河南省许昌市建安区第二高级中学2025-2026学年第二学期第二次质量检测高二生物

**基本信息** 高二生物期末质量检测，涵盖微生物工程、基因工程等模块，非选择题突出实验设计与综合应用，如纤维素分解菌筛选、“生物导弹”制备，体现科学思维与探究实践。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/48分|传统发酵技术（题1）、PCR技术（题11）、胚胎工程（题8）|结合文化传承（题6引用古人酿酒诗句）、科技前沿（题9 iPS细胞治疗干眼症）| |非选择题|5题/52分|微生物培养计数（题17）、原生质体融合（题18）、转基因青稞培育（题20）|注重实验设计（题18预实验浓度梯度探究）、科学思维（题19单克隆抗体制备流程分析）|

2025-2026学年第二学期第二次质量检测 高二生物 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置上。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 一、选择题：本部分共16题，每题3分，共48分。在每题列出的四个选项中，选出最符合题目要求的一项。 1．下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（     ） A．醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸 B．酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精 C．泡菜腌制利用的乳酸菌是异养厌氧型生物 D．腐乳制作利用了毛霉等微生物将蛋白质分解 2．发酵工程的中心环节是（     ） A．菌种的选育 B．发酵罐内的发酵过程 C．培养基的配制 D．产品的分离提纯 3．一种生活在深海的赖氨酸缺陷型稀有放线菌能产生安莎霉素，安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染，具有较高的抗菌活性。为培育能高产安莎霉素的菌种，研究人员用紫外线对采自深海的放线菌进行了诱变，实验的部分流程如下图所示，下列相关的判断中正确的是（     ） 注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落 A．①中的培养基是以安莎霉素为唯一碳源的选择培养基 B．在①中进行培养时，接种后要对培养基进行灭菌处理 C．②和④是完全培养基，③是缺赖氨酸的不完全培养基 D．甲菌落不能产生安莎霉素，而乙菌落能产生安莎霉素 4. 在实验室中培养微生物时，常用到不同的分离和计数方法。下列叙述正确的是（     ） A．碳源是微生物生长的必需营养物质，故不含碳源的培养基无法培养出微生物 B．分离土壤中分解尿素的细菌时，土样梯度稀释后常用血细胞计数板进行计数 C．用接种环对挑取的菌种进行连续的平板划线4次，也需要灼烧接种环4次 D．对培养液中的酵母菌进行计数时，若先滴加培养液再盖盖玻片，结果会偏高 5. 某校生命科学社的同学利用学校实验平台对微生物进行纯培养，下列操作中正确的有几项（     ） ①在接种室内预先喷洒煤酚皂溶液，并用紫外灯照射进行消毒 ②为避免杂菌污染，超净工作台需全程开启紫外灯 ③培养基中的牛肉膏和蛋白胨可为微生物提供氮源 ④所有微生物培养时，培养基中都需加入碳源 ⑤利用接种环接种前需对其进行灼烧灭菌 ⑥消毒比灭菌更加温和，生物消毒法可以除去环境中全部微生物 ⑦在培养乳酸杆菌时，培养基中需添加纤维素 ⑧使用后的培养基可直接丢入垃圾桶 ⑨生长在伊红——亚甲蓝琼脂培养基的大肠杆菌菌落呈深紫色，有金属光泽 A．2项 B．3项 C．4项 D．5项 6. 宋人张表臣曾在《珊瑚钩诗话》中说：“中古之时，未知曲蘖，杜康肇造，爱作酒醴，可为酒后，秫酒名也”。这显示出古人已经开始采用糵（发芽的谷物）来发酵产酒，目前该技术仍用于现代啤酒生产。下列叙述正确的是（     ） A．大麦发芽程度越高，释放的淀粉酶越多越有利于啤酒生产 B．啤酒酵母的扩大培养与发酵产酒需要控制的条件相同 C．主发酵过程冷却水流量突然增大会导致的生成量增加 D．啤酒的后发酵降低发酵温度，有利于次生代谢物的积累 7. 下列有关植物细胞工程的应用的叙述，错误的是（     ） A．微型繁殖技术不仅能实现种苗的大量繁殖，还能保持优良品种的遗传特性 B. 利用茎尖进行作物脱毒的原因是茎尖的病毒极少，甚至无病毒 C. 利用射线、化学物质等诱变因素处理愈伤组织并进一步培养，可获得突变体 D. 生产中常采用植物组织培养技术获得植物的次生代谢产物 8. 科研人员以小鼠为实验材料，进行胚胎工程的相关操作，具体情况如图所示。下列说法正确的是（     ） A. 将MⅠ期的卵母细胞与获能后的精子共同培养完成体外受精 B. 对桑葚胚或囊胚进行二分制，可获得基因型完全相同的两个胚胎 C. 通常选用早期胚胎的内细胞团进行DNA分析等检测 D. 超数排卵处理时，常用含性腺激素的促排卵剂 9. 干眼症是由于泪液分泌减少导致的眼睛干涩的病症。通过将有关基因导入已分化的体细胞获得类似胚胎干细胞（ES细胞）的诱导多能干细胞（iPS细胞），进而培养得到眼结膜组织，可分泌泪液成分“粘液素”，有望治疗干眼症。下列说法错误的是（     ） A. 导入的基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力 B. 利用iPS获得眼结膜组织时应加入分化诱导因子 C. 不同类型的干细胞，它们的分化潜能是有差别的 D. 利用ES细胞治疗人类疾病的前景优于iPS细胞 10. 作为基因的运输工具-载体，必须具备的条件之一及理由是（     ） A. 能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因 B. 具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C. 具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合 D. 对宿主细胞无伤害，以便于重组DNA的鉴定和选择 11. 下列关于PCR技术的相关叙述，正确的是（     ） A.PCR反应体系需加入4种核糖核苷酸作为原料 B. 利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，将凝胶置于300nm紫外灯下可观察扩增结果 C.PCR利用了DNA的热变性原理，在反应体系中需添加耐高温的DNA聚合酶和DNA 连接酶 D. 一般加入的引物有2种，分别与两条模板链的5'端结合 12.RT - PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，可以用来检测RNA病毒，具体过程如下，有关叙述错误的是（     ） A. 过程I需用到游离的脱氧核苷酸、逆转录酶、核酸酶等 B. 利用RT—PCR技术获取的目的基因能在物种之间交流 C. 图中单链cDNA在PCR扩增n次后，理论上需要引物B 2ⁿ - 1个 D. 该技术提高了待测RNA逆转录产生的DNA数量，提高了检测的灵敏度 13. 如图为用转基因牛生产人血清白蛋白（药用蛋白）的过程，分析图中操作过程。下列叙述错误的是（     ） A. 图中的受体细胞是乳腺细胞，所以药用蛋白基因可以在乳腺细胞中表达 B. 上述过程实现了跨物种的基因重组 C. 过程①通常采用的方法是显微注射法 D. ②需要筛选性染色体组成为XX的胚胎进行移植 14. 利用基因工程赋予生物以新的遗传特性，或创造出更符合人类需要的生物产品时，需要使用多种工具酶，有4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。下列相关叙述错误的是（     ） A．限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，能识别特定核苷酸序列 B．用限制酶SmaⅠ和EcoRV切割后产生的均为平末端 C．DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是磷酸二酯键 D．含有1个EcoRⅠ识别位点的环状DNA，被EcoRⅠ切割后可形成2个DNA片段 15．下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（     ） A．可选择新鲜洋葱、香蕉、菜花或猪肝等作为材料粗提取DNA B．滤液沉淀过程中放在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解 C．鉴定DNA时将丝状物直接加入二苯胺试剂中并进行沸水浴加热 D．加入冷却的酒精后可用玻璃棒沿一个方向搅拌滤液进而获得DNA 16．生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（     ） A．转基因技术可用来增加酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期 B．把抗虫基因整合到植物叶绿体基因组中，可减少因花粉扩散造成的基因污染 C．反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿 D．生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等 二、非选择题：共5题，共52分。 17．（11分．每空1分） 地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%能被土壤中某些微生物 分解利用。科研人员从森林土壤中筛选纤维素分解菌并计数，进行了如图所示操作。请回答 下列有关问题： （1）配制培养基时，培养基中一般都含有水、碳源、            、            等营养物质。 答案第5页，共9页 （2）防止杂菌污染，____是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。在提取分离过程中，对吸管、培养皿通常采用____法进行灭菌，对操作的空间、操作者的衣着和手进行____。筛选时所用的培养基需添加____作为唯一碳源。 （3）图中的接种方法是____。用该计数方法得到的菌落数量比活菌的实际值小，原因是____；若用显微镜计数法统计，结果比实际活菌数偏大，原因是____。 （4）可通过单菌落周围的透明圈判断其分解纤维素能力更强，判断依据是____。 若将稀释倍数是的菌液涂布平板，3个平板平均菌落数分别为111，120，129，305则每1mL菌液中活菌数为____个。 18.（11分. 除标注外每空1分） 同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀气病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀气病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R - 6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同） （1）步骤①诱导二者原生质体融合时除可用PEG处理外，还有____（答两种）等方法。 （2）据图可知，本研究主要利用的生物技术的原理是____。此种育种方式的优点是____。 （3）上述过程中需要提供光照的是____（填序号），光照的作用是____。得到的杂种植株是____倍体，理论上是否可育？____。请回答并阐述理由____。 （4）在实验前需要通过预实验来探究R - 6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，如何设计预实验：____。 19.（12分. 除标注外每空1分） 某科研团队欲利用以下技术路线，开发一种能特异性识别非小细胞肺癌细胞表面的抗原A，并携带高效抗癌药物M的“生物导弹”，同时尝试通过核移植技术获得能大量生产该抗体的克隆动物。图1、图2是该团队设计的部分技术流程示意图（图中仅展示关键步骤，部分过程未详述）。回答下列问题： （1） 在体外培养杂交瘤细胞时，培养基中除必要的营养物质外，通常需要加入____等天然成分，需要提供的气体条件是____。培养时细胞可能表现为：____。悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。贴壁细胞在生长增殖时，除受上述因素的影响外，还会发生____现象，即当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。 （2） 图1中，诱导小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的常用化学试剂是____。图1中，对融合后的细胞进行两次筛选的目的和方法均不同：第一次筛选是为了获得细胞X，是用____进行筛选的，第二次筛选获得细胞Y，该细胞应具备的特点是____。 （3） 图1中，运用到的动物细胞工程技术是____。图2中，目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是____。重构胚形成后，需用物理或化学方法（如电刺激、____、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等）激活，使其完成细胞分裂和发育进程。 （4） 克隆动物早期胚胎培养过程中，需向培养液中添加血清、血浆等天然成分。科研人员为了探究“经抗原A免疫后的小鼠血清中是否含有针对抗原A的抗体”，请以抗原A、经抗原A免疫后的小鼠血清、健康小鼠血清等为材料，设计一个简单的实验。实验思路：____。 20. （8分。除标注外每空1分） 青藏高原地区气候寒冷，低温冻害频发，严重影响青稞的正常生长与产量。我国科研人员从高原特有耐寒植物雪灵芝中获得了抗冻基因Frosty，利用基因工程技术将Frosty基因导入青稞，培育出抗冻转基因青稞新品种。 限制酶 识别序列及切割位点 Bgl II 5’-             3’-TCTA             Nde I 5’-CA             3’-GTAT             Xho I 5’-C             3’-GAGCT             EcoR I 5’-G             3’-CTTAA             BamH I 5’-G             3’-CCTAG             Sal I 5’-G             3’-CAGCT             Xba I 5’-T             3’-AGATC             （1）构建抗冻转基因青稞新品种过程中，Ti质粒的T - DNA可随机整合至青稞的            中，筛选后的细胞需经植物组织培养成为突变体植株。 （2）为了将Frosty基因正确插入质粒构建重组质粒，利用PCR技术扩增Frosty基因时需在引物的            （填写“5’端”或“3’端”）添加限制酶的识别序列，结合上表限制酶的识别序列及切割位点分析，上游引物应添加限制酶            的识别序列。应选用两种限制酶            切割质粒，双酶切的优点是：            。 （3）将重组质粒导入农杆菌后，若要筛选成功导入重组质粒的农杆菌，应使用含            的培养基；若要进一步检测Frosty基因是否在青稞细胞中成功表达蛋白质，可采用            技术。 （4）在个体水平鉴定转基因青稞的抗冻性，具体操作为：            。 21. （10分. 除标注外每空1分） PCR技术可用于基因工程中目的基因的获取、扩增和检测，请分析下列相关问题。 （1）理想状态下，一个DNA片段经过n轮PCR扩增所消耗的引物数量是            个；耐高温的DNA聚合酶能与引物结合，并从引物的            （3’，5’）端连接脱氧核苷酸；PCR过程中用到的引物在允许范围内片段越长，理论上扩增出来的非特异性片段（非目标片段）越            （多，少）。 （2）PCR扩增缓冲液中Mg²⁺的作用是            ，PCR的变性、复性、延伸三个阶段需调控到三个不同的温度，如94℃、55℃、72℃，其中            ℃时DNA聚合酶的活性较高。PCR的产 物一般通过            来鉴定。 （3）科研人员构建了可表达I-VS融合蛋白的重组质粒并进行了检测。构建重组质粒后，为了确定I基因连接到质粒中且插入方向正确（图1示插入方向正确），需进行PCR检测。若仅用一对引物，应选择图1中的引物对            或            。 （4）如图所示，在一段未知序列的突变体DNA片段中，插入了已知序列的T-DNA，要想对T-DNA两侧的未知序列进行测序，可用DNA连接酶将该DNA连接成环状后，再用引物            （填序号）PCR扩增后测序。 试卷答案 一、选择题（每题3分，共48分） 1 2 3 4 5 6 8 9 10 11 A B C D B D B D A B 12 13 14 15 A A D D 16. 无正确答案 二、非选择题（共52分） 17. （11分，每空1分） （1） 氮源 无机盐 （2） 无菌技术 干热灭菌 消毒 纤维素 （3） 稀释涂布平板法 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 显微镜计数法将死菌和活菌都统计在内 （4） 甲菌落周围的透明圈更大，说明其分解的纤维素更多，分解能力更强 18. （11分，除标注外每空1分） （1） 电融合法、离心法（或聚乙二醇法、高 高pH融合法，任选两种） （2） 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，获得兼有双亲优良性状的新品种 （3） ③ 诱导叶绿素的形成，使植株能进行光合作用制造有机物 六 不可育 紫花苜蓿是同源四倍体，百脉根是二倍体，杂种细胞中三个染色体组，减数分裂时联会紊乱，不能产生正常配子 （4） 设置一系列浓度梯度的R6G和IOA溶液，分别处理等量的紫花苜蓿和百脉根原生质体，将处理后的原生质体培养在适宜的愈伤组织诱导培养基上，观察愈伤组织的生长情况，刚好使原生质体不能再生愈伤组织的最低浓度即为临界浓度（3分） 19. （12分，除标注外每空1分） （1） 血清、血浆 的混合气体 细胞贴壁生长、接触抑制 接触抑制 （2） 聚乙二醇（PEG） 选择培养基 既能迅速大量增殖，又能产生所需的专一抗体 （3） 动物细胞融合技术、动物细胞培养技术 显微操作法 载体 （4） 取等量的抗原A均分为两组，一组加入经抗原A免疫后的小鼠血清，另一组加入健康小鼠血清，在适宜条件下反应一段时间后，观察是否出现沉淀（或凝集反应），若加入免疫小鼠血清的组出现沉淀，说明血清中含有针对抗原A的抗体，反之则没有（3分） 20. （8分，除标注外每空1分） （1） 染色体DNA （2）5’端 Xba I Xba I和BamH I 防止目的基因和质粒自身环化，保证目的基因按照正确的方向插入质粒 （3） 卡那霉素 抗原抗体杂交 （4） 将转基因青稞和普通青稞置于相同的低温环境中培养一段时间，观察两者的生长状况，若转基因青稞生长状态更好，说明其抗冻性更强（2分） 21. （10分，除标注外每空1分） (1)2(2 1)3’ 多 （2） 作为DNA聚合酶的激活剂，维持DNA聚合酶的活性72琼脂糖凝胶电泳 (3)F2和R1 F1和R2 (4)R1和R2 学科网（北京）股份有限公司 $