专题14 发酵工程（期末真题汇编，广东专用）高二生物下学期人教版

**基本信息** 聚焦发酵工程三大核心考点，以广东地域特色农产品（如荔枝果酒、客家娘酒、沙田柚醋）为情境载体，融合基础概念辨析与实验探究能力考查，适配高中生物学期末复习需求。 **题型特征** |题型|题量|知识覆盖|命题特色| |----|----|----------|----------| |单选题|36题|传统发酵技术（果酒/醋制作）、发酵工程应用（工程菌构建）、微生物培养（分离/计数）|结合地域产业案例（如东莞荔枝酿酒），考查操作原理与误差分析| |非选择题|9题|发酵流程设计（如荔枝果酒工艺）、微生物互作（如益生菌复合发酵）、实验方案评价（如抑菌效果检测）|突出探究实践，如通过蓝莓酒总酚含量数据判断保健价值，体现科学思维与数据分析能力|

专题14 发酵工程 3大高频考点概览 考点01 传统发酵技术 考点02 发酵工程及其应用 考点03 微生物的培养与应用 地 城 考点01 传统发酵技术 一、单选题 1．(24-25高二下·广东江门·期末)柿子具有较高的营养价值和药用价值。采用液体发酵法可酿制出醋香浓郁、酸味纯正的柿子醋，提高了柿子的经济价值。柿子醋的酿造工艺流程如图所示。下列关于柿子醋酿造过程的叙述，错误的是（    ） A．酒精发酵前可对柿子汁进行杀菌，以利于酒精发酵 B．酒精发酵和醋酸发酵的步骤都需在无氧条件下进行 C．若柿子酒的酒精度过高，应稀释后再用于醋酸发酵 D．使用人工培养的单一菌种可提升柿子醋质量的稳定性 【答案】B 【详解】A、酒精发酵前可对柿子汁进行消毒，避免混入杂菌，以利于酒精发酵，A正确； B、酒精发酵是利用的酵母菌的无氧呼吸，需要的是无氧条件，醋酸菌是需氧菌，醋酸发酵在有氧条件下进行，B错误； C、醋酸菌是好氧细菌，当氧气、糖源充足时可以将糖分解成醋酸，当缺少糖源时可以将乙醇转化为乙醛，再由乙醛转化为醋酸，因此若柿子酒的酒精度过高，应稀释后再用于醋酸发酵，避免高浓度的酒精使醋酸菌脱水死亡，C正确； D、使用人工培养的单一菌种，能避免自然菌种中杂菌的干扰（杂菌可能导致发酵异常、风味不稳定），从而提升柿子醋质量的稳定性，D正确。 故选B。 2．(24-25高二下·广东梅州·期末)沙田柚是梅州的特色农产品。某食品公司酿制柚子醋的酿造工艺流程如下：下列叙述错误的是（    ） A．榨汁的主要目的是增加原料与发酵微生物的接触面积，提高发酵效率 B．加入大米米浆的主要作用是为酵母菌提供充足糖源，增加酒精含量 C．酒精发酵过程中密封发酵罐有利于酵母菌大量繁殖 D．从酒精发酵到醋酸发酵，需要提高环境温度并通入充足的氧气 【答案】C 【分析】果酒发酵的主要菌种是酵母菌，醋酸发酵的主要菌种是醋酸菌，醋酸菌是需氧生物。 【详解】A、榨汁可以使原料与酵母菌充分接触，提高发酵效率，A正确； B、大米米浆中含有大量的糖类，可以为酵母菌提供充足的碳源，增加发酵产物酒精的含量，B正确； C、酵母菌繁殖需要在有氧条件下进行，C错误； D、醋酸菌适宜的温度高于酵母菌，且需要氧气，故从酒精发酵到醋酸发酵，需要提高环境温度并通入充足的氧气，D正确。 故选C。 3．(24-25高二下·广东广州八区·期末)生物学实验中合理选择材料和研究方法是顺利完成实验的前提条件。下列叙述正确的是（　　） A．稀释涂布平板法既可用于分离纯化菌株，又可用于菌种计数 B．向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水，有助于坛内无菌环境的形成 C．将配制好的酵母菌培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板 D．将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线，培养后可获得单菌落 【答案】A 【详解】A、稀释涂布平板法通过梯度稀释使菌液分散成单个细胞，培养后可形成单菌落，既能分离纯化菌株，又能通过统计菌落数计算活菌数，A正确； B、泡菜坛盖边沿的水槽注水是为了隔绝空气，创造无氧环境以利于乳酸菌发酵，但坛内并非无菌环境（如乳酸菌本身存在），B错误； C、培养基灭菌需用高压蒸汽灭菌法，煮沸无法彻底灭菌（如无法杀灭芽孢），直接倒平板会导致杂菌污染，C错误； D、接种环烧红后需冷却再蘸取菌液，否则高温会杀死酵母菌，无法形成单菌落，D错误。 故选A。 4．(24-25高二下·广东揭阳·期末)下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是（    ） A．“酿酒不成反成醋”可能是醋酸菌大量繁殖产生醋酸所致 B．发酵过程中为防止杂菌污染，器具、原料等均需严格灭菌 C．腐乳发酵以毛霉为单一菌种，以固体发酵及半固体发酵为主 D．制作泡菜时，加入陈泡菜水是为了接种醋酸菌 【答案】A 【分析】发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。 【详解】A、酿酒需要酵母菌的无氧呼吸，而醋酸菌在有氧条件下可将乙醇转化为醋酸。若酿酒过程中温度过高或氧气充足，可能导致醋酸菌繁殖产酸，故“酿酒不成反成醋”可能由醋酸菌引起，A正确； B、传统发酵通常依赖原料和环境中的天然菌种，器具和原料只需消毒，严格灭菌会杀死有益菌（如酵母菌），B错误； C、腐乳发酵以毛霉为主，但还有其他微生物（如曲霉、酵母菌）参与，且发酵过程为固体发酵，非半固体，C错误； D、陈泡菜水含大量乳酸菌（而非醋酸菌），用于加速乳酸发酵，D错误。 故选A。 5．(24-25高二下·广东湛江·期末)腐乳和臭豆腐是我国传统发酵食品，两者均通过微生物发酵制成。油炸臭豆腐制作时需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵。以下关于两者发酵过程的叙述，正确的是( ) A．腐乳制作中毛霉产生的蛋白酶可将蛋白质分解为氨基酸和甘油 B．臭豆腐发酵时卤汁中的酵母菌可进行有氧呼吸产生酒精和CO2 C．两种食品发酵时微生物的代谢活动均会导致发酵环境pH降低 D．腐乳和臭豆腐发酵所需的酶均由原核生物的核糖体合成 【答案】C 【分析】腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。 【详解】A、毛霉产生的蛋白酶将蛋白质分解为多肽和氨基酸，而甘油是脂肪酶分解脂肪的产物，A错误； B、酵母菌在无氧条件下进行无氧呼吸才会产生酒精和CO₂，B错误； C、腐乳制作中，毛霉分解脂肪产生脂肪酸（酸性），可能导致pH降低；而臭豆腐中乳酸菌产乳酸直接降低pH，因此两种发酵均可能使环境pH降低，C正确； D、腐乳的毛霉是真核生物，其酶由真核生物的核糖体合成，而臭豆腐的乳酸菌和芽孢杆菌是原核生物，D错误。 故选C。 6．(24-25高二下·广东潮州·期末)温度的变化往往会影响生物学实验的结果。相关叙述正确的是（    ） A．制作果醋时，将温度控制在18~30℃有利于醋酸菌的旺盛代谢 B．探究植物细胞的失水和吸水时，适当提高温度可加快植物细胞质壁分离和复原 C．DNA粗提取时，为去除杂质，洋葱研磨液过滤后，可常温静置几分钟后再取上清液 D．探究α-淀粉酶的最适温度时，将α-淀粉酶溶液与可溶性淀粉溶液混合后，进行恒温水浴能缩短反应时间 【答案】B 【分析】制作果醋的菌种是醋酸菌，最适生长温度为30~35℃。探究酶最适温度时，温度是自变量，控制单一变量，需将酶和底物分别预热至设定温度后再混合。 【详解】A、醋酸菌的最适生长温度为30~35℃，而18~30℃是酵母菌（用于果酒制作）的适宜温度。制作果醋需较高温度，A错误； B、温度升高会加快分子运动速率，促进细胞失水或吸水，从而加速质壁分离及复原现象，且适当提高温度不会破坏细胞活性，B正确； C、DNA粗提取时，常温静置可能使DNA酶活性增强，导致DNA分解。正确操作应低温（4℃）静置以沉淀DNA，C错误； D、探究酶最适温度时，需将酶和底物分别预热至设定温度后再混合，直接混合后水浴会导致反应未在预设温度下进行，影响结果准确性，D错误。 故选B。 7．(24-25高二下·广东佛山·期末)葡萄是一种具有独特风味的水果，有较高的营养价值。某同学选用新鲜的葡萄制作葡萄酒和葡萄醋，下列操作中合理的是（　　） A．将葡萄、发酵瓶等清洗干净后，用70%酒精消毒 B．将葡萄汁装入发酵瓶中时，应尽可能装满 C．在发酵过程中，每隔12h左右需要打开瓶盖一次 D．葡萄酒发酵后期通气并适当升高温度，可酿制葡萄醋 【答案】D 【详解】A、葡萄表面含有天然酵母菌，若用70%酒精消毒会杀死这些菌种，导致发酵失败；发酵瓶可用酒精消毒，但葡萄只需冲洗而非消毒，A错误； B、酒精发酵初期需营造无氧环境，但发酵瓶应留约1/3空间，避免产气时液体溢出，B错误； C、酒精发酵需严格无氧条件，频繁开盖会引入氧气抑制酵母菌无氧呼吸，且增加杂菌污染风险，C错误； D、葡萄酒发酵完成后，通入氧气（醋酸菌为需氧型）并将温度升至30~35℃（醋酸菌最适温度），可启动醋酸发酵，D正确。 故选D。 8．(24-25高二下·广东肇庆·期末)传统的食品保存方法多种多样，常见的有：①用盐腌制萝卜干；②将鲜奶制成酸奶；③将香菇晒干；④用保鲜膜包裹剩菜冷藏。下列有关食品保存的原理，错误的是（    ） A．①在高盐环境下，微生物细胞渗透失水，生长繁殖受到抑制 B．②乳酸菌发酵产酸抑制一些杂菌，同时促进蛋白质的消化 C．③通过减少水分以降低微生物代谢活性，延长保存时间 D．④保鲜膜隔绝氧气，彻底杀灭剩菜中的需氧微生物，防止剩菜腐败 【答案】D 【分析】食物腐败变质是由于微生物的生长和大量繁殖而引起的，根据食物腐败变质的原因，食品保存就要尽量的杀死或抑制微生物的生长和大量繁殖，传统的食品保存方法有盐腌、糖渍、干制、酒泡等，现代的贮存方法主要有罐藏、脱水、冷冻、真空包装、添加防腐剂、溶菌酶等。 【详解】A、高盐环境导致微生物细胞渗透失水（质壁分离），抑制其繁殖，A正确； B、乳酸菌发酵产酸抑制杂菌，同时分解部分蛋白质为小分子物质，促进消化，B正确； C、晒干香菇减少水分，降低微生物代谢活性，C正确； D、保鲜膜隔绝氧气仅抑制需氧菌活动，但无法“彻底杀灭”微生物（冷藏为抑制而非灭菌），D错误。 故选D。 9．(24-25高二下·广东云浮·期末)中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术。下列叙述错误的是（　　） A．在葡萄酒酿制的整个过程中需要先密封后通气 B．乳腐制作过程中，毛霉分泌的蛋白酶能分解蛋白质 C．泡菜制作过程中，乳酸菌将葡萄糖分解生成乳酸 D．家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵 【答案】A 【详解】A、酵母菌是兼性厌氧菌，葡萄酒酿制初期需要先通气让酵母菌大量繁殖，后期密封发酵产生酒精，A错误； B、毛霉分泌的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，B正确； C、泡菜制作过程中，乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解为乳酸，C正确； D、家庭制作果酒、果醋和腐乳依赖自然环境中的微生物（如葡萄皮上的酵母菌、空气中的醋酸菌、毛霉等），并非纯种发酵，D正确。 故选A。 10．(24-25高二下·广东韶关·期末)咸菜是潮汕饮食文化中极具代表性的传统食品之一。其制作方法是：将芥菜洗净后晒干，一层芥菜一层粗盐铺于陶瓷瓮中，再用干净石块压实，初腌两三天后菜叶便会渗出水分，继续加入盐水，密封容器口，发酵15天左右即可食用。下列叙述正确的是（　　） A．初腌加入大量粗盐是为了抑制杂菌的生长和促进植物细胞主动吸收盐分 B．密封容器口的目的是为乳酸菌创造无氧环境，从而产生乳酸和二氧化碳 C．利用干净石块压实既促进菜叶渗出水分又能保证菜叶完全浸没在盐水中 D．整个发酵过程乳酸和亚硝酸盐的含量都会呈现先增加后减少的变化趋势 【答案】C 【分析】泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。泡菜的制作流程是：选择原料、配制盐水、调味装坛、密封发酵。 【详解】A、初腌时加入大量粗盐通过高浓度盐溶液使芥菜细胞渗透失水（质壁分离），导致细胞死亡，此时细胞膜失去选择透过性，盐分被动扩散进入细胞，而非主动吸收；同时高盐环境抑制杂菌繁殖，A错误； B、乳酸菌进行无氧呼吸不会产生CO2，其产物是乳酸，B错误； C、石块压实可增大压力促进细胞破裂释放水分（细胞液渗出），同时使菜叶完全浸没于盐水中，隔绝空气以抑制好氧菌生长，确保乳酸菌主导发酵，C正确； D、乳酸含量随发酵时间持续增加并趋于稳定，D错误。 故选C。 11．(24-25高二下·广东汕尾·期末)某兴趣小组在葡萄酒制作完成后，打开发酵瓶的瓶盖，盖上一层纱布，进行葡萄醋的发酵，发酵温度为30~35℃，时间为7~8d。下列叙述正确的是（　　） A．在醋酸发酵的过程中酵母菌也会进行大量繁殖 B．醋酸发酵过程中乙醇为醋酸菌提供碳源和能源 C．打开瓶盖的目的只是为葡萄醋的发酵提供氧气 D．利用天然的菌种往往会使发酵食品的品质更好 【答案】B 【分析】果酒制备的菌种是酵母菌，发酵前期酵母菌先进性有氧呼吸，促进酵母菌的繁殖，后期进行无氧呼吸产生酒精。果酒制作的原理是酵母菌在无氧的条件下进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖原都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。 【详解】A、在进行醋酸发酵时，发酵的条件已经改变（温度升高），不适合酵母菌生长繁殖，所以这个时候酵母菌的活性是受抑制的，不会大量繁殖，A错误； B、该醋酸发酵是在酒精发酵基础上，所以乙醇为醋酸菌提供碳源和能源，B正确； C、打开瓶盖的目的一方面是为葡萄醋的发酵提供氧气，同时还为醋酸发酵提供空气中的醋酸菌，C错误； D、天然菌种往往会混有多种菌，所以发酵的产物多样，发酵食品的品质难以控制，D错误。 故选B。 二、实验题 12．(24-25高二下·广东东莞·期末)东莞作为“中国荔枝之乡”，拥有悠久的荔枝种植历史。某生物科技公司利用当地盛产的糯米糍荔枝，开发出具有岭南特色的荔枝果酒。以下为该公司荔枝果酒发酵生产的简化工艺流程。 荔枝鲜果→清洗去核→打浆榨汁→果汁调配（加蔗糖+果胶酶）→灭菌→接种酵母→主发酵→固液分离→后发酵→陈酿→过滤装瓶 请回答下列问题： (1)从呼吸作用类型看，酵母菌属于__________型微生物。 (2)相较于普通酿酒酵母，从东莞本地荔枝果皮中筛选的野生菌株具有__________的优势。果汁调配时添加蔗糖的主要目的是__________。 (3)大部分糖的分解和代谢产物的生成在__________（填流程环节）完成。生产中发现发酵液表面出现白色膜状物，排查发现装置有漏气现象，发酵液pH值下降，推测可能被__________（填“乳酸菌”或“醋酸菌”）污染。 (4)为提高荔枝果酒的产量和品质，可采取的措施有__________（答出2点即可）。 【答案】(1)兼性厌氧 (2) 更适应荔枝果汁的营养环境（或“产酒效率高”、“风味物质合成能力强”） 提供酵母菌发酵所需碳源，提高酒精产量（或提高酒精的浓度和甜度） (3) 主发酵 醋酸菌 (4)①定期检测发酵液的酒精度和pH，及时调整发酵条件；②对酵母菌进行诱变育种，筛选高产菌株；③控制陈酿时间和温度，促进风味物质形成 【分析】如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥,即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。 【详解】（1）从呼吸作用类型看，酵母菌属于兼性厌氧型微生物。 （2）相较于普通酿酒酵母，从东莞本地荔枝果皮中筛选的野生菌株具有更适应荔枝果汁的营养环境的优势。果汁调配时添加蔗糖的主要目的是提供酵母菌发酵所需碳源，提高酒精产量（或提高酒精的浓度和甜度）。 （3）大部分糖的分解和代谢产物的生成在主发酵完成。生产中发现发酵液表面出现白色膜状物，排查发现装置有漏气现象，发酵液pH值下降，可能被醋酸菌污染，因为酵母菌可以进行有氧呼吸产生CO2，发酵液pH值下降。而乳酸菌进行无氧呼吸且不会产生气体，不可能是乳酸菌污染。 （4）为提高荔枝果酒的产量和品质，可采取的措施有①定期检测发酵液的酒精度和pH，及时调整发酵条件；②对酵母菌进行诱变育种，筛选高产菌株；③控制陈酿时间和温度，促进风味物质形成。 三、解答题 13．(24-25高二下·广东佛山·期末)蓝莓酸甜可口，具有抗氧化等保健功能，被誉为“水果皇后”，深受人们的青睐。植物组织培养是蓝莓扩大繁殖的重要方法，具体操作流程如图a所示。 回答下列问题： (1)上述过程中的培养基按物理性质划分属于______培养基，蓝莓茎段培育成植株的过程体现了______的原理。 (2)蓝莓的组织培养过程中有两种器官发生途径：①直接器官发生，即外植体不经历愈伤组织便产生芽或根等器官：②间接器官发生，即需外植体先脱分化形成愈伤组织。推测两种器官发生途径主要与______有关，直接器官发生途径的优点是______（答出两点即可）。 (3)蓝莓可加工成蓝莓酒等产品，以提高蓝莓的附加值。研究人员检测了不同品种蓝莓酒中总酚的含量，及其对两种自由基DPPH、ABTS的清除率，结果如图b所示。 注：酚类物质是蓝莓生物活性的重要物质之一，具有消除人体内自由基作用。 ①结合图b的结果，选择_______品种的蓝莓进行酒精发酵，能够更有效提升蓝莓酒的保健价值，判断依据是________。 ②有人认为蓝莓酒具有抗衰老的保健功效，应该多喝。你认同这种观点吗?说明理由________。 【答案】(1) 固体 植物细胞具有全能性 (2) 添加的植物激素种类和含量（或是否光照） 避免形成愈伤组织容易发生遗传变异、缩短培养周期（或操作更简便） (3) 园蓝 相比于其他品种的蓝莓酒，园蓝发酵产生的蓝莓酒总酚含量明显更高，对自由基ABTS的清除能力更强，更有利于延缓人体衰老 不认同。酒精对人体有害，饮用应注意控制用量 【分析】题中有两组图，图 a 呈现蓝莓植物组织培养流程，从消毒处理的蓝莓茎段，经生芽、生根诱导培养基培养，到组培苗驯化移栽，展示了完整的组织培养过程；图 b 是不同品种蓝莓酒的检测结果，包含总酚含量及对 DPPH、ABTS 自由基的清除率数据，体现品种间抗氧化能力差异。植物组织培养基按物理性质分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。固体培养基因添加琼脂等凝固剂，能为培养物提供支撑，便于观察和分离，常用于植物组织培养的初代培养、生根培养等 ；液体培养基有利于营养物质的快速吸收和细胞的生长代谢，常用于大规模细胞悬浮培养、原生质体培养等，以获取细胞产物；半固体培养基性质介于前两者之间，在一些特定的植物组织培养实验中也有应用 。 【详解】（1）植物组织培养用的培养基是固体培养基（含琼脂 ），便于培养物附着生长。蓝莓茎段培育成植株，是由离体组织发育成完整植株，体现植物细胞全能性（已分化细胞有发育成完整个体的潜能 ）。 （2）植物组织培养中，器官发生途径由植物激素（如生长素、细胞分裂素 ）调控（激素种类和比例决定是生根还是生芽 ），也受光照等影响。直接器官发生（不形成愈伤组织 ），因跳过愈伤组织阶段，减少了细胞分裂中遗传变异概率，且流程短、操作简，能更快得到植株。 （3）选园蓝，图 b 显示，园蓝品种蓝莓酒总酚含量高，对 ABTS 自由基清除率高（酚类是抗氧化关键 ），酚类能抗自由基、延缓衰老，故园蓝酿的酒保健价值高。关于 “多喝”，虽蓝莓有抗氧化成分，但蓝莓酒含酒精，酒精伤肝、增加健康风险，所以不能因有保健成分就多喝，需控量，故不认同 “多喝” 观点。 14．(24-25高二下·广东佛山·期末)益生菌发酵乳制品不仅营养丰富，还含有对人体健康有益的益生菌。为评估唾液链球菌（ST）与动物双歧杆菌（BL）复合发酵对发酵乳品质的影响，研究人员采用这两种益生菌菌株对牛乳进行复合发酵，在发酵终点分别测定单菌发酵组和复合菌株发酵组的pH和活菌数，结果如图a和图b所示。 回答下列问题： (1)ST与BL_______（“有”或“无”）以核膜为界限的细胞核。牛乳作为培养基的主要成分，可以为这两种发酵菌提供_________等营养物质。为保证牛乳中的营养成分不被破坏，可以采用_______法除去该培养基的杂菌。 (2)活菌数变化和pH是评价发酵乳制品质量的关键指标。三组实验在发酵终点pH都降低的细胞学原理是_______。由图b可知，与单菌发酵相比，复合发酵时两种菌株的生长存在_______作用，结合图a分析这种作用的具体机制可能是_______。 (3)研究表明，发酵产品的pH在一段时间后仍会出现一定程度的下降，出现这种变化的原因是_________，这对于发酵乳的保存和食用的启示是________。 【答案】(1) 无 碳源、氮源、无机盐、水 巴氏消毒 (2) BL和ST无氧呼吸产生乳酸，导致pH下降 协同/相互促进/互补 ST能够快速产酸而迅速降低pH值，为BL创造适宜的生长环境，BL可能为ST提供生长因子或抑制有害菌 (3) 发酵产品中还存在有活性的乳酸菌继续进行发酵 酸奶应在低温下保存并在保质期内食用 【分析】1、原核细胞与真核细胞的主要区别是没有以核膜为界限的细胞核。由真核细胞构成的生物叫作真核生物，如植物、动物、真菌等。由原核细胞构成的生物叫作原核生物，如细菌(如蓝细菌，旧称蓝藻)、支原体、衣原体、立克次氏体等。 2、培养基的化学成分包括 水、无机盐、碳源、氮源 等。 【详解】（1）唾液链球菌（ST）为细菌，动物双歧杆菌（BL）也为细菌，二者均属于原核生物，无以核膜为界限的细胞核。牛乳富含碳源（如乳糖）、氮源（如酪蛋白）、水、无机盐和生长因子等，可为发酵菌提供必要的营养。为避免高温破坏牛乳中的营养成分，可采用巴氏消毒法（低温长时间或高温短时间处理）或过滤除菌法（物理去除杂菌）。 （2）三组实验在发酵终点pH都降低的细胞学原理是BL和ST无氧呼吸产生乳酸，导致pH下降。由图b可知，相较于单菌发酵组，复合发酵组内两种菌的数目均高于单菌发酵组，故复合发酵时两种菌株的生长存在协同（或相互促进或互补）作用，结合图a分析这种作用的具体机制可能是ST能够快速产酸而迅速降低pH值，为BL创造适宜的生长环境，BL可能为ST提供生长因子或抑制有害菌。 （3）发酵产品的pH在一段时间后仍会出现一定程度的下降，出现这种变化的原因是发酵产品中还存在有活性的乳酸菌继续进行发酵，这对于发酵乳的保存和食用的启示是酸奶应在低温下保存并在保质期内食用。 地 城 考点02 发酵工程及其应用 一、单选题 1．(24-25高二下·广东韶关·期末)木栓酮是药用植物雷公藤的次生代谢产物，具有抗肿瘤、消炎抗菌等多种功效。从雷公藤体内提取木栓酮的效率低。研究人员将雷公藤的木栓酮合酶基因引入酵母细胞中构建了酵母工程菌使木栓酮产量有所提升，但产量达不到工业生产要求且有副产物香树脂醇产生。为此研究人员通过分析木栓酮合酶的氨基酸序列并改造其关键氨基酸位点，以期提高木栓酮的产量，结果如下表所示。下列分析正确的是（　　） 改造的氨基酸位点 木栓酮（mg/L） 香树脂醇（mg/L） 野生型 21.1 12.7 11 18.5 18.9 259 0 28.3 280 27.8 11.7 548 14.2 17.6 552 24.8 22.3 A．木栓酮是雷公藤生长和生存所必需的物质 B．利用蛋白质工程和发酵工程构建酵母工程菌 C．改造280位点可以提高木栓酮合酶的催化活性 D．同时改造多个位点可进一步提高木栓酮合酶性质 【答案】C 【分析】次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。 【详解】A、木栓酮是次生代谢产物，不是雷公藤生长和生存所必需的物质，A错误； B、将雷公藤的木栓酮合酶基因引入酵母细胞中构建了酵母工程菌使木栓酮产量有所提升，分析木栓酮合酶的氨基酸序列并改造其关键氨基酸位点，以期提高木栓酮的产量，因此利用蛋白质工程构建酵母工程菌，没有用到发酵工程，B错误； C、与野生型相比，改造280位点木栓酮明显提高，因此可以提高木栓酮合酶的催化活性，C正确； D、结合表格可知，同时改造多个位点结果未知，不一定可提高木栓酮合酶性质，D错误。 故选C。 2．(24-25高二下·广东深圳龙华区·期末)聚羟基丁酸酯（PHB）是一种可降解塑料，可由木质素转化合成。某研究团队将关键代谢基因整合到微生物基因组中，并对工程菌进行驯化和筛选，实现了木质素向PHB的高效转化。下列叙述正确的是（　　） A．木质素为工程菌提供碳源，无需添加其他营养物质 B．对工程菌进行的驯化和筛选是通过选择培养基实现的 C．关键代谢基因整合到微生物基因组实现了诱变育种 D．获得PHB的工程菌需要利用提取、分离和纯化等技术 【答案】B 【详解】A、木质素主要提供碳源，但微生物生长还需氮源、无机盐等，仅木质素无法满足所有营养需求，A错误； B、驯化和筛选工程菌时，选择培养基能抑制其他微生物生长，从而筛选出目标菌株，B正确； C、关键代谢基因整合到微生物属于基因工程（转基因技术），而非诱变育种（由物理、化学等因素诱导基因突变），C错误； D、“获得PHB的工程菌”需通过基因工程构建和筛选，而提取、分离和纯化技术用于获取PHB产物本身，D错误。 故选B。 3．(23-24高二下·广东潮州·期末)下列关于传统发酵技术及发酵工程的说法，错误的是（    ） A．在菌种选育过程中，可以利用人工诱变或基因工程等手段 B．醋酸菌能以酵母菌的某种代谢产物为原料合成醋酸 C．发酵时，发酵条件变化会影响微生物生长，不影响微生物的代谢途径 D．发酵工程的产品可以采用过滤、沉淀、蒸馏、萃取等方法提取 【答案】C 【分析】酵母菌是一类单细胞真菌，能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的水果、蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28°C。 醋酸菌是好氧细菌，当O2、糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸；当缺少糖源时则直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸。醋酸菌可用于制作各种风味的醋。多数醋酸菌的最适生长温度为30~35°C。 【详解】A、在菌种选育过程中，性状优良的菌种可以从自然界中筛选出，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A正确； B、醋酸菌能将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸，B正确； C、在谷氨酸发酵过程中，pH呈中性或弱碱性时会积累谷氨酸，而pH呈酸性时易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，C错误； D、若发酵工程的产品是微生物细胞本身，可在发酵结束后采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，若产品是代谢物，可以根据产物的性质采取蒸馏、萃取、离子交换等方式提取、分离和纯化产品，D正确。 故选C。 4．(24-25高二下·广东梅州·期末)赤藓糖醇是一种低热量的甜味剂，广泛应用于无糖食品。工业上以木薯淀粉为原料，经解脂假丝酵母发酵生产赤藓糖醇。下图为解脂假丝酵母发酵生产赤藓糖醇的简要流程图。下列叙述错误的是（    ） A．从自然界分离菌种后，可以通过基因工程、诱变育种等方式获得高产解脂假丝酵母 B．将菌种由A培养基转接至B培养基的目的是为了增加解脂假丝酵母的数量 C．加α-淀粉酶的作用是使木薯淀粉水解，为菌种提供碳源 D．利用发酵工程生产赤藓糖醇的中心环节是产品的分离和提纯 【答案】D 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。 【详解】A、从自然界分离菌种后，可以通过基因工程、诱变育种（可以大幅度改良生物性状）等方式获得高产解脂假丝酵母，A正确； B、将菌种由A培养基转接至B培养基的目的是扩大培养，即从A培养基中获得目标菌种转移到B培养基中进行大量培养，B培养基的状态为液体，有利于目标菌种的大量繁殖，B正确； C、加α-淀粉酶的作用是使红薯中淀粉水解，变成单糖，进而可为菌种提供碳源和能源，C正确； D、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，D错误。 故选D。 5．(24-25高二下·广东佛山·期末)发酵工程广泛应用于食品工业、医药工业及其他工农业生产等方面。下列关于发酵工程的叙述正确的是（　　） A．可以采用过滤、沉沉等方法来获得微生物的代谢物 B．从微生物细胞中提取单细胞蛋白以制成微生物饲料 C．将相应菌种接种到发酵液中是发酵工程的中心环节 D．可利用诱变育种、基因工程等获得性状优良的菌种 【答案】D 【详解】A、过滤、沉淀等方法一般用于分离菌体，而获得微生物代谢物通常采用蒸馏、萃取、离子交换等方法，A错误； B、单细胞蛋白本身就是微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，B错误； C、发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，而不是将菌种接种到发酵液中，C错误； D、可利用诱变育种、基因工程等方法对菌种进行改良，获得性状优良的菌种，D正确。 故选D。 6．(24-25高二下·广东东莞·期末)次生代谢产物X是某植物细胞在微生物侵害等胁迫过程中产生的防御物质，可用于药物生产。其研发流程为：筛选高产细胞→确定细胞生长和产物X合成的关系（如图）→大量生产X。下列叙述错误的是（    ） A．应先培养大量细胞，后改变条件使细胞停止生长来大量生产X B．可将微生物菌体作为诱导因子加入培养基中，进而提高X产量 C．X的工厂化生产需要将高产植物的外植体培养成完整植株后提取 D．可以通过改造酵母菌等微生物的基因，利用发酵工程生产X 【答案】C 【详解】A、据实验结果可知，细胞停止生长后才开始大量合成X，为了大量获取X，应先培养大量细胞，后改变条件使细胞停止生长，A 正确； B、微生物侵害等胁迫可诱导植物细胞产生X ，将微生物菌体作为诱导因子加入培养基，可提高X 产量，B 正确； C、X 的工厂化生产利用植物细胞培养技术，不需要培养成完整植株，直接培养高产细胞即可提取，C 错误； D、可通过基因工程改造酵母菌等微生物，导入相关基因，利用发酵工程生产X ，D 正确。 故选C。 7．(23-24高二下·广东珠海·期末)随着生命科学的发展，生物工程技术已广泛应用于农业、医药卫生和环境保护等多个领域。下列有关生物工程技术在生产实践中应用的叙述正确的是（　　） A．利用植物细胞工程技术对茎尖进行培养，可获得抗病毒的新品种 B．利用发酵工程从微生物细胞中提取单细胞蛋白，生产微生物饲料 C．利用蛋白质工程能生产出自然界不存在的蛋白质，满足实际需求 D．利用胚胎移植能充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力，发展畜牧业 【答案】C 【分析】植物细胞工程的应用：植物繁殖新途径（微型繁殖、作物脱毒）、作物新品种培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产等。 【详解】A、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，利用植物细胞工程技术对茎尖进行培养，可获得脱毒的新品种，但不能抗病毒，A错误； B、单细胞蛋白指通过发酵工程获得的微生物菌体，不能从微生物细胞中提取，B错误； C、利用蛋白质工程能来改造现有蛋白或生产出自然界不存在的蛋白质，满足实际需求，C正确； D、利用胚胎移植能充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，发展畜牧业，D错误。 故选C。 8．(23-24高二下·广东湛江·期末)如图所示为果酒和果醋生产过程中的物质变化情况（其中C6H12O6代表葡萄糖），下列有关叙述错误的是（    ） A．果酒发酵初期酵母菌细胞内主要进行①②代谢过程 B．④⑤过程差异的主要原因是糖源是否充足 C．酵母菌和醋酸菌主要区别在于是否有成形的细胞核 D．利用发酵罐发酵是工业化生产果酒的中心环节，需严格控制温度、pH和溶解氧等条件 【答案】A 【分析】分析题图：过程①代表有氧呼吸（或无氧呼吸）第一阶段，过程③代表有氧呼吸第二阶段，过程②代表无氧呼吸第二阶段（即酒精发酵第二阶段），过程④代表由酒精生成醋酸的过程，过程⑤代表由葡萄糖直接生成醋酸的过程。 【详解】A、果酒发酵初期酵母菌细胞内主要进行有氧呼吸，而①②代谢过程表示无氧呼吸，A错误； B、在糖源充足时，醋酸菌直接将葡萄糖分解为醋酸；糖原缺乏时，醋酸菌将乙醇（即酒精）转变为乙醛，然后乙醛转变为醋酸，即④⑤过程差异的主要原因是糖源是否充足，B正确； C、酵母菌（真核生物）和醋酸菌（原核生物）主要区别在于是否有成形的细胞核，C正确； D、发酵是发酵工程的中心环节，为了获得合格的果酒，需要严格控制温度、pH和溶解氧等条件，D正确。 故选A。 9．(23-24高二下·广东珠海·期末)发酵工程可实现发酵产品的大规模生产，下图为发酵工程的基本环节，相关叙述正确的是（　　） A．①、②依次是诱变育种、基因工程育种 B．③是发酵工程的中心环节，需要严格控制发酵条件 C．④需要在菌种确定之前选择原料并反复实验 D．产物浓度的检测必须在发酵结束后进行 【答案】A 【分析】发酵工程的基本环节有选育菌种、扩大培养、配制培养基、灭菌、接种、发酵、产品的分离和纯化。①、②可以是诱变育种或基因工程育种，③是灭菌，④是配制培养基。 【详解】A、发酵工程所用的优良菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，因此①、②可以是诱变育种或基因工程育种，A正确； B、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，③是灭菌，不是发酵工程的中心环节，B错误； C、④是配制培养基，在菌种确定之后，要选择原料制备培养基，在生产实践中，培养基的配方要经过反复试验才能确定，C错误； D、在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，D错误。 故选A。 10．(23-24高二下·广东佛山·期末)客家娘酒是采用优质糯米，经蒸煮、发酵、炙酒而成的一种甜米酒，发酵过程中使用的酒曲含有根霉、酵母菌等微生物，其中根霉在生长时会产生大量的淀粉酶。下列关于酿酒过程的叙述，错误的是（    ） A．客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，可促进微生物的繁殖 B．炙酒是指用暗火烤炙密封的米酒，可以延长娘酒储存的时间 C．根霉将糯米中的淀粉转化为小分子糖类，为酵母菌生长提供碳源 D．随着酒曲中根霉比例的增大，酵母菌酒精发酵的速度也会加快 【答案】D 【分析】发酵的概念：人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。 【详解】A、用稻草为酿酒容器“保暖”，可提高温度，促进微生物的繁殖，A正确； B、炙酒是指用暗火烤炙密封的米酒，经火炙的娘酒更加醇厚香甜，营养价值也更高，而且可以延长娘酒储存的时间，B正确； C、根霉在生长时会产生大量的淀粉酶，将糯米中的淀粉转化为小分子糖类，为酵母菌生长提供碳源，C正确； D、随着酒曲中根霉比例的增大，淀粉水解的速度会加快，但酵母菌酒精发酵的速度不会加快，D错误。 故选D。 11．(23-24高二下·广东湛江·期末)基因工程应用广泛，成果丰硕。下列属于基因工程的是（    ） A．通过物理辐射培育能产生大量青霉素的青霉菌 B．利用体细胞杂交技术培育能同时结出多种水果的植物 C．利用能分解石油的细菌来构造能降解石油的“超级细菌” D．利用发酵技术培养大量能产生干扰素的工程菌 【答案】C 【分析】1、植物基因工程的应用：培育抗虫、抗病、抗逆的作物新品种，改良植物的品质，如抗虫棉、抗病毒烟草、抗盐碱和抗干旱的烟草、高赖氨酸玉米等。 2、动物基因工程的应用：培育快速生长的转基因动物，如转基因绵羊、转基因鲤鱼；改善畜产品品质的转基因动物 ，如乳汁中含乳糖较少的转基因牛；生产药物的转基因动物，如利用乳腺生物反应器生产药物；作器官移植供体的转基因动物，如无免疫排斥的转基因猪。 【详解】A、科学家通过诱变育种方式培育出高产青霉菌株，培养青霉菌并从中提取青霉素。该过程没有采用基因工程技术，不属于基因工程的应用，A不符合题意； B、利用体细胞杂交技术培育能同时结出多种水果的植物属于植物细胞工程，B不符合题意； C、野生型的假单胞杆菌只能分解石油中的一种烃类，科学家利用基因工程技术，制造出一种能分解石油中3种烃类的“超级细菌”，提高了石油的降解速率，这属于基因工程的应用，C符合题意； D、利用发酵技术培养大量能产生干扰素的工程菌属于发酵技术，D不符合题意。 故选C。 12．(23-24高二下·广东中山·期末)人类有意无意地利用微生物发酵制作果酒或其他食品，已有几千年历史。下列叙述正确的是（    ） A．传统发酵中，需要对原材料及发酵瓶进行灭菌，以防杂菌污染导致发酵失败 B．用于乳制品制作的微生物具有核膜包被的细胞核，用于果酒发酵的微生物则不具有 C．发酵用的不同微生物的最适生长温度不同，酿酒酵母的最适生长温度约为28℃ D．进行果酒发酵时，每隔12h左右需将瓶盖打开一次，进行果醋发酵时，瓶盖始终处于打开状态 【答案】C 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。 【详解】A、传统发酵中，原材料不能进行灭菌，因为菌种是来自原料表面，A错误； B、用于乳制品制作的微生物是乳酸菌，乳酸菌是原核生物，不具有核膜包被的细胞核，B错误； C、温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28 ℃，C正确； D、进行果酒发酵时，每隔12小时左右将瓶盖拧松一次（不是打开瓶盖），此后再拧紧，这样做的目的是放掉发酵产生的大量CO2，防止爆瓶，D错误。 故选C。 13．(23-24高二下·广东佛山·期末)连续发酵是指以一定的流速向发酵罐中连续添加培养基，同时以相同的流速排出发酵液的发酵方法。某研究团队通过实验探究不同发酵方法对大肠杆菌分泌L-酪氨酸的影响，结果如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．培养基加入发酵罐之前常用湿热灭菌法进行无菌处理 B．发酵过程中需要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件 C．发酵后采用离心法分离菌体，通过破碎细胞获取L-酪氨酸 D．连续发酵可提高菌体活力，延长产L-酪氨酸的周期 【答案】C 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。 【详解】A、在微生物发酵过程中，为了防止杂菌的污染，需要对培养基进行严格的灭菌处理。 湿热灭菌法是一种常用的灭菌方法，它利用高温高压的蒸汽来杀死微生物，从而达到灭菌的目的，A正确； B、发酵过程是一个复杂的生物化学过程，它受到多种环境因素的影响。其中，温度、pH和溶解氧是三个至关重要的发酵条件。 温度会影响酶的活性，进而影响微生物的生长和代谢；pH会影响微生物细胞膜的通透性和酶的活性；溶解氧则会影响好氧微生物的呼吸作用。因此，在发酵过程中需要严格控制这些条 件，以保证发酵的顺利进行，B正确； C、虽然离心法可以用于分离菌体，但L-酪氨酸并不是直接通过破碎细胞获取的。L-酪氨酸是大肠杆菌在发酵过程中分泌到细胞外的产物，因此应该通过收集发酵液并经过适当的处理(如过滤、离心等)来分离和纯化L-酪氨 酸，C错误； D、连续发酵是一种高效的发酵方法，它可以保持发酵罐中微生物的恒定浓度和活力， 从而延长产物的生产周期。在连续发酵过程中，不断向发酵罐中添加新鲜的培养基并排出含有产物的发酵液，这样可以为微生物提供充足的营养和生长空间，同时避免产物对微生物的抑制作用，D正确。 故选C。 阅读下列材料，完成下面小题。 小曲白酒的酒香纯正，以大米、大麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。 14．(23-24高二下·广东江门·期末)关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的是（　　） A．摊晾可防止温度过高杀死小曲中的微生物 B．撒曲糖化可将原料中的淀粉水解为葡萄糖 C．原料加入小曲后应立即装坛密封进行发酵 D．发酵坛密封不严，可能令酿出的酒有酸味 15．(23-24高二下·广东江门·期末)为了提高白酒的品质和产量，下列叙述错误的是（　　） A．可通过调整小曲和原料的合理配比来提高品质 B．可采用诱变育种和基因工程育种对菌种进行改良 C．发酵过程中，需要及时调控发酵温度和通气状况 D．发酵结束后，对菌体进行破碎处理可增加白酒产量 【答案】14．C 15．D 【分析】白酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 15．A、蒸粮后摊凉再撒曲糖化是为了防止温度过高杀死小曲中的微生物，A正确； B、淀粉的基本单位是葡萄糖，撒曲糖化可将原料中的淀粉水解为葡萄糖，B正确； C、原料加入小曲后应进行一段时间的需氧呼吸，有利于酵母菌的增殖，然后密封进行发酵，C错误； D、发酵坛密封不严，发酵产生的酒精在有氧条件下被转化为醋酸等酸性物质，D正确。 故选C。 16．A、发酵产生的白酒的品质受原料、菌种、环境因素的影响，因此可通过调整小曲和原料的合理配比来提高品质，A正确； B、诱变育种和基因工程育种都可以对菌种进行改良，进而提高白酒的产量和品质，B正确； C、温度影响酶活性进而影响酒精发酵，通气状况影响微生物的细胞呼吸方式影响酒精发酵，因此发酵过程中，需要及时调控发酵温度和通气状况，C正确； D、酵母菌细胞呼吸产生的酒精会直接释放到所处的发酵液中，不需要对菌体进行破碎处理，D错误。 故选D。 地 城 考点03 微生物的培养与应用 一、单选题 1．(24-25高二下·广东韶关·期末)我国卫生部门规定1mL自来水检出的菌落总数不得超过100个（37℃培养48h）。研究人员拟对自来水中的大肠杆菌进行检测与培养，培养基配方如下表所示。下列叙述正确的是（　　） 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂 含量（g） 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL A．须将待测水样进行梯度稀释后再涂布于平板上 B．检测时不需要设一个不接种的平板作为对照 C．指示剂的作用是与培养基上各种菌落发生显色反应 D．在配制上述培养基时，需要先调pH再灭菌 【答案】D 【分析】选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基；鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物的培养基。 【详解】A、可将待测水样进行稀释后再涂布于平板上进行计数，也可以直接使用显微镜借助于细菌计数板进行计数，A错误； B、检测时需要设一个不接种的平板作为对照，以排除杂菌污染，B错误； C、指示剂的作用是与培养基上大肠杆菌菌落发生显色反应，该培养基属于鉴别培养基，而不是与各种菌落发生反应，C错误； D、制备培养基时应先调pH、定容等后再灭菌，灭菌后定容容易导致培养基污染，D正确。 故选D。 2．(24-25高二下·广东深圳龙华区·期末)研究发现，与正常菌群（SPF）孕鼠血清相比，抗生素处理（ABX）的孕鼠血清缺少5种肠道菌群代谢产物。为了进一步研究孕鼠5种肠道菌群代谢产物对胎儿神经发育的影响，设计相关实验，结果如下图所示。下列分析错误的是（　　） A．该实验的自变量是母体肠道菌群的种类 B．补充这些代谢物有利于恢复胚胎丘脑皮质轴突发育 C．分离关键肠道微生物时可采用平板划线法 D．抗生素处理对孕鼠的胎儿的神经系统发育是有影响的 【答案】A 【详解】A、实验自变量是补充的代谢物种类，而非母体肠道菌群种类，A错误； B、补充代谢物后胚胎丘脑皮质轴突发育改善，B正确； C、平板划线法可用于分离微生物，C正确； D、根据数据分析可知，抗生素处理以后丘脑皮质轴突突发升值下降，说明抗生素会胚胎影响胎儿神经发育，D正确。 故选A。 3．(24-25高二下·广东云浮·期末)养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物能使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物，实验小组进行了分离目的菌株的实验，流程如图所示。下列实验操作错误的是（　　）    A．过程①将样本进行稀释，接种到培养基后进行培养 B．过程②筛选的菌落能在a培养基上生长，不能在b培养基上生长 C．过程③可添加脲酶并检测其活性，结果菌株甲组有NH3产生 D．向粪便中添加菌株甲比添加菌株乙更有利于减少NH3的产生 【答案】D 【详解】A、过程①将样本进行稀释，接种到培养基后进行培养，即利用稀释涂布平板法分离目的菌株，A正确； B、由图可知，②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B正确； C、所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙菌株，结果菌株甲不产生脲酶，添加脲酶后，脲酶催化尿素产 NH3，C正确； D、由图可知，甲不产生脲酶，而乙分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株使甲能够产生NH3，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。 故选D。 4．(24-25高二下·广东江门·期末)科研人员在平板上接种某种革兰氏阳性菌（G+），然后探究PPC（培养过P菌的培养液）对G+生长的影响，实验结果见下图。下列分析错误的是（    ） 注：Hot-PPC（100℃处理15min后再加入）、NaOH-PPC（加NaOH调节pH值至中性）、PBA能抑制G+生长。 A．PPC能抑制G+生长 B．PPC的热稳定性比较弱 C．P菌酸性物质能抑制G+生长 D．PPC和PBA的作用效果相近 【答案】B 【详解】A、观察图中“PPC”组有明显抑菌圈，说明PPC能抑制G+生长，A正确； B、“Hot - PPC”是经100℃处理15min后的PPC。对比“PPC”组和“Hot - PPC”组的抑菌圈相似。这说明加热后PPC的抑制能力不变，即PPC热稳定性高，B错误； C、NaOH-PPC组没有抑菌圈，该组在PPC中加入了NaOH后调节到了中性，说明PPC呈酸性；而PPC组存在抑菌圈，表明P菌酸性物质能抑制G+生长，C正确； D、观察图中“PPC”和“PBA”组的抑菌圈大小：二者抑菌圈范围相近，说明抑制G+生长的效果相近，D正确。 故选B。 5．(24-25高二下·广东佛山·期末)刚果红是一种染料，它可与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。图为土壤中几种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈，其中a、b、c、d表示四种菌落。下列叙述错误的是（　　） A．取样时用到的纸袋、铁铲和采集的土壤等都需进行灭菌处理 B．纤维素分解菌产生的纤维素酶可以分泌到细胞外发挥作用 C．图中的接种方法为稀释涂布平板法，一个菌落一般来源于一个活菌 D．纤维素分解能力与透明圈和菌落的直径比值正相关，因此d最高效 【答案】A 【详解】A、采集土壤时，用于取样的纸袋、铁铲需灭菌处理， 但采集的土壤不能灭菌，否则会杀死土壤中的纤维素分解菌，A错误； B、纤维素分解菌产生的纤维素酶是胞外酶，可分泌到细胞外发挥作用，分解环境中的纤维素，B正确； C、图中菌落分布均匀，接种方法为稀释涂布平板法，在稀释度足够高时，一个菌落一般来源于一个活菌，C正确； D、透明圈的大小反映了纤维素分解菌产生纤维素酶的能力和相对数量，透明圈越大，说明纤维素分解菌产生纤维素酶的能力越强，因此菌落d中的菌株分解纤维素能力最强，其能力大小可用单菌落周围透明圈直径和单菌落直径的比值表示，D正确。 故选A。 6．(24-25高二下·广东茂名·期末)为测定某植物提取液对大肠杆菌的MIC值，即肉眼看不见菌落生长的最低抑菌浓度，下列相关实验操作错误的是（　　） A．配制一系列浓度梯度的某植物提取液 B．向灭菌后的液体培养基中加入配制好的植物提取液 C．采用涂布法将等量大肠杆菌菌液接种于含提取液的培养基表面 D．培养时间过长导致MIC值偏高的原因是细菌耐药性出现假阳性 【答案】B 【详解】A、配制一系列浓度梯度的某植物提取液是测定MIC的必要条件，用于确定抑制细菌生长的最低浓度，A正确； B、应先将植物提取液加入培养基中，然后再灭菌，若先灭菌后加入植物提取液，可能会引入杂菌污染，B错误； C、采用涂布法将等量大肠杆菌菌液接种于含提取液的培养基表面，这样可以保证接种的菌量一致，使实验结果更准确，C正确； D、培养时间过长可能会导致细菌出现耐药性，从而使原本应该被抑制的细菌生长，导致MIC值偏高，出现假阳性结果，D正确。 故选B。 7．(24-25高二下·广东清远·期末)某兴趣小组拟测定校园土壤尿素分解菌的数量。下列叙述错误的是（　　） A．需要配制以尿素作为唯一氮源的培养基 B．土壤样品进行梯度稀释后需要充分灭菌 C．同一稀释度的菌液至少要涂布3个平板 D．取菌落数目稳定时的记录作为实验结果 【答案】B 【分析】选择培养基是微生物学中用于筛选特定微生物的一类培养基，其核心原理是通过添加特定物质（如抗生素、抑制剂、特殊碳源或氮源等），抑制或阻止大多数不需要的微生物生长，同时允许目标微生物正常繁殖，从而实现对目标微生物的选择性分离和纯化。 【详解】A、尿素分解菌的分离需使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，其他微生物因无法分解尿素而无法生长，A正确； B、梯度稀释的目的是降低土壤菌液的浓度，若稀释后灭菌会将所有微生物（包括目标菌）杀死，导致后续无法培养出菌落，B错误； C、同一稀释度涂布3个平板可减少偶然误差，提高实验结果的可靠性，C正确； D、菌落数目稳定时记录结果，可避免未形成菌落或菌落重叠导致的计数偏差，D正确。 故选B。 8．(24-25高二下·广东东莞·期末)金黄色葡萄球菌高度耐盐，可引起肺炎等疾病。在血平板（添加适量血液的培养基）上生长时，该菌可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。检测鲜牛奶是否被该菌污染的操作流程如下。相关叙述错误的是（    ）    A．接种环接种前需高压蒸汽灭菌，使用后灼烧灭菌 B．图中将样品接种到血平板上的方法是平板划线法 C．用7.5% NaCl肉汤培养基的主要目的是筛选金黄色葡萄球菌 D．若血平板有褪色现象，说明鲜牛奶被金黄色葡萄球菌污染 【答案】A 【详解】A、接种环接种前用灼烧灭菌而非高压蒸汽灭菌，A 错误； B、图中用接种环在血平板划线，是平板划线法，B 正确； C、金黄色葡萄球菌耐盐，7.5% NaCl肉汤培养基可筛选出该菌，C 正确； D、金黄色葡萄球菌能使血平板红细胞褪色，若有褪色现象，说明被该菌污染，D 正确。 故选A。 9．(24-25高二下·广东肇庆·期末)某校三名高中生食用某品牌冰激凌后出现腹泻，怀疑冰激凌中大肠杆菌超标，他们用伊红—亚甲蓝琼脂培养基检测（大肠杆菌菌落呈深紫色带金属光泽）。下列操作或结论错误的是（    ） A．取样时选择该品牌多支冰激凌进行检测，避免单一样品偶然性 B．统计菌落数目时无须设置空白对照组，但需设置重复组取平均值 C．培养基上除深紫色菌落外还有其他颜色的菌落，说明可能存在其他菌类 D．若检测到大肠杆菌菌落数超标，应立即禁止销售该商品并报告监管部门 【答案】B 【分析】选择培养基是根据特定目的，通过添加或调整成分，抑制不需要的微生物生长、促进目标微生物繁殖的培养基，在微生物筛选、分离等实验中常用。 【详解】A、取样时选择多支冰激凌检测，可减少单一样本的偶然误差，符合实验的重复性原则，A正确； B、统计菌落数目时需设置空白对照组（未接种的培养基），以确认培养基灭菌是否彻底，避免污染干扰实验结果，B错误； C、伊红—亚甲蓝琼脂培养基（EMB培养基）为选择培养基，检测时若有大肠杆菌，其菌落呈深紫色带金属光泽，若除深紫色菌落外还有其他颜色的菌落，说明可能存在其他菌类，C正确； D、若检测到大肠杆菌超标，根据食品安全规范应立即采取禁止销售并报告的措施，D正确。 故选B。 10．(24-25高二下·广东茂名·期末)白酒在酿造过程中，大曲中的微生物起到了至关重要的作用，它们负责将原料中的糖类转化为酒精，以及生成各种香气物质。下图为科研人员调查的不同浓香型酿酒大曲中的主要细菌（左）和真菌（右）及其相对丰度，下列叙述正确的是（　　） A．图中a、b、c表示不同类型的大曲，白酒的差异可能与大曲中微生物的种类和数量相关 B．将大曲制成悬浮液后，采用平板划线法可以分离得出图中不同的微生物种类和相对丰度 C．图中相对丰度是指不同浓香型大曲中微生物的种类数 D．图示细菌属的相对丰度明显高于真菌属，由此可得出白酒的酒精发酵主要由细菌属完成 【答案】A 【详解】A、a、b、c代表不同的大曲，其中的微生物种类和数量存在一定的差异，所以白酒的差异与大曲中微生物的种类和数量都相关，A正确； B、直接平板划线法只能分离出部分微生物种类，而且不能计数，所以最好选择稀释涂布平板法，B错误； C、图中的相对丰度是描述每种微生物类别的相对数量，不同于生物群落的物种丰富度，C错误； D、两图中纵坐标单位量不同，且酒精发酵主要依赖酵母菌的无氧呼吸，D错误。 故选A。 11．(24-25高二下·广东湛江·期末)为研究淡水鱼体表致病菌的抑菌方法，研究者从某鲫鱼体表黏液中分离出嗜水气单胞菌（一种细菌），并采用平板划线法接种于固体培养基。下列叙述正确的是（    ） A．黏液样液需经高压蒸汽灭菌后再进行接种 B．该固体培养基的 pH 一般要调至酸性 C．每次划线前后均需对接种环进行灼烧灭菌 D．完成平板划线后，直接将平板倒置培养 【答案】C 【分析】黏液样液若经高压蒸汽灭菌会杀死所有微生物，包括目标菌嗜水气单胞菌，导致无法分离目标菌 【详解】A、黏液样液若经高压蒸汽灭菌会杀死所有微生物，包括目标菌嗜水气单胞菌，导致无法分离目标菌，A错误； B、细菌通常在中性或弱碱性环境中生长（如培养基pH为7.2-7.4），酸性环境更适合真菌（如霉菌），B错误； C、平板划线法中，每次划线前灼烧接种环是为了杀死残留菌种，避免污染；划线后灼烧是为了防止菌种扩散污染环境，C正确； D、平板划线后需先静置一段时间（待菌液稍干燥），再倒置培养，以防止冷凝水滴落影响菌落形成，D错误。 故选C。 二、解答题 12．(24-25高二下·广东广州八区·期末)为保障公共健康，需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如图所示。 回答下列问题： (1)检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行______灭菌。在伊红-亚甲蓝琼脂培养基上培养时，大肠杆菌会产生呈现深紫色且具有金属光泽的菌落，此培养基对大肠杆菌起到______作用。 (2)本检测______（填“可以”或“不可以”）用血细胞计数板直接计数替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量，原因是______。 (3)从设计实验的角度看，本检测需要设置两组对照组：一组用无菌水涂布在伊红-亚甲蓝琼脂培养基中并培养，目的是______；另一组的操作是______，目的是检测该培养基能否培养出大肠杆菌。 【答案】(1) 干热 鉴定 (2) 不可以 大肠杆菌较小 (3) 了解培养基是否被污染 在伊红-亚甲蓝琼脂培养基上涂布大肠杆菌菌液并培养 【分析】细菌的数目可以通过滤膜法来测定。将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，根据黑色菌落的数目，计算水样中大肠杆菌的数量。 【详解】（1）为了避免杂菌污染，检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行干热灭菌处理。在伊红-亚甲蓝琼脂培养基上培养时，大肠杆菌会呈现出特定的颜色，可以对大肠杆菌进行鉴别或鉴定。 （2）大肠杆菌较小，属于原核生物，不适宜用血细胞计数板直接计数。 （3）无菌水涂布组是空白对照组，可以用来判断培养基是否被污染；要检测该培养基能否培养出大肠杆菌，可以在伊红-亚甲蓝琼脂培养基上涂布大肠杆菌菌液并培养，观察是否长出大肠杆菌菌落。 13．(24-25高二下·广东江门·期末)牛奶富含多种氨基酸和矿物质，多饮用牛奶有利于增强体质，但牛奶消毒不严格也容易携带细菌。根据国家标准规定，每毫升合格的牛奶细菌总数不能超过50000个。某兴趣小组利用恒温水浴锅对生牛奶进行消毒，然后检测消毒的效果。回答下列问题：    (1)步骤①对生牛奶消毒的方法被称为______，牛肉膏蛋白胨培养基一般采用的灭菌方法是______。从效果方面进行分析，生牛奶消毒的方法的优点是______。 (2)步骤②是将牛奶进行梯度稀释，这样做的目的是______。步骤③的接种方法是______，该方法可以用来统计样品中活菌的数目，其原理是______。 (3)兴趣小组的同学通过步骤①-③接种了3个平板，将这3个平板和1个未接种的平板放入恒温培养箱，在适宜的温度条件下培养48h，然后统计出4个平板上的菌落数分别是57、53、55和9。根据这样的实验结果，能否判断该兴趣小组消毒后的牛奶细菌超标？为什么？______ 【答案】(1) 巴氏消毒 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒有利于营养的保存而且容易做到，超高温消毒不仅仅将细菌、病毒杀死，就连有益的微生物也有可能杀死 (2) 使聚集在一起的微生物分散，便于能在培养基表面形成单个菌落 稀释涂布平板法 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中大约含有多少活菌 (3)不能；因为未接种的培养基上有菌落出现，说明培养基灭菌不彻底，则其它培养基上的菌落数不能表示牛奶中细菌数量 【分析】消毒 指使用较为温和的物理或化学方法，杀死物体表面或环境中所有病原微生物（不包括芽孢和孢子），达到防止传染病传播的目的。灭菌指使用强烈的理化因素，彻底杀灭物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子（微生物的休眠体，抵抗力极强）。接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。 【详解】（1）由题目中利用恒温水浴锅对生牛奶消毒及常见消毒方法可知，步骤①对生牛奶消毒的方法是巴氏消毒。 在微生物培养中，牛肉膏蛋白胨培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。 巴氏消毒法是在较低温度下进行消毒，这样有利于营养的保存，并且相对容易操作。而超高温消毒虽然能杀灭细菌、病毒，但可能会杀死有益微生物。 （2）步骤②将牛奶进行梯度稀释，目的是使聚集在一起的微生物分散开。因为如果微生物聚集，在接种后就难以在培养基表面形成单个菌落，不利于后续的计数等操作。步骤③的接种方法是稀释涂布平板法。 该方法可以统计样品中活菌数目的原理是，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 （3） 不能判断该兴趣小组消毒后的牛奶细菌超标。因为未接种的培养基上出现了菌落，这说明培养基灭菌不彻底。在培养基灭菌不彻底的情况下，其他接种了牛奶的培养基上的菌落数就不能准确代表牛奶中细菌的数量。 三、实验题 14．(24-25高二下·广东梅州·期末)樱桃采后常因感染各种病原菌而腐烂，比如因感染链格孢菌而引发黑腐病，运输过程中的机械损伤也会增加致腐率，给果农带来巨大的经济损失。为了解决这一问题，科研人员研究了枯草芽孢杆菌对链格孢菌的抑菌效果及作用机理。回答下列问题： (1)欲对腐烂的樱桃果进行各种病原菌的分离和鉴定，可将完全腐烂的樱桃组织置于无菌水中制成菌悬液，用______法接种到培养基上培养，再根据菌落的______（答出2点即可）等特征来初步区分不同种类的微生物，从中可挑选出链格孢菌的单菌落。 (2)链格孢菌从樱桃果中获得其生长繁殖所需的水、无机盐、______等基本营养物质。 (3)为探究枯草芽孢杆菌对链格孢菌的抑菌效果及作用机理，研究人员进行了樱桃采后果实实验，步骤如下： 选材与处理 选取新鲜、无机械损伤的樱桃果分成4组，表面消毒。 接种与处理 A组：___________ B组：在果实中部打孔、接种10μL链格孢菌悬液 C组：在果实中部打孔，喷5ml枯草芽孢杆菌悬液 D组：在果实中部打孔，先喷5ml枯草芽孢杆菌悬液，24h后接种10μL链格孢菌悬液 贮藏 果实置于20℃、相对湿度85%的人工气候箱中贮藏（模拟常温运输条件） 观察 观察病斑直径和致腐率 测定 测定樱桃果细胞中防御酶（POD和PAL）的活性    上表中对A组的处理是______。综合图1甲、乙结果，表明枯草芽孢杆菌对链格孢菌的抑制作用机理可能是______。 (4)基于以上研究，对樱桃采后黑腐病的防控提出一条预防措施：____________。 【答案】(1) 平板划线法/稀释涂布平板法 形状、大小和颜色 (2)碳源、氮源 (3) 在果实中部打孔，接种 10μL无菌水 枯草芽孢杆菌通过提升(楼桃果细胞中)防御酶(POD和PAL)的活性来抵抗链格孢菌的侵染 (4)配制枯草芽孢杆菌溶液浸果/运输过程尽量避免机械损伤/剔除病果、伤果，仅保留无机械损伤的果实等 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】（1）分离纯化微生物可以用平板划线法或稀释涂布平板法将微生物接种到培养基上培养，鉴定根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种类的微生物，从中可挑选出链格孢菌的单菌落。 （2）樱桃果作为链格孢菌的培养基，能为链格孢菌提供其生长繁殖所需的水、无机盐、碳源、氮源等基本营养物质。 （3）实验目的是探究枯草芽孢杆菌对链格孢菌的抑菌效果及作用机理，上表中A作为对照组，对A组的处理是在果实中部打孔，接种 10 μL无菌水。综合图1甲、乙结果，表明枯草芽孢杆菌对链格孢菌的抑制作用机理可能是枯草芽孢杆菌通过提升(楼桃果细胞中)防御酶(POD和PAL)的活性来抵抗链格孢菌的侵染。 （4）基于以上研究，对樱桃采后黑腐病的防控提出一条预防措施：配制枯草芽孢杆菌溶液浸果运输过程尽量避免机械损伤剔除病果、伤果，仅保留无机械损伤的果实等。 15．(24-25高二下·广东汕尾·期末)沙门氏菌是人类患肠炎的主要食源性病原菌之一。某研究小组对不同温度下鸡蛋清中沙门氏菌的生长规律进行研究，以了解不同温度下沙门氏菌在鸡蛋清中的生存能力。实验步骤如下： ①配制增殖培养基（成分：蛋白胨、鸡蛋清、NaCl、磷酸盐、H2O）； ②接种初始浓度（103CFU/mL）的沙门氏菌； ③将各组分别置于不同温度下培养48小时； ④每隔一定时间取样，接种到BGS培养基上，置于一定温度下培养24小时，统计菌落数； ⑤对实验数据进行处理，绘制曲线图。 回答下列问题： (1)增殖培养基中沙门氏菌所需的碳来源于______，步骤①和④中培养基的主要区别是④中BGS培养基一般要加入______。 (2)步骤④中大部分样品取样的时间间隔是______小时，一般用_______法接种到培养基上以后需要在______温度下培养24小时。 (3)根据以上实验结果和生活经验，你认为鸡蛋储存在哪种温度较好并说明理由（可供选择的温度：4℃、30℃、39℃和42℃）_____。 【答案】(1) 蛋白胨和鸡蛋清 琼脂 (2) 8/八 稀释涂布平板 37℃ (3)4℃，既可以保持鸡蛋品质，又能有效地发挥低温抑菌的效果（或42℃，42℃的杀菌效果是四组实验中最好的，只要答案合理即可） 【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。 【详解】（1）根据培养基成分，培养基中的蛋白胨和鸡蛋清既提供碳源也提供氮源；④中的培养基培养完以后需要对菌落进行统计，所以是固体培养基，需要加入琼脂。 （2）根据数据图，每8小时有一个数据点，所以是每8小时取样检测；需要用菌落进行计数，就需要用稀释涂布平板法进行接种；沙门氏菌感染人体时，人体的体温是37℃，所以是在37℃条件下培养24h。 （3）从实验数据实验组4℃接种初始浓度（103CFU/mL）的沙门氏菌培养48小时的过程中，菌液浓度仅略增长，没有明显增长；实验组20℃和37℃培养48小时的过程中，沙门氏菌菌液浓度大量增长；实验组42℃培养48小时的过程中，虽然有效抑制了沙门氏菌，但高温不利于鸡蛋的保藏，储存在42℃时鸡蛋品质会迅速下降。因此，综合考虑保鲜和抑菌两方面因素，在有效切断沙门氏菌污染源的基础上，鸡蛋应置于0～4℃储存，这样既可以保持鸡蛋品质，又能有效地发挥低温的抑菌效果，将人类患病的风险降到最低。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题14 发酵工程 3大高频考点概览 考点01 传统发酵技术 考点02 发酵工程及其应用 考点03 微生物的培养与应用 地 城 考点01 传统发酵技术 一、单选题 1．B 2．C 3．A 4．A 5．C 6．B 7．D 8．D 9．A 10．C 11．B 二、实验题 12．(1)兼性厌氧 (2) 更适应荔枝果汁的营养环境（或“产酒效率高”、“风味物质合成能力强”） 提供酵母菌发酵所需碳源，提高酒精产量（或提高酒精的浓度和甜度） (3) 主发酵 醋酸菌 (4)①定期检测发酵液的酒精度和pH，及时调整发酵条件；②对酵母菌进行诱变育种，筛选高产菌株；③控制陈酿时间和温度，促进风味物质形成 三、解答题 13．(1) 固体 植物细胞具有全能性 (2) 添加的植物激素种类和含量（或是否光照） 避免形成愈伤组织容易发生遗传变异、缩短培养周期（或操作更简便） (3) 园蓝 相比于其他品种的蓝莓酒，园蓝发酵产生的蓝莓酒总酚含量明显更高，对自由基ABTS的清除能力更强，更有利于延缓人体衰老 不认同。酒精对人体有害，饮用应注意控制用量 14．(1) 无 碳源、氮源、无机盐、水 巴氏消毒 (2) BL和ST无氧呼吸产生乳酸，导致pH下降 协同/相互促进/互补 ST能够快速产酸而迅速降低pH值，为BL创造适宜的生长环境，BL可能为ST提供生长因子或抑制有害菌 (3) 发酵产品中还存在有活性的乳酸菌继续进行发酵 酸奶应在低温下保存并在保质期内食用 地 城 考点02 发酵工程及其应用 一、单选题 1．C 2．B 3．C 4．D 5．(D 6．C 7．C 8．A 9．A 10．D 11．C 12．C 13．C 14．C 15．D 地 城 考点03 微生物的培养与应用 一、单选题 1．D 2．A 3．D 4．B 5．A 6．B 7．B 8．A 9．B 10．A 11．C 二、解答题 12．(1) 干热 鉴定 (2) 不可以 大肠杆菌较小 (3) 了解培养基是否被污染 在伊红-亚甲蓝琼脂培养基上涂布大肠杆菌菌液并培养 13．(1) 巴氏消毒 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒有利于营养的保存而且容易做到，超高温消毒不仅仅将细菌、病毒杀死，就连有益的微生物也有可能杀死 (2) 使聚集在一起的微生物分散，便于能在培养基表面形成单个菌落 稀释涂布平板法 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中大约含有多少活菌 (3)不能；因为未接种的培养基上有菌落出现，说明培养基灭菌不彻底，则其它培养基上的菌落数不能表示牛奶中细菌数量 三、实验题 14．(1) 平板划线法/稀释涂布平板法 形状、大小和颜色 (2)碳源、氮源 (3) 在果实中部打孔，接种 10μL无菌水 枯草芽孢杆菌通过提升(楼桃果细胞中)防御酶(POD和PAL)的活性来抵抗链格孢菌的侵染 (4)配制枯草芽孢杆菌溶液浸果/运输过程尽量避免机械损伤/剔除病果、伤果，仅保留无机械损伤的果实等 15．(1) 蛋白胨和鸡蛋清 琼脂 (2) 8/八 稀释涂布平板 37℃ (3)4℃，既可以保持鸡蛋品质，又能有效地发挥低温抑菌的效果（或42℃，42℃的杀菌效果是四组实验中最好的，只要答案合理即可） 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题14 发酵工程 3大高频考点概览 考点01 传统发酵技术 考点02 发酵工程及其应用 考点03 微生物的培养与应用 地 城 考点01 传统发酵技术 一、单选题 1．(24-25高二下·广东江门·期末)柿子具有较高的营养价值和药用价值。采用液体发酵法可酿制出醋香浓郁、酸味纯正的柿子醋，提高了柿子的经济价值。柿子醋的酿造工艺流程如图所示。下列关于柿子醋酿造过程的叙述，错误的是（    ） A．酒精发酵前可对柿子汁进行杀菌，以利于酒精发酵 B．酒精发酵和醋酸发酵的步骤都需在无氧条件下进行 C．若柿子酒的酒精度过高，应稀释后再用于醋酸发酵 D．使用人工培养的单一菌种可提升柿子醋质量的稳定性 2．(24-25高二下·广东梅州·期末)沙田柚是梅州的特色农产品。某食品公司酿制柚子醋的酿造工艺流程如下：下列叙述错误的是（    ） A．榨汁的主要目的是增加原料与发酵微生物的接触面积，提高发酵效率 B．加入大米米浆的主要作用是为酵母菌提供充足糖源，增加酒精含量 C．酒精发酵过程中密封发酵罐有利于酵母菌大量繁殖 D．从酒精发酵到醋酸发酵，需要提高环境温度并通入充足的氧气 3．(24-25高二下·广东广州八区·期末)生物学实验中合理选择材料和研究方法是顺利完成实验的前提条件。下列叙述正确的是（　　） A．稀释涂布平板法既可用于分离纯化菌株，又可用于菌种计数 B．向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水，有助于坛内无菌环境的形成 C．将配制好的酵母菌培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板 D．将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线，培养后可获得单菌落 4．(24-25高二下·广东揭阳·期末)下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是（    ） A．“酿酒不成反成醋”可能是醋酸菌大量繁殖产生醋酸所致 B．发酵过程中为防止杂菌污染，器具、原料等均需严格灭菌 C．腐乳发酵以毛霉为单一菌种，以固体发酵及半固体发酵为主 D．制作泡菜时，加入陈泡菜水是为了接种醋酸菌 5．(24-25高二下·广东湛江·期末)腐乳和臭豆腐是我国传统发酵食品，两者均通过微生物发酵制成。油炸臭豆腐制作时需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵。以下关于两者发酵过程的叙述，正确的是( ) A．腐乳制作中毛霉产生的蛋白酶可将蛋白质分解为氨基酸和甘油 B．臭豆腐发酵时卤汁中的酵母菌可进行有氧呼吸产生酒精和CO2 C．两种食品发酵时微生物的代谢活动均会导致发酵环境pH降低 D．腐乳和臭豆腐发酵所需的酶均由原核生物的核糖体合成 6．(24-25高二下·广东潮州·期末)温度的变化往往会影响生物学实验的结果。相关叙述正确的是（    ） A．制作果醋时，将温度控制在18~30℃有利于醋酸菌的旺盛代谢 B．探究植物细胞的失水和吸水时，适当提高温度可加快植物细胞质壁分离和复原 C．DNA粗提取时，为去除杂质，洋葱研磨液过滤后，可常温静置几分钟后再取上清液 D．探究α-淀粉酶的最适温度时，将α-淀粉酶溶液与可溶性淀粉溶液混合后，进行恒温水浴能缩短反应时间 7．(24-25高二下·广东佛山·期末)葡萄是一种具有独特风味的水果，有较高的营养价值。某同学选用新鲜的葡萄制作葡萄酒和葡萄醋，下列操作中合理的是（　　） A．将葡萄、发酵瓶等清洗干净后，用70%酒精消毒 B．将葡萄汁装入发酵瓶中时，应尽可能装满 C．在发酵过程中，每隔12h左右需要打开瓶盖一次 D．葡萄酒发酵后期通气并适当升高温度，可酿制葡萄醋 8．(24-25高二下·广东肇庆·期末)传统的食品保存方法多种多样，常见的有：①用盐腌制萝卜干；②将鲜奶制成酸奶；③将香菇晒干；④用保鲜膜包裹剩菜冷藏。下列有关食品保存的原理，错误的是（    ） A．①在高盐环境下，微生物细胞渗透失水，生长繁殖受到抑制 B．②乳酸菌发酵产酸抑制一些杂菌，同时促进蛋白质的消化 C．③通过减少水分以降低微生物代谢活性，延长保存时间 D．④保鲜膜隔绝氧气，彻底杀灭剩菜中的需氧微生物，防止剩菜腐败 9．(24-25高二下·广东云浮·期末)中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术。下列叙述错误的是（　　） A．在葡萄酒酿制的整个过程中需要先密封后通气 B．乳腐制作过程中，毛霉分泌的蛋白酶能分解蛋白质 C．泡菜制作过程中，乳酸菌将葡萄糖分解生成乳酸 D．家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵 10．(24-25高二下·广东韶关·期末)咸菜是潮汕饮食文化中极具代表性的传统食品之一。其制作方法是：将芥菜洗净后晒干，一层芥菜一层粗盐铺于陶瓷瓮中，再用干净石块压实，初腌两三天后菜叶便会渗出水分，继续加入盐水，密封容器口，发酵15天左右即可食用。下列叙述正确的是（　　） A．初腌加入大量粗盐是为了抑制杂菌的生长和促进植物细胞主动吸收盐分 B．密封容器口的目的是为乳酸菌创造无氧环境，从而产生乳酸和二氧化碳 C．利用干净石块压实既促进菜叶渗出水分又能保证菜叶完全浸没在盐水中 D．整个发酵过程乳酸和亚硝酸盐的含量都会呈现先增加后减少的变化趋势 11．(24-25高二下·广东汕尾·期末)某兴趣小组在葡萄酒制作完成后，打开发酵瓶的瓶盖，盖上一层纱布，进行葡萄醋的发酵，发酵温度为30~35℃，时间为7~8d。下列叙述正确的是（　　） A．在醋酸发酵的过程中酵母菌也会进行大量繁殖 B．醋酸发酵过程中乙醇为醋酸菌提供碳源和能源 C．打开瓶盖的目的只是为葡萄醋的发酵提供氧气 D．利用天然的菌种往往会使发酵食品的品质更好 二、实验题 12．(24-25高二下·广东东莞·期末)东莞作为“中国荔枝之乡”，拥有悠久的荔枝种植历史。某生物科技公司利用当地盛产的糯米糍荔枝，开发出具有岭南特色的荔枝果酒。以下为该公司荔枝果酒发酵生产的简化工艺流程。 荔枝鲜果→清洗去核→打浆榨汁→果汁调配（加蔗糖+果胶酶）→灭菌→接种酵母→主发酵→固液分离→后发酵→陈酿→过滤装瓶 请回答下列问题： (1)从呼吸作用类型看，酵母菌属于__________型微生物。 (2)相较于普通酿酒酵母，从东莞本地荔枝果皮中筛选的野生菌株具有__________的优势。果汁调配时添加蔗糖的主要目的是__________。 (3)大部分糖的分解和代谢产物的生成在__________（填流程环节）完成。生产中发现发酵液表面出现白色膜状物，排查发现装置有漏气现象，发酵液pH值下降，推测可能被__________（填“乳酸菌”或“醋酸菌”）污染。 (4)为提高荔枝果酒的产量和品质，可采取的措施有__________（答出2点即可）。 三、解答题 13．(24-25高二下·广东佛山·期末)蓝莓酸甜可口，具有抗氧化等保健功能，被誉为“水果皇后”，深受人们的青睐。植物组织培养是蓝莓扩大繁殖的重要方法，具体操作流程如图a所示。 回答下列问题： (1)上述过程中的培养基按物理性质划分属于______培养基，蓝莓茎段培育成植株的过程体现了______的原理。 (2)蓝莓的组织培养过程中有两种器官发生途径：①直接器官发生，即外植体不经历愈伤组织便产生芽或根等器官：②间接器官发生，即需外植体先脱分化形成愈伤组织。推测两种器官发生途径主要与______有关，直接器官发生途径的优点是______（答出两点即可）。 (3)蓝莓可加工成蓝莓酒等产品，以提高蓝莓的附加值。研究人员检测了不同品种蓝莓酒中总酚的含量，及其对两种自由基DPPH、ABTS的清除率，结果如图b所示。 注：酚类物质是蓝莓生物活性的重要物质之一，具有消除人体内自由基作用。 ①结合图b的结果，选择_______品种的蓝莓进行酒精发酵，能够更有效提升蓝莓酒的保健价值，判断依据是________。 ②有人认为蓝莓酒具有抗衰老的保健功效，应该多喝。你认同这种观点吗?说明理由________。 14．(24-25高二下·广东佛山·期末)益生菌发酵乳制品不仅营养丰富，还含有对人体健康有益的益生菌。为评估唾液链球菌（ST）与动物双歧杆菌（BL）复合发酵对发酵乳品质的影响，研究人员采用这两种益生菌菌株对牛乳进行复合发酵，在发酵终点分别测定单菌发酵组和复合菌株发酵组的pH和活菌数，结果如图a和图b所示。 回答下列问题： (1)ST与BL_______（“有”或“无”）以核膜为界限的细胞核。牛乳作为培养基的主要成分，可以为这两种发酵菌提供_________等营养物质。为保证牛乳中的营养成分不被破坏，可以采用_______法除去该培养基的杂菌。 (2)活菌数变化和pH是评价发酵乳制品质量的关键指标。三组实验在发酵终点pH都降低的细胞学原理是_______。由图b可知，与单菌发酵相比，复合发酵时两种菌株的生长存在_______作用，结合图a分析这种作用的具体机制可能是_______。 (3)研究表明，发酵产品的pH在一段时间后仍会出现一定程度的下降，出现这种变化的原因是_________，这对于发酵乳的保存和食用的启示是________。 地 城 考点02 发酵工程及其应用 一、单选题 1．(24-25高二下·广东韶关·期末)木栓酮是药用植物雷公藤的次生代谢产物，具有抗肿瘤、消炎抗菌等多种功效。从雷公藤体内提取木栓酮的效率低。研究人员将雷公藤的木栓酮合酶基因引入酵母细胞中构建了酵母工程菌使木栓酮产量有所提升，但产量达不到工业生产要求且有副产物香树脂醇产生。为此研究人员通过分析木栓酮合酶的氨基酸序列并改造其关键氨基酸位点，以期提高木栓酮的产量，结果如下表所示。下列分析正确的是（　　） 改造的氨基酸位点 木栓酮（mg/L） 香树脂醇（mg/L） 野生型 21.1 12.7 11 18.5 18.9 259 0 28.3 280 27.8 11.7 548 14.2 17.6 552 24.8 22.3 A．木栓酮是雷公藤生长和生存所必需的物质 B．利用蛋白质工程和发酵工程构建酵母工程菌 C．改造280位点可以提高木栓酮合酶的催化活性 D．同时改造多个位点可进一步提高木栓酮合酶性质 2．(24-25高二下·广东深圳龙华区·期末)聚羟基丁酸酯（PHB）是一种可降解塑料，可由木质素转化合成。某研究团队将关键代谢基因整合到微生物基因组中，并对工程菌进行驯化和筛选，实现了木质素向PHB的高效转化。下列叙述正确的是（　　） A．木质素为工程菌提供碳源，无需添加其他营养物质 B．对工程菌进行的驯化和筛选是通过选择培养基实现的 C．关键代谢基因整合到微生物基因组实现了诱变育种 D．获得PHB的工程菌需要利用提取、分离和纯化等技术 3．(23-24高二下·广东潮州·期末)下列关于传统发酵技术及发酵工程的说法，错误的是（    ） A．在菌种选育过程中，可以利用人工诱变或基因工程等手段 B．醋酸菌能以酵母菌的某种代谢产物为原料合成醋酸 C．发酵时，发酵条件变化会影响微生物生长，不影响微生物的代谢途径 D．发酵工程的产品可以采用过滤、沉淀、蒸馏、萃取等方法提取 4．(24-25高二下·广东梅州·期末)赤藓糖醇是一种低热量的甜味剂，广泛应用于无糖食品。工业上以木薯淀粉为原料，经解脂假丝酵母发酵生产赤藓糖醇。下图为解脂假丝酵母发酵生产赤藓糖醇的简要流程图。下列叙述错误的是（    ） A．从自然界分离菌种后，可以通过基因工程、诱变育种等方式获得高产解脂假丝酵母 B．将菌种由A培养基转接至B培养基的目的是为了增加解脂假丝酵母的数量 C．加α-淀粉酶的作用是使木薯淀粉水解，为菌种提供碳源 D．利用发酵工程生产赤藓糖醇的中心环节是产品的分离和提纯 5．(24-25高二下·广东佛山·期末)发酵工程广泛应用于食品工业、医药工业及其他工农业生产等方面。下列关于发酵工程的叙述正确的是（　　） A．可以采用过滤、沉沉等方法来获得微生物的代谢物 B．从微生物细胞中提取单细胞蛋白以制成微生物饲料 C．将相应菌种接种到发酵液中是发酵工程的中心环节 D．可利用诱变育种、基因工程等获得性状优良的菌种 6．(24-25高二下·广东东莞·期末)次生代谢产物X是某植物细胞在微生物侵害等胁迫过程中产生的防御物质，可用于药物生产。其研发流程为：筛选高产细胞→确定细胞生长和产物X合成的关系（如图）→大量生产X。下列叙述错误的是（    ） A．应先培养大量细胞，后改变条件使细胞停止生长来大量生产X B．可将微生物菌体作为诱导因子加入培养基中，进而提高X产量 C．X的工厂化生产需要将高产植物的外植体培养成完整植株后提取 D．可以通过改造酵母菌等微生物的基因，利用发酵工程生产X 7．(23-24高二下·广东珠海·期末)随着生命科学的发展，生物工程技术已广泛应用于农业、医药卫生和环境保护等多个领域。下列有关生物工程技术在生产实践中应用的叙述正确的是（　　） A．利用植物细胞工程技术对茎尖进行培养，可获得抗病毒的新品种 B．利用发酵工程从微生物细胞中提取单细胞蛋白，生产微生物饲料 C．利用蛋白质工程能生产出自然界不存在的蛋白质，满足实际需求 D．利用胚胎移植能充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力，发展畜牧业 8．(23-24高二下·广东湛江·期末)如图所示为果酒和果醋生产过程中的物质变化情况（其中C6H12O6代表葡萄糖），下列有关叙述错误的是（    ） A．果酒发酵初期酵母菌细胞内主要进行①②代谢过程 B．④⑤过程差异的主要原因是糖源是否充足 C．酵母菌和醋酸菌主要区别在于是否有成形的细胞核 D．利用发酵罐发酵是工业化生产果酒的中心环节，需严格控制温度、pH和溶解氧等条件 9．(23-24高二下·广东珠海·期末)发酵工程可实现发酵产品的大规模生产，下图为发酵工程的基本环节，相关叙述正确的是（　　） A．①、②依次是诱变育种、基因工程育种 B．③是发酵工程的中心环节，需要严格控制发酵条件 C．④需要在菌种确定之前选择原料并反复实验 D．产物浓度的检测必须在发酵结束后进行 10．(23-24高二下·广东佛山·期末)客家娘酒是采用优质糯米，经蒸煮、发酵、炙酒而成的一种甜米酒，发酵过程中使用的酒曲含有根霉、酵母菌等微生物，其中根霉在生长时会产生大量的淀粉酶。下列关于酿酒过程的叙述，错误的是（    ） A．客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，可促进微生物的繁殖 B．炙酒是指用暗火烤炙密封的米酒，可以延长娘酒储存的时间 C．根霉将糯米中的淀粉转化为小分子糖类，为酵母菌生长提供碳源 D．随着酒曲中根霉比例的增大，酵母菌酒精发酵的速度也会加快 11．(23-24高二下·广东湛江·期末)基因工程应用广泛，成果丰硕。下列属于基因工程的是（    ） A．通过物理辐射培育能产生大量青霉素的青霉菌 B．利用体细胞杂交技术培育能同时结出多种水果的植物 C．利用能分解石油的细菌来构造能降解石油的“超级细菌” D．利用发酵技术培养大量能产生干扰素的工程菌 12．(23-24高二下·广东中山·期末)人类有意无意地利用微生物发酵制作果酒或其他食品，已有几千年历史。下列叙述正确的是（    ） A．传统发酵中，需要对原材料及发酵瓶进行灭菌，以防杂菌污染导致发酵失败 B．用于乳制品制作的微生物具有核膜包被的细胞核，用于果酒发酵的微生物则不具有 C．发酵用的不同微生物的最适生长温度不同，酿酒酵母的最适生长温度约为28℃ D．进行果酒发酵时，每隔12h左右需将瓶盖打开一次，进行果醋发酵时，瓶盖始终处于打开状态 13．(23-24高二下·广东佛山·期末)连续发酵是指以一定的流速向发酵罐中连续添加培养基，同时以相同的流速排出发酵液的发酵方法。某研究团队通过实验探究不同发酵方法对大肠杆菌分泌L-酪氨酸的影响，结果如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．培养基加入发酵罐之前常用湿热灭菌法进行无菌处理 B．发酵过程中需要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件 C．发酵后采用离心法分离菌体，通过破碎细胞获取L-酪氨酸 D．连续发酵可提高菌体活力，延长产L-酪氨酸的周期 阅读下列材料，完成下面小题。 小曲白酒的酒香纯正，以大米、大麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。 14．(23-24高二下·广东江门·期末)关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述错误的是（　　） A．摊晾可防止温度过高杀死小曲中的微生物 B．撒曲糖化可将原料中的淀粉水解为葡萄糖 C．原料加入小曲后应立即装坛密封进行发酵 D．发酵坛密封不严，可能令酿出的酒有酸味 15．(23-24高二下·广东江门·期末)为了提高白酒的品质和产量，下列叙述错误的是（　　） A．可通过调整小曲和原料的合理配比来提高品质 B．可采用诱变育种和基因工程育种对菌种进行改良 C．发酵过程中，需要及时调控发酵温度和通气状况 D．发酵结束后，对菌体进行破碎处理可增加白酒产量 地 城 考点03 微生物的培养与应用 一、单选题 1．(24-25高二下·广东韶关·期末)我国卫生部门规定1mL自来水检出的菌落总数不得超过100个（37℃培养48h）。研究人员拟对自来水中的大肠杆菌进行检测与培养，培养基配方如下表所示。下列叙述正确的是（　　） 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂 含量（g） 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL A．须将待测水样进行梯度稀释后再涂布于平板上 B．检测时不需要设一个不接种的平板作为对照 C．指示剂的作用是与培养基上各种菌落发生显色反应 D．在配制上述培养基时，需要先调pH再灭菌 2．(24-25高二下·广东深圳龙华区·期末)研究发现，与正常菌群（SPF）孕鼠血清相比，抗生素处理（ABX）的孕鼠血清缺少5种肠道菌群代谢产物。为了进一步研究孕鼠5种肠道菌群代谢产物对胎儿神经发育的影响，设计相关实验，结果如下图所示。下列分析错误的是（　　） A．该实验的自变量是母体肠道菌群的种类 B．补充这些代谢物有利于恢复胚胎丘脑皮质轴突发育 C．分离关键肠道微生物时可采用平板划线法 D．抗生素处理对孕鼠的胎儿的神经系统发育是有影响的 3．(24-25高二下·广东云浮·期末)养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物能使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物，实验小组进行了分离目的菌株的实验，流程如图所示。下列实验操作错误的是（　　）    A．过程①将样本进行稀释，接种到培养基后进行培养 B．过程②筛选的菌落能在a培养基上生长，不能在b培养基上生长 C．过程③可添加脲酶并检测其活性，结果菌株甲组有NH3产生 D．向粪便中添加菌株甲比添加菌株乙更有利于减少NH3的产生 4．(24-25高二下·广东江门·期末)科研人员在平板上接种某种革兰氏阳性菌（G+），然后探究PPC（培养过P菌的培养液）对G+生长的影响，实验结果见下图。下列分析错误的是（    ） 注：Hot-PPC（100℃处理15min后再加入）、NaOH-PPC（加NaOH调节pH值至中性）、PBA能抑制G+生长。 A．PPC能抑制G+生长 B．PPC的热稳定性比较弱 C．P菌酸性物质能抑制G+生长 D．PPC和PBA的作用效果相近 5．(24-25高二下·广东佛山·期末)刚果红是一种染料，它可与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。图为土壤中几种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈，其中a、b、c、d表示四种菌落。下列叙述错误的是（　　） A．取样时用到的纸袋、铁铲和采集的土壤等都需进行灭菌处理 B．纤维素分解菌产生的纤维素酶可以分泌到细胞外发挥作用 C．图中的接种方法为稀释涂布平板法，一个菌落一般来源于一个活菌 D．纤维素分解能力与透明圈和菌落的直径比值正相关，因此d最高效 6．(24-25高二下·广东茂名·期末)为测定某植物提取液对大肠杆菌的MIC值，即肉眼看不见菌落生长的最低抑菌浓度，下列相关实验操作错误的是（　　） A．配制一系列浓度梯度的某植物提取液 B．向灭菌后的液体培养基中加入配制好的植物提取液 C．采用涂布法将等量大肠杆菌菌液接种于含提取液的培养基表面 D．培养时间过长导致MIC值偏高的原因是细菌耐药性出现假阳性 7．(24-25高二下·广东清远·期末)某兴趣小组拟测定校园土壤尿素分解菌的数量。下列叙述错误的是（　　） A．需要配制以尿素作为唯一氮源的培养基 B．土壤样品进行梯度稀释后需要充分灭菌 C．同一稀释度的菌液至少要涂布3个平板 D．取菌落数目稳定时的记录作为实验结果 8．(24-25高二下·广东东莞·期末)金黄色葡萄球菌高度耐盐，可引起肺炎等疾病。在血平板（添加适量血液的培养基）上生长时，该菌可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。检测鲜牛奶是否被该菌污染的操作流程如下。相关叙述错误的是（    ）    A．接种环接种前需高压蒸汽灭菌，使用后灼烧灭菌 B．图中将样品接种到血平板上的方法是平板划线法 C．用7.5% NaCl肉汤培养基的主要目的是筛选金黄色葡萄球菌 D．若血平板有褪色现象，说明鲜牛奶被金黄色葡萄球菌污染 9．(24-25高二下·广东肇庆·期末)某校三名高中生食用某品牌冰激凌后出现腹泻，怀疑冰激凌中大肠杆菌超标，他们用伊红—亚甲蓝琼脂培养基检测（大肠杆菌菌落呈深紫色带金属光泽）。下列操作或结论错误的是（    ） A．取样时选择该品牌多支冰激凌进行检测，避免单一样品偶然性 B．统计菌落数目时无须设置空白对照组，但需设置重复组取平均值 C．培养基上除深紫色菌落外还有其他颜色的菌落，说明可能存在其他菌类 D．若检测到大肠杆菌菌落数超标，应立即禁止销售该商品并报告监管部门 10．(24-25高二下·广东茂名·期末)白酒在酿造过程中，大曲中的微生物起到了至关重要的作用，它们负责将原料中的糖类转化为酒精，以及生成各种香气物质。下图为科研人员调查的不同浓香型酿酒大曲中的主要细菌（左）和真菌（右）及其相对丰度，下列叙述正确的是（　　） A．图中a、b、c表示不同类型的大曲，白酒的差异可能与大曲中微生物的种类和数量相关 B．将大曲制成悬浮液后，采用平板划线法可以分离得出图中不同的微生物种类和相对丰度 C．图中相对丰度是指不同浓香型大曲中微生物的种类数 D．图示细菌属的相对丰度明显高于真菌属，由此可得出白酒的酒精发酵主要由细菌属完成 11．(24-25高二下·广东湛江·期末)为研究淡水鱼体表致病菌的抑菌方法，研究者从某鲫鱼体表黏液中分离出嗜水气单胞菌（一种细菌），并采用平板划线法接种于固体培养基。下列叙述正确的是（    ） A．黏液样液需经高压蒸汽灭菌后再进行接种 B．该固体培养基的 pH 一般要调至酸性 C．每次划线前后均需对接种环进行灼烧灭菌 D．完成平板划线后，直接将平板倒置培养 二、解答题 12．(24-25高二下·广东广州八区·期末)为保障公共健康，需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如图所示。 回答下列问题： (1)检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行______灭菌。在伊红-亚甲蓝琼脂培养基上培养时，大肠杆菌会产生呈现深紫色且具有金属光泽的菌落，此培养基对大肠杆菌起到______作用。 (2)本检测______（填“可以”或“不可以”）用血细胞计数板直接计数替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量，原因是______。 (3)从设计实验的角度看，本检测需要设置两组对照组：一组用无菌水涂布在伊红-亚甲蓝琼脂培养基中并培养，目的是______；另一组的操作是______，目的是检测该培养基能否培养出大肠杆菌。 13．(24-25高二下·广东江门·期末)牛奶富含多种氨基酸和矿物质，多饮用牛奶有利于增强体质，但牛奶消毒不严格也容易携带细菌。根据国家标准规定，每毫升合格的牛奶细菌总数不能超过50000个。某兴趣小组利用恒温水浴锅对生牛奶进行消毒，然后检测消毒的效果。回答下列问题：    (1)步骤①对生牛奶消毒的方法被称为______，牛肉膏蛋白胨培养基一般采用的灭菌方法是______。从效果方面进行分析，生牛奶消毒的方法的优点是______。 (2)步骤②是将牛奶进行梯度稀释，这样做的目的是______。步骤③的接种方法是______，该方法可以用来统计样品中活菌的数目，其原理是______。 (3)兴趣小组的同学通过步骤①-③接种了3个平板，将这3个平板和1个未接种的平板放入恒温培养箱，在适宜的温度条件下培养48h，然后统计出4个平板上的菌落数分别是57、53、55和9。根据这样的实验结果，能否判断该兴趣小组消毒后的牛奶细菌超标？为什么？______ 三、实验题 14．(24-25高二下·广东梅州·期末)樱桃采后常因感染各种病原菌而腐烂，比如因感染链格孢菌而引发黑腐病，运输过程中的机械损伤也会增加致腐率，给果农带来巨大的经济损失。为了解决这一问题，科研人员研究了枯草芽孢杆菌对链格孢菌的抑菌效果及作用机理。回答下列问题： (1)欲对腐烂的樱桃果进行各种病原菌的分离和鉴定，可将完全腐烂的樱桃组织置于无菌水中制成菌悬液，用______法接种到培养基上培养，再根据菌落的______（答出2点即可）等特征来初步区分不同种类的微生物，从中可挑选出链格孢菌的单菌落。 (2)链格孢菌从樱桃果中获得其生长繁殖所需的水、无机盐、______等基本营养物质。 (3)为探究枯草芽孢杆菌对链格孢菌的抑菌效果及作用机理，研究人员进行了樱桃采后果实实验，步骤如下： 选材与处理 选取新鲜、无机械损伤的樱桃果分成4组，表面消毒。 接种与处理 A组：___________ B组：在果实中部打孔、接种10μL链格孢菌悬液 C组：在果实中部打孔，喷5ml枯草芽孢杆菌悬液 D组：在果实中部打孔，先喷5ml枯草芽孢杆菌悬液，24h后接种10μL链格孢菌悬液 贮藏 果实置于20℃、相对湿度85%的人工气候箱中贮藏（模拟常温运输条件） 观察 观察病斑直径和致腐率 测定 测定樱桃果细胞中防御酶（POD和PAL）的活性    上表中对A组的处理是______。综合图1甲、乙结果，表明枯草芽孢杆菌对链格孢菌的抑制作用机理可能是______。 (4)基于以上研究，对樱桃采后黑腐病的防控提出一条预防措施：____________。 15．(24-25高二下·广东汕尾·期末)沙门氏菌是人类患肠炎的主要食源性病原菌之一。某研究小组对不同温度下鸡蛋清中沙门氏菌的生长规律进行研究，以了解不同温度下沙门氏菌在鸡蛋清中的生存能力。实验步骤如下： ①配制增殖培养基（成分：蛋白胨、鸡蛋清、NaCl、磷酸盐、H2O）； ②接种初始浓度（103CFU/mL）的沙门氏菌； ③将各组分别置于不同温度下培养48小时； ④每隔一定时间取样，接种到BGS培养基上，置于一定温度下培养24小时，统计菌落数； ⑤对实验数据进行处理，绘制曲线图。 回答下列问题： (1)增殖培养基中沙门氏菌所需的碳来源于______，步骤①和④中培养基的主要区别是④中BGS培养基一般要加入______。 (2)步骤④中大部分样品取样的时间间隔是______小时，一般用_______法接种到培养基上以后需要在______温度下培养24小时。 (3)根据以上实验结果和生活经验，你认为鸡蛋储存在哪种温度较好并说明理由（可供选择的温度：4℃、30℃、39℃和42℃）_____。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $