四川省眉山市仁寿县铧强中学2025-2026学年高二下学期5月期中生物试题

**基本信息** 聚焦现代生物技术，融合《诗经》泡菜等跨学科情境与CRISPR基因编辑等科技前沿，通过基础判断与综合探究，考查生命观念、科学思维及探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|15题/45分|传统发酵技术、微生物培养、基因工程工具酶、细胞工程|跨学科情境（如《诗经》记载）；基础概念辨析（如灭菌与消毒）| |非选择题|5题/55分|发酵工程（谷氨酸生产）、基因工程（胰岛素制备）、细胞工程（单克隆抗体）|实验数据分析（如NAA对Res产量影响）；科技前沿应用（如智能工程菌治疗IBD）|

铧强中学2024级高二（下）第二次教学质量检测 生物试题 说明： 1.本试卷分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷，共6页。考生作答时，须将答案答在答题卡上，在本试卷、草稿纸上答题无效。考试结束后，将答题卡交回。 2.本试卷满分100分，75分钟完卷。 第Ⅰ卷（选择题共45分） 一、单项选择题（每题3分，共45分） 1．（跨学科）在《诗经·邶风·谷风》中有“我有旨蓄，亦以御冬”的记载。“旨蓄”是指储藏的美味食品，也就是腌制的酸菜、泡菜等。下列相关叙述错误的是（　　） A．将泡菜盐水煮沸有防止杂菌污染的作用 B．为了保证泡菜坛内的无氧环境，坛内盐水没过全部菜料，盖好坛盖，在坛盖边沿的水槽中注满水 C．整个发酵过程中亚硝酸盐的含量不断增加，故泡菜越早食用越好 D．发酵初期，产生的气泡与乳酸菌繁殖无关 2．下列关于家庭制作果酒、果醋的叙述，正确的是（　　） A．果酒、果醋制作中利用的两种菌种均为好氧型微生物 B．果酒制作过程中，不能对材料多次反复冲洗，以防止菌种流失 C．可先进行果酒发酵，后通入无菌空气并降低温度进行果醋发酵 D．当缺少糖源时，醋酸菌产生的酶可以直接将酒精转化为乙酸和CO₂ 3．微生物在生物技术中被广泛应用，下列有关说法正确的是（    ） A．有的微生物灭活后能使细胞膜上的物质重新排布 B．天然微生物能用于传统发酵但不能用于发酵工程 C．无菌技术主要包括消毒和灭菌，煮沸是常用的灭菌方法之一 D．微生物只能为重组DNA技术提供两种“分子工具” 4．中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，经分离、鉴定得到新的微生物菌株X，并进一步研究其生物学特性。菌株X在不同培养基上的生长情况如图所示。已知藻类细胞解体后的难降解多糖物质通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部并被菌株X分解。下列叙述错误的是（　　） A．菌株X的存在可加速深海生态系统的碳循环 B．培养基接入沉积物样品后，在高温条件下培养一段时间可获得含菌株X的培养物 C．图示的实验数据可通过对菌株X的纯培养物采用稀释涂布平板法获得 D．为快速大量繁殖菌株X，应以纤维素作为首选碳源制成液体培养基对其进行培养 5．为培育抗青枯病的马铃薯新品种R和A206，研究人员用抗青枯病野生种马铃薯（2N=24）与易感青枯病栽培种马铃薯（4N=48）进行了如图所示的操作。下列叙述错误的是（　　）    A．杂交品种R的体细胞中含有36条染色体 B．制备原生质体时，酶解液的渗透压应比细胞液的低 C．体细胞杂交中可用高Ca2+一高pH融合法诱导原生质体融合 D．新品种A206马铃薯植株可能比野生种马铃薯植株长得更为高大 6．发酵工程在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。下列关于发酵工程应用的叙述，错误的是（　　） A．与化学防治相比，利用微生物农药进行防治可显著减少环境污染 B．从培养的微生物细胞中分离出的单细胞蛋白可作为食品添加剂 C．啤酒发酵中酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成 D．发酵产品包括微生物细胞本身、代谢物，不同产品需要的提纯方法可能不同 7．研究人员将大熊猫皮肤成纤维细胞重编程为诱导多能干细胞（iPSCs），这些iPSCs在体外培养下能够分化成各种不同类型的细胞。下列叙述错误的是（　　） A．大熊猫体内已分化的T细胞也有可能被诱导为iPSCs B．用皮肤成纤维细胞重编程为iPSCs时可能需借助载体将特定基因导入皮肤成纤维细胞中 C．iPSCs体外分化的过程与细胞内基因表达的调控有关 D．利用自体iPSCs治疗疾病时，理论上需要注射免疫抑制剂来抑制免疫排斥反应 8．科研人员将取自某遗传性肝病患者的肝细胞通过体外培养、基因修复，获得了基因编辑肝细胞，并将其移植到该患者体内，以治疗遗传性肝病，过程如图所示（CRISPR/Cas9是一种新型的基因编辑工具，能对动物和植物的DNA进行特异性改变，该技术类似于一种特殊的分子剪刀）。下列叙述正确的是（　　） A．体外培养肝细胞时可用胃蛋白酶处理所取肝组织，将组织分散成单细胞 B．图中原代肝细胞培养过程中会出现细胞贴壁现象，但不会出现接触抑制现象 C．需将原代肝细胞置于含有95%氧气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中培养 D．CRISPR/Cas9基因编辑工具可能是将致病基因剪切掉以便替换为正常基因 9．如图是我国科学家利用胚胎干细胞建立体外胚胎和胚胎发育潜能研究的流程。人胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态（naive）和始发态（primed）。naive干细胞具有最高的发育潜能，primed干细胞全能性相对较低。下列叙述错误的是（　　） A．过程⑤形成的原肠胚表面的细胞向内迁移形成内胚层 B．猴子芽体相当于囊胚，过程③的起点细胞应取自芽体的滋养层细胞 C．过程⑥需对受体母猴进行同期发情处理，为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境 D．与神经干细胞相比，primed干细胞具有形成机体所有的组织和器官甚至个体的潜能 10．在畜牧生产中，利用动物细胞核移植技术可加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育。如图是利用动物细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列叙述正确的是（　　） A．过程①供体细胞必须是从甲牛卵巢采集的卵母细胞 B．进行过程②操作时必须穿透受体细胞透明带 C．图中过程②去除的是纺锤体——染色体复合物 D．后代丁牛的所有性状都不可能与丙牛相同 11．巴马香猪不仅肉质醇美，口感极佳，还可作为医用模型。科研工作者利用胚胎工程技术促进巴马香猪的快速繁育与应用，相关流程如图所示。下列叙述正确的是（　　）    A．图中涉及胚胎移植等技术 B．为提高胚胎的利用率可对早期胚胎进行分割，分割次数越多，利用率越高 C．得到的胚胎经过程②必须移植到生理状态相同的巴马香猪C（与巴马香猪A、B为同一品种）体内 D．对移植的胚胎进行性别鉴定时，需要取内细胞团细胞进行DNA分析 12．BamHⅠ、MboⅠ是基因工程中常用的两种限制酶，其识别位点分别如图1、图2所示。现用这两种限制酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点一定能切开），酶切产物分离结果如图3所示。已知①为BamHⅠ处理后分离结果，②为MboⅠ处理后分离结果。下列叙述错误的是（　　） A．BamHⅠ、MboⅠ识别的序列不完全相同 B．BamHⅠ、MboⅠ切割该DNA片段后形成的都是黏性末端 C．该DNA分子上有3个BamHⅠ的识别序列 D．该DNA分子上某2个BamHI识别序列的正中间可能还存在1个MboⅠ的识别序列 13．炎症性肠病（IBD）是一种易导致结肠癌的慢性疾病，患者肠道内会产生硫代硫酸盐，且生成量与疾病严重程度呈正相关。为简化疾病诊断和精确用药，科研人员开发了智能工程菌。科研人员将抗炎蛋白基因与硫代硫酸盐特异性诱导激活的启动子P连接，构建出如图所示的表达载体，将表达载体导入大肠杆菌细胞中，筛选得到菌株E。饲喂菌株E的IBD小鼠症状明显缓解。下列叙述错误的是（　　）    A．将目的基因导入动物受精卵最常用的方法是显微注射法 B．将图示的表达载体导入大肠杆菌细胞前，应先用Ca2+处理大肠杆菌 C．构建表达载体时可使用抗生素抗性基因作为选择标记，以筛选成功转化的细胞 D．选用启动子P的优点是仅在IBD发生时才表达抗炎蛋白且表达量与IBD程度呈负相关 14．农杆菌转化法广泛应用于植物基因工程中，研究人员利用农杆菌转化法将海岛棉中抗草铵膦除草剂基因Bar导入陆地棉中，经培养筛选获得抗草铵膦除草剂的转基因棉花。下列叙述错误的是（　　） A．农杆菌转化法主要用于双子叶植物和裸子植物 B．农杆菌转化法可将含Bar基因的重组Ti质粒整合到陆地棉细胞的染色体DNA上 C．检测Bar基因是否在陆地棉细胞中翻译常利用抗原—抗体杂交技术 D．培育转基因棉花还可利用我国科学家独创的花粉管通道法 15．某科研人员在研究某基因时，使用PCR技术扩增了一个500bp的DNA片段，并通过琼脂糖凝胶电泳进行鉴定。电泳结果显示，除了500bp的目标条带外，还有一些非特异性条带（由于引物与非目标序列的结合所产生）。下列关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，正确的是（　　） A．在电场作用下DNA分子会向着与其所带电荷相同的电极处移动 B．待指示剂前沿迁移到达凝胶加样孔边缘时需停止电泳，以防DNA跑出凝胶 C．增加模板DNA的用量、重新设计引物等措施都可减少PCR反应中的非特异性条带 D．在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换 第Ⅱ卷（非选择题共55分） 二．非选择题（共55分） 16．（除标注外，每空1分，共13分）谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取味精（主要成分为谷氨酸钠）。图1为谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径。谷氨酸发酵的培养基成分主要有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，发酵装置如图2所示。回答下列问题： (1)从物理性质看，谷氨酸发酵的培养基属于________培养基。从培养基的成分与发酵装置可看出，谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是_________。 (2)谷氨酸的发酵生产中，通常需要分次加入氨水（弱碱性），从氨水的作用角度分析，原因是______（2分）。 (3)若要监测发酵液中谷氨酸棒状杆菌的数目，可采用显微镜直接计数，使用该方法的计数过程是先将稀释100倍的发酵液加入计数板（由25中方格×16小方格=400个小方格组成，容纳液体总体积为0.1mm3）的计数室中，然后计数菌体数。若计数室中有36个菌体，则1mL的原发酵液中估计有谷氨酸棒状杆菌______个。此外还可以用________法监测发酵液中谷氨酸棒状杆菌的数目。通常情况下，前者计数结果比后者计数结果更______（填“大”或“小”），原因是___________（2分）。 (4)研究发现：发酵过程中当溶氧量不足时，谷氨酸棒状杆菌的代谢产物是乳酸或琥珀酸，所以谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要不断地通入无菌空气并不断搅拌。当培养基中碳、氮比为4：1时，菌体大量繁殖，而产生的谷氨酸量较少；当碳、氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。 ①发酵过程中搅拌的作用是________（2分）。 ②结合上述发现，写出一种利用一定起始数量的菌种通过发酵得到大量谷氨酸的发酵思路：________（2分）。 17.（除注明外，每空1分，共9分）为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。    回答下列问题： (1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是______________。 (2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：______________（2分）。 (3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于______________，使用该培养基进行细胞培养的结果是______________。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是______________。 (4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有______________（答出2点即可）（2分）。 (5)抗体—药物偶联物（ADC）通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。如下图所示，ADC依靠______________（填“a”或“b”）最终作用于细胞核，可导致癌细胞凋亡。    18.（除注明外，每空1分，共8分）白藜芦醇（Res）是存在于葡萄、花生、虎杖等多种植物中的一种含量很低的天然成分，具有抗衰、抗炎、抗癌和美白等多种功效，在保健品、医药和化妆品等领域具有广泛的应用前景。科研人员为了获得Res，选择花生植株M为材料，先用外植体获得愈伤组织，然后在生物反应器中悬浮培养。回答下列问题： (1)工厂化生产Res的过程中，常选择幼嫩的茎段作为外植体，原因是_______。为确保培养过程中不受污染，需要对所取材料进行严格的________处理，该处理中用到的试剂除无菌水、酒精外，还有________（写出1种）。 (2)培养至愈伤组织阶段经历了________生理过程，使已经分化的细胞经过该过程，即失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞。科研人员用少量纤维素酶和果胶酶处理培养材料获得了单细胞，再用不同浓度的NAA溶液进行悬浮培养。悬浮培养时细胞的生长速率及单位质量细胞中的Res产量如图所示。由图可知，培养液中NAA对Res合成起-______（填促进或抑制）作用。 注：生长速率=每天每升（（L—1⋅d—1）培养基中增加的细胞干重克数 (3)为了筛选出高产Res细胞，科研人员常采用诱变的方法处理愈伤组织。他们选愈伤组织作为处理材料的原因是___________。 (4)若该实验中所用的花生植株M是一种杂合体，要快速获得与植株M基因型和表型都相同的花生植株，利用植株M减数分裂得到的花粉粒作为外植体进行植物组织培养的方案是否可行并说明理由____（2分）。 19．（除注明外，每空1分，共13分）酿酒酵母是重要的发酵菌种，广泛应用于酿酒、食品加工及生物燃料生产等。FLO基因表达的FLO蛋白可提高发酵中乙醇的产量，且FLO蛋白量与乙醇产量呈正相关。研究人员将FLO基因与超表达启动子（能够显著提高基因的转录效率）连接以构建超表达载体（如图1所示），然后转入酿酒酵母细胞，以期获得高产乙醇的酿酒酵母品系。回答下列问题： (1)利用酒精可将酿酒酵母细胞中的DNA粗提取出来，其原理是_________。 (2)PCR技术扩增FLO基因的过程中，除需添加引物、含Mg2+的缓冲液外，还需要添加__________（写出3点）（2分），其中反应缓冲液中添加的Mg2+的作用是_____。已知FLO基因中碱基G+C的占比很大，则一般要求PCR过程中变性的温度会较高，原因是______；PCR过程中通过控制温度可使DNA复制在体外反复进行，其中将温度调设到50℃的目的是________。 (3)获得PCR产物后，用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行鉴定，影响DNA分子迁移速率的主要因素有_______（写出2点）（2分）。利用PCR技术扩增FLO基因时根据________来设计引物；一个FLO基因经PCR连续扩增3次，共需要________个引物。 (4)图1中所示FLO超表达载体中绿色荧光蛋白基因的作用是_________。 (5)已知一株酿酒酵母A（菌株A）含有1个FLO基因，研究人员对酿酒酵母菌株A进行基因工程改造以提高发酵中的乙醇产量，他们基于菌株A构建得到菌株B、C、D（如图2）。该实验中，构建菌株B的目的是______，预期菌株A、B、C、D发酵中乙醇产量的高低为________。 20、（每空2分，共12分）胰岛素是机体内唯一能降低血糖的激素，同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。外源性胰岛素主要用来治疗糖尿病。科研人员通过基因工程制备胰岛素的操作流程如下图所示，该流程中可能用到的限制酶及其识别序列和切割位点，如下表所示。请回答下列问题： 限制酶 KpnI EcoRI SmaI HindIII 识别序列和切割位点（5′→3′） GGTAC↓C G↓AATTC CCC↓GGG A↓AGCTT    (1)通过PCR获取胰岛素基因时应选择的引物是________。在设计该对引物时，需要在相应引物序列的5′端添加对应限制酶的识别序列，这对引物5′端添加的碱基序列对应的限制酶情况分别是________，用这些限制酶识别和切割胰岛素基因和质粒后，最好用________DNA连接酶连接。 (2)依据图中信息，图中培养基A中添加的抗生素是________，培养基B中添加的抗生素是________，菌落________（填图中数字）中的大肠杆菌能合成分泌胰岛素。 试卷第1页，共3页 试卷第9页，共10页 学科网（北京）股份有限公司 铧强中学2024级高二（上）第二次教学质量检测 生物试题答案 一．选择题（共45分，每题3分） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C B A B B B D D B C 题号 11 12 13 14 15 答案 A C D B D 二．非选择题（共55分） 16.（除标注外,每空1分,共13分） (1) 液体 异养需氧型 (2) 氨水既可以为谷氨酸棒状杆菌提供氮源，又能调节发酵液的pH（2分） (3) 3.6×107 稀释涂布平板 大 显微镜直接计数法把活菌和死菌都计算在内，而稀释涂布平板法只计数活菌，且可能存在多个菌体形成一个菌落的情况，导致计数偏小（2分） (4) 增加溶氧量，使菌种与营养物质充分接触（2分） 先将培养基中碳、氮比设置为4:1，让菌体大量繁殖；然后将培养基中碳、氮比改为3:1，，促进谷氨酸大量合成 (2分） 17.（除注明外，每空1分，共9分） (1) 诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞 (2) 取小鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液 （2分） (3) 选择培养基 只有杂交瘤细胞能够生存 抗原与抗体的反应具有特异性 (4) 将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养（2分） (5) b 18.（除注明外，每空1分，共8分） (1) 细胞分裂活跃 消毒 次氯酸钠 (2) 脱分化 抑制 (3)愈伤组织细胞未分化，分裂能力强，全能性高，易受诱变处理产生遗传变异，从而筛选出高产细胞 (4)不可行，因为花生植株M是杂合体，其减数分裂得到的花粉粒基因型与植株M不同，不能保证获得的植株与植株M基因型和表型完全相同（2分） 19.（除注明外，每空1分，共13分） (1) DNA不溶于酒精，但某些蛋白质等物质溶于酒精 (2) dNTP、DNA聚合酶和模板DNA（2分）‌ 激活耐高温的DNA聚合酶‌ GC碱基对之间有三个氢键，而AT碱基对之间只有两个氢键，因此打开GC碱基对需要更多的能量‌ 使引物结合到模板DNA链上‌ (3） 琼脂糖溶液的浓度、DNA分子的大小和构象（2分）‌‌ FLO基因两端的部分核苷酸序列‌‌ 14 (4)作为标记基因，以便筛选出含有重组载体的细胞 (5) 作为空白对照组，排除基因表达载体对乙醇产量的影响 菌株C＞菌株A=菌株B＞菌株D 20 （每空2分，共12分） (1) F引物和R引物（或F和R） F引物对应EcoRI或HindⅢ、R引物对应SmaI T4 (2) 四环素 新霉素 3和5 $