专题05 发酵工程（期末真题汇编，上海专用）高二生物下学期

**基本信息** 聚焦发酵工程专题，融合手机细菌检测、林可霉素生产、紫杉醇合成等真实情境，通过三层突破设计实现基础巩固与创新应用的衔接，适配高中生物学期末综合测评需求。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |非选择题|8大题|发酵工程、微生物培养、基因工程、植物细胞工程|以手机细菌对比实验考查培养基选择与操作规范，结合林可霉素生产菌鉴定体现科技前沿，通过甜米酒制作融入传统发酵文化，注重实验设计与结果分析的科学思维考查|

专题05 发酵工程 解析版 核心必练+进阶提升+培优冲刺 三层突破 1． 【答案】(1) 固体 葡萄糖 (2) 1 培养基1属于通用培养基，可满足多种微生物的营养需要（或写培养基2是无氮培养基，不能满足多种微生物生长的需要） (3)①④⑤⑥ (4)①③⑤ (5)ACD (6)CD (7) 无有机碳源 培养基灭菌温度太低 (8)C (9) 错误 错误 正确 (10)AB (11)Asp 【分析】1、原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核。 2、微生物实验室分离中配制培养基的操作步骤：计算→称量→溶解→调pH→灭菌步骤。 【详解】（1）上述培养基中含有琼脂，属于固体培养基。培养基2中葡萄糖可以提供碳源。 （2）培养基1属于通用培养基，可满足多种微生物的营养需要，故应该选择培养基1。 （3）①用无菌棉拭子取样，可以避免杂菌污染，①正确； ②不能用接种环取样，②错误； ③在不同样品表面任选5个点取样，可能误差较大，③错误； ④在不同样品表面选固定面积的区域内取样，可以减小误差，④正确； ⑤在取样部位反复涂抹5次，增加细菌数目，⑤正确； ⑥将采集到的样本置于无菌试管内封闭备用，避免杂菌污染，⑥正确。 故选①④⑤⑥。 （4）①操作I可将待测样本放入无菌生理盐水，避免杂菌污染，①正确； ②接种时用涂布器进行接种，②错误； ③接种时用涂布棒进行涂布，使微生物分散开来，③正确； ④不同的培养基平板需在皿底上做好记号，④错误； ⑤接种后的培养基平板需倒置放在恒温箱中培养2-3天，⑤正确。 故选①③⑤。 （5）A、取样部位不同，其细菌的种类和数量有较大差异，可能造成不同的结果，A正确； B、如果细菌的生长速度不同，在相同的实验条件下，二者会有一定的差异，但不会截然相反，B错误； C、样本数少，偶然性较大，影响实验结果可信度，可能会造成截然相反的结果，C正确； D、个人卫生习惯和取样环境等因素不同，会使细菌的种类和数量有较大差异，可能造成不同的结果，D正确。 故选ACD。 （6）细菌属于原核生物，真菌属于真核生物，原核细胞和真核细胞最大的区别是有无成形细胞核，原核细胞没有复杂细胞器，真核细胞有各种细胞器。因此若鉴别林可霉素生产菌属于细菌或真菌，可根据有无成形细胞核来区分，根据有无内质网来区分。 综上所述，CD正确，AB错误。 故选CD。 （7）林可霉素生产菌培是一种细菌，细菌绝大多数是营寄生或腐生的异养型生物，因此培养基中应该含有有机碳源；该流程中高压蒸汽灭菌的温度100℃是不对的，应该是121℃，即无有机碳源和培养基灭菌温度太低。 （8） 抗生素能选择性地作用于细菌，主要是对细菌起作用，因此为鉴定林可霉素生产菌产抗生素的能力，图中培养皿丙中需预先涂布细菌即大肠杆菌，但该抗生素是林可霉素生产菌产生的，不能对自身起作用。 综上所述，C正确，ABD错误。 故选C。 （9）甲培养皿中的菌落有不产林可霉素，也有产林可霉素，这句话是错误的。乙培养皿中的菌落可能暴露在无菌环境中较长时间，会发生基因型和表型的改变，因此菌落基因型和表型不完全相同，这句话是错误的。据图可知，丙培养皿中菌落的周围出现透明圈，表明抗生素可分泌到细胞外，这句话是正确的。 （10）A、菌体合成抗生素的能力越强，产生的抗生素越多，抑菌圈可能就越大，A正确； B、四个锥形瓶中的菌体生长速度不同，生长快的菌体在相同的时间内产生的抗生素更多，抑菌圈可能更大，B正确； C、由于是同一来源的菌液涂布，故不可能是涂布的样品浓度不同导致，C错误； D、若丙培养皿上的培养基厚度不均，主要影响菌体的生长状况，不影响抑菌圈的大小，D错误。 故选AB。 （11）据图可知，以氨基酸Cys、Lys或Ser为唯一氮源的培养基培养野生株和AflQ缺失株，两者的菌体生长量和抗生素产量相差不大。但是以氨基酸Asp为唯一氮源的培养基上，AflQ缺失株抗生素的产量明显增加，因此可以判断，膜蛋白AflQ感应的氨基酸是Asp。 2． 【答案】(1)B (2)II和IV (3)②④ (4)BD (5)AB (6)②④ (7)ABD (8)C 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。 （4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】（1）在设计 PCR 引物时，限制性内切酶的识别序列需添加在引物的 5' 端，而保护碱基应位于识别序列的外侧（即更远离 3' 端）。由于 PCR 扩增时，引物的 3' 端需与模板严格互补配对以启动 DNA 合成，因此保护碱基只能添加在5' 端（不影响配对）。两条引物分别对应基因的两端，故保护碱基应添加在两条引物的 5' 端。综上所述，ACD错误，B正确。 故选B。 （2）步骤 II：将重组 Ti 质粒导入农杆菌后，需通过氨苄青霉素抗性筛选含目的基因的农杆菌。 步骤 IV：悬浮培养转基因红豆杉细胞后，需筛选高产紫杉醇的细胞株。 步骤 I（构建重组质粒）和 III（农杆菌转化植物细胞）无需直接筛选，因此需筛选的步骤为 II 和 IV。 （3）重组 Ti 质粒含氨苄青霉素抗性基因（Apr），因此成功导入质粒的农杆菌具有氨苄青霉素抗性。 绿色荧光蛋白基因（GFP）虽在 Ti 质粒上，但 GFP 通常在植物细胞中表达，农杆菌本身不发光，故表型为不发绿色荧光。综上所述，①③错误，②④正确。 故选②④。 （4）  A 、基因复制能力与表达量无直接关联，且细胞内质粒拷贝数有限，A错误； B、提升Bapt基因的转录水平可直接增加 Bapt 基因的 mRNA 量，从而提高酶的合成量，促进紫杉醇合成，B正确； C、定点突变需对基因进行操作，C错误； D、通过不断筛选高产紫杉醇细胞，可使Bapt基因定向进化，D正确。 故选BD。 （5）A、红豆杉与内生微生物可能因共同祖先保留了合成紫杉醇的相关基因，A正确； B、共生关系是长期相互选择、协同进化的结果，B正确； C 、内生微生物的遗传物质独立，合成能力由自身基因决定，C错误； D 、变异是不定向的，环境（红豆杉）仅起选择作用，而非诱导变异，D错误。 故选AB。 （6）②固体培养基：用于分离单菌落（图 2 中 “挑取单菌落” 需固体培养基）。 ④通用培养基：分离内生微生物时，若未添加特殊选择成分，默认使用通用培养基（非选择培养基）。 （7）温度、pH、反应物浓度是细胞培养和微生物发酵的共同关键参数，显著影响细胞代谢和产物合成，而植物细胞培养和需氧 / 厌氧微生物发酵需求不同，题干未明确微生物类型，故非共同关键参数。综上所述，ABD正确，C错误。 故选ABD。 （8）植物细胞培养和内生菌发酵的共同点是利用活细胞作为生物反应器，通过细胞代谢合成目标产物（紫杉醇）。综上所述，ABD错误，C正确。 故选C。 3． 【答案】(1)C (2) 稀释涂布平板法 ①③④ (3)ABC (4) 乙 乙菌落周围形成的透明圈最大，说明分解能力强 (5) 乙 2.3×108 偏小 【分析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。 计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞)，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。 【详解】（1）欲从土壤中分离出能高效降解物质M的细菌，培养基中需要以物质M为唯一碳源，筛选需要用固体培养基，需要加入琼脂，另外硝酸铵提供氮源，还需要加入氯化钠、其他无机盐等维持渗透压，C正确。 故选C。 （2）根据培养皿上菌落的分布均匀情况，图①所示的接种方式是稀释涂布平板法，需要用到①（移液器）取样、③（涂布器）涂布、④（酒精灯）在酒精灯火焰旁进行，可以减少杂菌污染。②为接种环，不需要用到。故选①③④。 （3）A、高压蒸汽灭菌较彻底，可对培养基进行灭菌，A正确； B、实验前操作者的手和衣着用75%酒精消毒，B正确 ； C、整个实验操作都在超净台内、酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染，C正确； D、培养基用完后需要灭菌后才能丢弃，以防污染环境，D错误。 故选ABC。 （4）乙菌落周围形成的透明圈最大，说明分解能力强，因此应选乙菌进行扩大培养。 （5）甲的平板数太少，误差较大，丙的平板上的菌落没有都在30-300之间，乙的统计结果是相对准确可信；0.1mL涂布液中的菌为230，土壤悬浮液中的菌数为2.3×108，因此10g 土壤中的菌体数约是2.3×108。由于两个或多个细菌可能形成一个菌落，因此该方法计算结果偏小。 4． 【答案】(1)ABD (2)AB (3)ABC (4)35℃ (5)减数分裂过程中联会紊乱 (6)A (7)比值下降导致吸收的光能减少，且类囊体垛叠程度越低、排列松散，光反应减慢 (8)D (9)ABD (10)ACD 【分析】有氧呼吸的全过程，可以分为三个阶段：第一个阶段，一个分子的葡萄糖分解成两个分子的丙酮酸，在分解的过程中产生少量的氢(用[H]表示)，同时释放出少量的能量。这个阶段是在细胞质基质中进行的；第二个阶段，丙酮酸经过一系列的反应，分解成二氧化碳和氢，同时释放出少量的能量。这个阶段是在线粒体中进行的；第三个阶段，前两个阶段产生的氢，经过一系列的反应，与氧结合而形成水，同时释放出大量的能量。 【详解】（1）图1中①是水，②是ATP，③是氧气，④是丙酮酸，a是叶绿体，b是线粒体，d是细胞质基质，能产生ATP的场所包括叶绿体、线粒体、细胞质基质，即a、b、d。 故选ABD。 （2）③是氧气，线粒体利用的氧气，可以从外界环境中吸收，也可以来自于光反应产生，即来自于a叶绿体。 故选AB。 （3）光照强度影响光反应阶段，二氧化碳浓度影响暗反应阶段，酶的活性受温度影响，进而影响光合作用。相对湿度可影响气孔的开闭程度，图2中不涉及湿度。 故选ABC。 （4）真光合速率等于净光合速率+呼吸速率，图示对应的是净光合速率即CO2的吸收速率，在全光照、CO2浓度为1.22%的条件下，30°C对应的真光合速率是55，35°C对应的真光合速率是65，最大时所对应的温度是35°C。 （5）三倍体的体细胞中含有三个染色体组，减数分裂联会过程中会出现联会紊乱的现象，即不可育。 （6）图4中随着氯化钠浓度增大，B气孔导度逐渐降低，说明失水多气孔关闭，而A植物几乎无影响，说明相同的盐浓度下A植物几乎没影响，不会失去，说明A植物耐盐。 （7）色素的作用是吸收、转化传递光能，比值下降导致吸收的光能减少，导致光反应减慢，类囊体垛 叠程度越低、排列松散，叶绿体是光反应的场所，结构改变导致光反应减慢。 （8）根据图4分析，当NaCl浓度大于100mmol/L时，葡萄B气孔导度减小，即气孔关闭程度增大，导致二氧化碳的吸收量减少，影响了碳反应，导致光合速率进一步下降。 故选D。 （9）A、细胞膜上离子转运蛋白增加，可吸收更多的离子，导致细胞内浓度增大，有利于对高盐环境的适应，A正确； B、从外界环境中吸收无机盐离子至液泡中，可导致液泡渗透压增大，有利于适应高盐环境，B正确； C、溶质微粒的数目影响渗透压，数目多渗透压 大，细胞质内合成可溶性有机小分子会使细胞液渗透压升高，利于适应高盐环境，C正确； D、细胞内产生一类具有调节渗透作用的蛋白，可调节渗透压，有利于适应高盐环境，D正确。 故选ABCD。 （10）A、剧烈运动后肌肉酸痛，是由于肌细胞无氧呼吸产生了乳酸，A正确； B、酵母菌大量繁殖是由于有氧呼吸产生大量能量，无氧条件下能量少，一般不大量繁殖，B错误； C、酸奶的制作是利用了乳酸菌无氧呼吸产生乳酸的原理，C正确； D、水稻发生了烂秧是由于水稻的根细胞无氧呼吸产生了酒精，对细胞产生了毒害作用，D正确。 故选ACD。 5． 【答案】(1)①③ (2)②③ (3) ② 梯度稀释 (4)有透明圈菌落中的细菌是筛选出来的目的菌，理由是目的菌能降解莠去津，使菌落周围的莠去津被分解，从而出现透明圈 (5)配制的培养基灭菌后不接种，与实验组放在相同条件下培养 (6)BCD (7)②④ (8)④ (9)促融剂溶液浓度大于原生质体内的浓度，导致原生质体失水 (10) ② ① ②③⑤ 【分析】当可能提供目的菌的环境中菌种较少时，为确保能够从样品中分离到所需要的微生物，通常要进行数次选择培养以提高其密度。选择培养后目的菌仍与其他杂菌混在一起，因此若要获得纯种菌，必须在固体培养基上接种分离，为保证在固体培养基上得到单个菌形成的菌落，在接种前要进行梯度稀释。培养基上有透明带，说明莠去津被降解了，也就说明有我们所需要的目的菌。 【详解】（1）在选育能降解莠去津的细菌实验中，使用无氮培养液 + 过量莠去津进行培养。无氮培养液意味着只有能利用莠去津作为氮源的细菌才能生长。①在无氮且含过量莠去津的培养液中，只有能降解莠去津获取氮源的细菌才能生存，所以从 A 瓶到 C 瓶的液体培养可以初步选择能降解莠去津的细菌，①正确； ②液体培养阶段还未形成菌落，菌落是在固体培养基上形成的，②错误；③通过在适宜条件下进行液体振荡培养，能为细菌提供良好的生长环境，从而增加能降解莠去津的细菌数量，③正确；④从 A 瓶到 C 瓶的液体培养主要目的不是去除土壤中的杂质，虽然在培养过程中可能会有一些杂质被去除，但这不是主要目的，④错误。 故本题答案为：①③； （2）在无氮培养液+过量莠去津的环境中，甲类细菌密度迅速降低。莠去津是含氮农药，培养液中缺少甲类细菌可利用的氮源可能导致其无法正常生长繁殖，从而数量减少；振荡造成培养液中溶氧增加，若甲类细菌是厌氧型细菌，也可能抑制其生长；若莠去津会杀死甲类细菌以及甲类细菌需要寄生宿主，则其在A瓶中不会有较多的数量，。所以主要原因可能是②③； （3）观察图1，将C瓶菌种接种到固体培养基时，是将1mL菌液均匀涂布在固体培养基表面，所以采用的方法是②稀释涂布法。菌种接种之前通常要进行梯度稀释，这样可以使接种到固体培养基上的菌液中的细菌数量适中，便于形成单个菌落； （4）因为莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明，而能降解莠去津的细菌会将其周围的莠去津分解，从而在菌落周围形成透明圈。所以有透明圈菌落中的细菌是筛选出来的目的菌，理由是目的菌能降解莠去津，使菌落周围的莠去津被分解，从而出现透明圈； （5）设置对照组为配制的培养基灭菌后不接种，与实验组（接种 C 瓶菌种的培养基）放在相同条件下培养。若对照组无菌落出现，说明非目的菌来自 C 瓶菌种；若对照组出现菌落，说明非目的菌来自培养基； （6）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，要制备植物细胞的原生质体，需要去除细胞壁，常用纤维素酶和果胶酶处理，因为它们可以特异性地分解纤维素和果胶，而不破坏细胞的其他结构。蛋白酶主要用于分解蛋白质，植物细胞壁中不含蛋白质，A选项不合适；机械分离也可于制备原生质体。所以答案选BCD； （7）①酶解法主要用于去除细胞壁，不是诱导原生质体融合的方法，①错误；②PEG促融是常用的诱导植物原生质体融合的化学方法，②正确；③灭活病毒常用于诱导动物细胞融合，对植物原生质体融合一般不适用，③错误；④电融合是诱导植物原生质体融合的物理方法，④正确；⑤农杆菌介导法是将目的基因导入植物细胞的方法，不是诱导原生质体融合的方法，⑤错误；⑥显微注射法一般用于将外源基因导入动物细胞或受精卵等，不是诱导原生质体融合的方法，⑥错误；⑦胰蛋白酶处理常用于动物细胞培养中使细胞分散，不适用于植物原生质体融合，⑦错误。所以过程②诱导两种原生质体融合的方法有②④； （8）花椰菜（2n = 18），紫罗兰（2n=14），通过原生质体融合得到的新品种花椰菜是异源四倍体，其染色体数目为18 + 14=32，即4n = 32。 故本问答案为：④； （9）当促融剂质量分数为35%和40%时，促融剂溶液浓度大于原生质体内的溶液浓度，根据渗透作用原理，水分子会从低浓度的原生质体溶液向高浓度的促融剂溶液扩散，导致原生质体失水，从而出现缩小现象； （10）在植物组织培养中，生长素和细胞分裂素的比例会影响愈伤组织的分化方向。当生长素与细胞分裂素比例适中时，促进愈伤组织的形成；当生长素含量高于细胞分裂素时，有利于根的分化；当细胞分裂素含量高于生长素时，有利于芽的分化。观察可知，植物激素Y含量较高时有利于根的分化，植物激素X含量较高时有利于芽的分化，所以植物激素Y是生长素（①），植物激素X是细胞分裂素（②）。新品种花椰菜培育过程中，需要将离体的组织、细胞培养成完整的植株，这涉及植物细胞和组织培养技术（②），在植物细胞和组织培养过程中需要在无菌条件下操作，涉及无菌操作技术（⑤）；如果是通过体细胞杂交培育新品种，还会涉及体细胞杂交技术（③）。胚胎移植技术和体外受精技术主要应用于动物的繁殖过程，与花椰菜培育无关。所以新品种花椰菜培育过程中主要涉及的生物技术有②③⑤； 6． 【答案】(1)AD (2)C (3)C (4)②③⑥ (5)抑制细菌生长 (6) 0.1%、8天 接种量较大，酵母菌数量增长过快导致葡萄糖消耗过多，用于酵母菌无氧呼吸产生酒精的葡萄糖减少 (7) 发酵罐 灭菌 (8) （梯度）稀释 乙酸会抑制野生型酵母菌的生长和发酵，与菌株P1相比，而菌株P2的耐乙酸能力更强 (9)在一定的时间内，菌株P2与野生型酵母菌相比，菌株P2消耗的葡萄量少，产生的乙醇多 【分析】醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。 【详解】（1）A、制作果酒是利用酵母菌无氧呼吸，制作果醋是利用醋酸菌产生醋酸，A错误； B、醋酸菌是严格需氧型微生物，所以制作果醋需要不断充入氧气，B正确； C、醋酸菌在缺少糖源，有氧条件下将乙醇转变为乙醛再转变为乙酸，所以果醋是在果酒基础上，进行醋酸发酵酿制而成 ，C正确； D、果酒制作过程中需每隔一段时间，将瓶盖拧松，释放发酵过程中产生的气体，D错误。 故选AD。 （2）现代发酵技术与传统发酵技术相比，优势体现在多方面，如产物专一，生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉、废弃物对环境污染小，能够保证食品安全，大规模生产和生产效率较高，传统发酵技术是利用自然界中菌种进行发酵，不易控制发酵过程，C正确，ABD错误。 故选C。 （3）A、酿造米酒的原料富含糖类，米酒过甜是因为米中有糖类物质未被完全消耗，A正确； B、“酒冷沸止”说明酵母菌的代谢产热和释放CO2逐渐停止，由于微生物呼吸作用消耗糖类等有机物，会释放能量，且释放的能量绝大多数以热能的形式散失，导致酒液温度产生变化，B正确； C、微生物无氧呼吸产生的CO2溶于发酵液会形成碳酸，使液体pH值降低，“曲势尽”的原因可能是发酵过程pH降低或酒液中酒精含量升高，C错误； D、酿制米酒所用微生物是酵母菌，酵母菌的呼吸类型为兼性厌氧型，D正确。 故选C。 （4）LB培养基的成分为胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水，该培养基中胰蛋白胨和酵母提取物含有多种成分，是②天然培养基，不含凝固剂，这是③液体培养基，其中不含有鉴别的试剂，适合多种微生物生长，是⑥通用培养基 。 故选②③⑥。 （5）四环素和链霉素属于抗生素，可以抑制细菌的生长，所以YPD培养基中需加入一定量的四环素和链霉素，其目的是抑制细菌生长。 （6）由题图2可知，接种量为0.1%时，达到最大酒精含量时，产酒精量比其它接种量高，当发酵时间为8天时，还原糖含量几乎不再变化，因此，YWBY的最佳接种量及主发酵时间分别是0.1%、8天。YWBY接种量为0.12%时，酒精含量最低的原因可能是接种量较大，菌种数量增长过快导致葡萄糖消耗过多，用于酵母菌无氧呼吸产生酒精的葡萄糖减少。 （7）酵母菌发酵通常在发酵罐中进行，在发酵之前必须采用高压蒸汽对培养基和附属设备等进行灭菌，杀死所有的微生物菌体、孢子和芽孢。 （8）得两株高表达MRP8的酵母菌菌种P1和P2，将菌种（梯度）稀释后，分别涂布于不同的培养基上，这是稀释涂布平板法；实验结果表明培养基中添加乙酸会抑制菌株的生长，其中对菌株P1和野生型的抑制作用更明显。 （9）在实际生产中，使用P2菌株比使用野生型菌株更有利于提高乙醇产量，判断的依据是在一定的时间内，菌株P2与野生型酵母菌相比，菌株P2消耗的葡萄量少，产生的乙醇多。 7． 【答案】(1)①④ (2)①②③④⑤ (3)BD (4)①②③ (5)D (6)AD 【分析】图2中①-④依次表示呼吸作用第一阶段，有氧呼吸第二、三阶段，酒精发酵第二阶段，乳酸发酵第二阶段。 醋酸菌是好氧细菌，酵母菌是兼性厌氧型真菌，若要加速果酒转变为果醋通入无菌空气。 【详解】（1）细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，破除细胞壁时可使用纤维素酶和果胶酶。 （2）培养基一般含有碳源、碳源、水、无机盐，生长因子，火龙果汁含有大量水分、有机物和部分无机盐，可为酵母菌提供碳源、碳源、水、无机盐，生长因子。 （3）进行酒精发酵时，应预留1/3的空间，然后塞好瓶塞，夹紧进气管和出气管，预留1/3空间的目的是给酒曲中的酵母菌增殖提供空气，使酵母菌进行有氧呼吸、大量繁殖，由于发酵过程会产气体，预留空间可防止瓶内气压过大；塞好瓶塞，夹紧进气管和出气管的目的是使酵母菌消耗完瓶内氧气后进行无氧呼吸，开始酒精发酵，产生酒精，AC错误，BD正确。 故选BD。 （4）按上题操作，静置时，发酵瓶内酵母菌同时进行有氧呼吸和无氧呼吸（酒精发酵），图2中①-④依次表示呼吸作用第一阶段，有氧呼吸第二、三阶段，酒精发酵第二阶段，乳酸发酵第二阶段。即静置时，发酵瓶内酵母菌同时进行①②③。 （5）火龙果酒酿造过程中，发酵瓶内酵母菌的种群数量先随着有氧呼吸的进行，快速增加，随后由于氧气的消耗导致其种群数量趋于平稳，由于代谢产物的积累，导致最后种群数量开始下降，ABC错误，D正确。 故选D。 （6）A、由题意可知，酒味逐渐消失并出现醋酸味，火龙果酒逐渐转变为火龙果醋，说明该过程是果酒被氧化为果醋的过程，该过程首先是乙醇转化为乙醛，随后再转化为醋酸，A正确； B、果酒转变为果醋的菌种（醋酸菌）与制作酸奶所用的菌种（乳酸菌）不同，B错误； CD、醋酸菌是好氧细菌，酵母菌是兼性厌氧型真菌，若要加速果酒转变为果醋，应打开发酵瓶的进、出气管，C错误，D正确。 故选AD。 8． 【答案】(1) 纤维素酶和果胶酶 消毒 (2)甲′+甲′、乙′+乙′ (3)脱分化 (4) 细胞分裂素    诱导未分化细胞群分化出芽 (5)促进生根、除草剂等 (6) 选择   6 (7)能保持植物原有的遗传特性、繁殖速度快、不受季节、气候和地域的限制等 【分析】1、利用细胞工程技术培养杂交植株时，首先利用纤维素酶和果胶酶（①）处理细胞去除其细胞壁；甲乙两细胞的原生质体经诱导产生“甲'+乙'”，即融合的原生质体，其再生新的细胞壁，形成杂种细胞，杂种细胞经过②脱分化过程形成愈伤组织，再经过再分化过程形成植株丙'，该植株经过图中③过程的选择作用培养出高产耐酸植物丙。 2、植物组织培养的过程：外植体→愈伤组织→胚状体→目的植株。 3、微型繁殖又叫快速繁殖技术，其优点包括：（1）保持的遗传的优良特性；（2）能实现种苗的快速繁殖；（3）不受自然生长季节、气候和地域的限制（因为在具有一定人工设施的室内生产）。 【详解】（1）由植物细胞变成原生质体，需要去掉细胞壁，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，酶具有专一性，所以应用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁。为了防止杂菌污染，进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行消毒处理。 （2）PEG诱导后，除了“甲'+乙'”，还有自身融合的细胞甲′+甲′、乙′+乙′。 （3）利用植物组织培养技术可通过脱分化得到愈伤组织，即图中②过程。 （4）由图可知，当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，诱导未分化细胞群分化出芽，说明植物激素X为细胞分裂素。 （5）植物激素Y与植物激素X的比值大于1时，诱导未分化细胞群分化出根，植物激素Y为生长素，植物激素Y及其类似物在农业生产中可促进生根、除草剂等。 （6）从用途上看，图中含一定浓度酸的固体培养基属于选择培养基。根据题意可知，某种耐酸植物甲（4N）有4个染色体组，高产植物乙（2N）有2个染色体组，因此丙'植株的体细胞中有6个染色体组。 （7）根据以上分析可知，植物微型繁殖技术具有的优点：能保持植物原有的优良的遗传特性、繁殖速度快、不受季节、气候和地域的限制等。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题04 发酵工程 解析版 核心必练+进阶提升+培优冲刺 三层突破 1．（2024-2025高二下·上海静安·期末）材料1:有国外期刊撰文指出“手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多18倍”。为了验证该说法的正确性，A、B两组研究人员分别进行实验调查。A、B两组的实验操作流程和实验结果如图。下表是2种可供选择的培养基配方。 培养基名称 配方（/L） 培养基1 蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，琼脂15g 培养基2 葡萄糖10g，KH2PO40.2g，MgSO40.2g，NaCl0.2g，CaSO45g，蒸馏水1000mL，琼脂15g (1)从物理性质上看，上述两种培养基属于________培养基。培养基2中提供碳源的物质是_________。 (2)根据实验目的，应选择培养基_____（1或2），理由是:________。 (3)在取样环节，合理的操作应包括________。（编号选填） ①用无菌棉拭子取样 ②用无菌接种环取样 ③在不同样品表面任选5个点取样 ④在不同样品表面选固定面积的区域内取样 ⑤在取样部位反复涂抹5次 ⑥将采集到的样本置于无菌试管内封闭备用 (4)研究人员欲通过菌落计数的方法，比较手机屏幕和马桶按钮的细菌污染情况。据图1，正确的操作是__________。（编号选填） ①操作I可将待测样本放入无菌生理盐水 ②接种时用接种环进行划线 ③接种时用涂布棒进行涂布 ④不同的培养基平板需在皿盖上做好记号 ⑤接种后的培养基平板需倒置放在恒温箱中培养2-3天 (5)A、B两组各自完成了实验，但实验结果却截然不同。经检查，两组操作步骤均正确，对实验结果分析合理的是______。 A．可能因为取样部位不同 B．可能因为细菌的生长速度不同 C．样本数少，影响实验结果可信度 D．未考虑个人卫生习惯和取样环境等因素 材料2:林可霉素是一种临床上广泛使用的抗生素。最近研究人员在林可霉素生产菌的细胞膜上鉴定出一种能响应胞外氮源分子的蛋白质（AflQ）。试回答下列有关该项研究工作的问题。 (6)若鉴别林可霉素生产菌属于细菌或真菌，下列指标可选用的是______。 A．有无细胞壁 B．有无核糖体 C．有无核膜包被的细胞核 D．有无内质网 (7)称取K2HPO40.5g，谷氨酸0.5g，MgSO4·7H2O0.2g，FeSO4·7H2O0.01g，自来水或蒸馏水定容至1000mL，调pH至7.2，100℃高压蒸汽灭菌15min。以上林可霉素生产菌培养基配制流程的表述中，明显的错误是_______和_______。 实践表明，即便来自无性繁殖的细胞群体，当它们暴露在无菌环境中较长时间，仍会发生基因型和表型的改变。因此在抗生素大规模发酵生产前，仍需对接种的菌种进行分离、纯化和鉴定，其操作流程如图所示。 (8)为鉴定林可霉素生产菌产抗生素的能力，下图培养皿丙中需预先涂布______。 A．林可霉素 B．生理盐水 C．大肠杆菌 D．林可霉素生产菌 (9)在表格中填写你对上图中甲乙丙三个培养皿有关表述的判断（正确用“√”表示，错误用“×”表示） 表述 判断 甲培养皿中的菌落均不产林可霉素 ______ 乙培养皿中的菌落基因型和表型均相同 ______ 丙培养皿中的现象表明，抗生素可分泌到细胞外 ______ (10)在生产实践中发现，即便由乙培养皿至四个锥形瓶的接种量相同，培养皿丙中的圆圈也会大小不一，造成这种现象的可能原因包括______。 A．四个锥形瓶中菌体合成抗生素的能力不同 B．四个锥形瓶中菌体的生长速度不同 C．丙培养皿上涂布的样品浓度不同 D．丙培养皿的培养基厚度不均匀 (11)研究人员分别配制了以氨基酸Cys、Asp、Lys或Ser为唯一氮源的培养基，并测定野生株和Af1Q缺失株的生长量和抗生素产量，结果如下图所示。据图可以判断，膜蛋白Af1Q感应的氨基酸是______。 2．（2024-2025高二下·上海浦东新·期末）紫杉醇是治疗某些癌症的特效药，传统获取方法是从红豆杉的树皮中提取。为提高生产效率，研究人员构建了转紫杉醇合成关键酶(Bapt)基因的红豆杉细胞，通过悬浮培养获得了高纯度的紫杉醇，主要流程见图，其中Ⅰ~Ⅳ代表操作步骤，Ap'表示氨苄青霉抗性基因， GFP 表示绿色荧光蛋白基因。 (1)为与 Ti质粒高效连接, Bapt基因两端应携带EcoRⅠ 或SacⅠ的识别序列, 同时要有额外的保护碱基。在设计 PCR 引物时，保护碱基应添加在_。 A．两条引物的3'端 B．两条引物的5'端 C．引物2 的 3'端和引物1 的5'端 D．引物1 的3'端和引物2的 5'端 (2)步骤Ⅰ~Ⅳ中， 需作筛选处理的是_____ (3)步骤Ⅲ中，用于转化红豆杉细胞的农杆菌的表型应为_____。(编号选填) ①氨苄青霉素敏感②氨苄青霉素抗性③发出绿色荧光④不发绿色荧光 (4)为进一步提升转基因红豆杉细胞产紫杉醇的能力，下列策略合理的有_。 A．提升 Bapt基因的复制能力 B．提升 Bapt基因的转录水平 C．对 Bapt 酶进行定点突变 D．对 Bapt基因进行定向进化 进一步研究发现，红豆杉组织中存在内生微生物，也能合成紫杉醇。下图为内生微生物的分离筛选， 以及利用红豆杉组织碎、麦麸等废弃物发酵生产紫杉醇的主要流程。 (5)红豆杉组织中存在内生微生物，并能合成紫杉醇。下列有关该现象的说法，合理的是_ A．红豆杉与内生微生物可能存在共同的原始祖先 B．红豆杉与内生微生物的共生关系是相互选择的结果 C．内生微生物合成紫杉醇的能力由红豆杉的遗传物质决定 D．内生微生物为了适应红豆杉环境，产生了合成紫杉醇的变异 (6)根据研究目的， 图中培养基①的类型是______、(编号选填) ①液体培养基②固体培养基③选择培养基④通用培养基 (7)下列控制参数中，对反应器①和反应器②的反应都有较大影响的是_ A．温度 B．pH C．溶解氧 D．反应物浓度 (8)本案例中，运用植物细胞培养技术和内生菌发酵技术生产紫杉醇，就其产业化应用而言，它们的基本原理是_。 A．必须改造相关生物的基因 B．以原生物体的代谢物为产品 C．以活细胞作为生物反应器 D．以糖类等有机物作为主要原料 3．（2024-2025高二下·上海·期中）某地化工厂附近的土壤受到了污染。其中含有一种只含C、H两种元素的有机污染物M。 若在培养基中加入物质M,则其达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中分离出能高效降解物质M的细菌，部分实验流程如图。 (1)为了筛选土壤中能高效降解物质M的细菌，下列培养基配方中最佳的是_。。 A．牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐、物质M、琼脂 B．牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐 C．氯化钠、硝酸铵、其他无机盐、物质M、琼脂 D．氯化钠、硝酸铵、其他无机盐、琼脂 (2)图①所示的接种方式是____________。此过程用到的工具有______________。 (3)在整个操作过程中要保持无菌操作，下列做法正确的是_。 A．培养基配制后用高温蒸汽灭菌法灭菌 B．实验前操作者的手和衣着用酒精消毒 C．整个实验操作都在酒精灯火焰旁进行 D．培养基用完后立即丢弃到垃圾桶内 (4)经过筛选后，在培养基上出现甲、乙、丙三种细菌，在菌落周围形成透明圆圈，如图所示。则如果要进一步扩大培养，则应该选取_______菌最佳，理由是：_____________________。 (5)三位同学分别在步骤④的各组平板上统计菌落数量，得到以下统计结果： 甲同学涂布了1个平板，统计的菌落数是250； 乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是220、230和240,取平均值230； 丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256,取平均值163； 在三位同学的统计中，_________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果，10g 土壤中的菌体数约是___________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量______(填 “偏大”“偏小”或“基本一致”)。 4．（2024-2025高二下·上海·期中）葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。公元前139年，张骞出使西域，便将葡萄带到了华夏大地。葡萄因其水分足、营养丰富，一直是人们爱吃的水果之一、我们的祖先也在很早以前就利用葡萄酿出美味的葡萄酒。图1表示葡萄植株某叶肉细胞的部分代谢过程，a、b、c、d代表不同的细胞结构，①~④代表不同的物质，图2表示葡萄植株在不同条件下CO2吸收速率(mg/h)。 (1)图1中，能产生物质“②”的细胞结构有___________(多选)。 A．a B．b C．c D．d (2)图1中，结构“b”中代谢所需物质“③”的来源有___________(多选)。 A．从细胞外环境中吸收 B．“a”中的代谢产物 C．“c”中的代谢产物 D．“d”中的代谢产物 (3)图2中，影响葡萄植株光合作用强度的因素有___________(多选)。 A．光照强度 B．温度 C．CO2浓度 D．相对湿度 (4)图2中，在全光照、CO2浓度为1.22%的条件下，葡萄植株真正光合速率(实际光合作用)最大时所对应的温度是___________。 (5)二倍体葡萄和四倍体葡萄杂交得到的三倍体葡萄高度不育的原因是___________。 某研究小组以葡萄品种A和B为材料，研究了盐胁迫对两种葡萄植株光合作用的影响。实验中将两种植物置于不同浓度NaCl培养液中培养，分别测得叶片叶绿素a/叶绿素b比值和气孔导度(气孔张开程度)，结果如下图3、4。 (6)分析图1，对高盐环境耐受性较高的植物是___________。 叶绿素a/叶绿素b比值可以反映叶绿体中类囊体的垛叠程度，其比值越低，类囊体垛叠程度越低、排列松散，类囊体膜的稳定性也越差。 (7)据图4，增加NaCl浓度后，葡萄B中的叶绿素a/叶绿素b比值明显下降。请分析叶绿素a/叶绿素b比值下降对该植物光合作用光反应过程的影响：___________。 (8)研究发现，当NaCl浓度大于100mmol/L时，葡萄B光合速率进一步下降。综合分析图3、图4，葡萄B光合速率进一步下降最可能的原因是___________。 A．叶绿体中类囊体结构排列松散，影响光反应 B．叶绿素a/叶绿素b比值下降，影响光的吸收 C．盐胁迫下植物失水，叶肉细胞中的代谢减弱 D．气孔导度下降影响CO2的吸收，影响碳反应 (9)培育耐盐植物，需研究植物适应高盐环境的生理特性。有利于植物对高盐环境适应的特性有___________(多选)。 A．细胞膜上离子转运蛋白增加 B．能从外界环境中吸收无机盐离子至液泡中 C．细胞质内合成可溶性有机小分子     D．细胞内产生一类具有调节渗透作用的蛋白 (10)葡萄酿酒利用了微生物无氧呼吸，下列哪项活动也涉及到无氧呼吸___________(多选)。 A．剧烈运动后肌肉酸痛 B．酵母菌大量繁殖 C．酸奶的制作 D．水稻发生了烂秧 5．（2024-2025高二下·上海·期中）莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下图1程序选育能降解莠去津的细菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。 (1)由图1推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是_______（编号选填）。 ①初步选择能降解莠去津的细菌 ②初步选择能降解莠去津的细菌菌落 ③增加能降解莠去津的细菌数量 ④去除土壤中的杂质 (2)图2为A~C瓶中三类细菌的最大密度柱形图，甲类细菌密度迅速降低的主要原因可能是_______（编号选填）。 ①莠去津会杀死甲类细菌 ②培养液中缺少甲类细菌可利用的氮源 ③振荡造成培养液中溶氧增加，抑制了甲类细菌生长 ④培养液中没有甲类细菌寄生的宿主 (3)实验中将C瓶菌种接种到固体培养基的方法是________（①平板划线法/②稀释涂布法/③逐个接种法）（编号选填），菌种接种之前通常要进行________。 (4)一段时间后，培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落。请根据培养结果，分析哪种菌落中的细菌是筛选出来的目的菌，并说明理由：________。 (5)为探究固体培养基中的非目的菌来自C瓶菌种还是培养基，应如何设置对照组？_______。 花椰菜（2n=18）是人们喜爱的蔬菜，种植时容易遭受病菌侵害，形成病斑。紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用相关技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种，过程如图3所示。 (6)科研人员分别取紫罗兰叶肉细胞和黑暗处发芽的花椰菜胚轴细胞，经过一定处理，得到两种原生质体，下列适合用于制备原生质体的是（　　）（多选） A．蛋白酶 B．纤维素酶 C．果胶酶 D．机械分离 (7)过程②诱导两种原生质体融合的方法有________（编号选填）。 ①酶解法②PEG促融③灭活病毒④电融合⑤农杆菌介导法⑥显微注射法⑦胰蛋白酶处理 (8)所得新品种花椰菜染色体数目为________（编号选填）。 ①2n=16②4n=18③2n=32④4n=32 融合较好的原生质体呈哑铃型。研究人员用不同浓度促溶剂诱导，然后用光学显微镜观察融合原生质体，结果如表所示。 促溶剂质量分数 原生质体状态 25% 有破碎现象，哑铃型原生质体比例<0.01% 30% 形态正常，哑铃型原生质体比例0.03% 35% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01—0.02% 40% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01—0.02% (9)当促融剂质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象，试分析原因：_________。 愈伤组织后续培养所用的培养基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，愈伤组织的变化情况如图4所示。 (10)植物激素X和Y分别是________和________（①生长素②细胞分裂素③赤霉素④脱落酸⑤乙烯），新品种花椰菜培育过程中主要涉及的生物技术有________（①胚胎移植技术②植物细胞和组织培养技术③体细胞杂交技术④体外受精技术⑤无菌操作技术）（编号选填）。 6．（2023-2024高二下·上海浦东新·期末）甜米酒是我国的传统酒种，某酿酒厂以无核黄皮果（富含维生素、有机酸及特殊的香味）为辅料研制出黄皮甜米酒，该酒具有消食、润肺和清热解毒等功效。制作黄皮甜米酒的工艺流程如图1所示。回答下列问题： (1)生活中，我们也可以利用传统发酵技术来生产食品，比如果酒或果醋。下列关于果酒和果醋制作的叙述，不正确的是____。 A．果酒和果醋制作分别需要醋酸菌和酵母菌 B．制作果醋需要不断充入氧气 C．果醋是在果酒基础上，进行醋酸发酵酿制而成 D．果酒制作过程中需始终拧紧瓶盖以防止杂菌污染 (2)与现代发酵技术相比，传统发酵技术的特点是____。 A．能够保证食品安全 B．能大规模生产 C．不易控制发酵过程 D．生产效率较高 (3)我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“世人云：米过酒甜，此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”下列有关叙述不正确的是____。 A．“米过酒甜”是因为米中糖类物质过量，发酵停止时仍未被完全消耗 B．“酒冷沸止”说明微生物的代谢产热和释放CO2逐渐停止 C．“曲势尽”的原因可能是米酒中pH或酒精含量升高 D．酿制米酒所用微生物的呼吸类型为兼性厌氧 (4)对酒曲微生物进行分离纯化时，需制备LB（培养细菌）和YPD（培养真菌）培养基。LB培养基的成分为胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水，此培养基为____（填写编号） ①合成培养基②天然培养基③液体培养基④半固体培养基 ⑤固体培养基 ⑥通用培养基 ⑦选择培养基 ⑧鉴别培养基 (5)将不同种酒曲稀释液涂布于LB和YPD培养基上，培养一段时间后，挑取长出的单菌落，转移到相对应的新LB和YPD培养基中继续分离纯化培养，此过程中YPD培养基中需加入一定量的四环素和链霉素，其目的是____。 (6)在制作黄皮甜米酒的过程中，为确定黄酒高活性干酵母（YWBY）的添加量及发酵时间，研究人员进行了相关实验，实验结果如图2所示。根据实验结果制作黄皮甜米酒时，YWBY的最佳接种量及主发酵时间分别是____。YWBY接种量为0.12%时，酒精含量最低的原因可能是____。 酵母发酵产生的乙醇除了可以作为我们日常的饮品，乙醇也可作为可再生清洁能源，具有良好的应用前景。酵母菌可利用纤维素生产乙醇，此过程中产生的乙酸等物质会抑制酵母菌的生长和发酵，进而影响乙醇的产量。为选择合适的菌株，提高乙醇产量，科研人员进行下列实验。 (7)在现代发酵工业中，酵母菌发酵通常在____中进行，在发酵之前必须采用高压蒸汽对培养基和附属设备等进行____。 (8)科研人员基于前期实验，获得两株高表达MRP8的酵母菌菌种P1和P2。将菌种____后，分别涂布于不同的培养基上，培养一段时间后，记录菌落生长情况，结果如图3。实验结果表明____。 (9)将野生型酵母菌和P2菌分别接种于含4.8g/L乙酸的两个发酵装置中。一段时间后，检测其中葡萄糖消耗量和乙醇的生成量，结果如图4。 科研人员认为：在实际生产中，使用P2菌株比使用野生型菌株更有利于提高乙醇产量，判断的依据是____。 7．（2024-2025高二下·上海·期中）火龙果不仅味道香甜，还具有很高的营养价值。用火龙果制作的果酒具有镇静、助消化、利尿、预防便秘等多种作用。火龙果酒的酿造并不复杂，一般用火龙果、大米和酒曲（含酵母菌等微生物）为原材料，图1为简易的发酵瓶，图2为细胞呼吸的相关代谢途径。    (1)火龙果榨汁时，破除细胞壁可提高出汁率，可使用的酶是_______。（编号选填） ①纤维素酶②蛋白酶③磷脂酶④果胶酶 (2)从培养基成分角度分析，火龙果汁为酵母菌提供的营养物质有_____。（编号选填） ①碳源②氮源③水④生长因子⑤无机盐 (3)将火龙果汁、大米、酒曲等原料装入图1所示发酵瓶时，需留出1/3的空间。然后塞好瓶塞，夹紧进气管和出气管，静置即可。留出1/3空间的目的是_______。 A．便于观察发酵程度 B．给酒曲中的酵母菌增殖提供空气 C．对发酵液中的pH变化起调节作用 D．发酵过程会产气体，防止瓶内气压过大 (4)按上题操作，静置时，发酵瓶内酵母菌可进行图2中的_____过程。（编号选填） (5)火龙果酒酿造过程中，发酵瓶内酵母菌的种群数量变化符合曲线______。 A． B． C． D． (6)酿好的火龙果酒若置于某种特定的条件下，酒味会逐渐消失并出现醋酸味，火龙果酒逐渐转变为火龙果醋。关于该过程的分析，正确的是________ A．果酒中的乙醇转化为乙醛，再转化为醋酸 B．果酒转变为果醋的菌种与制作酸奶所用的菌种相同 C．若要加速果酒转变为果醋，发酵瓶应继续保持密封 D．若要加速果酒转变为果醋，应打开发酵瓶的进、出气管 8．（2024-2025高二下·上海·专题练习）植物体细胞杂交技术可将不同种植物的优势集中在一个个体上，培育人们生产所需的优良杂种植株。如图为利用某种耐酸植物甲（4N）和高产植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。回答下列问题。 (1)①过程为酶解法去壁，该过程所需的酶是_______，进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行_______处理，以防止杂菌污染。 (2)PEG诱导后，除了“甲'+乙'”，还存在________。 (3)图中过程②称为________。 (4)在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素X和植物激素Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如图所示。植物激素X的名称是_____。当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，___________。 (5)除植物组织培养外，举例说明植物激素Y及其类似物在农业生产中的应用：_______（要求写出2个）。 (6)从用途上看，图中含一定浓度酸的固体培养基属于______培养基。植物丙'的体细胞中有_____个染色体组。 (7)得到植物丙之后，可以利用植物组织培养技术进行繁殖。请说明与常规的种子繁殖方法相比，用植物组织培养技术进行繁殖具有的优点：_______（写出两点）。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题05 发酵工程 解析版 核心必练+进阶提升+培优冲刺 三层突破 1．（2024-2025高二下·上海静安·期末）材料1:有国外期刊撰文指出“手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多18倍”。为了验证该说法的正确性，A、B两组研究人员分别进行实验调查。A、B两组的实验操作流程和实验结果如图。下表是2种可供选择的培养基配方。 培养基名称 配方（/L） 培养基1 蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，琼脂15g 培养基2 葡萄糖10g，KH2PO40.2g，MgSO40.2g，NaCl0.2g，CaSO45g，蒸馏水1000mL，琼脂15g (1)从物理性质上看，上述两种培养基属于________培养基。培养基2中提供碳源的物质是_________。 (2)根据实验目的，应选择培养基_____（1或2），理由是:________。 (3)在取样环节，合理的操作应包括________。（编号选填） ①用无菌棉拭子取样 ②用无菌接种环取样 ③在不同样品表面任选5个点取样 ④在不同样品表面选固定面积的区域内取样 ⑤在取样部位反复涂抹5次 ⑥将采集到的样本置于无菌试管内封闭备用 (4)研究人员欲通过菌落计数的方法，比较手机屏幕和马桶按钮的细菌污染情况。据图1，正确的操作是__________。（编号选填） ①操作I可将待测样本放入无菌生理盐水 ②接种时用接种环进行划线 ③接种时用涂布棒进行涂布 ④不同的培养基平板需在皿盖上做好记号 ⑤接种后的培养基平板需倒置放在恒温箱中培养2-3天 (5)A、B两组各自完成了实验，但实验结果却截然不同。经检查，两组操作步骤均正确，对实验结果分析合理的是______。 A．可能因为取样部位不同 B．可能因为细菌的生长速度不同 C．样本数少，影响实验结果可信度 D．未考虑个人卫生习惯和取样环境等因素 材料2:林可霉素是一种临床上广泛使用的抗生素。最近研究人员在林可霉素生产菌的细胞膜上鉴定出一种能响应胞外氮源分子的蛋白质（AflQ）。试回答下列有关该项研究工作的问题。 (6)若鉴别林可霉素生产菌属于细菌或真菌，下列指标可选用的是______。 A．有无细胞壁 B．有无核糖体 C．有无核膜包被的细胞核 D．有无内质网 (7)称取K2HPO40.5g，谷氨酸0.5g，MgSO4·7H2O0.2g，FeSO4·7H2O0.01g，自来水或蒸馏水定容至1000mL，调pH至7.2，100℃高压蒸汽灭菌15min。以上林可霉素生产菌培养基配制流程的表述中，明显的错误是_______和_______。 实践表明，即便来自无性繁殖的细胞群体，当它们暴露在无菌环境中较长时间，仍会发生基因型和表型的改变。因此在抗生素大规模发酵生产前，仍需对接种的菌种进行分离、纯化和鉴定，其操作流程如图所示。 (8)为鉴定林可霉素生产菌产抗生素的能力，下图培养皿丙中需预先涂布______。 A．林可霉素 B．生理盐水 C．大肠杆菌 D．林可霉素生产菌 (9)在表格中填写你对上图中甲乙丙三个培养皿有关表述的判断（正确用“√”表示，错误用“×”表示） 表述 判断 甲培养皿中的菌落均不产林可霉素 ______ 乙培养皿中的菌落基因型和表型均相同 ______ 丙培养皿中的现象表明，抗生素可分泌到细胞外 ______ (10)在生产实践中发现，即便由乙培养皿至四个锥形瓶的接种量相同，培养皿丙中的圆圈也会大小不一，造成这种现象的可能原因包括______。 A．四个锥形瓶中菌体合成抗生素的能力不同 B．四个锥形瓶中菌体的生长速度不同 C．丙培养皿上涂布的样品浓度不同 D．丙培养皿的培养基厚度不均匀 (11)研究人员分别配制了以氨基酸Cys、Asp、Lys或Ser为唯一氮源的培养基，并测定野生株和Af1Q缺失株的生长量和抗生素产量，结果如下图所示。据图可以判断，膜蛋白Af1Q感应的氨基酸是______。 【答案】(1) 固体 葡萄糖 (2) 1 培养基1属于通用培养基，可满足多种微生物的营养需要（或写培养基2是无氮培养基，不能满足多种微生物生长的需要） (3)①④⑤⑥ (4)①③⑤ (5)ACD (6)CD (7) 无有机碳源 培养基灭菌温度太低 (8)C (9) 错误 错误 正确 (10)AB (11)Asp 【分析】1、原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核。 2、微生物实验室分离中配制培养基的操作步骤：计算→称量→溶解→调pH→灭菌步骤。 【详解】（1）上述培养基中含有琼脂，属于固体培养基。培养基2中葡萄糖可以提供碳源。 （2）培养基1属于通用培养基，可满足多种微生物的营养需要，故应该选择培养基1。 （3）①用无菌棉拭子取样，可以避免杂菌污染，①正确； ②不能用接种环取样，②错误； ③在不同样品表面任选5个点取样，可能误差较大，③错误； ④在不同样品表面选固定面积的区域内取样，可以减小误差，④正确； ⑤在取样部位反复涂抹5次，增加细菌数目，⑤正确； ⑥将采集到的样本置于无菌试管内封闭备用，避免杂菌污染，⑥正确。 故选①④⑤⑥。 （4）①操作I可将待测样本放入无菌生理盐水，避免杂菌污染，①正确； ②接种时用涂布器进行接种，②错误； ③接种时用涂布棒进行涂布，使微生物分散开来，③正确； ④不同的培养基平板需在皿底上做好记号，④错误； ⑤接种后的培养基平板需倒置放在恒温箱中培养2-3天，⑤正确。 故选①③⑤。 （5）A、取样部位不同，其细菌的种类和数量有较大差异，可能造成不同的结果，A正确； B、如果细菌的生长速度不同，在相同的实验条件下，二者会有一定的差异，但不会截然相反，B错误； C、样本数少，偶然性较大，影响实验结果可信度，可能会造成截然相反的结果，C正确； D、个人卫生习惯和取样环境等因素不同，会使细菌的种类和数量有较大差异，可能造成不同的结果，D正确。 故选ACD。 （6）细菌属于原核生物，真菌属于真核生物，原核细胞和真核细胞最大的区别是有无成形细胞核，原核细胞没有复杂细胞器，真核细胞有各种细胞器。因此若鉴别林可霉素生产菌属于细菌或真菌，可根据有无成形细胞核来区分，根据有无内质网来区分。 综上所述，CD正确，AB错误。 故选CD。 （7）林可霉素生产菌培是一种细菌，细菌绝大多数是营寄生或腐生的异养型生物，因此培养基中应该含有有机碳源；该流程中高压蒸汽灭菌的温度100℃是不对的，应该是121℃，即无有机碳源和培养基灭菌温度太低。 （8） 抗生素能选择性地作用于细菌，主要是对细菌起作用，因此为鉴定林可霉素生产菌产抗生素的能力，图中培养皿丙中需预先涂布细菌即大肠杆菌，但该抗生素是林可霉素生产菌产生的，不能对自身起作用。 综上所述，C正确，ABD错误。 故选C。 （9）甲培养皿中的菌落有不产林可霉素，也有产林可霉素，这句话是错误的。乙培养皿中的菌落可能暴露在无菌环境中较长时间，会发生基因型和表型的改变，因此菌落基因型和表型不完全相同，这句话是错误的。据图可知，丙培养皿中菌落的周围出现透明圈，表明抗生素可分泌到细胞外，这句话是正确的。 （10）A、菌体合成抗生素的能力越强，产生的抗生素越多，抑菌圈可能就越大，A正确； B、四个锥形瓶中的菌体生长速度不同，生长快的菌体在相同的时间内产生的抗生素更多，抑菌圈可能更大，B正确； C、由于是同一来源的菌液涂布，故不可能是涂布的样品浓度不同导致，C错误； D、若丙培养皿上的培养基厚度不均，主要影响菌体的生长状况，不影响抑菌圈的大小，D错误。 故选AB。 （11）据图可知，以氨基酸Cys、Lys或Ser为唯一氮源的培养基培养野生株和AflQ缺失株，两者的菌体生长量和抗生素产量相差不大。但是以氨基酸Asp为唯一氮源的培养基上，AflQ缺失株抗生素的产量明显增加，因此可以判断，膜蛋白AflQ感应的氨基酸是Asp。 2．（2024-2025高二下·上海浦东新·期末）紫杉醇是治疗某些癌症的特效药，传统获取方法是从红豆杉的树皮中提取。为提高生产效率，研究人员构建了转紫杉醇合成关键酶(Bapt)基因的红豆杉细胞，通过悬浮培养获得了高纯度的紫杉醇，主要流程见图，其中Ⅰ~Ⅳ代表操作步骤，Ap'表示氨苄青霉抗性基因， GFP 表示绿色荧光蛋白基因。 (1)为与 Ti质粒高效连接, Bapt基因两端应携带EcoRⅠ 或SacⅠ的识别序列, 同时要有额外的保护碱基。在设计 PCR 引物时，保护碱基应添加在_。 A．两条引物的3'端 B．两条引物的5'端 C．引物2 的 3'端和引物1 的5'端 D．引物1 的3'端和引物2的 5'端 (2)步骤Ⅰ~Ⅳ中， 需作筛选处理的是_____ (3)步骤Ⅲ中，用于转化红豆杉细胞的农杆菌的表型应为_____。(编号选填) ①氨苄青霉素敏感②氨苄青霉素抗性③发出绿色荧光④不发绿色荧光 (4)为进一步提升转基因红豆杉细胞产紫杉醇的能力，下列策略合理的有_。 A．提升 Bapt基因的复制能力 B．提升 Bapt基因的转录水平 C．对 Bapt 酶进行定点突变 D．对 Bapt基因进行定向进化 进一步研究发现，红豆杉组织中存在内生微生物，也能合成紫杉醇。下图为内生微生物的分离筛选， 以及利用红豆杉组织碎、麦麸等废弃物发酵生产紫杉醇的主要流程。 (5)红豆杉组织中存在内生微生物，并能合成紫杉醇。下列有关该现象的说法，合理的是_ A．红豆杉与内生微生物可能存在共同的原始祖先 B．红豆杉与内生微生物的共生关系是相互选择的结果 C．内生微生物合成紫杉醇的能力由红豆杉的遗传物质决定 D．内生微生物为了适应红豆杉环境，产生了合成紫杉醇的变异 (6)根据研究目的， 图中培养基①的类型是______、(编号选填) ①液体培养基②固体培养基③选择培养基④通用培养基 (7)下列控制参数中，对反应器①和反应器②的反应都有较大影响的是_ A．温度 B．pH C．溶解氧 D．反应物浓度 (8)本案例中，运用植物细胞培养技术和内生菌发酵技术生产紫杉醇，就其产业化应用而言，它们的基本原理是_。 A．必须改造相关生物的基因 B．以原生物体的代谢物为产品 C．以活细胞作为生物反应器 D．以糖类等有机物作为主要原料 【答案】(1)B (2)II和IV (3)②④ (4)BD (5)AB (6)②④ (7)ABD (8)C 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。 （4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】（1）在设计 PCR 引物时，限制性内切酶的识别序列需添加在引物的 5' 端，而保护碱基应位于识别序列的外侧（即更远离 3' 端）。由于 PCR 扩增时，引物的 3' 端需与模板严格互补配对以启动 DNA 合成，因此保护碱基只能添加在5' 端（不影响配对）。两条引物分别对应基因的两端，故保护碱基应添加在两条引物的 5' 端。综上所述，ACD错误，B正确。 故选B。 （2）步骤 II：将重组 Ti 质粒导入农杆菌后，需通过氨苄青霉素抗性筛选含目的基因的农杆菌。 步骤 IV：悬浮培养转基因红豆杉细胞后，需筛选高产紫杉醇的细胞株。 步骤 I（构建重组质粒）和 III（农杆菌转化植物细胞）无需直接筛选，因此需筛选的步骤为 II 和 IV。 （3）重组 Ti 质粒含氨苄青霉素抗性基因（Apr），因此成功导入质粒的农杆菌具有氨苄青霉素抗性。 绿色荧光蛋白基因（GFP）虽在 Ti 质粒上，但 GFP 通常在植物细胞中表达，农杆菌本身不发光，故表型为不发绿色荧光。综上所述，①③错误，②④正确。 故选②④。 （4）  A 、基因复制能力与表达量无直接关联，且细胞内质粒拷贝数有限，A错误； B、提升Bapt基因的转录水平可直接增加 Bapt 基因的 mRNA 量，从而提高酶的合成量，促进紫杉醇合成，B正确； C、定点突变需对基因进行操作，C错误； D、通过不断筛选高产紫杉醇细胞，可使Bapt基因定向进化，D正确。 故选BD。 （5）A、红豆杉与内生微生物可能因共同祖先保留了合成紫杉醇的相关基因，A正确； B、共生关系是长期相互选择、协同进化的结果，B正确； C 、内生微生物的遗传物质独立，合成能力由自身基因决定，C错误； D 、变异是不定向的，环境（红豆杉）仅起选择作用，而非诱导变异，D错误。 故选AB。 （6）②固体培养基：用于分离单菌落（图 2 中 “挑取单菌落” 需固体培养基）。 ④通用培养基：分离内生微生物时，若未添加特殊选择成分，默认使用通用培养基（非选择培养基）。 （7）温度、pH、反应物浓度是细胞培养和微生物发酵的共同关键参数，显著影响细胞代谢和产物合成，而植物细胞培养和需氧 / 厌氧微生物发酵需求不同，题干未明确微生物类型，故非共同关键参数。综上所述，ABD正确，C错误。 故选ABD。 （8）植物细胞培养和内生菌发酵的共同点是利用活细胞作为生物反应器，通过细胞代谢合成目标产物（紫杉醇）。综上所述，ABD错误，C正确。 故选C。 3．（2024-2025高二下·上海·期中）某地化工厂附近的土壤受到了污染。其中含有一种只含C、H两种元素的有机污染物M。 若在培养基中加入物质M,则其达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中分离出能高效降解物质M的细菌，部分实验流程如图。 (1)为了筛选土壤中能高效降解物质M的细菌，下列培养基配方中最佳的是_。。 A．牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐、物质M、琼脂 B．牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐 C．氯化钠、硝酸铵、其他无机盐、物质M、琼脂 D．氯化钠、硝酸铵、其他无机盐、琼脂 (2)图①所示的接种方式是____________。此过程用到的工具有______________。 (3)在整个操作过程中要保持无菌操作，下列做法正确的是_。 A．培养基配制后用高温蒸汽灭菌法灭菌 B．实验前操作者的手和衣着用酒精消毒 C．整个实验操作都在酒精灯火焰旁进行 D．培养基用完后立即丢弃到垃圾桶内 (4)经过筛选后，在培养基上出现甲、乙、丙三种细菌，在菌落周围形成透明圆圈，如图所示。则如果要进一步扩大培养，则应该选取_______菌最佳，理由是：_____________________。 (5)三位同学分别在步骤④的各组平板上统计菌落数量，得到以下统计结果： 甲同学涂布了1个平板，统计的菌落数是250； 乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是220、230和240,取平均值230； 丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256,取平均值163； 在三位同学的统计中，_________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果，10g 土壤中的菌体数约是___________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量______(填 “偏大”“偏小”或“基本一致”)。 【答案】(1)C (2) 稀释涂布平板法 ①③④ (3)ABC (4) 乙 乙菌落周围形成的透明圈最大，说明分解能力强 (5) 乙 2.3×108 偏小 【分析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。 计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞)，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。 【详解】（1）欲从土壤中分离出能高效降解物质M的细菌，培养基中需要以物质M为唯一碳源，筛选需要用固体培养基，需要加入琼脂，另外硝酸铵提供氮源，还需要加入氯化钠、其他无机盐等维持渗透压，C正确。 故选C。 （2）根据培养皿上菌落的分布均匀情况，图①所示的接种方式是稀释涂布平板法，需要用到①（移液器）取样、③（涂布器）涂布、④（酒精灯）在酒精灯火焰旁进行，可以减少杂菌污染。②为接种环，不需要用到。故选①③④。 （3）A、高压蒸汽灭菌较彻底，可对培养基进行灭菌，A正确； B、实验前操作者的手和衣着用75%酒精消毒，B正确 ； C、整个实验操作都在超净台内、酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染，C正确； D、培养基用完后需要灭菌后才能丢弃，以防污染环境，D错误。 故选ABC。 （4）乙菌落周围形成的透明圈最大，说明分解能力强，因此应选乙菌进行扩大培养。 （5）甲的平板数太少，误差较大，丙的平板上的菌落没有都在30-300之间，乙的统计结果是相对准确可信；0.1mL涂布液中的菌为230，土壤悬浮液中的菌数为2.3×108，因此10g 土壤中的菌体数约是2.3×108。由于两个或多个细菌可能形成一个菌落，因此该方法计算结果偏小。 4．（2024-2025高二下·上海·期中）葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。公元前139年，张骞出使西域，便将葡萄带到了华夏大地。葡萄因其水分足、营养丰富，一直是人们爱吃的水果之一、我们的祖先也在很早以前就利用葡萄酿出美味的葡萄酒。图1表示葡萄植株某叶肉细胞的部分代谢过程，a、b、c、d代表不同的细胞结构，①~④代表不同的物质，图2表示葡萄植株在不同条件下CO2吸收速率(mg/h)。 (1)图1中，能产生物质“②”的细胞结构有___________(多选)。 A．a B．b C．c D．d (2)图1中，结构“b”中代谢所需物质“③”的来源有___________(多选)。 A．从细胞外环境中吸收 B．“a”中的代谢产物 C．“c”中的代谢产物 D．“d”中的代谢产物 (3)图2中，影响葡萄植株光合作用强度的因素有___________(多选)。 A．光照强度 B．温度 C．CO2浓度 D．相对湿度 (4)图2中，在全光照、CO2浓度为1.22%的条件下，葡萄植株真正光合速率(实际光合作用)最大时所对应的温度是___________。 (5)二倍体葡萄和四倍体葡萄杂交得到的三倍体葡萄高度不育的原因是___________。 某研究小组以葡萄品种A和B为材料，研究了盐胁迫对两种葡萄植株光合作用的影响。实验中将两种植物置于不同浓度NaCl培养液中培养，分别测得叶片叶绿素a/叶绿素b比值和气孔导度(气孔张开程度)，结果如下图3、4。 (6)分析图1，对高盐环境耐受性较高的植物是___________。 叶绿素a/叶绿素b比值可以反映叶绿体中类囊体的垛叠程度，其比值越低，类囊体垛叠程度越低、排列松散，类囊体膜的稳定性也越差。 (7)据图4，增加NaCl浓度后，葡萄B中的叶绿素a/叶绿素b比值明显下降。请分析叶绿素a/叶绿素b比值下降对该植物光合作用光反应过程的影响：___________。 (8)研究发现，当NaCl浓度大于100mmol/L时，葡萄B光合速率进一步下降。综合分析图3、图4，葡萄B光合速率进一步下降最可能的原因是___________。 A．叶绿体中类囊体结构排列松散，影响光反应 B．叶绿素a/叶绿素b比值下降，影响光的吸收 C．盐胁迫下植物失水，叶肉细胞中的代谢减弱 D．气孔导度下降影响CO2的吸收，影响碳反应 (9)培育耐盐植物，需研究植物适应高盐环境的生理特性。有利于植物对高盐环境适应的特性有___________(多选)。 A．细胞膜上离子转运蛋白增加 B．能从外界环境中吸收无机盐离子至液泡中 C．细胞质内合成可溶性有机小分子     D．细胞内产生一类具有调节渗透作用的蛋白 (10)葡萄酿酒利用了微生物无氧呼吸，下列哪项活动也涉及到无氧呼吸___________(多选)。 A．剧烈运动后肌肉酸痛 B．酵母菌大量繁殖 C．酸奶的制作 D．水稻发生了烂秧 【答案】(1)ABD (2)AB (3)ABC (4)35℃ (5)减数分裂过程中联会紊乱 (6)A (7)比值下降导致吸收的光能减少，且类囊体垛叠程度越低、排列松散，光反应减慢 (8)D (9)ABD (10)ACD 【分析】有氧呼吸的全过程，可以分为三个阶段：第一个阶段，一个分子的葡萄糖分解成两个分子的丙酮酸，在分解的过程中产生少量的氢(用[H]表示)，同时释放出少量的能量。这个阶段是在细胞质基质中进行的；第二个阶段，丙酮酸经过一系列的反应，分解成二氧化碳和氢，同时释放出少量的能量。这个阶段是在线粒体中进行的；第三个阶段，前两个阶段产生的氢，经过一系列的反应，与氧结合而形成水，同时释放出大量的能量。 【详解】（1）图1中①是水，②是ATP，③是氧气，④是丙酮酸，a是叶绿体，b是线粒体，d是细胞质基质，能产生ATP的场所包括叶绿体、线粒体、细胞质基质，即a、b、d。 故选ABD。 （2）③是氧气，线粒体利用的氧气，可以从外界环境中吸收，也可以来自于光反应产生，即来自于a叶绿体。 故选AB。 （3）光照强度影响光反应阶段，二氧化碳浓度影响暗反应阶段，酶的活性受温度影响，进而影响光合作用。相对湿度可影响气孔的开闭程度，图2中不涉及湿度。 故选ABC。 （4）真光合速率等于净光合速率+呼吸速率，图示对应的是净光合速率即CO2的吸收速率，在全光照、CO2浓度为1.22%的条件下，30°C对应的真光合速率是55，35°C对应的真光合速率是65，最大时所对应的温度是35°C。 （5）三倍体的体细胞中含有三个染色体组，减数分裂联会过程中会出现联会紊乱的现象，即不可育。 （6）图4中随着氯化钠浓度增大，B气孔导度逐渐降低，说明失水多气孔关闭，而A植物几乎无影响，说明相同的盐浓度下A植物几乎没影响，不会失去，说明A植物耐盐。 （7）色素的作用是吸收、转化传递光能，比值下降导致吸收的光能减少，导致光反应减慢，类囊体垛 叠程度越低、排列松散，叶绿体是光反应的场所，结构改变导致光反应减慢。 （8）根据图4分析，当NaCl浓度大于100mmol/L时，葡萄B气孔导度减小，即气孔关闭程度增大，导致二氧化碳的吸收量减少，影响了碳反应，导致光合速率进一步下降。 故选D。 （9）A、细胞膜上离子转运蛋白增加，可吸收更多的离子，导致细胞内浓度增大，有利于对高盐环境的适应，A正确； B、从外界环境中吸收无机盐离子至液泡中，可导致液泡渗透压增大，有利于适应高盐环境，B正确； C、溶质微粒的数目影响渗透压，数目多渗透压 大，细胞质内合成可溶性有机小分子会使细胞液渗透压升高，利于适应高盐环境，C正确； D、细胞内产生一类具有调节渗透作用的蛋白，可调节渗透压，有利于适应高盐环境，D正确。 故选ABCD。 （10）A、剧烈运动后肌肉酸痛，是由于肌细胞无氧呼吸产生了乳酸，A正确； B、酵母菌大量繁殖是由于有氧呼吸产生大量能量，无氧条件下能量少，一般不大量繁殖，B错误； C、酸奶的制作是利用了乳酸菌无氧呼吸产生乳酸的原理，C正确； D、水稻发生了烂秧是由于水稻的根细胞无氧呼吸产生了酒精，对细胞产生了毒害作用，D正确。 故选ACD。 5．（2024-2025高二下·上海·期中）莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下图1程序选育能降解莠去津的细菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。 (1)由图1推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是_______（编号选填）。 ①初步选择能降解莠去津的细菌 ②初步选择能降解莠去津的细菌菌落 ③增加能降解莠去津的细菌数量 ④去除土壤中的杂质 (2)图2为A~C瓶中三类细菌的最大密度柱形图，甲类细菌密度迅速降低的主要原因可能是_______（编号选填）。 ①莠去津会杀死甲类细菌 ②培养液中缺少甲类细菌可利用的氮源 ③振荡造成培养液中溶氧增加，抑制了甲类细菌生长 ④培养液中没有甲类细菌寄生的宿主 (3)实验中将C瓶菌种接种到固体培养基的方法是________（①平板划线法/②稀释涂布法/③逐个接种法）（编号选填），菌种接种之前通常要进行________。 (4)一段时间后，培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落。请根据培养结果，分析哪种菌落中的细菌是筛选出来的目的菌，并说明理由：________。 (5)为探究固体培养基中的非目的菌来自C瓶菌种还是培养基，应如何设置对照组？_______。 花椰菜（2n=18）是人们喜爱的蔬菜，种植时容易遭受病菌侵害，形成病斑。紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用相关技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种，过程如图3所示。 (6)科研人员分别取紫罗兰叶肉细胞和黑暗处发芽的花椰菜胚轴细胞，经过一定处理，得到两种原生质体，下列适合用于制备原生质体的是（　　）（多选） A．蛋白酶 B．纤维素酶 C．果胶酶 D．机械分离 (7)过程②诱导两种原生质体融合的方法有________（编号选填）。 ①酶解法②PEG促融③灭活病毒④电融合⑤农杆菌介导法⑥显微注射法⑦胰蛋白酶处理 (8)所得新品种花椰菜染色体数目为________（编号选填）。 ①2n=16②4n=18③2n=32④4n=32 融合较好的原生质体呈哑铃型。研究人员用不同浓度促溶剂诱导，然后用光学显微镜观察融合原生质体，结果如表所示。 促溶剂质量分数 原生质体状态 25% 有破碎现象，哑铃型原生质体比例<0.01% 30% 形态正常，哑铃型原生质体比例0.03% 35% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01—0.02% 40% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01—0.02% (9)当促融剂质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象，试分析原因：_________。 愈伤组织后续培养所用的培养基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，愈伤组织的变化情况如图4所示。 (10)植物激素X和Y分别是________和________（①生长素②细胞分裂素③赤霉素④脱落酸⑤乙烯），新品种花椰菜培育过程中主要涉及的生物技术有________（①胚胎移植技术②植物细胞和组织培养技术③体细胞杂交技术④体外受精技术⑤无菌操作技术）（编号选填）。 【答案】(1)①③ (2)②③ (3) ② 梯度稀释 (4)有透明圈菌落中的细菌是筛选出来的目的菌，理由是目的菌能降解莠去津，使菌落周围的莠去津被分解，从而出现透明圈 (5)配制的培养基灭菌后不接种，与实验组放在相同条件下培养 (6)BCD (7)②④ (8)④ (9)促融剂溶液浓度大于原生质体内的浓度，导致原生质体失水 (10) ② ① ②③⑤ 【分析】当可能提供目的菌的环境中菌种较少时，为确保能够从样品中分离到所需要的微生物，通常要进行数次选择培养以提高其密度。选择培养后目的菌仍与其他杂菌混在一起，因此若要获得纯种菌，必须在固体培养基上接种分离，为保证在固体培养基上得到单个菌形成的菌落，在接种前要进行梯度稀释。培养基上有透明带，说明莠去津被降解了，也就说明有我们所需要的目的菌。 【详解】（1）在选育能降解莠去津的细菌实验中，使用无氮培养液 + 过量莠去津进行培养。无氮培养液意味着只有能利用莠去津作为氮源的细菌才能生长。①在无氮且含过量莠去津的培养液中，只有能降解莠去津获取氮源的细菌才能生存，所以从 A 瓶到 C 瓶的液体培养可以初步选择能降解莠去津的细菌，①正确； ②液体培养阶段还未形成菌落，菌落是在固体培养基上形成的，②错误；③通过在适宜条件下进行液体振荡培养，能为细菌提供良好的生长环境，从而增加能降解莠去津的细菌数量，③正确；④从 A 瓶到 C 瓶的液体培养主要目的不是去除土壤中的杂质，虽然在培养过程中可能会有一些杂质被去除，但这不是主要目的，④错误。 故本题答案为：①③； （2）在无氮培养液+过量莠去津的环境中，甲类细菌密度迅速降低。莠去津是含氮农药，培养液中缺少甲类细菌可利用的氮源可能导致其无法正常生长繁殖，从而数量减少；振荡造成培养液中溶氧增加，若甲类细菌是厌氧型细菌，也可能抑制其生长；若莠去津会杀死甲类细菌以及甲类细菌需要寄生宿主，则其在A瓶中不会有较多的数量，。所以主要原因可能是②③； （3）观察图1，将C瓶菌种接种到固体培养基时，是将1mL菌液均匀涂布在固体培养基表面，所以采用的方法是②稀释涂布法。菌种接种之前通常要进行梯度稀释，这样可以使接种到固体培养基上的菌液中的细菌数量适中，便于形成单个菌落； （4）因为莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明，而能降解莠去津的细菌会将其周围的莠去津分解，从而在菌落周围形成透明圈。所以有透明圈菌落中的细菌是筛选出来的目的菌，理由是目的菌能降解莠去津，使菌落周围的莠去津被分解，从而出现透明圈； （5）设置对照组为配制的培养基灭菌后不接种，与实验组（接种 C 瓶菌种的培养基）放在相同条件下培养。若对照组无菌落出现，说明非目的菌来自 C 瓶菌种；若对照组出现菌落，说明非目的菌来自培养基； （6）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，要制备植物细胞的原生质体，需要去除细胞壁，常用纤维素酶和果胶酶处理，因为它们可以特异性地分解纤维素和果胶，而不破坏细胞的其他结构。蛋白酶主要用于分解蛋白质，植物细胞壁中不含蛋白质，A选项不合适；机械分离也可于制备原生质体。所以答案选BCD； （7）①酶解法主要用于去除细胞壁，不是诱导原生质体融合的方法，①错误；②PEG促融是常用的诱导植物原生质体融合的化学方法，②正确；③灭活病毒常用于诱导动物细胞融合，对植物原生质体融合一般不适用，③错误；④电融合是诱导植物原生质体融合的物理方法，④正确；⑤农杆菌介导法是将目的基因导入植物细胞的方法，不是诱导原生质体融合的方法，⑤错误；⑥显微注射法一般用于将外源基因导入动物细胞或受精卵等，不是诱导原生质体融合的方法，⑥错误；⑦胰蛋白酶处理常用于动物细胞培养中使细胞分散，不适用于植物原生质体融合，⑦错误。所以过程②诱导两种原生质体融合的方法有②④； （8）花椰菜（2n = 18），紫罗兰（2n=14），通过原生质体融合得到的新品种花椰菜是异源四倍体，其染色体数目为18 + 14=32，即4n = 32。 故本问答案为：④； （9）当促融剂质量分数为35%和40%时，促融剂溶液浓度大于原生质体内的溶液浓度，根据渗透作用原理，水分子会从低浓度的原生质体溶液向高浓度的促融剂溶液扩散，导致原生质体失水，从而出现缩小现象； （10）在植物组织培养中，生长素和细胞分裂素的比例会影响愈伤组织的分化方向。当生长素与细胞分裂素比例适中时，促进愈伤组织的形成；当生长素含量高于细胞分裂素时，有利于根的分化；当细胞分裂素含量高于生长素时，有利于芽的分化。观察可知，植物激素Y含量较高时有利于根的分化，植物激素X含量较高时有利于芽的分化，所以植物激素Y是生长素（①），植物激素X是细胞分裂素（②）。新品种花椰菜培育过程中，需要将离体的组织、细胞培养成完整的植株，这涉及植物细胞和组织培养技术（②），在植物细胞和组织培养过程中需要在无菌条件下操作，涉及无菌操作技术（⑤）；如果是通过体细胞杂交培育新品种，还会涉及体细胞杂交技术（③）。胚胎移植技术和体外受精技术主要应用于动物的繁殖过程，与花椰菜培育无关。所以新品种花椰菜培育过程中主要涉及的生物技术有②③⑤； 6．（2023-2024高二下·上海浦东新·期末）甜米酒是我国的传统酒种，某酿酒厂以无核黄皮果（富含维生素、有机酸及特殊的香味）为辅料研制出黄皮甜米酒，该酒具有消食、润肺和清热解毒等功效。制作黄皮甜米酒的工艺流程如图1所示。回答下列问题： (1)生活中，我们也可以利用传统发酵技术来生产食品，比如果酒或果醋。下列关于果酒和果醋制作的叙述，不正确的是____。 A．果酒和果醋制作分别需要醋酸菌和酵母菌 B．制作果醋需要不断充入氧气 C．果醋是在果酒基础上，进行醋酸发酵酿制而成 D．果酒制作过程中需始终拧紧瓶盖以防止杂菌污染 (2)与现代发酵技术相比，传统发酵技术的特点是____。 A．能够保证食品安全 B．能大规模生产 C．不易控制发酵过程 D．生产效率较高 (3)我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“世人云：米过酒甜，此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”下列有关叙述不正确的是____。 A．“米过酒甜”是因为米中糖类物质过量，发酵停止时仍未被完全消耗 B．“酒冷沸止”说明微生物的代谢产热和释放CO2逐渐停止 C．“曲势尽”的原因可能是米酒中pH或酒精含量升高 D．酿制米酒所用微生物的呼吸类型为兼性厌氧 (4)对酒曲微生物进行分离纯化时，需制备LB（培养细菌）和YPD（培养真菌）培养基。LB培养基的成分为胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水，此培养基为____（填写编号） ①合成培养基②天然培养基③液体培养基④半固体培养基 ⑤固体培养基 ⑥通用培养基 ⑦选择培养基 ⑧鉴别培养基 (5)将不同种酒曲稀释液涂布于LB和YPD培养基上，培养一段时间后，挑取长出的单菌落，转移到相对应的新LB和YPD培养基中继续分离纯化培养，此过程中YPD培养基中需加入一定量的四环素和链霉素，其目的是____。 (6)在制作黄皮甜米酒的过程中，为确定黄酒高活性干酵母（YWBY）的添加量及发酵时间，研究人员进行了相关实验，实验结果如图2所示。根据实验结果制作黄皮甜米酒时，YWBY的最佳接种量及主发酵时间分别是____。YWBY接种量为0.12%时，酒精含量最低的原因可能是____。 酵母发酵产生的乙醇除了可以作为我们日常的饮品，乙醇也可作为可再生清洁能源，具有良好的应用前景。酵母菌可利用纤维素生产乙醇，此过程中产生的乙酸等物质会抑制酵母菌的生长和发酵，进而影响乙醇的产量。为选择合适的菌株，提高乙醇产量，科研人员进行下列实验。 (7)在现代发酵工业中，酵母菌发酵通常在____中进行，在发酵之前必须采用高压蒸汽对培养基和附属设备等进行____。 (8)科研人员基于前期实验，获得两株高表达MRP8的酵母菌菌种P1和P2。将菌种____后，分别涂布于不同的培养基上，培养一段时间后，记录菌落生长情况，结果如图3。实验结果表明____。 (9)将野生型酵母菌和P2菌分别接种于含4.8g/L乙酸的两个发酵装置中。一段时间后，检测其中葡萄糖消耗量和乙醇的生成量，结果如图4。 科研人员认为：在实际生产中，使用P2菌株比使用野生型菌株更有利于提高乙醇产量，判断的依据是____。 【答案】(1)AD (2)C (3)C (4)②③⑥ (5)抑制细菌生长 (6) 0.1%、8天 接种量较大，酵母菌数量增长过快导致葡萄糖消耗过多，用于酵母菌无氧呼吸产生酒精的葡萄糖减少 (7) 发酵罐 灭菌 (8) （梯度）稀释 乙酸会抑制野生型酵母菌的生长和发酵，与菌株P1相比，而菌株P2的耐乙酸能力更强 (9)在一定的时间内，菌株P2与野生型酵母菌相比，菌株P2消耗的葡萄量少，产生的乙醇多 【分析】醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。 【详解】（1）A、制作果酒是利用酵母菌无氧呼吸，制作果醋是利用醋酸菌产生醋酸，A错误； B、醋酸菌是严格需氧型微生物，所以制作果醋需要不断充入氧气，B正确； C、醋酸菌在缺少糖源，有氧条件下将乙醇转变为乙醛再转变为乙酸，所以果醋是在果酒基础上，进行醋酸发酵酿制而成 ，C正确； D、果酒制作过程中需每隔一段时间，将瓶盖拧松，释放发酵过程中产生的气体，D错误。 故选AD。 （2）现代发酵技术与传统发酵技术相比，优势体现在多方面，如产物专一，生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉、废弃物对环境污染小，能够保证食品安全，大规模生产和生产效率较高，传统发酵技术是利用自然界中菌种进行发酵，不易控制发酵过程，C正确，ABD错误。 故选C。 （3）A、酿造米酒的原料富含糖类，米酒过甜是因为米中有糖类物质未被完全消耗，A正确； B、“酒冷沸止”说明酵母菌的代谢产热和释放CO2逐渐停止，由于微生物呼吸作用消耗糖类等有机物，会释放能量，且释放的能量绝大多数以热能的形式散失，导致酒液温度产生变化，B正确； C、微生物无氧呼吸产生的CO2溶于发酵液会形成碳酸，使液体pH值降低，“曲势尽”的原因可能是发酵过程pH降低或酒液中酒精含量升高，C错误； D、酿制米酒所用微生物是酵母菌，酵母菌的呼吸类型为兼性厌氧型，D正确。 故选C。 （4）LB培养基的成分为胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水，该培养基中胰蛋白胨和酵母提取物含有多种成分，是②天然培养基，不含凝固剂，这是③液体培养基，其中不含有鉴别的试剂，适合多种微生物生长，是⑥通用培养基 。 故选②③⑥。 （5）四环素和链霉素属于抗生素，可以抑制细菌的生长，所以YPD培养基中需加入一定量的四环素和链霉素，其目的是抑制细菌生长。 （6）由题图2可知，接种量为0.1%时，达到最大酒精含量时，产酒精量比其它接种量高，当发酵时间为8天时，还原糖含量几乎不再变化，因此，YWBY的最佳接种量及主发酵时间分别是0.1%、8天。YWBY接种量为0.12%时，酒精含量最低的原因可能是接种量较大，菌种数量增长过快导致葡萄糖消耗过多，用于酵母菌无氧呼吸产生酒精的葡萄糖减少。 （7）酵母菌发酵通常在发酵罐中进行，在发酵之前必须采用高压蒸汽对培养基和附属设备等进行灭菌，杀死所有的微生物菌体、孢子和芽孢。 （8）得两株高表达MRP8的酵母菌菌种P1和P2，将菌种（梯度）稀释后，分别涂布于不同的培养基上，这是稀释涂布平板法；实验结果表明培养基中添加乙酸会抑制菌株的生长，其中对菌株P1和野生型的抑制作用更明显。 （9）在实际生产中，使用P2菌株比使用野生型菌株更有利于提高乙醇产量，判断的依据是在一定的时间内，菌株P2与野生型酵母菌相比，菌株P2消耗的葡萄量少，产生的乙醇多。 7．（2024-2025高二下·上海·期中）火龙果不仅味道香甜，还具有很高的营养价值。用火龙果制作的果酒具有镇静、助消化、利尿、预防便秘等多种作用。火龙果酒的酿造并不复杂，一般用火龙果、大米和酒曲（含酵母菌等微生物）为原材料，图1为简易的发酵瓶，图2为细胞呼吸的相关代谢途径。    (1)火龙果榨汁时，破除细胞壁可提高出汁率，可使用的酶是_______。（编号选填） ①纤维素酶②蛋白酶③磷脂酶④果胶酶 (2)从培养基成分角度分析，火龙果汁为酵母菌提供的营养物质有_____。（编号选填） ①碳源②氮源③水④生长因子⑤无机盐 (3)将火龙果汁、大米、酒曲等原料装入图1所示发酵瓶时，需留出1/3的空间。然后塞好瓶塞，夹紧进气管和出气管，静置即可。留出1/3空间的目的是_______。 A．便于观察发酵程度 B．给酒曲中的酵母菌增殖提供空气 C．对发酵液中的pH变化起调节作用 D．发酵过程会产气体，防止瓶内气压过大 (4)按上题操作，静置时，发酵瓶内酵母菌可进行图2中的_____过程。（编号选填） (5)火龙果酒酿造过程中，发酵瓶内酵母菌的种群数量变化符合曲线______。 A． B． C． D． (6)酿好的火龙果酒若置于某种特定的条件下，酒味会逐渐消失并出现醋酸味，火龙果酒逐渐转变为火龙果醋。关于该过程的分析，正确的是________ A．果酒中的乙醇转化为乙醛，再转化为醋酸 B．果酒转变为果醋的菌种与制作酸奶所用的菌种相同 C．若要加速果酒转变为果醋，发酵瓶应继续保持密封 D．若要加速果酒转变为果醋，应打开发酵瓶的进、出气管 【答案】(1)①④ (2)①②③④⑤ (3)BD (4)①②③ (5)D (6)AD 【分析】图2中①-④依次表示呼吸作用第一阶段，有氧呼吸第二、三阶段，酒精发酵第二阶段，乳酸发酵第二阶段。 醋酸菌是好氧细菌，酵母菌是兼性厌氧型真菌，若要加速果酒转变为果醋通入无菌空气。 【详解】（1）细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，破除细胞壁时可使用纤维素酶和果胶酶。 （2）培养基一般含有碳源、碳源、水、无机盐，生长因子，火龙果汁含有大量水分、有机物和部分无机盐，可为酵母菌提供碳源、碳源、水、无机盐，生长因子。 （3）进行酒精发酵时，应预留1/3的空间，然后塞好瓶塞，夹紧进气管和出气管，预留1/3空间的目的是给酒曲中的酵母菌增殖提供空气，使酵母菌进行有氧呼吸、大量繁殖，由于发酵过程会产气体，预留空间可防止瓶内气压过大；塞好瓶塞，夹紧进气管和出气管的目的是使酵母菌消耗完瓶内氧气后进行无氧呼吸，开始酒精发酵，产生酒精，AC错误，BD正确。 故选BD。 （4）按上题操作，静置时，发酵瓶内酵母菌同时进行有氧呼吸和无氧呼吸（酒精发酵），图2中①-④依次表示呼吸作用第一阶段，有氧呼吸第二、三阶段，酒精发酵第二阶段，乳酸发酵第二阶段。即静置时，发酵瓶内酵母菌同时进行①②③。 （5）火龙果酒酿造过程中，发酵瓶内酵母菌的种群数量先随着有氧呼吸的进行，快速增加，随后由于氧气的消耗导致其种群数量趋于平稳，由于代谢产物的积累，导致最后种群数量开始下降，ABC错误，D正确。 故选D。 （6）A、由题意可知，酒味逐渐消失并出现醋酸味，火龙果酒逐渐转变为火龙果醋，说明该过程是果酒被氧化为果醋的过程，该过程首先是乙醇转化为乙醛，随后再转化为醋酸，A正确； B、果酒转变为果醋的菌种（醋酸菌）与制作酸奶所用的菌种（乳酸菌）不同，B错误； CD、醋酸菌是好氧细菌，酵母菌是兼性厌氧型真菌，若要加速果酒转变为果醋，应打开发酵瓶的进、出气管，C错误，D正确。 故选AD。 8．（2024-2025高二下·上海·专题练习）植物体细胞杂交技术可将不同种植物的优势集中在一个个体上，培育人们生产所需的优良杂种植株。如图为利用某种耐酸植物甲（4N）和高产植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。回答下列问题。 (1)①过程为酶解法去壁，该过程所需的酶是_______，进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行_______处理，以防止杂菌污染。 (2)PEG诱导后，除了“甲'+乙'”，还存在________。 (3)图中过程②称为________。 (4)在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素X和植物激素Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如图所示。植物激素X的名称是_____。当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，___________。 (5)除植物组织培养外，举例说明植物激素Y及其类似物在农业生产中的应用：_______（要求写出2个）。 (6)从用途上看，图中含一定浓度酸的固体培养基属于______培养基。植物丙'的体细胞中有_____个染色体组。 (7)得到植物丙之后，可以利用植物组织培养技术进行繁殖。请说明与常规的种子繁殖方法相比，用植物组织培养技术进行繁殖具有的优点：_______（写出两点）。 【答案】(1) 纤维素酶和果胶酶 消毒 (2)甲′+甲′、乙′+乙′ (3)脱分化 (4) 细胞分裂素    诱导未分化细胞群分化出芽 (5)促进生根、除草剂等 (6) 选择   6 (7)能保持植物原有的遗传特性、繁殖速度快、不受季节、气候和地域的限制等 【分析】1、利用细胞工程技术培养杂交植株时，首先利用纤维素酶和果胶酶（①）处理细胞去除其细胞壁；甲乙两细胞的原生质体经诱导产生“甲'+乙'”，即融合的原生质体，其再生新的细胞壁，形成杂种细胞，杂种细胞经过②脱分化过程形成愈伤组织，再经过再分化过程形成植株丙'，该植株经过图中③过程的选择作用培养出高产耐酸植物丙。 2、植物组织培养的过程：外植体→愈伤组织→胚状体→目的植株。 3、微型繁殖又叫快速繁殖技术，其优点包括：（1）保持的遗传的优良特性；（2）能实现种苗的快速繁殖；（3）不受自然生长季节、气候和地域的限制（因为在具有一定人工设施的室内生产）。 【详解】（1）由植物细胞变成原生质体，需要去掉细胞壁，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，酶具有专一性，所以应用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁。为了防止杂菌污染，进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行消毒处理。 （2）PEG诱导后，除了“甲'+乙'”，还有自身融合的细胞甲′+甲′、乙′+乙′。 （3）利用植物组织培养技术可通过脱分化得到愈伤组织，即图中②过程。 （4）由图可知，当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，诱导未分化细胞群分化出芽，说明植物激素X为细胞分裂素。 （5）植物激素Y与植物激素X的比值大于1时，诱导未分化细胞群分化出根，植物激素Y为生长素，植物激素Y及其类似物在农业生产中可促进生根、除草剂等。 （6）从用途上看，图中含一定浓度酸的固体培养基属于选择培养基。根据题意可知，某种耐酸植物甲（4N）有4个染色体组，高产植物乙（2N）有2个染色体组，因此丙'植株的体细胞中有6个染色体组。 （7）根据以上分析可知，植物微型繁殖技术具有的优点：能保持植物原有的优良的遗传特性、繁殖速度快、不受季节、气候和地域的限制等。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $