2027届高中生物一轮复习讲义 第47讲　微生物的培养技术及应用

该高中生物学讲义聚焦微生物培养技术及应用高考核心考点，以基本培养技术和选择培养计数为两大模块，系统梳理培养基配制、无菌技术、纯培养操作、选择培养基设计及微生物计数等知识点，通过考点分析、方法指导、真题讲解和分层练习，帮助学生构建知识网络，突破实验操作与分析难点。 资料突出高考真题与核心素养的深度融合，如通过分解平板划线法操作要点、对比稀释涂布平板法与显微镜计数差异培养科学思维和探究实践能力，设置限时练分层训练，确保复习高效精准，助力学生提升实验设计与分析能力，为教师把控复习节奏提供清晰教学路径。

第47讲　微生物的培养技术及应用 考点一　微生物的基本培养技术 1.培养基的配制 (1)培养基的概念、类型和用途 (2)培养基的配方 ①主要营养物质：水、碳源、氮源、无机盐。 ②其他条件：pH、特殊营养物质和氧气。如下表： 微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物 特殊需求 添加维生素 pH调至酸性 pH调至中性或弱碱性 无氧 2.无菌技术 (1)常见物品的消毒或灭菌方法 ①消毒方法及适用对象 ②灭菌方法及适用对象 (2)注意事项 ①实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。 ②为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。 3.酵母菌纯培养的操作步骤 4.平板划线法操作步骤 (1)实验成功关键点 (2)平板划线法操作中几次灼烧接种环的目的 考向1　培养基的配制和无菌技术[科学思维] 1.(2025·江苏卷，11)从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是(　　) A.制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌 B.将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布 C.连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 D.鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存 答案　B 解析　紫外线照射只能起到消毒作用，不能起到灭菌效果，制备的培养基通常采用高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)，A错误；从土壤中分离致病菌，应将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入并用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，稀释涂布平板法是分离菌种的常用方法，B正确；平板划线时，每次划线应从上一次划线的末端开始，而不是从上一次划线的起始端开始，C错误；将目的菌接种到斜面培养基上，并在4 ℃左右的环境下保存，而非室温下保存，D错误。 2.(2024·湖南卷，6)微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是(　　) A.①②⑤⑥ B.③④⑥⑦ C.①②⑦⑧ D.①③④⑤ 答案　D 解析　②中拔出棉塞后应握住棉塞上部；⑥中划线时不能将培养皿的皿盖完全拿开，应只打开一条缝隙；⑦中划线时第5次的划线不能与第1次的划线相连；⑧中平板应倒置培养，D正确。 考向2　微生物的纯培养[科学探究] 3.(2020·江苏卷，19)为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是(　　) A.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整 B.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落 C.该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的 D.菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色 答案　B 解析　倒平板后无需间歇晃动，A错误；图中Ⅰ区、Ⅱ区的细菌数量均太多，Ⅲ区的细菌数量较少，可从Ⅲ区挑取单菌落，B正确；Ⅲ区中存在单菌落，该实验结果能达到菌种纯化的目的，C错误；刚果红能与纤维素形成红色复合物，但不能和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖等形成红色复合物，因此菌落周围的纤维素被降解后，不能被刚果红染成红色，D错误。 4.(2025·黑吉辽蒙卷，4)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23ClN2O8)能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是(　　) A.以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B.逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C.配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求 D.用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 答案　D 解析　在以金霉素为唯一碳源的培养基中，只有能降解金霉素的微生物能生存，因此以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基，A正确；在逐步提高金霉素浓度的培养基中能生存的菌株具有对金霉素的高耐受性，B正确；配制选择培养基时，要确保培养基的pH等条件适宜，C正确；应用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，D错误。 考点二　微生物的选择培养和计数 1.选择培养基 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 常见选择培养基举例 ①筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源的培养基。 ②将培养基放在高温环境中培养，可分离出耐高温的微生物。 ③缺少氮源的培养基可以筛选能利用大气中N2的微生物。 ④含青霉素的培养基可淘汰细菌，筛选出真菌。 ⑤无有机碳源的培养基可筛选出自养型微生物。　　　 2.稀释涂布平板法 (1)系列稀释操作 取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 (2)涂布平板操作 3.微生物的数量测定方法 (1)显微镜直接计数法 提醒　显微镜直接计数法本身不能区分细菌的死活，但是通过一定的辅助处理，可以实现活菌计数，如在计数前用台盼蓝染液进行染色，可以通过统计无色细胞的个数来对活菌进行计数。 (2)间接计数法——活菌计数法(即稀释涂布平板法) 4.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作 (1)实验原理 (2)实验流程 (3)实验结果分析与评价 5.分解纤维素的微生物的分离 (1)分离方法与原理 (2)纤维素分解菌的选择培养基成分及鉴定原理 (1)稀释涂布平板法既可分离菌株又可用于计数。(2024·贵州卷，13A)(√) (2)以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌。(2024·浙江6月卷，14D)(√) (3)血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定。(2023·江苏卷，7D)(×) 提示　血细胞计数板不适用于微小的细菌计数。 (4)某同学欲分离产脲酶菌，可在选择培养基中添加尿素作为唯一氮源。(2022·江苏卷，3B)(√) (5)稀释涂布平板法和平板划线法均能得到单菌落，都可用于细菌计数。(2021·浙江6月选考，17C)(×) 提示　平板划线法只能用于细菌分离，不能用于细菌计数。 考向1　微生物的选择培育[科学探究] 1.(2025·湖南卷，5)采集果园土壤进行微生物分离或计数。下列叙述正确的是(　　) A.稀释涂布平板法和平板划线法都能用于尿素分解菌的分离和计数 B.完成平板划线后，培养时需增加一个未接种的平板作为对照 C.土壤中分离得到的醋酸菌能在无氧条件下将葡萄糖分离成乙酸 D.用于筛选尿素分解菌的培养基含有蛋白胨、尿素和无机盐等营养物质 答案　B 解析　平板划线法只能用于微生物的分离，不能用于计数，A错误；为了检测培养基是否彻底灭菌，完成平板划线后，培养时需增加一个未接种的平板作为对照，B正确；醋酸菌是好氧细菌，在有氧条件下才能将葡萄糖分解成乙酸，C错误；筛选尿素分解菌的培养基应以尿素为唯一氮源，培养基中不能含有蛋白胨，D错误。 2.(2025·山东卷，15)深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是(　　) 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① ② ③ ④ 常压 常压 高压 高压 － ＋ － ＋ ＋ － ＋ － － － － ＋ 注：“＋”表示有；“－”表示无。 A.可用平板划线法对该菌计数 B.制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C.由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长 D.由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长 答案　D 解析　平板划线法可以分离微生物，获得单菌落，但不能进行计数，A错误；制备培养基的过程中，应先进行高压蒸汽灭菌，再在酒精灯火焰旁倒平板，B错误；分析表格数据，比较②④组，两组均以纤维素为唯一碳源，②组常压条件下无菌落产生，④组高压条件下有菌落产生，说明在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在高压下生长，C错误；比较③④组，高压条件下，该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长，而能在以纤维素为唯一碳源的培养基上生长，D正确。 考向2　微生物的分离与计数[科学探究] 3.(2025·四川卷，8)微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌，将总菌量相同的X、Y、X＋Y(X∶Y＝1∶1)分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率(残留率＝剩余量/添加量×100%)，结果如下图。下列叙述正确的是(　　) A.用平板划线法能测定X菌组中的活菌数 B.Y菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高 C.混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种 D.能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料 答案　C 解析　平板划线法主要用于微生物的分离和纯化，不能用于测定活菌数，测定活菌数常用稀释涂布平板法，A错误；Y菌组微塑料残留率较高，说明Y菌对微塑料的降解能力相对较弱，而不是菌浓度高，微塑料残留率与微塑料降解菌对微塑料的降解能力有关，而非直接与菌浓度相关，B错误；由图可知，X＋Y混合菌种组的微塑料残留率低于X菌组和Y菌组，说明混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种，C正确；该培养基中含有蛋白胨，能在该培养基中生长繁殖的微生物可能利用蛋白胨作为碳源和氮源等，不一定都能降解微塑料，D错误。 4.(2026·重庆八中诊断)研究者从温泉中筛选出能高效产生耐高温淀粉酶的嗜热细菌的过程如图1所示。将得到的嗜热细菌悬液转接到特定固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，结果如图2所示。下列说法错误的是(　　) A.过程①②一般都取1 mL菌液转移 B.试管甲、乙都通过无菌水稀释 C.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种 D.过程①②属于稀释涂布平板法，能对分离得到的微生物进行计数 答案　A 解析　过程①为稀释过程，一般取1 mL菌液转移，过程②为涂布平板过程，一般取0.1 mL菌液进行涂布，A错误；图2中周围不显蓝色的菌落产生的淀粉酶可以在高温下分解淀粉，所以周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，C正确。 5.(2026·江苏徐州调研)研究人员筛选和分离纤维素分解菌，在刚果红培养基平板上，筛选到有透明降解圈的菌落，所形成的菌落如图所示。相关说法错误的是(　　) A.纤维素的基本单位是葡萄糖 B.透明圈的形成是由于纤维素被分解后刚果红不能与纤维素结合形成红色复合物 C.透明圈可能是分解刚果红的菌种形成的，为确定得到的是纤维素分解菌还需进行发酵产纤维素酶实验 D.菌落②的中心区域最大，纤维素分解菌含量多，是需要筛选和分离的目标菌株 答案　D 解析　刚果红可以与纤维素结合形成红色复合物，而当平板上纤维素被纤维素分解菌分解后，则无法形成红色复合物，从而出现透明圈，B正确；使用刚果红筛选和分离纤维素分解菌存在假阳性反应，即透明圈可能是由其他微生物降解刚果红而形成的，因此为确保是否得到目的菌，需要进行发酵产纤维素酶实验，C正确；菌落①的透明圈范围大，而且菌落小，说明菌落①降解纤维素的能力强，因此菌落①是需要筛选和分离的目标菌株，D错误。 两种纯化方法的比较 为探究链霉素对大肠杆菌抗性的选择作用，某科研小组设计实验，先将对链霉素敏感的大肠杆菌原始菌种涂布在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再涂布到5号培养基上，并重复以上步骤。请根据实验回答下列问题： 注：影印法指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上进行接种。 (1)实验中影印培养的目的是_______________________________________ __________________________________________________________________。 比较2、3培养基与6、7培养基可以得出：与原始菌种相比，4号培养液中 __________________________________________________________________。 (2)如果将4号培养液稀释104倍后取0.1 mL涂布到5号培养基上，重复三次统计菌落数目分别为131、132、136个，则4号培养液中大肠杆菌的密度约为　　　　。理论上，使用此方法比使用血细胞计数板直接计数的结果　　　　(填“大”“小”或“相等”)，原因是_______________________________________________ __________________________________________________________________。 (3)4号培养液中不含链霉素，一段时间后，4号培养液中大肠杆菌的数量减少了，原因是________________________________________________________ __________________________________________________________________。 (4)通过本实验结果，可以得出结论：_________________________________ __________________________________________________________________。 答案　(1)在不含链霉素的培养基的众多菌落中，选出含有抗链霉素菌的菌落　抗链霉素的大肠杆菌所占比例增大　(2)1.33×107个/mL　小　血细胞计数板计数会把死菌也计入；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 (3)营养物质减少，有害物质不断积累　(4)链霉素在大肠杆菌抗链霉素抗性的形成中起到选择作用 解析　(1)将对链霉素敏感的大肠杆菌原始菌种涂布在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再涂布到5号培养基上，并重复以上步骤，影印培养的目的是在不含链霉素的培养基的众多菌落中，选出含有抗链霉素菌的菌落，3号与2号、7号与6号培养基中的菌落数的比值，是不同培养液中抗性菌落占全部菌落的比例，观察实验结果可知，4号培养液中，抗链霉素菌株的比例增大。(2)重复三次统计菌落数目分别为131、132、136个，则4号培养液中大肠杆菌的密度约为(131＋132＋136)÷3÷0.1×104＝1.33×107(个/mL)，血细胞计数板计数会把死菌也计入，比实际结果偏大，而用稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，比实际结果偏小，理论上，使用此方法比使用血细胞计数板直接计数的结果小。(3)培养大肠杆菌需要营养物质，大肠杆菌也会产生代谢废物，4号培养液中不含链霉素，一段时间后，4号培养液中大肠杆菌的数量减少的原因是营养物质减少，有害物质不断积累。(4)影印培养的目的是在不含链霉素的培养基的众多菌落中，选出含有抗链霉素菌的菌落，通过本实验结果，可以得出结论：链霉素在大肠杆菌抗链霉素抗性的形成中起到选择作用。 限时练47　微生物的培养技术及应用 (时间：30分钟　分值：42分) 【对点强化】 考点一　微生物的基本培养技术 1.(2024·江苏卷，9)酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列相关叙述正确的是(　　) A.酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌 B.酵母菌是真核细胞，需放置在CO2培养箱中进行培养 C.可用稀释涂布平板法对酵母菌计数 D.该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰 答案　C 解析　酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌和真菌，A错误；将含有酵母菌的培养基放置在28 ℃左右恒温培养箱中进行培养，B错误；稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。由此可知，可用稀释涂布平板法对酵母菌计数，C正确；酵母菌是真核细胞，具有内质网和高尔基体，可以对合成的蛋白质进行加工和修饰，D错误。 2.(2025·福建卷，11)科研人员将光合系统相关基因整合到大肠杆菌后，该菌能在无碳源培养基中生长繁殖。下列叙述错误的是(　　) A.必需整合光反应和暗反应系统的相关基因 B.暗反应所需的所有能量来源于细胞中的ATP C.改造成功的大肠杆菌可用CO2作为唯一碳源 D.该菌在无碳源培养基中生长繁殖一定需要光照 答案　B 解析　光反应生成ATP和NADPH，暗反应利用这些物质固定CO2，两者缺一不可，因此必须整合光反应和暗反应系统的相关基因，A正确；暗反应的能量不仅来源于ATP，还需NADPH提供能量且作为还原剂，B错误；改造后的大肠杆菌通过暗反应固定CO2并合成有机物，CO2可作为唯一碳源，C正确；光反应需要光照提供能量，若培养基无碳源，该菌体必须依赖光反应进行自养，因此生长繁殖需要光照，D正确。 3.(2026·山东潍坊调研)做微生物的纯培养实验时，既要配制适宜的培养基，又要防止杂菌污染。下列说法正确的是(　　) A.培养基上获得的菌落都是由单个微生物繁殖形成的 B.培养霉菌时，一般需将培养基调至酸性 C.不含氮源的培养基不能用于微生物培养 D.配制好的培养基采用干热灭菌，以防止杂菌污染 答案　B 解析　微生物的纯培养实验中培养基上经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物，但是有的菌落可能是由两个或多个细胞连在一起繁殖形成的，A错误；微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质，不含氮源的培养基可以用于固氮微生物的培养，C错误；配制好的培养基可以采用高压蒸汽灭菌(不能采用干热灭菌)，其目的是防止杂菌污染培养基，这是获得纯净培养物的关键，D错误。 4.(2026·河北冀州中学调研)某校学生以培养基为纸，接种环为笔，不同菌种为墨，为我们勾画出一幅微生物版的风景画。在如图所示作品培养过程中，白色区域、绿色区域和黄色区域分别由地衣芽孢杆菌、魏氏藻、胁迫后的魏氏藻绘制而成。下列说法错误的是(　　) A.制备培养基时要经过配制培养基→灭菌→倒平板等步骤 B.图中作品白色区域的培养基一般为酸性 C.本实验的接种方法为平板划线法，使用接种环接种时，取样前和接种后都需将接种环进行灼烧灭菌 D.胁迫后的魏氏藻变黄的原因可能是叶绿素被分解破坏 答案　B 解析　配制固体培养基的基本步骤是配制培养基→灭菌→倒平板等，A正确；根据题意可知，图中白色区域接种的是地衣芽孢杆菌，地衣芽孢杆菌属于细菌，培养细菌时培养基一般要调至中性或弱碱性，B错误；由以接种环为笔可知，本实验的接种方法是平板划线法，使用接种环接种时，取样前将接种环进行灼烧灭菌的目的是杀死接种环上存在的杂菌，接种后将接种环进行灼烧灭菌的目的是消灭接种环上残留的样品，C正确；叶绿素呈绿色，胁迫处理后魏氏藻由绿色变为黄色，可能是因为叶绿素被分解破坏，D正确。 考点二　微生物的选择培养和计数 5.(2024·浙江6月选考，14)脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是(　　) A.镍是组成脲酶的重要元素 B.镍能提高尿素水解反应的活化能 C.产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖 D.以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌 答案　B 解析　根据题意，脲酶被去除镍后失去活性，说明镍是组成脲酶的重要元素，A正确；脲酶催化尿素水解的机理为降低化学反应所需的活化能，镍作为脲酶的重要组成元素，应该与降低尿素水解反应的活化能有关，B错误；产脲酶细菌可利用NH4Cl进行代谢活动，因此产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖，C正确；产脲酶细菌能利用脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源，不能产脲酶的细菌则无法分解尿素获得氮源，因此以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌，D正确。 6.(2023·山东卷，15)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是(　　) A.不含氮源的平板不能用于微生物培养 B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒 C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物 答案　D 解析　不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A错误；平板涂布时涂布器使用前必须灭菌，B错误；使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得氮源而进行生长繁殖，不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而无法生长，因此以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物，D正确。 7.(2022·江苏卷，3)下列是某同学分离产脲酶菌的实验设计，不合理的是(　　) A.选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株 B.在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源 C.适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落 D.可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌株 答案　D 解析　农田或公园土壤中含有较多的含脲酶的微生物，A正确；为了分离产脲酶菌，配制的培养基应选择尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该培养基上能生长，B正确；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，C正确；在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，酚红指示剂红色加深，D错误。 8.(2026·广东珠海一中质检)巴氏芽孢杆菌是一类具有较高脲酶活性，能够分解尿素的细菌，能改善土壤肥力。研究人员从土壤样品中分离该细菌的流程如图所示，①～⑤表示操作步骤。下列说法错误的是(　　) A.步骤②富集培养时以尿素为唯一氮源 B.步骤④采用了稀释涂布平板法 C.步骤⑤接种时，接种环至少要灼烧5次 D.若可用于计数的平板菌落数平均为160个，则锥形瓶中1 mL菌液中的细菌数为1.6×105个 答案　D 解析　步骤②富集培养的目的是增加培养液中巴氏芽孢杆菌的量，所使用的培养基应以尿素为唯一氮源，A正确；根据菌落的分布情况可知，步骤④采用的接种方法是稀释涂布平板法，B正确；步骤⑤分离纯化巴氏芽孢杆菌采用的方法是平板划线法，图中划线区域共4个，所以该操作过程中接种环至少要灼烧4＋1＝5(次)，C正确；若可用于计数的平板菌落数平均为160个，则锥形瓶中1 mL菌液中的细菌数为(160÷0.1)×103＝1.6×106(个)，D错误。 【综合提升】 9.(2025·广西卷，2)利用微生物分解厨余垃圾可实现资源的再利用。下列说法错误的是(　　) A.厨余垃圾分解过程产生的热量，会影响分解效率 B.对组成复杂的厨余垃圾再分类，可提高利用效率 C.厨余垃圾中的淀粉，可作为微生物的碳源和氮源 D.含盐量高的厨余垃圾，可选用耐高盐的微生物分解 答案　C 解析　微生物分解有机物时通过呼吸作用释放热量，若温度过高可能导致酶活性下降，从而影响分解效率，A正确；厨余垃圾成分复杂，分类后可根据不同成分选择适宜微生物或处理条件，提高分解利用效率，B正确；淀粉由C、H、O组成，仅含碳元素，可为微生物提供碳源，但无法提供氮源(氮源需含N元素)，C错误；高盐环境会抑制普通微生物生长和分解作用，但耐高盐微生物(如嗜盐菌)可适应此环境并分解有机物，D正确。 10.(2026·河北石家庄调研)西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌(一种真菌)引起的。研究人员从西瓜枯萎病多发的土壤中分离出多种单菌落进行扩大培养，然后将扩大培养的发酵液与未凝固的普通培养基混合后倒平板，冷却后再接种尖孢镰刀菌，培养并观察尖孢镰刀菌菌丝生长情况，以期筛选出尖孢镰刀菌的拮抗菌。下列叙述错误的是(　　) A.在西瓜枯萎病多发的土壤中取样更容易获得目的菌种 B.培养土壤多种菌的发酵液中可能含有拮抗菌的代谢产物 C.需要将尖孢镰刀菌接种在普通培养基上培养观察作为对照 D.尖孢镰刀菌菌丝生长最好的组别对应的微生物为最高效拮抗菌 答案　D 解析　在西瓜枯萎病(由尖孢镰刀菌引起)多发的土壤中，与尖孢镰刀菌存在拮抗关系的菌种可能较多，故在西瓜枯萎病多发的土壤中取样更容易获得目的菌种，A正确；西瓜枯萎病多发的土壤中可能含有尖孢镰刀菌的拮抗菌，故培养土壤多种菌的发酵液中可能含有拮抗菌的代谢产物，B正确；将尖孢镰刀菌接种在普通培养基上培养作为对照，可更好地比较多种分离菌种对尖孢镰刀菌生长的抑制情况，C正确；尖孢镰刀菌菌丝生长最差的组别对应的微生物为最高效拮抗菌，D错误。 11.(2026·福建九市模拟)伊红—亚甲蓝琼脂培养基(EMB)可用于检测自来水中大肠杆菌的数量。生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并带有金属光泽。操作时先用滤膜过滤待测水样，再将滤膜转移到EMB上培养，最终统计菌落数目。下列叙述正确的是(　　) A.以藻类制成的琼脂可为微生物提供碳源、氮源等营养物质 B.伊红—亚甲蓝琼脂培养基属于选择培养基，可用于分离微生物 C.用100 mL样液培养出各种颜色的菌落5个，则1 L样液中大肠杆菌数为50个 D.该方法统计得到的大肠杆菌菌落数目可能小于待测水样的大肠杆菌数目 答案　D 解析　琼脂作为凝固剂，不能为微生物提供碳源、氮源等营养物质，A错误；伊红—亚甲蓝培养基能够鉴别大肠杆菌，属于鉴别培养基，B错误；只有呈深紫色的菌落才是大肠杆菌，用100 mL样液培养出各种颜色的菌落5个，则1 L样液中对应的细菌数为1 L÷100 mL×5＝50个，大肠杆菌数小于50个，C错误；该方法是利用菌落数来反映细菌数，可能多个细菌形成一个菌落导致统计数据偏小，D正确。 12.(2026·昆明“三诊一模”)科研人员分离出微塑料降解菌并对其降解能力进行了测定。将等量各菌株分别接种到含有等量聚乙烯微塑料的培养基中，30天后检测，结果见表。下列叙述正确的是(　　) 菌株编号 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 微塑料剩余量与微塑料添加量的比值/% 98.4 92.3 98.7 99.0 98.2 A.用平板划线法接种菌液可统计每毫升样品中的活菌数 B.菌株Ⅳ降解微塑料的能力最强，相关酶活性最高 C.能在该培养基中生长、繁殖的微生物都能分解聚乙烯微塑料 D.还需设置一组培养条件相同、加入等量聚乙烯微塑料但不接种菌液的实验 答案　D 解析　获得微生物纯培养物的常用方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用来统计样品中活菌的数目，A错误；分析题干信息可知，菌株Ⅳ微塑料剩余量与微塑料添加量的比值为99.0%，该数据是五组中最高的，反映出菌株Ⅳ降解微塑料的能力最弱，B错误；能在该培养基中生长、繁殖的微生物并不一定都能分解聚乙烯微塑料，如某些自养型微生物不需要有机碳源也可以在该培养基上生长、繁殖，C错误；还需设置一组培养条件相同、加入等量聚乙烯微塑料但不接种菌液的实验，作为对照，检测培养基中微塑料含量变化，D正确。 13.(2026·湖衢丽三市一模)香蕉感染土壤中的尖孢镰刀菌会引发枯萎病。为防治香蕉枯萎病，研究人员从土壤中筛选能抑制尖孢镰刀菌生长繁殖的拮抗菌株，流程如图所示。下列相关叙述正确的是(　　) A.土壤取样后，用蒸馏水稀释获得悬浮液 B.在固体培养基甲中挑选区域1的菌落进行扩大培养 C.在固体培养基乙上均匀涂布含有尖孢镰刀菌的菌液 D.应挑选滤纸片C中的菌株进行进一步纯化获得目的菌株 答案　C 解析　为避免杂菌污染，应用无菌水稀释获得悬浮液，A错误；通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落，应挑选区域4的菌落进行扩大培养，B错误；在固体培养基乙上均匀涂布含有尖孢镰刀菌的菌液，将四个滤纸片放置于培养基上，检测滤纸片上的菌种对尖孢镰刀菌的拮抗效果，C正确；抑菌圈越大，表明该滤纸片上的菌株抑制尖孢镰刀菌生长的效果越好，因此应挑选滤纸片B中的菌株(产生的抑菌圈最大)进一步纯化培养获得目的菌株，D错误。 14.(2026·江苏南京六校联考)研究人员发现某除草剂(含氮有机物)不易被降解，且长期使用会导致土壤污染。为修复被该除草剂污染的土壤，科研人员按图示程序选育能降解该除草剂的细菌，已知含该除草剂的培养基不透明。下列叙述正确的是(　　) A.操作Ⅱ应该将接种环灼烧灭菌5次 B.经过一段时间的培养，培养皿中应该只存在有透明圈的菌落 C.图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数 D.筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源 答案　D 解析　接种环在接种前和每次划线后都要进行灼烧，因此操作Ⅱ应该将接种环灼烧灭菌6次，A错误；经过一段时间的培养，培养皿中应仍存在无透明圈的菌落，B错误；图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法，平板划线法可用于获取单菌落，但不能用于细菌计数，C错误；该除草剂为含氮有机物，含该除草剂的培养基不透明，除草剂被分解后培养基变透明，若要选育能降解该除草剂的细菌，培养基中应将该除草剂作为唯一氮源，D正确。 学科网（北京）股份有限公司 $