内容正文:
宴所需的实验材料,生理盐水、EP管、酒精灯、火柴、接种环、棉签、镊子、药敏片、含有不同抗生素的氯酯片、普通琼脂、平板恒温培养箱、细菌的固体培养物等。首先打开超净工作台开关,工作台自检后开启照明。平板划线接种。本实验细菌培养基接种采用平板连续化验法,注意画线一定要密集。首先在培养基背面标记好药敏片的位置及编号。用酒精棉擦拭手和操作台。待酒精挥发后,点燃酒精灯。将一批管中加入生理盐水。右手持接种环与酒精灯上灼烧灭菌带冷,左手持待检验的细菌培养基斜面。打开试管塞,将试管口通过火焰,在火焰附近用已冷却的接种环挑取适量的细菌。将试管口通过火焰后塞上试管塞,将接种环加入EP管中混匀取样。采用无菌棉拭子蘸取菌悬液的方式。在管壁上旋转,挤压掉多余的液体。在琼脂培养基表面均匀涂抹。盖好平米,在室温中干燥五分钟。药敏片的放置,用灭菌镊子夹取干燥。药敏片。均匀地选取六个距平面边缘15毫米处的点和中间一个点将药敏片轻切在已接种细菌的琼脂培养基表面,用镊子尖儿轻压,使纸片与培养基表面贴合牢固,一次放好,不得移动。培养观察及记录,将平皿至37摄氏度温箱中培养18至24小时。观察、记录并分析结果。根据印军环直径的大小,按下表标准判定各种药物的敏感度。下面我们来总结一下该实验的注意事项。接种菌液的浓度必须标准化,一般以细菌在琼脂平板上生长一定时间后成融合状态为标准。如菌液浓度过大会使抑菌环减小,浓度过小会使抑菌环增大。接种后应及时贴上药敏片,并放入37摄氏度培养箱中进行培养,培养时间一般为18至24小时,结果判定不宜过早。但培养过久,细菌可能恢复生长,使抑菌环缩小。实验过程中要防止污染药敏片,否则可发生抑菌环缩小。
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