山东省滨州市2025-2026学年高二生物下学期阶段测试（人教版必修1+选择性必修3）

**基本信息** 这份高二生物阶段测试卷（必修1+选择性必修3）以分子与细胞和生物技术与工程为核心，通过鼻咽癌分泌蛋白、3D细胞培养等原创科技情景题，融合图表分析与实验探究，实现知识覆盖与能力考查的统一。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选|15/30|细胞结构（核糖体/囊泡）、物质运输（Na⁺-K⁺泵）、酶活性|原创情景（环境污染物心脏毒性）、图表分析（温度对酶活性影响）| |多选|5/15|光反应（PSⅡ）、端粒酶、微生物培养|跨模块综合（光抑制与光呼吸）、实验评价（TTC筛选高产菌株）| |非选择|5/55|细胞呼吸（运动强度）、植物细胞培养（罗汉果甜苷）、基因工程（解钾菌表达载体）|实验设计（接种量对培养效果影响）、生态风险分析（转基因解钾菌）|

应用场景：山东省滨州市高二下学期阶段测试（其他地区若不符合可自行修改） 山东省滨州市高二生物下学期阶段测试 人教版必修1+选择性必修3 分子与细胞+生物技术与工程 （考试时间：90分钟，分值：100分） 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1.生物分子凝聚体是细胞内由蛋白质、核酸等生物大分子聚集而成的无膜包被的特殊结构，广泛参与多种生命活动。下列不属于生物分子凝聚体的是 A.核糖体 B.细胞骨架 C.酶与底物结合 D.囊泡 2.（原创，新情景）鼻咽癌发病过程中,肿瘤细胞可分泌某些蛋白分子参与癌细胞间的信息调控,改变微环境使之有利于癌细胞的转移。这些蛋白分子是指由细胞合成并分泌到细胞外的蛋白,主要通过体液循环作用于目标细胞和目标器官,被称为细胞分泌蛋白。下列说法正确的是 A.鼻咽癌细胞分泌该蛋白质的过程依赖生物膜的选择透过性 B.利用放射性同位素标记法，研究细胞分泌蛋白的合成与运输 C.细胞分泌蛋白的分泌参与细胞间的信息调控，不需要膜蛋白参与 D.内质网对蛋白质进行初步加工，是囊泡运输过程中的交通枢纽 3.Na+- K+泵维持了细胞Na+的电化学梯度，Na+顺浓度提供的能量驱动葡萄糖转运载体，将肠腔中的葡萄糖转运进入小肠上皮细胞（如图所示）。下列说法错误的是 A.Na+- K+泵转运 Na+、K+时需要消耗能量 B.葡萄糖进入小肠上皮细胞的方式属于主动运输 C.若抑制Na+- K+泵的活性，不会影响小肠上皮细胞吸收葡萄糖的速率 D.葡萄糖转运载、Na+- K+泵转运相应的物质时，其构象均会发生变化 4.（原创，新情景）近年来，环境污染物对机体的心脏毒性作用引起广泛关注。细胞凋亡是诱导心脏毒性的关键因素，化合物诱导细胞凋亡过程中存在胞质内Ca2+浓度升高的现象,蛋白激酶Ｂ（Akt）通过调节细胞内Ca2+ 浓度波动调控心肌细胞凋亡，从而影响化合物的心脏毒性作用。下列说法错误的是 A.已凋亡的细胞会被溶酶体合成的水解酶降解 B.环境污染物诱导的心肌细胞凋亡，受凋亡相关基因的调控 C.清除受损的心肌细胞，有利于维持内环境稳态 D.Akt可能通过阻止细胞质中Ca2+ 浓度升高，抑制细胞凋亡 5.为探究温度对酶活性的影响，某同学选择酶A、B在不同温度下分别催化底物C反应，结果如图所示。下列说法正确的是 A.酶A和酶B催化底物C时提高化学反应的活化能 B.实验的自变量是温度，因变量是加入酶后底物剩余量 C.酶A和酶B适宜在低温、低pH条件下保存 D.酶A和酶B在催化反应完成后性质不发生改变 6.我国科研团队研发出线粒体胶囊移植技术，将健康线粒体包裹于囊泡中，可安全高效递送至细胞与组织，显著改善帕金森症、利氏综合征等疾病症状。下列说法正确的是 A.丙酮酸在健康线粒体需要O2的参与，分解释放CO2 B.该健康线粒体合成的ATP来自其内膜 C.有氧呼吸第三阶段所需的[H]都来自有氧呼吸第一、二阶段 D.移植进入细胞的线粒体可无限增殖 7.“绿叶中色素的提取和分离”实验操作中，下列说法正确的是 A.无水乙醇作为有机溶剂可用体积分数为95%的乙醇加入适量无水碳酸钠替代分离色素 B.应在滤纸条上连续不间断地进行加样，使实验结果更显著 C.研磨时加入二氧化硅可以防止叶绿素被氧化破坏 D.滤液细线不能触及层析液 8.某种药物对癌细胞增殖有一定的影响，为探究其作用原理，分别将癌细胞在普通培养基和添加了该药物的培养基中培养一段时间后，测定核DNA含量与细胞数量，实验结果如图。据此推测该药物影响细胞分裂的作用机制为 A.抑制纺锤体形成，使细胞停滞在分裂期 B.抑制分裂间期核DNA复制 C.促进细胞从分裂间期进入分裂期 D.促进细胞质分裂，加快细胞增殖 9.（原创，新情景）研究人员采用水果龙眼和特色药材五指毛桃为原料，采用酿酒酵母为发酵菌株进行低温发酵，制备出口感气味宜人的复合果酒。工艺流程：①五指毛桃→净制、干燥→粉碎→过筛→五指毛桃细粉；②龙眼→清洗、去皮、去核→打浆→过滤→龙眼汁；①+②→接种酵母→复合发酵→过滤、离心→龙眼五指毛桃复合果酒。下列说法正确的是 A.龙眼打浆时加入胰蛋白酶提高出汁率 B.龙眼五指毛桃复合果酒发酵过程中温度控制在18～30℃ C.①+②接种酵母发酵过程中，需创造密闭的环境 D.复合发酵过程中为使菌种吸收营养物质，需每日多次开盖搅拌 10. 如图是利用甲、乙两种植物通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐杂种植株的流程图。下列说法错误的是 A.除PEG诱导甲、乙原生质体融合外，还可采用高Ca2+-高pH融合法 B.c 过程中杂种细胞再生出细胞壁，标志着细胞融合完成 C.愈伤组织经脱分化和再分化获得c，一般不需要光照 D.进行d过程时将植株种植在高盐的环境中，筛选出耐盐植株 11.（原创，新情景）近年来，三维（3D）细胞培养技术在骨组织再生和骨肿瘤等领域均有广泛应用。3D细胞培养技术是一种仿生的细胞培养技术，其核心在于体外模拟体内复杂的细胞微环境，3D培养的干细胞为骨组织的修复和替代提供了新策略，患者来源的细胞可以整合到3D培养系统中，为精准诊疗的开发和提供了体外模型。下列说法错误的是 A.3D细胞培养应置于95%的空气和5%的CO2的气体环境中进行培养 B.在体外培养3D 细胞时，必须保证无菌、无毒的环境 C.利用患者细胞培养出干细胞分化出的骨组织细胞移植后会发生免疫排斥 D.运用3D细胞培养技术培育动物器官或组织，开创人类疾病治疗的新方法 12.（原创，新情景））鸭短喙矮小综合征是由鹅细小病毒变异株——鸭短喙矮小综合征病毒（SBDSV）引起的一种水禽新发传染病，主要感染1月龄以内的雏鸭。科研人员为建立一种快速检测鸭短喙矮小综合征病毒的方法，给小鼠注射灭活的SBDSV后，获得单克隆抗体。下列说法错误的是 A.向小鼠注射灭活的SBDSV是为了诱导其产生更多抗SBDSV抗体 B.制备SBDSV的抗体应用了动物细胞融合和动物细胞培养等技术 C.用特定的选择培养基进行筛选，只有融合的杂交瘤细胞才能生长 D.抗SBDSV抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞可在体外进行大规模培养 13.如图为我国科学家培育世界首例体细胞克隆猴 “中中”“华华” 的流程示意图，下列说法错误的是 A.将体细胞注入去核卵母细胞中，可用电融合法使两细胞融合 B.卵母细胞进行去核时，注意不要破坏其纺锤体结构避免细胞损伤 C.用物理或化学方法激活重构胚，使其完成生长发育进程 D.克隆小猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性 14.关于“DNA粗提取与鉴定”“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验过程与结果，下列说法正确的是 A.将洋葱研磨液离心后保留沉淀物，便于收集DNA B.二苯胺试剂与DNA混匀后，溶液变为蓝色 C.将琼脂糖熔化后，直接加入适量的核酸染料并进行混匀 D.PCR实验中使用的微量离心管、蒸馏水等在使用前必须灭菌处理 15.（原创，新情景）某科研人员从垃圾站附近发现了“能吃塑料”的细菌，并从中分离出降解酶。该酶能在30℃ 下6周内几乎把塑料膜完全降解。采用蛋白质工程通过定点突变改造塑料降解酶化获取高效－塑料降解酶。下列说法正确的是 A.蛋白质工程的操作起点是塑料降解酶的氨基酸序列 B.对塑料降解酶的改造最终还必须通过改造基因来完成 C.可直接对塑料降解酶的空间结构进行改造 D.蛋白质工程只能生产自然界中存在的蛋白质 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16.当光照过强，植物吸收的光能超过光合作用所能利用的量时，引起光能转化效率下降的现象称为光抑制。光抑制主要发生在PSⅡ，PSⅡ是由蛋白质和光合色素组成的复合物，能将水分解为O2和H+并释放电子。电子积累过多会产生活性氧使PSⅡ变性失活，使光合速率下降。研究人员利用能接收电子的人工电子梭(铁氰化钾)有效解除微藻的光抑制现象，实验结果如图所示。下列说法正确的是 A.PSⅡ分布在叶绿体类囊体薄膜上，可参与光反应阶段 B.Ⅰ1～Ⅰ2随光照强度的增加，对照组微藻的光能转化效率不变 C.施加铁氰化钾可及时转运多余电子，减少活性氧生成 D.光抑制发生后，暗反应速率加快以消耗更多光反应产物 17. 端粒是染色体末端一段高度简单重复的核苷酸序列和蛋白质组成的复合体，在分裂的细胞中，端粒会随着分裂次数的增加而缩短。而端粒核苷酸序列的合成只能在端粒酶（由RNA和蛋白质组成）催化下完成，端粒酶作用过程如下图。下列分析正确的是 A．端粒酶是一种逆转录酶，以RNA为模板合成端粒核苷酸序列 B．一般情况下，胚胎细胞中端粒酶活性低于神经细胞 C．若干细胞中端粒酶活性降低，端粒随分裂缩短而致细胞衰老 D．增强端粒酶合成基因的表达可为研发癌症治疗药物提供依据 18. 三孢布拉霉菌能生产胡萝卜素，其细胞内的[H]可将无色的TTC还原为红色复合物，且细胞内[H]含量越高，还原能力越强，胡萝卜素合成能力也越强。研究人员筛选胡萝卜素高产菌株的流程如图所示，下列说法正确的是 A. 可采用湿热灭菌法对多次纯化培养的培养基进行灭菌处理 B．对照组需涂布等量的无菌水以判断培养基是否被污染 C．步骤④中涂布的菌液的稀释倍数为104倍 D．培养基甲中，A菌落合成胡萝卜素的能力较强 19.大肠杆菌pUC118质粒是基因工程中常用的一种运载体，具有氨苄青霉素抗性基因，该质粒中某限制酶的唯一切点位于lacZ基因中。在特定的选择培养基中，若lacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若lacZ基因被破坏，则菌落呈白色。下列说法错误的是 A．试管1中应加入DNA连接酶处理 B．试管2中需要使用Ca2+处理大肠杆菌，以便重组载体导入不含lacZ基因的大肠杆菌 C．若大肠杆菌的菌落为蓝色，则质粒未导入大肠杆菌 D．培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素 20.（原创，新情景）子囊霉素（FK520）是由吸水链霉菌产生的23元大环内酯类抗生素，具有高效免疫抑制活性。为 了提高其发酵水平，降低生产成本，首先采用核糖体工程诱变和紫外诱变结合的复合诱变方法进行菌种选育，利用发酵工程成功获得子囊霉素高产菌株。下列说法正确的是 A.为缩短发酵周期，接种前需要对吸水链霉菌进行扩大培养 B.发酵工程的菌种只可以来自诱变育种和基因工程育种 C.诱变处理后需进行筛选才能获得稳定遗传的高产菌株 D.采取适当的提取、分离和纯化措施获得子囊霉素 3、 非选择题：本题共5小题，共55分。 21.体育运动大体可以分为有氧运动和无氧运动。有氧运动过程中骨骼肌主要靠有氧呼吸供能，如慢跑。无氧运动过程中骨骼肌除进行有氧呼吸外，还会进行无氧呼吸，如短跑等。如图为有氧呼吸的某个阶段的示意图。 (1)图示过程是有氧呼吸的第______阶段。人在短跑时，产生CO2的具体部位是_______，而人在慢跑时，消耗的O2在细胞呼吸中的用途是_______________。 (2)据图可知，H+沿着线粒体内膜上的ATP合成酶内部的通道流回线粒体基质，推动某物质（A）合成ATP，则A为________。有的减肥药物能够增加线粒体内膜对H+的通透性，使得H+回渗到线粒体基质，推动ATP合成酶生成的ATP量减少，该药物能够加快体内有机物的消耗，但会严重危害健康，具体危害是____________（答1点即可）。 (3)有氧呼吸是在无氧呼吸的基础上进化产生的，从能量的角度分析，与无氧呼吸相比，有氧呼吸能够__________，其在进化地位上更为高等。 (4)为判断不同运动强度（高运动强度、中运动强度、低运动强度）下细胞呼吸的方式，设计了相关实验，大体实验思路如下：让同一个体分别在三种不同运动强度（高、中、低）下运动相同一段时间后，测定相关指标数据。测定的指标为_______。 22.持续强光照射会导致绿色植物光系统损伤，最终产生光抑制。绿色植物通过如图所示的三重防御机制有效避免光系统损伤。图中O2为超氧阴离子自由基，PSⅡ为参与光反应的色素—蛋白质复合体。强光条件下，叶肉细胞气孔关闭使CO2吸收受阻，此时过高的O2会在R酶的作用下氧化C5 ，生成CO2，被称为光呼吸。 （1）PSⅡ反应中心位于_________上，①过程为__________。叶肉细胞内因NADP⁺不足，使_____（填序号）过程减弱，导致电子传递给O2，形成O2⁻等一系列光有毒产物。 （2）光有毒产物会攻击PSⅡ中色素和D1蛋白，使D1蛋白高度磷酸化，随后发生D1蛋白降解。这导致了__________合成减少，进而影响到C3的还原。为研究D1蛋白降解过程中D1蛋白去磷酸化和D1蛋白交联聚合物解聚发生的先后顺序，科学家用特定药物处理叶片抑制叶绿体蛋白质合成和D1蛋白去磷酸化后，发现D1蛋白量几乎无变化，但D1蛋白交联聚合物明显减少。据此写出D1蛋白降解过程：D1蛋白降解依赖的环境条件→________→________→D1蛋白降解。 （3）强光下可触发植物的光呼吸。过程③中O2和CO2竞争性结合________（填物质），直接影响卡尔文循环中________（填物质）的生成，最终导致有机物积累减少。有人认为光呼吸是一种“浪费”过程，应通过基因工程手段抑制光呼吸以提高产量。请结合本文信息及生态学原理，评价这一观点的合理性___________。 23.植物细胞悬浮培养是将单个细胞或细胞团进行液体培养增殖的技术，培养装置如图所示。广西罗汉果的有效成分罗汉果甜苷具有清热润肺等功效。在进行工厂化生产时，先诱导外植体形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得罗汉果甜苷。 （1）植物细胞悬浮培养生产罗汉果甜苷，需先将外植体经过___________过程形成愈伤组织。罗汉果甜苷属于_____________（填“初生”或“次生”）代谢物。植物细胞悬浮培养所用的培养基中含有蔗糖，蔗糖的作用是___________（答2点即可）。 （2）外植体污染会导致植物细胞培养失败，导致外植体污染的原因可能有_______（答2点即可）。该装置中，出料口的作用是__________（答1点即可）。 （3）在植物细胞悬浮培养中，为提高罗汉果甜苷的产量，可采取的措施是________（多选）。 A．优化培养基成分，添加前体物质 B．利用基因工程技术，过表达甜苷合成关键酶基因 C．大幅提高培养温度，促进细胞快速增殖 D．采用两步培养法，先增殖细胞再诱导产物合成 （4）细胞接种量过低会导致增殖较慢，过高易导致营养不足。为探究细胞接种量对培养效果的影响，写出实验思路：_____________。 24.西北农林科技大学团队自2018年起开展藏羊胚胎工程应用技术研究，该技术同时利用了湖羊的高繁殖力，于2024年成功实现世界首例体细胞克隆藏羊的诞生。具体流程如下，①～⑦代表操作过程。 （1）图中①过程通常用_____处理A湖羊，使其超数排卵。 （2）⑦过程的实质是_____，E后代的生殖方式属于_____。 （3）④为去核过程，此过程去除的“核”实际上是_____；经⑤过程对耳体细胞进行动物细胞培养时，通常在合成培养基中添加_____等天然成分。 （4）可用物理或化学方法，如_____（写出两种）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，最终得到的F后代性别为_____，判断的依据是_____。 25.解钾菌能将土壤中难溶性的含钾矿物质转化为植物可利用的有效钾。研究表明gcd基因与pqqABCDE基因（图1）的协同表达可使解钾菌的解钾效率提高。研究人员从土壤中分离出野生型解钾菌，在gcd基因载体（图2）上构建gcd-pqqABCDE融合基因表达载体。利用基因工程技术培育出解钾效率更高的转基因解钾菌。 （1）通过PCR技术获取pqqABCDE基因时，应选择引物________。已知pqqABCDE基因两端不含限制酶的酶切位点，为了能与gcd基因载体定向连接，扩增pqqABCDE基因时，需在目的基因两端加上________限制酶的识别序列。依据图1、图2信息，写出上游引物的部分碱基序列5’-_________-3’（包括添加的限制酶识别序列，写出12个碱基）。 （2）将构建好的gcd-pqqABCDE融合基因表达载体转入野生型解钾菌，常采用________处理以完成转化。转化后获得的解钾菌扩大培养后，先在含________的培养基（甲）上培养，再利用灭菌的绒布将菌落复制到含________的培养基（乙）上培养，在甲、乙培养基中生长情况为________的菌落，即为所需转基因解钾菌。 （3）若该转基因解钾菌释放到自然土壤中，可能引发的生态风险有________。 学科网（北京）股份有限公司 $Sheet1 题号 题型 分值 知识点 难度系数（预估） 1 单选题 2 细胞结构与生物分子凝聚体（核糖体、细胞骨架、囊泡） 0.85 2 单选题 2 分泌蛋白的合成、加工、运输与生物膜特性 0.7 3 单选题 2 物质跨膜运输、协同转运、主动运输 0.75 4 单选题 2 细胞凋亡、溶酶体、内环境稳态、信号调控 0.75 5 单选题 2 酶的作用机理、影响酶活性的因素、酶的特性 0.7 6 单选题 2 线粒体结构与功能、有氧呼吸过程、细胞增殖 0.65 7 单选题 2 绿叶中色素的提取和分离实验操作与原理 0.8 8 单选题 2 细胞周期、核 DNA 含量变化、药物对细胞分裂的影响 0.6 9 单选题 2 果酒发酵、酵母菌培养条件、发酵工艺 0.6 10 单选题 2 植物体细胞杂交、原生质体融合、植物组织培养 0.55 11 单选题 2 动物细胞培养、3D培养、无菌无毒环境、免疫排斥 0.75 12 单选题 2 单克隆抗体制备、杂交瘤细胞筛选、动物细胞融合 0.65 13 单选题 2 体细胞核移植、克隆动物、细胞全能性、胚胎工程 0.65 14 单选题 2 DNA粗提取与鉴定、PCR、电泳鉴定实验操作 0.7 15 单选题 2 蛋白质工程、定点突变、基因改造、酶工程 0.7 16 不定项选择题 3 光抑制、光反应、活性氧、电子传递 0.6 17 不定项选择题 3 端粒与端粒酶、细胞衰老、癌变、逆转制 0.55 18 不定项选择题 3 微生物筛选、无菌技术、稀释涂布平板、菌株选育 0.65 19 不定项选择题 3 基因工程、质粒载体、蓝白斑筛选、转化 0.5 20 不定项选择题 3 诱变育种、发酵工程、菌种筛选、次级代谢产物 0.65 21 非选择题 10 有氧呼吸过程、线粒体功能、运动与细胞呼吸方式 0.65 22 非选择题 11 光反应、光抑制、光呼吸、D1蛋白修复机制 0.65 23 非选择题 11 植物细胞悬浮培养、次生代谢物、工厂化生产 0.65 24 非选择题 11 胚胎工程、体细胞核移植、克隆羊、胚胎移植 0.7 25 非选择题 12 基因工程、PCR 引物设计、载体构建、转化与筛选 0.5 Sheet2 Sheet3 $ 应用场景：山东省滨州市高二下学期阶段测试（其他地区若不符合则自行修改） 山东省滨州市高二生物下学期阶段测试 人教版必修1+选择性必修3 分子与细胞+生物技术与工程 答案及解析 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 D B C A D C D B B C 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 C A B D B AC AC ABC C ACD 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1.【答案】D 【解析】核糖体由蛋白质和rRNA组成，属于细胞内的生物分子凝聚体,A不符合题意；细胞骨架是由蛋白质纤维聚集形成的，属于细胞内的生物分子凝聚体，B不符合题意；生物分子凝聚体可富集相关酶与底物，有利于提高代谢效率，C不符合题意，囊泡具有膜结构，不属于生物分子凝聚体，D符合题意。 2.【答案】B 【解析】该分泌蛋白分泌到细胞外的过程依赖生物膜的流动性，A错误；利用放射性同位素标记法，研究细胞分泌蛋白的合成与运输，B正确；细胞分泌蛋白的分泌属于胞吐，需要膜蛋白参与，C错误；高尔基体是囊泡运输过程中的交通枢纽，D错误。 3.【答案】C 【解析】Na+- K+泵转运 Na+、K+时需要消耗ATP，A正确；葡萄糖进入小肠上皮细胞消耗Na+顺浓度提供的能量，属于主动运输，B正确；Na+- K+泵维持了细胞Na+的电化学梯度，会影响小肠上皮细胞吸收葡萄糖的速率，C错误；葡萄糖转运载、Na+- K+泵属于载体蛋白，发挥作用时其构象均会发生变化，D正确。 4.【答案】A 【解析】水解酶的本质是蛋白质，合成场所在核糖体，A错误；细胞凋亡是由基因决定的细胞程序性死亡，该过程中存在凋亡相关基因的选择性表达，B正确；机体清除受损、突变的细胞，有利于维持内环境稳态，C正确；Akt可能通过阻止细胞质中Ca2+ 浓度升高，抑制细胞凋亡，D正确。 5.【答案】D 【解析】酶A和酶B催化底物C时降低化学反应的活化能，A错误；实验的自变量是温度和酶的种类，因变量是加入酶后底物剩余量，B错误；酶A和酶B适宜在低温、最适pH条件下保存，C错误；酶A和酶B在催化反应完成后性质不发生改变，D正确。 6.【答案】C 【解析】丙酮酸在线粒体分解释放CO2属于有氧呼吸的第二阶段，不需要O2的参与，A错误；该健康线粒体合成的ATP来自线粒体基质和线粒体内膜，B错误；有氧呼吸第三阶段所需的[H]都来自有氧呼吸第一、二阶段，C正确；线粒体增殖受细胞核基因调控，不能无限增殖，D错误。 7.【答案】D 【解析】无水乙醇的作用时提取色素，A错误；滤纸条加样时需待上一次滤液细线干燥后再重复画线，若连续不间断加样回导致滤液细线过粗，最终色素带重叠模糊，B错误；二氧化硅作用是使研磨更充分，碳酸钙可保护色素，C错误；分离色素时需要注意滤液细线不能触及层析液，否则色素会溶解到层析液中无法实现分离，D正确。 8.【答案】B 【解析】若抑制纺锤体形成，细胞会停滞在分裂期，核DNA含量为 4n 的细胞会显著增多，与图中 4n 细胞减少的结果不符，A错误；从柱形图可知，和正常培养相比，添加药物后，核DNA含量为2n的细胞数量增多，2n～4n和4n的细胞数量明显减少，说明该药物使癌细胞停留在DNA复制前的阶段，无法完成DNA复制，B正确；促进从分裂间期进入分裂期使分裂期细胞增多，4n 细胞比例应升高，与图中结果相矛盾，C错误；促进细胞质分裂会使细胞增殖加快，细胞总数增多，与题图不符，D错误。 9.【答案】B 【解析】可加入纤维素酶和果胶酶提高龙眼的出汁率，A错误；龙眼五指毛桃复合果酒发酵过程中温度控制在18～30℃，B正确；酵母菌发酵前期需通入无菌空气，让酵母菌进行有氧呼吸大量增殖，之后再密闭进行酒精发酵，酒精发酵过程中会产生二氧化碳需定期排除，因此不能全程密闭，C错误；开盖搅拌会让氧气大量进入，抑制酵母菌的无氧呼吸，导致发酵失败，同时还会增加杂菌污染的风险，D错误。 10. 【答案】C 【解析】除PEG诱导甲、乙原生质体融合外，还可采用高Ca2+-高pH融合法，A正确；c过程中杂种细胞再生出细胞壁，标志着细胞融合完成，B正确；愈伤组织经再分化获得c，C错误；进行d过程时将植株种植在高盐的环境中，筛选出耐盐植株，D正确。 11. 【答案】C 【解析】动物细胞培养的标准气体环境是95%的空气（为细胞有氧呼吸提供氧气）和5% 的CO2（维持培养液的pH稳定），A正确；体外培养3D 细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的环境，否则杂菌、有毒物质会导致细胞代谢异常甚至死亡，B正确；利用患者自身细 胞诱导的干细胞，遗传物质与患者一致，分化出的骨组织细胞移植后不会发生免疫排斥，C错误；运用3D细胞培养技术培育动物器官或组织，开创人类疾病治疗的新方法，D正确。 12. 【答案】A 【解析】向小鼠注射灭活的SBDSV是为了诱导其发生体液免疫，产生用于制备单克隆抗体的B淋巴细胞，A错误；制备SBDSV的抗体应用的动物细胞工程有动物细胞融合和动物细胞培养，B正确；用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞核融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，C正确；抗体检测呈阳性，说明该杂交瘤细胞产生抗SBDSV抗体，筛选得到该细胞后，可在体外进行大规模培养，从培养液中获取单克隆抗体，D正确。 13. 【答案】B 【解析】将体细胞注入去核卵母细胞中，可用电融合法使两细胞融合，供体核进入卵细胞，形成重构胚，A正确；卵母细胞进行去核时，目的是去除纺锤体-染色体的复合物，不需要保留纺锤体，B错误；核移植获取的重构胚用物理或化学方法激活，使其完成生长发育进程，C正确；动物细胞核含有该物种的全套遗传信息，克隆小猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性，D正确。 14. 【答案】D 【解析】将洋葱研磨液离心后,DNA溶解于上清液中，沉淀物为破碎的细胞残渣等杂质，需取上清液进行保留，A错误；二苯胺试剂与DNA混匀后需经过沸水浴加热，待冷却后溶液变为蓝色，B错误；将琼脂糖熔化后再稍冷却后，将适量的核酸染料加入并进行混，C错误；PCR实验中使用的微量离心管、蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸汽灭菌处理，D正确。 15. 【答案】B 【解析】蛋白质工程操作的起点是预期蛋白质的功能，即获取高效－塑料降解酶，A错误；蛋白质的结构是由基因决定的，且改造后的基因可稳定遗传，因此对塑料降解酶的改造最终还必须通过改造基因来完成，B正确；蛋白质工程的操作对象是基因，无法直接对塑料降解酶的空间结构进行改造，C错误；基因工程只能生产自然界中存在的蛋白质，D错误。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16.【答案】AC 【解析】PSⅡ 参与水的光解，属于光反应结构，位于类囊体薄膜，A正确；由如可知光照强度从Ⅰ1增加到Ⅰ2的过程中，对照组微藻的官方和放氧速率不变，光合作用利用的光能不变，但由于光照强度增加，因此光能转化效率下降，B错误；由题干信息可知，”电子积累过多会产生活性氧使PSⅡ变性失活，使光合速率下降”，推测铁氰化钾能将光合作用产生的电子及时导出，使细胞内活性氧水平下降，降低PSⅡ受损伤的程度，因而能够有效接触光抑制，C正确；光抑制使光反应速率下降，ATP 和 NADPH 生成减少，暗反应速率随之降低，D错误。 17. 【答案】AC 【解析】由图可知，端粒酶是一种逆转录酶，以RNA为模板合成端粒核苷酸序列，A正确；一般来说，胚胎细胞具有较强的分裂能力，而端粒酶与细胞分裂过程中端粒的长度维持有关，因此其端粒酶活性较高，神经细胞高度分化，不再进行分裂，端粒酶活性低，B错误；若干细胞中端粒酶活性降低，不能延长端粒，端粒随分裂缩短而致细胞衰老，C正确；端粒酶可延长端粒，抑制端粒酶合成基因的表达可为研发癌症治疗药物提供依据，D错误。 18.【答案】ABC 【解析】可采用湿热灭菌法对使用的固体培养基进行灭菌处理，A正确；检测培养基是否被污染时，需要设置空白对照：在空白培养基上涂布等量无菌水，若培养后长出菌落，说明培养基被污染，若无菌落生长说明培养基灭菌合格，B正确；稀释倍数计算：10g土壤加入90mL无菌水，初始稀释倍数为101；之后每次取1mL稀释液加入9mL无菌水，共经过3次梯度稀释后，最终涂布的菌液总稀释倍数为104倍，C正确；由题干可知：[H]含量越高，TTC还原能力越强，红色越深，胡萝卜素合成能力越强。图中D菌落红色范围最大，A菌落无明显红色，因此D菌落合成胡萝卜素的能力更强，D错误。 19. 【答案】C 【解析】试管1中为酶切后的质粒和目的基因，需要加入DNA连接酶催化二者连接形成重组DNA分子，A正确；试管2中用Ca2+处理，使大肠杆菌属于感受态，这样可将重组载体导入不含lacZ基因的大肠杆菌中，B正确；若大肠杆菌的菌落为蓝色，说明若lacZ基因没有被破坏，则导入大肠杆菌是普通质粒，C错误；由题干信息可知标记基因是氨苄青霉素抗性基因，因此培养基中除必需的营养物质外，还应加入适量氨苄青霉素，D正确。 20. 【答案】ACD 【解析】接种前对吸水链霉菌进行扩大培养可提升初始菌种数量，缩短发酵周期，A正确；发酵工程的菌种除可来自诱变育种和基因工程育种外，还可直接从自然界中筛选获得野生菌种，C错误；人工诱变只能提高突变概率，不能直接得到目标高产菌株，必须通过性状检测、多次筛选，C正确；采取适当的提取、分离和纯化措施获得子囊霉素，D正确。 3、 非选择题：本题共5小题，共55分。 21.【答案】（10分，除标注外，每空1分） （1） 三（1分） 线粒体基质 和[H]结合形成水 （2）ADP、Pi 导致细胞供能不足和体温过高（2分） （3）更充分地将有机物中的能量释放出来供细胞使用（2分） （4）不同运动强度下的O2消耗速率和血浆中乳酸含量（2分） 【解析】（1）图示过程发生在线粒体内膜，是有氧呼吸的第三阶段。人在短跑时，同时进行有氧呼吸和无氧呼吸，但只在有氧呼吸的第二阶段产生CO2，其场所是线粒体基质；人在慢跑时，O2在有氧呼吸第三阶段与[H]结合生成水。 （2）据图可知，A在ATP合成酶的作用下合成ATP。据此推断，物质A为ADP和Pi。正常情况下，细胞呼吸释放的能量少部分储存在ATP中，大部分以热能的形式散失，以维持细胞的能量供应和人体的体温。而题述减肥药物会使得ATP合成酶合成ATP的量减少，则能量在体内的转化率降低，造成大量的额外产热，从而导致细胞供能不足和体温过高。 （3）与无氧呼吸相比，有氧呼吸能更充分地将有机物中的能量释放出来供细胞使用。 （4）本实验的目的为探究不同运动强度（高运动强度、中运动强度、低运动强度）下细胞呼吸的方式。自变量是运动强度大小，因变量是呼吸方式，故观测指标可以通过氧气的消耗速率和 血浆中的乳酸含量来检测。 22.【答案】（11分，除标注外，每空1分） （1）类囊体薄膜 水的光解 ② （2）ATP和NADPH（2分） D1蛋白交联聚合物解聚 D1蛋白去磷酸化 （3） C5 C3 不合理，光呼吸可以消耗过剩光能和O₂，减少光有毒物质，保护PSII（2分） 【解析】（1）光反应发生的场所是叶绿体类囊体薄膜，PSII为参与光反应的色素-蛋白质复合体，因此，PSII反应中心位于叶绿体类囊体薄膜上。由图可知，①过程为水的光解。叶肉细胞内因NADP+不足，使②NADP+、H+和e-生成NADPH的过程减弱，导致电子传递给O2，形成O2⁻等一系列光有毒产物。 （2）光有毒产物会攻击PSⅡ中色素和D1蛋白，使D1蛋白高度磷酸化，随后发生D1蛋白降解，影响了光反应的正常进行，导致ATP和NADPH合成减少，进而影响到C3的还原。科学家用特定药物处理叶片抑制叶绿体蛋白质合成和D1蛋白去磷酸化后，发现D1蛋白量几乎无变化，但D1蛋白交联聚合物明显减少，因此，D1蛋白降解过程为：D1蛋白降解依赖的环境条件→D1蛋白交联聚合物解聚→D1蛋白去磷酸化→D1蛋白降解。 （3）过程③中O2和CO2竞争性结合C5，直接影响卡尔文循环中C3的生成，最终导致有机物积累减少。题干观点不合理，原因是在植物的长期进化历程中，光呼吸依然被保留，据图分析其生理意义是：光呼吸消耗光反应产生的过量O2，从而减少光有毒物质的积累，降低对细胞结构（PSII中的D1蛋白）的损伤。 23.【答案】（11分，除标注外，每空1分） （1）脱分化 次生 为细胞提供营养物质(碳源和能源)；调节(或维持)渗透压（2分） （2）培养基、接种工具灭菌不彻底；外植体消毒不彻底；操作过程不符合无菌操作要求：外植体采集不当；操作环境不洁净等（2分） 收获细胞或细胞产物；排出旧培养液（2分） （3）ABD （4）设置不同接种量的组别，培养相同时间后测定细胞密度和罗汉果甜苷产量（2分） 【解析】（1）脱分化是指已分化的植物细胞在适宜培养基(含生长素和细胞分裂素)诱导下，失去原有功能，恢复分裂能力，形成愈伤组织。初生代谢物是植物生长发育所必需的物质，如糖类、脂质、蛋白质、核酸等，参与细胞的基本生命活动：次生代谢物不是植物生长所必需的，通常与防御、信号传递、适应环境胁迫等有关，如生物碱、萜类、酚类、甜苷等，因此，罗汉果甜苷属于次生代谢物。蔗糖是碳源和能源，同时维持渗透压，维持植物细胞正常的形态和功能 。（2）导致外植体被污染的原因可能有：培养基、接种工具灭菌不彻底；外植体消毒不彻底；操作过程不符合无菌操作要求等。出料口不仅可收获细胞或细胞产物：也可用于排出旧培养液及代谢废物，保持良好的培养环境。（3）添加甜苷合成的前体物质，可促进产物合成，提高产量，A正确；过表达甜苷合成关键酶基因，可增强合成途径，提高产量，B正确；植物细胞培养的最适温度为25℃左右，在工厂化生产时一般已调至最适温度，若再大幅提高温度会导致酶失活、细胞死亡，无法提高产量，C错误；两步培养法(先增殖细胞，再诱导产物合成)可分别优化细胞生长和产物合成条件，提高产量，D正确。 （4）根据实验的目的为探究细胞接种量对培养效果的影响，判断自变量是接种量，因变量是细胞密度和罗汉果甜苷产量，其余变量属于无关变量，实验思路：设置不同接种量的组别，培养相同时间（保证无关变量相同）后测定细胞密度和罗汉果甜苷产量。 24.【答案】（11分，除标注外，每空1分） （1）促性腺激素 （2）早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移（2分） 有性生殖 （3）纺锤体–染色体复合物 血清 （4）电脉冲、Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等（任选两个，2分） 雌性 F后代的细胞核遗传物质来自C顶级欧拉藏羊（雌性），性染色体组成为XX（2分） 【解析】（1）图中①过程通常用促性腺激素处理A湖羊，可促使其超数排卵，这样可以获得更多的卵母细胞； （2）⑦过程是胚胎移植，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移；E后代是由受精卵发育而来的，属于有性生殖； （3）去核过程去除的“核”实际上是纺锤体–染色体复合物；动物细胞培养时，通常在合成培养基中添加血清等天然成分，以补充细胞生长所需的未知营养物质； （4）激活重构胚的物理或化学方法有电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等；F后代的性别为雄性，判断依据是重构胚的细胞核来自C顶级欧拉藏羊♂（雄性）的耳体细胞，生物的性别由细胞核中的遗传物质决定。 25.【答案】（12分，除标注外，每空2分） （1）引物2和引物3 EcoRI和HindIII GAATTCATGGCA （2）Ca2+（CaCl2）（1分） 氯霉素（1分） 四环素（1分） 在甲中菌落能生长，在乙中菌落不能生长 （3）基因污染（或“破坏生物平衡”、“降低生物多样性”、“改变自然种群基因频率”、“影响生态系统稳定性”）（1分） 【解析】（1）PCR扩增目的基因时，引物要与模板链的3'端结合，通过PCR技术获取pqqABCDE基因时，应选择引物2和引物3。要将目的基因定向插入载体gcd基因下游，且保证插入后不破坏载体其他必需结构，根据图2，需要选择gcd下游、四环素抗性基因内部两个酶切位点Sau3AI和BsrGI，二者酶切后产生不同黏性末端，可实现定向连接，因此需要在目的基因两端添加这两种限制酶的识别序列。依据图1、图2信息，写出上游引物的部分碱基序列5′-GAATTCATGGCA-3′。 （2）将重组质粒转入原核细胞（解钾菌）时，常用Ca2+处理使细胞处于感受态，完成转化。重组载体插入目的基因后，氯霉素抗性基因Cmr完整，四环素抗性基因TetR被插入失活，因此筛选时：先在含氯霉素的培养基甲上培养，能存活的是导入了载体的菌；再影印到含四环素的培养基乙上，重组菌（插入目的基因）的TetR失活，因此表现为甲中能生长，乙中不能生长。 （3）转基因解钾菌释放到自然环境中，可能的生态风险有：目的基因发生扩散造成基因污染，改变土壤原有微生物群落结构，破坏土壤生态系统的生物多样性，打破原有生态平衡（答出合理一点即可） 学科网（北京）股份有限公司 $