，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制  ③. 耐高温、耐盐碱的酶 （3） ①. 溶氧量 ②. 能被RNA聚合酶识别以驱动基因转录， ③. B  ④. 相同的限制酶切割产生相同的黏性末端 （4） ①. 丙 ②. 接种丙菌种的纤维素降解率最高  【解析】 【小问1详解】 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基，为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为唯一碳源，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株；培养过程中定期取样并对活菌进行接种并计数，常用稀释涂布平板法。 【小问2详解】 发酵工程中获得纯净发酵产物的关键是防止杂菌污染，常采用高压蒸汽灭菌法对培养液进行灭菌。这种方法可以在高温高压下彻底杀灭培养液中的各种微生物，包括芽孢和孢子；由题干信息可知，菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，因此当培养基盐浓度为60g/L，pH为10时，菌株H可正常持续发酵60d以上，而盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡，且pH为10的条件下，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制，故该系统不需要灭菌。由于生活中嗜盐菌、嗜热菌耐盐碱、耐高温，因此嗜盐菌、嗜热菌也常用于生产耐高温、耐盐碱的酶。 【小问3详解】 研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，这说明发酵条件中氧气不足，使菌种进行无氧呼吸产生了乙醇，据此推测溶氧量是限制高密度培养的重要因素。①启动子Pvgb能被RNA聚合酶识别以驱动基因转录，在DNA分子中，转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，根据碱基互补配对原则，新合成的RNA链与模板链反向平行，所以转录的模板链的5＇端位于N端。3'端为-OH端，5'端为磷酸基团端，因此DNA连接酶作用的底物为图3中的B；由于相同的限制酶切割产生相同的黏性末端，因此vgb基因能够接入载体。 【小问4详解】 分析图表可知：在相同条件下，丙菌株纤维素降解率最高，秸秆失重最多，说明其被分解的最多，即丙菌株纤维素分解菌纤维素酶的活力最高。 20. HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）制备抗HER2-ADC时，需要用______对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。 （2）过程①的原理是______，跟植物体细胞杂交相比，动物细胞特有的融合方法是______；动物体细胞核移植技术中激活重构胚的方法是_______。 （3）过程②所用的HAT培养基从用途上看属于______培养基，能在其上生长的细胞特点为_______。 （4）经过程②筛选的细胞还需进行过程③______和______，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （5）过程④合成的抗HER2-ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，这依赖于_______原理。 （6）为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。结果如图2所示： ①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200mm³时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射______，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。 ②实验结果表明________。 【答案】（1）HER2      （2） ①. 细胞膜具有一定的流动性  ②. 灭活病毒诱导融合法 ③. 电刺激法 （3） ①. 选择  ②. 既能产生抗体，又能大量增殖  （4） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测 （5）抗原—抗体特异性结合  （6） ①. 