福建莆田第十五中学2025-2026学年高二下学期5月期中生物试题

**基本信息** 聚焦现代生物技术前沿，融合基因工程、细胞培养等核心内容，通过安莎霉素筛选、双特异性抗体等真实科研情境考查综合应用能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|15题/40分|植物细胞培养、限制酶作用、发酵流程等|结合酶切位点表、发酵流程图考查基础原理| |非选择题|5题/60分|微生物筛选、原生质体融合、ADC药物设计等|16题设计实验比较酶降解能力，18题通过双特异性抗体机制考查科学思维，20题结合GFP改造体现蛋白质工程应用|

2025-2026学年下学期期中质量检查 高二生物 考试时间：75 分钟 满分：100 分 命题人：黄莉 审核人：高二生物组 学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________ 一、单选题（只有一个选项符合题目要求。共 15 题，1-10小题，每题 2 分，11-15小题，每题4分，满分 40 分）。1．利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（    ） A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B．植物细胞有细胞壁，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产 C．次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养 D．该技术主要利用促进细胞生长的培养条件，提高单个细胞中次生代谢物的含量 2．基因工程中需要使用多种工具，部分限制酶的酶切位点如表所示，其中“↓”表示酶切位点。下列正确的是（    ） 限制酶 限制酶1 限制酶2 酶切位点 G↓GATCC CCC↓GGG A．限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，它们能够切割DNA两条链中的氢键 B．限制酶1、2切割DNA分子产生的末端分别是平末端、黏性末端 C．恢复被限制酶切开的DNA末端通常需要使用DNA聚合酶 D．质粒是常用载体，通常具有一个至多个限制酶的酶切位点，且具有自我复制能力 3．某种老陈醋的发酵流程如图所示。据图分析，下列叙述正确的是（    ） A．蒸熟的高粱需要立即加入大曲，有利于高粱糖化和酒精发酵 B．糖化的目的是将高粱中的淀粉分解，形成糖浆，有利于酵母菌发酵产生酒精 C．加入醋醅是为了接种醋酸菌，其可以将图中产生的酒精在无氧条件下转化为醋酸 D．图中从酒精发酵到醋酸发酵需要适当降低温度，更有利于醋酸的发酵 4．体细胞核移植技术在家畜保种育种方面具有广泛的应用前景。下列叙述正确的是（　　） A．体细胞核移植技术需要对供体核的全能性进行激活 B．供体细胞的分离培养需用胶原蛋白酶或胃蛋白酶处理 C．家畜体细胞可直接与MI期去核卵母细胞融合 D．重构胚发育的幼畜主要表现代孕母畜的遗传特性 5．某研究小组设计了一个利用秸秆中的纤维素生产乙醇的实验，实验流程如图所示。下列叙述错误的是（　　）    A．菌A属于腐生生物，能分泌纤维素酶分解秸秆中的纤维素 B．淋洗液主要为酵母菌的生长繁殖提供碳源和能源等 C．在发酵阶段不能打开瓶盖以保持厌氧环境完成酒精的生成 D．发酵结束后可通过过滤、沉淀等方法获得乙醇 6．假阳性是指检查结果是阳性，但实际是阴性；假阴性则与之相反。某流感患者进行甲型病毒检测，下列可导致假阳性结果的是（　　） A．抗原检测一单克隆抗体保存温度过高 B．抗体检测—患者半年内接种过甲流疫苗 C．核酸检测—PCR 扩增时变性温度设置过低 D．核酸检测—病毒发生变异与 RCR 引物不匹配 7．A型血友病患者的控制凝血因子的基因发生突变，导致其凝血因子含量降低或功能异常。控制凝血因子的基因主要在肝脏中表达，若将凝血因子第309位的丙氨酸替换为丝氨酸，则可增加凝血因子的分泌，从而达到基因治疗的目的。下列叙述错误的是（　　） A．上述蛋白质工程生产的只能是自然界中已经存在的蛋白质 B．改造凝血因子须根据丝氨酸的密码子设计对应的DNA序列 C．改造后的凝血因子的结构可通过计算机进行模拟，从而预测其功能变化 D．选择肝脏蛋白基因的启动子可使控制凝血因子的基因只在肝细胞中表达 8．兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（　　） A．①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B．百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 C．3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 D．②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 9．为拯救濒危植物红豆杉，并同时获得高抗癌活性物质——紫杉醇，科研小组设计了如图所示的实验流程。下列相关叙述正确的是（    ） A．