重难点03 单克隆抗体的制备和应用（期末真题汇编）高二生物下学期人教版

**基本信息** 聚焦单克隆抗体制备与应用，汇编多地区高二下期末试题，融合生物制药前沿情境，突出技术流程与实际应用的结合。 **题型特征** |题型|题量|知识覆盖|命题特色| |----|----|----------|----------| |单选题|16|单克隆抗体制备流程（融合、筛选）、原理（细胞膜流动性）|结合HAT培养基筛选、灭活病毒诱导等基础实验| |多选题|8|双特异性抗体、动物细胞培养技术|考查杂交瘤细胞特性、培养条件等细节| |解答题|8|抗体-药物偶联物（ADC）、双抗制备及应用|如25题以ADC为情境，分析靶向治疗机制；26题设计抗体结合位点探究实验，体现探究实践素养|

重难点 03 单克隆抗体的制备和应用 一、单选题 1．(24-25高二下·陕西西安新城区·期末)单克隆抗体在医药方面占有重要地位。下图为单克隆抗体制备过程示意图，下列有关说法错误的是（　　） A．注射抗原A的主要目的是刺激小鼠产生能够分泌相应抗体的B淋巴细胞 B．HAT培养基作为选择培养基，可以筛选出杂交瘤细胞 C．灭活的病毒能够促使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 D．克隆化培养得到的都是能够分泌相应抗体的杂交瘤细胞 【答案】D 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、注射抗原A的主要目的是刺激小鼠产生免疫反应，从而得到能产生抗体的B淋巴细胞，A正确； B、HAT培养基作为选择培养基，只有杂交瘤细胞可以生长，可以筛选出杂交瘤细胞，B正确； C、诱导动物细胞融合常用的方法为灭活病毒诱导法，C正确； D、克隆化培养后还需经抗体检测，筛选得到的是能够分泌相应抗体的杂交瘤细胞，D错误。 故选D。 2．(24-25高二下·河南天一大联考·期末)甲状旁腺激素（PTH）是调节钙、磷代谢的主要激素之一，临床上PTH含量是低钙血症等疾病的重要诊断指标。现有两种抗PTH单克隆抗体A1、B1，科研人员将B1固定在固相载体上作为捕获抗体，用辣根过氧化物酶标记A1，建立定量检测PTH的方法，如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．筛选杂交瘤细胞的特定选择培养基中，只有融合的杂交瘤细胞才能生长 B．据图可知，PTH可使底物发生显色反应，从而通过棕色深浅来测定PTH的含量 C．B1和A1均可与待测样本中的PTH特异性结合，但二者与PTH结合的位点不同 D．单克隆抗体不仅可用于诊断疾病，还可形成运载药物的抗体—药物偶联物以治疗疾病 【答案】B 【详解】A、筛选杂交瘤细胞的特定选择培养基中，未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，A正确； B、PTH是调节钙、磷代谢的激素，不能起到催化作用，据图可知，可使底物发生显色反应的是辣根过氧化物酶，棕色越深，说明PTH的含量越高，B错误； C、据图可知，B1和A1均可与待测样本中的PTH特异性结合，但二者与PTH结合的位点不同，C正确； D、单克隆抗体灵敏度高，特异性强，可以大量制备；单克隆抗体不仅可用于诊断疾病，还可形成运载药物的抗体—药物偶联物以治疗疾病，D正确。 故选B。 3．(24-25高二下·甘肃临夏州·期末)动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。下列叙述错误的是（　　） A．动物细胞融合技术体现了细胞膜的结构特点 B．采用灭活病毒诱导法可以诱导动物细胞融合 C．制备单克隆抗体需要使用动物细胞融合技术 D．单克隆抗体的制备体现了动物细胞的全能性 【答案】D 【详解】A、动物细胞融合依赖于细胞膜的流动性，而流动性是细胞膜的结构特点，A正确； B、灭活病毒（如仙台病毒）可通过表面蛋白促进细胞膜融合，是诱导动物细胞融合的常用方法，B正确； C、制备单克隆抗体需将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，因此必须使用细胞融合技术，C正确； D、单克隆抗体的制备依赖细胞融合和细胞培养技术，未涉及细胞发育为完整个体的全能性，D错误。 故选D。 4．(24-25高二下·福建泉州鲤城区福建泉州第七中学·期末)CD87是某种癌细胞膜上的受体蛋白，与癌细胞的转移和增殖有关。CD3是所有T细胞表面的特异性抗原，该抗原被激活后，能极大促进T细胞的免疫效力。科研人员尝试通过诱导两种杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，以筛选出能同时结合CD87和CD3的双特异性抗体CD87×CD3，如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．制备双杂交瘤细胞时，需要将CD87、CD3分别注射到小鼠体内 B．体外培养的双杂交瘤细胞会出现贴壁生长和接触抑制现象 C．小鼠体内培养双杂交瘤细胞时需从小鼠腹水中提取双特异性抗体 D．双特异性抗体CD87×CD3的结合不会改变抗体CD87和抗体CD3原有的氨基酸序列 【答案】B 【详解】A、制备双杂交瘤细胞时，需要将CD87、CD3分别注射到小鼠体内，引起机体的体液免疫，获得分别能产生CD87抗体、CD3抗体的B淋巴细胞，A正确； B、体外培养的双杂交瘤细胞能无限增殖，不会出现贴壁生长和接触抑制现象，B错误； C、小鼠体内培养双杂交瘤细胞时需从小鼠腹水中提取双特异性抗体，C正确； D、双特异性抗体CD87×CD3的结合并没有改变遗传物质，抗体CD87和抗体CD3原有的氨基酸序列也不会发生改变，D正确。 故选B。 5．(24-25高二下·福建泉州鲤城区福建泉州第七中学·期末)“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是（    ） A．用选择培养基筛选微生物，对照组不接种微生物，实验组接种微生物 B．制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 C．诱导甘蓝根细胞与白菜叶肉细胞原生质体融合，观察到叶绿体即可筛选出杂种细胞 D．培育耐盐转基因植株时，通过PCR等技术检测到目的基因及其mRNA即可筛选耐盐植株 【答案】B 【详解】A、用选择培养基筛选微生物时，需要用完全培养基接种等量的微生物作对照，A错误； B、制备单克隆抗体时，第一次筛选获得杂交瘤细胞，第二次需通过抗体检测（分子水平）筛选能产生所需抗体的细胞，B正确； C、甘蓝根细胞无叶绿体，白菜叶肉细胞含叶绿体，但未融合的白菜细胞或者只有白菜细胞形成的融合细胞也存在叶绿体，仅凭叶绿体无法准确筛选杂种细胞，C错误； D、PCR检测目的基因及mRNA仅能确认基因导入和转录，无法保证耐盐性状的表达，D错误。 故选B。 6．(24-25高二下·贵州遵义区县一中·期末)人的细胞中含有TK酶而缺乏HGPRT酶（TK+/HGPRT-），小鼠细胞含有HGPRT酶而缺乏TK酶（TK—/HGPRT+），只有融合的杂交细胞能在选择培养基（HAT培养基）中存活，杂交细胞培养的过程中会随机丢失人类染色体，通过分析不同杂交细胞保留的染色体，可进行HGPRT基因定位，具体流程如下图，下列说法不正确的是（　　） A．利用灭活病毒诱导动物细胞融合时病毒的遗传物质可以进入细胞内 B．动物细胞融合与植物原生质体的融合都依据的是细胞膜的流动性 C．HGPRT基因位于X染色体上，杂交细胞内发生了染色体数目变异 D．HGPRT基因在转录和翻译的过程中均要遵循碱基互补配对原则 【答案】A 【详解】A、灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能 够与细胞膜上的糖蛋白发生作用， 使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布， 细胞膜打开，细胞发生融合；利用灭活病毒诱导动物细胞融合时病毒的遗传物质不会进入细胞内，A错误； B、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，都依据的是细胞膜的流动性，B正确； C、题图可知，三种杂交细胞均含有X染色体，且均含有HGPRT基因，可推测HGPRT基因位于X染色体上；杂交细胞培养的过程中会随机丢失人类染色体，杂交细胞内发生了染色体数目变异，C正确； D、转录过程中DNA和RNA杂交区域，DNA模板链和合成的RNA碱基互补配对；翻译过程中mRNA和tRNA互补配对，故HGPRT基因在转录和翻译的过程中均要遵循碱基互补配对原则，D正确。 故选A。 7．(24-25高二下·广东深圳深圳大学实验中学·期末)某抗原检测试剂盒可通过特异性抗体捕获特定抗原并检测抗原含量，流程如题图。其中固相抗体是由固相载体连接后的单克隆抗体。下列分析错误的是（　　） A．若未充分洗去游离的酶标抗体，易出现假阳性 B．使用单克隆抗体可以保障检测的特异性与灵敏性 C．酶标抗体既可与固相抗体相结合，又有催化作用 D．光信号检测颜色变化的程度，可定量分析抗原的含量 【答案】C 【详解】A、若未充分洗去游离的酶标抗体，游离的酶标抗体催化无色底物分解，也会出现有色产物，出现假阳性，A正确； B、单克隆抗体特异性强、灵敏度高、可大量制备，使用单克隆抗体可以保障检测的特异性与灵敏性，B正确； C、酶标抗体既可以和抗原A结合，又有催化作用（使无色底物形成有色产物），但酶标抗体不能与固相抗体结合，C错误； D、抗原越多，抗原结合的酶标抗体越多，分解产生的有色产物越多，故可根据光信号检测颜色变化的程度，可定量分析抗原的含量，D正确。 故选C。 8．(24-25高二下·吉林长春外五县·期末)抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　）    A．ADC的制备涉及动物细胞融合和动物细胞培养技术 B．ADC中的抗体主要发挥治疗效应以杀伤肿瘤细胞 C．ADC进入肿瘤细胞的过程体现了细胞膜的流动性 D．与化疗相比，使用ADC治疗癌症具有毒副作用小的优点 【答案】B 【详解】A、单克隆抗体的制备过程需要用到动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，A正确； B、ADC中的抗体主要发挥靶向运输作用，通过特异性结合靶细胞表面的抗原，将连接的药物输送到靶细胞，药物发挥杀伤靶细胞的治疗效应，B错误； C、ADC通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，体现了细胞膜的流动性，C正确； D、与化疗相比，ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用，因此它在临床上具有靶点清楚、毒副作用小等优点，D正确。 故选B。 9．(24-25高二下·山东东营·期末)利用体细胞核移植技术将精子与去核的卵母细胞融合，通过诱导可获得单倍体胚胎干细胞，在遗传分析中具有重要应用。下列说法正确的是（　　） A．胚胎干细胞具有组织特异性可发育成其它各种细胞 B．对MⅡ期的卵母细胞去核操作时，可采用紫外线短时间照射等方法 C．可用电融合法使两细胞融合，用高Ca2+—高pH法激活重构细胞 D．融合之前的细胞一般置于含95%氧气的培养箱培养 【答案】B 【分析】动物细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理是动物细胞核的全能性。 【详解】A、胚胎干细胞具有全能性，可分化为各种组织细胞，不具有组织特异性，A错误； B、MⅡ期卵母细胞去核通常采用显微操作法，也可以用紫外线短时间照射等方法，B正确； C、可以用电刺激、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活重构胚，C错误； D、动物细胞培养需在含95%空气+5% CO2的气体环境中进行，D错误。 故选B。 10．(24-25高二下·浙江嘉兴·期末)针对某病原体的单克隆抗体制备流程如图1。鼠源抗体的结构如图2，其中5区可与抗原特异性结合，6区可引起人体免疫反应。