江西南昌二中2025-2026学年度下学期高二生物月考（二）

**基本信息** 以斑点钝口螈共生、AI设计PET水解酶等科技前沿情境为载体，覆盖现代生物科技核心知识，注重科学思维与探究实践能力考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|12/24|细胞结构（如原核与真核区别）、微生物培养（如平板划线法）|结合《自然》杂志报道等真实科研情境，考查生命观念| |多选题|4/16|植物体细胞杂交（原生质体活性检测）、细胞培养（悬浮培养技术）|通过实验操作分析，体现科学思维的严谨性| |非选择题|5/60|基因工程（Ti质粒构建）、核移植（克隆猴实验）、PCR技术（融合基因扩增）|以克隆猴、紫色西红柿培育等综合实验为背景，突出探究实践与态度责任|

南昌二中2025-2026学年度下学期高二生物月考（二） 命题人：郑军 审题人：黄宇 一、单选题（每题只有一个正确选项，每题2分，共计24分） 1．据英国《自然》杂志网站报道，科学家在斑点钝口螈（一种两栖类动物）的细胞内观察到一种绿藻，斑点钝口螈也由此被称为“太阳能脊椎动物”。下列有关叙述正确的是（　 ） A．斑点钝口螈细胞的细胞核是其细胞代谢和遗传的中心 B．斑点钝口螈细胞和绿藻细胞的主要区别是有无以核膜为界限的细胞核 C．斑点钝口螈与绿藻之间的关系为互利共生关系 D．斑点钝口螈进行光合作用的场所位于绿藻细胞的细胞质基质 2．我国科学家在某热泉口发现一种古细菌，其细胞膜上富含一种特殊的脂质。进一步研究发现该细菌能氧化硫化氢，并利用该过程释放的化学能固定二氧化碳合成有机物，下列分析不合理的是（     ） A．该细菌细胞膜上富含的特殊脂质可能具有较高的热稳定性 B．该细菌主要遗传物质是DNA C．该细菌可用于某些有毒污水的净化 D．该细菌属于自养生物 3．有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物，广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，不少种类对人、畜的毒性很强。某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物，下列做法不正确的是（     ） A．在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在添加有机磷农药的培养基上培养以获取相应的微生物 B．在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，以检测培养基平板灭菌是否合格 C．若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用平板划线法统计 D．制备固体培养基时，在液体培养基中加入琼脂后，制成琼脂固体培养基 4．青蒿素是治疗疟疾的重要药物。研究人员利用细胞悬浮培养技术筛选高产青蒿素细胞并进行工厂化生产，实验流程如下，下列叙述正确的是（　　） A．青蒿素属于次生代谢物，在整个生命过程中一直产生 B．①过程需对外植体进行灭菌，防止杂菌污染 C．②过程常用果胶酶处理愈伤组织，解离细胞间的连接 D．③过程应保持在无菌、无毒和5%的CO2环境条件下 5．某农业科技公司为抢救濒危药用植物“红豆杉”，启动了组织培养快速繁殖项目。在实验中，技术人员发现：当外植体取自树皮部位时，脱毒效果差；而取自茎尖分生组织时，可获得高纯度脱毒苗。同时，为研究生殖细胞全能性，团队还进行了花粉离体培养实验。下列关于该过程的叙述，错误的是（　　） A．外植体脱分化过程中，细胞逐渐失去原有形态和功能特异性，形成不定形的薄壁组织团块 B．再分化阶段，若培养基中细胞分裂素与生长素比例较高，则有利于芽的形成，但会抑制根的发育 C．单倍体植株幼苗经秋水仙素处理后恢复可育性，体现了植物生殖细胞的全能性 D．选择茎尖分生组织作为外植体获得脱毒苗，是因为该区域病毒极少，甚至无病毒 6．大多数的宫颈癌都与一种叫作人乳头瘤病毒（HPV）的感染有关。为降低宫颈癌治疗的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC）。下图是ADC作用的示意图。下列叙述错误的是（     ） A．制备单克隆抗体利用了动物细胞克隆化培养和动物细胞融合技术 B．ADC进入癌细胞的过程与细胞膜间的信息交流有关 C．宫颈癌的单克隆抗体既具有导航作用，也具有免疫功能 D．宫颈癌细胞吞噬ADC后，药物在溶酶体的作用下释放 7．某公司计划分两阶段实施一项“跨物种生殖替代技术”。核移植阶段：将供体物种（雪豹）的体细胞核移植到受体物种（奶牛）的卵母细胞中，培养形成重构胚。胚胎移植阶段：将重构胚移植到受体物种（奶牛）的子宫内，利用受体的妊娠环境让胚胎发育至分娩。下列叙述正确的是（　　） A．核移植阶段采用受体物种的卵母细胞将有利于后期的胚胎移植和妊娠 B．后代雪豹个体的遗传物质均来自于供体雪豹，奶牛仅提供妊娠环境 C．应取囊胚期的内细胞团细胞做DNA分析，以用于雪豹的性别鉴定及基因研究 D．与诱导iPS细胞核移植技术相比，雪豹的体细胞核移植安全性、成功率均更高 8．某珍稀濒危哺乳动物仅存雄性个体，科研团队通过多代细胞培养，将其胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞，从而实现后代繁育。下列说法正确的是（　　） A．用于培养胚胎干细胞的培养液需要进行消毒处理，营造无菌无毒的环境 B．获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体结构和数目变异 C．XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程中发生了细胞分化 D．将该技术应用于人类繁衍，更有利于人类的生存与进化 9．大肠杆菌的pBR322质粒常用于重组质粒的构建，该质粒上限制酶识别位点如图1所示。受体菌可能导入重组质粒或pBR322质粒，需要在培养基中添加抗生素进行初筛和复筛。将初筛培养基上的菌落原位影印（将菌落按原有位置影印到另一培养基上）到复筛培养上培养，1～6表示菌落，结果如图2所示。下列有关分析正确的是（　　） A．若目的基因和pBR322质粒用BamHⅠ、EcoRⅠ切割，则初筛培养基要添加四环素 B．若目的基因和pBR322质粒用BclⅠ、HindⅢ切割，则复筛培养基要添加氨苄青霉素 C．若目的基因和pBR322质粒用BamHⅠ、EcoRⅠ切割，则菌落3、4、6导入的是重组质粒 D．若目的基因和pBR322质粒用BclⅠ、HindⅢ切割，则菌落1、2、5导入的是pBR322质粒 10．既往报道的PET水解酶降解聚酯塑料PET废弃物时，仍有10%的残留物。我国科研团队基于AI计算策略，通过对细菌HR29的水解酶B进行设计改造，得到一种新型水解酶T。该酶是由3个相同亚基组成的三聚体，凭借其活性中心更灵活的“PET结合槽”实现对PET几乎完全降解。下列叙述正确的是（　　） A．水解酶T的单体和三聚体都具有催化PET降解的生物活性 B．基于AI计算策略设计、改造得到水解酶T，应用了蛋白质工程 C．改造水解酶T是通过直接改造水解酶B的空间结构实现的 D．三聚体的形成与细菌HR29的内质网、高尔基体、线粒体等细胞器有关 11．巢式PCR是一种高特异性、高灵敏度的PCR技术，通过两轮PCR扩增来显著提高扩增的准确性，其核心原理如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．第一次PCR扩增使用外引物，其结合位点位于第二次PCR扩增目标产物的外侧 B．第二次PCR扩增以第一次PCR扩增的中间产物为模板，可显著降低非特异性产物的产生 C．若第一次PCR扩增出现非特异性产物，第二次PCR扩增的内引物仍可与之结合并完成扩增 D．巢式PCR可用于检测极低拷贝数的目标DNA，如被病毒感染的早期少量的样本 12．生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。下列叙述错误的是（　　） A．研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基因污染 B．干细胞培养应用前景广泛，但也可能面临一些问题，如存在导致肿瘤发生的风险 C．生物武器是用病毒类、干扰素及生化毒剂类等来形成杀伤力 D．反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿 二、多选题（每题4分，共计16分，全对得4分，选不全得2分，选错或不选得0分） 13．植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员欲通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物，进行了如下图所示的操作。下列相关叙述不正确的是（     ） 、 A．过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B．步骤②前可通过台盼蓝染色法来检测原生质体是否有活性 C．过程⑤相较于过程④需更换培养基，主要目的是满足不同阶段细胞的营养需求 D．若得到的植株未兼有甲、乙优良性状，则其不是杂种植株 14．贴壁细胞依赖细胞膜表面黏附因子与细胞外基质或其他细胞接触维持活性，失去这些接触会引发细胞凋亡。无血清全悬浮培养技术是让贴壁细胞在无血清培养基中悬浮生长的技术。下列相关叙述正确的是（　　） A．悬浮细胞培养不存在接触抑制现象，无须分瓶传代培养 B．悬浮细胞培养有利于营养物质的吸收及发挥细胞的生产潜能 C．无血清培养基中添加促进黏附因子表达的物质不利于细胞悬浮 D．用台盼蓝染液染色，可借助血细胞计数板对被染成蓝色的活细胞进行计数 15．科研人员为研究M蛋白，构建了编码M蛋白的M基因与编码荧光蛋白的G基因融合表达的重组质粒，该质粒的部分结构如图1。为确定融合基因是否正确表达，科研人员提取了发荧光的受体细胞中的总蛋白，分成两组进行相关实验，并分别用抗M蛋白抗体和抗荧光蛋白抗体检测相应蛋白的表达情况，结果如图2和图3（抗体与相应蛋白结合后会显示出条带，条带位置与蛋白质大小有关）。下列叙述正确的是（     ） A．用PCR检测重组质粒中是否插入完整的G-M融合基因，应选择引物2和引物3 B．G-M融合基因在受体细胞内转录时，以a链作为模板 C．条带1检出的蛋白为受体细胞表达的G-M融合蛋白 D．条带2检出的蛋白可能是受体细胞自身的M基因控制合成的M蛋白 16．双向启动子可同时结合两个RNA聚合酶驱动两侧基因转录，研究人员利用Ti质粒构建如图所示基因表达载体，用于检测双向启动子功能。下列叙述错误的是（　　） A．在培养基中添加壮观霉素可筛选出成功导入表达载体的植物受体细胞 B．可通过荧光+蓝色显色双重检测，更准确判断双向启动子是否双向起效 C．双向启动子驱动GUS与LUC转录时，使用同一条DNA单链作为模板链 D．为连入GUS基因，需用SalI和AgeI酶切整合了双向启动子及LUC基因的质粒 三、非选择题（没空2分，共计60分） 17．支原体肺炎是一种由支原体引起的呼吸系统疾病，常见于儿童和青少年。支原体肺炎的临床表现与细菌性肺炎相似，但用药不相同。根据所学知识回答下列问题。 (1)为进一步了解支原体，研究人员用培养基培养分离得到支原体，一段时间后培养基上由一个支原体繁殖形成“荷包蛋”状的菌落（大量同种支原体），菌落属于生命系统结构层次中的________。 (2)用显微镜观察支原体时，已经在视野中找到物象，为进一步观察，该同学正确的操作顺序是________（填以下序号）。 ①转动粗准焦螺旋 ②转动细准焦螺旋 ③转动转换器 ④移动载玻片 (3)支原体引起的肺炎常因黏液栓堵住支气管，造成影像学上的“白肺”，这与新冠病毒导致的双肺弥散性病变产生的“白肺”是两个概念。导致这两种“白肺”的病原微生物的主要区别在于________。 (4)有人对“白肺”及正常肺部及其他部位细胞观察，根据观察到部分动物细胞都有细胞核而得出动物细胞都有细胞核这一结论，运用的科学方法是________。 (5)肺炎治疗常用以下两种抗生素，抗菌机制如下表所示，表中______类药物对支原体引发的肺炎治疗效果更理想，理由是________。 抗生素药物类型 杀菌机制 大环内酯类 作用于原核细胞核糖体，阻碍蛋白质合成，起到抑菌作用 头孢菌素类 可以影响细菌细胞壁的合成从而起到杀菌作用 18．反刍动物如牛、羊，具有特殊的器官——瘤胃，瘤胃中恒定的温度和厌氧的环境为多种瘤胃微生物提供了生长繁殖的有利条件。图示是从瘤胃中分离果胶分解菌（果胶分解菌能产生果胶酶将难溶于水的高分子果胶分解成易溶于水的半乳糖醛酸）的流程图。回答下列问题： （滚管培养法：用注射器吸取一定体积的菌液注入盛有50℃左右液体状态的培养基的试管中，振荡均匀，而后将其平放于盛有冰块的盘中迅速滚动，这样带菌培养基在试管内壁立即凝固成一薄层，经培养后可在培养基内或表面长出肉眼可见的菌落。） (1)微生物培养基一般都含有的基本营养成分有____，在该实验中选择培养时所用培养基在成分上的特点是____；请写出一个制造无氧培养环境的措施：____。 (2)滚管培养法____（填“能”或“不能”）用于计数细菌；若不能，请说明理由，若能，请写出需要知道的数据：____。 (3)最终获得的纯净培养物只是初步筛选出的果胶分解菌，对分离得到的菌种还需要借助生物化学方法进一步鉴定，具体方法是____。 19．现代社会压力使人类的作息时间很难严格遵循于体内的生物钟。因为加班、频繁跨越时区、熬夜、肥胖等，越来越多的人面临着生物钟紊乱的困扰，导致失眠、睡眠中断、日间过度嗜睡，与人交流出现障碍等问题。2019年我国科研团队获得了5只基因BMAL1缺失(或敲除)的克隆猴，极大推动人类脑疾病机理研究、早期诊断与干预及药物研发等相关领域研究。下图为克隆猴的步骤，回答下列问题： (1)5只克隆猴是科学家利用___________技术获得的。首先需将A猴卵母细胞培养至MⅡ期，并通过___________法进行去核，然后将B猴体细胞注入去核A猴卵母细胞形成重构胚。 (2)重构胚的激活可用物理或化学方法，其中化学方法有___________(答出一点即可)。重构胚进行体外培养时，除需要提供适宜的营养条件外，还需适宜的环境条件，为保证无菌、无毒的环境，具体操作有___________(答出两点)。然后将细胞置于___________中进行培养。将得到的胚胎移植到经过同期发情处理的代孕母猴体内，最终产出克隆猴。 (3)为了验证这5只基因敲除猴是否存在昼夜节律紊乱问题，科学家给猴子们佩戴了检测设备，可以随时监测到它们的昼夜活动情况，通过行为学分析检测了其是否明显表现出类似精神分裂症的症状。对照组的设置应为___________。观察发现，与对照组相比，实验组猴的神经内分泌激素褪黑素分泌减少；与睡眠剥夺、抑郁症以及衰老等相关的基因表达增强；不再按照24小时的周期活动，在夜间活动明显增多，有人靠近时双手抱头，蜷缩在角落里，不敢活动。由此证明___________。 20．紫色西红柿经基因编辑后可产生比普通西红柿多9倍的花青素（紫色），紫色花青素能降低人类患心脏病、糖尿病的风险。如图是花青素合成酶基因（S）的cDNA（由某种生物发育某个时期的mRNA经逆转录产生的互补DNA）和Ti质粒的结构示意图。请结合基因工程相关知识，回答下列问题。 (1)构建基因表达载体时，需用限制酶切割花青素合成酶基因的cDNA和Ti质粒。若要保证目的基因完整插入Ti质粒的T-DNA区域，且后续能正常表达，应选择的限制酶组合是___________，选择依据是___________。 (2)基因表达载体中，启动子的作用是___________；标记基因（某抗生素抗性基因）的作用是___________。 (3)若要检测花青素合成酶基因是否成功导入受体细胞，常用的技术是___________；若要检测花青素合成酶基因是否在受体细胞中成功表达，可采用的方法有___________（答出1种即可）。 21．研究表明纳米抗体具有高特异性识别特殊位点，绿色荧光蛋白可实现荧光示踪的优势。现将AnB1基因与EGFP基因利用PCR技术拼接成融合基因，运用线性质粒为载体将融合基因导入受体菌，表达获得融合蛋白，过程如图1所示。请回答下列问题： (1)图1所示的过程Ⅰ是利用PCR技术将质粒线性化，为了保证扩增后的产物是图中所示的线性质粒载体，应该选择引物_____________。 (2)分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时，配制的两个反应体系中不同的有____________。PCR每次循环要经历变性、复性和延伸三步，其中复性的目的是_______。 (3)有关基因序列如图2，引物F2-F应在下列选项中选用_________。 EGFP基因序列：5′ATGGTGAGCAAGGGC--------GACGAGCTGTACAAG 3′ AnB1基因序列：5′CATGTCCAGCTGCAG--------CCAAAACCACAACCA3′ 图2 A．GACGAG…………CTGCAG B．ATGGTG…………CAACCA C．TGGTTG……… …CACCAT D．CTGCAG…………CTCGTC (4)为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同菌落的质粒为模板，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增，质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3.初步判断，____________（从“P1~P4”中选填）的质粒符合设计。 高二第二次月考参考答案 一、单选题（每题只有一个正确选项，每题2分，共计24分） 1~5.CBCCC 6~10.BACBB 11~12.CC 二、多选题（每题4分，共计16分，全对得4分，选不全得2分，选错或不选得0分） 13.CD 14.BC 15.ACD 16.AC 三、非选择题（每空2分，共计60分） 17（12分） (1) 种群 (2) ④③② (2) 支原体属于原核生物，具有细胞结构，新冠病毒无细胞结构 (3) 不完全归纳法 (4) 大环内酯 大环内酯类药物可以作用于核糖体，阻碍蛋白质合成，抑制支原体效果更好/支原体无细胞壁，头孢菌素类不起作用   18（12分） (1) 水、无机盐、碳源和氮源 以果胶为唯一碳源 在培养基表面铺一层石蜡油以隔绝空气 (2) 能 菌落数、注射器吸取的菌液体积和稀释度 (3) 将分离得到的适量菌种与一定量的果胶溶液混合，在适宜的环境中反应一段时间后观察到溶液由浑浊变得澄清即可鉴定 19（14分） (1) 动物细胞核移植 显微操作 (2) Ca2+载体(或乙醇或蛋白酶合成抑制剂) 培养液和培养用具进行灭菌处理、在无菌环境下进行操作、定期更换培养液 CO2培养箱(或95%空气和5%CO2的培养箱) (3) 给没有做基因敲除的猴子佩戴检测设备，检测它们的活动，分析其是否明显表现出类似精神分裂症的症状 5只基因敲除猴确实存在昼夜节律紊乱问题 20（12分） (1) EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ 既能完整切割下花青素合成酶基因的cDNA，又能在Ti质粒的T-DNA区域打开相同末端，且不破坏T-DNA的启动子、终止子等关键结构，保证目的基因正常表达 (2) RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动目的基因转录 筛选出含有目的基因的受体细胞 (3) PCR技术、DNA分子杂交技术 抗原—抗体杂交（或观察受体细胞表现出紫色性状） 21（10分） (1) 引物2和引物3 (2) 模板DNA、引物 使引物与变性后的单链模板DNA通过碱基互补配对特异性结合 (3) A （4）P1、P2 2 1 学科网（北京）股份有限公司 $