黑龙江牡丹江市海林市高级中学2025-2026学年度下学期高二学年第十一周周考卷

**基本信息** 高二生物周测试卷聚焦生物技术实践与现代生物工程，融合传统发酵（制醋）、基因编辑（CRISPR/Cas9）、单克隆抗体制备等真实情境，通过图表分析、实验设计等考查科学思维与探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|25题|微生物培养（2题）、酶活性（3题）、胚胎工程（12题）等|第3题结合折线图分析pH对酶活性影响，考查科学思维| |不定项选择题|5题|蛋白质工程（26题）、PCR技术（27题）等|27题通过电泳结果分析抗性基因扩增，体现探究实践| |非选择题|2题|核移植（31题）、重组质粒构建（32题）|32题综合限制酶选择、PCR引物设计，考查工程实践能力|

海林市高级中学高二学年下学期第十一周周考试卷 一、单选题 1．制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物，常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是（    ） A．食用醋的酸味主要来源于乙酸 B．醋酸菌不适宜在无氧条件下生存 C．醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶 D．葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内 2．从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（    ） A．制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌 B．将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布 C．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 D．鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存 3．如图是某课外活动小组探究酶活性影响因素时绘制的实验结果图。下列有关叙述正确的有（    ）    ①．pH为3时酶的活性小于pH为9时酶的活性 ②．pH为1时有淀粉水解，则过酸条件下酶没有失活 ③．实验的自变量是1h后淀粉剩余量，因变量是pH ④．应先将各组的淀粉溶液和淀粉酶溶液的pH值调到设定数值再混匀 ⑤．1h后若将pH为13的试管的pH调至7，则其淀粉剩余量基本不变 A．1项 B．2项 C．3项 D．4项 4．生物学实验常呈现“五颜六色”的变化。下列实验中有关颜色变化的叙述正确的是（    ） A．在新鲜的梨汁中加入斐林试剂，混匀后在加热条件下由无色变成砖红色 B．在厌氧发酵的果汁中加入酸性重铬酸钾溶液，混匀后由蓝色变成灰绿色 C．在DNA溶液中加入二苯胺试剂，混匀后在沸水浴条件下逐渐变成蓝色 D．刚果红染液能与纤维二糖、葡萄糖等糖类物质结合形成红色复合物 5．PHA是一种由微生物合成的天然可降解高分子材料。我国科学家构建了一株耐盐碱能力强的嗜盐单胞菌H，利用糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液）为原料培养菌株H可以合成PHA替代传统塑料。根据发酵工程原理分析下列说法错误的是（    ） A．发酵结束后通过过滤、沉淀即可获得PHA，这是发酵工程的中心环节 B．在大规模发酵生产PHA过程中，要先对嗜盐单胞菌H进行扩大培养，以提高发酵效率 C．利用菌株H耐盐碱的特性，在发酵过程中可以适当提高盐浓度，防止其它杂菌污染 D．为了提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用率，可以用适当的高浓度蔗糖溶液做碳源选择培养目的菌种 6．某科创小组将叶绿素合成相关基因转入小麦愈伤组织，获得再生植株，并进行相关检测。下列实验操作错误的是（    ） A．将种子消毒后，取种胚接种到适当的固体培养基诱导愈伤组织 B．在提取的DNA溶液中加入二苯胺试剂，沸水浴后观察颜色以鉴定DNA C．将小麦色素提取液滴加到滤纸条，然后将色素滴加部位浸入层析液进行层析 D．对叶片抽气处理后，转到富含CO2的清水中，探究不同光照下的光合作用强度 7．Solexa测序是一种将PCR与荧光检测相结合的高通量测序技术。为了确保该PCR过程中，DNA聚合酶催化一个脱氧核苷酸单位完成聚合反应后，DNA链不继续延伸，应保护底物中脱氧核糖结构上的（    ） A．1'-碱基 B．2'-氢 C．3'-羟基 D．5'-磷酸基团 8．羊瘙痒病是感染性蛋白粒子PrPSc引起的。某些羊体内存在蛋白质PrPc，但不发病。当羊感染了PrPSc后，PrPSc将PrPc不断地转变为PrPSc，导致PrPSc积累，从而发病。把患瘙痒病的羊组织匀浆接种到小鼠后，小鼠也会发病。下列分析合理的是（    ） A．动物体内的PrPSc可全部被蛋白酶水解 B．患病羊体内存在指导PrPSc合成的基因 C．产物PrPSc对PrPc转变为PrPSc具有反馈抑制作用 D．给PrPc基因敲除小鼠接种PrPSc，小鼠不会发病 9．生物技术与工程学相结合，可研究、设计和加工生产各种生物工程产品。下列有关叙述正确的是（    ） ①由于外植体在植物组织培养过程中不感染病毒，用任何外植体都可制备脱毒苗 ②由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用 ③胚胎移植作为胚胎工程的前端技术环节，推动了胚胎工程其他技术的研究和应用 ④PCR反应过程可以在PCR扩增仪中自动完成，而后常用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物 ⑤利用基因工程技术的乳腺生物反应器，可以让哺乳动物批量生产相应的药物 ⑥蛋白质工程仅以蛋白质结构为基础逆中心法则进行，就可以改造或制造新的蛋白质 A．①③ B．②④⑤ C．②③④⑥ D．①③④⑤⑥ 10．下图为转基因抗冻番茄培育过程的示意图（其中ampr为氨苄青霉素抗性基因）。下列叙述不正确的是（    ） A．质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞和促进目的基因的表达 B．可同时选用限制酶Pst I、Sma I对含目的基因的DNA进行剪切 C．过程②可采用农杆菌转化法将含目的基因的表达载体导入受体细胞 D．④过程中可利用放射性同位素标记的目的基因作为探针对植株进行筛选 11．生物工程在社会生产中的应用日益广泛，下列相关技术和方法错误的是（    ） A．利用组织培养技术实现兰花的快速繁殖和优良性状的保持 B．在没有CO2的有氧环境中进行胚胎干细胞培养 C．利用灭活病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 D．对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵用于胚胎制备 12．为保护濒危哺乳动物甲，科研工作者将甲的近亲物种乙（种群数量多）进行了如图所示的研究，下列叙述正确的是（    ） A．克隆动物的核基因组来源于甲、乙 B．体外受精需用获能的精子与MI期的卵母细胞受精 C．囊胚①的内细胞团可发育为胎盘、个体 D．滋养层可影响内细胞团的发育 13．CD47是一种细胞膜表面的糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的功能。为验证抗CD47的单克隆抗体能减弱CD47对巨噬细胞的抑制作用，某科研小组进行了实验，实验过程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．CD47与巨噬细胞结合后会抑制后者的抗原处理、呈递功能 B．通常向肿瘤细胞共培养体系加入血清，可提供某些营养物质 C．融合、筛选得到的杂交瘤细胞都能产生抗CD47的单克隆抗体 D．预期实验结果为实验组的巨噬细胞的吞噬能力高于对照组的 14．我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，再用小分子TH34成功诱导衍生成胰岛B细胞。下列相关叙述错误的是（    ） A．基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞 B．在小分子TH34诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因 C．衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗糖尿病 D．若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡 15．胚胎移植是医学和农业生产上应用较多的胚胎工程技术。下列生物技术需用到胚胎移植的是（    ） ①体细胞核移植  ②胚胎分割  ③培育转基因动物  ④动物细胞培养  ⑤动物细胞融合 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．②③⑤ 16．科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了羊毛长度显著长于对照组的优良品系。下列叙述错误的是（    ） A．为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理 B．为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理 C．受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加 D．对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响 17．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是（    ） A．通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精 B．哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质 C．克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程 D．将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖 18．科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（    ） A．超数排卵 B．精子获能处理 C．细胞核移植 D．胚胎培养 19．采用CRISPR/Cas9 基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因定点插入到受精卵的Y染色体上，获得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小鼠交配，通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操作错误的是（　　） A．基因编辑处理的受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液 B．基因编辑处理的受精卵经体外培养至2细胞期，须将其植入同期发情小鼠的子宫，才可获得表达 EGFP的小鼠 C．分离能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠 D．通过观察早期胚胎的荧光，能表达 EGFP 的即为雄性小鼠胚胎 20．为研究治疗性克隆能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行如图所示实验。下列说法错误的是（    ）    A．过程①～⑤利用并体现了动物细胞核的全能性 B．鼠皮肤细胞在进行①过程前可用灭活的病毒处理 C．在过程③和④中都体现了基因的选择性表达 D．受体小鼠应该不需要注射相应的免疫抑制剂 21．科学家利用携带猪源细胞表面蛋白基因（GT）的NDV病毒靶向感染人体内癌细胞，从而强烈激活免疫系统，起到了较好的肿瘤治疗效果。下列有关说法正确的是（　　） A．培养体外实验使用的癌细胞时，通常需添加血清 B．感染NDV-GT的癌细胞会被巨噬细胞特异性吞噬 C．经NDV-GT方法治愈的患者，体内不存在能识别GT蛋白的免疫细胞 D．人体正常细胞若被感染并表达了GT，不会被免疫系统识别为“非己”成分 22．肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A．①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞 B．②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞 C．③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞 D．④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测 23．下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“琼脂糖凝胶电泳”实验的相关说法，正确的是（    ） A．利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA溶于酒精 B．过滤后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解 C．琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越快 D．提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后即可变为蓝色 24．用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（　　）    A．若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同 B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因 C．若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D．若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落 25．深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（    ） 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① 常压 - + - ② 常压 + - - ③ 高压 - + - ④ 高压 + - + 注： “+”表示有；“一”表示无 A．可用平板划线法对该菌计数 B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C．由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长 D．由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长 二、不定项选择题 26．一种天然蛋白 t-PA 能高效降解因血浆纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药，但是心梗患者注射大剂量的t-PA会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低其诱发出血的副作用。据此，先对天然t-PA基因的碱基序列进行改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因，可制造出性能优异的改良 t-PA蛋白。下列说法不正确的是（    ）    A．以上技术制造出性能优异的改良 t-PA 过程被称为蛋白质工程 B．构建重组质粒时需要选用限制酶 Xma I 和 Nhe I 切割质粒 pCLY11 C．可使用T4 DNA 连接酶将t-PA 改良基因与质粒pCLY11连接 D．成功导入重组质粒的受体细胞在含有新霉素的培养基上能存活，且呈现蓝色 27．抗干热风小麦能够在干热风的环境下保持较好的生长状态。为研究抗干热风小麦的相关抗性基因，科研人员分别提取了普通小麦（甲）和抗干热风小麦（乙）的基因组DNA，并以两种小麦的DNA为模板，使用两对不同的引物进行PCR扩增，然后进行电泳检测，结果如下图所示。下列分析正确的是（　　）    注：1号：甲基因组DNA；2号：乙基因组DNA；3号：甲DNA的PCR扩增阳性对照；4号：乙DNA的PCR扩增阳性对照；5号：甲进行相关抗性基因的PCR扩增结果；6号：乙进行相关抗性基因的PCR扩增结果；7号：甲的PCR扩增空白对照；8号：乙的PCR扩增空白对照。 A．1号没有条带，可能是在制备或加样过程中操作不当，导致样本从凝胶孔中漏出 B．设置3号、4号PCR阳性对照实验的主要目的是检测DNA模板有无问题 C．设置7号、8号空白对照的主要目的是排除可能存在的外来DNA干扰 D．6号泳道中非特异性条带产生的原因可能是复性时的温度过高 28．瘤胃纤毛虫是一种能分泌纤维素酶的原生动物，生活在牛羊等反刍动物的瘤胃中。研究人员将纯化的瘤胃纤毛虫接种到含5mL改良培养液（由、、、NaCl等组成）的试管中，每天投喂100μL底物悬液（由淀粉和草粉组成），每3-4天换液一次，投喂和换液结束后均需充入某种气体再盖上盖子继续培养。每天进行计数，结果如图所示。相关叙述正确的是（    ） A．计数前应将瘤胃纤毛虫与培养液充分混匀 B．和共同作用能维持培养液的pH值 C．投喂和换液结束后充入的是，其目的是提供有氧环境 D．将等量瘤胃纤毛虫接种到含10mL改良培养液的试管中，其生长曲线将左移 29．制备抗猴痘病毒A35R蛋白单克隆抗体的流程如下，相关叙述正确的是（　　） ①生产A35R重复串联蛋白→②免疫小鼠→③取血清抗体效价高的小鼠再次免疫→④从小鼠脾脏中取B淋巴细胞采用PEG诱导其与骨髓瘤细胞融合→⑤筛选杂交瘤细胞→⑥筛选稳定分泌抗A35R蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞→⑦生产单克隆抗体 A．过程②用A35R重复串联蛋白免疫小鼠的主要目的是减少抗原的用量 B．过程④PEG进入细胞促进核膜融合，其结构基础是核膜的流动性 C．过程⑤筛选得到的杂交瘤细胞有多种，不同种细胞的染色体数可能不等 D．过程⑥通过多次克隆化培养和抗体检测，才能获得足够数量的所需杂交瘤细胞 30．利用非对称细胞融合技术可以实现两个原生质体核、质基因的优化组合，该技术对细胞质中含有优良基因的某一原生质体进行去核或破坏染色体处理，对细胞核中含有优良基因的第二种原生质体进行细胞质失活处理，然后将两个原生质体进行融合。下列说法正确的是（　　） A．采用梯度离心，紫外线照射等方法可以实现细胞去核 B．病毒表面的糖蛋白和酶能使细胞膜上的蛋白质和脂质重新排布 C．该种技术能够转移细胞质雄性不育基因，培育优良作物不育系 D．将融合细胞培养为植株时，通常用葡萄糖提供碳源并调节渗透压 三、非选择题 31．I.供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAmA修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者进行系列实验。 (1)核移植的受体是____________________细胞，核移植后的重构胚发育至____________________阶段可利用____________________技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体，从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的____________________可用于医学研究。 (2)RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如图1、2。结果表明，核供体细胞的分化程度越高，___________________越低。    II.兰花人工种子由人工种皮、原球茎和人工胚乳构成。原球茎是由胚性细胞组成、形态类似球茎的结构，可发育成完整植株，人工胚乳可调控原球茎的休眠，并为原球茎的发育提供营养成分和激素。回答下列问题： (3)从盆兰花获取茎尖，对其进行____________________处理后接种于培养基，茎尖通过_____________________后生长为原球茎。原球茎在发芽培养基上可很快长出幼叶，然后在生根培养基中形成完整植株。 (4)将原球茎切成小块，转入增殖培养基进行继续培养，可以得到大量原球茎，实现兰花的快速繁殖。在增殖培养基中添加椰子水，原球茎会长得更饱满。不同成熟度椰子的椰子水对原球茎生长的促进效果不同，推测原因是不同成熟度椰子的椰子水中____________________和____________________的含量存在差异。 (5)某实验研究发现，与添加用过滤除菌法处理的椰子水（A组）相比，人工胚乳中添加用湿热灭菌法处理的椰子水（B组）使原球茎的休眠时间变短。研究人员推测B组原球茎休眠时间短的原因是脱落酸被破坏。作出上述推测的依据是：椰子水中有脱落酸；____________________;脱落酸不耐高温。为了验证上述推测，可增加一组实验（C组），C组的处理是：____________________。 32、相分离是蛋白质具有的一种物理特性，是驱动细胞内各类无膜凝聚体形成的重要机制。研究人员将未知蛋白与不具有相分离特性的Cry2蛋白相连，如果未知蛋白具有相分离特性，则在蓝光照射下会发生凝聚，从而开发出检测蛋白是否有相分离特性的工具。FUS蛋白作为经典的相分离蛋白，经常用作实验对照。为了探究X蛋白是否具备相分离特性，科学家需要构建能同时表达Cry2蛋白和X蛋白的重组质粒，质粒中LacZ基因编码产生的β——半乳糖苷酶可以分解X——gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。图1表示质粒的结构，图2表示含有目的基因的DNA片段，其中P1、P2、P3表示引物，其余箭头处表示相关限制酶的识别位点。回答下列问题： （1）构建重组质粒的过程中需要用到E.coliDNA连接酶，该酶的作用是将具有__34__的DNA片段连接起来。据图1分析，应选用四种限制酶中的__35__和__36__切割质粒，以保证目的基因插入后能够正常表达出 Cry2蛋白和X蛋白。 （2）已知X蛋白基因转录得到的mRNA前三个碱基为起始密码子AUG。研究发现在紧邻起始密码子AUG之前加入序列GCCACC，会显著提高基因的表达效率。利用PCR技术获取X蛋白基因时，为保证X蛋白基因能正确插入载体并高效表达，除选择引物P1外，还需要选择引物__37__（填“P2”或“P3”），并在该引物5端增加碱基序列5＇-__38__-3＇。 （3）通过琼脂糖凝胶电泳可将不同的DNA片段区分开来，该技术所依据的原理是__39__，对PCR产物进行电泳检测，结果显示除X蛋白基因条带外，还有多条非特异性条带（引物和模板不完全配对导致）。为减少非特异性条带的产生，可适当__40__（填“提高”或“降低”）PCR中复性过程的温度。 （4）为筛选出成功导入重组质粒的目标菌，需要将重组质粒与经处理的大肠杆菌混匀，再将大肠杆菌接种到含有四环素和X-gal的培养基上。培养一段时间后，培养基中颜色为__41__的菌落为目标菌落，原因是__42__。 （5）为了确认X蛋白的相分离特性，还可以构建两种重组质粒作为对照，对照组质粒与实验组质粒相比，所含基因的差异分别是__43__、__44__。 参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 D B C C A C C D B A 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 B D C B A C C C B A 题号 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 答案 A B B D D BD AC AB D ABC 31．(1) 去核的卵母 桑葚胚或囊胚 胚胎移植 胚胎干细胞 (2)RNA修饰水平和核移植重构胚的发育效率 (3) 消毒 脱分化 (4) 营养物质 激素 (5) 脱落酸促进休眠 人工胚乳中先添加用高压蒸汽灭菌法处理的椰子水后加脱落酸 32.(1) 互补黏性末端 MunI XhoI (2) P2 GAATTCGCCACC (3) 不同DNA 分子的大小和构象不同，在凝胶中的迁移速率不同    提高 (4) 白色 重组质粒中不含LacZ基因，不能编码产生的β-半乳糖苷酶，不能分解X-gal产生蓝色物质 (5) 不含X蛋白基因 用FUS蛋白基因替换X蛋白基因 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $