精品解析：河南青桐鸣2025-2026学年下学期5月份阶段性测试生物试卷

高二生物学 HN202605 注意事项： 1.答题前，务必将自己的个人信息填写在答题卡上，并将条形码粘贴在答题卡上的指定位置。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 研究人员对略阳县和勉县的极危植物石蝴蝶进行种群结构研究，并进行龄级划分，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 调查石蝴蝶的种群密度时应在多个样地中随机取样 B. 略阳县种群幼龄个体占比较大，预测其种群密度将增大 C. 勉县种群各龄级个体占比相似，属于衰退型种群 D. 适当扩大样方面积有利于保证调查数据的准确性 【答案】C 【解析】 【详解】A、石蝴蝶为植物，调查其种群密度常采用样方法，且应在多个样地中随机取样，A正确； B、略阳县种群幼龄个体占比较大（>2/3），年龄结构属于增长型，预测其种群密度将增大，B正确； C、勉县种群各龄级个体占比相似，年龄结构属于稳定型，而非衰退型，C错误； D、石蝴蝶属于极危植物，个体数量稀少，适当扩大样方面积有利于统计足够数量的个体，保证调查数据的准确性，D正确。 2. 某生物学兴趣社团通过投掷骰子模拟多种因素对濒危动物镇海棘螈种群数量的影响。镇海棘螈的起始种群数量为200尾，每组两人各投掷一枚骰子，骰子总点数对应特定事件，各种事件对种群的影响不同，例如：总点数为6代表“农业污染”，会使镇海棘螈数量减少20%；总点数为11代表“食物丰富”，会使镇海棘螈数量增长20%等。下列叙述错误的是（ ） A. 台风、干旱均可直接影响镇海棘螈的出生率与死亡率 B. 天敌是影响镇海棘螈种群数量的生物因素，也是密度制约因素 C. “骰子点数随机出现”可模拟“自然环境中多种影响因素的随机发生” D. 某些事件需要根据种群数量分类讨论其影响，其模拟非密度制约因素 【答案】D 【解析】 【详解】A、台风、干旱均可直接影响种群的出生率与死亡率，A正确； B、天敌属于生物因素，天敌捕食强度随种群密度增大而增强，属于密度制约因素，B正确； C、投掷骰子出现的点数是随机的，可用“骰子点数随机出现”模拟“自然环境中多种影响因素的随机发生”，C正确； D、某些事件需要根据种群数量分类讨论其影响，其模拟密度制约因素，D错误。 3. 江西省泰和县的红壤丘陵区立足小流域，设计了一个个“丘上—缓坡—沟谷—鱼塘”的小单元，形成了“丘上林草丘间塘、缓坡沟谷果鱼粮”的立体农业布局，如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 在经济林中，动物没有明显的分层 B. 春花生与夏红薯轮作，体现了群落的季节性 C. 油菜田的观赏价值属于生物多样性的间接价值 D. 果树林中苹果树高低错落，体现了群落的垂直结构 【答案】B 【解析】 【详解】A、动物的分层依赖植物的分层实现，即在经济林中植物的垂直分层为动物创造了多种多样的栖息空间和食物条件，在经济林中，植物有明显的分层，所以动物也有明显的分层，A错误； B、春花生与夏红薯轮作，使不同季节的群落特征呈现规律性更替，体现了群落的季节性，B正确； C、间接价值是指生物多样性的生态功能，如调节气候、蓄养水源、保持水土等，油菜田的观赏价值属于生物多样性的直接价值，C错误； D、苹果树属于一个种群，不能构成群落，无法体现群落的垂直结构，D错误。 4. 长江“十年禁渔”政策实施后，研究人员对木洞江段进行了食物网结构研究，禁渔前后该江段食物网的部分指标变化如表所示。下列叙述正确的是（ ） 指标 物种数 连接数 平均泛化性 杂食性比例 禁渔前 33 73 2.21 65.4% 禁渔后 36 97 2.69 55.2% 注：物种数表示食物网中包含的生物种类数量；连接数表示不同物种之间实际存在的捕食关系数量；平均泛化性表示捕食者平均捕食的猎物种类数；杂食性比例表示同时取食植物和动物的物种所占的比例。 A. 禁渔后物种数增加，说明每条食物链的长度都变长了 B. 禁渔后连接数增加，说明物种之间的捕食关系更加复杂 C. 禁渔后平均泛化性升高，说明捕食者的食性变得更加专一 D. 禁渔后杂食性比例降低，说明生产者固定的太阳能总量减少 【答案】B 【解析】 【详解】A、物种数增加不代表每条食物链的长度都变长，食物链的长度取决于营养级的数量，A错误； B、连接数代表捕食关系的数量，连接数增加意味着食物网更加复杂，B正确； C、平均泛化性升高表示捕食者捕食的猎物种类增加，食性变得更广而非更专一，C错误； D、杂食性比例表示同时取食植物和动物的物种所占的比例，该比例与生产者固定的太阳能总量无直接联系，D错误。 5. 光伏鱼塘是指在水面架设光伏板实现水上发电的鱼塘。研究人员对比光伏鱼塘与非光伏鱼塘的浮游藻类生长情况，部分结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 应采用抽样检测法调查鱼塘中浮游藻类的种群密度 B. 光伏鱼塘浮游藻类多样性增加，光合作用同化量也增加 C. 光伏鱼塘中金藻门密度显著降低，不利于生态系统的稳定 D. 若光伏鱼塘中三种藻类数量减少，则鱼获得的能量一定减少 【答案】A 【解析】 【详解】A、检测液体中微小生物的密度应使用抽样检测法，A正确； B、据图可知，光伏鱼塘浮游藻类多样性很可能增加，但由于光伏板遮挡阳光，光合作用同化量可能减少，B错误； C、光伏板覆盖可避免金藻门占据绝对优势，为其他藻类的生存腾出空间，使藻类多样性增加，有利于生态系统的稳定，C错误； D、藻类并非鱼类的唯一食物来源，鱼塘中的鱼还可取食浮游动物、有机碎屑、人工饵料等，因此鱼获得的能量不一定减少，D错误。 6. 下列关于羊取食草的叙述，错误的是（ ） A. 不同季节，草向羊提供的总能量可能不同 B. 羊粪便中的能量应该属于草同化量的一部分 C. 幼羊对摄入量的同化效率高，即能量传递效率高 D. 羊取食草的过程与生态系统的信息传递有关 【答案】C 【解析】 【详解】A、春夏季，草光合作用固定的太阳能较多，且蛋白质、糖分含量高，较易消化吸收，向羊提供的总能量较高；秋冬季，草光合作用固定的太阳能较少，且纤维含量高，不易消化吸收，向羊提供的总能量较低，A正确； B、羊粪便中的能量是羊未同化的能量，这部分能量是草被羊摄入后未被吸收利用的，所以应该属于草同化量的一部分，B正确； C、能量传递效率是相邻营养级之间的同化量之比，而非一个营养级的摄入量和同化量之比，C错误； D、羊取食草的过程中，草的状态、气味等物理或化学信息会影响羊的取食行为，D正确。 7. 下列关于生态系统稳定性的叙述，错误的是（ ） A. 生态系统稳定性与食物网复杂程度有关 B. 负反馈调节有利于生态系统保持相对稳定 C. 河流轻度污染的净化体现了其抵抗力稳定性 D. 抵抗力稳定性与恢复力稳定性间一定呈负相关 【答案】D 【解析】 【详解】A、生态系统的食物网越复杂，其自我调节能力就越强，稳定性也就越高，A正确； B、负反馈调节是生态系统自我调节能力的基础，有利于维持生态系统的相对稳定，B正确； C、抵抗力稳定性是指生态系统抵抗外界干扰并使自身的结构和功能保持原状的能力，河流轻度污染的净化体现了其抵抗力稳定性，C正确； D、某些生态系统（如苔原生态系统）生物种类稀少、营养结构简单，其抵抗力稳定性和恢复力稳定性都较低，D错误。 8. 西瓜酱豆和柿子醋的制作均利用了传统发酵技术，下列叙述正确的是（ ） A. 传统发酵以天然菌种为主，常因菌种差异等造成发酵食品品质不一 B. 制作西瓜酱豆主要利用醋酸菌，制作柿子醋主要利用乳酸菌 C. 参与柿子醋发酵的微生物属于厌氧微生物 D. 制作过程中需要对所有原料进行严格灭菌 【答案】A 【解析】 【详解】A、传统发酵通常是利用多种天然菌种进行的混合发酵，菌种组成、活性等存在差异，且发酵过程不稳定，易导致传统发酵食品的品质不一，A正确； B、制作西瓜酱豆主要利用的是霉菌，制作柿子醋主要利用的是醋酸菌，B错误； C、醋酸菌是好氧细菌，C错误； D、传统发酵通常利用原料中存在的天然微生物，因此并非所有原料都需进行严格灭菌，D错误。 9. 银耳山楂复合型酸奶是以鲜牛乳为原料，添加银耳颗粒和山楂原浆，利用保加利亚乳杆菌等混合发酵制成的功能性酸奶，制作流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 山楂原浆中的有机酸可降低发酵体系的pH B. 原料均质后的杀菌处理，目的是杀死杂菌 C. 原料杀菌后应先待其冷却再进行接种 D. 冷藏后熟阶段，乳酸菌仍大量繁殖 【答案】D 【解析】 【详解】A、山楂原浆里含有有机酸，有机酸在发酵体系中会解离出氢离子，从而降低发酵体系的pH值，A正确； B、原料均质后杀菌处理，目的是杀死杂菌，保证接种的乳酸菌在发酵过程中的优势地位，B正确； C、原料杀菌后应先待其冷却再进行接种，避免高温杀死菌种，有利于菌种发挥作用，C正确； D、冷藏后熟阶段温度较低，乳酸菌代谢活动被抑制，D错误。 10. 某乳业集团为开发特色发酵乳，拟从传统发酵乳制品中筛选高产酸、耐胆盐的乳酸菌菌株。技术人员取老酵头样品，进行如下操作：①将样品进行梯度稀释；②取各稀释液涂布于含碳酸钙的固体培养基上，培养48h；③挑取产生透明圈的菌落进行纯化培养；④将纯化菌株接种于含胆盐的液体培养基中，测定其生长情况。下列叙述正确的是（ ） A. 步骤①稀释样品时，应在酒精灯火焰旁进行操作 B. 步骤②需进行厌氧培养，且固体培养基不能倒置 C. 步骤③选择透明圈最大的菌落作为目标高产酸菌株 D. 步骤④的接种方法是稀释涂布平板法或平板划线法 【答案】A 【解析】 【详解】A、酒精灯火焰旁形成无菌区域，可减少空气中杂菌污染，A正确； B、为避免冷凝水污染培养基，使用固体培养基培养微生物时，培养皿倒置，B错误； C、透明圈直径较大的菌落可作为候选，但还应比较透明圈直径与菌落直径的比值，且需进一步通过发酵液酸度测定确认其产酸能力，并结合遗传稳定性测试和工业条件适应性评估，最终筛选出目标菌株，C错误； D、稀释涂布平板法或平板划线法适用于固体培养基接种，而步骤④要求接种于液体培养基中，不适用这两种方法，D错误。 11. 下列关于植物细胞工程的叙述，错误的是（ ） A. 利用花药离体培养得到的单倍体植株一般不能直接用于农田种植 B. 番茄和马铃薯的原生质体能融合，说明两种植物间不存在生殖隔离 C. 次生代谢物不是植物基本生命活动所必需的，但对植物有重要作用 D. 利用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少或无病毒 【答案】B 【解析】 【详解】A、花药离体培养得到的是单倍体植株，一般植株矮小、高度不育，需经秋水仙素诱导发生染色体加倍后再用于田间种植，A正确； B、番茄和马铃薯是两个不同物种，不同物种间存在生殖隔离，B错误； C、次生代谢物不是植物基本生命活动所必需的，但它们在适应环境、防御天敌、吸引传粉者等方面发挥重要作用，C正确； D、植物顶端分生区病毒极少，甚至没有病毒，利用这些无病毒组织进行植物组织培养可以获得脱毒苗，D正确。 12. 角膜移植是目前治疗角膜盲的唯一途径，角膜内皮细胞培养可解决捐献角膜数量有限的难题。下列叙述错误的是（ ） A. 角膜内皮细胞培养过程中需要提供CO2 B. 培养前要用胰蛋白酶等处理捐献的角膜组织 C. 原代培养过程中贴壁的细胞会出现分层生长现象 D. 贴壁细胞传代培养前要先分散成单个细胞，再用离心法收集 【答案】C 【解析】 【详解】A、培养箱中气体应含有5%的CO2，以维持培养液的pH相对稳定，A正确； B、动物细胞培养前，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织，使细胞分散开，形成单细胞悬液，B正确； C、动物细胞培养过程中，贴壁细胞会单层生长，当细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，不会出现分层生长现象，C错误； D、贴壁细胞传代培养前要先分散成单个细胞，再用离心法收集，D正确。 13. 青海藏羊是优质的畜牧资源，但其传统繁殖方式受季节限制。为解决这一问题，可将胚胎在极低温度下储存，待适宜时机再解冻移植。为探究最佳冷冻方案，研究人员进行了相关实验，冷冻对不同发育阶段胚胎的影响如表所示。下列叙述错误的是（ ） 胚胎发育阶段 胚胎数量/枚 存活率/% 损伤率/% 2~8细胞阶段 37 63.5 36.5 桑葚胚阶段 28 73.5 26.5 囊胚阶段 23 84.7 15.3 A. 2~8细胞阶段属于卵裂期，该时期胚胎冷冻后的存活率最低 B. 桑葚胚阶段的每个细胞都具有全能性，但胚胎分割仍受限制 C. 囊胚阶段的细胞已分化，移植到受体子宫内会发生免疫排斥 D. 还需研究冷冻时间、解冻温度等因素对胚胎冷冻效果的影响 【答案】C 【解析】 【详解】A、2-8细胞阶段属于卵裂期，据表可知，该时期胚胎冷冻后的存活率最低，A正确； B、桑葚胚阶段的每个细胞都具有全能性，但在胚胎分割时仍需要对分割的次数进行控制，B正确； C、囊胚阶段的细胞已分化，出现内细胞团细胞和滋养层细胞，但受体的子宫对外来胚胎一般不会发生免疫排斥，C错误； D、为探究最佳冷冻方案，除研究冷冻对不同发育阶段胚胎的影响，还需研究冷冻时间、解冻温度等因素的影响，D正确。 14. 科学家曾借助转基因技术从微生物反应器大肠杆菌中获得人血清白蛋白（HSA），以期治疗相关疾病，但产品无功能活性。用动物生物反应器生产重组HSA存在产品易受病毒污染等缺点。研究人员欲开发水稻胚乳生物反应器生产重组HSA，为确保目的基因仅在胚乳中表达，需要筛选胚乳特异性启动子，已知三种基因在水稻叶、根和胚乳中的表达量数据如表所示。下列叙述正确的是（ ） 叶 根 胚乳 Glua1基因表达量 0.5 3 101978 SBE1基因表达量 27 25 1461 Xa1基因表达量 0.6 8 0 A. 微生物反应器大肠杆菌的内质网和高尔基体可修饰翻译出的肽链 B. 为确保目的基因仅在胚乳中表达，需将基因表达载体导入胚乳细胞 C. 根据表中数据可知，宜选用SBE1基因的启动子驱动目的基因的转录 D. 与乳腺生物反应器相比，胚乳生物反应器的产品携带病原体的风险更小 【答案】D 【解析】 【详解】A、大肠杆菌为原核生物，有核糖体但无内质网和高尔基体，A错误； B、应将目的基因导入愈伤组织细胞，通过植物组织培养获得植株，构建基因表达载体时，需将血清白蛋白基因与水稻胚乳细胞蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，从而实现血清白蛋白基因在水稻胚乳细胞中表达，B错误； C、为确保目的基因仅在胚乳中表达，需要胚乳特异性启动子，根据表中数据可知，SBE1基因在叶和根中表达量相对较高，而Glua1基因在胚乳中表达量极高且在其他组织中几乎不表达，宜选用Glua1基因的启动子驱动目的基因的转录，C错误； D、据题可知，用动物生物反应器生产重组HSA存在产品易受病毒污染等缺点，水稻不是人类或动物病毒的宿主，其自身也无可感染人的病毒，因此，胚乳生物反应器的产品携带病原体的风险更小，D正确。 15. 实时荧光定量PCR（qPCR）技术是在常规PCR的基础上，加入与模板DNA某条链互补的荧光探针（一类两端经过荧光基团、荧光淬灭剂修饰的单链DNA片段），当子链延伸至探针处时，DNA聚合酶会降解探针并释放荧光基团，使荧光监测系统接收到荧光信号，即DNA每复制一次，就有一个荧光分子生成，如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 引物的作用是使RNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 B. 荧光探针的5′端连接一个荧光淬灭剂Q，3′端连接一个荧光基团R C. 1个双链DNA分子经过6轮qPCR循环，一共会生成63个荧光分子 D. qPCR中DNA聚合酶催化磷酸二酯键形成，不催化磷酸二酯键断裂 【答案】C 【解析】 【详解】A、引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，A错误； B、根据图中子链的延伸方向可知，荧光探针连接Q的是3′端，连接R的是5′端，B错误； C、荧光探针只能跟模板DNA的某条链互补配对，每有一个DNA分子生成，就有一个荧光分子生成，经过6轮qPCR循环一共会生成26-1=63个荧光分子，C正确； D、子链延伸时DNA聚合酶可催化磷酸二酯键形成，在子链的3′端添加脱氧核苷酸，当子链延伸至探针处时，DNA聚合酶可催化磷酸二酯键断裂，降解探针释放荧光基团，D错误。 16. 研究人员发现某天然酶在工业条件下催化效率低、热稳定性不足，将其第251位和281位的丙氨酸替换为半胱氨酸后可提高其热稳定性。下列叙述错误的是（ ） A. 题述获得热稳定性更强的酶的过程属于蛋白质工程 B. 可直接将第251位和281位的丙氨酸替换为半胱氨酸 C. 该工程的基本思路与中心法则的信息流动方向是相反的 D. 可利用基因的定点突变技术进行碱基替换进而实现氨基酸替换 【答案】B 【解析】 【详解】A、蛋白质工程是指通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。题目中对天然酶的改造是将其第251位和281位的丙氨酸替换为半胱氨酸，属于对现有蛋白质的改造，因此该过程属于蛋白质工程，A正确； B、蛋白质工程的操作对象是基因，而非直接对蛋白质进行改造。因为蛋白质的结构由基因决定，若直接替换蛋白质中的氨基酸，该蛋白质无法稳定遗传，且无法通过细胞分裂传递给子代。因此，不能直接将第251位和281位的丙氨酸替换为半胱氨酸，需通过改造控制该酶合成的基因来实现，B错误； C、中心法则的信息流动方向是“DNA→RNA→蛋白质”，即从基因到蛋白质的表达过程。而蛋白质工程的基本思路是“从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)→改造或合成目的基因→获得所需蛋白质”，其信息流动方向是“蛋白质→基因”，与中心法则相反，C正确； D、基因的定点突变技术是指在体外对基因的特定碱基进行替换、增添或缺失，从而改变基因的碱基序列。通过该技术可实现对控制酶合成的基因中特定碱基的替换，进而导致氨基酸序列的改变(如将丙氨酸对应的密码子替换为半胱氨酸对应的密码子)，从而实现氨基酸的替换，D正确。 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17. 微生物是白酒酿造的关键因素，揭示清香型白酒酿造过程中微生物的变化规律对白酒酿造技术的发展具有重要作用。清香型白酒酿造过程中酵母菌群落结构的变化规律如图所示（Pa、Pf、Io、Sc、Pm和Ho为6种类型的酵母菌）。回答下列问题： （1）为统计酵母菌的多样性，可用______法将发酵过程中的酵母菌进行分离、纯化并计数，此过程中用______法对培养基进行灭菌。 （2）发酵前期对发酵装置进行通氧，目的是______。发酵后期酵母菌总数量减少，原因是______。 （3）发酵开始后的0~5天，_____（填酵母菌类型）数量较多，10天后，_____（填酵母菌类型）占绝对优势。若计划从发酵体系中筛选一株可用于清香型白酒强化发酵的酵母菌株，则宜选择_____，理由是_____。 【答案】（1） ①. 稀释涂布平板 ②. 湿热灭菌##高压蒸汽灭菌 （2） ①. 使酵母菌进行有氧呼吸，扩大酵母菌的种群数量 ②. 营养物质的消耗和代谢产物的积累 （3） ①. Ho ②. Sc ③. Sc ④. Sc在发酵后期占绝对优势，说明其对发酵后期的环境具有良好的适应性，适合作为强化发酵的菌株 【解析】 【小问1详解】 对微生物进行分离、纯化并计数时应使用稀释涂布平板法，对培养基进行灭菌应使用湿热灭菌法。 【小问2详解】 发酵前期对发酵装置进行通氧的目的是使酵母菌进行有氧呼吸，扩大酵母菌的种群数量。发酵后期酵母菌总数量减少，原因是营养物质的消耗和代谢产物的积累。 【小问3详解】 据柱状图可知，发酵开始后的0-5天Ho占比较大，10天后Sc占绝对优势。Sc在发酵后期占绝对优势，说明其对发酵后期的环境具有良好的适应性，适合作为强化发酵的菌株。 18. 肠球菌是一种比较常见的机会致病菌，广泛存在于人和动物的肠道中，可通过食物感染人类。阅读以下两则资料，回答下列问题： 资料1：肠球菌耐盐、耐酸，在10~45℃条件下均可繁殖，在干燥表面、污水、粪便中可存活数月至数年。肠球菌对热有一定抵抗力，60℃下可存活30分钟，但100℃煮沸可将其杀灭。 资料2：肠球菌的分离常用胆汁七叶苷培养基，其成分如表所示。 培养基成分 蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、七叶苷、枸橼酸铁铵、牛胆汁粉（或胆汁盐）、琼脂 （1）从物理状态分析，胆汁七叶苷培养基属于______培养基。该培养基中的胆汁盐可抑制多数链球菌的生长，而肠球菌能在该培养基上正常生长，该培养基属于______培养基。肠球菌能水解七叶苷，与枸橼酸铁铵反应生成黑色沉淀，使菌落周围呈现黑褐色，据此判断该培养基属于______培养基。 （2）常使用抗生素防治肠球菌病。请利用以下材料，探究肠球菌HS1对不同抗生素的敏感性。 实验材料：已培养HS1的琼脂平板、圆形滤纸片、三种不同抗生素的溶液、恒温培养箱、直尺。 实验思路：______。 （3）肠球菌多存在于乳制品、熟食、即食食品中，在日常生活中我们应该如何预防肠球菌感染？请写出2点建议：______。 【答案】（1） ①. 固体 ②. 选择 ③. 鉴别 （2）用三种不同抗生素的溶液分别浸泡圆形滤纸片，将已培养HS1的琼脂平板均分为四部分，分别放上不含抗生素的滤纸片和浸泡不同抗生素的滤纸片，进行多组重复，将各平板置于恒温培养箱中培养一段时间，用直尺测量抑菌圈直径并分别计算平均值 （3）乳制品、熟食、即食食品注意低温储存；乳制品、熟食、即食食品在食用前应彻底加热；饭前、便后注意洗手（答出2点且合理即可） 【解析】 【小问1详解】 据表可知，胆汁七叶苷培养基含有凝固剂琼脂，是固体培养基。 该培养基中的胆汁盐可抑制其他微生物生长，促进目标微生物生长，说明该培养基属于选择培养基。 目标微生物在该培养基上有特殊的颜色反应，说明该培养基属于鉴别培养基。 【小问2详解】 该实验的目的是探究HS1对三种不同抗生素的敏感性，自变量是三种不同抗生素的溶液，观测指标是抑菌圈直径大小。结合对照原则设计实验，实验思路为用三种不同抗生素的溶液分别浸泡圆形滤纸片，将一个已培养HS1的琼脂平板均分为四部分，分别放上不含抗生素的滤纸片和浸泡不同抗生素的滤纸片，进行多组重复，将各平板置于恒温培养箱中培养一段时间，用直尺测量抑菌圈直径并分别计算平均值。 【小问3详解】 结合生活常识与题目信息，在日常生活中为预防肠球菌感染，应做到乳制品、熟食、即食食品注意低温储存；乳制品、熟食、即食食品在食用前应彻底加热；饭前、便后注意洗手等。 19. 油菜（2n=38）的栽培品种遗传多样性不足，导致育种工作受到限制。紫罗兰（2n=14）花色丰富，种子油富含亚麻酸，不易受虫害。为了利用紫罗兰基因资源进行油菜品质改良，研究人员进行了如图所示的实验。回答下列问题： （1）获取原生质体时在略微高渗的溶液中进行，可使植物细胞失水，处于微弱的_____状态，便于使用_____去除细胞壁。 （2）为计数原生质体，可利用_____（填“血细胞计数板”或“细菌计数板”）在显微镜下直接计数。此方法的缺点是_____。 （3）研究人员采取高Ca2+—高pH法、PEG法、PEG/高Ca2+—高pH法分别进行油菜和紫罗兰原生质体融合，并统计融合率，结果如表所示（两个原生质体的融合称为二源融合，多于两个原生质体的融合称为多源融合）。 融合方法 高Ca2+—高pH法 PEG法 PEG/高Ca2+—高pH法 二源融合 4.2% 10.5% 17.8% 多源融合 1.1% 4.4% 5.6% 二源融合产生的细胞类型有_____种。据表判断_____法是油菜和紫罗兰原生质体融合的最佳方法，依据是_____。 （4）筛选出的杂种细胞形成愈伤组织后，再分化获得杂种植株。理论上，获得的杂种植株为_____倍体，其体细胞中的染色体数为_____条；该杂种植株在减数分裂时，_____（填“能”或“不能”）产生可育配子。 【答案】（1） ①. 质壁分离 ②. 纤维素酶和果胶酶 （2） ①. 血细胞计数板 ②. 不能区分有活性的原生质体和无活性的原生质体 （3） ①. 3 ②. PEG/高Ca2+—高pH ③. 该方法的总融合率最高，且二源融合率也最高 （4） ①. 四 ②. 52 ③. 能 【解析】 【小问1详解】 获取原生质体时在略微高渗的溶液中进行，可使植物细胞失水，处于微弱的质壁分离状态，便于使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。 【小问2详解】 血细胞计数板比细菌计数板厚，常用于相对较大的细胞的计数。在显微镜下直接计数不能区分有活性的原生质体和无活性的原生质体。 【小问3详解】 二源融合可能产生油菜—油菜原生质体、紫罗兰—紫罗兰原生质体和油菜—紫罗兰原生质体，共3种。据表可知，PEG/高Ca2+—高pH法的总融合率最高，且二源融合率也最高，因此是进行油菜和紫罗兰原生质体融合的最佳方法。 【小问4详解】 杂种细胞是油菜体细胞与紫罗兰体细胞融合而形成的，获得的杂种植株为异源四倍体，其体细胞中的染色体数为二者体细胞染色体数之和，即38+14=52条。杂种植株减数分裂时，来自油菜的同源染色体正常联会，来自紫罗兰的也正常联会，因此可以产生可育的配子。 20. 长期使用单克隆抗体（单抗）易导致癌细胞产生耐药性。为解决此问题，双特异性抗体（双抗）应运而生，如CD38/CD3双抗，其可分别结合T细胞表面的CD3和骨髓瘤细胞表面的CD38，强制T细胞杀伤骨髓瘤细胞。CD38/CD3双抗的制备过程如图1所示。但双抗仅通过CD3激活T细胞，缺乏共刺激信号，导致T细胞易凋亡。为此，研究人员开发了三特异性抗体（三抗），如图2所示的CD38/CD3/CD28三抗。回答下列问题： （1）据图1分析，CD38/CD3双抗制备过程中，给小鼠注射CD38蛋白，是为了从小鼠的脾脏中分离得到_____；注射的抗原A是指_____。 （2）据图1分析，与植物细胞融合的诱导方法相比，过程②和④还可采用的诱导方法是_____。过程④筛选获得的细胞是_____，过程⑤筛选获得的细胞具有的特点是_____。 （3）研究人员为验证CD38/CD3/CD28三抗比CD38/CD3双抗具有更强的抗肿瘤活性，将骨髓瘤细胞与T细胞混合后均分为_____组，各组处理分别为______，培养一段时间后，统计并计算_____。 （4）据图2分析，CD38/CD3/CD28三抗的优势是______。 【答案】（1） ①. 能产生特定抗体（CD38抗体）的B淋巴细胞 ②. CD3蛋白 （2） ①. 灭活病毒诱导法 ②. 单克隆杂交瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞 ③. 既能大量增殖，又能产生CD38/CD3双抗 （3） ①. 3 ②. 不加抗体、加适量CD38/CD3双抗、加等量CD38/CD3/CD28三抗 ③. 各组骨髓瘤细胞的杀伤率（或存活率） （4）在连接T细胞与骨髓瘤细胞的同时，通过CD28信号促进Bcl-xL表达，抑制T细胞凋亡，增强免疫效果 【解析】 【小问1详解】 给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，然后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，该细胞能够产生特定抗体。由于要制备CD38/CD3双抗，先给小鼠注射CD38蛋白，是为了从小鼠的脾脏中获得已免疫的B淋巴细胞，该细胞能够产生与CD38蛋白特异性结合的抗体；后给小鼠注射抗原A，从而获得能分泌CD38/CD3双抗的杂交瘤细胞，故注射的抗原A应是CD3蛋白。 【小问2详解】 过程②和④包含诱导动物细胞融合，与诱导植物细胞融合的方法相比，诱导动物细胞融合还可用灭活病毒诱导法。过程④的筛选是从单克隆杂交瘤细胞和B淋巴细胞的诱导融合体系中，筛选出单克隆杂交瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞。过程⑤是融合细胞的筛选，筛选出既能无限增殖，又能产生CD38/CD3双抗的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 实验设计应遵循对照原则，需设置阴性对照组（无抗体），排除细胞自身增殖或死亡的影响，还应遵循单一变量原则，因此应设计无抗体、加双抗、加三抗三组处理。题目要求比较抗肿瘤活性，因此检测指标应为骨髓瘤细胞的杀伤率或存活率。 【小问4详解】 据图2分析，CD38/CD3/CD28三抗的优势是在连接T细胞与骨髓瘤细胞的同时，通过CD28信号促进Bcl-xL表达，抑制T细胞凋亡，增强免疫效果。 21. 柑橘黄龙病是全球柑橘产业最具毁灭性的病害，由亚洲韧皮杆菌引起。我国科学家利用黄龙病菌原噬菌体杀菌蛋白基因（简称L基因），通过基因工程成功培育出抗黄龙病柑橘新品种。图1为用于基因工程的pBIN质粒（一种Ti质粒）示意图，图2为L基因内部限制酶酶切位点分布图，相关限制酶识别序列与酶切位点如表所示。回答下列问题： 限制酶 识别序列与酶切位点 XhoI EcoRI XbaI KpnI SmaI （1）利用PCR技术扩增L基因时，除需加入模板DNA、引物、含Mg2+的缓冲液外，还需加入_____和_____。 （2）为将L基因正确插入pBIN质粒的启动子与终止子之间，切割pBIN质粒时应选用_____两种限制酶。利用PCR扩增L基因时，需在引物的______端添加限制酶识别序列。结合图中信息分析，扩增L基因的上游引物应添加限制酶______的识别序列，下游引物应添加限制酶______的识别序列。使用______连接切割后的pBIN质粒与L基因。 （3）用携带重组质粒的农杆菌侵染柑橘愈伤组织时，基因表达载体中的______片段可整合到柑橘细胞的染色体DNA上，从而将L基因导入柑橘细胞。pBIN质粒上含有______基因，可用于筛选成功导入目的基因的植物细胞。 【答案】（1） ①. 四种脱氧核苷酸（或dNTP） ②. 耐高温的DNA聚合酶（或TaqDNA聚合酶）（与前一空答案可颠倒） （2） ①. XbaI、KpnI ②. 5′ ③. XhoI ④. KpnI ⑤. DNA连接酶 （3） ①. T-DNA ②. 卡那霉素抗性 【解析】 【小问1详解】 利用PCR技术扩增目的基因时，反应体系中需要加入模板DNA、引物、含Mg2+的缓冲液（作为酶的激活剂）、四种脱氧核苷酸（dNTP，作为原料）和耐高温的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶），TaqDNA聚合酶能在高温条件下催化脱氧核苷酸聚合形成DNA链。 【小问2详解】 L基因应插入真核启动子与终止子之间，根据图示，质粒上有两个真核启动子，其中一个真核启动子与终止子之间有卡那霉素抗性基因，不宜破坏该抗性基因，且此真核启动子与终止子之间无限制酶识别序列，因此应选择在另一个真核启动子与终止子之间插入目的基因，故选用XbaI、KpnI两种限制酶切割质粒。子链延伸方向为5′→3′，引物的3′端必须与模板完全匹配以保证延伸正常进行，而5′端可以添加非模板序列（如酶切位点）。确定切割质粒的限制酶后，分析切割L基因的限制酶，在L基因中有XbaI的识别序列，因此不能选用XbaI切割L基因。由表可知，XhoI与XbaI酶切生成的黏性末端相同，因此可选择XhoI与KpnI切割L基因。根据L基因的转录方向可知，基因左侧为上游，为使目的基因正常转录，上游应接近启动子位置，故此处应添加XhoI的识别序列。同理，基因下游应添加KpnI的识别序列。切割后的pBIN质粒和L基因需要使用DNA连接酶进行连接，形成重组质粒。 【小问3详解】 农杆菌转化法中，Ti质粒上的T-DNA片段可以携带外源基因整合到植物细胞的染色体DNA中，从而实现稳定遗传。T-DNA上有卡那霉素抗性基因，可用于筛选成功导入目的基因的植物细胞。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物学 HN202605 注意事项： 1.答题前，务必将自己的个人信息填写在答题卡上，并将条形码粘贴在答题卡上的指定位置。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 研究人员对略阳县和勉县的极危植物石蝴蝶进行种群结构研究，并进行龄级划分，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 调查石蝴蝶的种群密度时应在多个样地中随机取样 B. 略阳县种群幼龄个体占比较大，预测其种群密度将增大 C. 勉县种群各龄级个体占比相似，属于衰退型种群 D. 适当扩大样方面积有利于保证调查数据的准确性 2. 某生物学兴趣社团通过投掷骰子模拟多种因素对濒危动物镇海棘螈种群数量的影响。镇海棘螈的起始种群数量为200尾，每组两人各投掷一枚骰子，骰子总点数对应特定事件，各种事件对种群的影响不同，例如：总点数为6代表“农业污染”，会使镇海棘螈数量减少20%；总点数为11代表“食物丰富”，会使镇海棘螈数量增长20%等。下列叙述错误的是（ ） A. 台风、干旱均可直接影响镇海棘螈的出生率与死亡率 B. 天敌是影响镇海棘螈种群数量的生物因素，也是密度制约因素 C. “骰子点数随机出现”可模拟“自然环境中多种影响因素的随机发生” D. 某些事件需要根据种群数量分类讨论其影响，其模拟非密度制约因素 3. 江西省泰和县的红壤丘陵区立足小流域，设计了一个个“丘上—缓坡—沟谷—鱼塘”的小单元，形成了“丘上林草丘间塘、缓坡沟谷果鱼粮”的立体农业布局，如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 在经济林中，动物没有明显的分层 B. 春花生与夏红薯轮作，体现了群落的季节性 C. 油菜田的观赏价值属于生物多样性的间接价值 D. 果树林中苹果树高低错落，体现了群落的垂直结构 4. 长江“十年禁渔”政策实施后，研究人员对木洞江段进行了食物网结构研究，禁渔前后该江段食物网的部分指标变化如表所示。下列叙述正确的是（ ） 指标 物种数 连接数 平均泛化性 杂食性比例 禁渔前 33 73 2.21 65.4% 禁渔后 36 97 2.69 55.2% 注：物种数表示食物网中包含的生物种类数量；连接数表示不同物种之间实际存在的捕食关系数量；平均泛化性表示捕食者平均捕食的猎物种类数；杂食性比例表示同时取食植物和动物的物种所占的比例。 A. 禁渔后物种数增加，说明每条食物链的长度都变长了 B. 禁渔后连接数增加，说明物种之间的捕食关系更加复杂 C. 禁渔后平均泛化性升高，说明捕食者的食性变得更加专一 D. 禁渔后杂食性比例降低，说明生产者固定的太阳能总量减少 5. 光伏鱼塘是指在水面架设光伏板实现水上发电的鱼塘。研究人员对比光伏鱼塘与非光伏鱼塘的浮游藻类生长情况，部分结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 应采用抽样检测法调查鱼塘中浮游藻类的种群密度 B. 光伏鱼塘浮游藻类多样性增加，光合作用同化量也增加 C. 光伏鱼塘中金藻门密度显著降低，不利于生态系统的稳定 D. 若光伏鱼塘中三种藻类数量减少，则鱼获得的能量一定减少 6. 下列关于羊取食草的叙述，错误的是（ ） A. 不同季节，草向羊提供的总能量可能不同 B. 羊粪便中的能量应该属于草同化量的一部分 C. 幼羊对摄入量的同化效率高，即能量传递效率高 D. 羊取食草的过程与生态系统的信息传递有关 7. 下列关于生态系统稳定性的叙述，错误的是（ ） A. 生态系统稳定性与食物网复杂程度有关 B. 负反馈调节有利于生态系统保持相对稳定 C. 河流轻度污染的净化体现了其抵抗力稳定性 D. 抵抗力稳定性与恢复力稳定性间一定呈负相关 8. 西瓜酱豆和柿子醋的制作均利用了传统发酵技术，下列叙述正确的是（ ） A. 传统发酵以天然菌种为主，常因菌种差异等造成发酵食品品质不一 B. 制作西瓜酱豆主要利用醋酸菌，制作柿子醋主要利用乳酸菌 C. 参与柿子醋发酵的微生物属于厌氧微生物 D. 制作过程中需要对所有原料进行严格灭菌 9. 银耳山楂复合型酸奶是以鲜牛乳为原料，添加银耳颗粒和山楂原浆，利用保加利亚乳杆菌等混合发酵制成的功能性酸奶，制作流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 山楂原浆中的有机酸可降低发酵体系的pH B. 原料均质后的杀菌处理，目的是杀死杂菌 C. 原料杀菌后应先待其冷却再进行接种 D. 冷藏后熟阶段，乳酸菌仍大量繁殖 10. 某乳业集团为开发特色发酵乳，拟从传统发酵乳制品中筛选高产酸、耐胆盐的乳酸菌菌株。技术人员取老酵头样品，进行如下操作：①将样品进行梯度稀释；②取各稀释液涂布于含碳酸钙的固体培养基上，培养48h；③挑取产生透明圈的菌落进行纯化培养；④将纯化菌株接种于含胆盐的液体培养基中，测定其生长情况。下列叙述正确的是（ ） A. 步骤①稀释样品时，应在酒精灯火焰旁进行操作 B. 步骤②需进行厌氧培养，且固体培养基不能倒置 C. 步骤③选择透明圈最大的菌落作为目标高产酸菌株 D. 步骤④的接种方法是稀释涂布平板法或平板划线法 11. 下列关于植物细胞工程的叙述，错误的是（ ） A. 利用花药离体培养得到的单倍体植株一般不能直接用于农田种植 B. 番茄和马铃薯的原生质体能融合，说明两种植物间不存在生殖隔离 C. 次生代谢物不是植物基本生命活动所必需的，但对植物有重要作用 D. 利用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少或无病毒 12. 角膜移植是目前治疗角膜盲的唯一途径，角膜内皮细胞培养可解决捐献角膜数量有限的难题。下列叙述错误的是（ ） A. 角膜内皮细胞培养过程中需要提供CO2 B. 培养前要用胰蛋白酶等处理捐献的角膜组织 C. 原代培养过程中贴壁的细胞会出现分层生长现象 D. 贴壁细胞传代培养前要先分散成单个细胞，再用离心法收集 13. 青海藏羊是优质的畜牧资源，但其传统繁殖方式受季节限制。为解决这一问题，可将胚胎在极低温度下储存，待适宜时机再解冻移植。为探究最佳冷冻方案，研究人员进行了相关实验，冷冻对不同发育阶段胚胎的影响如表所示。下列叙述错误的是（ ） 胚胎发育阶段 胚胎数量/枚 存活率/% 损伤率/% 2~8细胞阶段 37 63.5 36.5 桑葚胚阶段 28 73.5 26.5 囊胚阶段 23 84.7 15.3 A. 2~8细胞阶段属于卵裂期，该时期胚胎冷冻后的存活率最低 B. 桑葚胚阶段的每个细胞都具有全能性，但胚胎分割仍受限制 C. 囊胚阶段的细胞已分化，移植到受体子宫内会发生免疫排斥 D. 还需研究冷冻时间、解冻温度等因素对胚胎冷冻效果的影响 14. 科学家曾借助转基因技术从微生物反应器大肠杆菌中获得人血清白蛋白（HSA），以期治疗相关疾病，但产品无功能活性。用动物生物反应器生产重组HSA存在产品易受病毒污染等缺点。研究人员欲开发水稻胚乳生物反应器生产重组HSA，为确保目的基因仅在胚乳中表达，需要筛选胚乳特异性启动子，已知三种基因在水稻叶、根和胚乳中的表达量数据如表所示。下列叙述正确的是（ ） 叶 根 胚乳 Glua1基因表达量 0.5 3 101978 SBE1基因表达量 27 25 1461 Xa1基因表达量 0.6 8 0 A. 微生物反应器大肠杆菌的内质网和高尔基体可修饰翻译出的肽链 B. 为确保目的基因仅在胚乳中表达，需将基因表达载体导入胚乳细胞 C. 根据表中数据可知，宜选用SBE1基因的启动子驱动目的基因的转录 D. 与乳腺生物反应器相比，胚乳生物反应器的产品携带病原体的风险更小 15. 实时荧光定量PCR（qPCR）技术是在常规PCR的基础上，加入与模板DNA某条链互补的荧光探针（一类两端经过荧光基团、荧光淬灭剂修饰的单链DNA片段），当子链延伸至探针处时，DNA聚合酶会降解探针并释放荧光基团，使荧光监测系统接收到荧光信号，即DNA每复制一次，就有一个荧光分子生成，如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 引物的作用是使RNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 B. 荧光探针的5′端连接一个荧光淬灭剂Q，3′端连接一个荧光基团R C. 1个双链DNA分子经过6轮qPCR循环，一共会生成63个荧光分子 D. qPCR中DNA聚合酶催化磷酸二酯键形成，不催化磷酸二酯键断裂 16. 研究人员发现某天然酶在工业条件下催化效率低、热稳定性不足，将其第251位和281位的丙氨酸替换为半胱氨酸后可提高其热稳定性。下列叙述错误的是（ ） A. 题述获得热稳定性更强的酶的过程属于蛋白质工程 B. 可直接将第251位和281位的丙氨酸替换为半胱氨酸 C. 该工程的基本思路与中心法则的信息流动方向是相反的 D. 可利用基因的定点突变技术进行碱基替换进而实现氨基酸替换 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17. 微生物是白酒酿造的关键因素，揭示清香型白酒酿造过程中微生物的变化规律对白酒酿造技术的发展具有重要作用。清香型白酒酿造过程中酵母菌群落结构的变化规律如图所示（Pa、Pf、Io、Sc、Pm和Ho为6种类型的酵母菌）。回答下列问题： （1）为统计酵母菌的多样性，可用______法将发酵过程中的酵母菌进行分离、纯化并计数，此过程中用______法对培养基进行灭菌。 （2）发酵前期对发酵装置进行通氧，目的是______。发酵后期酵母菌总数量减少，原因是______。 （3）发酵开始后的0~5天，_____（填酵母菌类型）数量较多，10天后，_____（填酵母菌类型）占绝对优势。若计划从发酵体系中筛选一株可用于清香型白酒强化发酵的酵母菌株，则宜选择_____，理由是_____。 18. 肠球菌是一种比较常见的机会致病菌，广泛存在于人和动物的肠道中，可通过食物感染人类。阅读以下两则资料，回答下列问题： 资料1：肠球菌耐盐、耐酸，在10~45℃条件下均可繁殖，在干燥表面、污水、粪便中可存活数月至数年。肠球菌对热有一定抵抗力，60℃下可存活30分钟，但100℃煮沸可将其杀灭。 资料2：肠球菌的分离常用胆汁七叶苷培养基，其成分如表所示。 培养基成分 蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、七叶苷、枸橼酸铁铵、牛胆汁粉（或胆汁盐）、琼脂 （1）从物理状态分析，胆汁七叶苷培养基属于______培养基。该培养基中的胆汁盐可抑制多数链球菌的生长，而肠球菌能在该培养基上正常生长，该培养基属于______培养基。肠球菌能水解七叶苷，与枸橼酸铁铵反应生成黑色沉淀，使菌落周围呈现黑褐色，据此判断该培养基属于______培养基。 （2）常使用抗生素防治肠球菌病。请利用以下材料，探究肠球菌HS1对不同抗生素的敏感性。 实验材料：已培养HS1的琼脂平板、圆形滤纸片、三种不同抗生素的溶液、恒温培养箱、直尺。 实验思路：______。 （3）肠球菌多存在于乳制品、熟食、即食食品中，在日常生活中我们应该如何预防肠球菌感染？请写出2点建议：______。 19. 油菜（2n=38）的栽培品种遗传多样性不足，导致育种工作受到限制。紫罗兰（2n=14）花色丰富，种子油富含亚麻酸，不易受虫害。为了利用紫罗兰基因资源进行油菜品质改良，研究人员进行了如图所示的实验。回答下列问题： （1）获取原生质体时在略微高渗的溶液中进行，可使植物细胞失水，处于微弱的_____状态，便于使用_____去除细胞壁。 （2）为计数原生质体，可利用_____（填“血细胞计数板”或“细菌计数板”）在显微镜下直接计数。此方法的缺点是_____。 （3）研究人员采取高Ca2+—高pH法、PEG法、PEG/高Ca2+—高pH法分别进行油菜和紫罗兰原生质体融合，并统计融合率，结果如表所示（两个原生质体的融合称为二源融合，多于两个原生质体的融合称为多源融合）。 融合方法 高Ca2+—高pH法 PEG法 PEG/高Ca2+—高pH法 二源融合 4.2% 10.5% 17.8% 多源融合 1.1% 4.4% 5.6% 二源融合产生的细胞类型有_____种。据表判断_____法是油菜和紫罗兰原生质体融合的最佳方法，依据是_____。 （4）筛选出的杂种细胞形成愈伤组织后，再分化获得杂种植株。理论上，获得的杂种植株为_____倍体，其体细胞中的染色体数为_____条；该杂种植株在减数分裂时，_____（填“能”或“不能”）产生可育配子。 20. 长期使用单克隆抗体（单抗）易导致癌细胞产生耐药性。为解决此问题，双特异性抗体（双抗）应运而生，如CD38/CD3双抗，其可分别结合T细胞表面的CD3和骨髓瘤细胞表面的CD38，强制T细胞杀伤骨髓瘤细胞。CD38/CD3双抗的制备过程如图1所示。但双抗仅通过CD3激活T细胞，缺乏共刺激信号，导致T细胞易凋亡。为此，研究人员开发了三特异性抗体（三抗），如图2所示的CD38/CD3/CD28三抗。回答下列问题： （1）据图1分析，CD38/CD3双抗制备过程中，给小鼠注射CD38蛋白，是为了从小鼠的脾脏中分离得到_____；注射的抗原A是指_____。 （2）据图1分析，与植物细胞融合的诱导方法相比，过程②和④还可采用的诱导方法是_____。过程④筛选获得的细胞是_____，过程⑤筛选获得的细胞具有的特点是_____。 （3）研究人员为验证CD38/CD3/CD28三抗比CD38/CD3双抗具有更强的抗肿瘤活性，将骨髓瘤细胞与T细胞混合后均分为_____组，各组处理分别为______，培养一段时间后，统计并计算_____。 （4）据图2分析，CD38/CD3/CD28三抗的优势是______。 21. 柑橘黄龙病是全球柑橘产业最具毁灭性的病害，由亚洲韧皮杆菌引起。我国科学家利用黄龙病菌原噬菌体杀菌蛋白基因（简称L基因），通过基因工程成功培育出抗黄龙病柑橘新品种。图1为用于基因工程的pBIN质粒（一种Ti质粒）示意图，图2为L基因内部限制酶酶切位点分布图，相关限制酶识别序列与酶切位点如表所示。回答下列问题： 限制酶 识别序列与酶切位点 XhoI EcoRI XbaI KpnI SmaI （1）利用PCR技术扩增L基因时，除需加入模板DNA、引物、含Mg2+的缓冲液外，还需加入_____和_____。 （2）为将L基因正确插入pBIN质粒的启动子与终止子之间，切割pBIN质粒时应选用_____两种限制酶。利用PCR扩增L基因时，需在引物的______端添加限制酶识别序列。结合图中信息分析，扩增L基因的上游引物应添加限制酶______的识别序列，下游引物应添加限制酶______的识别序列。使用______连接切割后的pBIN质粒与L基因。 （3）用携带重组质粒的农杆菌侵染柑橘愈伤组织时，基因表达载体中的______片段可整合到柑橘细胞的染色体DNA上，从而将L基因导入柑橘细胞。pBIN质粒上含有______基因，可用于筛选成功导入目的基因的植物细胞。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $