贵州省高二下学期生物学期末测试卷（新人教版选择性必修三《生物技术与工程》第一到第四章）

**基本信息** 聚焦生物技术与工程核心内容，原创题占比高，融入双特异性抗体、低过敏转基因花生等科技前沿情境，注重实验探究与科学思维考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/48分|微生物培养（1题）、植物组织培养（4题）、基因工程（11题）、胚胎工程（8题）|第1题结合苹果酒醋发酵考查无菌技术，第16题以2024年低过敏转基因花生为情境，体现生命观念与科学思维| |非选择题|5题/52分|微生物分离计数（17题）、单克隆抗体制备（18题）、基因工程应用（20题）、CRISPR技术伦理（21题）|17题设计腐败牛奶产蛋白酶细菌分离实验，考查探究实践能力；21题开放题讨论基因编辑伦理，强化态度责任|

高中生物选择性必修三《生物技术与工程》期末测试卷 注意事项： 1. 答题前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2. 选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题用黑色签字笔在答题卡指定区域作答。 3. 考试时间75分钟，满分100分。 一、选择题（本题共16小题，每小题3分，共48分。每小题只有一个选项符合题目要求） 1. （原创）某研究小组利用苹果皮上的野生酵母菌进行苹果酒发酵，然后在苹果酒中加入醋酸菌进行苹果醋发酵。为检测发酵过程中是否被杂菌污染，该小组配制了醋酸盐培养基（含碳酸钙，醋酸菌产生的醋酸可溶解碳酸钙形成透明圈）。下列叙述正确的是（　　） A. 苹果酒发酵过程中，需定期打开瓶盖排放CO₂，并全程保持无氧 B. 苹果醋发酵时，需将温度控制在18～25℃，并持续通入无菌空气 C. 用血细胞计数板计数法统计得到的酵母菌数量即为活菌数量 D. 在醋酸盐培养基上出现透明圈的菌落，可能是醋酸菌 2. 土壤中微生物的种类和数量众多随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有着重大意义。为了筛选出土壤中能分解纤维素的细菌，下列培养基配方中最合理的是（　　） A. 蛋白胨、牛肉膏、纤维素、琼脂、水 B. 纤维素、(NH4)2SO4、KH2PO4、MgSO4、琼脂、水 C. 葡萄糖、酵母膏、K2HPO4、NaCl、琼脂、水 D. 纤维素、葡萄糖、KNO3、NaCl、琼脂、水 3. 获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌污染，下列有关无菌技术的叙述，错误的是（　　） A. 接种室和超净工作台可用紫外线照射进行消毒 B. 金属接种工具常用灼烧灭菌法处理 C. 培养皿、培养基可用干热灭菌法灭菌 D. 实验者的双手可用酒精擦拭进行消毒 4.（原创） 甜叶菊的叶片中含有甜菊糖苷，是一种天然甜味剂。科研人员利用甜叶菊的幼嫩茎段通过组织培养获得愈伤组织，再通过液体悬浮培养使愈伤细胞大量增殖，最后从培养液中提取甜菊糖苷。下列叙述错误的是（　　） A. 对幼嫩茎段进行消毒时，可用酒精和次氯酸钠溶液先后处理 B. 植物组织培养和植物细胞培养都需要将愈伤组织再分化后才能获得目标产物 C. 液体悬浮培养时，需定期更换培养液以补充营养并避免代谢物积累 D. 甜菊糖苷是愈伤细胞分泌到胞外的次生代谢物 5. “番茄—马铃薯”杂种植株的培育过程如图所示，下列叙述错误的是（　　） A. 过程①常用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁 B. 过程②可用聚乙二醇（PEG）诱导原生质体融合 C. 杂种植株同时具有番茄和马铃薯的遗传物质，一定能地上结番茄、地下长马铃薯 D. 过程⑤需要调整植物激素的比例以诱导分化 6. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础。动物细胞培养时，下列操作或现象叙述正确的是（　　） A. 培养时需将细胞置于含95% O2和5% CO2的混合气体中 B. 传代培养时，需要用胃蛋白酶处理贴壁细胞使分散成单个细胞 C. 原代培养的细胞一般传至10代左右会出现接触抑制而停止分裂 D. 传代至50代以上的细胞通常仍保留正常的二倍体核型 7. （原创）双特异性抗体（bsAb）能同时结合两种不同的抗原，在肿瘤免疫治疗中具有独特优势。制备bsAb的一种常用方法是“三源杂交瘤法”：将两种分别分泌不同单克隆抗体的杂交瘤细胞融合，再筛选出能同时分泌两种抗体的双杂交瘤细胞。下列相关叙述正确的是（　　） A. 获得两种亲本杂交瘤细胞都需要用选择培养基预先筛选，以获得能分泌单一抗体的细胞 B. 可用灭活病毒诱导融合杂交瘤细胞，融合后需用特定的HAT培养基筛选出双杂交瘤细胞 C. 双杂交瘤细胞能同时分泌两种抗体，说明双杂交瘤细胞中含有两个不同的抗体基因 D. 与单克隆抗体相比，双特异性抗体只能识别一种抗原，因此特异性更强 8. 高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂、分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程，下列关于哺乳动物胚胎发育的叙述，正确的是（　　） A. 受精卵在输卵管内进行卵裂，细胞数量和胚胎总体积都增加 B. 桑葚胚的细胞都具有全能性，囊胚的细胞开始出现分化 C. 囊胚期透明带破裂，胚胎从其中伸展出来的过程叫做孵化 D. 原肠胚包含内细胞团、滋养层和原肠腔等结构 9. 哺乳动物的受精过程以及早期胚胎发育的规律是胚胎工程的理论基础。下列关于体外受精及早期胚胎培养的叙述，错误的是（　　） A. 采集到的卵母细胞需要培养到MⅡ中期才能受精 B. 精子需要获能后才能完成受精作用 C. 胚胎发育到囊胚或原肠胚阶段才能移植 D. 早期胚胎培养所用的培养液成分通常包括无机盐、维生素、激素、血清等 10. 若要获得多只相同的转基因动物，可进行胚胎分割和胚胎移植。下列关于胚胎分割和胚胎移植的叙述，正确的是（　　） A. 胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚 B. 对囊胚进行分割时，需将内细胞团均等分割，否则影响分割后胚胎的恢复 C. 供体母畜需要注射孕激素进行超数排卵处理 D. 胚胎移植时，受体母畜需进行免疫检查，防止发生免疫排斥 11. 某科学家得到了两种质粒，一种含有正常的乳糖操纵基因，另一种含有氨苄青霉素抗性基因。，若获得了一些含有这两种基因的重组质粒，需用到限制酶和DNA连接酶。下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述，正确的是（　　） A. 限制酶能从DNA分子中部切开磷酸二酯键，产生黏性末端或平末端 B. 不同限制酶切割产生的黏性末端一定不能互补配对 C. E.coli DNA连接酶既能连接黏性末端也能连接平末端 D. DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸连接到DNA片段上 12. 以下①～④表示基因工程操作的基本流程中的操作步骤。下列叙述正确的是（　　） ①获取目的基因→②构建基因表达载体→③导入受体细胞→④检测与鉴定 A. 步骤①中，获取目的基因的方法有人工合成、PCR扩增等 B. 步骤②中，基因表达载体上的启动子起始密码子都是DNA片段 C. 步骤③中，将目的基因导入动物受精卵常用农杆菌转化法 D. 步骤④中，若检测到受体细胞中有目的基因，说明转基因成功 13. 玉米螟和田间杂草严重影响玉米的生长发育，导致玉米产量和品质下降。科研人员获取了少量的抗虫基因和抗草甘膦基因。为了获得更多的目的基因，可采用PCR技术进行扩增，利用PCR技术扩增目的基因时，下列叙述错误的是（　　） A. PCR反应需要热稳定的DNA聚合酶、引物、dNTP、模板DNA和缓冲液 B. 变性、复性、延伸三个步骤的温度分别为90℃以上、50℃左右、72℃左右 C. 第n轮循环后，理论上含目的基因的DNA分子数为2n个 D. 引物与模板链的3'端结合，DNA聚合酶从引物的5'端开始延伸子链 14. 生物技术就像一把双刃剑，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来灾难。近年来，生物技术引发的社会争论越来越广。下列关于转基因生物安全性的叙述，不合理的是（　　） A. 转基因作物可能通过花粉将目的基因传递给近缘杂草，造成基因污染 B. 转基因微生物可能产生新的过敏原，引发过敏反应 C. 只要严格管理，就可以完全杜绝转基因生物带来的所有风险 D. 我国对转基因生物坚持“谨慎推广、依法管理”的原则 15. 随着生物科学技术的发展，动物乃至人类自身的生殖方式变得越来越多样化，下列关于“试管婴儿”和“克隆动物”的叙述，正确的是（　　） A. 试管婴儿应用了体外受精和胚胎移植技术，属于有性生殖 B. 克隆动物应用了核移植技术，属于有性生殖 C. 试管婴儿和克隆动物的培育过程都需要在体外完成早期胚胎发育的全部阶段 D. 两者都体现了动物细胞的全能性 16. （原创）2024年，我国科研团队利用基因工程技术，将花生中编码过敏原蛋白Ara h 2的基因序列进行定点突变，再将突变后的基因导入花生基因组，成功培育出低过敏转基因花生。经检测，突变后的Ara h 2蛋白在结构上发生了改变，与过敏患者血清中特异性IgE的结合能力下降了90%以上。下列叙述正确的是（　　） A. 获取花生过敏原基因时，可通过逆转录法从花生基因组DNA中直接扩增获得 B. 构建基因表达载体时，只需将突变后的Ara h 2基因插入质粒中即可完成 C. 将突变基因导入花生细胞时，常用CaCl2处理花生细胞使其成为感受态细胞 D. 转基因花生中Ara h 2基因能稳定遗传，说明该基因已整合到花生细胞的染色体DNA中 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17.（原创）（10分） 牛奶、豆浆等富含蛋白质的食品容易腐败，主要原因是微生物产生的胞外蛋白酶分解蛋白质。某兴趣小组欲从腐败的牛奶中分离出产蛋白酶的细菌，并初步比较不同菌株产酶能力的高低（不溶性酪蛋白使培养基呈乳白色、不透明）。回答下列问题： （1）配制分离产蛋白酶细菌的培养基时，应在培养基中加入 （填物质名称），以便根据菌落周围的 （填现象）初步判断产酶能力。该培养基属于 （填“选择”或“鉴别”）培养基。 （2）为了初步比较不同菌株产酶能力的高低，可在平板上测量并计算 的比值，比值越大，说明产酶能力越强。 （3） 该兴趣小组在完成上述实验后，想进一步了解腐败牛奶中产蛋白酶细菌的总数量（包括活菌和死菌）。有同学建议用显微镜直接计数法（血细胞计数板）进行计数，也有同学建议用稀释涂布平板法进行计数。 ① 若采用显微镜直接计数法，统计得到的结果会______（填“大于”“等于”或“小于”）稀释涂布平板法的计数结果，原因是________________________________________________。 ② 若要同时获得产蛋白酶细菌的活菌数量和总菌数量，可以采取的操作是：用显微镜直接计数法统计 ，用稀释涂布平板法统计 。 ③兴趣小组取1 mL腐败牛奶样品，加入盛有9 mL无菌水的试管中，得到10倍稀释液，再依次进行系列稀释。取0.2 mL的104、105、106倍稀释液涂布到上述培养基平板上，每个稀释度涂布3个平板。培养后统计菌落数如下表： 稀释度 平板1 平板2 平板3 104 345 356 351 105 42 38 40 106 5 4 6 应选择稀释度为______的平板进行计数，该样品中产蛋白酶细菌的活菌浓度约为______个/mL（保留整数）。 18. （10分） 单克隆抗体在疾病诊断和治疗中具有重要应用。人肌红蛋白是早期诊断急性心肌梗死的生化标志物之一，下图是制备抗人肌红蛋白单克隆抗体制备流程示意图，请据图回答： （1） 图中给小鼠注射的抗原是 ，目的是获得能产生特定抗体的 细胞。 （2） 诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合常用的化学试剂是 。 （3）第二次筛选需进行____________和____________，最终获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 （3） 将筛选出的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养，可从小鼠的 中提取单克隆抗体。单克隆抗体最主要的优点是 。 （5） 利用制备得到的抗人肌红蛋白单克隆抗体，可制成诊断试剂盒用于急性心肌梗死的早期诊断，其原理是单克隆抗体能与患者血清中的 特异性结合，通过检测抗原的存在与否及含量，辅助诊断心肌梗死。该诊断方法利用了单克隆抗体 的特点。 19. （10分） 荷斯坦奶牛是世界上产奶量最高的牛，每头荷斯坦奶牛平均每年产奶量超过9500 升。荷斯坦奶牛不仅产奶量高，牛奶的质量也非常高。牛的自然繁殖率比较低，下图表示科研人员利用胚胎工程培育荷斯坦奶牛的过程。请回答下列问题。 （1） 对供体母牛注射____________激素进行超数排卵处理，使其排出更多的卵母细胞。 （2）(2)进行人工授精时.从荷斯坦公牛体内获得的精子不能直接与成熟的卵子完成受精，原因是 。为了检查受精卵的受精状况和发育能力，需将受精卵移入发育培养液中培养。受精过程中，防止多精入卵的两道屏障是____________反应和____________反应。 （3）对胚胎的性别进行鉴定时，常取囊胚的 (填“滋养层”或“内细胞团”) 细胞进行DNA 分析。滋养层最终会发育成 。内细胞团细胞属于胚胎干细胞，该细胞在形态上的特点是 。 (4) 图中④过程用到的生物技术为 。荷斯坦牛的胚胎能在本地母牛的子宫内存活，其生理学基础是 。 20. （12分） 科研人员利用基因工程技术将人的胰岛素基因导入大肠杆菌，生产人胰岛素。请回答下列问题： （1）获取人的胰岛素基因的方法有：从人 细胞中获得mRNA，通过 过程合成cDNA；也可根据已知的胰岛素氨基酸序列，推测 序列，通过化学合成法获得。 （2）构建基因表达载体时，为确保胰岛素基因与质粒正确连接，需用相同的 酶切割目的基因和质粒，以产生相同的 。基因表达载体上通常有标记基因，其作用是 。 （3）将重组质粒导入大肠杆菌前，常用______处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。若要检测胰岛素基因是否转录出mRNA，可采用 技术。 （4）若在大肠杆菌中表达的人胰岛素不具有生物活性，需要经过体外复性处理才能恢复活性，原因是 。 （5） 利用PCR技术扩增胰岛素基因时，需要根据已知的胰岛素基因序列设计 种引物。PCR反应中，引物与模板链的______（填“3'”或“5'”）端结合。 21. （开放题）（10分） CRISPR/Cas9基因编辑技术被称为“基因剪刀”，能对生物基因组进行精准修饰。该技术在疾病治疗、农业改良等方面具有巨大潜力，但也引发了伦理和安全争议。请回答下列问题： (1)有些细胞中没有编码cas9酶的基因，可利用基因工程的方法构建 ，通常通过 载体导入细胞。 （2）CRISPR/Cas9中sgRNA分子的序列与基因组DNA中特定碱基序列通过 可以彼此结合在一起，而Cas9酶是一种 酶，可催化 键水解，实现对DNA序列的定向切割。 （3）该技术若用于人类生殖细胞（如受精卵）的编辑，所产生的遗传改变可能会________ 。 （4）有人认为“设计完美婴儿”违背了伦理道德，请从科学或社会角度提出一条反对理由： 。 （6） 编辑人类婴儿基因的行为会遭到了科学界的强烈谴责，因为_____________________ _ （写出两点）。 学科网（北京）股份有限公司 $ 高中生物选择性必修三《生物技术与工程》期末测试卷 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 答案 D B C B C C C B C B A A D C A D 1.答案：D 解析： · A错误。苹果酒发酵利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精，但发酵初期（酵母菌大量繁殖阶段）需要少量氧气，因此通常先通气后密闭；“全程保持无氧”说法不严谨。定期打开瓶盖是为了排出CO₂，防止气压过高。 · B错误。醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30～35℃；18～25℃是酵母菌发酵的适宜温度。醋酸发酵需要持续通入无菌空气，因为醋酸菌是好氧菌。 · C错误。用血细胞计数板在显微镜下直接计数，无法区分死菌和活菌，统计结果为总菌数（包括死菌和活菌）。要获得活菌数，需结合染色（如台盼蓝染色，死菌被染成蓝色）或采用稀释涂布平板法。 · D正确。醋酸菌产生的醋酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈。因此，在醋酸盐培养基上出现透明圈的菌落，很可能是醋酸菌。 核心考点： 传统发酵技术（果酒、果醋）的条件控制；显微镜直接计数法的局限性；醋酸菌的鉴别筛选原理。 易错点： 误以为血细胞计数板可直接计活菌数；混淆果酒和果醋的发酵温度。 2. 答案：B 解析： · A错误。蛋白胨和牛肉膏含有丰富的碳源和氮源，虽然含有纤维素，但微生物会优先利用蛋白胨等易利用的碳源，无法达到筛选分解纤维素细菌的目的。 · B正确。以纤维素为唯一碳源，不含其他碳源（如葡萄糖），只有能分解纤维素的细菌才能生长。(NH4)2SO4提供氮源，KH2PO4和MgSO4提供无机盐，琼脂为凝固剂，该配方符合选择培养基的原则。 · C错误。葡萄糖是易利用的碳源，不能筛选分解纤维素的细菌。 · D错误。同时含有纤维素和葡萄糖，微生物会优先利用葡萄糖，筛选效果不佳。 核心考点： 选择培养基的设计原理——以特定物质为唯一碳源或氮源。 易错点： 误以为只要含有纤维素就能筛选，忽略其他碳源的存在会干扰筛选。 3.答案：C 解析： · A正确。紫外线照射能破坏微生物的DNA结构，常用于接种室、超净工作台等空间的空气和表面消毒。 · B正确。金属接种工具（如接种环、接种针）使用前后常用灼烧灭菌法，温度高、效果好、操作方便。 · C错误。培养皿（玻璃或塑料）可用干热灭菌（160～170℃、2小时），但培养基（含水分和营养物质）必须用高压蒸汽灭菌法（121℃、15～30分钟），否则培养基会焦化或成分被破坏。 · D正确。75%酒精能迅速杀死皮肤表面的部分微生物，常用于手部消毒。 核心考点： 消毒与灭菌的区别；不同灭菌方法的适用范围。 易错点： 混淆培养基与玻璃器皿的灭菌方法；误认为干热灭菌适用于一切物品。 4.答案：B 解析： · A正确。植物组织培养中，外植体需进行表面消毒，常用70%酒精（30秒左右）和次氯酸钠溶液（5～10分钟）先后处理，再用无菌水多次冲洗。 · B错误。植物组织培养需要将愈伤组织再分化形成完整植株，才能获得某些产物（如种子、果实）；而植物细胞培养（如液体悬浮培养）只需愈伤细胞大量增殖即可从培养液中提取次生代谢产物（如甜菊糖苷、紫杉醇等），不需要再分化。 · C正确。液体悬浮培养时，细胞代谢会产生有毒废物（如乳酸、酚类化合物），同时消耗营养，定期更换培养液可补充营养、避免代谢物积累。 · D正确。从培养液中提取甜菊糖苷，说明该物质被分泌到细胞外，属于胞外产物。 核心考点： 植物组织培养与植物细胞培养的区别；次生代谢产物的获取方式。 易错点： 误认为所有植物培养都必须经历再分化。 5.答案：C 解析： · A正确。植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，用纤维素酶和果胶酶处理可去除细胞壁，获得原生质体。 · B正确。诱导原生质体融合的方法包括物理法（电融合）和化学法（聚乙二醇PEG、高Ca²⁺高pH等）。 · C错误。杂种植株虽含有番茄和马铃薯的全部遗传物质，但基因表达受到复杂的调控，不一定能同时表现出双亲的所有性状。实际实验中，“番茄—马铃薯”杂种植株往往不结番茄也不长马铃薯。 · D正确。过程④是再分化阶段，需要调整生长素与细胞分裂素的比例来诱导芽或根的分化（生长素/细胞分裂素比值高诱导生根，比值低诱导生芽）。 核心考点： 植物体细胞杂交技术流程及局限性；植物激素对分化的调节。 易错点： 误以为杂种植株一定能表现所有双亲性状。 6.答案：C 解析： · A错误。动物细胞培养的气体环境是95%空气（提供O₂）和5% CO₂（维持培养液pH），不是95% O₂（纯氧会对细胞造成损伤）。 · B错误。传代培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理贴壁细胞，使细胞分散成单个细胞；胃蛋白酶的最适pH约为2，在中性pH下失活，不适用于细胞培养。 · C正确。原代培养的细胞（正常二倍体细胞）一般传至10代左右会出现接触抑制——细胞长满瓶壁后停止分裂。这是正常细胞的特性。 · D错误。传代至50代以上的细胞往往会发生癌变或遗传物质改变（核型异常），成为无限传代细胞系。 核心考点： 动物细胞培养的条件、传代操作和细胞特性。 易错点： 混淆胰蛋白酶与胃蛋白酶；误认为传代细胞可无限保持正常核型。 7.答案：C 解析： · A错误。选择培养基只能筛选出杂交瘤细胞，筛选出分泌单一抗体的杂交瘤细胞要用抗体检测。 · B错误。双杂交瘤细胞由两个杂交瘤细胞融合而成，HAT培养基为选择培养基，只能筛选出杂交瘤细胞，确定是否为双杂交瘤细胞。 · C正确，双杂交瘤细胞能同时合成两种不同抗体，说明双杂交瘤细胞中含有两个不同的抗体基因且都都表达 · D错误。双特异性抗体可同时识别两种不同的抗原，而非一种。题中“只能识别一种抗原”表述错误。 核心考点： 单克隆抗体制备原理；杂交瘤细胞的筛选；双特异性抗体的概念。 易错点： 误以为双特异性抗体特异性更强（实际是能结合两种抗原，特异性更广）；混淆两次筛选的目的和方法。 8.答案：B 解析： · A错误。受精卵在输卵管内进行卵裂，细胞数量增加，但胚胎总体积基本不变（或略有减小），因为卵裂期细胞分裂不伴随细胞生长。 · B正确。桑葚胚的细胞均为全能细胞，尚未分化；囊胚期出现内细胞团（将来发育为胎儿）和滋养层（将来发育为胎膜和胎盘），细胞开始分化。 · C错误。孵化是指囊胚从透明带中伸展出来的过程，发生在囊胚期，不是囊胚期透明带破裂（透明带破裂是孵化的一部分，但表述不准确）。 · D错误。原肠胚已着床后，包含外胚层、中胚层、内胚层和原肠腔，不再有内细胞团和滋养层（这些是囊胚的结构）。 核心考点： 哺乳动物早期胚胎发育各阶段的特点。 易错点： 混淆囊胚和原肠胚的结构；误以为卵裂期胚胎总体积增大。 9.答案：C 解析： · A正确。采集到的卵母细胞需在体外培养至减数第二次分裂中期（MⅡ中期）才能被精子受精。 · B正确。精子需要获能后才能获得受精能力，获能方法包括培养法（用获能液）和化学法（用肝素等）。 · C错误。胚胎发育到桑葚胚或囊胚阶段可进行移植，原肠胚已着床，移植后难以存活。注意题目要求选“错误的”，C错误。 · D正确。早期胚胎培养液成分复杂，包括无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等。 核心考点： 体外受精的条件；胚胎移植的时期。 易错点： 误认为原肠胚也可移植。 10.答案：B 解析： · A错误。胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，原肠胚已分化严重，分割后不易恢复。 · B正确。对囊胚进行分割时，需将内细胞团均等分割，否则分割后胚胎的发育能力会受影响。 · C错误。供体母畜应注射促性腺激素（如FSH、PMSG）进行超数排卵，孕激素用于胚胎移植后的保胎。 · D错误。胚胎移植时，受体母畜一般不会对移入的胚胎发生免疫排斥，因为胚胎在母体子宫内受到免疫保护，无需进行免疫检查。 核心考点： 胚胎分割的材料选择和技术要点；超数排卵的激素种类；胚胎移植的免疫学基础。 易错点： 混淆促性腺激素与孕激素；误认为胚胎移植需要免疫检查。 11.答案：A 解析： · A正确。限制酶能识别特定的DNA序列，并在序列内部或附近切开磷酸二酯键，产生黏性末端（交错切口）或平末端（齐平切口）。 · B错误。不同限制酶切割产生的黏性末端有可能互补配对，例如BamHI和BglII切割后产生的黏性末端可以相互连接。 · C错误。E.coli DNA连接酶只能连接黏性末端；T4 DNA连接酶既能连接黏性末端也能连接平末端。 · D错误。DNA连接酶催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不能将单个脱氧核苷酸连接到DNA片段上（那是DNA聚合酶的功能）。 核心考点： 限制酶和DNA连接酶的作用特点。 易错点： 混淆DNA连接酶与DNA聚合酶；误以为不同限制酶的黏性末端不能互补。 12.答案：A 解析： · A正确。获取目的基因的方法包括：从基因文库中获取、PCR扩增、人工化学合成、逆转录合成cDNA等。 · B错误。启动子是DNA片段，位于基因上游，是RNA聚合酶结合的部位；起始密码子是mRNA上的三个碱基（AUG），位于翻译起始位置，不是DNA片段。 ·C错误，将目的基因导入动物受精卵常用显微注射法，农杆菌转化法适用于植物细胞。 · D错误，检测到目的基因只代表DNA水平整合成功，还需检测是否转录出mRNA和是否翻译出蛋白质，才能说明转基因成功。 核心考点： 基因工程操作四步骤；启动子与起始密码子的区别；受体细胞类型与导入方法的对应；转基因成功的检测标准。 易错点： 混淆启动子与起始密码子；误认为CaCl₂法适用于所有受体细胞；误认为检测到目的基因即代表转基因成功。 13答案：D 解析： · A正确。PCR反应体系需要热稳定的DNA聚合酶（如Taq酶）、一对引物、四种脱氧核苷酸（dNTP）、模板DNA和缓冲液（含Mg²⁺）。 · B正确。PCR三个步骤的温度：变性（90℃以上，双链解开）、复性（50℃左右，引物与模板结合）、延伸（72℃左右，Taq酶活性最高）。 · C正确。PCR是指数扩增，第n轮循环后，理论上DNA分子数为2^n个（起始为1个双链DNA分子时）。 · D错误。引物与模板链的3'端结合（通过碱基互补配对），DNA聚合酶从引物的3'端开始延伸子链（因为聚合酶催化方向是5'→3'，需要3'-OH作为起始）。 核心考点： PCR的原料、温度设定、扩增原理、引物结合方向。 易错点： 误认为引物结合在模板的5'端或DNA聚合酶从5'端延伸。 14.答案：C 解析： · A正确。转基因作物的花粉可能将目的基因传递给近缘杂草，造成基因污染，这是转基因生物安全性的重要关注点。 · B正确。转基因微生物可能产生新的蛋白质，其中部分可能成为过敏原，引发过敏反应。 · C错误（不合理）。严格管理可以降低风险，但由于生态系统的复杂性和科学认识的局限性，无法完全杜绝所有风险。该说法过于绝对。 · D正确。我国对转基因生物的管理坚持“谨慎推广、依法管理”的原则，既积极研究，又严格监管。 核心考点： 转基因生物安全性的主要问题；我国的管理原则。 易错点： 误认为可以完全杜绝风险。 15.答案：A 解析： · A正确。试管婴儿技术包括体外受精和胚胎移植，精子和卵子在体外结合形成受精卵，属于有性生殖。 · B错误。克隆动物（如体细胞核移植）是将体细胞核移入去核卵母细胞中，不涉及精子和卵子的结合，属于无性生殖。 · C错误。试管婴儿的早期胚胎在体外培养到桑葚胚或囊胚阶段即移植入母体子宫，不需要完成全部早期发育；克隆动物同样不需要在体外完成全部早期发育。 · D错误。试管婴儿体现了受精卵的全能性，但未体现动物细胞的全能性（动物体细胞核全能性在克隆动物中得到体现）。 核心考点： 试管婴儿与克隆动物的生殖方式区别；全能性的理解。 易错点： 混淆试管婴儿与克隆的生殖方式；误认为两者都体现细胞全能性。 16. 答案：D 解析： · A错误。逆转录法是以mRNA为模板合成cDNA，不能直接从基因组DNA中扩增获得目的基因。从基因组DNA中扩增目的基因应使用PCR技术。 · B错误。构建基因表达载体时，仅将目的基因插入质粒是不够的，完整的基因表达载体还需要包括启动子（驱动转录）、终止子（终止转录）、标记基因（筛选重组子）等元件。 · C错误。CaCl₂处理法（制备感受态细胞）适用于部分细菌（如大肠杆菌），不适用于植物细胞。将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法或基因枪法。 · D正确。外源基因能在受体细胞中稳定遗传（传递给子代细胞），说明该基因已整合到受体细胞的染色体DNA中，否则会被降解或丢失。 核心考点： 目的基因的获取方法（逆转录vs PCR）；基因表达载体的组成；将目的基因导入不同受体细胞的方法；外源基因稳定遗传的条件。 易错点： 误认为逆转录法可直接从基因组DNA中扩增；误认为仅插入质粒即可完成表达载体构建；误认为CaCl₂法适用于植物细胞。 17.(10分，每空1分） （1）酪蛋白（或不溶性酪蛋白） 透明圈 鉴别 （2）透明圈直径 / 菌落直径（或“水解圈直径与菌落直径之比”） （3） ① 大于 显微镜直接计数法将死菌和活菌均计数在内，而稀释涂布平板法只能计数活菌 ② 总菌数量 活菌数量 ③ 105 2.0 ×107 个/mL 解析：（1）在培养基中加入酪蛋白（一种不溶性蛋白质，使培养基呈乳白色、不透明），若细菌产蛋白酶，则菌落周围的酪蛋白被分解，形成透明圈。 该培养基允许多种细菌生长，但通过透明圈现象鉴别产酶菌，因此属于鉴别培养基（2）比较产酶能力高低 （2）产酶能力越强，分解酪蛋白范围越大，透明圈直径（D） 越大。但菌落大小（d）也会影响绝对圈径，因此用 D / d 比值 来衡量相对产酶能力。 （3）①显微镜直接计数法将死菌和活菌均计数在内，而稀释涂布平板法只能计数活菌因此前者结果 大于 后者 ② 总菌数量 → 显微镜直接计数法（不区分死活）。 活菌数量 → 稀释涂布平板法（菌落数代表活菌）。 ③ 稀释度 菌落数（平均值） 是否可用 10^4 (345+356+351)/3 ≈ 351 过多（>300），不可用 10^5 (42+38+40)/3 = 40 30~300，可用 10^6 (5+4+6)/3 = 5 过少（<30），不可用 平均菌落数 = 40 个 涂布体积 = 0.2mL → 每 mL 稀释液中活菌数 = 40 \ 0.2 = 200 个 稀释倍数 = 105 → 原液活菌浓度 = 200×105 = 2.0 ×107 个/mL 18（10分，除特殊标记外，每空1分） （1） 人肌红蛋白 B淋巴 （2） 聚乙二醇（或“PEG”）  （3） 克隆化培养 抗体检测（或“抗体阳性检测”） （4） 腹水  特异性强、灵敏度高、可大量制备（2分，答出两点即可） （5）人肌红蛋白   特异性强（或“灵敏度高”，答出一点即可） 解析 （1）根据题干“制备抗人肌红蛋白单克隆抗体”，可知注射的抗原是人肌红蛋白，用于刺激小鼠产生特异性免疫反应；注射抗原后，小鼠体内能产生特定抗体的细胞是B淋巴细胞 （2）诱导B细胞与骨髓瘤细胞融合的常用化学试剂是聚乙二醇（PEG）； （3）第二次筛选的目的是从众多杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体（抗人肌红蛋白抗体）的细胞，具体包括两步： 克隆化培养：将杂交瘤细胞稀释培养，确保每孔不超过1个细胞，实现单克隆增殖； 抗体检测：检测各孔培养上清液中是否含有目标抗体。两者结合才能获得能稳定分泌所需抗体的杂交瘤细胞株。 （4）将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔，细胞在腹腔内大量增殖并分泌抗体，几天后可抽取腹水提取单克隆抗体；单克隆抗体的三大优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。答出任意两点即可得2分。 （5）急性心肌梗死时，心肌细胞受损释放人肌红蛋白进入血液，因此诊断试剂盒利用抗人肌红蛋白单克隆抗体检测患者血清中的人肌红蛋白抗原。 ；单克隆抗体具有特异性强（只结合人肌红蛋白，不结合其他蛋白）和灵敏度高（微量抗原即可检测）的特点，适合用于早期诊断。答出一点即可得1分。 19. （10分）除特殊标记外，每空1分 （1）促性腺 （2）精子尚未获能；透明带；卵细胞膜 （3）滋养层；胎膜和胎盘；细胞小、核大、核仁明显 （4）胚胎移植；受体母牛子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应（2分） 解析 （1）在胚胎工程中，为了从供体母牛获得更多的卵母细胞，通常注射促性腺激素，使母牛一次排出多个卵子。 （2）从公牛体内采集的精子尚未完成获能过程，不能直接与卵子结合。获能是指精子在雌性生殖道中发生生理变化，获得受精能力。防止多精入卵的两道屏障：透明带反应：当第一个精子进入卵子后，卵子释放皮质颗粒内容物，使透明带结构改变，阻止其他精子穿过； 卵细胞膜反应（也称卵黄膜反应）：卵子质膜发生去极化等变化，阻止更多精子进入。 （3）囊胚分为滋养层和内细胞团。性别鉴定取滋养层细胞，因为内细胞团将发育为胎儿本体，不可随意损伤。滋养层细胞与胎儿遗传组成相同，可安全取样进行DNA分析；滋养层最终发育为胎膜和胎盘，为胎儿提供营养和保护；内细胞团细胞属于胚胎干细胞，形态上具有细胞小、核大、核仁明显的特点，这是多能干细胞在光镜下的典型特征。 （4）图中④过程是将早期胚胎移入受体母牛子宫，属于胚胎移植技术；荷斯坦牛的胚胎能在本地母牛子宫内存活，生理学基础是受体母牛子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。 20.（12分，除特殊标记外，每空1分） （1） 胰岛B细胞 逆转录  脱氧核苷酸（或“碱基”） （2） 限制（或“限制性内切核酸酶”）  黏性末端  鉴别和筛选含有目的基因的受体细胞（1分） （3） Ca²⁺（或“氯化钙”） 分子杂交（或“核酸分子杂交”） （4）  大肠杆菌是原核生物，缺乏内质网和高尔基体，无法对胰岛素进行加工修饰（2分） （5） 2  3'  解析 （1）胰岛素基因只在胰岛B细胞中特异性表达，因此从该细胞中提取的mRNA中胰岛素mRNA含量最高，便于后续逆转录获得cDNA。若写“胰岛”也可酌情给分；以mRNA为模板，在逆转录酶催化下合成互补DNA（cDNA）的过程称为逆转录；根据已知的氨基酸序列，结合遗传密码表反推mRNA的碱基序列，再进一步推测DNA的脱氧核苷酸序列，从而通过化学合成法直接合成目的基因。 （2）限制性内切核酸酶（简称限制酶）能识别特定的DNA序列并进行切割，是构建重组DNA分子的关键工具；用同种限制酶切割目的基因和质粒，会产生相同的黏性末端（少数情况下为平末端），通过碱基互补配对和DNA连接酶的作用，可将两者连接成重组质粒；标记基因（如抗生素抗性基因、荧光蛋白基因等）用于区分成功导入目的基因的受体细胞与未导入的细胞，实现对重组细胞的鉴别与筛选。 （3）用氯化钙（CaCl₂）处理大肠杆菌，可增加细胞膜的通透性，使细胞处于一种能够摄取外源DNA的状态，即感受态细胞；检测特定mRNA是否存在，常用的方法是分子杂交技术。具体操作：提取细胞总RNA，与标记的胰岛素基因探针（放射性或荧光标记）进行杂交，若出现杂交信号则说明胰岛素基因已经成功转录。 （4）大肠杆菌属于原核生物，细胞内没有内质网和高尔基体，无法对胰岛素前体进行肽链剪切、二硫键正确配对以及糖基化等加工修饰，因此直接表达的胰岛素不具有生物活性； （5）PCR扩增需要两种引物，分别与目的基因两条链的3'端序列互补；DNA聚合酶只能从引物的3'端开始延伸新链，因此引物必须与模板链的3'端结合（即引物的3'端指向模板链延伸方向）。这是PCR反应的基本原理。 21.（10分。除特殊标记外每空1分） （1）基因表达载体 质粒 （2） 碱基互补配对 限制（限制性核酸内切） 磷酸二酯 （3）该技术若用于人类生殖细胞（如受精卵）的编辑，所产生的遗传改变可能会传递给后代，引发不可预测的遗传缺陷（2分） （4）可能会加剧社会不平等（或：违背自然规律；或目前技术尚不成熟；或可能造成基因歧视等） （5）(5)基因编辑技术还不成熟，基因编辑的风险巨大；不能利用人体做实验，违背伦理。（答出1点给1分，共2分） 解析 （1）基因工程步骤的核心是基因表达载体构建；载体有质粒，动植物病毒和λ噬菌体的衍生物等。 （2）DNA中特定碱基序列通过碱基互补配对可以彼此结合在一起，A和T配对，C和G配对；Cs9酶是一种限制酶（限制性核酸内切酶），作用部位为磷酸二酯键。 （3）该技术若用于人类生殖细胞（如受精卵）的编辑，所产生的遗传改变可能会传递给后代，引发不可预测的遗传缺陷（2分） （4）设计完美婴儿可能会加剧社会不平等（或：违背自然规律；或目前技术尚不成熟；或可能造成基因歧视等） (5)基因编辑技术还不成熟，基因编辑的风险巨大；不能利用人体做实验，违背伦理。 学科网（北京）股份有限公司 $Sheet1 高中生物选择性必修三《生物技术与工程》期末测试卷 题号 题型 分值 考查知识点 核心素养 难度系数(预估） 1 单向选择题 3 发酵工程 （果酒、果醋发酵条件控制；血细胞计数板直接计数法局限性；醋酸菌鉴别 科学探究 0.7 2 单向选择题 3 发酵工程 （选择培养基设计） 科学思维 0.65 3 单向选择题 3 无菌技术（消毒与灭菌的区别、不同灭菌方法的适用范围） 社会责任 0.85 4 单向选择题 3 细胞工程 （植物组织培养与植物细胞培养的区别；外植体消毒；液体悬浮培养；次生代谢物） 科学思维 0.6 5 单向选择题 3 细胞工程 （植物体细胞杂交） 生命观念 0.65 6 单向选择题 3 细胞工程 （动物细胞培养） 科学探究 0.6 7 单向选择题 3 细胞工程 （单克隆抗体制备） 科学思维 0.45 8 单向选择题 3 胚胎工程 （哺乳动物早期胚胎发育（卵裂期特点、桑葚胚与囊胚分化） 生命观念 0.65 9 单向选择题 3 胚胎工程 （体外受精与早期胚胎培养） 科学探究 0.6 10 单向选择题 3 胚胎工程 胚胎分割与胚胎移植 科学思维 0.55 11 单向选择题 3 基因工程 基因工程工具（限制酶切割位点、同尾酶概念、DNA连接酶类型区别、连接酶与聚合酶区别） 科学思维 0.6 12 单向选择题 3 基因工程 基因工程操作流程（目的基因获取、运载体条件、导入方法适用对象、检测方法对应） 科学思维 0.55 13 单向选择题 3 PCR技术（反应体系、温度设定、扩增原理、引物结合方向与延伸方向） 科学探究 0.5 14 单向选择题 3 转基因生物安全性（基因污染、过敏原、风险管理及我国管理原则） 社会责任 0.8 15 单向选择题 3 试管婴儿与克隆动物对比（生殖方式、技术应用、全能性体现） 生命观念 0.65 16 单向选择题 3 基因工程 基因工程综合应用 科学思维 0.55 17 非选择题 10 产蛋白酶细菌分离与计数（教材实验类比、培养基设计、稀释涂布平板法计数、透明圈比值比较、两种计数方法对比） 科学探究 0.6 18 非选择题 10 细胞工程 （单克隆抗体制备流程：抗原注射、细胞融合、HAT筛选、克隆化培养、抗体检测、腹水提取、抗体优点） 科学思维 0.5 19 非选择题 10 胚胎工程综合（超数排卵、体外受精、防多精入卵、移植时期、同期发情、胚胎分割、） 社会责任 0.6 20 非选择题 12 基因工程 基因工程生产胰岛素（目的基因获取、表达载体构建、导入与检测、原核表达局限性、PCR) 科学思维 0.48 21 非选择题 10 伦理综合 CRISPR基因编辑（限制酶类比、生殖细胞编辑风险、设计婴儿伦理) 社会责任 0.65 Sheet2 Sheet3 $