2026届山东日照市高三下学期考前预测生物试卷

2023级高三模拟考试生物学试题 参考答案及评分标准 2026.06 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合 题目要求的。 1.C2.A3.D4.D5.B6.B7.A8.A 9.C10.B 11.C12.C13.D14.D15.D 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题给出的四个选项中，有的只有一个选项正确， 有的有多个选项正确，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16.ABD17.BC18.C 19.ABC 20.CD 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21.(9分) (1)吸收光能(1分) 类囊体和叶绿体基质(2分) (2)非气孔(1分) 高温胁迫下气孔导度下降，但胞间C02浓度升高(2分) (3)高温胁迫导致D1蛋白含量减少(1分)抑制高温胁迫导致的D1蛋白降解(2分) 22.(15分) (1)无需去雄(1分) (2)减数分裂I完成后(2分) 1/2(2分) (3)恢复系(2分) 减数分裂过程中，8号染色体的非姐妹染色单体间发生互换，导 致D与不育系亲本的分子标记重新组合，进入配子中(2分)N(2分) (4)8号染色体以外的染色体上(2分) 花粉染色率100%、75%、50%的植株比 例约为7：3：2(2分) 23.(9分) (1)交感神经(1分) 神经(1分) (2)下丘脑和垂体(1分) 肾上腺素(1分) 肾上腺素的分泌属于神经调节，糖皮质激素的分泌还需要通过激素调节，而神经调节反应速度快于体 液调节(2分) (3)手术切除肾上腺(1分) 都升高(2分) 24.(10分) (1)分解者(1分) 与其他物种的关系（种间关系）(1分) (2)环境选择(1分) 泛化种(1分) 高环境压力导致可利用的生存资源减 少，泛化种生态位较宽，可利用的资源和空间范围大，适应能力强(2分) (3)特化种微生物相对数量减少(1分) 物质循环(1分) (4)种类、数量和分布(2分) 25.(12分) (1)不能(1分) AD与模板结合的位置不确定(2分) 序列（或基因）数据库(1分) (2)TSC启动子(1分) (3)SeI、HidⅢ(2分) (4)潮霉素(1分) F3与F4(2分) F1与F2(2分)参照秘密级管理★启用前 试卷类型：A 2023级高三模拟考试 生物学 2026.05 注意事项： 1,答题前，考生将自己的姓名、考生号、座号填写在相应位置，认真核对条形码上的姓 名、考生号和座号，并将条形码粘贴在指定位置上。 2.选择题答案必须使用2B铅笔（按填涂样例）正确填涂，非选择题答案必须使用0.5毫 米黑色签字笔书写，绘图时，可用2B铅笔作答，字迹工整、笔迹清楚。 3.请按照题号在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、 试题卷上答题无效。保持卡面清洁，不折叠、不破损。 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1.锌离子在维持蛋白质结构稳定、调节蛋白质活性等方面具有重要作用。细胞内的锌能 够与蛋白质中的半胱氨酸(C3HNO2S)结合构成锌指蛋白。最近的研究表明，高浓度 的锌离子能够结合谷胱甘肽还原酶(GS)的活性位点并影响其活性，从而使得氧化 型谷胱甘肽水平升高，导致癌细胞死亡。下列叙述错误的是 A.组成锌指蛋白的元素有6种 B.锌在细胞内大多以离子的形式存在 C.锌主要位于锌指蛋白中氨基酸的侧链基团 D.补锌有利于改变GSR的活性诱导癌细胞死亡 2.在盐碱地种植的普通作物细胞会因盐碱胁迫产生过量的H2O2,H2O2积累会破坏细胞 结构，最终导致作物死亡或减产。研究发现，蛋白AT1能够降低细胞膜上通道蛋白 PP2s的磷酸化水平，导致其运输H2O2能力降低，造成细胞内H2O2积累。下列叙述 错误的是 A.磷酸化后的PP2s结合HO2分子的能力更强 B.磷酸化的PP2s能将H2O2顺浓度运输到细胞外 C.PP2s的合成起始于细胞质基质中游离的核糖体 D.敲除AT1基因可能会提高农作物的抗盐碱能力 3.内吞死亡是一种细胞程序性死亡方式。它常由葡萄糖缺乏等应激条件触发，特征是一 个活细胞被另一个细胞内吞，形成“细胞套细胞”结构，最终被溶酶体降解。后来的 研究发现，CDH1基因正常表达能激活内吞死亡，清除有潜在风险的细胞以抑制肿瘤 的发生。下列说法错误的是 A.内吞死亡和细胞凋亡均存在基因选择性表达 B.溶酶体含有的多种水解酶可清除被包裹的细胞 C.从功能上分析，CDH1基因可能属于抑癌基因 D.人成熟红细胞发生内吞死亡时，其CDH1基因的转录水平较高 4.诱导产生母源性二倍体（只有母系遗传物质）的方法有：①抑制减数分裂I形成极体 过程；②抑制减数分裂Ⅱ形成极体过程；③抑制被精子激发卵细胞的第一次卵裂。科 研人员利用某个基因型为BbTt的动物快速建立了纯合母源性二倍体。已知B、b和T、 t两对基因位于一对染色体上，且减数分裂过程中两对基因发生了重组。下列叙述错 误的是 A.该动物正常减数分裂会产生四种基因型的卵细胞 B.通过途径①获得的母源性二倍体全为杂合子 C.通过途径③获得的母源性二倍体全部为纯合子 D.通过途径①和②获得的母源性二倍体基因型不同 高三生物学试题第1页（共8页) 5. 研究人员在普通大麦(2n=14)中发现了一种特殊的“平衡三级三体”品系，该品系 一对正常染色体上带有一对雄性不育基因和一对绿种皮基因y,并额外多出一条异 常染色体，其上带有一个可育基因N和黄种皮基因Y,已知N对n为显性，Y对y 为显性。减数分裂时，异常染色体无法配对，随机分配到子细胞中。含异常染色体的 花粉败育，而卵细胞的存活率为25。现用该品系植株自交，后代中既有可育个体， 又有雄性不育个体。不考虑染色体互换和突变，下列说法错误的是 A.该品系减数分裂I后期，会有16条染色单体移向细胞一极 B.该品系自交后代中可育个体与雄性不育个体的比例为2：3 C.该品系植株连续自交，F3代中可育基因N的基因频率为1/8 D.自交后代中，绿皮种子可用于制备杂交种，黄皮种子自交可用来保持品系 6.线虫体内存在一种复合体(DCC),当其与X染色体结合后会抑制X染色体上相关 基因表达。DCC的作用受xol-1基因的表达产物调控，机制如下图所示。下列叙述正 确的是 基因表达水平(%) DCC 050100 XX(雌性) 不表达 x0k-1基因< DCC 基因表达水平/(%) 50100 X0(雄性) A.DCC作用于X染色体后会使其基因结构被破坏 B.若xol-1基因缺失，可能会导致雄性线虫发育异常 C.xol1基因在雄性线虫中表达，其表达产物可增强DCC作用 D.上述机制可增大雌雄线虫间X染色体上相关基因总表达量的差异 7.阈电位是细胞产生动作电位的“点火开关”。在神经元或肌肉细胞等可兴奋细胞中， 只有当外部刺激使膜电位由静息状态到达某一特定临界值时，才会激活电压门控Na 通道，产生兴奋。神经细胞所处的环境能够影响其兴奋性，下图中甲、乙和丙表示不 同环境下静息电位或阈电位的变化情况。下列叙述正确的是 A.在神经细胞兴奋过程中存在不同的Na转运蛋 +30 白起作用 B.将神经细胞置于K+浓度较高的环境，静息电 -30 位会如甲所示 C.神经细胞在环境乙中比丙中的电压门控Na+通 -60闲电位 道更容易激活 -90 D.在一定范围内，随刺激强度增加，动作电位的 静息电位 峰值增大 -120 正常 甲 乙丙 8.植物激素和环境因素均能参与调节植物生命活动。据此，植物生长调节剂、环境因子 调控等在农业生产中已有广泛应用。下列有关叙述正确的是 A.在黄瓜的雄花和雌花分化期施用适宜浓度的乙烯利可以显著提高雌花比例 B.用赤霉素类生长调节剂处理拔节期的玉米，可提高玉米植株的抗倒伏能力 C.植物生长调节剂是分子结构和生理效应均与植物激素类似的人工合成物质 D.火龙果是长日照植物，对火龙果植株进行适当遮光处理，可使其提前开花 高三生物学试题第2页（共8页) 9.血容量是指人体内血液的总量，下图是血浆渗透压变化和血容量的变化对血浆中抗利 尿激素(ADH)浓度影响的示意图。下列叙述错误的是 A,研究血浆渗透压变化对血浆ADH水 平的影响时，血容量应保持稳定 最大 最大 B.大量失血后，机体分泌ADH增多， 患者肾小管细胞对水的重吸收增加 C.大量失血后，可通过及时大量补水来 恢复患者的血浆渗透压和血容量 最小 最小 D.ADH的分泌对血浆渗透压变化的反 -30369 -30-20-1001020 血浆渗透压变化(%) 血容量变化（%) 应比对血容量变化的反应更敏感 10.为控制某地区鼠害，研究人员系统评估了多种因素对某鼠种群密度变化的影响，相关 性如图所示。下列叙述错误的是 2.752.802.852.902.953.00 1.856.8511.8516.8521.85 0.150.200250.300.35040 低植被叶面积指数/m子m 土壤温度/℃ 土壤体积含水量/mm) 注：效应值越接近1，正相关越显著；效应值越接近-1，负相关越显著。 A.实验前可用标记重捕法估算该鼠的种群密度作为对照 B.土壤温度和含水量均是影响鼠种群密度的密度制约因素 C.低植被叶面积指数和土壤温度对鼠种群密度的影响效应不同 D.土壤体积含水量为0.35m3.m3时，对该鼠种群密度的促进效应较强 11.滨螺是一类主要栖息于潮间带的软体动物，捕食多种藻类， 12个 b 尤其喜食小型绿藻浒苔。研究人员调查了以浒苔为初始优势 种的某潮间带中，藻类种数随滨螺密度变化的关系，结果如 章10 款8 图所示。下列叙述错误的是 6 A.ab段出现与藻类间种间竞争压力减小有关 B.bc段出现与滨螺对其他藻类的取食增加有关 3 C.中等捕食压力有利于提高藻类的种群密度 0 10020030d D.若滨螺无取食偏好，也可能会出现类似结果 滨螺密度/（个·m3 12.“草一藻全链条生态修复技术”是在坡面及滨岸带种植高效菌草，利用其发达根系固 土保水、吸收污染物；在水域构建由沉水植物、微藻等生物组成的“水下森林”体系， 同时可投加生物酶加速污染物分解，实现水体和底泥同步净化。改良后的菌草是良好 的饲料、板材、纤维来源。下列说法错误的是 A.该技术有效选择生物组分并合理布设，利用了生态工程的自生原理 B.收割的菌草用于制作饲料，有利于物质的循环再生和能量的多级利用 C.构建“水下森林”提高了水域生态系统的物种丰富度和恢复力稳定性 D.该生态修复技术能够提高生态系统生物多样性的直接价值和间接价值 13.某实验小组利用某种方法接种并分离菌株的结果如下图所示，下列说法错误的是 A.该实验中采用的接种方法可以对微生物进行计数 B.分离微生物所用的接种工具在接种前后均应灭菌 ● C.接种后应在培养皿底部注明组别、接种时间等信息 D.图示的实验结果可能是由于取样前未摇匀培养液所致 高三生物学试题第3页（共8页） 14.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的说法，正确的是 A.向含DNA的滤液加入冷酒精后析出的白色丝状物为蛋白质 B.为提高DNA提取量，可将研磨液过滤后在室温下静置过夜 C.实验过程中可进行两次离心，且两次离心均需要取上清液 D.DNA沸水浴下遇二苯胺试剂呈蓝色，此时DNA空间结构被破坏 15.为探究猪流行性腹泻病毒蛋白Nspl5是否与宿主蛋白SLC25a3结合，研究人员构建 两种重组质粒分别表达融合蛋白Flag-Nspl5和Myc-SLC25a3,转化后获得三组细胞 ①②③。利用抗lag抗体分别收集各组中能与之结合的蛋白，再分别用抗Flag、抗 MyC的单克隆抗体检测，同时取各组细胞总蛋白进行相同检测，结果如图所示。下列 分析正确的是 ②⑧ A.制备抗Flag单抗时需在已免疫动物体内分 Flag-Nsp15+ -+ 离得到记忆B细胞 Myc-SLC25a3 ++ B.若使用抗Myc抗体收集蛋白，则①组中同 卫 Flag 样会出现Flag条带 (抗Flag抗体收集蛋白) C.②组P产物中无MyC条带，说明细胞内 一 Myc 不表达SLC25a3蛋白 Flag D.③组P产物中有Myc条带，表明Nspl5 细胞总蛋白 能与SLC25a3结合 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目 要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16.剧烈运动时，肌肉细胞产生的乳酸在肝细胞内生成葡萄糖，葡萄糖进入血液再进入肌 肉细胞氧化供能的过程称为乳酸循环，如图所示。以下说法错误的是 肌肉 血液 肝脏 肌糖原 肝糖原≤ 6磷酸葡萄糖 6磷酸葡萄糖 葡萄糖← 葡萄糖← ,葡萄糖 丙酮酸K ATP 丙酮酸 ATP NADH ATP NAD ↑Y NADH NAD' CO,+H2O乳酸 》乳酸 乳酸 A.肌细胞无氧呼吸时，葡萄糖中的能量大部分都以热能形式散失 B.丙酮酸转化为乳酸利用的NADH来自细胞质基质和线粒体基质 C.肌肉细胞中可能缺乏催化6-磷酸葡萄糖转化为葡萄糖的相关酶 D.剧烈运动时，肌细胞中乳酸的增加有利于肝脏中肝糖原的积累 17.正常情况下，人体的体温调定点在37℃左右。病毒引起机体产生L-6引发炎症反应， L-6可提高环氧化酶(COX)的活性使体温调定点升高，导致机体发烧。临床上常用 皮质醇类似物地塞米松进行降温。肾上腺皮质分泌的皮质醇通过调控基因的表达降低 炎症反应并使体温调定点下调。下列说法错误的是 A.病毒导致体温调定点上升后，机体的冷觉感受器兴奋 B.地塞米松与靶细胞膜上的受体结合后，进而调控相关基因的表达 C.皮质醇可通过提高COX基因的表达，降低L-6对体温调定点的调控效应 D.长期服用地塞米松可能会导致肾上腺皮质的分泌功能降低 高三生物学试题第4页（共8页) 18.某种兔毛的颜色黑色、棕色、灰色与多对基因有关，从一个黑色显性纯合的野生型兔 品系中选育出4个不同的单基因隐性突变纯合品系P1~P4。为探究兔毛色的遗传，科 研人员进行了如表所示的杂交实验。不考虑基因位于XY同源区段和致死现象。下列 说法错误的是 组别 亲本组合 F1自由交配得的F2表型及比例 P1×野生型 黑色 黑色（9)：灰色(9)=3：1 黑色（♂)：灰色（♂)=3：1 Ⅱ P1（♀)×P2（3) 黑色 黑色：灰色=1：1 I P1(9)×P3(6) 黑色 黑色：棕色：灰色=9：3：4 IV P1(♀)×P4(3) 黑色 黑色：棕色：灰色=9：3：4 P3(♀)×P4（8) 黑色 黑色：棕色=9：7 A.组别Ⅱ的F2中黑色兔的基因型有1种，灰色兔的基因型有2种 B.由上述实验结果可推测，控制兔毛色的基因至少位于3对同源染色体上 C.若P4突变基因位于常染色体上，则P3突变基因可能位于常染色体或X染色体 D.若P3突变基因位于常染色体上，则P4突变基因可能位于常染色体或X染色体 19.某研究机构调查了一段时间内某热带雨林生态系统的能量流动情况，调查结果如下表 所示，其中甲、乙、丙、丁分别代表该生态系统各营养级的所有生物，GP代表各营 养级的同化量，R代表各营养级生物呼吸作用消耗的能量。下列叙述正确的是 营养级 GP X R 甲 25.2 18.5 乙 3.9 0.8 3.1 丙 214.3 78.5 135.8 丁 1678.6 635.7 1042.9 分解者 369.8 50.1 319.7 注：表中能量数值单位为：10J/(m2a) A.由表中数据可知，该时间段内此生态系统能量的输入大于输出 B. 表中X代表各营养级用于生长发育繁殖的能量，“？”的数值为6.7 C.该生态系统中第三营养级与第四营养级间的能量传递效率约为15.5% D.该生态系统中的食物链为丁→丙→甲→乙，能量沿该食物链逐级递减 20.工业上常利用黑曲霉通过深层通气发酵生产柠檬酸，其发酵流程如图所示。下列分析 正确的是 玉米粉淀 玉米清液配制发酵培养基 发酵蝶分离、提纯柠樽酸 内发酵 黑曲霉孢子接种，种子培养基 A.种子培养基为固体培养基，可用于对黑曲霉进行扩大培养 B.发酵培养基和种子培养基加入到发酵罐前需经过严格灭菌处理 C. 深层通气能够增加发酵罐内的溶氧量，有利于柠檬酸的积累 D.发酵结束之后，可以根据柠檬酸的性质采取适当的措施进行提取分离 高三生物学试题第5页（共8页） 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21.(9分)高温胁迫是植物生长过程中常见的胁迫因子，科研人员研究了高温胁迫 对野生水稻光合作用相关指标的影响，结果如表所示。 温度 光能转化效率 气孔导度 胞间C02浓度 25℃ 0.82 0.38 284.45 44℃ 0.62 0.25 314.25 (1)在叶绿体内部巨大的膜表面上，分布着许多色素分子，其主要功能是 此外在 中还有许多进行光合作用所必需的酶。这是叶绿体进行光合作用的结构基 础。 (2)据表分析，高温胁迫导致野生水稻光合速率降低，此时限制光合作用的主要因 素是 (填“气孔”或“非气孔”)因素，依据是 (3)D1是光反应过程中的重要蛋白，通常与光合色素结合形成光合复合体PSⅡ，高 温会使PSⅡ受损，光合速率下降。科研人员向水稻中转入基因X获得了耐高温的R品系 水稻并检测了野生型和R品系水稻在不同温度条件下D1蛋白的含量，结果如下图所示。 25℃ 44℃ 野生型R品系 野生型R品系 D1稀 参考蛋白一 结合上图分析高温胁迫下光合速率下降的原因是 。进一步的研究发现，44℃ 条件下野生型水稻与R品系水稻细胞中D1蛋白合成相关基因的表达水平基本相同，由此 推测基因X能够 ，从而使光合速率维持在较高水平。 22.(15分)在农业生产中，利用雄性不育系制备杂交种是简化制种的有效手段。为 研究水稻雄性不育及其育性恢复机制，研究人员进行了以下研究。 (1)在杂交育种时，利用雄性不育系制备杂交种的优点是 (2)研究发现，若花粉中不能积累淀粉，表现为花粉不育。将雄性不育品系I与纯合 育性恢复系Ⅱ杂交，获得F1。用碘液对花粉染色，品系I、恢复系Ⅱ和F,的花粉染色率分 别为0、100%、50%，由此推测该育性恢复基因发挥作用的时期为 。 若该性状由 对等位基因控制，F1自交，F2中花粉染色率为100%的植株比例应为 (3)为确定上述育性恢复基因（记为“D”)在染色体上的位置，对F2进行检测， 发现大多数植株8号染色体的分子标记类型均与花粉育性表现一致，但其中有极少数花粉 染色率为100%的植株检测到不育系亲本的分子标记，结果如表所示（已知：基因和分子 标记间的重组率与二者的距离呈正相关)。 植株类型 8号染色体的分子标记 花粉育性 M N (染色率) 类型1 a a 6 100% 类型2 6 100% 注： “a”表示来自恢复型亲本；“b”表示来自不育型亲本 ①F2中花粉染色率为100%的植株中，大多数个体的分子标记M、N和P来自 亲本。 ②表中两种类型植株的分子标记和花粉育性不一致的原因是 ③根据表中数据推测，距离D最近的分子标记是 0 高三生物学试题第6页（共8页） (4)科研人员将另一功能相似的育性恢复基因E导入恢复系Ⅱ中，然后培育获得了 纯合育性恢复系I,将恢复系Ⅲ与品系【杂交，测得F1花粉染色率约为75%。由此推测 基因E导入的位置是 ；若F1自交，F2植株花粉染色率的类型及比例为 则支持上述推测。 23.(9分)经典理论认为：急性应激状态下，机体通过“自主神经一肾上腺髓质轴” 和“下丘脑一垂体一肾上腺皮质轴”调控血糖升高，这两条途径需数十分钟才能升高血糖， 不符合紧急情况下对能量的需求。但近来研究发现，“下丘脑一交感神经一肝脏轴”在早 期应激血糖的产生中十分关键。 自主神经 肾上腺髓质→肾上腺素 途径① ◆血糖升高 危险 下丘脑 肝脏 刺激 途径② 垂体 斗肾上腺皮质→糖皮质激素 途径③ 交感神经 (1)应激状态下，途径①中支配肾上腺髓质的自主神经中，占据优势的是 (填“交感神经”或“副交感神经”)。危险刺激导致促肾上腺皮质激素释放激素分泌增 加是 (填“神经”“体液”或“神经一体液”）调节的结果。 (2)糖皮质激素的分泌存在负反馈调节，参与该过程的结构中含有糖皮质激素受体 的器官是 。 危险刺激时，肾上腺素和糖皮质激素含量先升高的是 ，原因 是 (3)用电刺激小鼠足底可引起急性应激反应，造成早期应激血糖升高和延迟血糖升 高。因此研究团队质疑经典理论，提出假说：急性应激状态下，机体早期应激血糖升高与 肾上腺无关。为了验证该假说，请完善下表中的实验方案。 对照组 实验处理 假手术，刺激足底后立即测定血糖水平 实验组 刺激足底后立即测定血糖水平 预期结果 两组小鼠的早期应激血糖水平变化是 24. (10分)为探究环境压力对土壤微生物群落的影响，研究人员对黄土高原进行研 究，发现随着环境压力增大，微生物α多样性指数逐渐降低，平均生态位宽度逐渐增大。α 多样性指数与物种丰富度呈正相关。生态位宽度是指生物利用资源或占据空间的范围，其 中生态位窄的生物为特化种，生态位宽的生物为泛化种。同时检测了TI值，结果如图 所示。 ·细菌 ◆真菌 注：BNTI值用于衡量微生物 群落物种的分布，其值大于2 说明环境选择主导微生物聚 2 集，小于2时说明随机分布主 导微生物聚集。 0 0.20.40.60.8环境压力指数 (1)土壤中腐生微生物属于生态系统组成成分中的 0 研究某细菌生态位通 常要研究它所处的空间位置、占用资源的情况以及 等。 (2)结合图中数据分析，在高环境压力下，土壤微生物聚集主要受 影响， 高三生物学试题第7页（共8页） (填“泛化种”或“特化种”)逐渐占据优势，推测其原因是 (3)为探究环境压力影响土壤生态功能的机制，研究人员检测发现随环境压力增大， 微生物群落中某基因类群的相对含量下降。该基因类群主要存在特化种中，参与氮代谢、 甲烷代谢和特殊有机物分解等特定功能活动的调控。请分析该基因类群相对含量下降的直 接原因是 ，该变化主要影响土壤生态系统的功能。 (4)综合上述研究结果，环境压力可通过调控微生物的 影响土壤生态系统 功能。 25.(12分)某科研小组利用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)技术进行了小麦耐盐基 因(TaSC)启动子的克隆及功能研究。 (I)TaSC启动子的克隆：TAIL-PCR是一种克隆已知序列旁侧未知序列的分子生物 学技术，分别利用三种较长的特异性引物SP1、SP2、SP3和较短的随机简并引物AD(特 异性较低)组合，依次以基因组、第一组PCR产物、第二组PCR产物为模板，进行三组 PCR反应扩增特异性产物的过程。第三组PCR扩增反应结束后，理想情况下产物电泳可 以得到一条清晰的条带，该产物的长度 (填“能”或“不能”)确定，原因是 然后对扩增产物进行电泳、回收并测序，再通过检索 进行序列比对，来确定是 否克隆了完整的IaSC启动子。 特异引物 SPL SP2 P 已知序列 目标序列如 「非目标序列 图1 (2)分段启动子的克隆：根据 的碱基序列设计不同引物，以小麦基因组为 模板进行PC扩增，得到5种不同长度渐进缺失的ISC启动子，如图2所示。 TaSC启动子（含调控序列) T6SC基因终止子 XbaLR 图2 (3)基因表达载体的构建及转化：将各启动子片段与含有报告基因GS(葡萄糖苷 酸酶基因，其表达产物可水解X-Gūc呈蓝色)的载体进行拼接，分别导入农杆菌后侵染 拟南芥。为将扩增后的片段定向插入载体T-DNA中启动GUS基因的表达，在F1~F5与R 末端添加的序列所对应的限制酶分别为 。 将目的基因导入拟南芥细胞后进行植物 组织培养。 卡那霉素抗性基因GUS基因 潮露素抗性基因 限制酶识别序列及切割位，点： oI HindXbaI Hind IIl:5'-AAGCTT-3' XbaL:5'-TCTAGA-3' 终止子 Xho I:5'-CTCGAG-3 T-DNA Spe I:5'-ACTAGT-3' 图3 (4)检测启动子的活性中心：用含 的培养基对组培苗进行筛选，再进行GUS 染色。结果显示，含F1~F3与R扩增产物的转基因拟南芥呈GUS阳性（其中F2、F3对 应的拟南芥呈弱阳性)，而4、5与R扩增产物的转基因拟南芥无显色反应。由此推出， 耐盐基因(TaSC)启动子的活性中心位于 对应序列之间，增强启动子功能的调控 序列可能存在 对应序列之间。 高三生物学试题第8页（共8页）