下列叙述错误的是（　　） A．对小鼠多次注射某病原体后，只有一种B淋巴细胞被激活 B．经选择培养1获得能增殖的杂交瘤细胞 C．经选择培养2获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 D．若图2的单克隆抗体6区为人源抗体片段，可降低免疫排斥 【答案】A 【详解】A、某病原体通常含有多种抗原决定簇，对小鼠多次注射后，会激活多种针对不同抗原决定簇的 B淋巴细胞，而非仅一种，A错误； B、选择培养1可淘汰未融合的亲本细胞、B-B融合细胞和瘤-瘤融合细胞，保留能增殖的杂交瘤细胞，B正确； C、选择培养2通过抗原 - 抗体杂交等方法，从杂交瘤细胞中筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，C正确； D、鼠源抗体的6区可引起人体免疫反应，若替换为人源片段，可降低这种排斥反应，D正确。 故选A。 11．(24-25高二下·陕西铜川王益区王益中学·期末)将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，分离该小鼠脾脏中的免疫细胞制备抗p72的单克隆抗体。下列相关叙述错误的是（　　） A．注入小鼠体内的抗原浓度会显著影响所需B淋巴细胞的浓度 B．利用已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合可制备单克隆抗体 C．若非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72基因的关键序列改变，原单抗药效会增强 D．改变非洲猪瘟病毒衣壳蛋白类型并注入小鼠体内可制备出多种抗病毒单抗 【答案】C 【详解】A、抗原浓度越高，刺激机体产生的B淋巴细胞数量越多，因此抗原浓度会影响所需B淋巴细胞的浓度，A正确； B、单克隆抗体制备需将已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，该细胞既能无限增殖又能分泌特异性抗体，B正确； C、若病毒蛋白 p72基因的关键序列改变，会导致相应的抗原决定簇改变，原有单抗药效通常会明显降低甚至丧失，C错误； D、非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72上有多种抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，改变小鼠体内注入的病毒蛋白种类可以刺激小鼠产生不同类型的 B细胞，可制备多种单抗，D正确。 故选C。 12．(24-25高二下·安徽马鞍山·期末)双特异性单克隆抗体（简称“双抗”）是一类具有特殊结构和功能的生物药物。它是通过基因工程或化学偶联技术设计的抗体，能同时结合两个不同抗原表位，从而在疾病治疗中实现更精准的靶向作用。下图是研究人员通过杂交瘤技术生产双抗的部分过程，下列叙述错误的是（　　）    A．图中步骤②诱导细胞融合常用灭活病毒、聚乙二醇等方法 B．双抗同时结合 CD19 和 CD3，从而提高 T 细胞杀灭癌细胞的效率 C．与传统单抗相比，双抗治疗癌症的优势是可增强治疗效果、减少耐药性 D．对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，需要使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶 【答案】D 【详解】A、步骤②表示动物细胞融合，常用灭活病毒、聚乙二醇等方法处理，A正确； B、双抗同时结合CD19和CD3，从而提高T 细胞杀灭癌细胞的效率，在疾病治疗中实现更精准的靶向作用，B正确； C、与传统单抗相比，双抗治疗癌症可增强治疗效果、减少耐药性，靶向性更强，C正确； D、杂交瘤细胞不会发生接触抑制，不需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，D错误。 故选D。 13．(24-25高二下·浙江宁波·期末)人体心肌细胞中组成肌钙蛋白的亚基cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。下图为制备抗cTnI的单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（　　） A．动物细胞培养应在含5%CO2和95%O2的混合气体的恒温培养箱中进行 B．可在培养基中添加抗生素以防止有害代谢物的积累 C．用cTnI多次免疫小鼠可产生更多能产生特异性抗体的B淋巴细胞 D．甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是丙 【答案】C 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞；第二次筛选：利用多孔板法和抗原—抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、动物细胞培养时，为了满足动物细胞对营养的需求，培养液中通常加入血清或血浆等天然成分，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体环境中进行培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH，A错误； B、为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素；为了防止有害代谢物的积累，可采用定期更换培养液的方法，以便清除代谢物，B错误； C、为了提高淋巴细胞的免疫能力，刺激小鼠机体产生更多的免疫细胞和抗体，一般通过多次注射相应抗原实现，C正确； D、由图可知：杂交瘤细胞需要对甲筛选，因此乙和丙应该都含杂交瘤细胞，D错误。 故选C。 14．(24-25高二下·贵州六盘水·期末)细胞毒素类药物能有效杀伤肿瘤细胞，也会对健康细胞造成伤害。科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合制成抗体—药物偶联物（ADC），ADC可选择性杀伤肿瘤细胞，其作用机制如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．ADC中的抗体能特异性识别、杀伤肿瘤细胞 B．ADC识别肿瘤细胞后，以胞吞的方式进入细胞 C．ADC进入细胞后被溶酶体中的酶降解，释放出药物 D．利用同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤 【答案】A 【详解】A、ADC中的抗体能特异性识别肿瘤抗原，ADC中的阿霉素是杀死肿瘤细胞的有效成分，A错误； B、ADC进入肿瘤细胞的过程，需要抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合，方式为胞吞，B正确； C、ADC胞吞进入靶细胞后，与溶酶体膜融合，被溶酶体中的酶降解，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，C正确； D、利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可与细胞膜上特定受体结合，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病，D正确。 故选A。 15．(24-25高二下·河南许昌·期末)科研人员利用抗原X和实验小鼠，制备单克隆抗体的过程如图所示。已知:①HAT培养基中，未融合的脾细胞无法增殖，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏HGPRT酶而无法增殖;②抗原X的表面存在两种不同的识别位点α和β。下列相关叙述不正确的是（    ） A．HAT培养基通过诱导未融合的脾细胞和骨髓瘤细胞凋亡进行筛选 B．诱导脾细胞与骨髓瘤细胞的融合时可以使用灭活病毒诱导法 C．若需制备能同时识别α和β位点的双特异性抗体，需要进行二次融合 D．该制备过程使用的脾细胞是被抗原X激活的B淋巴细胞 【答案】A 【详解】A、HAT 培养基是通过让未融合的脾细胞无法增殖、未融合的骨髓瘤细胞因缺乏HGPRT酶无法增殖来筛选，不是诱导凋亡，A错误； B、诱导动物细胞融合常用灭活病毒诱导法，B正确； C、抗原X有两种识别位点α和β，要制备同时识别二者的双特异性抗体，需二次融合得到能产生对应抗体的杂交瘤细胞，C正确； D、制备单克隆抗体用的脾细胞是被抗原X激活的B淋巴细胞（能产生抗体），D正确。 故选A。 16．(24-25高二下·云南曲靖陆良县·期末)流感病毒（IFV）表面的抗原蛋白（HA）在病毒侵染宿主细胞过程中起关键作用。科研人员利用IFV制备抗HA蛋白的单克隆抗体，过程如图所示。下列有关叙述正确的是（    ） A．图中的X细胞均为从小鼠的脾中得到的能产生单克隆抗体的B淋巴细胞 B．通过过程①获得的细胞A均为两种类型的细胞融合产生的融合细胞 C．过程②指的是置于特定的培养基上进行培养 D．过程③不需要对杂交瘤细胞克隆化培养，但需要进行抗体检测 【答案】C 【详解】A、X细胞中的B淋巴细胞不能产生单克隆抗体，经过筛选后的杂交瘤细胞才能产生单克隆抗体，A错误； B、通过过程①获得的细胞A有两种类型的细胞融合产生的融合细胞，有同种类型的细胞融合产生的融合细胞，也有未融合的亲本细胞，B错误； C、过程②指的是置于选择培养基上进行培养，经过筛选，只有杂交瘤细胞才能在培养基上生长，C正确； D、过程③需要对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，才能获得产生所需抗体的杂交瘤细胞，D错误。 故选C。 二、多选题 17．(24-25高二下·吉林白山五校·期末)青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。青蒿素的作用方式主要是干扰表膜线粒体的功能，使疟原虫迅速形成自噬泡，并不断排出虫体外，导致疟原虫损失大量胞浆而死亡。为了快速检测青蒿素，科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，其基本操作过程如图。下列相关叙述中正确的是（　　） A．过程①注射相应抗原后立即从小鼠脾脏中提取细胞甲 B．过程②诱导细胞融合，可以利用聚乙二醇作介导 C．过程③④的筛选方法不同，细胞丙的类型多于细胞丁 D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖 【答案】BCD 【详解】A、 过程①注射相应抗原后，使机体产生免疫反应，使B细胞增殖分化形成具有免疫能力的B细胞后，才可以从小鼠脾脏中提取细胞甲，A错误； B、 过程②诱导细胞融合，可以利用物理方法（如电激）、化学方法（如聚乙二醇）或生物方法（如灭活的病毒）作介导，聚乙二醇能促进细胞融合，B正确； C、 过程③是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，过程④是用抗体检测和克隆化培养筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，筛选方法不同，细胞丙是经过过程③筛选出的杂交瘤细胞，其类型有多种（因为融合的情况多样），细胞丁是经过过程④进一步筛选出的能产生特定抗体的杂交瘤细胞，类型单一，所以细胞丙的类型多于细胞丁，C正确； D、 细胞丁是经过筛选得到的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞具有既能大量增殖又能产生特异性抗体的特点，所以过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖，D正确。 故选BCD。 18．(24-25高二下·河北张家口·期末)下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是（    ） A．将制备的单克隆抗体与药物结合，可增强抗体杀伤癌细胞的能力 B．动物体细胞核移植需用到动物细胞培养、动物细胞融合和体外受精技术 C．体外培养干细胞时加入血清以补充某些营养物质 D．对卵母细胞进行去核操作时，也可用紫外线照射等方法使其去核或使其中的DNA变性 【答案】AB 【详解】A、单克隆抗体与药物结合后，单克隆抗体识别癌细胞，而药物对癌细胞才有杀伤作用，A错误； B、动物体细胞核移植的流程为：将体细胞核移入去核卵母细胞→重组细胞培养→胚胎移植。该过程需要动物细胞培养（培养重组细胞），但不需要动物细胞融合（核移植是细胞核与细胞质的重组，而非细胞融合），也不需要体外受精技术，B错误； C、血清中含有多种未知的营养成分、生长因子等，能为干细胞体外培养提供必要的营养支持，C正确； D、卵母细胞可用显微操作去核，也可用紫外线短时间照射等方法在没有穿过卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性，D正确。 故选AB。 19．(24-25高二下·辽宁丹东·期末)CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6倍至5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。下列叙述错误的是（    ） A．多次进行步骤①的处理目的是使小鼠产生更多抗CD47抗体 B．过程②筛选得到的杂交瘤细胞分泌的抗体都能与CD47特异性结合 C．③过程筛选出的单个杂交瘤细胞通过无性繁殖产生的细胞群能产生同种抗体 D．体外培养杂交瘤细胞时，需要给细胞提供95%空气和5%O2的混合气体 【答案】ABD 【分析】步骤①是向小鼠体内注射特定的抗原，多次向免疫动物注射抗原CD47的目的是为了获得更多分泌抗CD47抗体的B淋巴细胞。②使用选择培养基筛选融合的杂交瘤细胞，未融合的和融合了同种核的细胞死亡，③用专一抗体检测（抗原—抗体杂交）的方法筛选出能产生抗CD47抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、多次向免疫动物注射抗原CD47即步骤①的目的是为了获得更多分泌抗CD47抗体的B淋巴细胞，A错误； B、②使用选择培养基筛选融合的杂交瘤细胞，其分泌的抗体不一定能与CD47特异性结合，B错误； C、③用专一抗体检测（抗原—抗体杂交）的方法筛选出能产生抗CD47抗体的杂交瘤细胞，该过程筛选出的单个杂交瘤细胞通过无性繁殖产生的细胞群能产生同种抗体，C正确； D、体外培养杂交瘤细胞时，需要给细胞提供95%空气和5%CO2的混合气体，D错误。 故选ABD。 20．(24-25高二下·湖南永州第一中学·期末)CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制T细胞活性甚至使T细胞凋亡，从而使机体肿瘤细胞免受T细胞攻击。科研人员将两种不同的杂交瘤细胞融合得到双杂交瘤细胞并置于培养液中培养，而后成功从培养液中筛选出同时抗CTLA-4和PD-1的双特异性抗体（如图），抗体疗效更好。下列叙述正确的是（    ） A．双杂交瘤细胞需要CTLA-4和PD-1刺激，才能产生双特异性抗体 B．制备双杂交瘤细胞时可采用PEG融合法、灭活病毒诱导法诱导细胞融合 C．筛选双特异性抗体时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原 D．双特异性抗体可以靶向作用两种受体分子，增强细胞免疫达到更好的抗肿瘤效果 【答案】BCD 【详解】A、 双杂交瘤细胞是由两种不同的杂交瘤细胞融合得到的，其产生双特异性抗体是由细胞内的基因决定的，并非需要CTLA-4和PD-1刺激才产生，A错误； B、在动物细胞融合过程中，常用PEG融合法、灭活病毒诱导法等诱导细胞融合来制备双杂交瘤细胞，B正确； C、筛选同时抗CTLA-4和PD-1的双特异性抗体时，需要用CTLA-4和PD-1这两种抗原进行筛选，即制备单克隆抗体时所使用的2种抗原，C正确； D、 双特异性抗体可以同时靶向作用于CTLA-4和PD-1这两种T细胞表面的受体分子，避免T细胞活性被抑制或凋亡，增强细胞免疫，从而达到更好的抗肿瘤效果，D正确。 故选BCD。 21．(24-25高二下·河北沧州·期末)某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S，蛋白S上含有多个不同的抗原决定簇，已知每一个抗原决定簇能够刺激机体产生一种抗体。研究人员制备抗S单克隆抗体的过程如图所示．下列叙述错误的是（    ） A．在小鼠体内培养杂交瘤细胞时需从小鼠脾脏中提取特异性抗体 B．体外培养的杂交瘤细胞生长到表面相互接触时会停止分裂、增殖 C．单克隆抗体M和单克隆抗体N都能够识别蛋白S，说明制备的抗体不具有特异性 D．可用灭活病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 【答案】ABC 【详解】A、在小鼠体内培养杂交瘤细胞时，杂交瘤细胞会在小鼠腹腔等部位增殖并分泌特异性抗体，需要从小鼠腹水中提取特异性抗体，而不是从脾脏中提取，A错误；    B、杂交瘤细胞具有癌细胞的特点，体外培养的杂交瘤细胞具有无限增殖的能力，不会出现接触抑制现象，即生长到表面相互接触时不会停止分裂、增殖，B错误；    C、蛋白S上含有多个不同的抗原决定簇，单克隆抗体M和单克隆抗体N都能够识别蛋白S，是因为它们分别识别蛋白S上不同的抗原决定簇，这恰恰体现了制备的抗体具有特异性，C错误；    D、在制备单克隆抗体的过程中，可用灭活病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，D正确。    故选ABC。 22．(24-25高二下·江苏淮安·期末)将单克隆抗体与细胞毒素类药物相结合，可制备抗体-药物偶联物（ADC）用于肿瘤的治疗，下列相关叙述正确的有（    ） A．单克隆抗体制备过程中，可用肿瘤细胞膜蛋白作为抗原，对抗体进行筛选 B．杂交瘤细胞只能在动物体内繁殖，因此单克隆抗体要在腹水中提取 C．相比直接用细胞毒素作为抗肿瘤药物，ADC对健康细胞的副作用较小 D．若将单克隆抗体进行荧光标记，还可用于肿瘤的诊断和定位 【答案】ACD 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、在单克隆抗体制备过程中，需要用特定的抗原刺激 B 淋巴细胞，使其产生相应的抗体。肿瘤细胞膜蛋白可以作为抗原，通过该抗原刺激得到的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后，再用该抗原对产生的抗体进行筛选，获得能特异性结合肿瘤细胞膜蛋白的单克隆抗体，A正确； B、杂交瘤细胞既能在动物体内繁殖，也能在体外培养条件下大量繁殖。单克隆抗体可以在动物的腹水中提取，也可以在体外培养的培养液中提取，B错误； C、直接使用细胞毒素作为抗肿瘤药物，细胞毒素对健康细胞也会有较大的杀伤作用。而 ADC（抗体 - 药物偶联物）是将细胞毒素与单克隆抗体结合，单克隆抗体能特异性地识别肿瘤细胞，将细胞毒素定向运输到肿瘤细胞处发挥作用，对健康细胞的副作用较小，C正确； D 、由于单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，若将单克隆抗体进行荧光标记，利用抗原 - 抗体特异性结合的原理，就可以对肿瘤细胞进行诊断和定位，D正确。 ACD。 23．(24-25高二下·黑龙江大庆萨尔图区大庆实验中学·期末)HAT选择培养基可以筛选出融合成功的杂交瘤细胞，研究人员将两株不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞。该细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生具有CD3和CD87结合位点的双特异性抗体，如图所示。CD87是一种癌细胞膜上的受体蛋白，研发针对CD87的抗体类药物能提高癌症的治愈率；CD3是所有T细胞表面均有表达的特异性抗原，该抗原被激活后，能极大促进T细胞的免疫效力。下列叙述错误的是（　　） A．培养双杂交瘤细胞的培养基中应加入水、无机盐、琼脂和血清等 B．双特异性单克隆抗体使T细胞更精准接触并杀伤癌细胞 C．将两株不同的杂交瘤细胞融合后，可利用HAT选择培养基筛选出双杂交瘤细胞 D．双杂交瘤细胞受到CD87和CD3两种抗原刺激后才能产生双特异性抗体 【答案】ACD 【详解】A、双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，说明是在液体培养基中培养，而琼脂是制作固体培养基的凝固剂，不需要加入，A错误； B、CD87是癌细胞膜上受体蛋白，CD3激活后能促进T细胞免疫效力，双特异性单克隆抗体一端与癌细胞上CD87结合，一端与T细胞上CD3结合，能使T细胞更精准接触并杀伤癌细胞，B正确； C、HAT选择培养基是用于筛选融合成功的杂交瘤细胞，而将两株不同杂交瘤细胞融合后，不能再用HAT选择培养基筛选双杂交瘤细胞，C错误； D、杂交瘤细胞无需抗原刺激就能产生单克隆抗体，双杂交瘤细胞也一样，并非受到CD87和CD3两种抗原刺激后才产生双特异性抗体，D错误。 故选ACD。 24．(24-25高二下·湖南长沙宁乡·期末)在制备单克隆抗体过程中，诱导免疫脾细胞（B淋巴细胞）和骨髓瘤细胞融合后，在培养体系中会存在多种细胞，常使用HAT培养基筛选所需的杂交瘤细胞，其原理如图（已知哺乳动物细胞中有两条途径可以合成 DNA，一条途径会被 HAT 培养基中的氨基喋呤阻断，另一条途径需要关键酶HGPRT 的参与）。下列分析正确的是（　　） 注：+/-分别代表存在和缺失。 A．融合剂处理后存在未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞和融合的杂交瘤细胞 B．免疫脾细胞的 DNA 合成过程被HAT 培养基中的氨基喋呤阻断从而不能在体外无限繁殖 C．实验过程中使用的骨髓瘤细胞是经过人工筛选的缺陷型细胞，具备无限增殖的能力 D．融合成功的杂交瘤细胞在 HAT 培养基中，DNA的合成不会被干扰，能够存活并无限增殖 【答案】AC 【分析】在选择培养基上，自身融合的细胞和未融合的细胞都不能存活，只有杂交瘤细胞可以存活。 【详解】A、由于融合是随机的，且融合率不是100%，诱导融合后会产生三种类型的细胞：未融合的亲本细胞、融合同种核的细胞和杂交瘤细胞，A正确； B、免疫脾细胞可以合成DNA，但不能分裂，故不能存活，B错误； C、实验过程中使用的骨髓瘤细胞可以无限增殖，是经过人工筛选的缺陷型细胞，缺乏关键酶HGPRT，C正确； D、融合成功的杂交瘤细胞在HAT培养基（含有氨基喋呤）中会失去一条DNA合成的途径，即DNA的合成会被干扰，但具有关键酶HGPRT，依然能够存活并无限增殖，D错误。 故选AC。 三、解答题 25．(24-25高二下·天津西青区·期末)为降低肺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图1所示。回答下列问题：        (1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自__________。 (2)为了获得杂交瘤细胞，需要进行筛选。图1中过程②所采用的培养基属于__________；使用该培养基进行细胞培养的结果是__________。 (3)单克隆抗体是图1ADC中的__________（填“a”或“b”）部分。研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。    (4)①据图2回答，ADC进入肺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于__________（填结构名称），可导致癌细胞凋亡。 ②ADC能降低肺癌治疗药物的副作用，是因为__________（答出2点）。 【答案】(1)肺癌细胞 (2) 选择培养基 只有杂交瘤细胞能够生存 (3)a (4) 细胞核 ADC中单克隆抗体能精确的定位癌细胞，让药物作用于肺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应。且单克隆抗体具有灵敏度高的特征，小剂量使用药物就可以有效地治疗疾病 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再通过克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1） 给小鼠注射抗原的目的是使小鼠产生能分泌相应抗体（针对肺癌细胞）的B淋巴细胞，故小鼠注射的特定抗原应取自肺癌细胞。 （2）经过程②培养基培养后可把杂交瘤细胞筛选出来，故该培养基是起筛选作用的选择培养基。使用该培养基进行细胞培养的结果是：未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞不能在该培养基上生存，只有杂交瘤细胞才能在该培养基中生存。 （3）ADC通常由抗体、接头和药物三部分组成，其中抗体起特异性识别作用，据图1可知，a是单克隆抗体，b是药物。 （4）①据图2可知，ADC进入肺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，药物被释放至细胞质基质中，释放出的药物再进入细胞核，最终作用于细胞核，导致癌细胞凋亡。 ②ADC中单克隆抗体能精确的定位癌细胞，让药物作用于肺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应。单克隆抗体具有灵敏度高的特征，小剂量使用药物，就可以有效地治疗疾病，因而可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用。 26．(24-25高二下·广东江门·期末)猪流行性腹泻病（PED）是一种急性传染性肠道疾病，病原体为PEDV。PED传播速度快、死亡率高，严重制约养猪行业的健康和高效发展。制备抗PEDV单克隆抗体对检测和治疗PED具有重要意义。回答下列问题： (1)制备抗PEDV单克隆抗体时，先将纯化的PEDV抗原间隔多次注射给仔猪，一段时间后，再取出免疫仔猪的脾细胞与体外培养的小鼠______细胞混合，然后利用______诱导它们融合，选择培养得到杂交瘤细胞。最后再经过一系列筛选获得分泌抗PEDV单抗的猪源杂交瘤细胞系（14A1），用于后续研究。 (2)科研人员用含不同浓度抗菌肽（AMP）的培养基培养14A1，分析图1、表1结果可知，抗菌肽（AMP）浓度为______最利于14A1在体外进行大规模培养，理由是______。 表1 AMP浓度（ug/ml） 抗体效价 0 1∶4000 10 1∶16000 20 1∶8000 注：抗体效价越大，抗PEDV单抗含量越高 (3)PEDV具有多个与PEDV单抗结合的位点。为研究PEDV1（V1）、PEDV2（V2）两种单抗与PEDV结合的位点是否相同，科研人员按照图2流程进行了实验。 ①请将图2中使用的抗体填入表2中ⅠⅡⅢ处（填“V1”或“V2”或“无关抗体”），完成一种实验探究方案。Ⅰ______、Ⅱ______、Ⅲ______。 表2 未标记抗体 荧光标记抗体 对照组1 V2 V2 对照组2 Ⅰ V2 实验组 Ⅱ Ⅲ ②若V1、V2与PEDV结合的位点不同，与对照组1、2分别比较，实验组的荧光值应______。 (4)科研人员用分子结构成像技术证实了V1、V2与PEDV结合的位点不同。基于上述系列研究，请你为治疗PED提供两种思路______。 【答案】(1) 骨髓瘤 PEG、灭活病毒 (2) 10μg/ml 该浓度下细胞数量较多且抗体效价最大 (3) V1 无关抗体 V2 与对照组1基本相同，且明显高于对照组2 (4)思路一：单独或共同使用V1、V2进行治疗；思路二：利用单抗制成靶向药物 【分析】单克隆抗体制备是将产生特异性抗体的B淋巴细胞与能无限增殖的骨髓瘤细胞融合，获得既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，进而制备单一抗体的技术。单克隆抗体的特点：特异性强、 可大量制备。 【详解】（1）单克隆抗体制备过程中，需要将免疫动物的脾细胞（含B淋巴细胞）与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞混合，然后利用聚乙二醇（PEG）或灭活的病毒等诱导它们融合。 （2）从图1和表1分析，当抗菌肽（AMP）浓度为10μg/ml时，细胞数量较多（从图1可知细胞生长状况较好），且抗体效价最大（从表1可知，此时抗体效价为1:16000，是所给浓度中最高的），说明此时既能保证细胞的大量增殖，又能产生较多的抗PEDV单抗。因为在抗菌肽（AMP）浓度为10μg/ml时，一方面从图1可知此时14A1的数量相对较多，有利于大规模培养获取足够数量的14A1；另一方面从表1可知此时抗体效价最大，抗PEDV单抗含量最高，培养获得的产物质量好 。所以理由是在该浓度下14A1数量较多且抗体效价最大（抗PEDV单抗含量最高）。 （3）为研究两种单抗与PEDV结合的位点是否相同，可先将一种单抗（如V1）与PEDV结合，再加入另一种单抗（V2），若能结合则说明结合位点不同，若不能结合则说明结合位点可能相同。同时需要设置无关抗体作为对照，排除非特异性结合的影响。所以一种可行的方案是Ⅰ处为V1、Ⅱ处为无关抗体、Ⅲ处为V2 。（答案不唯一，也可以Ⅰ处为V2、Ⅱ处为无关抗体。 ②  对照组1中只有V2与PEDV结合产生荧光，对照组2中由于V1先与PEDV结合（但结合位点与V2不同），V2仍能结合产生荧光。而实验组中V1作为未标记抗体先与PEDV结合，然后荧光标记的V1再结合，因为结合位点相同，所以实验组的荧光值与对照组1相比应基本相同（因为结合的荧光标记抗体数量差不多），与对照组2相比应明显降低（因为对照组2中V1和V2结合位点不同，能结合更多荧光标记抗体）。 若V1、V2与PEDV结合的位点不同，则实验中先加入未标记的抗体V1或无关抗体，再加入荧光标记的抗体B时 不影响抗体B与PEDV的结合，实验组的荧光值应与对照组1相近；但是对照组2先加入未标记的抗体V2后，与PEDV结合的位点已经被占用，后加入的荧光标记的抗体V2就无法再与相应位点结合，因此其荧光值非常低。 （4）  思路一：因为V1、V2与PEDV结合位点不同，所以可以同时使用V1和V2制成联合抗体药物，这样可以更全面地结合PEDV，增强治疗效果。 思路二：以V1和V2与PEDV结合的位点为靶点，设计小分子药物，阻止PEDV与宿主细胞结合，从而达到治疗的目的。 27．(24-25高二下·陕西渭南临渭区·期末)下图是某科研所以小鼠为材料制备实验克隆体和某抗原的单克隆抗体及研究胚胎干细胞分化条件的流程图。请回答下列相关问题： (1)图中去核卵母细胞是通过________法去除卵母细胞中的核得到的。B细胞应选择________期细胞，原因是________。 (2)④过程常用的生物诱导因素是_________。④过程中产生的两两融合细胞的类型有________（用X、Y细胞表述）。 (3)单克隆抗体制备过程中要进行经过多次筛选。第一次筛选的目的是________，后续筛选所用的方法是_________，经过多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 (4)若要在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO2的培养箱中培养，CO2的作用是________。 【答案】(1) 显微操作（去核） 减数第二次分裂中期（或MII期） 卵细胞质中有激发细胞核全能性表达的物质；卵细胞体积大、易操作；卵细胞中营养物质丰富 (2) 灭活的病毒 XX、YY、XY（或X自身融合、Y自身融合、XY融合） (3) 用选择培养基筛选出杂交瘤细胞（或获得杂交瘤细胞） 克隆化培养和抗体检测 (4)维持培养液的pH 【分析】单克隆抗体的制备过程：制备产生特异性抗体的B淋巴细胞→获得杂交瘤细胞→克隆化培养和抗体检测→将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖→提取单克隆抗体（从细胞培养液或小鼠的腹水中提取 ）。 【详解】（1）图中去核卵母细胞是通过显微操作法去除卵母细胞中的核得到的。B细胞应选择减数第二次分裂中期的卵母细胞去核，原因是卵细胞质中有激发细胞核全能性表达的物质、卵细胞体积大，易操作、卵细胞中营养物质丰富。 （2）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂，生物诱导法常用灭活的病毒，④过程为诱导细胞融合的过程，常用的生物诱导因素是灭活的病毒。④过程中产生的融合细胞的类型有X自身融合细胞、Y自身融合细胞、X—Y融合细胞，产生的两两融合细胞的类型有XX、YY、XY。 （3）⑤过程是单克隆抗体的筛选过程，融合的结果是有很多不符合要求的；如有B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，所以要进行两次筛选，一次是通过具有筛选作用的培养基筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过克隆化培养和抗体检测（抗原一抗体杂交）筛选出能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞。 （4）动物细胞培养需要的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值）。 28．(24-25高二下·山东东营·期末)某些炎症疾病通常由多种途径驱动，如干细胞因子（SCF）和胸腺基质淋巴细胞增多素（TSLP）两种炎症促进因子，可通过不同途径诱导炎症疾病的发生。传统的单靶点抗体疗效有限，多特异性抗体制备对于临床靶向治疗相关疾病具有重要价值。以下是针对SCF和TSLP的双特异性抗体制备过程。回答下列问题。 (1)在提取小鼠B淋巴细胞之前需要用SCF或TSLP多次注射到小鼠体内，目的是_____。与其它大多数细胞不同，在体外培养骨髓瘤细胞时，应采用的培养方式为_______，在培养过程中需要定期更换培养液，原因是______。 (2)常用灭活病毒诱导法诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，原理是灭活病毒可使细胞膜上的_______，细胞膜打开，细胞发生融合。 (3)图中筛选1用特定的培养基进行筛选，不能在该培养基上继续生长的细胞有_______，筛选2通常用多孔板进行培养和筛选，对杂交瘤细胞的培养液进行充分稀释，尽量使_______。通过培养让它增殖为单克隆细胞，再用_____进行抗体检测获得两种杂交瘤细胞。 (4)使用SCF/TSLP双特异性抗体治疗炎症疾病具有较高的临床价值，与单克隆抗体相比其优点是_______。 【答案】(1) 刺激小鼠产生免疫反应，产生能分泌抗SCF或抗TSLP抗体的B淋巴细胞 悬浮培养 清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害 (2)蛋白质分子和脂质分子重新排布 (3) 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞 每一个孔只接种一个杂交瘤细胞 SCF或TSLP抗原 (4)使用一种抗体就可以同时阻断两种不同的炎症致病途径，达到比抑制单一途径更好的治疗效果 【分析】单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞结合，经过选择培养基的筛选得到杂交瘤细胞，经专一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞，即可得单克隆抗体。 【详解】（1）用SCF或TSLP多次注射到小鼠体内，目的是刺激小鼠产生免疫反应，产生能分泌抗SCF或抗TSLP抗体的B淋巴细胞，因为抗原多次刺激机体可以使机体产生更多的相应免疫细胞。在体外培养骨髓瘤细胞时，应采用悬浮培养方式，骨髓瘤细胞具有无限增殖能力且能在体外悬浮生长，在培养过程中需要定期更换培养液，是为了清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。 （2）常用灭活病毒诱导法诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，原理是灭活病毒可使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 （3）图中筛选1用特定的培养基进行筛选，不能在该培养基上继续生长的细胞有未融合的亲本细胞（B淋巴细胞和骨髓瘤细胞）以及融合的具有同种核的细胞（B-B融合细胞和骨髓瘤-骨髓瘤融合细胞），因为特定培养基只允许杂交瘤细胞生长，筛选2通常用多孔板进行培养和筛选，对杂交瘤细胞的培养液进行充分稀释，尽量使每个孔中只接种一个杂交瘤细胞，这样通过培养让它增殖为单克隆细胞，再用抗原（SCF和TSLP ）进行抗体检测获得两种杂交瘤细胞，即能产生抗SCF抗体和抗TSLP抗体的杂交瘤细胞。 （4）使用SCF/TSLP双特异性抗体治疗炎症疾病与单克隆抗体相比，优点是使用一种抗体就可以同时阻断两种不同的炎症致病途径，达到比抑制单一途径更好的治疗效果。 29．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)双特异性抗体（Bispecific Antibody，BsAb）是一种人工设计的抗体，能够同时结合两种不同的抗原或同一抗原的两个不同表位，从而实现“双靶向”功能，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题。 (1)图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是________。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是________。 (2)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行________和抗体检测，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，其产生的单克隆抗体的优点是____________。 (3)④步骤取一定稀释倍数的杂交瘤细胞悬液加入多孔板中，适宜条件下培养后，利用___________原理进行抗体阳性检测。图2方框内需要经过_______次筛选，才能获取单克隆杂交一杂交瘤细胞。 (4)单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外培养时，需在培养液中提供细胞所需的各种营养物质，此外，通常还需要加入________等天然成分。进行细胞培养时，需提供的气体环境是_________。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为细胞密度过大、______和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。 (5)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_______。 【答案】(1) 刺激小鼠产生特定抗体的B淋巴细胞 灭活病毒诱导法 (2) 克隆化培养 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备 (3) 抗原与抗体特异性结合 2（或两） (4) 血清 95%空气和5%CO2 有害代谢产物积累 (5)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞 【分析】题图分析，双特异性抗体制备流程为，先给小鼠注射特定癌胚抗原使之发生免疫反应，然后获取已经免疫的B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；再把单克隆杂交瘤细胞与经注射长春碱后从小鼠中获得的免疫的B淋巴细胞再杂交，得到单克隆杂交—杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体。 【详解】（1）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠产生特定抗体的B淋巴细胞。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是灭活病毒诱导法，即灭活病毒诱导法是诱导动物细胞融合特有的方法。 （2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，其目的是获得能产生目标抗体的杂交瘤细胞，筛选出杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生特异性抗体，而后对其进行体外或体内培养，通过该过程获得的单克隆抗体的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备。 （3）④步骤取一定稀释倍数的杂交瘤细胞悬液加入多孔板中，适宜条件下培养后，利用抗原与抗体特异性结合的原理进行抗体阳性检测，进而筛选出能产生目标抗体的杂交瘤细胞。图2方框内需要经过2次筛选，先筛选得到对长春碱免疫的B淋巴细胞，后筛选出杂交—杂交瘤细胞，进而才能获取单克隆杂交一杂交瘤细胞。 （4）单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外培养时，需在培养液中提供细胞所需的各种营养物质，此外，通常还需要加入血清等天然成分，因为血清的加入弥补了对动物细胞所需营养研究不清楚的不足，进而保证了动物细胞培养对营养的需求。进行细胞培养时，需提供的气体环境是95%空气和5%CO2，其中二氧化碳的作用是维持培养液的pH，体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为细胞密度过大、有害代谢产物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养，即此时需要更换培养基。 （5） 双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，避免对正常细胞造成伤害，因而对人体的副作用更小，这体现了双特异性单克隆抗体在治疗疾病（运载药物）方面的用途。 30．(24-25高二下·四川眉山仁寿县·期末)人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题： (1)动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的________，以满足动物细胞培养的营养需要。动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是________。 (2)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的________。为了防止有害代谢物的积累，可采用________的方法，以便清除代谢物；②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得________。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是________。 (4)抗体—药物偶联物（ADC）通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。如下图所示，ADC依靠________（填“a”或“b”）最终作用于细胞核，可导致癌细胞凋亡。 (5)单克隆抗体的制备技术是在动物细胞融合技术上发展起来的，与常规的血清抗体相比，单克隆抗体最大的优点在于________。 【答案】(1) 动物血清 维持培养液的pH (2) 抗生素 定期更换培养液 能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞 (3)与待测抗原结合，并催化检测底物生成产物 (4)b (5)能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 【分析】由图可知，①代表用特定的选择培养基进行筛选，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，就能获得足够数量的能分泌抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 【详解】（1）人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。动物细胞培养的气体环境：95%空气＋5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH，形成类似于细胞生存的内环境的pH。 （2）抗生素能抑制细菌的增殖，对真核细胞的培养没有影响，因此为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素。根据制作流程要求，细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，需要定期更换培养液。 ②表示第二次筛选即抗体检测和克隆化培养，是为了获得能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 （3）由图可知，两种抗体与检测的抗原均能结合，但结合部位是不同的，而酶标抗体可以与待测抗原结合，催化抗原分解，所以通过检测其分解产物多少就可确定抗原的含量。 （4）由图可知，a表示抗体，b表示药物，ADC依靠抗体特异性识别肿瘤细胞，b药物最终作用于细胞核，引起癌细胞的凋亡。 （5）从血清中分离出的抗体产量低、纯度低，而且特异性差，而单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。 31．(24-25高二下·江西景德镇·期末)将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞。CD47是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用。下图为筛选、制备抗CD47单克隆抗体的示意图，根据图解回答问题： (1)由图可看出，单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术有_______，实验前需给模型小鼠注射CD47抗原蛋白，其目的是_______，获得融合细胞的方法有_______（至少写两个）。 (2)若只考虑细胞两两融合，图中融合细胞理论上有_______种（只考虑细胞的两两融合）。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。鼠的B淋巴细胞有上述两种途径，但不能分裂增殖；鼠的骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。根据该原理，在含融合细胞的混合培养液中添加氨基嘌呤________（填“能”或“不能”）筛选出杂交瘤细胞，原因是_______。 (3)图2是用_______方法，经多次筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群，杂交瘤细胞的特点有_______。 【答案】(1) 动物细胞融合、动物细胞培养 刺激小鼠产生分泌抗CD47蛋白抗体的B淋巴细胞 聚乙二醇处理、电激或灭活病毒诱导等 (2) 3 能 杂交瘤细胞D途径被氨基嘌呤阻断后不能合成DNA，但可通过S途径合成DNA，并不断分裂增殖 (3) 抗原抗体杂交 既能无限增殖，又产生专一抗体 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再通过克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）由图可看出，单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术有动物细胞融合、动物细胞培养，实验前需给模型小鼠注射CD47抗原蛋白，其目的是刺激小鼠产生分泌抗CD47蛋白抗体的B淋巴细胞，获得融合细胞的方法有聚乙二醇处理、电激或灭活病毒诱导等。 （2）若只考虑细胞两两融合，图中融合细胞理论上有3种，即B淋巴细胞-B淋巴细胞、骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断，在含融合细胞的混合培养液中添加氨基嘌呤后，B淋巴细胞-B淋巴细胞和单独的B淋巴细胞能利用S途径进行DNA合成，但不能分裂增殖；骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞和单独的骨髓瘤细胞无法合成DNA；杂交瘤细胞D途径被氨基嘌呤阻断后不能合成DNA，但可通过S途径合成DNA，并不断分裂增殖，因此可以将杂交瘤细胞筛选出来。 （3）图2是用抗原抗体杂交方法，经多次筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群，杂交瘤细胞的特点有既能无限增殖，又产生专一抗体。 32．(24-25高二下·吉林吉林永吉实验高级中学等校·期末)女性怀孕后尿液中会检出绒毛膜促性腺激素（HCG）。用抗HCG单克隆抗体制备的试纸可以测试女性是否怀孕。如图是抗HCG单克隆抗体的制备流程示意图。回答下列问题： (1)制备单克隆抗体利用的生物学技术有__________（答出两点）。给小鼠注射的HCG相当于__________（填“抗体”或“抗原”）。 (2)诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，常用的化学诱导剂是__________。 (3)用特定的选择培养基对乙进行筛选，所得细胞丙的特点是__________，对丙进行检测、筛选得到丁，所采用操作技术依据的原理是__________。 (4)为了更多地生产出人HCG，有人构思利用胚胎分割技术，把一个胚胎分割成很多份，进而培育出大量相同的转基因牛以生产人HCG，这种方法__________（填“可行”或“不可行”）。 (5)将验孕试纸有MAX标志线的一端插入尿液后平放，若尿液中存在HCG，则其会随尿液向右扩散，与包埋在标志线右侧的被显色剂标记的抗HCG抗体1发生特异性结合，形成的复合体继续随尿液向右扩散至检测线处，与固定于此的抗体2结合而在此处显色，对照线处的抗体3也会捕获上述复合体而在此处显色。若某位女性已怀孕，则她尿检时显色的是__________（填“检测线”“对照线”或“检测线和对照线”）。 【答案】(1) 动物细胞培养、动物细胞融合 抗原 (2)聚乙二醇（PEG） (3) 既能无限增殖又能产生抗体 抗原—抗体杂交 (4)不可行 (5)检测线和对照线 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再通过克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）制备单克隆抗体利用的生物学技术有动物细胞培养和动物细胞融合。给小鼠注射HCG，目的是获得能够产生抗HCG抗体的B淋巴细胞，给小鼠注射的HCG相当于抗原。 （2）诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，因此，诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，常用的化学诱导剂是聚乙二醇（PEG）。 （3）用特定的选择培养基对乙进行筛选，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，生存下来的细胞丙是杂交瘤细胞，细胞丙的特点是既能无限增殖又能产生抗体，对丙进行克隆化培养和抗体检测，筛选得到丁（能产生所需抗体的杂交瘤细胞），此过程所采用操作技术依据的原理是抗原—抗体杂交。 （4）胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移植的成功率也越低，所以这种方法不可行。 （5）根据题意可知，怀孕女性的尿液中有绒毛膜促性腺激素（HCG），则HCG与包埋在标志线右侧的被显色剂标记的抗HCG抗体1发生特异性结合，形成复合体后继续随尿液向右扩散至检测线处，与固定于此的抗体2结合显色，还会继续向右扩散与对照线区域的抗体3结合显色，所以检测线和对照线都会显色。 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 重难点 03 单克隆抗体的制备和应用 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 D B D B B A C B B A 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 C D C A A C BCD AB ABD BCD 题号 21 22 23 24 答案 ABC ACD ACD AC 25．(1)肺癌细胞 (2) 选择培养基 只有杂交瘤细胞能够生存 (3)a (4) 细胞核 ADC中单克隆抗体能精确的定位癌细胞，让药物作用于肺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低肺癌细胞治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应。且单克隆抗体具有灵敏度高的特征，小剂量使用药物就可以有效地治疗疾病 26．(1) 骨髓瘤 PEG、灭活病毒 (2) 10μg/ml 该浓度下细胞数量较多且抗体效价最大 (3) V1 无关抗体 V2 与对照组1基本相同，且明显高于对照组2 (4)思路一：单独或共同使用V1、V2进行治疗；思路二：利用单抗制成靶向药物 27．(1) 显微操作（去核） 减数第二次分裂中期（或MII期） 卵细胞质中有激发细胞核全能性表达的物质；卵细胞体积大、易操作；卵细胞中营养物质丰富 (2) 灭活的病毒 XX、YY、XY（或X自身融合、Y自身融合、XY融合） (3) 用选择培养基筛选出杂交瘤细胞（或获得杂交瘤细胞） 克隆化培养和抗体检测 (4)维持培养液的pH 28．(1) 刺激小鼠产生免疫反应，产生能分泌抗SCF或抗TSLP抗体的B淋巴细胞 悬浮培养 清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害 (2)蛋白质分子和脂质分子重新排布 (3) 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞 每一个孔只接种一个杂交瘤细胞 SCF或TSLP抗原 (4)使用一种抗体就可以同时阻断两种不同的炎症致病途径，达到比抑制单一途径更好的治疗效果 29．(1) 刺激小鼠产生特定抗体的B淋巴细胞 灭活病毒诱导法 (2) 克隆化培养 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备 (3) 抗原与抗体特异性结合 2（或两） (4) 血清 95%空气和5%CO2 有害代谢产物积累 (5)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞 30．(1) 动物血清 维持培养液的pH (2) 抗生素 定期更换培养液 能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞 (3)与待测抗原结合，并催化检测底物生成产物 (4)b (5)能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 31．(1) 动物细胞融合、动物细胞培养 刺激小鼠产生分泌抗CD47蛋白抗体的B淋巴细胞 聚乙二醇处理、电激或灭活病毒诱导等 (2) 3 能 杂交瘤细胞D途径被氨基嘌呤阻断后不能合成DNA，但可通过S途径合成DNA，并不断分裂增殖 (3) 抗原抗体杂交 既能无限增殖，又产生专一抗体 32．(1) 动物细胞培养、动物细胞融合 抗原 (2)聚乙二醇（PEG） (3) 既能无限增殖又能产生抗体 抗原—抗体杂交 (4)不可行 (5)检测线和对照线 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 重难点 03 单克隆抗体的制备和应用 一、单选题 1．(24-25高二下·陕西西安新城区·期末)单克隆抗体在医药方面占有重要地位。下图为单克隆抗体制备过程示意图，下列有关说法错误的是（　　） A．注射抗原A的主要目的是刺激小鼠产生能够分泌相应抗体的B淋巴细胞 B．HAT培养基作为选择培养基，可以筛选出杂交瘤细胞 C．灭活的病毒能够促使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 D．克隆化培养得到的都是能够分泌相应抗体的杂交瘤细胞 2．(24-25高二下·河南天一大联考·期末)甲状旁腺激素（PTH）是调节钙、磷代谢的主要激素之一，临床上PTH含量是低钙血症等疾病的重要诊断指标。现有两种抗PTH单克隆抗体A1、B1，科研人员将B1固定在固相载体上作为捕获抗体，用辣根过氧化物酶标记A1，建立定量检测PTH的方法，如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．筛选杂交瘤细胞的特定选择培养基中，只有融合的杂交瘤细胞才能生长 B．据图可知，PTH可使底物发生显色反应，从而通过棕色深浅来测定PTH的含量 C．B1和A1均可与待测样本中的PTH特异性结合，但二者与PTH结合的位点不同 D．单克隆抗体不仅可用于诊断疾病，还可形成运载药物的抗体—药物偶联物以治疗疾病 3．(24-25高二下·甘肃临夏州·期末)动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。下列叙述错误的是（　　） A．动物细胞融合技术体现了细胞膜的结构特点 B．采用灭活病毒诱导法可以诱导动物细胞融合 C．制备单克隆抗体需要使用动物细胞融合技术 D．单克隆抗体的制备体现了动物细胞的全能性 4．(24-25高二下·福建泉州鲤城区福建泉州第七中学·期末)CD87是某种癌细胞膜上的受体蛋白，与癌细胞的转移和增殖有关。CD3是所有T细胞表面的特异性抗原，该抗原被激活后，能极大促进T细胞的免疫效力。科研人员尝试通过诱导两种杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，以筛选出能同时结合CD87和CD3的双特异性抗体CD87×CD3，如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．制备双杂交瘤细胞时，需要将CD87、CD3分别注射到小鼠体内 B．体外培养的双杂交瘤细胞会出现贴壁生长和接触抑制现象 C．小鼠体内培养双杂交瘤细胞时需从小鼠腹水中提取双特异性抗体 D．双特异性抗体CD87×CD3的结合不会改变抗体CD87和抗体CD3原有的氨基酸序列 5．(24-25高二下·福建泉州鲤城区福建泉州第七中学·期末)“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是（    ） A．用选择培养基筛选微生物，对照组不接种微生物，实验组接种微生物 B．制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 C．诱导甘蓝根细胞与白菜叶肉细胞原生质体融合，观察到叶绿体即可筛选出杂种细胞 D．培育耐盐转基因植株时，通过PCR等技术检测到目的基因及其mRNA即可筛选耐盐植株 6．(24-25高二下·贵州遵义区县一中·期末)人的细胞中含有TK酶而缺乏HGPRT酶（TK+/HGPRT-），小鼠细胞含有HGPRT酶而缺乏TK酶（TK—/HGPRT+），只有融合的杂交细胞能在选择培养基（HAT培养基）中存活，杂交细胞培养的过程中会随机丢失人类染色体，通过分析不同杂交细胞保留的染色体，可进行HGPRT基因定位，具体流程如下图，下列说法不正确的是（　　） A．利用灭活病毒诱导动物细胞融合时病毒的遗传物质可以进入细胞内 B．动物细胞融合与植物原生质体的融合都依据的是细胞膜的流动性 C．HGPRT基因位于X染色体上，杂交细胞内发生了染色体数目变异 D．HGPRT基因在转录和翻译的过程中均要遵循碱基互补配对原则 7．(24-25高二下·广东深圳深圳大学实验中学·期末)某抗原检测试剂盒可通过特异性抗体捕获特定抗原并检测抗原含量，流程如题图。其中固相抗体是由固相载体连接后的单克隆抗体。下列分析错误的是（　　） A．若未充分洗去游离的酶标抗体，易出现假阳性 B．使用单克隆抗体可以保障检测的特异性与灵敏性 C．酶标抗体既可与固相抗体相结合，又有催化作用 D．光信号检测颜色变化的程度，可定量分析抗原的含量 8．(24-25高二下·吉林长春外五县·期末)抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　）    A．ADC的制备涉及动物细胞融合和动物细胞培养技术 B．ADC中的抗体主要发挥治疗效应以杀伤肿瘤细胞 C．ADC进入肿瘤细胞的过程体现了细胞膜的流动性 D．与化疗相比，使用ADC治疗癌症具有毒副作用小的优点 9．(24-25高二下·山东东营·期末)利用体细胞核移植技术将精子与去核的卵母细胞融合，通过诱导可获得单倍体胚胎干细胞，在遗传分析中具有重要应用。下列说法正确的是（　　） A．胚胎干细胞具有组织特异性可发育成其它各种细胞 B．对MⅡ期的卵母细胞去核操作时，可采用紫外线短时间照射等方法 C．可用电融合法使两细胞融合，用高Ca2+—高pH法激活重构细胞 D．融合之前的细胞一般置于含95%氧气的培养箱培养 10．(24-25高二下·浙江嘉兴·期末)针对某病原体的单克隆抗体制备流程如图1。鼠源抗体的结构如图2，其中5区可与抗原特异性结合，6区可引起人体免疫反应。下列叙述错误的是（　　） A．对小鼠多次注射某病原体后，只有一种B淋巴细胞被激活 B．经选择培养1获得能增殖的杂交瘤细胞 C．经选择培养2获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 D．若图2的单克隆抗体6区为人源抗体片段，可降低免疫排斥 11．(24-25高二下·陕西铜川王益区王益中学·期末)将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，分离该小鼠脾脏中的免疫细胞制备抗p72的单克隆抗体。下列相关叙述错误的是（　　） A．注入小鼠体内的抗原浓度会显著影响所需B淋巴细胞的浓度 B．利用已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合可制备单克隆抗体 C．若非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72基因的关键序列改变，原单抗药效会增强 D．改变非洲猪瘟病毒衣壳蛋白类型并注入小鼠体内可制备出多种抗病毒单抗 12．(24-25高二下·安徽马鞍山·期末)双特异性单克隆抗体（简称“双抗”）是一类具有特殊结构和功能的生物药物。它是通过基因工程或化学偶联技术设计的抗体，能同时结合两个不同抗原表位，从而在疾病治疗中实现更精准的靶向作用。下图是研究人员通过杂交瘤技术生产双抗的部分过程，下列叙述错误的是（　　）    A．图中步骤②诱导细胞融合常用灭活病毒、聚乙二醇等方法 B．双抗同时结合 CD19 和 CD3，从而提高 T 细胞杀灭癌细胞的效率 C．与传统单抗相比，双抗治疗癌症的优势是可增强治疗效果、减少耐药性 D．对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，需要使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶 13．(24-25高二下·浙江宁波·期末)人体心肌细胞中组成肌钙蛋白的亚基cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。下图为制备抗cTnI的单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（　　） A．动物细胞培养应在含5%CO2和95%O2的混合气体的恒温培养箱中进行 B．可在培养基中添加抗生素以防止有害代谢物的积累 C．用cTnI多次免疫小鼠可产生更多能产生特异性抗体的B淋巴细胞 D．甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是丙 14．(24-25高二下·贵州六盘水·期末)细胞毒素类药物能有效杀伤肿瘤细胞，也会对健康细胞造成伤害。科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合制成抗体—药物偶联物（ADC），ADC可选择性杀伤肿瘤细胞，其作用机制如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．ADC中的抗体能特异性识别、杀伤肿瘤细胞 B．ADC识别肿瘤细胞后，以胞吞的方式进入细胞 C．ADC进入细胞后被溶酶体中的酶降解，释放出药物 D．利用同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤 15．(24-25高二下·河南许昌·期末)科研人员利用抗原X和实验小鼠，制备单克隆抗体的过程如图所示。已知:①HAT培养基中，未融合的脾细胞无法增殖，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏HGPRT酶而无法增殖;②抗原X的表面存在两种不同的识别位点α和β。下列相关叙述不正确的是（    ） A．HAT培养基通过诱导未融合的脾细胞和骨髓瘤细胞凋亡进行筛选 B．诱导脾细胞与骨髓瘤细胞的融合时可以使用灭活病毒诱导法 C．若需制备能同时识别α和β位点的双特异性抗体，需要进行二次融合 D．该制备过程使用的脾细胞是被抗原X激活的B淋巴细胞 16．(24-25高二下·云南曲靖陆良县·期末)流感病毒（IFV）表面的抗原蛋白（HA）在病毒侵染宿主细胞过程中起关键作用。科研人员利用IFV制备抗HA蛋白的单克隆抗体，过程如图所示。下列有关叙述正确的是（    ） A．图中的X细胞均为从小鼠的脾中得到的能产生单克隆抗体的B淋巴细胞 B．通过过程①获得的细胞A均为两种类型的细胞融合产生的融合细胞 C．过程②指的是置于特定的培养基上进行培养 D．过程③不需要对杂交瘤细胞克隆化培养，但需要进行抗体检测 二、多选题 17．(24-25高二下·吉林白山五校·期末)青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。青蒿素的作用方式主要是干扰表膜线粒体的功能，使疟原虫迅速形成自噬泡，并不断排出虫体外，导致疟原虫损失大量胞浆而死亡。为了快速检测青蒿素，科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，其基本操作过程如图。下列相关叙述中正确的是（　　） A．过程①注射相应抗原后立即从小鼠脾脏中提取细胞甲 B．过程②诱导细胞融合，可以利用聚乙二醇作介导 C．过程③④的筛选方法不同，细胞丙的类型多于细胞丁 D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖 18．(24-25高二下·河北张家口·期末)下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是（    ） A．将制备的单克隆抗体与药物结合，可增强抗体杀伤癌细胞的能力 B．动物体细胞核移植需用到动物细胞培养、动物细胞融合和体外受精技术 C．体外培养干细胞时加入血清以补充某些营养物质 D．对卵母细胞进行去核操作时，也可用紫外线照射等方法使其去核或使其中的DNA变性 19．(24-25高二下·辽宁丹东·期末)CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6倍至5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。下列叙述错误的是（    ） A．多次进行步骤①的处理目的是使小鼠产生更多抗CD47抗体 B．过程②筛选得到的杂交瘤细胞分泌的抗体都能与CD47特异性结合 C．③过程筛选出的单个杂交瘤细胞通过无性繁殖产生的细胞群能产生同种抗体 D．体外培养杂交瘤细胞时，需要给细胞提供95%空气和5%O2的混合气体 20．(24-25高二下·湖南永州第一中学·期末)CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制T细胞活性甚至使T细胞凋亡，从而使机体肿瘤细胞免受T细胞攻击。科研人员将两种不同的杂交瘤细胞融合得到双杂交瘤细胞并置于培养液中培养，而后成功从培养液中筛选出同时抗CTLA-4和PD-1的双特异性抗体（如图），抗体疗效更好。下列叙述正确的是（    ） A．双杂交瘤细胞需要CTLA-4和PD-1刺激，才能产生双特异性抗体 B．制备双杂交瘤细胞时可采用PEG融合法、灭活病毒诱导法诱导细胞融合 C．筛选双特异性抗体时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原 D．双特异性抗体可以靶向作用两种受体分子，增强细胞免疫达到更好的抗肿瘤效果 21．(24-25高二下·河北沧州·期末)某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S，蛋白S上含有多个不同的抗原决定簇，已知每一个抗原决定簇能够刺激机体产生一种抗体。研究人员制备抗S单克隆抗体的过程如图所示．下列叙述错误的是（    ） A．在小鼠体内培养杂交瘤细胞时需从小鼠脾脏中提取特异性抗体 B．体外培养的杂交瘤细胞生长到表面相互接触时会停止分裂、增殖 C．单克隆抗体M和单克隆抗体N都能够识别蛋白S，说明制备的抗体不具有特异性 D．可用灭活病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 22．(24-25高二下·江苏淮安·期末)将单克隆抗体与细胞毒素类药物相结合，可制备抗体-药物偶联物（ADC）用于肿瘤的治疗，下列相关叙述正确的有（    ） A．单克隆抗体制备过程中，可用肿瘤细胞膜蛋白作为抗原，对抗体进行筛选 B．杂交瘤细胞只能在动物体内繁殖，因此单克隆抗体要在腹水中提取 C．相比直接用细胞毒素作为抗肿瘤药物，ADC对健康细胞的副作用较小 D．若将单克隆抗体进行荧光标记，还可用于肿瘤的诊断和定位 23．(24-25高二下·黑龙江大庆萨尔图区大庆实验中学·期末)HAT选择培养基可以筛选出融合成功的杂交瘤细胞，研究人员将两株不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞。该细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生具有CD3和CD87结合位点的双特异性抗体，如图所示。CD87是一种癌细胞膜上的受体蛋白，研发针对CD87的抗体类药物能提高癌症的治愈率；CD3是所有T细胞表面均有表达的特异性抗原，该抗原被激活后，能极大促进T细胞的免疫效力。下列叙述错误的是（　　） A．培养双杂交瘤细胞的培养基中应加入水、无机盐、琼脂和血清等 B．双特异性单克隆抗体使T细胞更精准接触并杀伤癌细胞 C．将两株不同的杂交瘤细胞融合后，可利用HAT选择培养基筛选出双杂交瘤细胞 D．双杂交瘤细胞受到CD87和CD3两种抗原刺激后才能产生双特异性抗体 24．(24-25高二下·湖南长沙宁乡·期末)在制备单克隆抗体过程中，诱导免疫脾细胞（B淋巴细胞）和骨髓瘤细胞融合后，在培养体系中会存在多种细胞，常使用HAT培养基筛选所需的杂交瘤细胞，其原理如图（已知哺乳动物细胞中有两条途径可以合成 DNA，一条途径会被 HAT 培养基中的氨基喋呤阻断，另一条途径需要关键酶HGPRT 的参与）。下列分析正确的是（　　） 注：+/-分别代表存在和缺失。 A．融合剂处理后存在未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞和融合的杂交瘤细胞 B．免疫脾细胞的 DNA 合成过程被HAT 培养基中的氨基喋呤阻断从而不能在体外无限繁殖 C．实验过程中使用的骨髓瘤细胞是经过人工筛选的缺陷型细胞，具备无限增殖的能力 D．融合成功的杂交瘤细胞在 HAT 培养基中，DNA的合成不会被干扰，能够存活并无限增殖 三、解答题 25．(24-25高二下·天津西青区·期末)为降低肺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图1所示。回答下列问题：        (1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自__________。 (2)为了获得杂交瘤细胞，需要进行筛选。图1中过程②所采用的培养基属于__________；使用该培养基进行细胞培养的结果是__________。 (3)单克隆抗体是图1ADC中的__________（填“a”或“b”）部分。研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。    (4)①据图2回答，ADC进入肺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于__________（填结构名称），可导致癌细胞凋亡。 ②ADC能降低肺癌治疗药物的副作用，是因为__________（答出2点）。 26．(24-25高二下·广东江门·期末)猪流行性腹泻病（PED）是一种急性传染性肠道疾病，病原体为PEDV。PED传播速度快、死亡率高，严重制约养猪行业的健康和高效发展。制备抗PEDV单克隆抗体对检测和治疗PED具有重要意义。回答下列问题： (1)制备抗PEDV单克隆抗体时，先将纯化的PEDV抗原间隔多次注射给仔猪，一段时间后，再取出免疫仔猪的脾细胞与体外培养的小鼠______细胞混合，然后利用______诱导它们融合，选择培养得到杂交瘤细胞。最后再经过一系列筛选获得分泌抗PEDV单抗的猪源杂交瘤细胞系（14A1），用于后续研究。 (2)科研人员用含不同浓度抗菌肽（AMP）的培养基培养14A1，分析图1、表1结果可知，抗菌肽（AMP）浓度为______最利于14A1在体外进行大规模培养，理由是______。 表1 AMP浓度（ug/ml） 抗体效价 0 1∶4000 10 1∶16000 20 1∶8000 注：抗体效价越大，抗PEDV单抗含量越高 (3)PEDV具有多个与PEDV单抗结合的位点。为研究PEDV1（V1）、PEDV2（V2）两种单抗与PEDV结合的位点是否相同，科研人员按照图2流程进行了实验。 ①请将图2中使用的抗体填入表2中ⅠⅡⅢ处（填“V1”或“V2”或“无关抗体”），完成一种实验探究方案。Ⅰ______、Ⅱ______、Ⅲ______。 表2 未标记抗体 荧光标记抗体 对照组1 V2 V2 对照组2 Ⅰ V2 实验组 Ⅱ Ⅲ ②若V1、V2与PEDV结合的位点不同，与对照组1、2分别比较，实验组的荧光值应______。 (4)科研人员用分子结构成像技术证实了V1、V2与PEDV结合的位点不同。基于上述系列研究，请你为治疗PED提供两种思路______。 27．(24-25高二下·陕西渭南临渭区·期末)下图是某科研所以小鼠为材料制备实验克隆体和某抗原的单克隆抗体及研究胚胎干细胞分化条件的流程图。请回答下列相关问题： (1)图中去核卵母细胞是通过________法去除卵母细胞中的核得到的。B细胞应选择________期细胞，原因是________。 (2)④过程常用的生物诱导因素是_________。④过程中产生的两两融合细胞的类型有________（用X、Y细胞表述）。 (3)单克隆抗体制备过程中要进行经过多次筛选。第一次筛选的目的是________，后续筛选所用的方法是_________，经过多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 (4)若要在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO2的培养箱中培养，CO2的作用是________。 28．(24-25高二下·山东东营·期末)某些炎症疾病通常由多种途径驱动，如干细胞因子（SCF）和胸腺基质淋巴细胞增多素（TSLP）两种炎症促进因子，可通过不同途径诱导炎症疾病的发生。传统的单靶点抗体疗效有限，多特异性抗体制备对于临床靶向治疗相关疾病具有重要价值。以下是针对SCF和TSLP的双特异性抗体制备过程。回答下列问题。 (1)在提取小鼠B淋巴细胞之前需要用SCF或TSLP多次注射到小鼠体内，目的是_____。与其它大多数细胞不同，在体外培养骨髓瘤细胞时，应采用的培养方式为_______，在培养过程中需要定期更换培养液，原因是______。 (2)常用灭活病毒诱导法诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，原理是灭活病毒可使细胞膜上的_______，细胞膜打开，细胞发生融合。 (3)图中筛选1用特定的培养基进行筛选，不能在该培养基上继续生长的细胞有_______，筛选2通常用多孔板进行培养和筛选，对杂交瘤细胞的培养液进行充分稀释，尽量使_______。通过培养让它增殖为单克隆细胞，再用_____进行抗体检测获得两种杂交瘤细胞。 (4)使用SCF/TSLP双特异性抗体治疗炎症疾病具有较高的临床价值，与单克隆抗体相比其优点是_______。 29．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)双特异性抗体（Bispecific Antibody，BsAb）是一种人工设计的抗体，能够同时结合两种不同的抗原或同一抗原的两个不同表位，从而实现“双靶向”功能，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题。 (1)图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是________。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是________。 (2)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行________和抗体检测，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，其产生的单克隆抗体的优点是____________。 (3)④步骤取一定稀释倍数的杂交瘤细胞悬液加入多孔板中，适宜条件下培养后，利用___________原理进行抗体阳性检测。图2方框内需要经过_______次筛选，才能获取单克隆杂交一杂交瘤细胞。 (4)单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外培养时，需在培养液中提供细胞所需的各种营养物质，此外，通常还需要加入________等天然成分。进行细胞培养时，需提供的气体环境是_________。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为细胞密度过大、______和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。 (5)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_______。 30．(24-25高二下·四川眉山仁寿县·期末)人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题： (1)动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的________，以满足动物细胞培养的营养需要。动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是________。 (2)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的________。为了防止有害代谢物的积累，可采用________的方法，以便清除代谢物；②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得________。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是________。 (4)抗体—药物偶联物（ADC）通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。如下图所示，ADC依靠________（填“a”或“b”）最终作用于细胞核，可导致癌细胞凋亡。 (5)单克隆抗体的制备技术是在动物细胞融合技术上发展起来的，与常规的血清抗体相比，单克隆抗体最大的优点在于________。 31．(24-25高二下·江西景德镇·期末)将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞。CD47是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用。下图为筛选、制备抗CD47单克隆抗体的示意图，根据图解回答问题： (1)由图可看出，单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术有_______，实验前需给模型小鼠注射CD47抗原蛋白，其目的是_______，获得融合细胞的方法有_______（至少写两个）。 (2)若只考虑细胞两两融合，图中融合细胞理论上有_______种（只考虑细胞的两两融合）。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。鼠的B淋巴细胞有上述两种途径，但不能分裂增殖；鼠的骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。根据该原理，在含融合细胞的混合培养液中添加氨基嘌呤________（填“能”或“不能”）筛选出杂交瘤细胞，原因是_______。 (3)图2是用_______方法，经多次筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群，杂交瘤细胞的特点有_______。 32．(24-25高二下·吉林吉林永吉实验高级中学等校·期末)女性怀孕后尿液中会检出绒毛膜促性腺激素（HCG）。用抗HCG单克隆抗体制备的试纸可以测试女性是否怀孕。如图是抗HCG单克隆抗体的制备流程示意图。回答下列问题： (1)制备单克隆抗体利用的生物学技术有__________（答出两点）。给小鼠注射的HCG相当于__________（填“抗体”或“抗原”）。 (2)诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，常用的化学诱导剂是__________。 (3)用特定的选择培养基对乙进行筛选，所得细胞丙的特点是__________，对丙进行检测、筛选得到丁，所采用操作技术依据的原理是__________。 (4)为了更多地生产出人HCG，有人构思利用胚胎分割技术，把一个胚胎分割成很多份，进而培育出大量相同的转基因牛以生产人HCG，这种方法__________（填“可行”或“不可行”）。 (5)将验孕试纸有MAX标志线的一端插入尿液后平放，若尿液中存在HCG，则其会随尿液向右扩散，与包埋在标志线右侧的被显色剂标记的抗HCG抗体1发生特异性结合，形成的复合体继续随尿液向右扩散至检测线处，与固定于此的抗体2结合而在此处显色，对照线处的抗体3也会捕获上述复合体而在此处显色。若某位女性已怀孕，则她尿检时显色的是__________（填“检测线”“对照线”或“检测线和对照线”）。 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $