精品解析：江苏镇江第一中学等校2025-2026学年高二第二学期5月考试生物试题

高二生物 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 北魏农学巨著《齐民要术》记载了许多古人在实际生产中积累的经验，也蕴藏着众多生物学知识。请阅读下表中的古籍原文，判断以下相关叙述，错误的是（ ） 工艺名称 古籍原文 酿酒技术 浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷…… 制醋技术 大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之……七日后当臭，衣生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成。 A. 实验室里培养制醋微生物时，一般需将温度设置在30℃～35℃ B. “鱼眼汤”是指液面冒出小泡的现象，主要是醋酸菌呼吸作用释放CO2形成 C. “衣生”指发酵液表面形成一层菌膜的现象，主要是由醋酸菌大量繁殖形成 D. 酿酒过程与制醋过程所用微生物的主要区别是有无以核膜为界限的细胞核 【答案】B 【解析】 【详解】A、制醋所用微生物为醋酸菌，其最适生长温度范围是30℃～35℃，因此实验室培养醋酸菌时需将温度设置在该区间，A正确； B、“鱼眼汤”是酿酒浸曲阶段的现象，该阶段发酵的微生物是酵母菌，气泡是酵母菌呼吸作用释放CO2形成的，此时未进行醋酸发酵，与醋酸菌无关，B错误； C、醋酸菌是好氧微生物，在制醋过程中会在发酵液表层大量繁殖，形成菌膜，即题干所述的“衣生”现象，C正确； D、酿酒的核心微生物是酵母菌，属于真核生物，有以核膜为界限的细胞核；制醋的核心微生物是醋酸菌，属于原核生物，无核膜包被的细胞核，二者的主要区别是有无以核膜为界限的细胞核，D正确。 2. 目的基因导入受体细胞后，需要检测目的基因是否可以维持稳定和表达其遗传特性。下列关于目的基因的检测和鉴定的叙述，正确的是（ ） A. 可从转基因生物中提取蛋白质来检测目的基因是否翻译成相应蛋白质 B. 目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是能否转录出mRNA C. 可采用PCR检测目的基因是否转录和翻译 D. 抗虫、抗病检验用于确定转基因生物是否具备相关性状，属于分子水平的检测 【答案】A 【解析】 【详解】A、检测目的基因是否翻译成相应蛋白质时，可从转基因生物中提取蛋白质，通过抗原-抗体杂交技术完成检测，A正确； B、目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是目的基因是否整合到受体细胞的染色体DNA中，能否转录出mRNA是检测目的基因是否转录的判断依据，B错误； C、PCR是核酸扩增技术，可用于检测目的基因是否插入、是否转录（需先将mRNA逆转录为cDNA再扩增），但翻译产物为蛋白质，无法通过PCR检测，C错误； D、抗虫、抗病接种检验是对转基因生物个体性状的检测，属于个体生物学水平的鉴定，D错误。 3. 合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭细菌的效果，结果如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. 在酒精灯火焰旁倒平板后，再用湿热灭菌法对培养基进行灭菌 B. 菌落计数过程中，将接种针先在酒精灯火焰上灼烧，冷却后再涂布 C. 采用显微镜直接计数法会把死菌和活菌一起计数，所以测得的活细菌的数量会偏小 D. 用C消毒液处理，活菌数减少量最少，且杀菌时间较长，故C消毒液杀菌效果最差 【答案】D 【解析】 【详解】A、培养基需先经湿热灭菌法灭菌，再在酒精灯火焰旁倒平板，A错误； B、菌落计数采用稀释涂布平板法，使用的接种工具是涂布器，B错误； C、显微镜直接计数法会同时计数死菌和活菌，因此测得的活细菌数量会比实际活菌数偏大，C错误； D、用C消毒液处理，活菌数减少量最少，且杀菌时间较长，杀菌效果最差， A消毒液活菌数减少量最多，且杀菌时间较短，效率最高，因此A消毒液杀菌效果最好，D正确。 4. 安莎霉素是一类主要由海洋中的稀有放线菌产生的次生代谢产物，具有较高的抗菌活性。经人工诱变后，部分放线菌由于某种酶被破坏，其细胞中某些化学反应不能正常进行，就形成了氨基酸营养缺陷型菌株（不能在基本培养基上生长，只能在完全培养基上生长），这在工业生产上有较广阔的应用前景。利用影印法初检某种氨基酸营养缺陷型菌株的过程如下图，下列相关叙述错误的是（ ） A. 基本培养基与完全培养基存在差异的成分是氨基酸 B. ④培养皿中是完全培养基 C. 进行过程③④培养时，应先将丝绒布转印至④培养基上 D. 应挑取菌落甲进行接种培养，并进一步鉴定 【答案】C 【解析】 【详解】A、产安莎霉素的放线菌具有一个普遍的共性——氨基酸营养缺陷型，从培养基成分上看，基本培养基与完全培养基存在差异的成分是氨基酸，A正确； B、营养缺陷型菌株在完全培养基上可以生长，在基本培养基上不能生长。 图中③培养皿出现了无菌落的位置，说明是基本培养基；而④培养皿所有菌落都能生长，说明是完全培养基，B正确； C、影印法操作时，为了保证菌落的原位对应，需要先转印到基本培养基（③），再转印到完全培养基（④），这样才能通过对比找出在基本培养基上不长、在完全培养基上长的缺陷型菌株。如果先转印到完全培养基，再转印到基本培养基，会导致转印到基本培养基的菌量不足，影响结果，C错误； D、氨基酸缺陷型菌株不能在基本培养基上生长，只能在完全培养基上生长，所以为了完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员应挑取完全培养基上的菌落甲进行接种培养，并进一步鉴定，D正确。 5. 精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，用该方法制备转基因鼠的基本流程如图所示。下列叙述正确的有（　　） A. ①过程中精子获能后细胞膜的流动性增加 B. ②过程采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质都来自父母双方 C. ③过程形成的早期胚胎发育到桑葚胚或原肠胚才能进行胚胎移植 D. ④过程进行胚胎移植前需要对供体和受体进行超数排卵处理 【答案】A 【解析】 【分析】分析题图：图示表示培育转基因鼠的基本流程，其中①是筛选获得导入外源基因的精子的过程，②是体外受精过程，③是早期胚胎培养过程，④是胚胎移植过程。 【详解】A、①是筛选获得导入外源基因的精子的过程，该过程中获能后的精子运动加速，能够迅速的游向卵子，膜流动性增加，A正确； B、②采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质来自父母双方和外源基因，不都来自父母双方，B错误； C、③过程形成的早期胚胎发育到桑葚胚或囊胚才能进行胚胎移植，C错误； D、④是胚胎移植过程，应选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，进行胚胎移植前需要对供体雌性个体进行超数排卵处理，对受体进行同期发情处理，D错误。 故选A。 6. 研究表明，青蒿素并非在植物所有细胞中都能合成，它主要发生在叶片和幼嫩茎表面的分泌型腺毛中。某同学想通过植物细胞工程获得青蒿素，下图为其设计的过程示意图，有关说法错误的是（ ） A. 过程①要依次用酒精和次氯酸钠溶液对幼叶进行消毒 B. 过程⑤通过对愈伤组织细胞的培养可从中大量提取青蒿素 C. 经PEG诱导后产生的植株丁发生染色体数目变异 D. 过程②③要选择不同的培养基进行诱导培养 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物组织培养对外植体消毒时，需依次用酒精和次氯酸钠溶液处理，之后用无菌水冲洗去除残留消毒剂，操作符合要求，A正确； B、题干明确青蒿素仅在叶片和幼嫩茎的分泌型腺毛中合成，愈伤组织是未分化的薄壁细胞，没有分化出分泌型腺毛，无法合成青蒿素，不能通过培养愈伤组织大量提取青蒿素，B错误； C、PEG诱导原生质体融合后，融合细胞的染色体数目为两个原生质体的染色体数目之和，由其发育而来的植株丁发生了染色体数目变异，C正确； D、过程②是脱分化、过程③是再分化，两个过程需要的生长素和细胞分裂素的比例不同，因此要选择不同的培养基进行诱导培养，D正确。 7. 为提高厨余垃圾分解效率，研究人员以厨余垃圾浸出液为培养基（CY），对目标菌株A1、A2、A7和A8进行驯化（通过人工措施使微生物逐步适应某一条件的方法），以制备高活性微生物菌剂。相关实验结果如图所示。下列分析错误的是（　　） A. CY碳源、氮源丰富，比LB更适合大多数菌株生长 B. 可利用稀释涂布平板法对四种菌株进行筛选和计数 C. CY驯化培养可使四种菌株的基因频率发生定向改变 D. 从活菌数上评价，A2菌株的驯化效果最显著 【答案】A 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、结合图示可以看出，驯化前，LB培养基中活菌数目更多，因而该培养基更适合大多数菌株生长，A错误； B、稀释涂布平板法可获得单菌落，且能用于计数，因此，可利用稀释涂布平板法对四种菌株进行筛选和计数，B正确； C、CY驯化培养（人工进行选择）可使四种菌株的基因频率发生定向改变，使得菌株更适应CY培养液，C正确； D、根据图示结果可以看出，A2菌株在驯化后活菌数增加最多，因此，从活菌数上评价，A2菌株的驯化效果最显著，D正确。 故选A。 8. 下列关于动物细胞工程和植物细胞工程的叙述，正确的是（ ） A. 花药离体培养得到单倍体植株需要用到秋水仙素来诱导细胞融合恢复成二倍体 B. 愈伤组织和小鼠iPS细胞的诱导形成均发生了基因的选择性表达 C. 植物组织培养和动物细胞培养均需要经过脱分化过程 D. 生产中获得草莓脱毒苗和动物干细胞的培养均使用高压蒸汽灭菌的固体培养基 【答案】B 【解析】 【详解】A、花药离体培养得到单倍体植株后，秋水仙素的作用是抑制纺锤体形成，诱导染色体数目加倍获得可育二倍体，A错误； B、愈伤组织是植物细胞脱分化的产物，iPS细胞是体细胞重编程诱导形成的多能干细胞，两个过程都存在基因的选择性表达，B正确； C、植物组织培养需要经过脱分化、再分化过程，动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产物，不需要经过脱分化过程，C错误； D、动物干细胞培养使用的是液体培养基，且培养基中的血清、生长因子等活性成分不能通过高压蒸汽灭菌处理，否则会失活，D错误。 9. 关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验操作，下列说法正确的是（ ） A. 电泳时，接通电源后，待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳 B. PCR过程中，复性温度过低会导致无法扩增出DNA片段 C. 将洋葱切碎、研磨、过滤，滤液放置4℃冰箱中静置几分钟后，DNA存在于沉淀物中 D. 将PCR产物、核酸染料和凝胶载样缓冲液混合后，用微量移液器加入加样孔 【答案】A 【解析】 【详解】A、电泳时指示剂的迁移速率快于多数DNA片段，待其前沿接近凝胶边缘时停止电泳，可避免目标DNA迁移出凝胶，A正确； B、PCR复性温度过低会导致引物和模板发生非特异性结合，扩增出大量非目标DNA片段，并非无法扩增出DNA片段，B错误； C、洋葱研磨过滤后的滤液中，DNA溶解于上清液，4℃静置后的沉淀物是细胞碎片等不溶性杂质，DNA存在于上清液中，C错误； D、核酸染料通常在制备凝胶时加入凝胶体系，或电泳结束后对凝胶进行染色，无需与PCR产物、载样缓冲液混合后再加样，D错误。 10. 基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速。下图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（ ） A. 扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3′端进行子链合成 B. 目的基因要与能在绵羊乳腺细胞中特异性表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 C. 若目的基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该目的基因中不含启动子序列 D. 可以利用显微注射法将含有目的基因的重组质粒导入受精卵，进一步获得乳腺生物反应器 【答案】A 【解析】 【详解】A、扩增目的基因采用PCR技术，该过程需要的是耐高温的DNA聚合酶（Taq酶），A错误； B、要保证目的基因在绵羊乳腺细胞中特异性表达，需要将目的基因与绵羊乳腺特异性表达的基因的启动子等调控元件重组，使目的基因仅在乳腺细胞中启动转录，B正确； C、启动子是基因上游调控转录的非编码序列，不会被转录为mRNA，因此以mRNA为模板逆转录得到的目的基因不含启动子序列，C正确； D、将含有目的基因的重组质粒导入动物受精卵常用显微注射法，受精卵经后续培育可获得能在乳汁中分泌目的蛋白的乳腺生物反应器，D正确。 11. 反向PCR是一种用于扩增已知序列两侧的未知序列的技术，需要先将目标DNA进行环化，再以环化的DNA为模板进行扩增。现利用反向PCR技术来确定目的基因的插入位点，部分过程如下图所示，相关叙述错误的是（ ） A. PCR第三轮循环即可获得两条链等长的未知序列 B. 过程③中复性是在55℃左右使两种引物与模板链结合 C. 过程③所用的酶从引物的3′端开始连接核糖核苷酸 D. 过程②中根据目的基因两端的部分核苷酸序列设计引物1和4 【答案】C 【解析】 【详解】A、PCR第一轮循环得到的两条DNA链长度不同，第二轮循环得到的DNA片段也都不等长，至少要到第三轮循环才可获得两条链等长的DNA片段，A正确； B、PCR过程中，复性的温度一般在55-60℃左右使两种引物与模板链结合，B正确； C、DNA聚合酶只能从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，过程③PCR所用的酶也是从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，C错误； D、反向PCR是扩增已知序列两侧的未知序列，过程②设计引物时，应根据已知序列(目的基因两侧的部分核苷酸序列)来设计引物1和4，D正确。 12. 实时荧光RT-PCR用于新冠病毒核酸检测的原理如下：在PCR复性过程中探针会先与DNA的一条模板链结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，在新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如下图，下列相关叙述错误的是（ ） A. PCR过程中消耗引物的量与发出荧光强度呈负相关 B. 进行RT-PCR扩增需要的酶有逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶 C. 还可以通过检测病毒感染后产生的蛋白来检测，其原理是抗原—抗体杂交 D. 以病毒RNA为模板生成cDNA的第一条链时需要引物 【答案】A 【解析】 【详解】A、PCR扩增过程中，消耗引物的量越多，说明扩增得到的DNA产物越多，新链延伸过程中被破坏的探针越多，释放的荧光基团越多，荧光强度越高，二者呈正相关，A错误； B、RT-PCR为逆转录PCR，首先需要逆转录酶以病毒RNA为模板合成cDNA，后续PCR扩增过程需要耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）催化子链合成，B正确； C、病毒的蛋白可作为抗原，能与对应的抗体发生特异性结合，因此可通过抗原-抗体杂交技术检测病毒蛋白，实现新冠病毒检测，C正确； D、以RNA为模板逆转录合成cDNA第一条链时，需要引物结合到模板链上才能启动逆转录过程，D正确。 13. 双向启动子可同时结合两个RNA聚合酶来驱动下游基因的表达，研究人员构建了如图所示的表达载体，以检测双向启动子作用效果。下列分析错误的是（ ） A. 潮霉素抗性基因和GUS基因不共用一个启动子的目的是确保两个基因能分别表达并各自发挥作用 B. 表达载体中GUS基因和LUC基因转录时分别使用DNA两条单链为模板 C. 为连入GUS基因，需用SalI和SphI酶切已整合了双向启动子及LUC基因的质粒 D. 通过观察是否出现荧光和蓝色物质可检测双向启动子的作用效果 【答案】C 【解析】 【详解】A、不同基因独立表达需要各自的启动子，若潮霉素抗性基因和GUS基因共用启动子，会导致转录翻译出异常的融合蛋白，两个基因都无法正常发挥功能，因此不共用启动子是为了保证两个基因分别表达、各自发挥作用，A正确； B、转录是从RNA链（mRNA）5'→3'方向进行的，由图可知，双向启动子位于GUS基因和LUC基因之间，转录方向相反，因此两个基因转录时分别以DNA的两条不同单链作为模板，B正确； C、如果用SphⅠ酶切已整合了双向启动子及LUC基因的质粒时就会破坏LUC基因，C错误； D 、LUC基因表达可催化底物产生荧光，GUS基因表达可催化底物生成蓝色物质，若二者均有表达，说明双向启动子能同时驱动两侧基因转录，可有效检测其作用效果，D正确。 14. 科学家利用蛋白质工程研制出了赖脯胰岛素，与天然胰岛素相比，赖脯胰岛素经皮下注射后易吸收、起效快。下列相关叙述错误的是（　　） A. 赖脯胰岛素在受体工程菌的核糖体上合成 B. 通过蛋白质工程获取赖脯胰岛素的过程是④⑤⑥①②③ C. 必须先合成天然胰岛素基因，再定点突变获得赖脯胰岛素基因 D. 物质a是mRNA，物质b是多肽链，二者序列对应关系由密码子决定 【答案】C 【解析】 【详解】A、赖脯胰岛素基因导入工程菌后，合成的场所确实在受体工程菌核糖体上，A正确； B、蛋白质工程的思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因→获得所需要的蛋白质，即图中④⑤⑥①②③过程，B正确； C、利用蛋白质工程获得新蛋白基因，也可直接合成带有突变位点的DNA序列，C错误； D、物质a是mRNA，b是翻译形成的多肽链，二者序列对应关系由密码子决定，D正确。 故选C。 二、多项选择题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。 15. 生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列相关叙述正确的是（ ） A. 转基因生物引发安全性问题的原因之一是外源基因插入宿主基因组的部位不唯一 B. “试管婴儿”、“设计试管婴儿”均利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 C. 抗性基因可能会随花粉传播到田间近缘野生植物体内，造成基因污染 D. 生物武器是利用致病微生物或毒素等生物活性物质来形成杀伤力 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、转基因操作中外源基因插入宿主基因组的位点具有随机性，可能破坏宿主自身正常功能基因，进而表达出非预期产物甚至有毒有害物质，是转基因生物引发安全性问题的原因之一，A正确； B、普通“试管婴儿”仅需利用体外受精、胚胎移植技术即可实现，不需要使用遗传学诊断技术，只有“设计试管婴儿”需要在胚胎移植前进行遗传学诊断，B错误； C、转基因作物的抗性基因可通过花粉传播，与田间近缘野生植物发生基因交流，使野生植物获得相应抗性，造成基因污染，C正确； D、 生物武器包含致病微生物、毒素、生化毒剂等类群，依靠这类生物活性物质对人、畜或农作物产生杀伤破坏作用，D正确。 16. 可根据微生物发酵时对氧气的需求不同，将微生物发酵分为好氧发酵和厌氧发酵。下列相关说法错误的是（ ） A. 果酒发酵时，应利用葡萄皮上的野生酵母菌直接进行厌氧发酵 B. 生产单细胞蛋白时，酵母菌可利用纤维素水解液进行好氧发酵 C. 泡菜制作时，应将泡菜盐水注满泡菜坛以利于乳酸菌进行厌氧发酵 D. 果醋发酵时，当氧气和糖源都缺少时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、果酒发酵时，需要先通气让葡萄皮上的野生酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，增加菌种数量，之后再密封进行厌氧发酵产生酒精，不能直接进行厌氧发酵，A错误； B、单细胞蛋白是微生物菌体本身，酵母菌为异养生物，可利用纤维素水解液中的糖类，在有氧条件下大量繁殖获得单细胞蛋白，可通过好氧发酵生产，B正确； C、泡菜制作过程中，将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖，在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境，C错误； D、醋酸菌是严格好氧微生物，发酵过程始终需要充足的氧气，当氧气充足、糖源缺少时，醋酸菌才会将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，氧气缺少时醋酸菌无法存活，不能进行发酵，D错误。 17. 甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白（血凝素蛋白）密切相关，现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程，图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（ ） A. PCR扩增R基因中，微量离心管、枪头和移液器等在使用前均须消毒处理 B. 构建好的重组质粒长度共2000bp，据图乙可推测BamH Ⅰ在重组质粒上有3个酶切位点 C. 电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定 D. 图甲过程中至少需要应用到逆转录酶、RNA聚合酶、DNA连接酶 【答案】AD 【解析】 【详解】A、PCR扩增R基因中，微量离心管、枪头和移液器等在使用前均须高压蒸汽灭菌，A错误； B、用Hind Ⅲ将质粒2000bp切割后形成了200bp、400bp和1400bp共3个片段，说明Hind Ⅲ在重组质粒上有3个酶切位点，而用Hind Ⅲ和BamH Ⅰ将质粒切割后形成了200bp、420bp、560bp的片段，2000=420×2+560+200×3，所以一共形成了6个片段，因此共有6个酶切位点，因此BamH Ⅰ在重组质粒上有6-3=3个酶切位点，B正确； C、不同生物的DNA切割后长度不同，切割后再进行电泳，可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定，C正确； D、图甲获得重组质粒过程，需要逆转录、形成双链cDNA分子以及R蛋白基因与质粒的重组，所以至少需要应用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶，不需要RNA聚合酶，D错误。 18. T-DMI是曲妥珠单抗和药物DMI连接而成的抗体-药物偶联物，对HER-2蛋白有很强的靶向性，可用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。下列叙述错误的是（ ） A. 用选择培养基可筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞 B. 抗体-药物偶联物主要利用抗体杀死肿瘤细胞 C. 用灭活的病毒诱导细胞融合时细胞膜的蛋白质和脂质分子会重新排布 D. T-DMI中曲妥珠单抗与HER-2特异性结合是对癌细胞进行选择性杀伤的关键 【答案】AB 【解析】 【详解】A、选择培养基仅能筛选出杂交瘤细胞，淘汰未融合的亲本细胞、同种细胞融合的产物，若要筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞，还需进行专一抗体检测，仅用选择培养基无法完成该筛选，A错误； B、抗体-药物偶联物中，抗体仅起到靶向识别肿瘤细胞的作用，主要依靠偶联的药物DMI杀死肿瘤细胞，并非利用抗体发挥杀伤功能，B错误； C、细胞融合依赖细胞膜的流动性，用灭活病毒诱导细胞融合时，细胞膜的蛋白质和脂质分子会发生重新排布，实现膜的融合，C正确； D、T-DMI中曲妥珠单抗可与癌细胞表面的HER-2蛋白特异性结合，将药物定向运输至癌细胞处发挥作用，避免杀伤正常细胞，因此该特异性结合是对癌细胞选择性杀伤的关键，D正确。 19. 2025年3月，我国科学家成功将利用CRISPR/Cas9基因编辑系统改造后的猪肝脏移植入人体。该基因编辑系统主要包括向导RNA（crRNA和tracrRNA组成的复合体）和Cas9蛋白。crRNA含有与靶基因片段配对的序列，与tracrRNA共同协助Cas9蛋白准确定位，进行如图所示的基因编辑。下列叙述正确的是（ ） A. 为降低排斥反应，需敲除猪抗原基因，并使用免疫抑制剂降低细胞免疫水平 B. crRNA特异性识别目标DNA分子，是通过与靶基因片段碱基序列互补配对实现的 C. 通过延长crRNA来提高其特异性，可降低因错误结合而出现“脱靶”的概率 D. CRISPR/Cas9系统工作时作用机理和限制酶完全相同，Cas9蛋白具有专一性，可作用于磷酸二酯键 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、异体器官移植的免疫排斥以细胞免疫为主，敲除猪的抗原基因可减少供体的抗原成分，使用免疫抑制剂降低细胞免疫水平可减弱免疫系统对移植器官的攻击，有效降低排斥反应，A正确； B、根据题干信息，crRNA含有与靶基因片段配对的序列，它对目标DNA的特异性识别是通过与靶基因片段的碱基序列互补配对实现的，B正确； C、crRNA的序列越长，与非目标DNA序列发生随机互补配对的概率越低，识别的特异性越高，可降低因错误结合导致的“脱靶”概率，C正确； D、限制酶通过自身的蛋白质结构直接识别特定的DNA序列并进行切割，而CRISPR/Cas9系统需要向导RNA与靶DNA互补配对完成定位，二者作用机理并不完全相同，D错误。 三、非选择题：本部分包括5题，共计57分。 20. 酿酒酵母是重要的发酵菌种，广泛应用于酿酒、食品加工及生物燃料生产等，研究人员对酿酒酵母菌株的生活条件进行分析研究，以提高发酵产物的产量。 （1）对于酵母菌的培养，比较适合它的培养基为______（A．MS培养基 B．马铃薯蔗糖培养基 C．牛肉汤培养基），除了要选择合适的培养基成分外，还要考虑培养基中营养物质的______。 （2）发酵过程中要测定酵母菌的繁殖速度，可用______法和______法对酵母菌进行计数。在上述第二种方法中用到血球计数板，但计数时数值往往偏______。 （3）在酵母菌发酵过程中，操作人员会定时检测培养液中的酵母菌浓度以了解发酵进程，若将稀释了100倍的培养液用血细胞计数板（1mm×1mm×0.1mm，25个中方格，每个中方格包含16个小格）通过显微镜观察计数，则理论上统计的中方格中酵母菌平均数量应不少于______个才能达到5.5×108个/mL的预期浓度。在恒温培养箱培养时，培养皿的放置方式如图______（填“A”或“B”）。 （4）该酵母菌的发酵食品也会因为发酵时间的长短、条件和底物不同，而形成不同的代谢产物，使发酵食品的风味发生变化。酿酒时会因为发酵液放置过久等原因，导致出现酸味，可能是因为混入了______（填微生物）。 （5）某研究小组从葡萄皮上成功分离出某品种的酵母菌后，取等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于150r/min、200r/min、250r/min的摇床上培养，检测结果如图甲所示，由图中信息可知在______条件下酵母菌种群密度最大。小组同学继续用分离出的酵母菌进行果酒的发酵，发酵产物酒精可用______溶液检验。 【答案】（1） ①. B ②. 浓度和比例（配比） （2） ①. 稀释涂布平板 ②. 抽样检测法（显微计数法、血球计数板计数法） ③. 大 （3） ①. 22 ②. B （4）醋酸菌 （5） ①. 转速为250r/min、第8天 ②. 酸性重铬酸钾 【解析】 【小问1详解】 MS培养基用于植物组织培养，不适合酵母菌；牛肉汤培养基：主要用于细菌（如大肠杆菌）的培养，不适合酵母菌；马铃薯蔗糖培养基：马铃薯提供氮源、维生素，蔗糖提供碳源，是培养真菌（包括酵母菌）的常用培养基。故对于酵母菌的培养，比较适合它的培养基为马铃薯蔗糖培养基（B）。除了要选择合适的培养基成分外，还要考虑培养基中营养物质的浓度和比例（配比），以确保微生物能正常生存和发酵产品的品质。 【小问2详解】 测定繁殖速度，可用稀释涂布平板法（活菌计数）、也可用抽样检测法（或血球计数板计数法、显微计数法）。血细胞计数板计数时，会将死菌也计入，数值往往偏大。 【小问3详解】 计数室体积为1mm×1mm×0.1mm = 0.1mm³ = 1×10-4mL，稀释倍数为100 倍，预期浓度为5.5×108个 /mL。先计算计数室中总菌数：5.5×108÷100×1×10-4=5.5×102个。计数室分为25个中方格，因此每个中方格的平均菌数为5.5×102÷25=22个。恒温培养时，为防止冷凝水滴落污染培养基，应将培养皿倒置，即图中的B。 【小问4详解】 酿酒时会因为发酵液放置过久等原因，导致出现酸味，可能是因为混入了醋酸菌将酒精分解产生了醋酸。 【小问5详解】 观察图甲的三条曲线可知，250r/min、第8天在所有时间点的种群密度都最高，峰值接近3.0×10⁶个/mL，高于200r/min 和150r/min的组，因此，在250r/min、第8天条件下酵母菌种群密度最大。果酒发酵产生的酒精，可用酸性重铬酸钾溶液检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应，颜色由橙色变为灰绿色。 21. 基因编辑技术在胚胎工程中得到广泛的应用。如图1表示利用基因编辑技术培养小鼠B的过程，图2表示使用CRISPR/dCas9技术进行基因编辑的过程，其中dCas9不具有内切核酸酶活性，它能与不同作用的酶（A）结合，对基因进行定点修饰。回答下列问题。 （1）图1中，从卵泡中取出卵母细胞进行体外培养，培养液的pH要控制在______，培养基中通常需要加入血清等一些天然成分的原因是______。 （2）图1中，将极体注入次级卵母细胞常采用的方法是______，该过程的作用相当于______。对卵母细胞进行H19和Gt12基因甲基化，Igf2r、Snrpn等多个基因去甲基化处理的目的是______进而提高胚胎的发育率和妊娠率。 （3）图1中将囊胚移植到代孕母鼠之前，需要对代孕母鼠用______进行______处理。 （4）图2中，使用CRISPR/dCas9技术对基因编辑时，sgRNA的作用是______，设计sgRNA时应保证其碱基序列与______。目标序列的甲基化和去甲基化的遗传效应属于______。 【答案】（1） ①. 7.2-7.4 ②. 人们对动物细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚 （2） ①. 显微注射法 ②. 受精作用 ③. 调节相关基因表达 （3） ①. （孕）激素 ②. 同期发情 （4） ①. 引导酶（A）至目标序列处 ②. （靶基因的）识别序列互补配对 ③. 表观遗传 【解析】 【小问1详解】 动物细胞体外培养时，培养液pH需维持在7.2-7.4；由于人们对动物细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此培养基中通常需要加入血清等一些天然成分。血清中含有多种生长因子、激素、维生素、无机盐等物质，这些物质在细胞的生长、增殖和分化等过程中起着重要的调节作用。 【小问2详解】 图1中，将极体注入次级卵母细胞常采用的方法是显微注射法，该过程的作用相当于受精作用。基因的甲基化和去甲基化会影响基因的表达，对卵母细胞进行H19和Gt12基因甲基化，lgf2r、Snrpn等多个基因去甲基化处理的目的是调节相关基因表达，提高胚胎的发育率和妊娠率。 【小问3详解】 为了使代孕母鼠能够接受外来胚胎并为其提供适宜的生理环境，需要将代孕母鼠用孕激素等进行同期发情处理，图1中将囊胚移植到代孕母鼠之前，需要对代孕母鼠进行同期发情处理。 【小问4详解】 使用CRISPR/dCas9技术进行基因编辑时，sgRNA的作用是引导酶（A）至目标序列处，设计sgRNA时应保证其碱基序列与靶基因的识别序列互补配对。目标序列的甲基化和去甲基化会影响基因的表达，而基因表达的改变会导致生物体的性状发生变化，所以目标序列的甲基化和去甲基化的遗传效应属于表观遗传，表观遗传是指DNA序列不发生变化，但基因的表达却发生了可遗传的改变。 22. 紫杉醇是红豆杉属植物产生的次生代谢产物，能促进微管聚合并使之稳定，从而阻碍肿瘤细胞的分裂直至死亡，目前在临床上已经广泛用于乳腺瘤等的治疗。科研小组设计了如图所示的实验流程： （1）②为______过程，______是启动①②过程的关键激素。流程一的原理是______，整个流程二使用了______技术。 （2）应用的是下图是某生物兴趣小组设计的植物细胞悬浮培养装置，请同学们评议，下列评议合理的有 A. 实验流程中应该用蛋白酶等处理愈伤组织制备悬浮细胞 B. 装置中的充气管应置于液面上方，该管可同时作为排气管 C. 装置充气口需要增设无菌滤器，用于防止杂菌污染培养液 D. 细胞培养需要适宜的温度，装置需增设温度监测和控制设备 （3）悬浮培养时发现，即使营养条件充足，红豆杉细胞悬浮培养一段时间也会停止增殖，结合材料分析其原因可能是______。 （4）生物科研小组为探究不同浓度紫杉醇的抑癌效果，进行如下实验，请完成下表。 实验目的 实验操作 制备药剂 取适量紫杉醇溶于DMSO溶剂中制成母液，并进行梯度稀释。 供给乳腺癌细胞存活必需的营养等条件，同时防止培养过程中______ 用蒸馏水、无机盐、葡萄糖、氨基酸及促生长因子等制备合成培养基，针对实验目的①要在培养液中添加适量的______。 乳腺癌细胞培养 将培养瓶置于37℃恒温CO2培养箱中培养24小时，水平晃动培养瓶，使______，再继续培养48小时。 实验分组处理 取2～5号培养皿，分别加入______，1号培养皿中加入等量DMSO的培养液。置于CO2培养箱中继续培养。 检测结果 24h后检测各培养皿中乳腺癌细胞的______。 【答案】（1） ①. 再分化 ②. 生长素和细胞分裂素 ③. 植物细胞具有全能性 ④. 植物细胞培养 （2）CD （3）培养一段时间后，培养液中的紫杉醇含量升高，紫杉醇能促进微管聚合并使之稳定，从而抑制了红豆杉细胞的分裂 （4） ①. 杂菌污染 ②. 抗生素 ③. 乳腺癌细胞与培养液充分混匀 ④. 等量不同浓度的紫杉醇溶液 ⑤. 存活率 【解析】 【小问1详解】 植物组织培养中，外植体经①脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经②再分化形成胚状体，最终发育为完整植株；生长素和细胞分裂素是调控脱分化、再分化的关键激素；流程一通过植物组织培养获得完整植株，原理是植物细胞具有全能性；流程二通过培养红豆杉细胞获得细胞产物紫杉醇，用到的是植物细胞培养技术。 【小问2详解】 A、植物细胞分离需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，蛋白酶用于动物组织分散细胞，A错误； B、装置中的充气管应置于液面下方，以利于培养液中的溶氧量的增加，不能同时作为排气管，B错误； C、充气口通入气体的同时可能发生杂菌污染，为了防止杂菌污染培养液，装置充气口需要增设无菌滤器， C正确； D、温度的条件影响细胞生长、分裂，细胞培养时需要保证适宜的温度，装置需增设温度监测和控制设备，D正确。 【小问3详解】 悬浮培养时发现，即使营养条件充足，红豆杉细胞悬浮培养一段时间也会停止增殖，其原因是培养一段时间后，培养液中的紫杉醇含量升高，紫杉醇能促进微管聚合并使之稳定，从而抑制了红豆杉细胞的分裂。 【小问4详解】 动物细胞培养过程中除需要提供适应的营养条件外，还需防止杂菌污染，在培养液中添加适量的抗生素；将乳腺癌细胞培养至分裂高峰时，需要在37°C恒温CO2培养箱中晃动培养瓶，使乳腺癌细胞与培养液充分混匀，继续培养；本实验的目的是探究不同浓度紫杉醇的抑癌效果，所以应在2～5号培养皿，分别加入等量不同浓度的紫杉醇溶液，1号培养皿中加入等量DMSO的培养液，24h后检测各培养皿中乳腺癌细胞的存活率，并据此得出相应的结论。 23. 科研人员在研究中发现某真菌的W基因可编码一种高效降解纤维素的酶，已知乙链为W基因转录的模板链，为使放线菌产生该酶，以图中质粒为载体，进行转基因。 限制酶 BamH I EcoR I Mfe I Kpn I Hind Ⅲ 识别序列和切割位点 G↓GATTC G↓AATTC C↓AATTG GGTAC↓C A↓AGCTT （1）终止子的基本组成单位是______，启动子在基因表达的______过程中发挥作用。本研究中设计两个相同启动子分别连接氨苄青霉素抗性基因和目的基因，其目的是______。 （2）在对基因W的PCR过程中要以______为Taq酶提供复制的起点，在PCR过程中若基因W经5次循环，则产生等长的基因W数目为______个。 （3）为了将W基因与质粒重组且避免质粒和W基因自身环化，最好选择用限制酶______处理W基因、______处理质粒。 （4）研究人员欲对W基因的mRNA进行RT-PCR，已知其mRNA的序列为5′-AUGACGCGC…（中间序列）…CGUGACUGC-3′。为了便于将扩增后的基因和载体成功构建成重组质粒，用于PCR扩增的引物应为 。 A. 5′-GAATTCATG… B. 5′-ATGACGCGC… C. 5′-AAGCTTACG… D. 5′-AAGCTTGCA… （5）另一组科研人员采用基因工程获得转基因番茄，构建的重组载体后常使用______方法导入农杆菌中，实验结束后大量提取成功转化的4株双子叶植株叶片的基因组DNA，用合适的限制酶完全酶切，酶切产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交，其杂交结果如图所示（图中数字标号代表转化成功的植株）。下列有关分析正确的有______。 ①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示 ②杂交带位置不同说明Hind Ⅲ酶切形成的DNA片段长度不同 ③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同 ④目的基因插入受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的 【答案】（1） ①. 脱氧核苷酸 ②. 转录 ③. 依据氨苄青霉素抗性基因表达推测目的基因同时表达 （2） ①. 引物 ②. 22 （3） ①. EcoR I、Hind Ⅲ ②. Mfe I、Hind Ⅲ （4）AD （5） ①. 感受态细胞法（Ca2+处理法） ②. ①②④ 【解析】 【小问1详解】 终止子是DNA片段，DNA的基本组成单位是脱氧核糖核苷酸（或脱氧核苷酸）；启动子是RNA聚合酶结合的位点，启动基因的转录过程。两个启动子分别驱动标记基因和目的基因，可保证二者都能表达，后续可以依据氨苄青霉素抗性基因表达推测目的基因同时表达。 【小问2详解】 PCR过程中，需要引物为Taq酶提供复制起点。PCR扩增n次后，长度与目的基因相等的DNA分子数为2n-2n，因此n=5时，25-2×5=22个。 【小问3详解】 由表格可知，EcoR I和Mfe I切割后产生相同的黏性末端（AATT），Hind Ⅲ单独产生另一种黏性末端；对W基因用EcoR I+Hind Ⅲ切割、质粒用Mfe I+Hind Ⅲ切割后，W基因和质粒两端的黏性末端都不相同，可避免自身环化，且能保证目的基因正确连接。 【小问4详解】 RT-PCR扩增得到的基因，需要在两端加上对应限制酶的识别序列方便连接载体：上游引物5'端需要加EcoR I的识别序列（GAATTC），然后连接起始序列ATG，对应选项A；mRNA的3'端最后序列为…UGC，下游反向引物的5'端需要加Hind Ⅲ的识别序列（AAGCTT），然后连接互补的末端序列GCA，对应选项D，因此选AD。 【小问5详解】 将重组质粒导入微生物（农杆菌）常用Ca2+诱导的感受态细胞法。对杂交结果分析： ①该方法只有含目的基因的片段能与探针杂交显影，植物自身不含目的基因的DNA条带不会显示，①正确； ②电泳中DNA片段长度不同，迁移距离不同，因此杂交带位置不同说明酶切片段长度不同，②正确； ③相同位置仅说明片段长度相同，目的基因插入位置不同，片段侧翼的基因组序列不同，因此整个片段的脱氧核苷酸序列不同，③错误； ④农杆菌转化法中，目的基因整合到植物基因组的位置和数量都是随机的，从杂交带的数量和位置差异也能得到验证，④正确。 24. 肿瘤细胞表面有受体EGFR，CD3是T细胞表面的标志性抗原。科研人员制备双特异性抗体EGFR/CD3，可招募T细胞定向移至肿瘤细胞，增强其对肿瘤细胞的杀伤力，过程如下图所示。 （1）②过程的A、B细胞融合的原理是______，双杂交瘤细胞的特点是______。 （2）注射EGFR进入小鼠体内后，可从小鼠脾脏中获取能产生特异性抗体的细胞B，并用胰蛋白酶进行处理分离制备成______，细胞B与细胞A融合前，______（填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞B数量。 （3）诱导融合：细胞融合过程中可添加______（化学物质）诱导细胞融合。 （4）①第一次筛选：常使用特定的选择培养基（如HAT培养基），该培养基对______细胞生长具有抑制作用。 ②第二次筛选：筛选出杂交瘤细胞后，先进行______，再利用______法，来获得能产生特定抗体的单克隆杂交瘤细胞。 （5）克隆化培养：杂交瘤细胞进行体内培养时一般要在______中进行。据图分析，抗体是由两条H链和两条L链组成的4条肽链的对称结构，双杂交瘤细胞会产生多种抗体，推测其可能的原因是______。 【答案】（1） ①. 细胞膜的流动性 ②. 既能无限增殖，又能产生双特异性抗体 （2） ①. 细胞悬液 ②. 不需要 （3）PEG（或聚乙二醇） （4） ①. 未融合的细胞和同种融合（或融合的具有同种核） ②. 克隆化培养 ③. 抗原—抗体杂交（或专一抗体检测） （5） ①. 小鼠腹腔 ②. 双杂交瘤细胞会表达产生两种H链和两种L链，H链和L链的结合又是随机的，因而产生多种抗体 【解析】 【小问1详解】 A、B细胞融合的原理是细胞膜的流动性。单克隆抗体制备的核心是将能无限增殖的骨髓瘤细胞和能产生特异性抗体、经抗原免疫的B淋巴细胞（浆细胞）融合；双杂交瘤细胞同时具备两种亲本的特点：既能无限增殖，又能产生双特异性抗体。 【小问2详解】 EGFR作为抗原注射小鼠后，小鼠免疫系统会产生特异性抗体，从脾脏中获取细胞B，脾脏组织中的细胞相互黏连，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分解细胞间的蛋白质，使细胞分散形成细胞悬液。细胞B是已免疫的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞(细胞A)融合前不需要原代培养扩大数量，直接融合即可满足实验需求。 【小问3详解】 细胞融合过程中可添加PEG（或聚乙二醇）诱导细胞融合。PEG能改变细胞膜的通透性，使两个细胞的细胞膜融合，进而实现细胞质和细胞核的融合。 【小问4详解】 HAT培养基是筛选杂交瘤细胞的常用选择培养基，它能抑制未融合的亲本细胞(细胞A、细胞B)和同种融合细胞(如细胞A与细胞A融合、细胞B与细胞B融合)的生长，仅允许异种融合的杂交瘤细胞存活。第一次筛选得到的杂交瘤细胞可能存在多种，需先进行克隆化培养，获得单一细胞来源的克隆群，保证细胞的纯度。通过抗原——抗体杂交法等抗体阳性检测方法，筛选出能产生特定抗体(抗EGFR抗体或抗CD3抗体)的单克隆杂交瘤细胞，排除产生无关抗体的细胞。 【小问5详解】 杂交瘤细胞的体内培养一般是注入小鼠腹腔中增殖；双杂交瘤细胞由单克隆杂交瘤细胞与细胞C融合形成，会表达两种不同的H链和两种不同的L链。由于H链和L链的结合是随机的，会形成多种组合，因此理论上会产生多种抗体。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 北魏农学巨著《齐民要术》记载了许多古人在实际生产中积累的经验，也蕴藏着众多生物学知识。请阅读下表中的古籍原文，判断以下相关叙述，错误的是（ ） 工艺名称 古籍原文 酿酒技术 浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷…… 制醋技术 大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之……七日后当臭，衣生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成。 A. 实验室里培养制醋微生物时，一般需将温度设置在30℃～35℃ B. “鱼眼汤”是指液面冒出小泡的现象，主要是醋酸菌呼吸作用释放CO2形成 C. “衣生”指发酵液表面形成一层菌膜的现象，主要是由醋酸菌大量繁殖形成 D. 酿酒过程与制醋过程所用微生物的主要区别是有无以核膜为界限的细胞核 2. 目的基因导入受体细胞后，需要检测目的基因是否可以维持稳定和表达其遗传特性。下列关于目的基因的检测和鉴定的叙述，正确的是（ ） A. 可从转基因生物中提取蛋白质来检测目的基因是否翻译成相应蛋白质 B. 目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是能否转录出mRNA C. 可采用PCR检测目的基因是否转录和翻译 D. 抗虫、抗病检验用于确定转基因生物是否具备相关性状，属于分子水平的检测 3. 合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭细菌的效果，结果如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. 在酒精灯火焰旁倒平板后，再用湿热灭菌法对培养基进行灭菌 B. 菌落计数过程中，将接种针先在酒精灯火焰上灼烧，冷却后再涂布 C. 采用显微镜直接计数法会把死菌和活菌一起计数，所以测得的活细菌的数量会偏小 D. 用C消毒液处理，活菌数减少量最少，且杀菌时间较长，故C消毒液杀菌效果最差 4. 安莎霉素是一类主要由海洋中的稀有放线菌产生的次生代谢产物，具有较高的抗菌活性。经人工诱变后，部分放线菌由于某种酶被破坏，其细胞中某些化学反应不能正常进行，就形成了氨基酸营养缺陷型菌株（不能在基本培养基上生长，只能在完全培养基上生长），这在工业生产上有较广阔的应用前景。利用影印法初检某种氨基酸营养缺陷型菌株的过程如下图，下列相关叙述错误的是（ ） A. 基本培养基与完全培养基存在差异的成分是氨基酸 B. ④培养皿中是完全培养基 C. 进行过程③④培养时，应先将丝绒布转印至④培养基上 D. 应挑取菌落甲进行接种培养，并进一步鉴定 5. 精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，用该方法制备转基因鼠的基本流程如图所示。下列叙述正确的有（　　） A. ①过程中精子获能后细胞膜的流动性增加 B. ②过程采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质都来自父母双方 C. ③过程形成的早期胚胎发育到桑葚胚或原肠胚才能进行胚胎移植 D. ④过程进行胚胎移植前需要对供体和受体进行超数排卵处理 6. 研究表明，青蒿素并非在植物所有细胞中都能合成，它主要发生在叶片和幼嫩茎表面的分泌型腺毛中。某同学想通过植物细胞工程获得青蒿素，下图为其设计的过程示意图，有关说法错误的是（ ） A. 过程①要依次用酒精和次氯酸钠溶液对幼叶进行消毒 B. 过程⑤通过对愈伤组织细胞的培养可从中大量提取青蒿素 C. 经PEG诱导后产生的植株丁发生染色体数目变异 D. 过程②③要选择不同的培养基进行诱导培养 7. 为提高厨余垃圾分解效率，研究人员以厨余垃圾浸出液为培养基（CY），对目标菌株A1、A2、A7和A8进行驯化（通过人工措施使微生物逐步适应某一条件的方法），以制备高活性微生物菌剂。相关实验结果如图所示。下列分析错误的是（　　） A. CY碳源、氮源丰富，比LB更适合大多数菌株生长 B. 可利用稀释涂布平板法对四种菌株进行筛选和计数 C. CY驯化培养可使四种菌株的基因频率发生定向改变 D. 从活菌数上评价，A2菌株的驯化效果最显著 8. 下列关于动物细胞工程和植物细胞工程的叙述，正确的是（ ） A. 花药离体培养得到单倍体植株需要用到秋水仙素来诱导细胞融合恢复成二倍体 B. 愈伤组织和小鼠iPS细胞的诱导形成均发生了基因的选择性表达 C. 植物组织培养和动物细胞培养均需要经过脱分化过程 D. 生产中获得草莓脱毒苗和动物干细胞的培养均使用高压蒸汽灭菌的固体培养基 9. 关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验操作，下列说法正确的是（ ） A. 电泳时，接通电源后，待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳 B. PCR过程中，复性温度过低会导致无法扩增出DNA片段 C. 将洋葱切碎、研磨、过滤，滤液放置4℃冰箱中静置几分钟后，DNA存在于沉淀物中 D. 将PCR产物、核酸染料和凝胶载样缓冲液混合后，用微量移液器加入加样孔 10. 基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速。下图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（ ） A. 扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3′端进行子链合成 B. 目的基因要与能在绵羊乳腺细胞中特异性表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 C. 若目的基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该目的基因中不含启动子序列 D. 可以利用显微注射法将含有目的基因的重组质粒导入受精卵，进一步获得乳腺生物反应器 11. 反向PCR是一种用于扩增已知序列两侧的未知序列的技术，需要先将目标DNA进行环化，再以环化的DNA为模板进行扩增。现利用反向PCR技术来确定目的基因的插入位点，部分过程如下图所示，相关叙述错误的是（ ） A. PCR第三轮循环即可获得两条链等长的未知序列 B. 过程③中复性是在55℃左右使两种引物与模板链结合 C. 过程③所用的酶从引物的3′端开始连接核糖核苷酸 D. 过程②中根据目的基因两端的部分核苷酸序列设计引物1和4 12. 实时荧光RT-PCR用于新冠病毒核酸检测的原理如下：在PCR复性过程中探针会先与DNA的一条模板链结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，在新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如下图，下列相关叙述错误的是（ ） A. PCR过程中消耗引物的量与发出荧光强度呈负相关 B. 进行RT-PCR扩增需要的酶有逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶 C. 还可以通过检测病毒感染后产生的蛋白来检测，其原理是抗原—抗体杂交 D. 以病毒RNA为模板生成cDNA的第一条链时需要引物 13. 双向启动子可同时结合两个RNA聚合酶来驱动下游基因的表达，研究人员构建了如图所示的表达载体，以检测双向启动子作用效果。下列分析错误的是（ ） A. 潮霉素抗性基因和GUS基因不共用一个启动子的目的是确保两个基因能分别表达并各自发挥作用 B. 表达载体中GUS基因和LUC基因转录时分别使用DNA两条单链为模板 C. 为连入GUS基因，需用SalI和SphI酶切已整合了双向启动子及LUC基因的质粒 D. 通过观察是否出现荧光和蓝色物质可检测双向启动子的作用效果 14. 科学家利用蛋白质工程研制出了赖脯胰岛素，与天然胰岛素相比，赖脯胰岛素经皮下注射后易吸收、起效快。下列相关叙述错误的是（　　） A. 赖脯胰岛素在受体工程菌的核糖体上合成 B. 通过蛋白质工程获取赖脯胰岛素的过程是④⑤⑥①②③ C. 必须先合成天然胰岛素基因，再定点突变获得赖脯胰岛素基因 D. 物质a是mRNA，物质b是多肽链，二者序列对应关系由密码子决定 二、多项选择题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。 15. 生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列相关叙述正确的是（ ） A. 转基因生物引发安全性问题的原因之一是外源基因插入宿主基因组的部位不唯一 B. “试管婴儿”、“设计试管婴儿”均利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 C. 抗性基因可能会随花粉传播到田间近缘野生植物体内，造成基因污染 D. 生物武器是利用致病微生物或毒素等生物活性物质来形成杀伤力 16. 可根据微生物发酵时对氧气的需求不同，将微生物发酵分为好氧发酵和厌氧发酵。下列相关说法错误的是（ ） A. 果酒发酵时，应利用葡萄皮上的野生酵母菌直接进行厌氧发酵 B. 生产单细胞蛋白时，酵母菌可利用纤维素水解液进行好氧发酵 C. 泡菜制作时，应将泡菜盐水注满泡菜坛以利于乳酸菌进行厌氧发酵 D. 果醋发酵时，当氧气和糖源都缺少时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸 17. 甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白（血凝素蛋白）密切相关，现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程，图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（ ） A. PCR扩增R基因中，微量离心管、枪头和移液器等在使用前均须消毒处理 B. 构建好的重组质粒长度共2000bp，据图乙可推测BamH Ⅰ在重组质粒上有3个酶切位点 C. 电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定 D. 图甲过程中至少需要应用到逆转录酶、RNA聚合酶、DNA连接酶 18. T-DMI是曲妥珠单抗和药物DMI连接而成的抗体-药物偶联物，对HER-2蛋白有很强的靶向性，可用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。下列叙述错误的是（ ） A. 用选择培养基可筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞 B. 抗体-药物偶联物主要利用抗体杀死肿瘤细胞 C. 用灭活的病毒诱导细胞融合时细胞膜的蛋白质和脂质分子会重新排布 D. T-DMI中曲妥珠单抗与HER-2特异性结合是对癌细胞进行选择性杀伤的关键 19. 2025年3月，我国科学家成功将利用CRISPR/Cas9基因编辑系统改造后的猪肝脏移植入人体。该基因编辑系统主要包括向导RNA（crRNA和tracrRNA组成的复合体）和Cas9蛋白。crRNA含有与靶基因片段配对的序列，与tracrRNA共同协助Cas9蛋白准确定位，进行如图所示的基因编辑。下列叙述正确的是（ ） A. 为降低排斥反应，需敲除猪抗原基因，并使用免疫抑制剂降低细胞免疫水平 B. crRNA特异性识别目标DNA分子，是通过与靶基因片段碱基序列互补配对实现的 C. 通过延长crRNA来提高其特异性，可降低因错误结合而出现“脱靶”的概率 D. CRISPR/Cas9系统工作时作用机理和限制酶完全相同，Cas9蛋白具有专一性，可作用于磷酸二酯键 三、非选择题：本部分包括5题，共计57分。 20. 酿酒酵母是重要的发酵菌种，广泛应用于酿酒、食品加工及生物燃料生产等，研究人员对酿酒酵母菌株的生活条件进行分析研究，以提高发酵产物的产量。 （1）对于酵母菌的培养，比较适合它的培养基为______（A．MS培养基 B．马铃薯蔗糖培养基 C．牛肉汤培养基），除了要选择合适的培养基成分外，还要考虑培养基中营养物质的______。 （2）发酵过程中要测定酵母菌的繁殖速度，可用______法和______法对酵母菌进行计数。在上述第二种方法中用到血球计数板，但计数时数值往往偏______。 （3）在酵母菌发酵过程中，操作人员会定时检测培养液中的酵母菌浓度以了解发酵进程，若将稀释了100倍的培养液用血细胞计数板（1mm×1mm×0.1mm，25个中方格，每个中方格包含16个小格）通过显微镜观察计数，则理论上统计的中方格中酵母菌平均数量应不少于______个才能达到5.5×108个/mL的预期浓度。在恒温培养箱培养时，培养皿的放置方式如图______（填“A”或“B”）。 （4）该酵母菌的发酵食品也会因为发酵时间的长短、条件和底物不同，而形成不同的代谢产物，使发酵食品的风味发生变化。酿酒时会因为发酵液放置过久等原因，导致出现酸味，可能是因为混入了______（填微生物）。 （5）某研究小组从葡萄皮上成功分离出某品种的酵母菌后，取等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于150r/min、200r/min、250r/min的摇床上培养，检测结果如图甲所示，由图中信息可知在______条件下酵母菌种群密度最大。小组同学继续用分离出的酵母菌进行果酒的发酵，发酵产物酒精可用______溶液检验。 21. 基因编辑技术在胚胎工程中得到广泛的应用。如图1表示利用基因编辑技术培养小鼠B的过程，图2表示使用CRISPR/dCas9技术进行基因编辑的过程，其中dCas9不具有内切核酸酶活性，它能与不同作用的酶（A）结合，对基因进行定点修饰。回答下列问题。 （1）图1中，从卵泡中取出卵母细胞进行体外培养，培养液的pH要控制在______，培养基中通常需要加入血清等一些天然成分的原因是______。 （2）图1中，将极体注入次级卵母细胞常采用的方法是______，该过程的作用相当于______。对卵母细胞进行H19和Gt12基因甲基化，Igf2r、Snrpn等多个基因去甲基化处理的目的是______进而提高胚胎的发育率和妊娠率。 （3）图1中将囊胚移植到代孕母鼠之前，需要对代孕母鼠用______进行______处理。 （4）图2中，使用CRISPR/dCas9技术对基因编辑时，sgRNA的作用是______，设计sgRNA时应保证其碱基序列与______。目标序列的甲基化和去甲基化的遗传效应属于______。 22. 紫杉醇是红豆杉属植物产生的次生代谢产物，能促进微管聚合并使之稳定，从而阻碍肿瘤细胞的分裂直至死亡，目前在临床上已经广泛用于乳腺瘤等的治疗。科研小组设计了如图所示的实验流程： （1）②为______过程，______是启动①②过程的关键激素。流程一的原理是______，整个流程二使用了______技术。 （2）应用的是下图是某生物兴趣小组设计的植物细胞悬浮培养装置，请同学们评议，下列评议合理的有 A. 实验流程中应该用蛋白酶等处理愈伤组织制备悬浮细胞 B. 装置中的充气管应置于液面上方，该管可同时作为排气管 C. 装置充气口需要增设无菌滤器，用于防止杂菌污染培养液 D. 细胞培养需要适宜的温度，装置需增设温度监测和控制设备 （3）悬浮培养时发现，即使营养条件充足，红豆杉细胞悬浮培养一段时间也会停止增殖，结合材料分析其原因可能是______。 （4）生物科研小组为探究不同浓度紫杉醇的抑癌效果，进行如下实验，请完成下表。 实验目的 实验操作 制备药剂 取适量紫杉醇溶于DMSO溶剂中制成母液，并进行梯度稀释。 供给乳腺癌细胞存活必需的营养等条件，同时防止培养过程中______ 用蒸馏水、无机盐、葡萄糖、氨基酸及促生长因子等制备合成培养基，针对实验目的①要在培养液中添加适量的______。 乳腺癌细胞培养 将培养瓶置于37℃恒温CO2培养箱中培养24小时，水平晃动培养瓶，使______，再继续培养48小时。 实验分组处理 取2～5号培养皿，分别加入______，1号培养皿中加入等量DMSO的培养液。置于CO2培养箱中继续培养。 检测结果 24h后检测各培养皿中乳腺癌细胞的______。 23. 科研人员在研究中发现某真菌的W基因可编码一种高效降解纤维素的酶，已知乙链为W基因转录的模板链，为使放线菌产生该酶，以图中质粒为载体，进行转基因。 限制酶 BamH I EcoR I Mfe I Kpn I Hind Ⅲ 识别序列和切割位点 G↓GATTC G↓AATTC C↓AATTG GGTAC↓C A↓AGCTT （1）终止子的基本组成单位是______，启动子在基因表达的______过程中发挥作用。本研究中设计两个相同启动子分别连接氨苄青霉素抗性基因和目的基因，其目的是______。 （2）在对基因W的PCR过程中要以______为Taq酶提供复制的起点，在PCR过程中若基因W经5次循环，则产生等长的基因W数目为______个。 （3）为了将W基因与质粒重组且避免质粒和W基因自身环化，最好选择用限制酶______处理W基因、______处理质粒。 （4）研究人员欲对W基因的mRNA进行RT-PCR，已知其mRNA的序列为5′-AUGACGCGC…（中间序列）…CGUGACUGC-3′。为了便于将扩增后的基因和载体成功构建成重组质粒，用于PCR扩增的引物应为 。 A. 5′-GAATTCATG… B. 5′-ATGACGCGC… C. 5′-AAGCTTACG… D. 5′-AAGCTTGCA… （5）另一组科研人员采用基因工程获得转基因番茄，构建的重组载体后常使用______方法导入农杆菌中，实验结束后大量提取成功转化的4株双子叶植株叶片的基因组DNA，用合适的限制酶完全酶切，酶切产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交，其杂交结果如图所示（图中数字标号代表转化成功的植株）。下列有关分析正确的有______。 ①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示 ②杂交带位置不同说明Hind Ⅲ酶切形成的DNA片段长度不同 ③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同 ④目的基因插入受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的 24. 肿瘤细胞表面有受体EGFR，CD3是T细胞表面的标志性抗原。科研人员制备双特异性抗体EGFR/CD3，可招募T细胞定向移至肿瘤细胞，增强其对肿瘤细胞的杀伤力，过程如下图所示。 （1）②过程的A、B细胞融合的原理是______，双杂交瘤细胞的特点是______。 （2）注射EGFR进入小鼠体内后，可从小鼠脾脏中获取能产生特异性抗体的细胞B，并用胰蛋白酶进行处理分离制备成______，细胞B与细胞A融合前，______（填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞B数量。 （3）诱导融合：细胞融合过程中可添加______（化学物质）诱导细胞融合。 （4）①第一次筛选：常使用特定的选择培养基（如HAT培养基），该培养基对______细胞生长具有抑制作用。 ②第二次筛选：筛选出杂交瘤细胞后，先进行______，再利用______法，来获得能产生特定抗体的单克隆杂交瘤细胞。 （5）克隆化培养：杂交瘤细胞进行体内培养时一般要在______中进行。据图分析，抗体是由两条H链和两条L链组成的4条肽链的对称结构，双杂交瘤细胞会产生多种抗体，推测其可能的原因是______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $