蒸馏水瓶、废液缸、废料、刚生理盐水、细菌培养物、酒精灯、接种环架接种环、记号笔、吸水纸、火柴、载玻片、杀防护染液、脱涩、酒精、格兰仕碘液结晶紫染色液、培养皿。2、实验步骤一、图片取捷径，载不篇。一篇。做标记。拿起酒精灯，点燃酒精灯。接种环烧灼灭菌后，调取1至2环生理盐水至于载玻片中央。接种环灭菌后，调取细菌培养物少许盐，入生理盐水中做成菌悬液，以警衔液中点为圆心画同心圆，将菌悬液涂布成直径约1厘米左右的菌膜，使其薄而均匀。接种环烧灼灭菌后，放于接种环架上。2、干燥，将图片的举膜面朝上，在酒精灯火焰上方7到10厘米的热空气中进行烘干，切勿靠近火焰图片，也可在空气中自然干燥。3、固定，待菌液干燥后将图片的的菌膜面朝上，在酒精灯外焰上来回通过2到3次，以拨片反面触及手背感觉热而不烫手为宜，熄灭酒精灯。4、初苒在固定好的图片上滴加结晶紫染色液，染液覆盖整个菌膜为宜。染色计时一分钟，一分钟后拿住玻片使制成45度角，用洗瓶从载玻片前端进行水洗，切勿对准菌膜冲洗。让流水。带走染色液，水流至流出水无色，用吸水纸吸去玻片上多余的水。5、没染滴加格兰仕碘液，覆盖菌膜染色一分钟。用蒸馏水水洗至流出水无色。用吸水纸吸去玻片上多余的水。6、脱色，拿住拨片使制成45度角，滴加95酒精进行图片脱色剂。脱色20到30秒后水洗。用吸水纸吸去玻片上多余的水。七复染滴加砂，防染液与菌膜表面染色一分钟。蒸馏水水洗至流出水无色。再用吸水纸吸去玻片上多余的水，晾干后净简。3、实验注意事项一、军零一定要选取对数期18到24小时的细菌培养物进行染色，老林的格兰氏阳性菌容易被染成红色，造成假阴性现象。2、图片厚薄，调取的菌量要适宜，图片应该薄而均匀，不宜太厚。3、固定程度，火焰固定以热而不烫为宜，以免破坏细胞形态。4、脱色时间，乙醇脱色是影响实验结果的关键因素，注意控制好脱色时间，脱色时间过长，阳性菌会被染成阴性菌。脱色时间不够，阴性菌会被染成阳性菌。