等剂量的磷酸缓冲液     ②. 抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好      【解析】 【小问1详解】 制备单克隆抗体时，需要用对应的抗原（HER2）免疫小鼠，才能获得能产生相应抗体的B淋巴细胞。 【小问2详解】 过程①是细胞的融合，细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性；与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合特有的诱导方法是用灭活病毒诱导。动物体细胞核移植技术中激活重构胚的方法是电刺激法。 【小问3详解】 HAT培养基的作用是筛选出杂交瘤细胞，从用途上划分属于选择培养基；未融合的亲本细胞、同种融合细胞都不能存活，只有B细胞和骨髓瘤融合的杂交瘤细胞能存活，杂交瘤细胞能无限增殖，又能产生抗体。 【小问4详解】 第一次筛选得到杂交瘤细胞后，还需要经过克隆化培养和抗体检测，最终筛选得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 【小问5详解】 抗HER2-ADC可依靠抗原抗体特异性结合，将药物定向递送到HER2过度表达的癌细胞处，减少对正常细胞的杀伤，从而降低药物副作用。 【小问6详解】 ①实验的空白对照组遵循单一变量原则，需要注射等量的溶剂，即磷酸缓冲液。②根据实验结果可知，抗HER2-ADC组裸鼠的肿瘤体积最小，且比初始肿瘤体积小，说明抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好。 21. 我国中科院的研究团队利用成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如下图所示，请分析回答： （1）体外培养动物细胞时，首先应保证其处于________________的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制的气体条件是__________。 （2）要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，此卵母细胞应在体外培养到______期，在对卵母细胞进行去核时，常采用____________（答出1点即可）等方法处理。得到的重构胚通常需要发育到_________阶段才能进行胚胎移植。 （3）可利用______的方法对乙进行处理，得到多只孤雄小鼠；从遗传物质角度分析，这些孤雄小鼠________________，因而用于药物对照实验能够更准确地评估药效。 （4）ahESC与精子和去核卵母细胞融合后，不考虑致死情况，得到的融合细胞的性染色体组成可能是_____________________。 （5）据图分析只依赖雄性小鼠______（填“能”或“不能”）得到孤雄小鼠，请写出两个理由支持你的判断。理由1：____________；理由2：______________。 【答案】（1） ①. 无菌无毒 ②. 95%的空气和5%的CO2 （2） ①. MⅡ ②. 显微操作/梯度离心/紫外线短时间照射/化学物质处理 ③. 囊胚或桑葚胚 （3） ①. 胚胎分割 ②. 都含有相同遗传物质，可以排除由基因的差异造成的个体差异 （4）XX、XY、YY （5） ①. 不能 ②. 需要将ahESC和另一个精子一起注入到一个去核卵细胞中 ③. 重构胚必须移植到雌性小鼠的体内才能发育为个体 【解析】 【小问1详解】 体外培养动物细胞时，为了避免杂菌污染，首先应保证其处于无菌无毒的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制的气体条件是95%的空气和5%的CO2，其中二氧化碳的作用是维持培养液的pH。 【小问2详解】 核移植时，卵母细胞应在体外培养到MⅡ中期，可通过显微操作/梯度离心/紫外线短时间照射/化学物质处理以去除卵母细胞的细胞核。重构胚通常需要发育到囊胚或桑葚胚阶段才能进行胚胎移植。 【小问3详解】 要获得多只孤雄小鼠，可利用胚胎分割技术对乙（重构胚）进行处理，将一个胚胎分割成多个胚胎，再经胚胎移植获得同卵多仔。从遗传物质角度分析，这些孤雄小鼠都来自同一个重构胚的分割，都含有相同的遗传物质，可以排除由基因的差异造成的个体差异，因此在药物对照实验中能更准确地评估药效。 【小问4详解】 ahESC细胞中的性染色体组成为X或Y，而精子中的性染色体组成也是X或Y，精子与去核卵母细胞融合后再与ahESC细胞融合获得孤雄小鼠，则其性染色体可能是XX、XY或YY。 【小问5详解】 结合图示可知，只依赖雄性小鼠“不能”得到孤雄小鼠，这是因为要获得孤雄小鼠需要将ahESC和另一个精子一起注入到一个去核卵细胞中，而卵细胞来自雌性小鼠，另外获得的重构胚必须移植到雌性小鼠的体内才能发育为个体，可见离开雌性个体不能获得孤雄小鼠。 22. 幽门螺杆菌常寄生在胃黏膜组织中，感染后主要引起慢性胃炎和消化性溃疡等疾病，与胃癌、胃黏膜相关淋巴组织、淋巴瘤等疾病有密切的关系，被世界卫生组织（WHO）列为第一类生物致癌因子。 （1）幽门螺杆菌的遗传物质集中分布的区域称为______。下图4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基（琼脂含量 3.5g/L）中的生长状态，其中②号试管代表幽门螺杆菌的生长状态，由图判断，该菌在______条件下不能生长。 （2）日常饮食习惯中的不分餐也不使用公筷很可能会导致幽门螺旋杆菌的交叉传播。为了验证这一假说，有人提取某胃炎患者的家庭剩菜100g，加入无菌水稀释至1000ml。取0.1ml上述稀释液分别接种到3个适宜的培养基中置于适宜的条件下进行培养，3个平板上胃幽门螺旋杆菌菌落数介于30~300之间且相差不大，求得平均值为N个。在本实验中，胃幽门螺杆菌接种的方法是______。由实验的结果可知，每克剩菜中胃幽门螺杆菌数量为______个。 （3）某研究团队发现一个胃癌家庭，某健康夫妇甲和乙，生育的子女丙和丁均患胃癌。现对该家庭成员某抑癌基因进行基因检测，部分结果如下表： 个体 某抑癌基因碱基序列片段检测结果 甲 5'-TACGGACTT-3' 乙 5′-TACGGACTT-3' 丙 5′-TACGTACTT-3′ 丁 5'-TACGGACTT-3′ 从该抑癌基因的角度分析丙个体患胃癌的原因是______。该抑癌基因表达的蛋白质的作用有______。从其他基因的角度分析丁患胃癌的原因可能是______。丙患者体内的该基因能否遗传给下一代，为什么?_______。 （4）某些肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞表面的PD-1结合能抑制细胞毒性T细胞的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。某兴趣小组基于现有抗体—药物偶联物的思路提出了两种药物设计方案。方案一：将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合在一起。方案二：将化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起。你认为方案______（填“一”或“二”）可行，理由是______。 【答案】（1） ①. 拟核 ②. 氧气浓度过高或过低 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 100N （3） ①. 基因突变 ②. 抑制细胞的生长和增殖，或者促进细胞凋亡 ③. 原癌基因发生突变 ④. 丙个体的该基因突变发生在体细胞中，不会通过有性生殖传给后代 （4） ①. 一 ②. 方案一的偶联物既可阻断PD-1与PD-L1结合，恢复细胞毒性T细胞的活性，又使化疗药物靶向肿瘤细胞 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 幽门螺杆菌是原核生物，原核生物没有以核膜为界限的细胞核，其遗传物质集中分布的区域称为拟核。观察4支试管中微生物的生长状态，②号试管代表幽门螺杆菌的生长状态，对比可知该菌在氧气浓度过高或过低条件下不能生长。 【小问2详解】 根据题意分析，该接种方法中先对提取物进行了稀释，后接种到三个培养基的方法，说明该接种方法为稀释涂布平板法。三个平板的菌落数都符合计数要求，且平均值为N，则每克剩菜中胃幽门螺杆菌数量=N÷0.1x1000÷100=100N个。 【小问3详解】 对比甲、乙（正常）和丙的抑癌基因碱基序列，丙的碱基序列发生了改变，即发生了基因突变，这可能是丙个体患胃癌的原因。抑癌基因表达的蛋白质的作用有抑制细胞的生长和增殖，或者促进细胞凋亡。从其他基因角度分析，丁患胃癌的原因可能是原癌基因发生突变。丙患者体内的该基因不能遗传给下一代，因为丙个体的该基因突变发生在体细胞中，不会通过有性生殖传给后代。 【小问4详解】 某肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞表面的PD-1结合能抑制细胞毒性T细胞的免疫活性，故应该将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合在一起，即方案一的偶联物既可阻断PD-1与PD-L1结合，恢复细胞毒性T细胞的活性，又使化疗药物靶向肿瘤细胞。 23. 科研团队通过转基因获得了一种大肠杆菌工程菌，成为监测残留在生物组织或环境中的四环素水平的“报警器”，其监测原理如图1所示，天然大肠杆菌不具备图1中所示基因。 （1）在上述研究中，需导入天然大肠杆菌的目的基因有______。（选填序号） ①四环素合成相关基因 ②GFP基因 ③TetR基因 ④RNA聚合酶基因 （2）基因工程中最核心的步骤是______，其目的是______，需要的工具酶有______。 （3）据图1，当环境中不含四环素时，该大肠杆菌工程菌______（选填“能发出”“不发出”）荧光；环境中四环素水平越高，该种大肠杆菌工程菌的荧光______（选填“增强”“减弱”“不变”）。 （4）图2是2个DNA片段、质粒及其上的限制性内切核酸酶的识别序列的分布情况；其中质粒上的Ampr代表青霉素抗性基因。表为相关限制性内切核酸酶的识别序列与切割位点。 限制酶 EcoRⅠ XbaⅠ SpeⅠ BamHⅠ 识别序列及切割位点 5’…G↓AATC C…3’ 3’…C TTAA↑…5’ 5’…T↓CTAG A…3’ 3’…A GATC↑T…5’ 5’…A↓VTAG T…3’ 3’…T GATC↑A…5’ 5’…G↓GATC C…3’ 3’…C CTAG↑G…5’ 则，BamHI酶切后产生的黏性末端为______。若想要拼接DNA片段1和DNA片段2，结合图2和上表中信息，对DNA片段1应使用______酶切，对DNA片段2应使用______酶切，拼接后拼接点的碱基序列为______。（5’向3’方向） （5）研究人员设计了一个同时含DNA片段1和2的重组质粒的拼接方案，结合相关信息，最终建构成功的重组质粒示意图最合理的是_______。 A. B. C. D. 【答案】（1）②③ （2） ①. 基因表达载体的构建  ②. 使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传，使目的基因能够表达和发挥作用  ③. 限制酶和DNA连接酶 （3） ①. 不发出 ②. 增强      （4） ①. GATC ②. XbaⅠ    ③. SpeⅠ ④. 5'-TCTAGT-3'    （5）D 【解析】 【小问1详解】 据图分析可知，启动子1可与RNA聚合酶结合，促进TetR基因表达形成TetR蛋白，TetR蛋白抑制启动子2与RNA聚合酶的结合，抑制GFP（绿色荧光蛋白）基因表达形成绿色荧光蛋白。四环素可以抑制TetR蛋白的作用，因此当环境中没有四环素时，GFP（绿色荧光蛋白）基因不表达；当环境中有四环素时，四环素能够解除TetR蛋白对启动子2的抑制作用，最终使菌体发出绿色荧光。因此可以通过检测荧光强弱来判定环境中的四环素浓度，因此需导入天然大肠杆菌的目的基因有GFP基因和TetR基因，②③正确。故选②③。 【小问2详解】 基因工程中最核心的步骤是基因表达载体的构建，构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。构建基因表达载体时需要用限制酶切出黏性末端，然后再用DNA连接酶连接形成重组DNA。 【小问3详解】 据图1可知，当环境中不含四环素时，该大肠杆菌工程菌TetR基因表达的TetR蛋白会抑制启动子2与RNA聚合酶的结合，抑制GFP（绿色荧光蛋白）基因的表达形成绿色荧光蛋白，因此不发出荧光。当环境中没有四环素时，由于tetR基因的表达产物tetR蛋白对启动子2的抑制作用，使得GFP基因不能表达出绿色荧光蛋白（GFP蛋白）而不发光，当环境中存在四环素时，可以解除这种抑制作用，绿色荧光蛋白得以表达并发光，四环素水平越高，表达的GFP蛋白越多，荧光越强。 【小问4详解】 据表可知限制酶BamHⅠ可识别并切割，且产生的黏性末端为-GATC-；据图2分析可知，DNA片段1两端的限制酶识别序列分别是XbaⅠ和EcoRⅠ，而DNA片段2两端的限制酶识别序列是SpeⅠ和BamHⅠ，若要让两个DNA片段连接在一起，需要经酶切后获得相同的黏性末端。据表格分析，XbaⅠ和SpeⅠ酶切能获得相同的黏性末端，因此DNA片段1用XbaⅠ酶切，DNA片段2用SpeⅠ酶切，然后在用DNA连接酶将两个DNA片段连接在一起，根据两种酶的识别序列可知在特定工具酶作用下能成功拼接的位点处碱基序列为5'-TCTAGT-3'。 【小问5详解】 根据（4）分析可知，DNA片段1用XbaⅠ酶切，DNA片段2用SpeⅠ酶切，然后再用DNA连接酶将两个DNA片段连接在一起，启动子1和启动子2是反向连接的，如图C、D所示，两个片段经连接后的序列既不能被SpeⅠ酶切，也不能被XbaⅠ酶切，综上所述，ABC错误，D正确。 故选D。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025～2026学年第二学期高二期中复习·考前押题卷 生物 2026.04 一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项符合题意。 1. 油炸臭豆腐是我国一些地方的风味小吃。传统臭豆腐制作时需将豆腐浸入含乳酸菌、芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵。下列叙述错误的是（ ） A. 乳酸菌和芽孢杆菌存在种间竞争关系 B. 豆腐中的蛋白质在微生物作用下形成短肽和氨基酸 C. 微生物发酵产生不同代谢产物使臭豆腐具特殊味道 D. 为防止杂菌污染，陈卤汁需经过灭菌后才能再利用 2. 消毒和灭菌是生物学实验中的常规操作。下列叙述正确的是（ ） A. 涂布器及实验者的衣物、手等无需进行灭菌，消毒即可 B. 人工配制的培养基，通常在分装灭菌后调节pH C. 在火焰附近敞开皿盖，将培养基倒入培养皿，立即盖上皿盖 D. 实验结束后，对实验室喷洒石炭酸同时配合紫外线照射 3. 深海具有高压、黑暗等极端环境特征。我国科考船在南海采集到深海冷泉沉积物，从中分离培养出罕见的微生物。科学家分离培养深海微生物过程如图。下列叙述错误的是（ ） A. 步骤Ⅰ培养基添加的DNA可为微生物生长提供碳源和氮源 B. 步骤Ⅱ应将试管在冰水混合物中迅速滚动，模拟冷泉环境 C. 与步骤Ⅰ相比，步骤Ⅱ中的①所用培养基中还需要添加琼脂 D. 步骤Ⅲ从群落、个体和分子水平对微生物种类进行鉴定 4. 赖氨酸营养缺陷型大肠杆菌在科研领域中具有广泛的应用价值。下图为科研人员利用野生型大肠杆菌诱变、纯化赖氨酸缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，a和b代表菌落。下列叙述错误的是（ ） A. ④是基本培养基，①②③与其成分存在的差异是赖氨酸 B. 影印时应将细菌原位先后转印至③④上，顺序不能颠倒 C. 从③中挑取a菌落进行纯化培养，可获得所需的突变株 D. 长期保存菌种时，可将其与甘油混匀后置于-70℃环境中 5. 研究人员筛选出4种能降解木质素的假单胞杆菌，培养结果如图1所示；选出高效菌株进一步探究木质素降解率和木质素添加量之间的关系，结果如图2所示。下列叙述正确的是（ ） A. 将一个未接种的平板与接种后的平板立即倒置，恒温培养 B. 假单胞杆菌能吸收秸秆中的木质素，作为直接能源物质 C. 可选择图1中的c菌落进一步探究其降解木质素的能力 D. 木质素浓度过高可能会抑制细菌生长，导致降解率下降 6. 下列关于发酵工程及其应用的叙述，正确的是（ ） A. 通过发酵工程可从微生物细胞中提取单细胞蛋白制成微生物饲料 B. 菌种选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可从自然界筛选出来 C. 通过发酵工程生产的苏云金杆菌可制成微生物农药，防治多种农林虫害 D. 谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，应将pH控制在中性和弱酸性条件下 7. 植物细胞悬浮培养技术在生产中已得到应用。某兴趣小组尝试利用该技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素，设计了以下实验流程和培养装置（如图），请同学们进行评议。下列评议不合理的是（ ） A. 实验流程中应该用果胶酶等处理愈伤组织，制备悬浮细胞 B. 装置中的充气管应置于液面上方，该管可同时作为排气管 C. 装置充气口需要增设无菌滤器，用于防止杂菌污染培养液 D. 细胞培养需要适宜的温度，装置需增设温度监测和控制设备 8. 葛根素是一种具有药用价值的植物活性成分，传统葛根素的提取依赖葛根块根，产量低且资源消耗大。科研团队利用生物技术，获得了能产生葛根素合成关键酶的酵母菌，下图展示了部分技术路线。相关叙述正确的是（ ） A. 过程①为脱分化过程，利用了植物细胞的全能性 B. 过程②和过程③均以dNTP为原料合成脱氧核苷酸链 C. 过程④通过高Ca2+-高pH处理法将目的基因导入酵母菌 D. 对酵母菌进行鉴定和筛选是发酵工程的中心环节 9. 组蛋白乙酰化水平异常是制约异种体细胞核移植（iSCNT）效率的关键因素，下表为组蛋白去乙酰化酶抑制剂（Sc）对iSCNT胚胎发育效率的影响结果。下列相关叙述正确的是（　　） 组别 克隆胚胎数 卵裂率（%） 4-细胞期率（%） 8-细胞期率（%） 对照组 95 9.47±1.70 6.32±1.07 5.26±0.85 Sc处理组 91 23.08±2.94 18.68±3.25 9.89±1.95 A. 体细胞核移植中的“去核”就是将卵母细胞的细胞核去除 B. 体细胞与去核卵母细胞融合时膜上蛋白质和脂质分子重新排布 C. 提高组蛋白去乙酰化水平能提高胚胎发育效率 D. Sc对iSCNT胚胎发育效率的影响程度随发育进程的推进而增强 10. 动物细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。相关叙述正确的是（　　） A. 培养动物细胞的第一代（即第一次细胞增殖）称为原代培养 B. 体外诱导小鼠成纤维细胞获得的iPS细胞可用于治疗小鼠的镰状细胞贫血 C. 将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 D. 通常将精子培养在人工配制的获能液中使其获得能量后才能进行体外受精 11. 科研人员研究了猪精子经不同处理后，对ICSI（单个精子直接注入卵母细胞完成受精的技术）胚胎早期发育的影响，结果如图。下列相关叙述错误的是（　　） A. 使用新鲜断尾精子，会降低ICSI胚胎的卵裂率 B. 使用新鲜不断尾精子，无法显著提高ICSI胚胎的囊胚发育率 C. ICSI可用于治疗少精、弱精导致的雄性不育，助力濒危动物繁衍 D. ICSI可使精子绕过透明带和卵细胞膜的屏障，利于形成优质胚胎 12. 澳洲美利奴细毛羊的毛质好、产量高。我国育种工作者利用胚胎移植技术以小尾寒羊为胚胎受体，快速繁殖澳洲美利奴细毛羊。相关叙述错误的是（　　） A. 通过注射促性腺激素实现澳洲美利奴细毛羊的超数排卵 B. 在澳洲美利奴细毛羊母羊发情期，多次人工授精可提高受精率 C. 对小尾寒羊同期发情处理可实现批次化与集中化管理 D. 这种快速繁殖技术产生的小羊能保持母本性状，属于无性生殖 13. 关于基因工程的工具，下列叙述正确的是（ ） A. 限制酶具有特异性，不同限制酶识别的核苷酸序列都不同 B. TaqDNA聚合酶的浓度过低会引起非特异性扩增产物量增加 C. E．coli DNA连接酶只能连DNA片段互补的黏性末端，而不能连平末端 D. 为使目的基因准确插入，可将天然质粒上重复的限制酶识别位点删除 14. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A. 构建表达载体时需要在目的基因前加上起始密码子 B. 基因工程在分子水平上进行操作，属于基因重组 C. 标记基因中不能有限制酶的识别位点以防止其被破坏而失去作用 D. 导入人胰岛素基因的大肠杆菌可直接生产出有活性的人胰岛素 二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选、或不答的得0分。 15. 某兴趣小组进行实验探究新鲜牛奶的合适消毒温度。下列相关实验操作合理的有（ ） A. 将配置好的牛肉膏蛋白胨培养基置于121℃、100kPa条件下处理15～30min B. 等量新鲜牛奶分别置于50℃、60℃、70℃、80℃恒温水浴锅中处理30min C. 将处理后的牛奶进行梯度稀释后，接种于平板上置于37℃下培养24h D. 统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度即为最适消毒温度 16. 花高同学为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了相关实验。下列叙述正确的有（ ） A. 能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长的微生物都能合成脲酶 B. 土壤样液先在锥形瓶内进行富集培养，再等比稀释后涂布计数 C. 甲组中a培养基上的菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的 D. 应以乙组计数，5g土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×109个 17. 以新鲜洋葱为材料进行“DNA粗提取与鉴定”实验时，所用研磨液的成分主要有Tris（缓冲作用）、SDS（去污剂，可使蛋白质线性化）、EDTA（蛋白质变性剂）、NaCl等。下列说法正确的是（ ） A. Tris可维持研磨液的pH，防止DNA被破坏 B. SDS可破坏细胞膜的结构，有利于核物质的释放 C. EDTA可抑制DNA酶的活性，防止研磨过程中DNA被水解 D. 研磨、过滤后取沉淀物进行下一步提纯操作 18. 蓝莓产生的酚类化合物具有抗衰老、抗癌等功效。科研人员研究不同浓度的2，4-D对蓝莓茎段脱分化形成愈伤组织及产酚类化合物的影响，结果如下图。相关叙述错误的是（　　） A. 茎段培养前可用70%酒精和5%次氯酸钠消毒 B. 实验过程中各实验组细胞分裂素与2，4-D的比值应相等 C. 2，4-D对愈伤组织产酚的影响表现为低浓度促进、高浓度抑制 D. 根据实验结果，建议添加0.7mg·L-1的2，4-D对茎段进行诱导 三、非选择题：共5题，共60分。 19. 我国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，发酵生产一种新型可降解材料PHA（功能与塑料相似），期望提高甘蔗的整体利用价值。请回答下列问题： （1）为得到对蔗糖的耐受能力强和利用效率高的菌株H，可在液体培养基中将蔗糖作为______，并不断提高其浓度，经多次传代培养获得目标菌株。培养过程中定期取样并用______的方法对活菌进行接种并计数，评估菌株增殖状况。 （2）发酵工程中获得纯净发酵产物的关键是防止杂菌污染，常采用______对培养液进行灭菌。菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，能在未灭菌的开放式发酵系统（如图1）中正常持续发酵60d以上。该系统可不灭菌的原因有_______。生活中嗜盐菌、嗜热菌也常用于生产_______。 （3）在适宜温度、pH等条件下进行扩大培养时，发现菌株H细胞增殖及PHA产量均未达到预期，且产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中______可能是高密度培养的限制因素。为解决该问题，研究人员尝试将透明颤菌血红蛋白基因（vgb）转入嗜盐单胞菌。 ①图2是人工合成的vgb基因，Pvgb是vgb的启动子，其作用是________。 ②构建基因表达载体时，用DNA连接酶可作用于图3中的______（填“A”或“B”或“A和B”），vgb基因能够接入载体是因为其与载体含有_______。 （4）甘蔗榨糖后的甘蔗渣含有大量纤维素。为高效降解甘蔗渣废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行甘蔗渣降解实验，结果如下表。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株______，理由是______。 菌株 甘蔗渣总重（g） 甘蔗渣残重（g） 蔗渣失重（%） 纤维素降解率（%） 甲 2.00 151 24.50 16.14 乙 2.00 1.53 23.50 14.92 丙 2.00 1.42 29.00 23.32 20. HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）制备抗HER2-ADC时，需要用______对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。 （2）过程①的原理是______，跟植物体细胞杂交相比，动物细胞特有的融合方法是______；动物体细胞核移植技术中激活重构胚的方法是_______。 （3）过程②所用的HAT培养基从用途上看属于______培养基，能在其上生长的细胞特点为_______。 （4）经过程②筛选的细胞还需进行过程③______和______，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （5）过程④合成的抗HER2-ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，这依赖于_______原理。 （6）为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。结果如图2所示： ①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200mm³时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射______，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。 ②实验结果表明________。 21. 我国中科院的研究团队利用成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如下图所示，请分析回答： （1）体外培养动物细胞时，首先应保证其处于________________的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制的气体条件是__________。 （2）要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，此卵母细胞应在体外培养到______期，在对卵母细胞进行去核时，常采用____________（答出1点即可）等方法处理。得到的重构胚通常需要发育到_________阶段才能进行胚胎移植。 （3）可利用______的方法对乙进行处理，得到多只孤雄小鼠；从遗传物质角度分析，这些孤雄小鼠________________，因而用于药物对照实验能够更准确地评估药效。 （4）ahESC与精子和去核卵母细胞融合后，不考虑致死情况，得到的融合细胞的性染色体组成可能是_____________________。 （5）据图分析只依赖雄性小鼠______（填“能”或“不能”）得到孤雄小鼠，请写出两个理由支持你的判断。理由1：____________；理由2：______________。 22. 幽门螺杆菌常寄生在胃黏膜组织中，感染后主要引起慢性胃炎和消化性溃疡等疾病，与胃癌、胃黏膜相关淋巴组织、淋巴瘤等疾病有密切的关系，被世界卫生组织（WHO）列为第一类生物致癌因子。 （1）幽门螺杆菌的遗传物质集中分布的区域称为______。下图4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基（琼脂含量 3.5g/L）中的生长状态，其中②号试管代表幽门螺杆菌的生长状态，由图判断，该菌在______条件下不能生长。 （2）日常饮食习惯中的不分餐也不使用公筷很可能会导致幽门螺旋杆菌的交叉传播。为了验证这一假说，有人提取某胃炎患者的家庭剩菜100g，加入无菌水稀释至1000ml。取0.1ml上述稀释液分别接种到3个适宜的培养基中置于适宜的条件下进行培养，3个平板上胃幽门螺旋杆菌菌落数介于30~300之间且相差不大，求得平均值为N个。在本实验中，胃幽门螺杆菌接种的方法是______。由实验的结果可知，每克剩菜中胃幽门螺杆菌数量为______个。 （3）某研究团队发现一个胃癌家庭，某健康夫妇甲和乙，生育的子女丙和丁均患胃癌。现对该家庭成员某抑癌基因进行基因检测，部分结果如下表： 个体 某抑癌基因碱基序列片段检测结果 甲 5'-TACGGACTT-3' 乙 5′-TACGGACTT-3' 丙 5′-TACGTACTT-3′ 丁 5'-TACGGACTT-3′ 从该抑癌基因的角度分析丙个体患胃癌的原因是______。该抑癌基因表达的蛋白质的作用有______。从其他基因的角度分析丁患胃癌的原因可能是______。丙患者体内的该基因能否遗传给下一代，为什么?_______。 （4）某些肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞表面的PD-1结合能抑制细胞毒性T细胞的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。某兴趣小组基于现有抗体—药物偶联物的思路提出了两种药物设计方案。方案一：将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合在一起。方案二：将化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起。你认为方案______（填“一”或“二”）可行，理由是______。 23. 科研团队通过转基因获得了一种大肠杆菌工程菌，成为监测残留在生物组织或环境中的四环素水平的“报警器”，其监测原理如图1所示，天然大肠杆菌不具备图1中所示基因。 （1）在上述研究中，需导入天然大肠杆菌的目的基因有______。（选填序号） ①四环素合成相关基因 ②GFP基因 ③TetR基因 ④RNA聚合酶基因 （2）基因工程中最核心的步骤是______，其目的是______，需要的工具酶有______。 （3）据图1，当环境中不含四环素时，该大肠杆菌工程菌______（选填“能发出”“不发出”）荧光；环境中四环素水平越高，该种大肠杆菌工程菌的荧光______（选填“增强”“减弱”“不变”）。 （4）图2是2个DNA片段、质粒及其上的限制性内切核酸酶的识别序列的分布情况；其中质粒上的Ampr代表青霉素抗性基因。表为相关限制性内切核酸酶的识别序列与切割位点。 限制酶 EcoRⅠ XbaⅠ SpeⅠ BamHⅠ 识别序列及切割位点 5’…G↓AATC C…3’ 3’…C TTAA↑…5’ 5’…T↓CTAG A…3’ 3’…A GATC↑T…5’ 5’…A↓VTAG T…3’ 3’…T GATC↑A…5’ 5’…G↓GATC C…3’ 3’…C CTAG↑G…5’ 则，BamHI酶切后产生的黏性末端为______。若想要拼接DNA片段1和DNA片段2，结合图2和上表中信息，对DNA片段1应使用______酶切，对DNA片段2应使用______酶切，拼接后拼接点的碱基序列为______。（5’向3’方向） （5）研究人员设计了一个同时含DNA片段1和2的重组质粒的拼接方案，结合相关信息，最终建构成功的重组质粒示意图最合理的是_______。 A. B. C. D. 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $