湖北省黄冈市黄梅县第一中学2025-2026学年高二下学期5月月考生物试题

**基本信息** 高二年级五月月考生物试题聚焦微生物培养、细胞工程、基因工程等选修模块，以发酵食品、ADC药物等真实情境为载体，通过实验分析（如稀释涂布平板法、PCR技术）和逻辑推理（如限制酶切割方向判断）考查科学思维与探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|18题/36分|微生物培养（1-5）、细胞工程（6-9）、胚胎工程（10-12）、基因工程（13-18）|结合海拉细胞、治疗性克隆等科技情境，考查基础原理与辨析能力| |非选择题|4题/64分|发酵技术（19）、单克隆抗体（20）、核移植（21）、PCR与基因插入（22）|以《我不是药神》生物导弹、丁酸钠实验等为背景，综合考查实验设计、结果分析及科学表达|

高二年级五月月考生物试题 考试时间：75分钟 一、单选题(每题2分，共36分） 1.为获得优良的发酵食品，实验室在三支试管中培养了酵母菌、醋酸菌、乳酸菌。图中甲、乙、丙三支试管的菌种(试管内深色区域表示菌种存在的位置)及其发酵食品对应正确的是(　　) A.甲试管：醋酸菌——泡菜；乙试管：乳酸菌——果酒；丙试管：酵母菌——果醋 B.甲试管：醋酸菌——果醋；乙试管：乳酸菌——泡菜；丙试管：酵母菌——果酒 C.甲试管：醋酸菌——果醋；乙试管：酵母菌——果酒；丙试管：乳酸菌——泡菜 D.甲试管：酵母菌——果酒；乙试管：醋酸菌——果醋；丙试管：乳酸菌——泡菜 2．获得纯培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下列有关无菌技术的叙述，正确的是(　　) A.操作者的双手清洁后，用无水乙醇擦拭消毒 B.巴氏消毒法处理的食品不含有微生物，可长期保存 C.平板划线接种微生物时须在酒精灯火焰旁操作 D.培养基、培养皿等均须采用干热灭菌法灭菌 3.下列有关微生物培养基的配制，叙述错误的是(　　) A.培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为氮源和能源 B.尿素固体培养基中的KH2PO4能用于维持培养基的pH C.培养光能自养型的蓝细菌的培养基中不需要提供有机物 D.马铃薯蔗糖固体培养基中的琼脂能作为酵母菌的碳源 4.某些微生物能合成几丁质酶，使几丁质降解为N－乙酰氨基葡萄糖后进一步转化利用。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶，用于生物防治。下列相关叙述错误的是(　　) A.土壤样品应加到以几丁质为唯一碳源的选择培养基中培养 B.目的菌的纯化和计数可以使用平板划线法或稀释涂布平板法 C.可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株 D.获得的几丁质酶可用于防治某些有害的甲壳类动物、昆虫等生物 5.某兴趣小组按如图方法对没有加工的鲜奶进行细菌检测。下列有关叙述正确的是(　　) A.鲜奶常采用湿热灭菌法进行灭菌 B.若培养基需要调节pH，应该在灭菌后培养基凝固前立即进行 C.若3个培养皿中菌落数为35、33、34，则鲜奶中细菌数为3.4×106个/mL D.对鲜奶中细菌计数，常采用稀释涂布平板法，统计的结果往往比实际值偏高 6.下列关于植物组织培养中再分化的说法，错误的是(　　) A.再分化过程中，不同细胞内合成了功能不同的特异性蛋白质 B.脱分化与再分化使用的培养基主要是激素浓度及比例不同 C.再分化过程在实验室或植物组织培养车间进行，需要避光处理 D.再分化过程中，核遗传物质没有发生改变，但mRNA有变化 7.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理相符的是(　　) A.原生质体融合和动物细胞融合——生物膜选择透过性 B.动物细胞培养——细胞的全能性 C.纤维素酶、果胶酶处理——酶的高效性 D.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖 8.海拉细胞是从一位患宫颈癌的病人身上分离出来的宫颈癌细胞，该病人已经去世，但海拉细胞直到今天还被用于科学研究。下列说法正确的是(　　) A.海拉细胞可在体外大量增殖，在细胞培养过程中会出现接触抑制现象 B.将癌变的宫颈癌组织分散为单个的海拉细胞，可用胃蛋白酶处理 C.培养海拉细胞时，O2是细胞代谢所必需的，可将培养皿置于含有95%的O2和5%的CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养 D.培养液需定期更换，以便清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 9.2021年6月，我国首个原创性抗体—药物偶联物(ADC)获批上市。该药采用人源化抗HER－2抗体，通过可切割的接头与高效毒性分子MMAE偶联。ADC被肿瘤细胞内吞后，载荷MMAE被释放到细胞质中，可抑制细胞中微管蛋白聚合，进而影响纺锤体的形成。下列叙述错误的是(　　) A.传统鼠源性单抗可能会引起人体产生相应抗体进而影响ADC的效果 B.ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子脱落而对正常细胞造成损伤 C.连接抗体和MMAE的接头可能在肿瘤细胞溶酶体中被蛋白酶破坏 D.MMAE可能抑制肿瘤细胞内着丝粒分裂从而使其停滞在分裂中期 10.下列关于哺乳动物受精的描述正确的是(　　) ①获能后的精子与卵子相遇，释放多种酶，以溶解卵细胞膜外的结构(如透明带等) ②精子的细胞膜与卵细胞膜融合，卵细胞膜发生反应，阻止后来的精子进入卵内 ③精子入卵后，原有核膜破裂，最后形成一个比原来精子的核还大的雄原核 ④精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核 ⑤合子中的遗传物质，一半来自父方，一半来自母方 A.①③④ B.③④⑤ C.②④⑤ D.①③⑤ 11.如图所示为治疗性克隆的基本过程，首先取病人的体细胞核，移植到去核的卵母细胞中，在早期胚胎形成后，从中分离获得胚胎干细胞(ES细胞)，对ES细胞进行基因修饰和定向分化处理，将定向分化后的细胞移植给病人，从而达到治疗疾病的目的。下列相关叙述错误的是(　　) A.接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期 B.获得图中去核的卵母细胞时，可通过显微操作去核 C.图中形成的器官用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应 D.治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术和胚胎移植技术 12.羊奶的脂肪颗粒体积为牛奶的三分之一，更利于人体吸收，其维生素及微量元素含量明显高于牛奶。欲利用胚胎工程技术加快高产奶的萨能山羊的繁殖，下列说法正确的是(　　) A.为使萨能母羊超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素 B.卵裂期的细胞数量增加，但细胞的体积和细胞内有机物的种类会减少 C.为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割移植等无性繁殖技术 D.生产上可选用原肠胚细胞进行性别鉴定 13.如图为利用逆转录方法和PCR技术扩增目的基因片段的过程示意图。据图分析，下列说法错误的是(　　) A.在第3轮PCR结束后，两条链等长的DNA占 B.⑤过程使用72 ℃左右的温度处理既可以防止DNA变性，又可以促进子链的延伸 C.④过程两种引物通过碱基互补配对分别与DNA两条单链结合 D.第4轮④过程中消耗15对引物 14.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是(　　) A.将预冷酒精加入上清液后，出现的白色丝状物为粗提取的DNA B.鉴定DNA时应将丝状物直接加到二苯胺试剂中进行水浴加热 C.将扩增得到的PCR产物与不含指示剂的电泳缓冲液混合，注入加样孔 D.在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小、构象等有关 15.当目的基因和质粒都用HindⅢ处理、连接后，目的基因可能正向插入载体，也可能反向插入载体，为判断目的基因的插入方向，可使用限制酶处理，并进行电泳检测(如图)。下列选项中能判断目的基因插入方向的限制酶是(　　) 注：EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的识别序列、切割位点均不同，数字表示相邻两个限制酶切点之间的碱基对数(bp)，质粒全长20 000 bp。 A.HindⅢ B.EcoRⅠ C.BamHⅠ D.EcoRⅠ和HindⅢ 16.水杨酸羟化酶可催化水杨酸转化为龙胆酸，龙胆酸可被细胞利用。科研人员欲将水杨酸羟化酶基因与红色荧光蛋白基因（mrfp）连接成融合基因，导入工程菌中，以实现对水杨酸的动态监测和清除，基因结构如图所示。现欲通过PCR判断融合基因的连接方向是否正确，应选用的引物组合是（　　） A．引物1和引物2 B．引物1和引物3 C．引物1和引物4 D．引物2和引物4 17.THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述错误的是（    ） EcoRI BamHI KpnI MfeI HindIII 5′−G↓AATTC−3 3′− CTTAA↑G−5′ 5′−G↓GATCC−3 3′− CCTAG↑G−5′ 5′−G↓GTACC−3′ 3′−CCATG↑G −5′ 5′−C↓AATTG−3′ 3′−GTTAA↑C −5′ 5′−A↓AGCTT−3′ 3′−TTCGA↑A −5′ A．THP9基因有2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在5′端 B．构建基因表达载体时，用KpnI、HindIII切割质粒和目的基因 C．利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物2和引物3 D．为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，需要在个体水平上检测其蛋白质含量 18.最早的双脱氧测序法是PCR反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧核苷三磷酸(ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP)，子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则，以加入ddATP的体系为例：若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧腺苷三磷酸(dATP)，继续延伸；PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述不正确的是(　　) A．上述PCR反应体系中只加入一种引物 B．5′－CTACCCGTGAT－3′为对照个体的一段序列 C．患者该段序列中某位点的碱基C突变为G D．电泳时产物的片段越小，迁移速率越快 2、 非选择题(除标注外每空2分，共64分） 19.(16分)食醋酿造是多种微生物共同作用的过程，主要微生物为霉菌、酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。食醋发酵过程分为淀粉糖化、酒精发酵和醋酸发酵三个阶段，期间有不同种类的微生物生长繁殖并产生各种酶类，经过一系列复杂的生物化学变化最终形成食醋。 (1)发酵原料中的淀粉为微生物提供________(营养物质)。参与发酵的多种微生物种间关系属于________。 (2)研究人员对食醋固态发酵过程中微生物的生长变化规律进行研究。下图为醋醅(食醋发酵的物料)不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况。 ①用________________法将接菌种种到添加了碳源、氮源、无机盐、水以及________的培养基中，培养一段时间，获得单菌落后，挑选菌落数符合要求的平板进行计数。 ②由图1可知，整个发酵过程中酵母菌数量呈现________________________的趋势，且在不同层次上随着深度增加而减少。初期，由于________________，上层菌增殖速度高于中层及下层菌。之后，随着发酵条件的变化，酵母菌基本停止繁殖而主要进行酒精发酵。在第7天以后随发酵时间延长，酵母菌的数量呈降低趋势，原因是________________________________________________________________________________________________________________。 ③图2显示，醋酸菌在1～3天繁殖最快。醋酸菌将乙醇转化为醋酸，反应简式为：_______________________________________________________________。 20.(20分)电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物，此类靶向药物可称为“生物导弹”。通常，我们采用动物细胞融合技术来制备单克隆抗体，利用单克隆抗体来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段。 (1)若单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌，则特定抗原通常是____________________。靶向药物比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小是因为 ______________________________________________________________________。 (2)图中诱导细胞融合时需要采用_________________________ 或电融合法等方法诱导，杂交瘤细胞的特点是________________________________。 (3)用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞进行____________和________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 (4)近年来，科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响，某科研小组进行了相关实验，结果如表所示：丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体的影响 丁酸钠的浓度/(mmol·L－1) 时间/h 48 96 144 0 1∶320 1∶640 1∶1 200 0.25 1∶320 1∶1 280 1∶2 500 0.5 1∶160 1∶2 500 1∶2 500 0.75 1∶320 1∶320 1∶640 注：表中比值表示抗体效价，值越高表明越有利于抗体的产生。 ①该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO2的培养箱中培养，CO2的主要作用是________________，该实验的自变量为_______________________。 ②根据表中数据，分析丁酸钠浓度与单克隆抗体产生量的关系：(4分) ______________________________________________________________________。 21.(14分)由于猪的器官在生理形态上和人的器官非常接近，近年来应用猪的体细胞核移植技术研制人类基因疾病的动物模型，以及生产基因敲除猪用于人异种器官移植成为猪核移植相关研究的热点方向。下图为猪的体细胞核移植流程示意图，请回答下列问题。 (1)研究人员在用合成培养基对猪耳部成纤维细胞进行培养时，通常需加入________等一些天然成分。 (2)从卵巢中采集的卵母细胞需在体外培养至________期才能用于体细胞核移植。除该方法外，采集卵母细胞还可采用超数排卵法，其具体做法是给卵母细胞供体注射_________________，使其排出更多的卵子。 (3)重构胚通常需培养至________________期，然后通过________技术送入代孕母猪体内。为提高胚胎的利用率，还可采用________技术对胚胎进行处理。 (4)就猪的体细胞移植技术本身来讲，虽然已经有多例体细胞克隆猪诞生，但总体的效率还是较低的，克隆猪的存活率只有1%或更低。研究表明，用组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸(VPA)处理重构胚能显著提高其发育能力。从而大大提高克隆效率。若想探究VPA处理重构胚的最适浓度，其实验思路是______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________。 22.(14分)农杆菌Ti质粒上的T－DNA(序列已知)可以转移并随机插入被侵染植物的染色体DNA中。研究者将图1中被侵染植物的DNA片段连接成环，并以此环为模板，利用PCR技术扩增出T－DNA插入位置两侧的未知序列，进一步分析可确定T－DNA插入的具体位置。T－DNA的序列如图2所示，虚线处略了部分核苷酸序列。已知Sal Ⅰ酶的识别序列为5′—G↓TCGAC—3′。回答下列问题： (1)PCR技术扩增时起关键作用的酶是________，其作用是___________________。 (2)扩增出T－DNA插入位置两侧的未知序列时，需要先根据____________________设计两种特异性引物序列，利用图中的引物________组合可扩增出T－DNA两侧的未知序列。 (3)若只使用一种引物，通过PCR技术制备与T－DNA的b链相同的单链作为某些检测的探针，则所选择引物由5′→3′的前5个碱基序列为________。 (4)对PCR产物测序，经分析得到了图1中的未知序列。下列DNA单链序列中(虚线处省略了部分核苷酸序列)，可能正确的是________。 A.5′—GTCGACCAC……ATGTCGA—3′ B.5′—AATTCCATG……CTGAATT—3′ C.5′—GCAATGCGT……TCGGGAA—3′ D.5′—TTGATACGC……CGAGTAC—3′ (5)PCR技术扩增出T－DNA插入位置两侧的未知序列后，扩增产物可用________________技术进行鉴定。 高二年级五月月考生物试题答案 选择题： BCDBC CDDDA DCDBB BBC 19.答案　(1)碳源　种间竞争 (2)①稀释涂布平板法　琼脂　②先快速升高后缓慢降低　溶解氧的存在　　酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖(营养物质减少及有害代谢产物的积累) ③　C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O＋能量 20.答案　(1)肠癌细胞(膜)表面的蛋白质　单克隆抗体可特异性的结合癌细胞，不损伤正常细胞 (2)灭活病毒诱导法或聚乙二醇(PEG)融合法　既能迅速大量增殖，又能产生抗体 (3)克隆化培养　抗体检测 (4)①维持培养液的pH　丁酸钠的浓度和培养时间　②在一定浓度范围内，丁酸钠浓度越高，单克隆抗体产生越多，超过一定浓度，丁酸钠会抑制抗体的产生 21.答案　(1)血清(或动物血清)　(2)M Ⅱ　促性腺激素，　(3)桑葚胚或囊胚　胚胎移植　胚胎分割　(4)设置一系列浓度梯度的VPA溶液分别处理重构胚，一段时间后观察统计胚胎的发育情况 22.答案　(1)Taq DNA聚合酶(或耐高温的DNA聚合酶)　将游离的脱氧核苷酸连到引物的3′端　(2)T－DNA两端已知的碱基序列　①④ (3)5′—CTGTC—3′　(4)A　(5)琼脂糖凝胶电泳 第 2 页 共 6 页 第 1 页 共 6 页 学科网（北京）股份有限公司 $