诱导红豆杉茎尖经过再分化过程形成愈伤组织 B．在红豆杉组织培养过程中，通常加入蔗糖作为碳源和氮源 C．用液体培养基扩大培养愈伤组织生产紫杉醇时，通常要通入无菌空气 D．同一株植物不同部位的组织细胞经诱导培养获得的植株基因型一定相同 10．安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染。该抗生素是一种产自深海的赖氨酸缺陷型（自身代谢不能产生赖氨酸，必需从环境中摄取）放线菌所产生的。为筛选出能产安莎霉素的菌种，科研工作者用紫外线对采自深海的放线菌进行诱变与选育，实验的部分流程如下图所示。下列叙述错误的是（    ） 注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落。 A．A操作的目的是提高突变频率，增加突变株的数量 B．B过程中用涂布器蘸取少量菌液在培养基表面均匀涂布 C．图中①②④为完全培养基，③为只缺乏赖氨酸的培养基 D．经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养 11．将可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，最终得到高比例胚胎干细胞嵌合体猴。叙述正确的是（　　）    A．为防止细菌污染，培养4CL干细胞时可向培养液中加入适量的干扰素 B．4CL干细胞注入桑葚胚后会与其他胚胎细胞发生融合进而形成嵌合体 C．对嵌合囊胚或原肠胚进行胚胎分割后移植，可以产生更多的嵌合体猴 D．嵌合体猴部分细胞可发出绿色荧光，其遗传信息不一定能遗传给后代 12．抗体结构如图所示，与抗原特异性结合区域为CDR区，位于V区。鼠源抗体可被人体免疫系统当作抗原而清除。单克隆抗体经过四代发展：鼠源单克隆抗体→嵌合单克隆抗体（将小鼠V区代替人类V区）→人源化单克隆抗体（只有小鼠来源的CDR区，其余由人类免疫球蛋白G框架组成）→全人源单克隆抗体。叙述正确的是（　　） A．人源化单克隆抗对人体的免疫原性主要与恒定区有关 B．嵌合单克隆抗体、人源化单克隆抗体诱发人体产生抗单抗抗体的强度依次升高 C．嵌合单克隆抗体的制备过程涉及蛋白质工程和细胞工程等生物技术 D．人编码抗体的基因转移至小鼠中，小鼠表达出的均为完全人源化单抗 13．内共生假说认为，线粒体起源于在厌氧真核细胞中生活的需氧细菌。为验证上述假说，研究人员将维生素B1营养缺陷且能分泌ATP的大肠杆菌菌株B导入酵母细胞中，筛选获得融合菌株，如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．本实验中应去除酵母细胞的线粒体，融合后酵母细胞可以为菌株B提供维生素B1 B．用纤维素酶和果胶酶去除酵母细胞壁，用PEG融合法诱导酵母细胞和菌株B融合 C．融合后大肠杆菌形态正常且保持活性，推测发生融合的是其外层脂多糖层 D．筛选融合菌株时，选择培养基应以丙酮酸为唯一碳源，且在有氧条件下培养 14．乙肝基因工程疫苗的生产过程如图所示，其中质粒上箭头所指部位为相应的限制酶的切割位点。质粒中LacZ基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gal，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。下列相关分析正确的是（    ） A．过程①选择BamHⅠ和EcoRV切割目的基因和质粒，可避免目的基因和质粒反向连接 B．过程②利用农杆菌的T-DNA可将重组质粒上的目的基因转移到大肠杆菌细胞的DNA上 C．筛选大肠杆菌的培养基中需要添加青霉素和X-gal，便于重组质粒的筛选 D．若添加X-gal的培养基上的大肠杆菌菌落呈现蓝色，则说明该大肠杆菌成功导入重组质粒 15．科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其中 V5编码序列表达标签短肽 V5；该重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图乙所示。下列分析错误的是（　　） A．作为基因表达载体，图甲中的质粒还必须具有特殊标记基因、复制原点 B．为了确定基因连接到质粒中且插入方向正确，需用引物F1和R1进行PCR C．若J基因转录的模板链位于 b链，则引物F1与图甲中a链相应部分的序列相同 D．图乙中，条带1的出现证明重组质粒在受体细胞内表达了J-V5 融合蛋白 2、 非选择题 16．(12分)物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。 （1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是______ ___。 （2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是____ ____。 （3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_____ __。 （4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。 ①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_____ ____，三处滴加量相同。 ②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明_____ ______；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明_______ ____。 17．(12分)紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如图（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用）。 (1)该研究应用的生物技术所依据的原理是___ ____。培养原生质体时，需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是___ ____。 (2)在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是___ ___ _ 。 (3)过程③要进行照光培养，照光的作用是____ ___。 (4)百脉根富含单宁，单宁不是百脉根生长和生存所必需的产物，属于_______代谢物，在植物体内含量很低，化学合成困难。单宁具有收敛止血、抗氧化、抗菌等作用被用于各类产品。若要获得高产单宁的突变体，适合作为诱变处理的对象的是：_______（填“茎尖”、“愈伤组织”或“试管苗”），原因是____ ___。 18．(12分)单克隆抗体在临床中常用于肿瘤的治疗。长春新碱（VCR）可以抑制微管蛋白的聚合从而抑制纺锤体形成，阻断细胞分裂。将VCR与单克隆抗体通过接头连接形成抗体—药物偶联物（ADC），可实现对癌细胞的特异性杀伤，ADC的作用机制如图1所示。回答下列问题： (1)ADC中接头的作用是连接药物分子。据图1分析，理论上接头和药物的结合在血浆中的稳定性________（填“偏高”或“偏低”），在溶酶体中的稳定性_______（填“偏高”或“偏低”）。 (2)某些种类癌细胞表面会过量表达膜蛋白PSMA。CD28是T细胞表面受体，可有效激活T细胞。科研人员尝试构建既能结合PSMA，又能结合CD28的双特异性抗体（PSMA×CD28），如图2所示。制备时，应先将___ ____分别注射到小鼠体内，分离出相应的B淋巴细胞。诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，然后利用_____ ___初筛出杂交瘤细胞，然后对其进行___ _____，经多次筛选，就可以获得足够数量的两种杂交瘤细胞。再用___ __ __（方法）诱导两种杂交瘤细胞融合，筛选后置于二氧化碳培养箱中培养，以获得更多双杂交瘤细胞。通过进一步筛选，最终成功获得双特异性抗体（PSMA×CD28）。 (3)请据图2分析，双特异性抗体（PSMA×CD28）能有效杀伤该类癌细胞的原因是 。 19．(12分)人诱导多能干细胞（hiPSCs）是通过将特定转录因子导入成熟细胞中，使其重新编程为类似ES细胞的多能性干细胞。将hiPSCs诱导分化为内皮细胞的三个阶段如图所示，其中CHIR、BMP4、FGF2、VEGF为定向诱导分化因子。回答下列问题： (1)在诱导hiPSCs细胞分裂分化的过程中，需在培养液中加入___ ____等一些天然成分，同时需提供一定的气体环境，其中CO2的主要作用是__ _____。 (2)与使用外源ES细胞相比，利用患者体细胞诱导得到的hiPSCs细胞治疗某些疾病时具有的优势有____ ___ （写出两点）。 (3)内皮细胞的形成过程受细胞中Wnt信号通路的调控。研究发现，组蛋白去乙酰化酶5（HDAC5）的表达情况在内皮细胞形成中有显著变化。为研究Wnt信号通路与HDAC5表达情况的关系，研究者利用CHIR（Wnt信号通路激活剂）和IWP2（Wnt信号通路抑制剂）进行了相关实验，将各组表达的HDAC5进行电泳，结果如下图。据此分析，Wnt信号通路与HDAC5表达的关系是：Wnt信号通路_______（填“抑制”或“促进”）HDAC5的表达。 (4)为进一步确定HDAC5在内皮细胞形成三个阶段中的作用，研究者将HDAC5抑制剂BML210分别加入三个阶段的培养基中，检测三个阶段分化的标志物BraT、CD31、CD144的表达量，结果如下图。据此分析，HDAC5对内皮细胞分化的三个阶段的作用分别是___ ____ 。 (5)根据HDAC5的作用分析，其对三个阶段的调控作用机理可能是通过___ ___，从而在不同阶段对分化所需的关键基因表达起到调控的作用。 20．(12分)科研团队想通过基因工程构建一种大肠杆菌工程菌，作为监测残留在生物组织或环境中的四环素水平的“报警器”。其监测原理如图1所示，天然大肠杆菌不具备图1中所示基因。回答下列问题： (1)在上述研究中，需导入天然大肠杆菌的目的基因有_______（选填序号）。 ①四环素合成相关基因 ②GFP基因 ③TetR基因 ④RNA聚合酶基因 (2)据图1分析，环境中四环素水平升高时，该种大肠杆菌工程菌的荧光_______（填“增强”“减弱”或“不变”）。试概述该种四环素检测方法的原理：___ ____。 (3)图2是两个DNA片段、质粒及其上的限制酶的识别序列分布情况；其中质粒上的Ampr代表青霉素抗性基因，ori表示复制原点。下表是相关限制酶的识别序列与切割位点。 限制酶 EcoRI XbaI SpeI BamHI 识别序列及切割位点 5′-G↓AATTC-3′ 3′-CTTAA↑G-5′ 5′-T↓CTAGA-3′ 3′-AGATC↑T-5′ 5′-A↓CTAGT-3′ 3′-TGATC↑A-5′ 5′-G↓GATCC-3′ 3′-CCTAG↑A-5′ 研究人员设计了一个含DNA片段1和2拼接的重组质粒的拼接方案。结合图表信息，你认为最终建构成功的重组质粒示意图最合理的是_______。 (4)从个体水平，可通过____ ___来鉴定大肠杆菌工程菌是否构建成功。 (5)为提高对环境中四环素水平监测的有效性，研究人员将GFP的第65位丝氨酸变成苏氨酸后，增强了绿色荧光稳定性和强度。该项技术属于____ ___（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 《高二期中卷》参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 A D B A D B A B C B 题号 11 12 13 14 15 答案 D C B C B 1．A 【详解】A、部分植物次生代谢物结构复杂，难以通过化学合成途径获得或合成成本极高，可通过植物细胞培养技术获取这类产物，A正确； B、植物细胞虽有细胞壁，但可通过液体悬浮培养等技术实现细胞大规模增殖，能够实现次生代谢物的工厂化生产，比如人参皂苷、紫草素都可通过该技术工厂化生产，B错误； C、次生代谢物不是植物生长发育所必需的化合物，初生代谢物才是植物生命活动必需的物质，C错误； D、该技术是通过优化培养条件促进细胞大量增殖，提高细胞群体的次生代谢物总产量，并非提高单个细胞中次生代谢物的含量，且培养条件需兼顾次生代谢物的积累，而非仅促进细胞生长，D错误。 2．D 【分析】限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，自然界中限制酶的天然作用是破坏外来基因，限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即黏性末端和平末端。 【详解】A、限制酶主要来源于原核生物，但其作用是切割DNA的磷酸二酯键，而非氢键，A错误； B、限制酶1的酶切位点（G↓GATCC）切割后产生黏性末端，而限制酶2的位点（CCC↓GGG）切割后产生平末端，B错误； C、恢复被限制酶切开的DNA末端需通过DNA连接酶连接磷酸二酯键，而非DNA聚合酶（催化单个核苷酸连接），C错误； D、质粒作为载体需具备自我复制能力，且通常含多个限制酶切位点以便插入外源基因，D正确。 故选D。 3．B 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、蒸熟的高粱要放凉后再加入大曲（接种），避免高温杀死菌种，A错误； B、糖化主要是利用大曲中的微生物产生的淀粉酶将原料中的淀粉分解成葡萄糖，为酵母菌的发酵提供原料，有利于酵母菌发酵产生酒精，B正确； CD、醋酸菌是好氧菌，需要在有氧条件下发酵，且醋酸发酵的温度略高于酒精发酵的，CD错误。 故选B。 4．A 【详解】A、体细胞核移植过程中，高度分化的动物体细胞全能性受抑制，需要借助去核卵母细胞的细胞质成分激活供体核的全能性，使其具备发育为完整个体的潜能，A正确； B、动物细胞培养时分离供体细胞需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，胃蛋白酶的最适pH为酸性，在动物细胞培养的中性偏碱环境中会失活，无法发挥作用，B错误； C、体细胞核移植时，需将供体细胞与培养至MⅡ（减数第二次分裂）中期的去核卵母细胞融合，而非MI期卵母细胞，C错误； D、重构胚的细胞核遗传物质全部来自供核体细胞，细胞质遗传物质少量来自卵母细胞，代孕母畜仅提供胚胎发育的场所和营养，不提供遗传物质，因此幼畜主要表现供核个体的遗传特性，D错误。 5．D 【分析】酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖类分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，产生酒精和CO2。发酵结束后，如果发酵产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法获得产品；如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。 【详解】A、 从已死的，腐烂的生物体中获得营养的生物为腐生生物，秸秆中有大量的纤维素，接种菌A，能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，培养一段时间后发现菌A能够将桔杆中的纤维素大量分解，菌A属于腐生生物，A正确； B、采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，淋洗液主要为酵母菌的生长繁殖提供碳源、能源等，B正确； C、在酒精发酵过程中要保持无氧环境，不能打开瓶盖，C正确； D、发酵结束后，乙醇属于代谢产物，可以采用适当的提取、分离和纯化措施来获得乙醇，不能采取过滤、沉淀的方法，D错误。 故选D。 6．B 【分析】假阳性指检测结果为阳性但实际为阴性。需找出导致检测错误显示阳性的因素。 【详解】A、抗体的成分是蛋白质，若单克隆抗体保存温度过高，可导致其变性失活，无法检测出抗原，即抗原检测结果为阴性，A错误； B、患者半年内接种过甲流疫苗，体内存在甲流病毒对应的抗体，通过抗体检测结果为阳性，但实际该个体没有感染甲流病毒，实际为阴性，也会导致假阳性结果，B正确； C、PCR扩增时变性温度设置过低，导致DNA不能解旋形成单链，无法扩增出病毒的核酸，可导致核酸检测结果为阴性，C错误； D、病毒发生变异与RCR引物不匹配，导致无法扩增出病毒对应的核酸，核使酸检测结果为阴性，D错误。 故选B。 7．A 【分析】基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，以达到治疗目的。基因治疗的靶细胞主要分为两大类：体细胞和生殖细胞。 【详解】A、蛋白质工程的核心是通过改造基因来设计并生产自然界不存在的蛋白质，A错误； B、蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，其核心是基因工程，所以改造凝血因子须根据丝氨酸的密码子设计对应的DNA序列，B正确； C、通过基因修饰或基因合成完成改造后的凝血因子的结构可通过计算机进行模拟，从而预测其功能变，C正确； D、肝脏特异性启动子可限制控制凝血因子的基因，使其仅在肝细胞中表达，避免其他组织异位表达，符合基因治疗的靶向性需求，D正确。 故选A。 8．B 【详解】A、①过程得到愈伤组织，为脱分化的过程，愈伤组织是排列不规则的薄壁组织团块，A错误； B、百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此可以作为该研究中的外植体，B正确； C、3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值应该小于1，C错误； D、愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变，但基因重组发生在减数分裂过程中，而愈伤组织细胞的分化过程是有丝分裂，所以不会发生基因重组，D错误。 9．C 【详解】A、诱导红豆杉茎尖经过脱分化过程形成愈伤组织，A错误； B、在红豆杉组织培养过程中，因愈伤组织不能进行光合作用，所以需要加入蔗糖作为碳源和能源，蔗糖因不含有氮元素，所以不能作为氮源，B错误； C、用液体培养基培养固定在一定空间内的愈伤组织生产紫杉醇时，需要通入无菌空气，利于细胞进行有氧呼吸并避免杂菌污染，C正确； D、同一植株不同部位的组织细胞经诱导培养获得的植株基因型不一定相同，如花粉粒经诱导培养获得的植株，其体细胞内的染色体数是正常植株体细胞内的一半，基因型也与正常体细胞的不同，D错误。 10．B 【分析】影印培养法是指确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法。主要操作方法是：用灭菌的丝绒覆盖在一块与培养皿同样大小（或略小）的木制圆柱体上，轻轻地在母种培养皿的菌苔上印一下，把细菌菌落全部转移到丝绒面上，然后将这一丝绒面再印在另外的选择性培养基平板上，获得与原始平板完全相同的接种平板。待培养后，比对各培养皿在相同位置出现相同的菌落，从而筛选出适当的菌株。 【详解】A、紫外线属于物理诱变因素，用紫外线处理（A操作）可以提高基因突变频率，从而增加突变株的数量，A正确； B、稀释涂布平板法接种时，用滴管或移液管取少量菌液滴到培养皿上，然后用经过灭菌的涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，B错误； C、因为要筛选赖氨酸缺陷型（自身代谢不能产生赖氨酸，必需从环境中摄取）的能产安莎霉素的菌种，所以③为只缺乏赖氨酸的培养基，在这种培养基上只有赖氨酸缺陷型不能生长，而④为完全培养基，所有的菌都能生长，通过对比③④可以筛选出赖氨酸缺陷型，C正确； D、经C过程原位影印及培养后，在③中不生长，在④中生长的D菌落就是赖氨酸缺陷型，可从④中挑取D进行纯化培养，D正确。 故选B。 11．D 【分析】胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞。胚胎干细胞，是高度未分化的细胞。如果进行体外培养，能够无限的增殖和分化。胚胎肝细胞还可以分化成多功能的细胞。胚胎干细胞具有多能性，可以分化成多种组织的能力但是无法独自发育成一个个体细胞。胚胎里的干细胞被称为一种“全能”细胞，可以分化成所有类型的细胞，并且携带生物体的全套遗传信息。 【详解】A、动物细胞培养时，为防止细菌污染。可向培养液中加入适量的抗生素，A错误； B、4CL干细胞不会与其他胚胎细胞发生细胞融合，B错误： C、在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，而不能选择原肠胚，C错误； D、嵌合体猴中，由4CL干细胞增殖分化形成的组织可发出绿色荧光，这些细胞不一定发育成原始生殖细胞，因此其遗传信息不一定能遗传给后代，D正确。 故选D。 12．C 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、CDR区是小鼠来源，人源化单克隆抗对人体的免疫原性主要与可变区有关，A错误； B、结合题意可知，该技术鼠表达出完全人源化单抗，故嵌合单克隆抗体、人源化单克隆抗体诱发产生抗单抗抗体的强度依次降低，B错误； C、人鼠嵌合单抗的制备过程涉及将小鼠V 区基因与人类抗体基因拼接等蛋白质工程技术，以及细胞融合等细胞工程技术，C正确； D、人编码抗体的基因转移至小鼠中，小鼠表达出的不一定是完全人源化单抗，可能还会受到小鼠自身细胞内一些因素的影响，导致表达产物并非完全符合人源化单抗的预期，D错误。 故选C。 13．B 【详解】A、实验目的是验证线粒体起源于需氧细菌，因此需要去除酵母原有线粒体，避免其干扰实验；菌株B是维生素B1营养缺陷型，自身不能合成维生素B1，酵母细胞可为其提供维生素B1，A正确； B、纤维素酶和果胶酶只能去除植物细胞的细胞壁（植物细胞壁成分主要为纤维素和果胶）；酵母菌是真菌，细胞壁成分不是纤维素和果胶，而是几丁质，所以不能用该方法去除酵母细胞的细胞壁，B错误； C、大肠杆菌内层为坚固的肽聚糖，外层为脂多糖层，若肽聚糖被破坏，大肠杆菌无法维持正常形态和活性，融合后大肠杆菌形态正常且保持活性，推测发生融合的是外层脂多糖层，C正确； D、去除线粒体的酵母无法在有氧条件下分解丙酮酸（有氧呼吸第二、三阶段在线粒体中进行），只有成功导入可进行有氧呼吸的菌株B才能存活，因此选择丙酮酸为唯一碳源、有氧条件培养可筛选出融合菌株，D正确。 14．C 【分析】基因工程的基本操作程序是：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、由图可知，BamHI和EcoRI的酶切位点在目的基因两侧，用BamHI和EcoRI来切割含有目的基因的DNA片段可以获得完整的目的基因，且质粒上也存在这两种酶的识别位点，因此过程①应该选择BamHI和EcoRI来切割目的基因和质粒，可避免目的基因和质粒反向连接，A错误； B、过程②是将重组质粒导入大肠杆菌，需要用Ca2+处理大肠杆菌，增大其细胞壁的通透性,使细胞处于一种能吸收周围环境中 DNA分子的生理状态，农杆菌转化法适合用于将目的基因导入植物细胞中，B错误； C、质粒中LacZ基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gal，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。LacZ基因内部含有BamHI的酶切位点，构建重组质粒时，目的基因的插入导致lacZ基因被破坏，因此在添加X-gal的培养基上，含重组质粒的大肠杆菌菌落呈现白色，导入空载质粒的大肠杆菌菌落显蓝色，没有导入任何外源DNA的大肠杆菌不含青霉素抗性基因，不能在含有青霉素的培养基上生存，因此筛选含重组质粒的大肠杆菌，应在培养基中加入X-gal和青霉素，便于重组质粒的筛选，C正确； D、BamHI破坏了质粒上的LacZ基因，若添加X-gal的培养基上的大肠杆菌菌落呈现白色，则说明大肠杆菌成功导入重组质粒，D错误。 故选C。 15．B 【分析】基因工程的关键步骤是构建基因表达载体，基因表达载体主要由启动子、目的基因、标记基因和终止子组成，其中标记基因用于筛选重组DNA分子，可以是四环素、氨苄青霉素等抗性基因，也可以是荧光蛋白基因或产物能显色的基因。 【详解】A、作为基因表达载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制：④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来，图甲中有启动子和终止子等，因此质粒还需具备的结构有限制酶的切割位点、标记基因、复制原点等，A正确； B、用PCR扩增分析法确定重组质粒中目的基因插入方向是否正确时，常设计一对引物，一个引物与目的基因序列互补，另一个引物与质粒序列互补，两引物延伸方向相反，以扩增出两引物间的序列，若插入方向正确，则可扩增出相应序列，反之，则不能扩增出相应序列，故选用的引物应为F2、R1或F1、R2，若选用引物F1、R1或F2、R2，不论目的基因插入方向是否正确，都可扩增出目的基因序列。B错误； C、因为J基因的b链为转录的模板链，启动子在左侧，所以转录方向为从左到右，由于转录沿模板链3’到 5’端方向合成RNA，所以J基因b链左侧为3'端，引物要与DNA的3'端互补配对，所以F1与b链互补，a链也与b链互补，由此推知引物F1与a链相应部分序列相同，C正确； D、 据图乙可知，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测，均出现条带1，说明条带1是J-V5 融合蛋白。抗J蛋白抗体检测出现条带2，抗V5抗体检测不出现条带2，说明条带2所检出的蛋白不是由重组质粒上的融合的J基因表达的，D正确。 故选B。 16． W 乙 乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W 将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源 缓冲液 缓冲液不能降解W 酶E与天然酶降解W的能力相近 【分析】筛选培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或对某些化学、物理因素的抗性而设计的，能选择性地区分这种微生物的培养基。利用选择培养基，可使混合菌群中的目标菌种变成优势种群，从而提高该种微生物的筛选效率。 【详解】（1）该研究小组的目标菌是能够降解物质W的细菌，而物质W是一种含氮有机物，故可作筛选培养基中的氮源。 （2）研究小组的目标菌，是能够降解物质W的细菌，培养基中乙菌落的周围出现透明圈，说明乙菌落能够降解物质W，故乙菌落为该小组的目标细菌。 （3）目标菌能够利用空气中的氮气作为氮源，故选用的筛选培养基不添加氮源，能够在无氮源的培养基上生存的细菌便是目的细菌，故实验操作为：将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源。 （4）①C处作为空白对照，要排除作为溶剂的缓冲液对实验可能造成的影响，故需要在C处滴加缓冲液，且保持滴加量相同；②培养基中的透明圈表示物质W被降解的情况，若C处不出现透明圈，则说明缓冲液不能降解物质W；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明物质W被降解的程度相近，即酶E与天然酶降解物质W的能力相近。 【点睛】本题考查筛选培养基的配置和使用，针对不同要求的目标菌种，选择不同物质配制不同筛选作用的培养基。并且要求学生理解识别目标菌种筛选的现象，判断筛选结果。 17．(1) 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 保持原生质体的完整性 (2)将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况 (3)促进叶绿素的合成，有利于光合作用进行 (4) 次生 愈伤组织 愈伤组织细胞分裂能力强，突变率高，易获得突变体 【详解】（1）原生质体融合的原理是细胞膜的流动性，杂种细胞能够通过植物组织培养生长发育成植株的原理是植物细胞具有全能性。培养原生质体时，加入适宜浓度甘露醇保持一定渗透压，其作用是保持原生质体的完整性，防止原生质体吸水涨破或失水皱缩。 （2）实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，自变量为R-6G或IOA溶液浓度，因变量为原生质体再生情况，设计思路是将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况。 （3）过程③是再分化形成植株，照光的作用是促进叶绿素的合成，有利于光合作用进行。 （4）单宁不是百脉根生长和生存所必需的产物，属于次生代谢物，适合作为诱变处理对象的是愈伤组织，原因是愈伤组织细胞分裂能力强，DNA复制时易发生基因突变，突变率高，易获得突变体。 18．(1) 偏高 偏低 (2) PSMA、CD28 选择培养基 克隆化培养和抗体检测 灭活病毒融合法（PEG融合法、电融合法） (3)双特异性抗体（PSMA×CD28）可同时结合癌细胞表面抗原PSMA和T细胞表面受体CD28，前者可使双特异性抗体准确地和癌细胞结合，后者可有效激活T细胞，增强T细胞对癌细胞的杀伤能力 【详解】（1）为了药物能准确地在肿瘤细胞中释放，就需要接头和药物在血浆中运输时稳定结合，即理论上接头和药物的结合在血浆中的稳定性偏高，在肿瘤细胞的溶酶体中接头和药物结合的稳定性偏低，进而可以将药物释放出来。 （2）本研究的目的是构建既能结合PSMA，又能结合CD28的双特异性抗体，所以PSMA和CD28相当于抗原，制备时，需要先将PSMA、CD28分别注射到小鼠体内，分离出两种B淋巴细胞，将两种B淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合后利用选择培养基初筛出杂交瘤细胞，然后对其进行克隆化培养和抗体检测筛选得到既能产生所需抗体又能无限增殖的两种杂交瘤细胞。两种杂交瘤细胞可用灭活病毒融合法（PEG融合法、电融合法）等促进融合，融合后双杂交瘤细胞还需进行抗体检测和克隆化培养才能获得能产生足够数量所需的双特异性抗体（PSMA×CD28）的双杂交瘤细胞，最后通过大量培养获得双抗。 （3）图2显示，双特异性抗体（PSMA×CD28）可同时结合癌细胞表面抗原PSMA和T细胞表面受体CD28，前者可使双特异性抗体准确地和癌细胞结合，后者可有效激活T细胞，促进T细胞增殖分化，增强T细胞对癌细胞的杀伤能力，有效治疗癌症。 19．(1) 血清/动物血清 维持培养基pH相对稳定 (2)避免伦理争议和不发生免疫排斥反应 (3)抑制 (4)HDAC5在第一、三阶段抑制内皮细胞分化（即分别抑制中胚层细胞、内皮细胞的形成），在第二阶段促进内皮细胞分化（即促进血管前体细胞的形成） (5)改变相关组蛋白的乙酰化水平 【详解】（1）动物细胞培养过程中，需要在培养基中添加血清/动物血清等一些天然成分，添加动物血清的目的是弥补培养液中营养的不足，保证动物细胞培养的营养供应，同时需要提供95%的空气+5%CO2的气体环境，其中CO2的主要作用是维持培养基的pH相对稳定。 （2）ES细胞即胚胎干细胞，使用ES细胞治疗会面临伦理争议，且使用外源细胞会发生免疫排斥，所以与使用外源ES细胞相比，利用患者体细胞诱导得到的hiPSCs细胞治疗某些疾病时具有避免伦理争议和不发生免疫排斥反应等优点，因而发展前景广阔。 （3）由图可知，在同时使用CHIR和IWP2时HDAC5的量与不使用CHIR和IWP2时HDAC5的量相差不大，在单独使用CHIR处理时，HDAC5的量显著减少，说明该过程中CHIR激活Wnt信号通路，抑制HDAC5的表达。 （4）由图可知，第一阶段加入HDAC5抑制剂BML210后，BraT含量增多，会促进内皮细胞的分化，第二阶段加入HDAC5抑制剂BML210后，CD31减少，会抑制内皮细胞的分化，第三阶段加入HDAC5抑制剂BML210后，CD144含量增多，会促进内皮细胞分化。可推知HDAC5在第一、三阶段抑制内皮细胞分化（即分别抑制中胚层细胞、内皮细胞的形成），在第二阶段促进内皮细胞分化（即促进血管前体细胞的形成）。 （5）由于HDAC5是一种组蛋白去乙酰化酶，其对三个阶段的调控机理可能是通过改变相关组蛋白的乙酰化水平，从而在不同阶段对分化所需的关键基因起到调控的作用。 20．(1)②③ (2) 增强 四环素可解除TetR蛋白对GFP基因表达的抑制作用，并使大肠杆菌工程菌的GFP蛋白表达量随四环素水平的增加而增加 (3)D (4)观察环境中四环素浓度变化是否能引起大肠杆菌工程菌荧光强度的相应改变 (5)蛋白质工程 【详解】（1）据图1分析可知，TetR基因表达TetR蛋白，TetR蛋白抑制RNA聚合酶与启动子2的结合，抑制GFP基因表达绿色荧光蛋白。四环素可以抑制TetR蛋白的作用，因此当环境中没有四环素时，GFP基因不表达；当环境中有四环素时，四环素能够解除TetR蛋白对启动子2的抑制作用，最终使菌体发出绿色荧光。因此可以通过检测荧光强弱来判定环境中的四环素浓度，需导入天然大肠杆菌的目的基因有②③。 （2）据题（1）分析可知，环境中四环素水平越高，抑制TetR蛋白作用越强，解除TetR蛋白对启动子2的抑制作用的能力越强，GFP基因表达能力越强，荧光就会增强。因此，该种四环素检测方法的原理可表述为：四环素可解除TetR蛋白对GFP基因表达的抑制作用，并使大肠杆菌工程菌的GFP蛋白表达量随四环素水平的增加而增加。 （3）据图2可知，DNA片段1两端的限制酶识别序列分别对应XbaI和EcoRⅠ，而DNA片段2两端的限制酶识别序列对应SpeI和BamHⅠ，若要让两个DNA片段连接在一起，需要经酶切后获得相同的黏性末端。据表格可知，XbaI和SpeI酶切能获得相同的黏性末端，拼接后启动子1和启动子2是反向连接的，如图CD所示，两个片段经连接后的序列既不能被SpeⅠ酶切，也不能被XbaI酶切，综上所述，ABC错误，D正确。 （4）大肠杆菌工程菌建构的目的是监测残留在生物组织或环境中的四环素水平，因此构建成功的标志就是四环素浓度变化能引起大肠杆菌工程菌荧光强度的相应改变，该操作属于个体生物学鉴定。 （5）为提高对环境中四环素水平监测的有效性，研究人员将GFP的第65位丝氨酸变成苏氨酸后，增强了绿色荧光稳定性和强度，即荧光蛋白的结构发生了改变，属于蛋白质工程，蛋白质工程的实施需要通过合成和修饰相关基因实现。 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $■ ■回口口 ■ ■ 2025-2026学年下学期期中质量检测高二生物答题卡 1812分) 班级 姓名： 考场 座位号： (1)、2分) 注意事项： 准考证号 (2)、(8分) 答题前考生务必用黑色字迹的钢笔戏者铅笔填写准考证号和姓名等再用B铅笔把准考 证号的对应数字涂黑。 【 01 07 1 [01 ta] [01 2.保特卡面整洁.不要折叠.不要弄破 出 11 [2 2 [2 c2幻 [2] (3)、(2分) 3.考生不得填涂缺考。 [4 [4幻 [4J [4] [4 [4 [4] 4.必须在题号对应的答题区域内作答超出答题区域书写无效。 留 正确填涂■缺考标记[] 一、客观题(40分) 1912分) I CA3 CR3CC3 CD3 6 CA3CR3 EC3 C03 11 CATCR3CC3 C03 2 CAJ CB]CCJ CD] 7 CA3 CB]CCJ C03 12 CAJ CB]COJ CD] (1)、(4分) 3 CA3 CR3 CC3 ED3 8 CATCR]CC3C03 13 CA3 CR3 CC3 CD3 4 CA3 CB]CC3 CD3 9 CA]C8]CC]C03 14 CA3 C83 CO3 CD3 (2)、(2分) 5 CAJ CB3 CC]CD] 10 CAJ CB]CCJ CO] 15 CAJ CB]CC]CD] 16.(12分 (3)、(1分) (4)、(3分) (1)、(1分) (2)、(3分) (5)、(2分) (3)、(2分) (4)、(6分) 20(12分) (1)、(2分) 17.(12分) (2)、(4分) (1)、(4分) (2)、(2分) (3)、(2分 (3)、(2分) (4)、(2分) (4)、(4分) (5)、(2分) ■口口■ 第1面共1面 ■