吉林通化市梅河口市第五中学2025-2026学年高二下学期5月阶段检测生物试题

**基本信息** 以微生物发酵、细胞工程、基因工程为核心，结合“土坑酸菜”“转基因耐旱玉米”等社会热点与科技前沿，注重实验数据分析与综合应用的高二生物月考卷。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|15/30|微生物代谢（如醋发酵）、细胞计数、植物组织培养|结合杜康造醋传说，考查醋酸菌代谢（生命观念）；通过稀释涂布平板法计算活菌数（科学思维）| |多选题|5/15|生态系统能量流动、土壤微生物分解作用|分析淡水湖泊能量金字塔，辨析分解者作用（生态观）；设计对照实验探究土壤微生物分解作用（探究实践）| |非选择题|5/55|高产菌株筛选、单克隆抗体制备、基因工程|21题通过亚甲基蓝透明圈筛选ε-PL高产菌株，整合培养基配方与抑菌实验（科学思维）；23题尼帕病毒单克隆抗体制备，涉及细胞融合与抗体检测（探究实践）|

高二生物 一、单选题(共30分、每题2分) 1. 传说杜康的儿子墨塔在一次酿酒时发酵过头，直至第21天开缸时，发现酒液已变酸但香气扑鼻、酸甜可口，于是将其命名为“醋”。下列叙述正确的是（　　） A. 醋酸菌是好氧菌，最适生长温度为18-30℃ B. 当缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸 C. 果醋制作时先通气进行酒精发酵，再密封进行醋酸发酵 D. 利用醋酸菌细胞呼吸发酵制作酸奶时，溶液的pH逐渐降低 2. 某实验小组在对某大肠杆菌培养液中的大肠杆菌进行计数时，样品的稀释情况如图所示，涂布平板时各组所用稀释液的体积均为0.05 mL。若在F组稀释液对应的培养基中测得的菌落数的平均值为34个，则1 mL原培养液中大肠杆菌的活菌数约为（　　） A. 6.8×106个 B. 6.8×108个 C. 1.7×107个 D. 1.7×108个 3. 用植物组织培养技术快速繁殖菊花时，所需培养基的配方如表所示。MS表示培养基，NAA为生长素类似物，6-BA为细胞分裂素类似物。 培养基 配方 结果 甲 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 分化出丛状苗 乙 MS+NAA0.1mg/L 分化出根 下列叙述正确的是（ ） A. MS培养基中最常用的碳源是葡萄糖 B. 菊花外植体需灭菌后才能接种到培养基中 C. NAA和6-BA比植物天然激素的作用时间持续更长 D. 将培养基甲中的丛状苗转移至培养基乙中培养不需要光照 4. 研究人员利用植物体细胞杂交技术，尝试将耐盐碱的野生番茄（核基因组和细胞质基因均完好）与高产但不耐盐碱的栽培番茄（用X射线处理其原生质体，使核基因失活，细胞质基因完好）进行融合，以获得既耐盐碱又高产的番茄新品种丙，过程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. ①过程应在低渗溶液中用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B. ②和③过程中，只有③过程发生了基因的选择性表达 C. 再生植株丙的形成证明了原生质体甲或乙仍具有全能性 D. 丙的耐盐碱性状可能来自野生番茄的核基因和细胞质基因 5. 下图为小鼠细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 传代培养至一定代数，所培养的细胞全部都会衰老死亡 B. 为了保证细胞培养所需的无菌环境，可以添加适量的抗生素 C. 培养过程体现了细胞的全能性且存在基因的选择性表达 D. 培养过程中，需要CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸 6. 央视3.15晚会曝光老坛酸菜包里的部分酸菜是从外面收购的“土坑酸菜”。泡菜古称葅，是指为了利于长时间存放而经过发酵的蔬菜。它是一种在低浓度食盐液中泡制的蔬菜乳酸发酵加工品。下列叙述正确的是（ ） A. 泡菜主要是靠盐的渗透压来抑制腐败微生物的生长和繁殖 B. 腌制时间过短和制作过程污染严重等会使土坑酸菜易腐烂变质 C. 泡菜之盐水加热煮沸后应立即加入陈泡菜液以防止杂菌污染 D. 制作泡菜时要选择新鲜的原料，且为创设无氧环境泡菜坛要装满 7. 下面是有关啤酒的工业化生产的流程。下列有关叙述错误的是（ ） 发芽焙烤碾磨糖化蒸煮发酵消毒终止 A. 焙烤可以杀死大麦种子的胚，并使淀粉酶变性失活 B. 发芽的过程中大麦会产生淀粉酶，便于将大麦中的淀粉分解为葡萄糖进行酒精发酵 C. 发酵的过程是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的过程 D. 蒸煮可以杀死糖浆中的微生物，避免杂菌污染 8. 植物细胞工程包括植物组织培养、植物体细胞杂交等技术，具有广泛的应用前景和实用价值。下列对这些操作或应用的描述错误的是（　　） A. 可用PEG诱导植物原生质体融合，再生出细胞壁是融合成功的标志 B. 获取植物原生质体时，体现了酶的专一性 C. 植物体细胞杂交技术去壁前，需对两种植物细胞进行灭菌处理，以防止杂菌污染 D. 植物培养基中常用的植物生长调节剂，一般可以分为生长素类、细胞分裂素类 9. 将诱导多能干细胞（简称iPS细胞）移植给急性心肌梗死小鼠，检测发现小鼠心肌电生理指标逐渐恢复正常。下列说法不合理的是（　　） A. 该实验仅需要正常小鼠作为对照组 B. 与成体干细胞相比，iPS细胞的分化潜能更强 C. 因为诱导过程无需破坏胚胎，且选择病鼠自身细胞获得iPS细胞再移植可避免免疫排斥，所以应用前景优于胚胎干细胞 D. 培养iPS细胞的培养液中含有动物血清等 10. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①、②、③表示其结果，下列说法正确的是（ ） A. 若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性 B. 若c表示动物细胞融合技术，③为获得的单克隆抗体 C. ①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物 D. 若b是体外受精技术，则②可提高动物繁殖能力 11．“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列叙述正确的是 ①对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数实验，用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，检测选择培养基是否有筛选作用。②重组质粒的鉴定和筛选，需要在重组质粒上保留有抗生素的抗性基因。③统计活菌数目时，选择菌落数30-300的平板进行计数，计数结果往往偏小。④以尿素为唯一氮源的培养基，筛选出的一定是能分解尿素的微生物。 A．②③ B．①③ C．③④ D．①② 12．为保护和繁殖大熊猫，科研人员进行了如图实验，下列叙述正确的是 A．熊猫甲培育成功原因可能是卵母细胞的细胞质可使细胞核全能性得到表达 B．图中进行胚胎移植的胚胎可以是原肠胚 C．图中熊猫甲与亲代雄性大熊猫的性状基本一致 D．熊猫乙和丙的表型一定相同 13．2026年1月，我国首个转基因耐旱玉米转化体NAZ—4正式获得农业转基因生物安全证书。该品种通过转入耐旱关键基因BADH，可显著提升玉米在干旱胁迫下的水分利用效率。下列叙述错误的是 A．构建基因表达载体时需要限制酶和DNA连接酶 B．可通过农杆菌转化法将BADH基因转入玉米细胞 C．利用抗原—抗体杂交技术可判断BADH基因是否转录 D．BADH基因可能因插入位置不同影响玉米自身基因的表达 14．科研人员从粘质沙雷氏菌中分离获得了限制酶SmaⅠ，其识别并切割DNA序列为5′-CCC↓GGG-3′。下列叙述正确的是 A．限制酶的活性不受外界温度影响 B．该限制酶可破坏磷酸二酯键和氢键 C．该限制酶切割DNA分子后形成平末端 D．沙雷氏菌中的SmaⅠ可破坏自身DNA分子 15．某科研小组从猪源大肠杆菌中扩增得到LTB和ST1两个基因片段，利用重组PCR技术构建了LTB-ST1融合基因，制备过程如下图所示。下列叙述错误的是 A．引物P2与P3之间不应有互补序列，以防两者发生碱基互补配对 B．若对②过程得到的LTB-ST1基因进行扩增应选引物P1和P4 C．从①到②的过程不需要添加引物 D．PCR1与PCR2均经过两轮循环可得到其扩增产物 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的，全部选对得3分，选对但选不全得1分，有选错得0分。 16．研究者测定了某淡水湖泊生态系统中不同营养级的年能量流动和现存生物量，绘制出能量金字塔和生物量金字塔如图所示，其中，P表示生产者（藻类），C表示消费者，C1、C2、C3代表不同营养级（图中的数字代表能量相对值、生物量，能量单位是kcal·m-2·a-1，生物量单位是g·m-2）．下列叙述错误的是 A．能量金字塔呈正金字塔形，说明分解者不属于生态系统能量流动的环节 B．C1、C2、C3的能量逐级减少，说明营养级越高，生物的个体数量越少 C．P、C和分解者构成了生物群落，C1到C2的能量传递效率约为10.7% D．生物量金字塔倒置的原因是生产者P的繁殖速度慢，无法为消费者C1提供足够生物量 17．土壤中含有许多种类的微生物，某同学进行“探究土壤微生物的分解作用”实验，实验处理和结果如表所示（“√”表示进行处理，“×”表示不进行处理）。下列叙述正确的是 组别 甲 乙 实验处理 60℃恒温箱处理土壤1h √ × 将落叶埋入土壤一定时间 √ √ 实验结果 落叶腐烂状况 不腐烂 腐烂 A．甲组中可将土壤放入烧杯中，直接放入恒温箱进行恒温处理 B．甲组60℃恒温处理土壤，目的是排除土壤微生物分解作用 C．甲、乙两组埋入的落叶的数量相同，埋入的深度也必须相同 D．该实验说明土壤中微生物能够将落叶中有机物分解成无机物 18．四川泡菜制作时“盐少易酸、盐多味咸”，食盐用量直接影响发酵过程与食品安全。科研人员研究了在四川泡菜制作过程中，不同NaCl浓度下亚硝酸盐含量随腌制时间的变化，结果如图所示。下列叙述错误的是 A．由图可知，NaCl浓度越高，亚硝酸盐含量的峰值就相对越低，且峰值出现时间越早 B．腌制后期亚硝酸盐含量下降的原因是乳酸菌发酵产生的酸性环境，促进了亚硝酸盐的分解 C．由图可知，NaCl浓度对亚硝酸盐含量的时间动态变化趋势无显著干扰但会影响其生成量 D．为降低泡菜食用时亚硝酸盐含量，泡菜加工时可采取合理控制腌制的时间、控制好食盐用量等措施 19．某饲料霉变问题研究中发现，禾谷镰刀菌（霉菌）可产生有毒代谢产物ZEN，同时引发饲料霉变。研究人员从霉变饲料中筛选得到一株细菌X，为探究其降解ZEN的机制，测定了X的不同组分及不同处理的细胞培养液的上清液对ZEN的降解率，结果如表所示。下列叙述正确的是 研究对象及处理方式 ZEN降解率/% 上清液 未处理 65 蛋白酶处理 5 细胞内容物 38 活菌体 37 灭活菌体 22 A．若用稀释涂布平板法分离纯化细菌X，涂布前需将菌液进行梯度稀释 B．若要从发霉饲料中分离禾谷镰刀菌，可将样品接种到含青霉素的选择培养基上 C．推断细菌X降解ZEN的关键活性物质主要分布在胞外，且其化学本质为蛋白质 D．灭活菌体仍能降解ZEN，推测部分降解酶不依赖活细胞，可能结合在菌体表面发挥作用 20．体细胞核移植技术效率极低，哈尔滨医科大学研究发现，Nr5a2可显著提升克隆胚胎发育效率。如图为小鼠克隆流程，下列叙述正确的是 A．卵母细胞去核时，需一并去除纺锤体、染色体及第一、第二极体 B．为提高早期胚胎的利用率，可选取发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割 C．注入的Nr5a2的mRNA在胚胎发育期和新个体中均可发挥作用 D．该技术为干细胞再生治疗疾病及人类治疗性克隆提供了新思路 三、非选择题（本题共5小题，共55分。） 21．ε-聚赖氨酸（ε-PL）对细菌、酵母菌和霉菌等微生物具有广谱抗菌能力，是一种优良的天然食品防腐剂。为从土壤中筛选出高产ε-PL的菌株（好氧菌），科研人员进行了如图所示的实验，ε-PL可使培养基中的亚甲基蓝褪色，形成透明圈。请回答下列问题： （1）甲培养基的配方为：甘油10 g、酵母膏（富含氨基酸、核苷酸等）0.1 g、MgSO4·7H2O 0.25 g、（NH4）2SO4 0.66g、H2O 1000 mL，其中可作为微生物碳源的有_____________________，与甲培养基相比，乙培养基需添加的物质有_______________________________。 （2）过程Ⅰ使用了接种工具涂布器，使用前该工具的灭菌方法为________________。 （3）过程Ⅲ接种时，应挑选____号菌落，过程Ⅲ、Ⅳ接种培养的目的是________________。 （4）为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将不同菌种分别涂布于某培养基表面，再将浸有不同浓度ε-PL的圆形滤纸片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区的宽度（单位：mm），得到如下表所示结果。 ε-PL浓度/mg·L-1 20 30 40 50 60 70 大肠杆菌 + + 7.2 10.8 11.6 13.3 沙门氏菌 + + 6.5 9.2 10.9 13.0 酿酒酵母 7.2 9.1 12.6 13.4 14.8 - 红曲霉 + + + + 5.1 6.3 注：“+”表示无清晰区，“-”表示未进行实验。 结果显示ε-PL对_____________的抑制作用最强，且ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度_____________（正相关/负相关）。 22．科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄——马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。据图回答下列问题： （1）为获得原生质体，过程①需要利用_____________处理两种植物细胞。 （2）写出一种促进原生质体融合的方法_____________。 （3）过程③和④利用的植物细胞工程技术是_______。病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量较低，品质变差。生产上，作物脱毒也用到了该技术，且常选择茎尖为材料，原因是_________________________。 （4）④过程要进行照光培养，其作用是______________________________________________________。 （6）细胞融合完成后，融合细胞的细胞膜表面的荧光颜色可能是______________________。 23. 尼帕病毒（NV）是一种新型人畜共患病毒，该病毒的结构蛋白（X蛋白）可诱导动物机体产生中和抗体，从而防御病毒感染。制备单克隆中和抗体的流程如图所示。回答下列问题。 （1）制备单克隆抗体过程中涉及的动物细胞工程技术包括________。 （2）在体外培养骨髓瘤细胞时，需要在合成培养基中添加________等一些天然成分，气体环境是________。贴壁生长的细胞除营养物质缺乏等因素外，还会出现________现象，此时需要用________等处理后分瓶培养。 （3）在特定培养基Y中不能存活的细胞包括下列________。①B淋巴细胞；②小鼠的骨髓瘤细胞；③B淋巴细胞自身融合的细胞；④小鼠的骨髓瘤细胞自身融合的细胞；⑤杂交瘤细胞 （4）图中符合生产的杂交瘤细胞具有________的特点。最终可从________或________中获得大量的单克隆抗体。 （5）为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原（X蛋白）进行逐步截短，分别与纯化的单克隆抗体反应，实验结果如图所示（“+”表示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。结果证明，该单克隆抗体识别抗原（X蛋白）的区域大概为________（填“40~50”、“40~55”或“40~60”）位氨基酸。 24. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。 （1）图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用___________(填数字)。 （2）应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射___________，使用___________技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛性别为___________。 （3）供体1完成体内受精的场所在___________。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其___________，胚胎移植前需要对受体进行___________处理。 （4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过___________技术获得二分胚①和②，操作时需要注意___________，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 25. 人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的前胰岛素原，经加工后形成两条肽链（A链和B链）的有生物活性的胰岛素。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的两种方法：“AB”法是根据胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段，利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素;“BCA”法是利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。这两种方法使用同一种质粒作为载体。请据下图分析并回答下列问题： （1）由于一种氨基酸可能对应多种密码子，“AB”法中人工合成的两种DNA片段均有多种可能的序列。“BCA”法是利用人体______细胞中的mRNA，再由mRNA经_______得到的胰岛素基因，“AB和BCA”法获取的目的基因中不含人胰岛素基因启动子。 （2）如图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接，在设计PCR引物时可添加限制酶_______的识别序列，PCR引物应该添加在识别序列的_______（填“3’或5’）端。 （3）PCR扩增的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，下列叙述中正确的有______。 A. PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶主要在复性过程起作用 B. 琼脂糖凝胶电泳主要用来分离DNA，进行电泳时DNA片段越大，迁移速率越大 C. 进行电泳时，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动 D. 琼脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外灯下被检测 （4）β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。经_______（处理方法）大肠杆菌后，与重组质粒混合培养一段时间，将大肠杆菌接种到添加了_______和X-gal的培养基上筛选出_______色的菌落即为工程菌种。 （5）科学家利用蛋白质工程技术，研制出了易吸收、起效快的赖脯胰岛素，获得赖脯胰岛素基因的途径是：从预期的蛋白质功能出发→_______→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。 BBCDB BACAD BACCA 16．ABD 17．BC 18．AB 19．ACD 20．D 21. (1) 甘油和酵母膏（写全给分） 亚甲蓝（或琼脂和亚甲基蓝） (2) 灼烧灭菌法 (3) ① 分离、纯化目的菌 (4) 酿酒酵母 正相关 22. (1) 纤维素酶和果胶酶（写全给分） (2) 离心法、电融合法、聚乙二醇(PEG)融合法、高 Ca2+ —高pH融合法（写出一种即可） (3) 植物组织培养 茎尖(顶端分生区)的病毒极少，甚至无病毒 (4) 诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用 (5) 红色荧光和绿色荧光、红色荧光、绿色荧光 23（1）动物细胞培养、动物细胞融合 （2） ①. 血清 ②. 95%空气加5%CO2 ③. 接触抑制 ④. 胰蛋白酶 （3）①②③④ （4） ①. 既能无限增殖、又能产生所需抗体 ②. 小鼠腹水 ③. 培养液 （5）40~55 24（1）1、3 （2） ①. 促性腺激素 ②. 体细胞核移植 ③. 雌性 （3） ①. 输卵管 ②. 获能 ③. 同期发情 （4） ①. 胚胎分割 ②. 将内细胞团进行均等分割 25（1） ①. 胰岛B ②. 逆转录 （2） ①. XhoⅠ和MunⅠ ②. 3’ （3）CD （4） ①. 钙离子处理 ②. 氨苄青霉素 ③. 白 （5）设计预期的蛋白质结构 学科网（北京）股份有限公司 $