2027届高三生物一轮复习阶段滚动检测(五)

**基本信息** 聚焦生物技术与生态调节的跨模块滚动检测，通过生产实例与实验分析考查生命观念和科学思维 **综合设计** |模块|题量/典例|题型特征|知识逻辑| |----|-----------|----------|----------| |生物技术实践|4（泡菜发酵/细胞培养等）|结合生产流程考查操作原理|从无菌技术→脱分化→次生代谢物，构建技术操作链| |生态与调节|3（神经递质/农业生态）|以图表为载体分析调节机制|从突触传递→生态工程原理，体现结构与功能观| |基因与细胞工程|5（CRISPR/体细胞杂交等）|依托前沿技术考查操作步骤|从基因编辑工具→杂种植株筛选，形成技术应用逻辑| |实验与探究|4（药敏实验/双杂交技术）|设计对照实验分析结果|从变量控制→结果推理，培养科学探究能力|

阶段滚动检测(五)(第十单元) (75分钟　100分) 一、选择题:本题共16小题,共40分。第1~12小题,每小题2分;第13~16小题,每小题4分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。 1.(2025·深圳联考)泡菜是指为利于长时间存放而进行发酵的蔬菜。下列关于腌制泡菜的叙述,正确的是(　　) A.泡菜发酵期间,乳酸积累到质量分数为0.4%~0.8%时,泡菜的口味、品质最佳 B.不同腌制时间,泡菜中亚硝酸盐含量均不相同 C.泡菜发酵过程中表面出现白膜,可能是醋酸菌液面大量发酵引起的 D.膳食中的亚硝酸盐会危害人体健康 【解析】选A。制作传统泡菜是利用植物体表面天然的微生物进行发酵,发酵期间,乳酸会不断积累,当它的质量分数为0.4%~0.8%时,泡菜的口味、品质最佳,A正确;泡菜腌制过程中,随着时间的增加,亚硝酸盐的含量先增加后减少,因此不同腌制时间,泡菜中亚硝酸盐含量可能相同,B错误;在泡菜制作过程中,泡菜发酵液的营养丰富,其表面往往含有适量的氧气,适合酵母菌生长繁殖,成膜酵母菌生长繁殖会在泡菜坛液面形成一层白膜,C错误;膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康,D错误。 2.(滚动单独考查)(2024·广东六校联考)癫痫是一种神经系统疾病,与谷氨酸(脑中主要的兴奋性递质)代谢异常有关。癫痫发病时,患者脑内谷氨酸浓度升高且在发作后长时间内保持高水平。谷氨酸在脑内的代谢过程如图。下列叙述错误的是(　　) A.突触前神经元兴奋引发突触小体通过胞吐释放谷氨酸 B.EAAT 功能过强是导致癫痫的重要因素 C.突触前神经元和胶质细胞均可回收谷氨酸 D.谷氨酸与突触后神经元上受体结合使Na+通过通道蛋白大量内流 【解析】选B。图中谷氨酸属于神经递质,突触前神经元兴奋引发突触小体通过胞吐释放谷氨酸,作用于突触后膜,A正确;据图可知,突触前神经元和胶质细胞都可以通过膜上EAAT回收谷氨酸,若EAAT功能过强,则会使谷氨酸回收量增加,进而导致突触间隙的谷氨酸含量减少,而题干中指出癫痫是由患者脑内谷氨酸浓度升高且在发作后长时间内保持高水平所致,故EAAT功能过强并不会导致癫痫,B错误,C正确;谷氨酸是兴奋性递质,与受体结合后,可使突触后膜Na+通道打开,使Na+通过通道蛋白大量内流,进而发生膜内外电位变化,产生内正外负的动作电位,D正确。 3.(2025·云南适应性测试)人参皂苷具有重要的药用价值,可通过植物细胞培养生产。下列说法错误的是(　　) A.外植体消毒需用酒精和次氯酸钠溶液 B.外植体脱分化形成愈伤组织需要光照和氧气 C.可通过液体培养获得大量愈伤组织细胞 D.人参皂苷属于植物细胞的次生代谢物 【解析】选B。外植体在接种于培养基培养时,需先后用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒,消毒流程为:先用流水充分冲洗后的外植体用酒精消毒30 s,然后立即用无菌水清洗2~3次,再用次氯酸钠溶液处理30 min后,立即用无菌水清洗2~3次,A正确;脱分化形成愈伤组织过程中,需要遮光处理,不需要光照,B错误;植物细胞的培养一般使用液体培养基,因此可通过液体培养获得大量愈伤组织细胞,C正确;次生代谢物是指植物代谢产生的一些一般认为不是植物基本的生命活动所必需的产物,因此,人参皂苷属于植物细胞的次生代谢物,D正确。 4.(滚动单独考查)国务院《“十四五”推进农业农村现代化规划》指出“2035年,乡村全面振兴取得决定性进展,农业农村现代化基本实现。”下列有关该策略的说法错误的是(　　) A.培育良种、科学种植,提高农业生产效率,可以提高生态承载力 B.发展现代化农业时建立沼气池遵循的是生态工程的循环原理 C.多层育苗等立体农业生产方式增大了流入生态系统的总能量 D.“桑基鱼塘”实现了能量的多级利用,大大提高能量的传递效率 【解析】选D。培育良种、科学种植,提高农业生产效率,从而提高产量,可以提高生态承载力,A正确;发展现代化农业时建立沼气池,充分实现能量的多级利用,遵循的是生态工程的循环原理,B正确;多层育苗等立体农业生产方式,增加了环境资源的利用率,从而增大了流入生态系统的总能量,C正确;“桑基鱼塘”实现了能量的多级利用,但不能提高能量的传递效率,D错误。 5.(2025·珠海模拟)肺炎支原体的药敏实验中,将蘸有相同浓度的阿奇霉素、克拉霉素和罗红霉素的圆形滤纸片放置于平板不同位置。培养一段时间后,平板上出现的抑菌圈情况如图所示。下列叙述正确的是(　　) A.支原体与病毒的根本区别是细胞内无核糖体 B.可依据菌落特征判断病人是否有支原体感染 C.?处作为对照组,圆形滤纸片上滴加蒸馏水 D.阿奇霉素抑制支原体增殖效果比克拉霉素好 【解析】选B。支原体是原核细胞,有细胞结构,病毒无细胞结构,因此支原体与病毒的根本区别是有无细胞结构,A错误;支原体可在培养基上生存,可根据菌落特征判断病人是否有支原体感染,B正确;除实验中的三种抗生素组别外还需要设置空白对照组,故“?”处放置的是蘸有无菌水的圆形滤纸片,C错误;图示三个滤纸片中,克拉霉素对应的抑菌圈比阿奇霉素大,说明克拉霉素抑制效果比阿奇霉素好,D错误。 6.为提高培育转基因植株的成功率,植物转基因受体需具有较强的再生能力和遗传稳定性。下列关于植物转基因受体的叙述错误的是(　　) A.对受体细胞遗传稳定性的早期检测,可通过观察细胞内细胞核形态是否改变判断 B.对受体细胞遗传稳定性的早期检测,可通过分析染色体组型是否改变进行判断 C.受体全能性表达程度与受体的取材有关,受体为愈伤组织时全能性表达能力最高 D.受体全能性表达程度取决于受体的基因型、培养环境和培养时间长短等因素 【解析】选C。染色体数目的变异在显微镜下可见,故对培养的受体细胞遗传稳定性的早期检测,可通过观察细胞核形态是否改变进行判断,也可以直接在光学显微镜下观察分裂期染色体的形态特征和数量,分析染色体组型是否改变,A和B正确;受体全能性表达程度与受体的取材有关,受体为受精卵时全能性表达能力最高,C错误;植物转基因受体全能性表达程度高低除了与受体基因型、培养环境、传代次数有关,还与培养时间长短和受体的取材有关,D正确。 7.以菜花为材料提取DNA时,需将材料进行研磨,研磨液的成分常含有SDS(蛋白质变性剂)、EDTA(DNA酶抑制剂,稳定DNA活性)、Tris(缓冲剂)。下列有关叙述错误的是(　　) A.若选择鸡血细胞为材料,则省去了研磨过程 B.SDS可以使蛋白质变性,便于DNA与蛋白质分离 C.EDTA可以防止DNA水解成核糖核苷酸 D.Tris可以调节溶液中的pH 【解析】选C。鸡血细胞悬浮液作为实验材料,利用细胞吸水涨破的原理,省去了研磨过程,A正确;SDS是蛋白质变性剂,可使蛋白质结构变得松散,使染色体中DNA和蛋白质分离,B正确;DNA的基本单位是脱氧核苷酸,EDTA是DNA酶抑制剂,可以防止DNA水解成脱氧核苷酸,C错误;Tris是缓冲剂,可调节溶液中的pH,D正确。 8.(滚动交汇考查)生猪育种的过程可采用体外受精技术、孤雌生殖(卵细胞不经过受精发育成个体)和孤雄生殖(见下表③)等多种辅助生殖技术。某科研团队为研究不同辅助生殖技术下猪胚胎存活率存在差异的原因,追踪了猪早期胚胎发育过程中染色质的空间构象变化(见下表)。下列相关叙述错误的是(　　) 操作 对象 辅助 生殖技术 4细胞 胚胎期 桑葚胚 胚胎 存活率 MⅡ 期卵 母细 胞　 ①体外受精技术 染色质空间构象较快建立 高 ②孤雌生殖 染色质特殊区域解体 解体区域部分重建较慢 低 ③去核后体外受精 解体区域部分重建更慢 低 A.体外受精需对卵母细胞和精子分别进行成熟培养和获能处理 B.与②③不同,①必须将早期胚胎移植给受体才能获得后代 C.母源来源的染色质比父源的染色质更容易实现结构的重建 D.染色质结构重建的速率可能在胚胎成功发育中起关键作用 【解析】选B。体外受精时采集的卵母细胞应培养到MⅡ期,精子应经过获能处理,这样两者才能受精形成受精卵,A正确;胚胎工程任何一项技术获得的胚胎,都必须将胚胎移植给受体才能获得后代,因此①②③都需要将早期胚胎移植给受体才能获得后代,B错误;据表格可知,在桑葚胚时,孤雌胚胎和孤雄胚胎的染色质特殊区域都能进行部分重建,但去核后体外受精(孤雄生殖)重建速率更慢,说明母源来源的染色质比父源的染色质更容易实现结构的重建,C正确;据表可知,无论是体外受精技术,还是孤雌生殖(卵细胞不经过受精发育成个体)和孤雄生殖,胚胎发育过程中都需要染色质空间构象重建,但体外受精构象较快建立且胚胎存活率高,说明染色质结构重建的速率可能在胚胎成功发育中起关键作用,D正确。 9.(2025·湛江模拟)镰状细胞贫血(SCD)是一种由基因突变导致血红蛋白S出现异常,使得红细胞呈镰刀状的遗传病,利用CRISPR-Cas9技术编辑患者自体CD34+细胞的基因组,使靶位点DNA双链断裂实现基因敲除,可有效治疗镰状细胞贫血。下列叙述正确的是(　　) A.CD34+细胞可能是一种造血干细胞 B.CRISPR-Cas9技术依赖Cas9核酸内切酶破坏氢键来敲除基因 C.镰状细胞贫血属于分子水平上的变异,不可通过光学显微镜观察进行诊断 D.患者经过基因治疗后不会产生具有基因缺陷的后代 【解析】选A。编辑患者自体CD34+细胞的基因组,可以有效治疗镰状细胞贫血,可推测接受基因改造的CD34+细胞可能是一种造血干细胞,能分化出正常的红细胞,A正确;由于CRISPR-Cas9基因编辑技术可以对基因组进行编辑,Cas9内切核酸酶破坏的是磷酸二酯键,B错误;镰状细胞贫血患者的红细胞形态呈现镰刀状,因此可通过光学显微镜观察进行诊断,C错误;患者经过基因治疗后,其生殖细胞的遗传物质并没有改变,有可能产生具有基因缺陷的后代,D错误。 10.(2025·汕头模拟)花椰菜种植时容易遭受病菌侵害形成病斑,紫罗兰具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示,通过蛋白质电泳技术分析了亲本和④过程获得的植株1~5中的特定蛋白,结果如图2所示。下列有关叙述正确的是(　　) A.图1过程①在无菌水中进行,过程③在固体培养基中进行 B.图2中1、2、3为杂种植株,4、5分别为花椰菜和紫罗兰 C.图2中通过蛋白质电泳技术获得了有关氨基酸序列的数据信息 D.确定杂种植株后,可用在叶片上喷施病菌悬浮液的方法筛选出其中抗病性强的植株 【解析】选D。为避免原生质体吸水涨破,图1过程中①在等渗或略高渗溶液中进行,而不是在无菌水中,A错误;4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质,说明是杂种细胞,而1、2、3号个体只有花椰菜中的蛋白质,说明不是杂种细胞,B错误;图2中,蛋白质电泳技术是根据不同蛋白质的带电性质、形状和大小等不同,在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同,导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同,该技术不能获得有关氨基酸序列的数据信息,C错误;确定杂种植株后,可将病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上,一段时间后,测定病斑面积占叶片总面积的百分比,筛选出抗病性强的杂种植株,D正确。 11.(2025·云南适应性测试)Hv-Lv肽链是抗体与抗原识别并结合的关键结构。为筛选特异性高、结合能力强的Hv-Lv肽链,将编码Hv-Lv肽链的DNA片段与丝状噬菌体固有外壳蛋白pⅧ的基因连接并一起表达,最后用固定化抗原筛选(过程如图)。 下列说法错误的是(　　) A.Hv-LvDNA片段上游需要设计并连接启动子 B.Hv-LvDNA片段上无需连接标记基因 C.目标是获得能耐受多次冲洗的噬菌体 D.实验过程须严格遵循生物防护措施 【解析】选C。启动子位于基因的上游,是RNA聚合酶识别与结合的位点,可用于驱动基因的转录,故Hv-LvDNA片段上游需要设计并连接启动子,A正确;Hv-Lv肽链是抗体与抗原识别并结合的关键结构,而Hv-LvDNA可表达出Hv-Lv肽链,该技术中Hv-LvDNA属于目的基因,无需连接标记基因,B正确;结合题意可知,该过程目的是筛选特异性高、结合能力强的Hv-Lv肽链,C错误;实验过程须严格遵循生物防护措施,尽量避免可能会带来的安全问题,D正确。 12.下列关于生物技术的应用理解不正确的是(　　) A.“设计试管婴儿”属于生殖性克隆,故引发了关于伦理道德的讨论 B.利用基因工程培养工程菌,是因为微生物具有生理结构和遗传物质简单、生长繁殖快等优点 C.保护野生动物的目的是既要保留物种又要保留基因,更重要的是保留物种 D.制备单克隆抗体的过程中有细胞培养的过程,但是培养基成分与细胞培养可以有差异 【解析】选A。“设计试管婴儿”不属于生殖性克隆,A错误;微生物具有生理结构和遗传物质简单、生长繁殖快等优点,便于研究和操作,B正确;保护野生动物的目的是既要保留物种又要保留基因,更重要的是保留物种,C正确;制备单克隆抗体的过程中有细胞培养的过程,需要对细胞进行筛选,则不同时期的培养基成分与细胞培养有差异,D正确。 13.荧光定量PCR技术可检测样本中DNA含量,其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时,加入与某条模板链互补的荧光探针,当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针,使荧光监测系统接收到荧光信号,即每扩增一次,就有一个荧光分子生成(如图)。Ct值的含义为每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法不正确的是(　　) A.检测新型冠状病毒时,需加入逆转录酶将新型冠状病毒RNA转化为cDNA B.子链延伸时,脱氧核苷酸原料首先加到引物的3'端 C.Ct值越大表示被检测样本中病毒数目越多,患者危险性更高 D.若样本被污染,RNA酶将病毒RNA降解,检测结果可能为阴性 【解析】选C。耐高温的DNA聚合酶不能直接应用于RNA上,应先将病毒RNA反转录为cDNA,即检测新型冠状病毒时,需加入逆转录酶将新型冠状病毒RNA转化为cDNA,A正确;PCR技术中的每个循环由变性、复性、 延伸三个基本反应步骤构成,DNA复制是有方向性的,即在PCR延伸过程中,4种脱氧核苷酸依次加到引物的3'端,B正确;由题可知,Ct值越大,该反应管内的荧光信号到达设定阈值经历的循环数越大,即每次循环出现的荧光信号越少,代表被检测样本中的病毒数目越少,患者危险性越小,C错误;若样本被污染,RNA酶将病毒RNA降解,会导致无法检测出样本内的正确病毒数目,D正确。 14. (2025·茂名模拟)转录因子Gh1和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育,参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑,其机制如图所示。下列相关分析正确的是(　　) A.将愈伤组织细胞在脱分化培养基上继续培养可得到幼苗 B.Gh1基因发生甲基化可能会抑制愈伤组织细胞的增殖 C.促进GhEl基因的表达可促进愈伤组织分化成根等器官 D.Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达 【解析】选B。将脱分化产生的愈伤组织,在再分化培养基上继续培养可得到幼苗,A错误;Gh1基因发生甲基化,则会抑制Gh1基因表达,不能与GhE1基因的表达产物形成复合物,GhPs基因不能表达,会抑制愈伤组织细胞的增殖,B正确;促进GhE1基因的表达,可能会导致GhPs基因的表达产物增多,从而促进愈伤组织细胞的增殖,抑制愈伤组织分化成根等器官,C错误;Gh1基因与GhE1基因表达后形成的蛋白质相互结合可调控GhPs基因的表达,Gh1与GhE1单独作用不能调控GhPs基因的表达,D错误。 15.(2025·肇庆联考)HER-2(一种跨膜糖蛋白)高表达通常只出现于胎儿期,正常人体组织中其表达量极低,在乳腺细胞中高表达可加速细胞分裂,使其增殖、分化过程失衡,最终转变为乳腺癌。抗体-药物偶联物T-DMI由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成,对HER-2有很强的靶向性。下列相关分析错误的是(　　) A.胎儿期HER-2高表达可能与胚胎发育有关,成人HER-2含量高可为乳腺癌诊断提供参考 B.因为获取的B淋巴细胞可能有多种,所以曲妥珠单抗制备过程需进行专一抗体阳性检测 C.DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键 D.利用同位素标记的曲妥珠单抗在乳腺组织中成像的技术可定位诊断肿瘤的位置 【解析】选C。HER-2(一种跨膜糖蛋白)高表达通常只出现于胎儿期,可能与胚胎发育有关,正常人体组织中其表达量极低,在乳腺细胞中高表达可加速细胞分裂,使其增殖、分化过程失衡,最终转变为乳腺癌,所以成人HER-2含量高可为乳腺癌诊断提供参考,A正确;机体生活的环境存在多种抗原,所以获取的B淋巴细胞可能有多种,故曲妥珠单抗的制备过程需进行专一抗体阳性检测,以保证能与HER-2特异性结合,B正确;DMI是药物,不能与HER-2特异性结合,能与HER-2特异性结合的是曲妥珠单抗,C错误;曲妥珠单抗能与HER-2特异性结合,故利用同位素标记的曲妥珠单抗在乳腺组织中成像的技术可定位诊断肿瘤的位置,D正确。 16.(2024·广东调研)为研究水稻D基因的功能,研究者将T-DNA插入D基因中,致使该基因失活,失活后基因记为d。为验证F2植株基因型(DD、Dd、dd),研究者根据D基因、 T-DNA的序列设计了3种引物。随机选取F2植株若干,提取各植株的总DNA,分别用引物“Ⅰ+Ⅲ”组合(A组)及“Ⅱ+Ⅲ”组合(B组)进行PCR扩增,检测是否扩增(完整的T-DNA过大,不能完成PCR扩增)。下列叙述错误的是(　　) A.引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 B.PCR 扩增需要2种引物,确保特异地复制处于2个引物之间的DNA序列 C.若A组进行 PCR可完成扩增,B组不能,则相应植株的基因型是DD D.若 A、B组进行 PCR均可完成扩增,则相应植株的基因型是Dd 【解析】选C。引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸,A正确;PCR 扩增需要2种引物,确保特异地复制处于2个引物之间的DNA序列,B正确;子链延伸的方向是从5'到3',当使用引物Ⅰ+Ⅲ组合进行PCR时,可扩增出从D基因的左端到T-DNA之间的部分序列,表明该植株有d基因,当使用引物Ⅱ+Ⅲ组合进行PCR时,可扩增出未插入T-DNA的D基因的从左端CCGTGT到右端ATGCCT之间的序列,又由题意可知,完整的T-DNA过大,不能完成PCR扩增,所以D基因中若插入T-DNA,即基因为d时,通过PCR不能扩增,总之,当使用引物Ⅱ+Ⅲ组合进行PCR时,能扩增的是D基因,不能扩增的是d基因,所以当使用引物Ⅰ+Ⅲ组合和使用引物Ⅱ+Ⅲ组合进行PCR时,如果两组进行PCR均可完成扩增,则相应植株的基因型为Dd,如果使用引物Ⅰ+Ⅲ组合进行PCR能完成,而使用引物Ⅱ+Ⅲ组合进行PCR时不能完成时,基因型为dd,如果使用引物Ⅰ+Ⅲ组合进行PCR不能完成,而使用引物Ⅱ+Ⅲ组合进行PCR时能完成时,基因型为DD,C错误,D正确。 二、非选择题:本题共3小题,共60分。 17.(20分)(滚动单独考查)与常规农业相比,有机农业、无公害农业通过禁止或减少化肥、农药的使用,加大有机肥的应用,对土壤生物产生了积极的影响。某土壤中部分生物类群及食物关系如图所示,三种农业模式土壤生物情况如表所示。 取样深度 /cm 农业模式 生物组分 (类) 食物网复杂 程度(相对值) 0~10 常规农业 15 1.06 有机农业 19 1.23 无公害农业 17 1.1 10~20 常规农业 13 1 有机农业 18 1.11 无公害农业 16 1.07 (1)(7分)土壤中的线虫类群丰富,它们在土壤生态系统的结构中属于消费者成分,若捕食性线虫为该土壤中的最高营养级,与食细菌线虫相比,捕食性线虫同化能量的去向不包括流入下一个营养级。  【解析】(1)据图可知,植食性线虫吃植物的根系,捕食性线虫吃植食性线虫和食细菌线虫,食细菌线虫吃腐生细菌,因此线虫在土壤生态系统的结构中属于消费者;一个营养级的生物所同化的能量一般用于4个方面:一是呼吸消耗,二是分解者分解,三是流入下一营养级,四是未利用的能量。若捕食性线虫为该土壤中的最高营养级,则与食细菌线虫相比同化能量的去向不包括流入下一营养级。 (2)(6分)取样深度不同,土壤中生物种类不同,土壤中小动物类群丰富度常用的采集、调查方法是取样器取样法。  【解析】(2)由于土壤小动物具有身体微小、活动能力强的特点,调查其类群丰富度常用的采集、调查方法是取样器取样法。 (3)(7分)由表中数据可知,土壤生态系统稳定性最高的农业模式为有机农业,依据是生物组分多,食物网复杂程度高。  【解析】(3)一般来说,生态系统中的生物种类越多,食物网越复杂,其稳定性就越高,分析表中数据可知,有机农业土壤中生物种类和数量较多,营养结构复杂,是土壤生态系统稳定性最高的农业模式。 18.(20分)(2024·中山模拟)柑橘酸腐病是由白地霉引起的柑橘贮藏期常见的病害之一。抗菌肽是一种抑菌活性强、无环境污染的生物多肽,目前已用于多种农业病菌的防治。研究人员研究了抗菌肽对白地霉的抑菌效果,并且对其作用机制进行了探究。回答下列问题: 利用基因工程合成抗菌肽时,基本流程为:克隆目的基因→导入枯草杆菌→筛选菌种→诱导抗菌肽表达→分离纯化→功能研究。 (1)(6分)白地霉从柑橘中获得其生长繁殖所需的水、无机盐、碳源和氮源等营养物质。  【解析】(1)微生物生长一般都需要水、无机盐、氮源、碳源等营养物质。 (2)(7分)为研究抗菌肽对白地霉的抑菌效果,现用无菌打孔器在果实相同部位打孔,每个打孔处接种相同体积的处理液,比较15天后的病斑直径。各组处理及结果见表。 组别 1 2 3 4 5 接种处理方式 接种一定体积的病原菌孢子悬浮液 抗菌肽溶液与病原菌孢子悬浮液混合后直接接种 先加入抗菌肽溶液,2 h后接种病原菌孢子悬浮液 X 抗菌肽溶液与病原菌孢子悬浮液混合,培养2 h后接种 15天后病斑直径/mm 41.3 13.9 29.3 28.7 11.2 表中数据表明抗菌肽对白地霉有一定的抑菌效果,且抑菌效果与抗菌肽、病原菌孢子悬浮液接种顺序有关,表中X为先接种病原菌孢子悬浮液,2 h后再加入抗菌肽溶液。与第2组相比,第5组抑菌效果更好的可能原因是相比第2组,第5组混合后培养2 h,使抗菌肽与病原菌孢子充分接触,更有效发挥作用。  【解析】(2)根据表中接种处理方式可知,1组只接种病原菌,为对照组,2、3、5组均接种了等量且适量的抗菌肽溶液与病原菌孢子悬浮液,但每组的接种顺序不同,说明自变量为抗菌肽溶液与病原菌孢子悬浮液的接种顺序,2组与5组均为二者先混和,但2组混合后直接接种,5组混合后先培养2 h再接种,则结合第3组先加入抗菌肽溶液2 h后接种病原菌孢子悬浮液可分析得出,4组应与3组接种顺序相反,即先接种病原菌孢子悬浮液2 h后再加入抗菌肽溶液;抗菌肽直接作用与病原体,因此先混合培养2 h可使二者充分接触,使抗菌肽充分发挥抑菌作用,再接种后,病原菌孢子数量大大减少,引起的病斑直径下降。 (3)(7分)一般情况下,电导率和离子浓度呈正相关,通过测量溶液电导率可以反映出溶液中离子浓度的大小。研究人员将白地霉孢子与抗菌肽在无菌水中混合,测定电导率,培养一段时间后,再次测定电导率,结果发现电导率明显升高,据此推测抗菌肽抑制白地霉孢子的作用机制可能是抗菌肽破坏病原菌孢子的细胞膜,细胞内容物释放。  【解析】(3)白地霉孢子与抗菌肽在无菌水中混合培养一段时间后,溶液电导率明显上升,说明溶液中离子浓度增大,增加的离子只能来源于白地霉孢子细胞中,因此推测抗菌肽抑制白地霉孢子的作用机制可能是抗菌肽破坏病原菌孢子的细胞膜,使细胞内容物释放,杀死细胞。 19.(20分)(2025·揭阳联考)酵母菌双杂交技术常用于证明两种蛋白质(如蛋白质X和Y)是否能相互作用,其原理见下图。BD和AD 是构成转录激活因子的两个独立结构域,当二者未结合时,无法激活转录报告基因;将待测蛋白质 X 与 BD 融合,Y与 AD 融合,若蛋白质X和Y互作,则BD 和AD空间上靠近结合,才能激活转录报告基因。柑橘黄化脉明病毒(CYVCV)可引起柑橘黄脉病,其外壳蛋白(CP) 参与侵染、致病。现利用酵母菌双杂交技术,寻找与CP 蛋白互作的寄主蛋白。 实验步骤如下: (1)(6分)构建柑橘染病叶片的cDNA:柑橘幼苗需先进行柑橘黄化脉明病毒(CYVCV)处理,再提取叶片的总RNA,经逆转录得到cDNA。利用质粒1(见上图)和cDNA,构建含AD 和寄主蛋白融合基因的重组质粒,即寄主蛋白—质粒1。  【解析】(1)构建柑橘染病叶片的cDNA:柑橘幼苗需先用柑橘黄化脉明病毒(CYVCV)处理,再提取叶片的总RNA,经逆转录得到cDNA,其中包含与CP 蛋白互作的寄主蛋白基因。 (2)(6分)构建含BD 和CP蛋白融合基因的重组质粒:为了使CP 基因能够正确地插入质粒2(见上图),PCR获取CP 基因所用的两种引物的5'端需分别添加序列5'-CATATG-3'、5'-CCCGGG-3'。用相应限制酶切割目的基因和质粒2后,再用T4DNA 连接酶缝合,得到CP—质粒2。  【解析】(2)为了使CP 基因能够正确地插入质粒2,应将CP蛋白基因插入BD基因和终止子之间,PCR获取CP 基因所用的两种引物的5'端需分别添加NdeⅠ和SmaⅠ的识别序列　　 ↓ 5'-CATATG-3'和　　　 ↓ 5'-CCCGGG-3'。用相应限制酶切割目的基因和质粒2后,SmaⅠ切割后得到平末端,再用T4 DNA 连接酶缝合,得到CP—质粒2。 (3)(8分)将构建成功的寄主蛋白—质粒1 和 CP—质粒2同时转染某一营养缺陷型酵母菌(不能合成组氨酸、色氨酸、亮氨酸和腺嘌呤),再将转染后的酵母菌接种在不同类型的平板上并观察菌落出现情况。 ①若在不含色氨酸或不含亮氨酸的平板上长出菌落,仅能说明两种重组质粒成功转染,但未知 CP与对应寄主蛋白是否互作。  ②若在不含组氨酸、色氨酸、亮氨酸和腺嘌呤的平板上长出菌落,能证明CP 与对应寄主蛋白互作,可推测出报告基因应含有腺嘌呤合成基因、组氨酸合成基因。  ③仅靠CP蛋白也可能使得 AD 和BD 结合,为了排除这种可能性,应增加一组对照:用CP—质粒2和质粒1同时转染该营养缺陷型酵母菌。  【解析】(3)①若在不含色氨酸或不含亮氨酸的平板上长出菌落,仅能说明两种重组质粒成功转染,但未知 CP与对应寄主蛋白是否互作。 ②若在不含组氨酸、色氨酸、亮氨酸和腺嘌呤的平板上长出菌落,能证明CP 与对应寄主蛋白互作,可推测出报告基因应含有腺嘌呤合成基因、组氨酸合成基因。 ③仅靠CP蛋白也可能使得 AD 和BD 结合,为了排除这种可能性,应增加一组对照:用CP—质粒2和质粒1同时转染该营养缺陷型酵母菌。 - 19 - 学科网（北京）股份有限公司 $