精品解析：江苏连云港市东海县2024—2025学年度第二学期期中考试高二生物试题

2024—2025学年度第二学期期中考试 高二生物试题 第Ⅰ卷选择题部分 一、单项选择题：共15题，每题2分，共30分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 制作腐乳、泡菜、果酒、果醋的过程都离不开微生物发酵。下列叙述正确的是（ ） A. 腐乳制作所需要的适宜温度最高 B. 制作泡菜时应该将泡菜坛装满以制造无氧环境 C. 家庭制作果酒需要接种酿酒酵母菌 D. 在缺少糖源时，乙醇可作为醋酸发酵的底物 【答案】D 【解析】 【详解】A、腐乳制作适宜温度为15~18℃，果醋制作适宜温度为30~35℃，A错误； B、制作泡菜时蔬菜只需装至八成满，若完全装满，发酵过程中易出现汁液溢出的问题，只需保证盐水没过原料、坛口水封即可制造无氧环境，B错误； C、家庭制作果酒时，葡萄皮表面天然附着有野生型酿酒酵母菌，无需额外接种菌种即可完成发酵，C错误； D、醋酸菌为好氧菌，当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇先转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸，D正确。 2. 红茶菌是发酵液，其中含酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。研究人员选用红茶菌作为果醋饮品的发酵菌种，通过选择合适的发酵条件，实现了一步法发酵制醋，流程如下图所示。相关叙述错误的是（ ） A. 发酵1的目的是获得有活性的红茶菌 B. 热烫可大幅度减少香蕉浆中的多种微生物 C. 发酵2应依次在无氧、有氧条件下进行 D. 可检测发酵2中醋酸含量判断发酵进程 【答案】C 【解析】 【分析】根据题目信息可知，红茶菌是由含酵母菌、醋酸菌和乳酸菌三种菌的混合菌液共同发酵完成，酵母菌为兼性厌氧菌，醋酸菌为好氧菌，乳酸菌为厌氧菌。 【详解】A、红茶菌是以红茶和白糖为原料熬制而成的发酵液，发酵1的目的是利用红茶和白糖使得红茶菌快速繁殖增加数量，从而获得有活性的红茶菌，A正确； B、热烫可以大幅度减少香蕉浆中的多种微生物，但不能彻底杀灭所有微生物，因为有些微生物可能会形成耐热孢子或者某些微生物能耐受较高温度，B正确； C、酵母菌属于兼性厌氧菌，醋酸菌属于严格的好氧细菌，乳酸菌属于厌氧细菌，活菌饮料由3种菌共同发酵产生，同时要考虑3种菌的生存，因此发酵的过程不需要在严格的无氧条件下进行，可以前期为低氧，后期高氧条件，C错误； D、发酵后期主要是醋酸菌进行醋酸发酵，可检测发酵2中的醋酸含量判断发酵进程，D正确。 故选C。 3. 下列有关“酵母菌的纯培养”实验的叙述，合理的是（ ） A. 可用干热灭菌法对培养皿进行灭菌处理 B. 马铃薯琼脂培养基中葡萄糖是唯一碳源 C. 待培养基冷却至40℃时进行倒平板操作 D. 使用后的培养基丢弃前没有必要再灭菌 【答案】A 【解析】 【分析】1、灭菌:培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌； 2、接种分离酵母菌:酵母菌喜欢酸性环境，常用酸性液体培养基来培养，获得酵母菌的培养液，然后在固体培养基上用平板划线法分离； 3、培养酵母菌:20~30°C(酵母细胞生长最适温度在20~30°C)； 4、酵母菌的纯化培养的步骤是配制培养基、灭菌、倒平板、接种、分离和培养。 【详解】A、干热灭菌法适用于能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）、金属用具等。培养皿可以用干热灭菌法进行灭菌处理，A正确； B、马铃薯琼脂培养基中，马铃薯本身就含有多种有机物，不只是葡萄糖为碳源，葡萄糖不是唯一碳源，B错误； C、待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板操作，而不是40℃，温度过高，在操作过程中容易烫伤，且培养基容易在培养皿盖上形成过多冷凝水；温度过低，培养基容易凝固，不利于倒平板操作，C错误； D、使用后的培养基丢弃前必须进行灭菌处理，防止杂菌污染环境，以及可能存在的致病菌对人体等造成危害，D错误。 故选A。 4. 下列有关植物组织培养技术的叙述，错误的是（ ） A. 利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体 B. 经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞不具有细胞全能性 C. 利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株 D. 实验用的培养基和所有器械都要灭菌，外植体应进行消毒 【答案】B 【解析】 【详解】A、愈伤组织细胞分裂旺盛，DNA复制过程中易发生基因突变，对其进行诱变处理后经筛选可获得具有优良性状的突变体，A正确； B、细胞全能性指已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能，幼芽细胞含有该物种全套的遗传物质，依然具备细胞全能性，B错误； C、植物茎尖等分生区几乎不含病毒，经组织培养可获得脱毒苗；花粉是减数分裂形成的生殖细胞，由花粉进行组织培养获得的植株体细胞染色体数为体细胞的一半，属于单倍体植株，C正确； D、植物组织培养需要严格的无菌环境避免杂菌污染，培养基和实验器械需要灭菌处理，外植体需要消毒处理（避免杀死外植体细胞），D正确。 5. 紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的二萜类生物碱类化合物，是一种有效的抗癌药物，传统生产方法是从红豆杉树皮和树叶中提取，下图为利用植物细胞工程生产紫杉醇的流程图，相关叙述正确的是（　　） A. 紫杉醇是植物代谢活动产生的，属于初生代谢物 B. ①过程中添加生长素和细胞分裂素比例约为1：1 C. ②过程采用液体培养基，需要适当强度的光照 D. ③过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。 【详解】A、次生代谢物是生物体产生的一大类并非生长发育所必需的小分子有机化合物，紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种复杂的次生代谢物，A错误； B、①过程表示形成愈伤组织，该过程中添加生长素和细胞分裂素比例约为1：1，B正确； C、植物组织培养中常用的培养基是固体培养基，②过程采用固体培养基，需要适当强度的光照，C错误； D、③过程愈伤组织形成单个细胞，需要去除细胞壁，需要用纤维素酶和果胶酶处理，动物细胞培养中形成单个细胞需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，D错误。 故选B。 6. 下列关于动物细胞培养的叙述正确的是（ ） A. 动物细胞培养与植物组织培养依据的原理都是细胞的全能性 B. 动物细胞培养时，定期更换培养液的目的是防止杂菌污染 C. 原代培养过程中，多数细胞悬浮在培养液中生长增殖 D. 动物细胞培养一般用液体培养基，通常还需加入血清等天然成分 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养的原理是细胞增殖，植物组织培养的原理是细胞的全能性，二者依据的原理不同，A错误； B、动物细胞培养时定期更换培养液的目的是清除细胞代谢废物、补充营养物质，避免代谢产物积累对细胞造成毒害，防止杂菌污染通常通过向培养基中添加抗生素实现，B错误； C、动物细胞培养时多数正常细胞具有贴壁生长的特点，原代培养过程中多数细胞会贴附在培养瓶壁上生长增殖，并非悬浮生长，C错误； D、动物细胞培养一般使用液体合成培养基，由于目前人类对动物细胞所需的全部营养物质尚未完全明确，通常需要加入血清、血浆等天然成分来保证细胞正常生长代谢，D正确。 7. 下列有关细胞工程技术的叙述正确的是（ ） A. 动物细胞培养过程中加入血清的培养基需要进行高压蒸汽灭菌 B. 大量制备一种单克隆抗体需要大量的B细胞和骨髓瘤细胞 C. 核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物 D. 受体母畜对移入子宫的外来胚胎会发生免疫排斥反应 【答案】C 【解析】 【分析】1、核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物。 2、受体母畜对移入子宫的外来胚胎不会发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体母畜体内的存活提供了可能。 【详解】A、动物细胞培养过程中需要对培养液和培养用具进行灭菌处理，但不需要高压蒸汽灭菌，高温可能会使血清中的物质性质发生改变，A错误； B、单克隆抗体制备过程中，需要用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因此大量制备一种单克隆抗体不需要大量的B细胞和骨髓瘤细胞，B错误； C、核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物，C正确； D、受体母畜对移入子宫的外来胚胎不会发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体母畜体内的存活提供了可能，D错误。 故选C。 8. 人类活动严重威胁了郊狼的生存，使其濒临灭绝。科研人员将郊狼甲的体细胞注入家犬a去核卵母细胞中形成重构胚，再移入代孕家犬b体内，获得郊狼乙。下列叙述正确的是（　　） A. 家犬a卵母细胞需培养到MII期再去核 B. 家犬b需注射促性腺激素以促进其超数排卵 C. 郊狼乙细胞内的遗传物质和郊狼甲的完全相同 D. 用胚胎分割等有性繁殖技术可提高胚胎利用率 【答案】A 【解析】 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 【详解】A、使用显微操作技术对卵母细胞去核，且所用卵母细胞处于MⅡ中期，A正确； B、将胚胎植入代孕家犬前，需对家犬b进行同期发情处理，进行同期发情处理主要使用的是孕激素（或性激素），B错误； C、郊狼乙的遗传物质中细胞质遗传物质来自家犬，细胞核遗传物质来自郊狼甲，因此郊狼乙的遗传物质与代孕家犬不同，与郊狼甲的不完全相同，C错误； D、胚胎分割可提高胚胎利用率，但胚胎分割属于无性繁殖，D错误。 故选A。 9. 如图为快速培育优质奶牛的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 精子和卵子分别需经获能、成熟处理后才能受精 B. 胚胎移植前需要对受体牛进行免疫抑制处理 C. 可取②进行性别鉴定，两子代牛犊的性别不同 D. 胚胎移植的实质是生产和孕育胚胎的时间分离 【答案】A 【解析】 【分析】分析题图：图示为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，其中A是卵母细胞，可与获能的精子受精形成受精卵；①是囊胚中的内细胞团，②是囊胚腔。 【详解】A、采集到的成熟精子经获能处理后才具有受精能力，卵子要培养到减数第二次分裂中期才能进行受精，A正确； B、受体不会对移植的胚胎产生免疫排斥反应，故胚胎移植前不需要对受体牛进行免疫抑制处理，B错误； C、②为囊胚腔，应取滋养层细胞进行性别鉴定，两子代牛犊的性别相同，C错误； D、胚胎移植的实质是生产和孕育胚胎的空间分离，D错误。 故选A。 10. 我国是香蕉的主产地之一，大多数栽培香蕉是三倍体品种。传统生产采用吸芽繁殖方式，不仅周期长、产率低、果品不佳，还易积累病毒。下列措施无法达到改良目的的是（ ） A. 通过基因工程转入外源基因提高果实品质 B. 用香蕉顶端分生区作为外植体获得脱毒苗 C. 利用单倍体育种对栽培香蕉进行品种选育 D. 用香蕉叶鞘进行植物组织培养以提高产率 【答案】C 【解析】 【分析】脱毒香蕉苗的获得：选取香蕉外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比例，使其再分化形成芽和根，获得大量试管苗。 【详解】A、通过基因工程转入外源基因可以改变香蕉的基因组成，从而有可能提高果实品质，达到改良香蕉的目的，可以达到改良目的，A不符合题意； B、用香蕉顶端分生区作为外植体进行植物组织培养可以获得脱毒苗。因为植物顶端分生区附近的病毒含量很低或者几乎没有病毒，通过这种方式可以减少香蕉积累的病毒，提高香蕉的品质和产量，可以达到改良目的，B不符合题意； C、大多数栽培香蕉是三倍体品种，在减数分裂过程中会出现联会紊乱，无法正常产生配子，难以进行单倍体育种，无法达到改良目的，C符合题意； D、用香蕉叶鞘进行植物组织培养可以在短时间内获得大量的香蕉植株，缩短培养周期，从而提高产率，达到改良香蕉繁殖方式的目的，可以达到改良目的，D不符合题意。 故选C。 11. DNA重组技术中需要使用工具酶。下列叙述正确的是（ ） A. 限制性内切核酸酶主要是从病毒中分离纯化而来 B. 真核细胞中任意一个DNA片段都能被限制酶切割 C. 被SmaI酶切割后的DNA可以用T4DNA连接酶连接 D. DNA连接酶可以将游离的单个脱氧核苷酸连接成链 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程中的操作工具酶及其作用： ①分子手术刀——限制性核酸内切酶（限制酶），能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性； ②分子缝合针——DNA连接酶，E·coliDNA连接酶，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合黏性末端和平末端。 【详解】A、限制性内切核酸酶主要是从原核生物中分离纯化而来，A错误； B、限制性内切核酸酶需要识别特定的核苷酸序列进行切割，任意一个DNA片段不一定能被限制酶进行切割，B错误； C、被Sam I酶切割后的DNA片段为平末端，T4DNA连接酶可以连接黏性末端和平末端，C正确； D、DNA连接酶可以将DNA片段连接成双链结构，对游离的单个脱氧核苷酸进行连接的是DNA聚合酶，D错误。 故选C。 12. 某质粒中氨苄青霉素抗性基因（AmpR），四环素抗性基因（TetR）和多种限制酶的识别位点如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 基因工程的载体也可选用噬菌体和动植物病毒 B. 质粒和目的基因用ScaI和HindⅢ切割，用四环素进行筛选 C. 质粒和目的基因用SalⅠ和SphⅠ切割，用氨苄青霉素进行筛选 D. 质粒和目的基因用ScaⅠ和PvuⅠ切割，用四环素进行筛选 【答案】B 【解析】 【分析】质粒中的氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因是标记基因，标记基因的作用是便于重组DNA分子的筛选。 【详解】A、基因工程的载体有质粒、动植物病毒和噬菌体，A正确； B、质粒和目的基因用ScaI和HindⅢ切割，会破坏所有的标记基因，用四环素无法进行筛选，B错误； C、质粒和目的基因用SalⅠ和SphⅠ切割，会破坏四环素抗性基因，但不会破坏氨苄青霉素抗性基因，可以用氨苄青霉素进行筛选，C正确； D、质粒和目的基因用ScaⅠ和PvuⅠ切割，不会破坏四环素抗性基因，但会破坏氨苄青霉素抗性基因，可以用四环素进行筛选，D正确。 故选B。 13. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（　　） A. 可选用新鲜的香蕉、菠菜、猪肝等作为实验材料 B. 研磨液中2mol/L的NaCl溶液有利于溶解DNA和去除杂质 C. 过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性 D. 将析出的丝状物加入4mL二苯胺试剂后沸水浴加热可出现蓝色 【答案】D 【解析】 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离。 【详解】A、NA粗提取实验需要选取DNA含量相对较高的材料。新鲜的香蕉、菠菜（植物细胞）含有细胞核，有DNA；猪肝（动物细胞）也含有细胞核，存在DNA，这些材料都能用于该实验，A正确； B、DNA在2mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度较高，搅拌过滤后，DNA存在于滤液中，有利于去除杂质，B正确； C、酶活性的发挥需要适宜的温度等条件，将过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精的目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被水解，C正确； D、将析出的丝状物先溶于5ml 2mol/L NaCl溶液中，然后加入4mL二苯胺试剂，混匀后沸水浴中加热可出现蓝色，D错误。 故选D。 14. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是（ ） A. 该项替换研究中，目前可行的直接操作对象是蛋白质 B. 该项替换研究中，改造前后水蛭素的空间结构未发生改变 C. 改造的水蛭素基因导入微生物后可利用发酵工程生产水蛭素 D. 该项替换研究的思路与按照中心法则合成蛋白质的思路一致 【答案】C 【解析】 【详解】A、蛋白质工程的直接操作对象是基因而非蛋白质，通过修改基因序列来改变氨基酸组成，而非直接对蛋白质进行操作，A错误； B、根据题意信息可知，将天冬酰胺（极性氨基酸）替换为赖氨酸（带正电荷的碱性氨基酸），两者的理化性质差异显著，可能导致局部电荷分布和空间结构改变，从而影响蛋白质功能，B错误； C、改造后的水蛭素基因导入微生物（如大肠杆菌或酵母菌）后，可通过发酵工程大规模生产水蛭素，C正确； D、中心法则是从DNA到RNA再到蛋白质的正向流程，而蛋白质工程的思路是逆向的：先设计所需蛋白质结构，再反向推导并修改基因序列。因此，两者的研究思路并不一致，D错误。 故选C。 15. 生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，也引起了人们对它安全性的关注。相关叙述错误的是（ ） A. 克隆人会冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念 B. 生物武器等各类大规模杀伤性武器应全面禁止和彻底销毁 C. 转基因作物被动物食用后，目的基因会整合到动物细胞的染色体DNA上 D. 开展风险评估、预警跟踪和风险管理，是保障生物技术安全性的前提 【答案】C 【解析】 【分析】1、引发人们对转基因生物安全性的争论主要体现在食物安全、生物安全、环境安全三个方面。 2、对克隆技术伦理问题的争论，中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。但是，不反对治疗性克隆。 【详解】A、克隆人会冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念，A正确； B、生物武器致病能力强，致病范围广，生物武器等各类大规模杀伤性武器应全面禁止和彻底销毁，B正确； C、目的基因被消化分解后才能被吸收，不会整合到动物细胞的染色体DNA上，C错误； D、开展风险评估、预警跟踪和风险管理，是保障生物技术安全性的前提，D正确。 故选C。 二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 16. 混菌酿造复合果酒是提升果酒品质的常用方法之一。下图为菠萝苹果复合果酒工厂化生产流程。相关叙述正确的有（ ） A. 图中控温发酵是工厂化生产复合果酒的中心环节 B. 发酵前未对果汁进行灭菌是为了避免杀死原料中天然菌种 C. 混合接种酵母菌和乳酸菌进行发酵可提升复合果酒的风味 D. 发酵结束后需对发酵产物采用过滤、调节等方法进行处理 【答案】ACD 【解析】 【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢产物、酶及菌体本身。产品不同，分离提纯的方法一般不同：（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。2、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。3、传统发酵技术是利用微生物的发酵获得微生物的代谢产物，如果酒发酵、果醋发酵等。 【详解】A、图中控温发酵代表的是发酵罐内发酵，是工厂化生产复合果酒的中心环节，A正确； B、工厂化生产需要接种纯的菌种，不依赖于原料中天然菌种，B错误； C 、混合接种酵母菌和乳酸菌进行发酵，酵母菌可以将糖类转化为酒精，乳酸菌可以产生一些有机酸等物质，从而提升复合果酒的风味，C正确； D、发酵结束后需对发酵产物进行过滤以除去渣滓，并调节口味等，D正确。 故选ACD。 17. 关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验，下列叙述正确的是（ ） A. 琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小 B. 凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 C. 在同一电场作用下，DNA片段越长，向负极迁移速率越快 D. 待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，需及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察 【答案】AD 【解析】 【详解】A、琼脂糖凝胶电泳的浓度会影响DNA分子的迁移速率，片段越小需要的浓度越高，片段越大需要的浓度越低，A正确； B、缓冲液中的指示剂是用来观察电泳进程，B错误； C、DNA片段越大，在电场中迁移速率越慢，C错误； D、指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，表明电泳结束，应及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察，D正确。 18. 单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了下图所示研究。请据图分析，下列说法正确的是（ ） A. 为使A野化单峰骆驼超数排卵，需要注射适量的促性腺激素 B. 应用胚胎移植技术可以充分发挥C受体雌性的优良遗传特性 C. 对图示中的早期胚胎进行移植，出生后代之间可能差异很大 D. 卵裂期，细胞数目增多总体积不增加，有机物总量增加 【答案】AC 【解析】 【分析】胚胎移植主要包括供体、受体的选择和处理，配种或人工授精，胚胎的收集、检查、培养或保存，胚胎的移植，以及移植后的检查等步骤。胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。 【详解】A、给A野化单峰骆驼注射适量的促性腺激素，可使其超数排卵，A正确； B、胚胎移植技术可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，实现优良个体的快速大量繁殖，而不是C受体雌性，该个体只是提供胚胎发育的场所而已，B错误； C、图示中的早期胚胎是由不同的受精卵发育而来的，对这些胚胎进行移植，出生后代之间可能差异很大，C正确； D、卵裂期，细胞数量不断增加，细胞体积缩小，但胚胎总体积并不增加，有机物总量减少，D错误。 故选AC。 19. 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。下图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1~4表示DNA上引物可能结合的位置，下列叙述正确的是（ ） A. 若受体细胞为大肠杆菌，则蛛丝蛋白需要进一步加工才具有相应的功能 B. 若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏2个磷酸二酯键 C. 若用PCR技术获取目的基因，则图中的2、3分别是2种引物结合的位置 D. 选择图中适宜引物进行PCR扩增，经过5次循环可获得32个等长的蛛丝蛋白基因 【答案】AC 【解析】 【分析】由图可知，由于DNA聚合酶只能从5′→3′延伸子链，图中的磷酸基团为5'端，羟基为3′端，由于引物要延伸子链，子链和模板链反向平行，因此根据引物的延伸方向可知图中与引物结合的部位是2、3。 【详解】A、若受体细胞为大肠杆菌，大肠杆菌为原核生物，没有高尔基体和内质网，蛛丝蛋白需要进一步加工才具有相应的功能，A正确； B、若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，DNA每条链上会破坏2个磷酸二酯键，共会破坏4个磷酸二酯键，B正确； C、由于DNA聚合酶只能从5'→3'延伸子链，图中的磷酸基团为5'端，羟基为3'端，由于引物要延伸子链，子链和模板链反向平行，因此根据引物的延伸方向可知图中与引物结合的部位是2、3，C正确； D、如图所示  ，设X基因为目的基因。经过第一轮复制以亲代DNA的两条链做模板，可以得到①和②两种DNA；经过第二轮复制可以得到①和③、②和④；经过第三轮复制可以得到①和③、③和⑤、②和④、④和⑤；第四轮复制得到16个DNA分子，即①和③、2个③和2个⑤、②和④、2个④和2个⑤、第二轮的2个⑤得到4个⑤（统计为①、②、3个③、3个④、8个⑤）；第五轮复制得到32个DNA分子，即①和③、②和④、3个③和3个⑤、3个④和3个⑤、第四轮的8个⑤得16个⑤（统计为①、②、4个③、4个④、22个⑤，即还未获得32个目的基因），第六轮复制得64个DNA分子，即①和③、②和④、4个③和4个⑤、4个④和4个⑤、第五轮的22个⑤得44个⑤（统计为①、②、5个③、5个④、52个⑤，即此时获得32个以上符合条件的目的基因），综上所述，需要至少6次循环可获得32个符合要求的目的基因，D错误。 故选AC。 第Ⅱ卷非选择题部分 三、非选择题：本部分包括5题，共58分。 20. 尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后，被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 1.4g 2.1g 0.2g 1.0g 10.0g 1.0g （1）根据培养基的成分分析，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？_____（填“能”或“不能”），原因是_____。 （2）通常在实验室培养微生物时，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行_____。培养细菌时，一般需要将培养基的pH调至_____。 （3）某同学取稀释倍数为106倍的菌液0.2mL接种后，测得平板上菌落数为156、178和191，则每克样品中的菌落数为_____个。 （4）某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_____，为避免此种现象发生，正确的操作方法是_____。 （5）图1和图2是土壤中某细菌的分离结果图，其对应的接种方法分别是_____和_____，其中，_____（填“图1”或“图2”）所用的接种方法可用来对活菌进行计数，其统计的数目往往比活菌的实际数目偏低，这是因为_____。 【答案】（1） ①. 不能 ②. 尿素不是唯一氮源 （2） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 中性或弱碱性 （3）8.75×108 （4） ①. 菌液浓度过高 ②. j增加稀释度 （5） ①. 稀释涂布平板法 ②. 平板划线法 ③. 图1 ④. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上只有一个菌落 【解析】 【小问1详解】 培养基中可以提供氮源的物质有蛋白胨、尿素，除分解尿素的细菌可以生长，其他微生物也能生长，并没有起到筛选的作用； 【小问2详解】 对培养基和培养皿的灭菌方式通常选高压蒸汽灭菌法，培养细菌一般将培养基的pH调至中性或弱碱性； 【小问3详解】 3个平板平均菌落数为（156+178+191）÷3=175，则每克样品含有菌落数为175÷0.2×106=8.75×108； 【小问4详解】 分离纯化分解尿素的细菌的方法为稀释涂布平板法，培养基上没有单菌落最可能的原因是稀释度过低导致菌液浓度过高，可以增加稀释度。 【小问5详解】 图1平板上有单菌落且可以对菌落数进行计数为稀释涂布平板法，图2的平板有划线痕迹，为平板划线法，稀释涂布平板法统计数目比实际活菌数少是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上只有一个菌落。 21. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出具有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。回答下列问题： （1）过程①所需要的酶是_____，用相同的酶处理甲、乙的时间有差异，原因可能是_____。 （2）需要向原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_____。过程②可用物理法和化学法诱导原生质体融合，物理法包括_____。 （3）过程③筛选杂种细胞时，在光学显微镜下观察到融合的细胞有_____存在时，可作为初步筛选的标志。过程④是脱分化，脱分化是指_____。 （4）利用单倍体育种技术，也可以利用上述植物甲和植物乙培育出高产耐酸的新品种丙。下表是相关实验中的一些步骤，请根据题意完成以下表格。 实验目的 方法步骤要点 收集花粉 ①将品种甲和品种乙_____后获得F1，收集F1的花粉 获得可增殖分化的细胞 ②利用_____技术中的脱分化过程，获得_____ 诱导单倍体幼苗的形成 ③通过改变培养基中的_____，实现诱导分化 获得染色体加倍的植株 ④用_____处理单倍体幼苗 获得新品种丁 筛选符合要求的植株，收获其所结种子 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 植物甲和植物乙细胞壁的厚度（主要成分）不同 （2） ①. 保持原生质体的完整性 ②. 离心法、电融合法 （3） ①. 叶绿体 ②. 已分化的细胞经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转化成未分化细胞的过程 （4） ①. 植物体细胞杂交 ②. 花药离体培养（植物组织培养） ③. 愈伤组织 ④. 生长素和细胞分裂素的比例 ⑤. 秋水仙素（低温） 【解析】 【小问1详解】 植物细胞壁的成分为纤维素和果胶，去除细胞壁则用纤维素酶和果胶酶，不同植物细胞细胞壁的主要成分和厚度不同，处理时间也不相同； 【小问2详解】 植物细胞去除细胞壁后的结构为原生质体，在低渗溶液中诱导融合易发生吸水胀破，所以原生质体培养液要保持一定渗透压以维持原生质体的完整性，诱导原生质体融合的物理方法有离心法、电融合法等； 【小问3详解】 诱导植物甲叶片细胞和植物乙茎形成层细胞融合，因叶片细胞有叶绿体，可作为初步筛选融合细胞的标志；脱分化是已分化的细胞经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转化成未分化细胞的过程； 【小问4详解】 由于甲乙两种植物存在生殖隔离，因此不能杂交，故需要将植物甲和植物乙进行植物体细胞杂交后获得F1，收集F1的花粉进行花药离体培养（植物组织培养），经脱分化得到愈伤组织，调整培养基中细胞分裂素和生长素的比例，诱导愈伤组织再分化形成单倍体幼苗，因单倍体高度不育，所以经秋水仙素（低温）处理单倍体幼苗使其染色体加倍，得到可育植株，筛选符合要求的植株，收获其所结种子即可。 22. PSMA是某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白，CD28是T细胞表面受体。将两株不同杂交瘤细胞融合形成的双杂交瘤细胞，既能够悬浮在培养基中生长繁殖，又可以产生双特异性抗体PSMA×CD28。图1所示为双特异性抗体PSMA×CD28的制备流程，图2所示为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理。 （1）①过程需给小鼠分别注射PSMA蛋白、CD28蛋白的目的是_____。 （2）③过程常用的方法有_____（答出2点即可）。④过程的培养基从用途上看属于_____培养基。 （3）图1至少进行_____次抗体检测进行筛选才能得到双杂交瘤细胞XY，筛选时需在96孔板的孔洞中加入_____。 （4）获得的杂交瘤细胞XY要置于含有_____混合气体的培养箱中进行培养。对⑤过程得到的双杂交瘤细胞进行传代培养前，需用_____收集。 （5）该双特异性抗体不同于普通单抗的优点是_____。 （6）关于该双特异性抗体产生过程的说法正确的是_____。 A. 人对鼠源抗体可能会产生免疫排斥，通常需要人源化改造 B. 克隆化培养杂交瘤细胞XY分泌的抗体就是图2所示的抗体 C. 所需抗体可以从细胞培养液中和小鼠腹水中获得 D. 单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可大量制备 【答案】（1）获得能分泌抗PSMA蛋白抗体和抗CD28蛋白抗体的B淋巴细胞 （2） ①. 电融合法、PEG（聚乙二醇）融合法、灭活病毒诱导法 ②. 选择 （3） ①. 2 ②. PSMA蛋白、CD28蛋白 （4） ①. 95%空气和5%CO2 ②. 离心法 （5）既能识别PSMA蛋白，与癌细胞特异性结合，也能识别T细胞表面的CD28蛋白，从而激活T细胞，增强对癌细胞的杀伤力 （6）ACD 【解析】 【小问1详解】 给小鼠分别注射PSMA蛋白、CD28蛋白作为抗原激活小鼠的特异性免疫，从而获得能分泌抗PSMA蛋白抗体和抗CD28蛋白抗体的B淋巴细胞； 【小问2详解】 诱导动物细胞融合的方法多为电融合法、PEG（聚乙二醇）融合法、灭活病毒诱导法；④过程所用的培养基除杂交瘤细胞可以存活，其他未融合的细胞和融合同种核型的细胞均死亡，从培养基的功能看属于选择培养基； 【小问3详解】 题中的单克隆抗体为双特异性抗体，即杂交瘤细胞XY既能产生抗PSMA蛋白抗体，也能产生抗CD28蛋白抗体，所以要至少2次筛选，第一次用PSMA蛋白筛选能产生抗PSMA蛋白抗体的杂交瘤细胞，第二次用CD28蛋白在上一次筛选出来的杂交瘤细胞中筛选能产生抗CD28蛋白抗体的杂交瘤细胞； 【小问4详解】 动物细胞培养需要的气体环境为95%空气和5%CO2，杂交瘤细胞在培养液中悬浮生长，在传代培养前应先离心收集细胞； 【小问5详解】 既能识别PSMA蛋白，与癌细胞特异性结合，也能识别T细胞表面的CD28蛋白，从而激活T细胞，增强对癌细胞的杀伤力，普通抗体则只能识别一种特异性抗原； 【小问6详解】 A、不同生物的细胞膜上组织相容性抗原不同，人对鼠源抗体会发生免疫排斥反应，需要改造后使用，A正确； B、克隆化培养的杂交瘤细胞有多种，需要进行筛选后才能得到图2所示抗体结构，B错误； C、经抗体检测为阳性的杂交瘤细胞可以在体外培养亦或是注射到小鼠腹腔内增殖，最后从培养液或小鼠腹水中提取抗体，C正确； D、单克隆抗体的特点即为特异性强、灵敏度高、可大量制备，D正确。 23. 有人说，生物学可分为两个阶段——有PCR技术的生物学和没有PCR技术的生物学。由此可见PCR技术对于生物学发展是举足轻重的。回答下列与PCR相关的问题： （1）PCR技术的中文名称是_____，其主要原理是_____。扩增目的基因时，需要Taq酶，该酶显著的特点是_____。 （2）PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、_____三步，其中复性的结果是_____。 （3）热启动PCR可提高扩增效率，方法之一是：先将除Taq DNA聚合酶以外的各成分混合后，加热到80℃以上再混入酶，然后直接从94℃开始PCR扩增。下列叙述正确的有_____。 A. Taq DNA聚合酶最适催化温度范围为50～60℃ B. 与常规PCR相比，热启动PCR可减少反应起始时引物错配形成的产物 C. 两条子链的合成一定都是5′端向3′端延伸 D. PCR产物DNA碱基序列的特异性体现了Taq酶的特异性 （4）一般地，首轮PCR之前预变性的目的是_____。最后一轮PCR结束后应维持72℃下7min，其目的是_____。 （5）PCR扩增得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳后的结果如下： 实验中，DNA marker是一组已知长度和含量的标准DNA片段的混合物，DNA marker的作用是作为_____的参照物。已知在该缓冲液中DNA带负电，图中代表正极的电极是_____。 【答案】（1） ①. 聚合酶链式反应 ②. DNA半保留复制（DNA热变性） ③. 热稳定性高（耐高温） （2） ①. 延伸 ②. 引物与单链模板 DNA 碱基互补配对结合 （3）BC （4） ①. 增加大分子DNA彻底变性的概率 ②. 使子链充分延伸，得到更多的等长目的DNA序列  （5） ①. 电泳中DNA 片段大小（长度） ②. 电极 2 【解析】 【小问1详解】 PCR 全称聚合酶链式反应，本质是体外快速扩增 DNA，其主要原理是 DNA 半保留复制；普通 DNA 聚合酶高温会变性失活，只能用从嗜热菌中分离的耐高温的（热稳定性高的）Taq DNA 聚合酶。 【小问2详解】 PCR 每次循环固定三步：变性→复性（退火）→延伸，变性：90℃以上，DNA 双链解旋为单链 复性（退火）：50℃左右，降温让引物结合单链模板 延伸：72℃左右，Taq 酶从引物 3’端开始合成子链 DNA，所以复性是引物通过碱基互补配对与单链 DNA 模板结合（引物与变性后的单链目的基因模板链特异性结合）。 【小问3详解】 A、Taq DNA 聚合酶最适温度是72℃左右（延伸步骤温度），50~60℃是引物复性退火温度，不是酶最适温度，A错误； B、常规 PCR 常温加酶，低温阶段引物容易随机错配结合模板、产生非特异性产物；热启动先高温再加酶，从高温开始反应，抑制低温下引物错配，减少非特异性产物，B正确； C、DNA 聚合酶只能从引物3’端延伸 DNA 链，DNA 合成方向永远是 5′→3′，两条子链合成方向完全一致，C正确； D、PCR 产物特异性由引物的碱基特异性决定；Taq 酶只有催化 DNA 合成的功能，没有识别特异性，不能决定产物序列特异性，D错误。 【小问4详解】 在PCR扩增过程中，首轮PCR之前预变性的目的是增加大分子DNA彻底变性的概率，最后一轮PCR结束后维持最适温度（72℃、7min）一段时间，目的是使子链充分延伸，得到更多的等长目的DNA序列。 【小问5详解】 DNA marker 是已知长度、含量的标准 DNA 混合物，电泳后作为分子量标准参照物，用来对比判断待测 PCR 产物的片段大小、定量产物浓度。原理：DNA 分子带负电荷，电泳时向正极移动；电泳槽里，分子量越小的 DNA 片段迁移速度越快、跑在凝胶最下方。图中条带在凝胶下方，说明向电极 2 方向移动，因此电极 2 是正极。 24. 人的血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值，研究人员欲用乳腺生物反应器来大量生产HSA。图1为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，其中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。HSA只能从血浆中制备，以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的三条途径如图2所示。请回答下列问题： （1）质粒的化学本质是_____。大肠杆菌质粒pBR322可以作为多种目的基因的载体，原因是_____。 （2）据图分析，在构建基因表达载体时，选择_____作为切割质粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和载体的正确连接效率，其原因是_____。 （3）为了排除普通受体细胞（未导入质粒）、空质粒受体细胞（导入pBR322质粒而非重组质粒）的干扰，目的基因导入后进行了进一步筛选：制备甲、乙两种培养基，甲培养基中有新霉素，乙培养基中有氨苄青霉素，含重组质粒的受体细胞在甲培养基上_____（从“能”“不能”中选填）生存，在乙培养基上_____（从“能”“不能”中选填）生存。 （4）将农杆菌与水稻受体细胞混合后共同培养，旨在让Ti质粒的_____进入水稻受体细胞。为检测目的基因的表达情况，可提取受体细胞的蛋白质，用_____进行杂交实验。 （5）据下图分析，利用PCR技术获取HSA基因时，应选择甲、乙、丙、丁四种引物中的_____，需扩增_____次后得到HSA目的基因。 （6）科学家培养出一种转基因羊，其膀胱上皮细胞可以合成人血清白蛋白并分泌到尿液中。其培育方法中将重组质粒通过_____法导入山羊的_____细胞。与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受_____限制，受体来源更广泛。 【答案】（1） ①. DNA ②. 有多个限制酶切割位点、有标记基因、能在受体细胞稳定复制 （2） ①. EcoRⅠ、PstⅠ ②. 可以产生不同的黏性末端，避免目的基因和质粒反向连接和自身环化 （3） ①. 能 ②. 不能 （4） ①. T-DNA ②. 抗原—抗体杂交 （5） ①. 乙、丙 ②. 3 （6） ①. 显微注射 ②. 受精卵 ③. 性别、年龄（发育时期） 【解析】 【小问1详解】 质粒是独立于拟核以外的裸露的小型环状DNA分子，作为载体需具备以下条件：能在受体细胞稳定复制；有一个或多个限制酶切割位点，以便外源基因的插入；具有标记基因，可便于筛选重组质粒； 【小问2详解】 BamHⅠ酶会破坏HSA基因的完整性，EcoRⅠ单酶切会导致目的基因和质粒发生自身环化和随意连接，TthⅢ 1和PstⅠ双酶切会破坏质粒的两个标记基因，根据EcoRⅠ、TthⅢ 1和PstⅠ的位置关系，选择EcoRⅠ和PstⅠ对质粒和目的基因进行切割，避免出现目的基因和质粒发生自身环化和随意连接的现象； 【小问3详解】 重组质粒构建成功只保留了新霉素抗性基因的完整，氨苄青霉素抗性基因被破坏，所以含重组质粒的受体细胞在含新霉素的培养基能生长，在含氨苄青霉素的培养基不能生长； 【小问4详解】 农杆菌的Ti质粒的T-DNA可进入受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上，若要检测目的基因在受体细胞是否成功表达，需用抗原—抗体杂交技术检测； 【小问5详解】 利用PCR扩增目的基因时，引物需与模板链的3'端互补配对，符合要求的引物为乙和丙，第一次扩增，2个DNA包含部分HSA基因以外的序列，第二次扩增，2个DNA包含部分HSA基因以外的序列，2个DNA含一端引物的长片段，第三次扩增，其中包含2个完整的HSA基因； 【小问6详解】 将目的基因导入动物细胞一般选用显微注射法将重组质粒注入受精卵中，乳腺生物反应器只能在雌性动物泌乳期完成HSA基因的表达，而膀胱生物反应器没有这种限制。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2024—2025学年度第二学期期中考试 高二生物试题 第Ⅰ卷选择题部分 一、单项选择题：共15题，每题2分，共30分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 制作腐乳、泡菜、果酒、果醋的过程都离不开微生物发酵。下列叙述正确的是（ ） A. 腐乳制作所需要的适宜温度最高 B. 制作泡菜时应该将泡菜坛装满以制造无氧环境 C. 家庭制作果酒需要接种酿酒酵母菌 D. 在缺少糖源时，乙醇可作为醋酸发酵的底物 2. 红茶菌是发酵液，其中含酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。研究人员选用红茶菌作为果醋饮品的发酵菌种，通过选择合适的发酵条件，实现了一步法发酵制醋，流程如下图所示。相关叙述错误的是（ ） A. 发酵1的目的是获得有活性的红茶菌 B. 热烫可大幅度减少香蕉浆中的多种微生物 C. 发酵2应依次在无氧、有氧条件下进行 D. 可检测发酵2中醋酸含量判断发酵进程 3. 下列有关“酵母菌的纯培养”实验的叙述，合理的是（ ） A. 可用干热灭菌法对培养皿进行灭菌处理 B. 马铃薯琼脂培养基中葡萄糖是唯一碳源 C. 待培养基冷却至40℃时进行倒平板操作 D. 使用后的培养基丢弃前没有必要再灭菌 4. 下列有关植物组织培养技术的叙述，错误的是（ ） A. 利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体 B. 经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞不具有细胞全能性 C. 利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株 D. 实验用的培养基和所有器械都要灭菌，外植体应进行消毒 5. 紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的二萜类生物碱类化合物，是一种有效的抗癌药物，传统生产方法是从红豆杉树皮和树叶中提取，下图为利用植物细胞工程生产紫杉醇的流程图，相关叙述正确的是（　　） A. 紫杉醇是植物代谢活动产生的，属于初生代谢物 B. ①过程中添加生长素和细胞分裂素比例约为1：1 C. ②过程采用液体培养基，需要适当强度的光照 D. ③过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 6. 下列关于动物细胞培养的叙述正确的是（ ） A. 动物细胞培养与植物组织培养依据的原理都是细胞的全能性 B. 动物细胞培养时，定期更换培养液的目的是防止杂菌污染 C. 原代培养过程中，多数细胞悬浮在培养液中生长增殖 D. 动物细胞培养一般用液体培养基，通常还需加入血清等天然成分 7. 下列有关细胞工程技术的叙述正确的是（ ） A. 动物细胞培养过程中加入血清的培养基需要进行高压蒸汽灭菌 B. 大量制备一种单克隆抗体需要大量的B细胞和骨髓瘤细胞 C. 核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物 D. 受体母畜对移入子宫的外来胚胎会发生免疫排斥反应 8. 人类活动严重威胁了郊狼的生存，使其濒临灭绝。科研人员将郊狼甲的体细胞注入家犬a去核卵母细胞中形成重构胚，再移入代孕家犬b体内，获得郊狼乙。下列叙述正确的是（　　） A. 家犬a卵母细胞需培养到MII期再去核 B. 家犬b需注射促性腺激素以促进其超数排卵 C. 郊狼乙细胞内的遗传物质和郊狼甲的完全相同 D. 用胚胎分割等有性繁殖技术可提高胚胎利用率 9. 如图为快速培育优质奶牛的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 精子和卵子分别需经获能、成熟处理后才能受精 B. 胚胎移植前需要对受体牛进行免疫抑制处理 C. 可取②进行性别鉴定，两子代牛犊的性别不同 D. 胚胎移植的实质是生产和孕育胚胎的时间分离 10. 我国是香蕉的主产地之一，大多数栽培香蕉是三倍体品种。传统生产采用吸芽繁殖方式，不仅周期长、产率低、果品不佳，还易积累病毒。下列措施无法达到改良目的的是（ ） A. 通过基因工程转入外源基因提高果实品质 B. 用香蕉顶端分生区作为外植体获得脱毒苗 C. 利用单倍体育种对栽培香蕉进行品种选育 D. 用香蕉叶鞘进行植物组织培养以提高产率 11. DNA重组技术中需要使用工具酶。下列叙述正确的是（ ） A. 限制性内切核酸酶主要是从病毒中分离纯化而来 B. 真核细胞中任意一个DNA片段都能被限制酶切割 C. 被SmaI酶切割后的DNA可以用T4DNA连接酶连接 D. DNA连接酶可以将游离的单个脱氧核苷酸连接成链 12. 某质粒中氨苄青霉素抗性基因（AmpR），四环素抗性基因（TetR）和多种限制酶的识别位点如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 基因工程的载体也可选用噬菌体和动植物病毒 B. 质粒和目的基因用ScaI和HindⅢ切割，用四环素进行筛选 C. 质粒和目的基因用SalⅠ和SphⅠ切割，用氨苄青霉素进行筛选 D. 质粒和目的基因用ScaⅠ和PvuⅠ切割，用四环素进行筛选 13. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（　　） A. 可选用新鲜的香蕉、菠菜、猪肝等作为实验材料 B. 研磨液中2mol/L的NaCl溶液有利于溶解DNA和去除杂质 C. 过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性 D. 将析出的丝状物加入4mL二苯胺试剂后沸水浴加热可出现蓝色 14. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是（ ） A. 该项替换研究中，目前可行的直接操作对象是蛋白质 B. 该项替换研究中，改造前后水蛭素的空间结构未发生改变 C. 改造的水蛭素基因导入微生物后可利用发酵工程生产水蛭素 D. 该项替换研究的思路与按照中心法则合成蛋白质的思路一致 15. 生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，也引起了人们对它安全性的关注。相关叙述错误的是（ ） A. 克隆人会冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念 B. 生物武器等各类大规模杀伤性武器应全面禁止和彻底销毁 C. 转基因作物被动物食用后，目的基因会整合到动物细胞的染色体DNA上 D. 开展风险评估、预警跟踪和风险管理，是保障生物技术安全性的前提 二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 16. 混菌酿造复合果酒是提升果酒品质的常用方法之一。下图为菠萝苹果复合果酒工厂化生产流程。相关叙述正确的有（ ） A. 图中控温发酵是工厂化生产复合果酒的中心环节 B. 发酵前未对果汁进行灭菌是为了避免杀死原料中天然菌种 C. 混合接种酵母菌和乳酸菌进行发酵可提升复合果酒的风味 D. 发酵结束后需对发酵产物采用过滤、调节等方法进行处理 17. 关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验，下列叙述正确的是（ ） A. 琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小 B. 凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 C. 在同一电场作用下，DNA片段越长，向负极迁移速率越快 D. 待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，需及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察 18. 单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了下图所示研究。请据图分析，下列说法正确的是（ ） A. 为使A野化单峰骆驼超数排卵，需要注射适量的促性腺激素 B. 应用胚胎移植技术可以充分发挥C受体雌性的优良遗传特性 C. 对图示中的早期胚胎进行移植，出生后代之间可能差异很大 D. 卵裂期，细胞数目增多总体积不增加，有机物总量增加 19. 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。下图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1~4表示DNA上引物可能结合的位置，下列叙述正确的是（ ） A. 若受体细胞为大肠杆菌，则蛛丝蛋白需要进一步加工才具有相应的功能 B. 若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏2个磷酸二酯键 C. 若用PCR技术获取目的基因，则图中的2、3分别是2种引物结合的位置 D. 选择图中适宜引物进行PCR扩增，经过5次循环可获得32个等长的蛛丝蛋白基因 第Ⅱ卷非选择题部分 三、非选择题：本部分包括5题，共58分。 20. 尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后，被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 1.4g 2.1g 0.2g 1.0g 10.0g 1.0g （1）根据培养基的成分分析，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？_____（填“能”或“不能”），原因是_____。 （2）通常在实验室培养微生物时，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行_____。培养细菌时，一般需要将培养基的pH调至_____。 （3）某同学取稀释倍数为106倍的菌液0.2mL接种后，测得平板上菌落数为156、178和191，则每克样品中的菌落数为_____个。 （4）某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_____，为避免此种现象发生，正确的操作方法是_____。 （5）图1和图2是土壤中某细菌的分离结果图，其对应的接种方法分别是_____和_____，其中，_____（填“图1”或“图2”）所用的接种方法可用来对活菌进行计数，其统计的数目往往比活菌的实际数目偏低，这是因为_____。 21. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出具有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。回答下列问题： （1）过程①所需要的酶是_____，用相同的酶处理甲、乙的时间有差异，原因可能是_____。 （2）需要向原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_____。过程②可用物理法和化学法诱导原生质体融合，物理法包括_____。 （3）过程③筛选杂种细胞时，在光学显微镜下观察到融合的细胞有_____存在时，可作为初步筛选的标志。过程④是脱分化，脱分化是指_____。 （4）利用单倍体育种技术，也可以利用上述植物甲和植物乙培育出高产耐酸的新品种丙。下表是相关实验中的一些步骤，请根据题意完成以下表格。 实验目的 方法步骤要点 收集花粉 ①将品种甲和品种乙_____后获得F1，收集F1的花粉 获得可增殖分化的细胞 ②利用_____技术中的脱分化过程，获得_____ 诱导单倍体幼苗的形成 ③通过改变培养基中的_____，实现诱导分化 获得染色体加倍的植株 ④用_____处理单倍体幼苗 获得新品种丁 筛选符合要求的植株，收获其所结种子 22. PSMA是某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白，CD28是T细胞表面受体。将两株不同杂交瘤细胞融合形成的双杂交瘤细胞，既能够悬浮在培养基中生长繁殖，又可以产生双特异性抗体PSMA×CD28。图1所示为双特异性抗体PSMA×CD28的制备流程，图2所示为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理。 （1）①过程需给小鼠分别注射PSMA蛋白、CD28蛋白的目的是_____。 （2）③过程常用的方法有_____（答出2点即可）。④过程的培养基从用途上看属于_____培养基。 （3）图1至少进行_____次抗体检测进行筛选才能得到双杂交瘤细胞XY，筛选时需在96孔板的孔洞中加入_____。 （4）获得的杂交瘤细胞XY要置于含有_____混合气体的培养箱中进行培养。对⑤过程得到的双杂交瘤细胞进行传代培养前，需用_____收集。 （5）该双特异性抗体不同于普通单抗的优点是_____。 （6）关于该双特异性抗体产生过程的说法正确的是_____。 A. 人对鼠源抗体可能会产生免疫排斥，通常需要人源化改造 B. 克隆化培养杂交瘤细胞XY分泌的抗体就是图2所示的抗体 C. 所需抗体可以从细胞培养液中和小鼠腹水中获得 D. 单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可大量制备 23. 有人说，生物学可分为两个阶段——有PCR技术的生物学和没有PCR技术的生物学。由此可见PCR技术对于生物学发展是举足轻重的。回答下列与PCR相关的问题： （1）PCR技术的中文名称是_____，其主要原理是_____。扩增目的基因时，需要Taq酶，该酶显著的特点是_____。 （2）PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、_____三步，其中复性的结果是_____。 （3）热启动PCR可提高扩增效率，方法之一是：先将除Taq DNA聚合酶以外的各成分混合后，加热到80℃以上再混入酶，然后直接从94℃开始PCR扩增。下列叙述正确的有_____。 A. Taq DNA聚合酶最适催化温度范围为50～60℃ B. 与常规PCR相比，热启动PCR可减少反应起始时引物错配形成的产物 C. 两条子链的合成一定都是5′端向3′端延伸 D. PCR产物DNA碱基序列的特异性体现了Taq酶的特异性 （4）一般地，首轮PCR之前预变性的目的是_____。最后一轮PCR结束后应维持72℃下7min，其目的是_____。 （5）PCR扩增得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳后的结果如下： 实验中，DNA marker是一组已知长度和含量的标准DNA片段的混合物，DNA marker的作用是作为_____的参照物。已知在该缓冲液中DNA带负电，图中代表正极的电极是_____。 24. 人的血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值，研究人员欲用乳腺生物反应器来大量生产HSA。图1为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，其中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。HSA只能从血浆中制备，以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的三条途径如图2所示。请回答下列问题： （1）质粒的化学本质是_____。大肠杆菌质粒pBR322可以作为多种目的基因的载体，原因是_____。 （2）据图分析，在构建基因表达载体时，选择_____作为切割质粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和载体的正确连接效率，其原因是_____。 （3）为了排除普通受体细胞（未导入质粒）、空质粒受体细胞（导入pBR322质粒而非重组质粒）的干扰，目的基因导入后进行了进一步筛选：制备甲、乙两种培养基，甲培养基中有新霉素，乙培养基中有氨苄青霉素，含重组质粒的受体细胞在甲培养基上_____（从“能”“不能”中选填）生存，在乙培养基上_____（从“能”“不能”中选填）生存。 （4）将农杆菌与水稻受体细胞混合后共同培养，旨在让Ti质粒的_____进入水稻受体细胞。为检测目的基因的表达情况，可提取受体细胞的蛋白质，用_____进行杂交实验。 （5）据下图分析，利用PCR技术获取HSA基因时，应选择甲、乙、丙、丁四种引物中的_____，需扩增_____次后得到HSA目的基因。 （6）科学家培养出一种转基因羊，其膀胱上皮细胞可以合成人血清白蛋白并分泌到尿液中。其培育方法中将重组质粒通过_____法导入山羊的_____细胞。与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受_____限制，受体来源更广泛。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $