专题02 细胞工程（3大考点）（期末真题汇编，黑吉辽蒙专用）高二生物下学期人教版

**基本信息** 细胞工程专题期末试题汇编，涵盖植物细胞工程、动物细胞工程、胚胎工程三大考点，精选黑吉辽等多地期末真题，聚焦技术应用与实验分析。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|38题|植物脱毒苗培养（切花菊茎尖）、动物细胞培养（肝细胞）、胚胎发育（囊胚结构）|结合生产实例（铁皮石斛PLBs培养），考查基础操作原理| |多选题|13题|原生质体融合（三白草与鱼腥草）、单克隆抗体（双抗筛选）、胚胎移植（嵌合胚胎）|设置图表分析（转速对黄酮产量影响），考查综合判断能力| |解答题|8题|植物体细胞杂交流程、单克隆抗体制备、基因编辑猪器官移植|设计跨考点综合题（iPS细胞治疗干眼症），体现科技前沿|

专题02 细胞工程 3大模块高频考点概览 考点01 植物细胞工程及其应用 考点02 动物细胞工程 考点03 胚胎工程及其应用 地 城 考点01 植物细胞工程及其应用 一、单选题 1．(24-25高二下·黑龙江大庆萨尔图区大庆东风中学·期末)许多植物病毒的衣壳蛋白和酶系统在高温（35~45°C）下会发生变性。在通过植物组织培养生产切花菊脱毒苗的过程中，常取高温处理后的切花菊茎尖分生区为外植体。下列叙述错误的是（    ） A．高温处理后的外植体接种前不需再进行消毒处理 B．高温处理的主要目的是使组织中的病毒失去活性 C．选取茎尖分生区为外植体是因为其中病毒含量低 D．再分化过程中生芽等阶段需在有光的条件下进行 2．(24-25高二下·黑龙江龙东十校联盟·期末)铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱，在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示。 下列有关叙述错误的是（　　） A．新生营养芽细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs，常用作外植体 B．生物碱一般在特定的组织或器官，并在一定的环境条件上产生 C．培养基中常常添加脱落酸（ABA）促进PLBs的生长，提高生物碱含量 D．与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长起始快，快速生长时间较长 3．(24-25高二下·黑龙江大庆萨尔图区大庆实验中学·期末)利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述错误的是（　　） A．细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成 B．培养基先分装到锥形瓶，封口后用高压蒸汽灭菌法灭菌 C．芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体 D．紫杉醇也能通过细胞产物的工厂化生产来获取 4．(24-25高二下·黑龙江齐齐哈尔·期末)研究人员利用植物细胞培养技术，在离体条件下大量获得鱼腥草细胞中的萜类化合物，该物质可用于治疗过敏性荨麻疹。下列说法正确的是（    ） A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B．细胞产物的工厂化生产是为了提高单个细胞中萜类物质的含量 C．次生代谢物萜类物质是鱼腥草生命活动必需的营养物质 D．该技术不占用耕地，但受季节、天气等的限制 5．(23-24高二下·黑龙江黑河·期末)地黄为多年生草本植物，含有地黄素、强心苷等多种药用成分，具有清热凉血、解毒等功效。利用植物细胞培养技术工厂化生产地黄素的基本流程如下：接种外植体→诱导形成愈伤组织→悬浮振荡培养→生物反应器中培养→分离、提纯。下列叙述正确的是（　　） A．外植体需先后用次氯酸钠溶液和酒精进行灭菌 B．诱导形成愈伤组织需要一定的营养条件和适宜的光照 C．振荡培养的目的之一是增加培养液的溶氧量，促进细胞呼吸 D．该工厂化生产的目的是大幅提高单个细胞中地黄素、强心苷等的合成量 6．(23-24高二下·黑龙江黑河·期末)水母雪莲是我国的一种名贵药材，主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水母雪莲生长缓慢，长期的掠夺性采挖导致该药材资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水母雪莲细胞合成黄酮的工程技术研究，结果如表所示。下列叙述错误的是（　　） 转速（r/min） 55 65 75 85 相对生长速率 0.21 0.25 0.26 0.25 细胞干重（g/L） 7.5 9.7 11.4 9.5 黄酮产量（g/L） 0.2 0.27 0.32 0.25 A．黄酮产量与细胞干重呈正相关 B．黄酮是水母雪莲细胞生存和生长所必需的 C．氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的 D．转速为75r/min时既利于细胞分裂，又利于黄酮的积累 7．(23-24高二下·黑龙江黑河·期末)CMV 是危害烟草的主要病毒，CMV 侵染烟草后，发病的叶片会褪绿变成黄色。为筛选抗 CMV的烟草突变株，科研小组进行的实验流程如图所示。下列说法正确的是（    ） A．烟草幼苗茎尖病毒极少，直接取其进行组织培养可得到抗 CMV 植株 B．若发病叶片中出现绿色区域，取该区域进行组织培养可能得到抗CMV 植株 C．选取的叶片组织需先进行灭菌处理，再经过脱分化和再分化培养成抗 CMV 植株 D．接种CMV起到了选择作用，因此经组织培养后得到的植株无需再进行抗CMV 鉴定 8．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（    ） A．①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B．②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C．3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 D．百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 9．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)紫杉醇是一种从红豆杉树皮中提取的生物活性物质，目前已在临床中广泛应用于乳腺癌等疾病的治疗。植物细胞工程是生产紫杉醇的关键技术手段，为选育高产细胞系，某研究小组以南方红豆杉的不同外植体为材料进行悬浮培养实验，其结果如图所示。下列叙述不正确的是（    ） A．紫杉醇属于植物的次生代谢物，其产量低，应选择高产细胞进行培养 B．利用植物细胞工程技术生产紫杉醇时需要培养得到完整植株 C．实验结果表明，应选择茎段来源的红豆杉细胞，培养到5-6代提取紫杉醇 D．进行培养时，培养基中需要加入生长素、细胞分裂素 10．(24-25高二下·辽宁丹东·期末)研究者欲利用原生质体融合技术，实现三白草和鱼腥草有效成分的工厂化生产。下列叙述正确的是（　　） A．过程①常使用纤维素酶和果胶酶，应在无菌水中进行，以防止杂菌污染 B．过程②可使用聚乙二醇以诱导三白草原生质体和鱼腥草原生质体的融合 C．过程③经过脱分化、再分化形成的愈伤组织是呈不定形的薄壁组织团块 D．过程④需要调节培养基中生长素和细胞分裂素的比例，诱导生芽和生根 11．(24-25高二下·辽宁丹东·期末)植物甲抗旱、抗病能力强，植物乙结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞的技术 B．过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C．杂种细胞需要再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 D．植物丙的细胞中具有来自植物甲和植物乙的两个细胞核 12．(24-25高二下·辽宁丹东·期末)辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域，辣椒素的获得途径如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．若要培养脱毒苗，可用辣椒的茎尖经脱分化、再分化过程获得 B．过程①需先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体 C．过程②中生根与生芽所需的生长素与细胞分裂素的比例不同 D．辣椒素不是生物生长所必需的产物，属于细胞的次生代谢物 13．(24-25高二下·辽宁重点高中联合体·期末)豆科牧草沙打旺具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，紫花苜蓿固氮能力较强，科研人员利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如下图，细胞在融合过程可能存在染色体丢失现象。下列有关叙述或推测正确的是（　　） A．过程Ⅰ需要放到低渗或者等渗的溶液中进行去壁 B．V过程中若生长素和细胞分裂素的比值小于1时，将有利于根的形成 C．植物体细胞杂交的原理有细胞膜的流动性和植物细胞培养 D．d细胞的染色体数可能少于a细胞与b细胞染色体数之和 二、多选题 14．(24-25高二下·辽宁大连·期末)狼爪瓦松是一种具有观赏价值的二倍体野生花卉，其细胞中的黄酮类化合物可入药。某科研小组利用植物细胞工程等技术手段，进行狼爪瓦松的扩大培养，具体过程见下图（其中数字序号代表相应的处理过程）。下列叙述正确的是（    ） A．过程①前需要用酒精对外植体进行灭菌 B．过程③需在生长素/细胞分裂素比值高的培养基中诱导生芽 C．植株丙与植株甲、乙属于同一物种，但遗传信息不同 D．过程⑤利用愈伤组织分裂能力强的特点进行植物细胞培养 15．(24-25高二下·辽宁五校联考·期末)番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞悬浮技术培养胡萝卜细胞来获取，实验流程和培养装置如图。下列有关叙述正确的是（　　） A．悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团 B．通过加料口来保证培养液中营养物质处于较高浓度 C．充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理 D．增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度 16．(24-25高二下·吉林吉林永吉实验高级中学等校·期末)如图所示为利用植物体细胞杂交技术培育杂种植株的流程图。下列叙述正确的是（　　） A．制备A、B原生质体时需使用纤维素酶和果胶酶 B．融合的原生质体应当具有红色、绿色两种荧光标记 C．过程②中细胞内活动较旺盛的结构是溶酶体和线粒体 D．该过程依据的原理有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 17．(24-25高二下·吉林“BEST合作体”·期末)藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述错误的是（    ） A．组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生定向突变 B．过程①中外植体依次使用次氯酸钠和70%酒精溶液进行消毒 C．过程③④所用的培养基中添加的植物激素的种类和比例都相同 D．筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分 18．(24-25高二下·内蒙古巴彦淖尔·期末)为培育耐盐高产大豆新品种，利用滩涂耐盐大豆和普通高产大豆进行体细胞杂交，过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．①过程需要用纤维素酶和果胶酶处理，以去除细胞壁 B．②过程用病毒诱导等方法进行诱导，可得到3种两两融合的细胞 C．④过程为脱分化，形成的愈伤组织为不定形的薄壁组织团块 D．④⑤过程中，细胞分裂方式都是有丝分裂，且都需要光照 三、解答题 19．(24-25高二下·内蒙古赤峰·期末)某科研团队尝试利用植物体细胞杂交技术培育抗盐碱的番茄新品种（普通番茄和野生耐盐碱番茄均是二倍体生物）。以下是他们的实验流程模式图。回答下列问题： (1)在进行体细胞杂交之前，去除细胞壁，获得原生质体。制备原生质体的过程不能在无菌水中进行，这是为了防止______。 (2)诱导②过程的化学法包括聚乙二醇融合法和______融合法等。④过程是______，即失去其特有的______，转变成未分化的细胞，进而形成愈伤组织后经再分化形成芽、根等器官。这两个过程中______是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的______等都会影响植物细胞的发育方向。 (3)上述过程中利用的技术除了植物体细胞杂交技术外，还有______技术。植株G是______倍体植物，获得植物体G的原理是______。植株G的优点是______。 20．(24-25高二下·黑龙江龙东十校联盟·期末)柠檬酸是一种应用广泛的有机酸，生产时需接种黑曲霉（一种真菌）孢子在密闭发酵罐中发酵。下图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程。请回答下列问题： (1)培养基配制完成后需要_______方法灭菌。过程A采用的接种方法是___________，其作用是_______________________________________。 (2)黑曲霉发酵前需要进行菌种的扩大培养，其目的是__________________；菌液接种到发酵罐前，菌液的孢子数可用____________在显微镜下测定。 (3)红薯粉主要作为黑曲霉的碳源，同时也为黑曲霉的生命活动提供____________。 黑曲霉在密闭发酵罐生产柠檬酸，发酵过程中通过____________增加发酵液的溶氧量；为保证发酵过程的连续性，并解决营养物质不足和有害物质增加的问题，生产中可采取的措施是______________________________________。 (4)黑曲霉多不耐高温，发酵获得柠檬酸的过程需大量冷却水控制温度，生产成本高。现利用原生质体融合技术获得耐高温高产黑曲霉，过程如图所示。 为了在温和条件下获得具有活力的原生质体，②、③通常用__________法去除细胞壁。然后可采用染色排除法方法测定该原生质体的活性，其原理利用了活细胞细胞膜的_________________________功能。 21．(24-25高二下·吉林长春外五县·期末)人参是名贵的中药材，利用植物组织培养技术可实现人参的快速繁殖，流程如图1所示。人参皂苷是人参的主要活性成分，科研人员诱导人参根与胡萝卜根细胞进行细胞融合并产生愈伤组织，通过植物细胞培养以提高人参皂苷的产量，流程如图2所示。回答下列问题： (1)图1中，接种的植物组织细胞主要是分生区细胞，选择该类细胞的优点是_____。愈伤组织是已经分化的细胞经过脱分化转变成未分化细胞进而形成的_____。过程③和④的实质是____，植物激素中______的浓度和比例等都会影响植物的发育方向。 (2)制备图2中的a和b需要的酶是____，a和b融合完成的标志是_____。图2中将细胞c培养至图1中的_____（填结构名称）即可。 (3)利用图1中的培养方法不仅可以达到快速繁殖的目的，还能进行作物脱毒培养。作物脱毒培养一般采取茎尖作为培养材料，原因是_____。 地 城 考点02 动物细胞工程 一、单选题 1．(24-25高二下·吉林吉林永吉实验高级中学等校·期末)研究小组准备对某种动物的正常肝细胞进行培养。下列叙述正确的是（　　） A．可用胃蛋白酶处理肝组织以制备肝细胞悬液 B．该细胞在原代培养时通常会出现接触抑制现象 C．为保证细胞培养所需的无毒环境，需添加大量抗生素 D．恒温培养时CO2浓度维持在5%左右主要是为了促进细胞呼吸 2．(24-25高二下·吉林白山五校·期末)如图为实验小鼠皮肤组织进行细胞培养的过程，下列叙述中正确的是（　　） A．乙过程对皮肤组织可用胃蛋白酶处理 B．丙过程为原代培养，遗传物质一定不变 C．丁过程中某些细胞可能会无限增殖 D．动物细胞培养体现了动物细胞的全能性 3．(24-25高二下·吉林长春外五县·期末)青光眼是一种以视网膜神经节细胞（RGC）死亡为特征的不可逆性致盲眼病。研究表明间充质干细胞（MSC）在视网膜神经损伤修复中发挥重要作用，可以抑制视神经细胞凋亡，促进其修复和再生。下列叙述正确的是（　　） A．MSC分裂、分化过程中，基因的种类发生了变化 B．培养干细胞过程中，需要密封培养瓶瓶口以防污染 C．诱导MSC产生RGC，有望恢复失明青光眼患者的视力 D．培养干细胞所用的试剂和器具均需要进行高压蒸汽灭菌 4．(24-25高二下·吉林长春外五县·期末)抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．ADC的制备涉及动物细胞融合和动物细胞培养技术 B．ADC中的抗体主要发挥治疗效应以杀伤肿瘤细胞 C．ADC进入肿瘤细胞的过程体现了细胞膜的流动性 D．与化疗相比，使用ADC治疗癌症具有毒副作用小的优点 5．(24-25高二下·吉林长春东北师范大学附属中学·期末)犬疱疹病毒可引起犬类传染病。gD蛋白是犬疱疹病毒囊膜的重要组成部分，可诱导机体产生免疫应答。研究人员利用转基因技术制备gD蛋白，又以gD蛋白为抗原制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，主要技术路线如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，融合前细胞甲需通过原代培养扩大细胞数量 B．可使用选择培养基进行第1次筛选，仅有杂交瘤细胞能在其上生长增殖 C．通过克隆化培养和抗体检测进行第2次筛选，获得分泌所需抗体的杂交瘤细胞 D．筛选出的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔扩大培养后，可从其腹水中收集单克隆抗体 6．(24-25高二下·吉林“BEST合作体”·期末)猪体内隐藏的病毒少，是人类器官移植的优质供体。为防止免疫排斥，科研人员培育了用于器官移植的基因编辑猪，具体流程如图所示。下列叙述不正确的是（    ） A．CMAH基因和β4GalNT2基因可能是抗原决定基因 B．从1号收集的卵母细胞需在体外培养到MII期再进行去核处理 C．可用电刺激、Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚 D．胚胎移植前需用激素对3号进行同期发情和超数排卵处理 7．(24-25高二下·吉林普通高中友好学校联合体·期末)“白雪公主”草莓被誉为“水果皇后”，具有广阔的市场前景和较高的经济价值。草莓是无性繁殖的植物，感染病毒后容易传染给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。如图是育种工作者选育高品质“白雪公主”草莓的过程。下列叙述正确的是（    ） 草莓→外植体→无病毒草莓苗 A．获得外植体时需要用纤维素酶和果胶酶处理草莓植株 B．培育无病毒草莓苗时不用控制培养基中植物激素的比例 C．选用茎尖做外植体是因为其含病毒极少甚至不含病毒 D．常需要用95%的酒精对愈伤组织消毒后再诱导其再分化 8．(24-25高二下·吉林普通高中友好学校联合体·期末)下图是利用牛的乳腺细胞生产人体血清白蛋白的操作流程，其中细胞①已导入人血清白蛋白基因。相关叙述不正确的是（    ） A．细胞①的培养液中需要加入胃蛋白酶 B．“卵母细胞”应在体外培养到MII期 C．图示“细胞②→早期胚胎”过程在体外完成 D．该技术与试管牛培育的主要原理不同 9．(24-25高二下·吉林友好学校第79届期末联考·期末)2020年12月24日，青岛农业大学的赵明辉团队研究的克隆猫“平安”降生。“平安”的获得是从野生森林猫的皮肤上取一小块皮肤，用一只在宠物医院做绝育手术的中华田园猫的卵子作为受体，通过细胞核置换和人工激活，制作出多枚体细胞克隆胚胎。将克隆胚胎移植到受体母猫后，经过62天孕育得到的。经鉴定，“平安”与受体母猫无任何亲缘关系。用猫克隆技术和基因编辑技术可以大量生产携带特定疾病的个体，供医学研究和药物开发所使用。下列说法错误的是（    ） A．从中华田园猫的卵巢中获取的卵子应在体外培养到减数第二次分裂的中期 B．对野生森林猫的皮肤组织用胰蛋白酶处理后进行扩大培养获得更多的核供体细胞 C．用乙醇、蛋白酶合成抑制剂等物质激活重组胚胎，使其完成细胞分裂和发育进程 D．对受体中华田园猫进行同期发情和免疫抑制处理，保证移入的桑葚胚或囊胚在其子宫内存活 10．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)下图是某科研团队通过小鼠体细胞核移植技术获得可供研究和疾病治疗的ES细胞流程图。下列叙述错误的是（    ） A．可用紫外线短时照射或梯度离心法去除小鼠卵母细胞的细胞核 B．激活重构胚的方法有电刺激、蛋白酶合成抑制剂、乙醇和Ca2+载体 C．ES细胞和成体干细胞均具有组织特异性，只能分化成特定的组织或器官 D．囊胚DNA来源鉴定时可从囊胚的滋养层细胞中提取DNA样本 11．(24-25高二下·黑龙江龙东十校联盟·期末)为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，抗CD14单克隆抗体的制备流程如图所示： 下列有关叙述错误的是（　　） A．步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射CD14蛋白和抗CD14抗体 B．步骤②所用的SP2/0细胞能在体外无限增殖 C．④检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体 D．步骤⑥从小鼠腹水中提取到大量的抗CD14抗体 12．(24-25高二下·黑龙江齐齐哈尔·期末)下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说法正确的是（    ） A．步骤①和⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞 B．经步骤②诱导融合后的细胞都能分泌TREM2抗体又能无限增殖 C．步骤③和④的培养孔中均含有TREM2抗体，依据的原理是抗原与抗体特异性结合 D．TREM2单克隆抗体具有准确识别抗原的细微差异、又可无限增殖的特点 13．(24-25高二下·黑龙江齐齐哈尔·期末)下图是利用核移植来克隆高产奶牛的大致流程示意图。下列相关叙述错误的是（    ） A．激活重构胚的目的是使其完成分裂和发育进程 B．图中过程①常用显微操作法去除细胞中的纺锤体—染色体的复合物 C．图中过程③是将供体细胞整个注入去核卵母细胞中 D．体外培养至 MⅡ期的卵母细胞要先经过获能处理才能用于后续操作 二、多选题 14．(24-25高二下·黑龙江大庆萨尔图区大庆实验中学·期末)HAT选择培养基可以筛选出融合成功的杂交瘤细胞，研究人员将两株不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞。该细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生具有CD3和CD87结合位点的双特异性抗体，如图所示。CD87是一种癌细胞膜上的受体蛋白，研发针对CD87的抗体类药物能提高癌症的治愈率；CD3是所有T细胞表面均有表达的特异性抗原，该抗原被激活后，能极大促进T细胞的免疫效力。下列叙述错误的是（　　） A．培养双杂交瘤细胞的培养基中应加入水、无机盐、琼脂和血清等 B．双特异性单克隆抗体使T细胞更精准接触并杀伤癌细胞 C．将两株不同的杂交瘤细胞融合后，可利用HAT选择培养基筛选出双杂交瘤细胞 D．双杂交瘤细胞受到CD87和CD3两种抗原刺激后才能产生双特异性抗体 15．(24-25高二下·黑龙江龙东十校联盟·期末)在培养液中单独培养ES细胞时，ES细胞容易发生分化，科研人员设计如下实验解决此类问题。图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的示意图，图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞(ES细胞)的示意图。 有关说法正确的是（　　） A．图一所示，制备细胞悬液时，常用胃蛋白酶来消化剪碎的组织块 B．当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂 C．ES细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织器官中 D．结合图二可推知MEF细胞可抑制ES细胞分化 16．(24-25高二下·黑龙江牡丹江第二高级中学·期末)抗体——药物偶联物（ADC）作为一种新兴的抗癌治疗方法，近年来在生物医药领域引起了广泛关注。ADC通过将强效的抗癌药物与特异性抗体连接在一起，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列叙述不正确的是（    ） A．ADC中的抗体可通过杂交瘤技术大量制备 B．制备单克隆抗体涉及的技术有动物细胞融合、动物细胞核移植 C．ADC中的抗体主要是发挥治疗作用 D．ADC利用单克隆抗体的特异性杀伤力诱导肿瘤细胞凋亡 17．(24-25高二下·黑龙江哈尔滨·期末)HCG是女性怀孕后滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。抗HCG单克隆抗体可用于早早孕的诊断，图示是制备流程。下列叙述错误的是（    ） A．过程①的处理可以利用灭活的病毒诱导动物细胞融合 B．过程②的处理稀释，需要稀释至每孔最多1个细胞 C．96孔板中的细胞均为B淋巴细胞和鼠瘤细胞的融合细胞 D．图中细胞集落c可用于扩大培养生产抗HCG单克隆抗体 18．(24-25高二下·吉林白山五校·期末)青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。青蒿素的作用方式主要是干扰表膜线粒体的功能，使疟原虫迅速形成自噬泡，并不断排出虫体外，导致疟原虫损失大量胞浆而死亡。为了快速检测青蒿素，科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，其基本操作过程如图。下列相关叙述中正确的是（　　） A．过程①注射相应抗原后立即从小鼠脾脏中提取细胞甲 B．过程②诱导细胞融合，可以利用聚乙二醇作介导 C．过程③④的筛选方法不同，细胞丙的类型多于细胞丁 D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖 19．(24-25高二下·吉林白山抚松县第一中学·月考)干眼症是由多种因素导致的以眼睛干涩为主要症状的泪腺分泌障碍性眼病。科学家将Oct4，Sox2、c-Myc和Klf4等基因导入已分化的患者体细胞，诱导出类似胚胎干细胞（ES细胞）的多能干细胞（iPS细胞），进而培养获得眼结膜组织，可分泌泪液成分“黏液素”，有望治疗干眼症。下列相关说法正确的是（    ） A．由于泪腺功能受损，内环境中的泪液分泌不足，会导致干眼症 B．iPS细胞与ES细胞相比，其优点之一是可以在不需要人类胚胎的情况下获得 C．iPS细胞可不断自我更新并具有发育为多种细胞的潜能 D．iPS细胞中仅有Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc基因能够转录、翻译 三、解答题 20．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)双特异性抗体（Bispecific Antibody，BsAb）是一种人工设计的抗体，能够同时结合两种不同的抗原或同一抗原的两个不同表位，从而实现“双靶向”功能，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题。 (1)图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是________。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是________。 (2)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行________和抗体检测，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，其产生的单克隆抗体的优点是____________。 (3)④步骤取一定稀释倍数的杂交瘤细胞悬液加入多孔板中，适宜条件下培养后，利用___________原理进行抗体阳性检测。图2方框内需要经过_______次筛选，才能获取单克隆杂交一杂交瘤细胞。 (4)单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外培养时，需在培养液中提供细胞所需的各种营养物质，此外，通常还需要加入________等天然成分。进行细胞培养时，需提供的气体环境是_________。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为细胞密度过大、______和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。 (5)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_______。 21．(24-25高二下·辽宁大连·期末)猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰以及胎盘发育异常，导致克隆成功率较低。我国科学家采用一定的技术手段对克隆胚胎进行处理，提高了克隆成功率，并在2024年获得了首个活到成年的克隆猴。操作流程如图所示，请分析回答下列问题： 注：杂种雌猴由食蟹猴（♀）与恒河猴（♂）杂交产生 (1)培养杂种雌猴的成纤维细胞时，通常将细胞置于含有_____的混合气体的CO2培养箱中进行培养，其中CO2的主要作用是______。 (2)囊胚a的内细胞团能发育形成_____，囊胚b的滋养层将发育为_____。 (3)成纤维细胞应注入去核的食蟹猴_____期卵母细胞，去核的实质是去除_____，去核的常用方法是_____。囊胚b是通过体外受精技术获得的胚胎，判断卵细胞受精的标志通常是______。 22．(24-25高二下·辽宁大连·期末)双特异性抗体是含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体，目前已在白血病等癌症的治疗中崭露头角。科研人员尝试构建PSMA×CD28双特异性抗体（简称“PC双抗”），其制备的部分流程如图1。图2为其结构及作用机理示意图，其中PSMA是癌细胞表面的抗原，CD28是T细胞表面的受体。回答下列问题。 (1)图1中“物质X”是指______，获取小鼠脾脏，用______酶进行处理，分离出B淋巴细胞。 (2)骨髓瘤细胞在进行传代培养前，______（填“需要”或“不需要”）用（1）中的酶处理。细胞在CO₂培养箱中进行培养，其中CO₂的作用是______ (3)与诱导原生质体融合相比，诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合所特有的方法是______。融合后，经初筛得到的多种杂交瘤细胞还需进行______，方可获得杂交瘤细胞A或B。 (4)将步骤（3）中获得的两种杂交瘤细胞再次进行诱导融合，筛选出杂交瘤细胞A×B．该细胞能够表达两种L链和两种H链，并产生多种抗体。根据图2所示，从蛋白质结构的角度分析，其产生多种抗体的原因是______。最终，需经过进一步筛选才能获得具有特定功能的PC双抗。 地 城 考点03 胚胎工程及其应用 一、单选题 1．(24-25高二下·黑龙江绥化肇东第四中学校·期末)下图表示哺乳动物胚胎早期发育过程的某个阶段，下列叙述正确的是（    ） A．图中①将来发育成胎儿的各种组织 B．图中③表示透明带，胚胎从其中伸展出来的过程叫作卵裂 C．该胚胎均等分割后移植给受体，生出的后代毛色等性状一定相同 D．胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得 2．(24-25高二下·黑龙江齐齐哈尔·期末)下列有关生物技术相关操作的描述，正确的是（    ） A．植物体细胞杂交过程中，灭活的病毒可以诱导原生质体融合 B．动物细胞融合过程中只发生细胞膜融合而没有核膜的融合 C．在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，并对其取样做DNA分析，进行性别鉴定 D．在进行动物细胞的传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集 3．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)胚胎工程技术的应用为优良牲畜的大量繁殖提供了有效的解决办法，如奶牛活体采卵—体外胚胎生产（OPU-IVP）技术，该技术流程如下图所示。已知良种公牛Y染色体上有一段雄性特异的高度重复序列（SRY），依据该重复序列设计引物，建立了用于奶牛胚胎性别鉴定的PCR体系（SRY-PCR）。下列叙述正确的是（    ） A．一般用外源促性腺激素进行超数排卵处理，获得更多的成熟的卵子 B．体外受精后，在透明带和卵细胞膜间观察到一个极体说明受精成功 C．若对桑葚胚进行分割提高胚胎利用率，应注意将其内细胞团均等分割 D．选择SRY-PCR检测结果为阳性的胚胎进行移植可获得雌性良种奶牛 4．(24-25高二下·吉林长春长春汽车经济技术开发区第三中学·期末)下图是胚胎发育过程中某阶段示意图，下列有关叙述错误的是（    ） A．图中②将来发育成胎膜和胎盘 B．高等哺乳动物胚胎发育过程中，细胞分化始于桑葚胚期，终止于生命结束 C．图中③可发育成胎儿的各种组织 D．胚胎从①中伸展出来的过程发生于囊胚期 5．(24-25高二下·吉林长春外五县·期末)体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，正确的是（　　） A．精子触及卵细胞膜的瞬间，内细胞团发生生理反应，防止多精子入卵 B．对胚胎进行移植时，需将胚胎移植到同种的、遗传性状优良的雌性体内 C．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 D．对优良供体母牛进行人工授精，收集胚胎后即可移植到受体母牛体内进行繁殖 6．(24-25高二下·吉林长春农安县第十中学·期末)科研人员以精子为载体，将外源基因导入受体细胞获得转基因牛的过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．刚采集到的卵母细胞和精子需要立即进行受精作用，防止两者的生理功能降低 B．早期胚胎应培养至原肠胚时期再导入受体母牛子宫 C．应对受体母牛进行同期发情处理并注射免疫抑制剂，以提高移植胚胎的成活率 D．获得的转基因牛体内不含有受体母牛的遗传物质 7．(24-25高二下·吉林长春第五中学·期末)如图为培育体细胞克隆猴的流程。据图分析，下列叙述错误的是（　　） A．将成纤维细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是利于细胞融合 B．图中克隆猴的细胞质基因来自猴A和猴 B C．组蛋白的甲基化和乙酰化不利于重构胚完成细胞分裂和发育过程 D．体细胞克隆猴的成功便于建立某些疾病模型和药物筛选 8．(24-25高二下·吉林吉林第十二中学·期中)动物个体发育包括胚胎发育和胚后发育两个阶段。卵生（如鱼、鸟）动物的胚胎发育在母体外进行，而胎生动物（如人）的胚胎发育在体内进行。下图是人胚胎早期发育过程图。下列相关叙述错误的是（    ） A．卵生动物的出生率比胎生动物出生率高，是对环境的一种适应 B．图中从D到E的变化说明不同的细胞分裂速度有差异 C．结构E中的1、3发育结果的不同是基因选择性表达的结果 D．进行胚胎分割时可以选择结构E时期，并对2进行均等分割 9．(24-25高二下·辽宁重点中学协作校·期末)科学家经过多年对辽宁绒山羊体外胚胎生产技术的研究总结，形成了如图所示的操作流程。下列叙述正确的是（　　） A．经过离心处理后的精子可以更好的接受获能液中的能量用于受精作用 B．胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 C．经体外胚胎培养检查合格的胚胎，移植后便不需再进行检查 D．外源促性腺激素诱发卵巢排出的次级卵母细胞可直接受精 10．(24-25高二下·辽宁丹东·期末)下列关于动物细胞工程的叙述正确的是（    ） A．造血干细胞、神经干细胞和诱导多能干细胞均属于胚胎干细胞 B．将供体细胞注入去核卵细胞的目的是促进其完成细胞分裂和发育进程 C．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 D．进行动物细胞培养时培养基中应加入动物激素，以促进其发育成个体 11．(24-25高二下·辽宁县域重点高中·期末)科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞能增殖分化为多种组织细胞，用于某些疾病的治疗。下列有关叙述正确的是（　　） A．小鼠的成纤维细胞是一种胚胎干细胞 B．造血干细胞分化程度高于iPS细胞，且有一定组织特异性 C．iPS细胞分化产生的组织细胞的基因、蛋白质均相同 D．获得iPS细胞的过程中，细胞的遗传物质一定不变 12．(24-25高二下·内蒙古赤峰·期末)胚胎工程是一项具有广泛应用前景和深远意义的生物技术，如图表示胚胎工程的部分流程。下列叙述错误的是（　　） A．培养早期胚胎时，需要向培养液中添加血清等天然成分 B．与精子需要获能不同，卵母细胞排出后即可进行①过程 C．为了减少对胚胎的影响③过程可取滋养层细胞进行检测 D．④在分割囊胚阶段的胚胎时要注意将内细胞团均等分割 二、多选题 13．(24-25高二下·吉林长春长春汽车经济技术开发区第三中学·期末)下图表示三亲婴儿的培养过程，下列相关说法错误的是（    ） A．三亲婴儿细胞中的染色体不仅仅来自甲和丙 B．该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作 C．图示方法可避免携带有线粒体致病基因的甲产下患该病的子代 D．核移植时可将乙的卵母细胞在体外培养至MI中期 14．(24-25高二下·辽宁大连·期末)2025年3月，我国科学家成功将基因编辑猪的肾脏植入终末期肾病患者体内，这一举措成为亚洲首例活体异种肾移植案例，具体技术流程见下图。下列叙述正确的是（    ） A．培养步骤①获得的体细胞时，常在培养基中加入动物血清 B．步骤②的目的主要是去除引发免疫排斥的关键抗原 C．步骤③需利用体细胞核移植技术构建重构胚并将其激活 D．步骤④应对代孕母体进行超数排卵和同期发情处理 15．(24-25高二下·辽宁重点高中联合体·期末)为探究治疗性克隆对阿尔茨海默病的治疗效果，科研人员以阿尔茨海默病模型鼠为实验对象进行如下操作，下列叙述或推测正确的是（　　） A．只有过程①②体现了动物细胞核的全能性 B．过程①前对鼠成纤维细胞可用胰蛋白酶处理使其分散 C．过程③到⑤均有基因的选择性表达发生 D．移植后的模型鼠自身免疫系统可能不会排斥植入的神经细胞 三、解答题 16．(24-25高二下·辽宁重点中学协作校·期末)“人造精子”是一种可替代精子使卵细胞“受精”的单倍体胚胎干细胞。该技术不仅为动物模型的获得提供了新手段，同时也为动物生殖、遗传与发育调控机制研究提供了新思路。下图为科研人员利用胚胎工程技术，通过两种方式获得重组细胞，进而培育出某种动物“人造精子”的流程。回答下列问题 (1)方法一中，可以利用________方法获得更多卵细胞，以保证后续操作的成功。在受精过程中，________和________是阻止多精子入卵的两道屏障。通过观察到________，作为受精的标志。接下来需要在合子形成前，及时去除________（结构），是产生单倍体胚胎干细胞、继而培育“人造精子”的关键。 (2)方法二中，卵母细胞去核最常用的方法是________，而去除的“核”其实是________。 (3)目前构建的单倍体胚胎干细胞系，均为性染色体为X的细胞系，暂时无法获得性染色体为Y的细胞系。从X、Y染色体基因差异角度推测其可能原因是________。 (4)培育出的单倍体胚胎干细胞系由于属于贴壁细胞，传代培养收集细胞的操作过程是________。 17．(24-25高二下·广东韶关·期末)我国研究者首次在猪的体内成功培养出了含有人体细胞的中期肾脏（中肾），为解决供体器官短缺这一世界难题提供了新的方向。他们通过基因编辑技术敲除猪成纤维细胞中的肾脏发育关键基因SIX1和SALL1，再采用体细胞核移植技术获得猪早期胚胎，并将患者自身改造后的iPS细胞注射到猪早期胚胎中，形成嵌合胚胎，进而在代孕母猪体内培育出人源化中肾，操作流程如图所示。 回答下列问题： (1)图中步骤①可以采用______技术对卵母细胞去核，步骤⑥中嵌合胚胎通常培养到______阶段再移植入代孕母猪体内，所得人源化中肾细胞的基因型是______（填“相同”或“不同”）的。 (2)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对猪成纤维细胞DNA进行处理，由向导RNA定向引导Cas9蛋白与目的基因结合，Cas9蛋白对目的基因进行精准切割，使______键断裂，从而敲除猪成纤维细胞中SIX1和SALL1基因，该操作的目的是______。 (3)该项技术经临床试验后，猪体内可能无法形成完整中肾或者出现中肾在猪体内无法存活，推测原因分别是______。 (4)上述研究是通过在动物身上“种植”出可供移植的人体器官，以期解决供体器官短缺的问题。你是否认同这种解决方案，并说出理由______（理由答出一点即可）。 18．(24-25高二下·河南郑州中牟县中牟县第一高级中学·月考)骆驼被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中单峰骆驼曾经分布于阿拉伯半岛，濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝（只生活在栽培、圈养条件下即认为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养）。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。请根据所学知识回答下列问题： (1)胚胎工程中一般注射_____处理A使其超数排卵。①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有_____，受精的标志是_____。 (2)过程③之后需要将获得的重构胚激活，使其在适宜的培养液中培养至_____阶段进行胚胎移植，欲获得更多的胚胎可以对囊胚进行_____操作，操作过程需要特别注意的问题是必须将_____。 (3)胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础为受体对外来胚胎基本上不发生_____。 (4)与F相比，E更具有多样性，其原因是E的生殖方式为_____，其亲代在进行减数分裂过程中会发生基因重组。若要胚胎移植前对E进行性别鉴定应选_____细胞，避免对胚胎造成影响。 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题02 细胞工程 3大模块高频考点概览 考点01 植物细胞工程及其应用 考点02 动物细胞工程 考点03 胚胎工程及其应用 地 城 考点01 植物细胞工程及其应用 一、单选题 1．(24-25高二下·黑龙江大庆萨尔图区大庆东风中学·期末)许多植物病毒的衣壳蛋白和酶系统在高温（35~45°C）下会发生变性。在通过植物组织培养生产切花菊脱毒苗的过程中，常取高温处理后的切花菊茎尖分生区为外植体。下列叙述错误的是（    ） A．高温处理后的外植体接种前不需再进行消毒处理 B．高温处理的主要目的是使组织中的病毒失去活性 C．选取茎尖分生区为外植体是因为其中病毒含量低 D．再分化过程中生芽等阶段需在有光的条件下进行 【答案】A 【详解】A、即使经过高温处理，外植体表面仍可能存在微生物污染，接种前仍需进行常规表面消毒（如酒精、次氯酸钠处理），否则易引发污染，A错误； B、高温处理通过使病毒衣壳蛋白和酶变性，导致病毒失活，B正确； C、茎尖分生区细胞分裂旺盛，病毒难以大量积累，因此病毒含量低，C正确； D、再分化阶段，芽的形成需要光照以调节植物激素的作用，D正确。 2．(24-25高二下·黑龙江龙东十校联盟·期末)铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱，在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示。 下列有关叙述错误的是（　　） A．新生营养芽细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs，常用作外植体 B．生物碱一般在特定的组织或器官，并在一定的环境条件上产生 C．培养基中常常添加脱落酸（ABA）促进PLBs的生长，提高生物碱含量 D．与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长起始快，快速生长时间较长 【答案】C 【详解】A、新生营养芽细胞分化程度低，细胞的全能性较高，容易诱导形成PLBs，常用作外植体，A正确； B、生物碱属于次生代谢物，一般在特定的组织或器官，并在一定的环境和时间条件下产生，B正确； C、 脱落酸（ABA）一般会抑制细胞的分裂和生长，而植物组织培养中通常添加生长素和细胞分裂素等植物激素来促进 PLBs 的生长，C错误； D、由图可知与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长起始快，快速生长时间较长，PLBs产量较高，D正确。 3．(24-25高二下·黑龙江大庆萨尔图区大庆实验中学·期末)利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述错误的是（　　） A．细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成 B．培养基先分装到锥形瓶，封口后用高压蒸汽灭菌法灭菌 C．芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体 D．紫杉醇也能通过细胞产物的工厂化生产来获取 【答案】C 【分析】植物组织培养的条件：（1）细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；（2）一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、细胞分裂素和生长素的比例调控细胞分化方向，比例适中时促进愈伤组织形成，A正确； B、培养基需先分装至容器后再灭菌，高压蒸汽灭菌法适用于耐高温的培养基灭菌，B正确； C、芽原基细胞虽已分化，但离体后仍可通过脱分化形成愈伤组织，因此可用作外植体，C错误； D、紫杉醇属于细胞次级代谢产物，可通过大规模培养愈伤组织实现工厂化生产，D正确。 4．(24-25高二下·黑龙江齐齐哈尔·期末)研究人员利用植物细胞培养技术，在离体条件下大量获得鱼腥草细胞中的萜类化合物，该物质可用于治疗过敏性荨麻疹。下列说法正确的是（    ） A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B．细胞产物的工厂化生产是为了提高单个细胞中萜类物质的含量 C．次生代谢物萜类物质是鱼腥草生命活动必需的营养物质 D．该技术不占用耕地，但受季节、天气等的限制 【答案】A 【详解】A、植物细胞培养技术可通过离体培养大量获得细胞内的次生代谢产物（如萜类化合物），这些产物可能因结构复杂或合成条件苛刻而难以通过化学合成途径获得，A正确； B、工厂化生产的目的是通过大规模细胞培养增加细胞数目以提高总产量，而非提高单个细胞中产物的含量，B错误； C、次生代谢物（如萜类）并非植物生命活动所必需，其通常与植物防御、信息传递等功能相关，C错误； D、植物细胞培养在人工控制的生物反应器中进行，无需耕地且不受季节、天气限制，D错误。 5．(23-24高二下·黑龙江黑河·期末)地黄为多年生草本植物，含有地黄素、强心苷等多种药用成分，具有清热凉血、解毒等功效。利用植物细胞培养技术工厂化生产地黄素的基本流程如下：接种外植体→诱导形成愈伤组织→悬浮振荡培养→生物反应器中培养→分离、提纯。下列叙述正确的是（　　） A．外植体需先后用次氯酸钠溶液和酒精进行灭菌 B．诱导形成愈伤组织需要一定的营养条件和适宜的光照 C．振荡培养的目的之一是增加培养液的溶氧量，促进细胞呼吸 D．该工厂化生产的目的是大幅提高单个细胞中地黄素、强心苷等的合成量 【答案】C 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、接种用的外植体需先后用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒，A错误； B、诱导形成愈伤组织的培养基中需添加一定的营养和激素，不需要光照，B错误； C、振荡培养的目的是增加培养液的溶氧量，从而促进细胞的有氧呼吸，C正确； D、该工厂化生产通过增加细胞数目提高地黄素合成量，而不是提高单个细胞中地黄素的合成量，D错误。 6．(23-24高二下·黑龙江黑河·期末)水母雪莲是我国的一种名贵药材，主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水母雪莲生长缓慢，长期的掠夺性采挖导致该药材资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水母雪莲细胞合成黄酮的工程技术研究，结果如表所示。下列叙述错误的是（　　） 转速（r/min） 55 65 75 85 相对生长速率 0.21 0.25 0.26 0.25 细胞干重（g/L） 7.5 9.7 11.4 9.5 黄酮产量（g/L） 0.2 0.27 0.32 0.25 A．黄酮产量与细胞干重呈正相关 B．黄酮是水母雪莲细胞生存和生长所必需的 C．氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的 D．转速为75r/min时既利于细胞分裂，又利于黄酮的积累 【答案】B 【分析】分析表格，随着转速升高，细胞干重增加，黄酮产量最多。 【详解】A．从图中看出，黄酮产量随着细胞干重增加而增加，所以黄酮产量与细胞干重呈正相关，A正确； B．黄酮属于次生 代谢产物，并非细胞生存和生长所必需，B错误； C．氧气参与有氧呼吸，为细胞生长、分裂和代谢提供能量，所以氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的，C正确； D．75r/min时相对生长速率、细胞干重和黄酮产量均最高，所以转速为75r/min时既利于细胞分裂，又利于黄酮的积累，D正确； 7．(23-24高二下·黑龙江黑河·期末)CMV 是危害烟草的主要病毒，CMV 侵染烟草后，发病的叶片会褪绿变成黄色。为筛选抗 CMV的烟草突变株，科研小组进行的实验流程如图所示。下列说法正确的是（    ） A．烟草幼苗茎尖病毒极少，直接取其进行组织培养可得到抗 CMV 植株 B．若发病叶片中出现绿色区域，取该区域进行组织培养可能得到抗CMV 植株 C．选取的叶片组织需先进行灭菌处理，再经过脱分化和再分化培养成抗 CMV 植株 D．接种CMV起到了选择作用，因此经组织培养后得到的植株无需再进行抗CMV 鉴定 【答案】B 【分析】物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A 、烟草幼苗茎尖病毒极少，但不能直接确定其就是抗 CMV 的，直接取其进行组织培养不一定能得到抗 CMV 植株，A 错误； B、若发病叶片中出现绿色区域，说明可能存在对 CMV 有抗性的细胞，取该区域进行组织培养有可能得到抗 CMV 植株，B 正确； C 、叶片组织不能先进行灭菌处理，这样会杀死细胞，应该先进行脱分化形成愈伤组织，再进行再分化培养成抗 CMV 植株，C 错误； D、 接种 CMV 起到了选择作用，但经组织培养后得到的植株仍需再进行抗 CMV 鉴定来确保其抗性，D 错误。 8．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（    ） A．①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B．②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C．3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 D．百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 【答案】D 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、在脱分化过程中，1号培养基中的愈伤组织是排列不规则的薄壁组织团块，A错误； B、愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变，但基因重组发生在减数分裂过程中，而愈伤组织细胞的分化过程是有丝分裂，所以不会发生基因重组，B错误。 C、3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值应该小于1，C错误； D、百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此可以作为该研究中的外植体，D正确； 9．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)紫杉醇是一种从红豆杉树皮中提取的生物活性物质，目前已在临床中广泛应用于乳腺癌等疾病的治疗。植物细胞工程是生产紫杉醇的关键技术手段，为选育高产细胞系，某研究小组以南方红豆杉的不同外植体为材料进行悬浮培养实验，其结果如图所示。下列叙述不正确的是（    ） A．紫杉醇属于植物的次生代谢物，其产量低，应选择高产细胞进行培养 B．利用植物细胞工程技术生产紫杉醇时需要培养得到完整植株 C．实验结果表明，应选择茎段来源的红豆杉细胞，培养到5-6代提取紫杉醇 D．进行培养时，培养基中需要加入生长素、细胞分裂素 【答案】B 【详解】A、紫杉醇是植物次生代谢物（植物生长发育非必需，多有特殊生理活性），从红豆杉树皮提取产量低，通过植物细胞工程选高产细胞培养可提高产量，A正确； B、植物细胞工程生产紫杉醇，利用细胞悬浮培养增殖并积累产物，无需培养成完整植株（培养成植株是植物组织培养用于快速繁殖等情况），B错误； C、通过对图1和图2的数据分析，应选择茎段来源的红豆杉细胞，培养到5-6代提取紫杉醇，C正确； D、植物细胞悬浮培养需配制培养基，添加生长素、细胞分裂素等植物激素调节细胞分裂、分化，D正确。 10．(24-25高二下·辽宁丹东·期末)研究者欲利用原生质体融合技术，实现三白草和鱼腥草有效成分的工厂化生产。下列叙述正确的是（　　） A．过程①常使用纤维素酶和果胶酶，应在无菌水中进行，以防止杂菌污染 B．过程②可使用聚乙二醇以诱导三白草原生质体和鱼腥草原生质体的融合 C．过程③经过脱分化、再分化形成的愈伤组织是呈不定形的薄壁组织团块 D．过程④需要调节培养基中生长素和细胞分裂素的比例，诱导生芽和生根 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离， 实现远缘杂交育种培育植物新品种等方面展示出独特的优势。 【详解】A、用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁的过程应在等渗溶液中进行，以免细胞渗透吸水或失水过多，A错误； B、诱导植物原生质体融合可使用聚乙二醇，B正确； C、过程③经过脱分化即可形成愈伤组织，不存在再分化，C错误； D、过程④是提取代谢产物，并未培育成完整植株，不需要诱导生芽和生根，D错误。 11．(24-25高二下·辽宁丹东·期末)植物甲抗旱、抗病能力强，植物乙结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞的技术 B．过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C．杂种细胞需要再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 D．植物丙的细胞中具有来自植物甲和植物乙的两个细胞核 【答案】C 【详解】A、植物体细胞杂交是将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，再把杂种细胞培育成新植物体的技术，该项缺少 “培育成新植物体” 环节，A错误； B、过程②为原生质体的融合，常用PEG诱导原生质体融合，灭活的病毒可诱导动物细胞融合，不能用于植物细胞融合，B错误； C、杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，因此融合的原生质体再生出细胞壁后才能诱导形成愈伤组织，C正确； D、植物体细胞杂交过程中，融合的原生质体（含甲、乙细胞核 ）会进行核融合，形成一个含有甲和乙遗传物质的细胞核，植物丙细胞中是一个融合后的细胞核，不是两个细胞核，D错误。 12．(24-25高二下·辽宁丹东·期末)辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域，辣椒素的获得途径如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．若要培养脱毒苗，可用辣椒的茎尖经脱分化、再分化过程获得 B．过程①需先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体 C．过程②中生根与生芽所需的生长素与细胞分裂素的比例不同 D．辣椒素不是生物生长所必需的产物，属于细胞的次生代谢物 【答案】B 【详解】A、培育脱毒苗时一般选用茎尖（或芽尖、根尖）作为外植体，依据是此处的病毒极少甚至没有，故若要培养脱毒苗，可用辣椒的茎尖经脱分化、再分化过程获得，A正确； B、过程①为脱分化过程，不需先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，B错误； C、诱导生根和生芽的培养基的主要区别在于生长素和细胞分裂素的比例不同，生长素比例高有利于生根，C正确； D、辣椒素不是生物生长所必需的产物，属于细胞的次生代谢物，D正确。 13．(24-25高二下·辽宁重点高中联合体·期末)豆科牧草沙打旺具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，紫花苜蓿固氮能力较强，科研人员利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如下图，细胞在融合过程可能存在染色体丢失现象。下列有关叙述或推测正确的是（　　） A．过程Ⅰ需要放到低渗或者等渗的溶液中进行去壁 B．V过程中若生长素和细胞分裂素的比值小于1时，将有利于根的形成 C．植物体细胞杂交的原理有细胞膜的流动性和植物细胞培养 D．d细胞的染色体数可能少于a细胞与b细胞染色体数之和 【答案】D 【详解】A、过程Ⅰ不能放到低渗的溶液中，因为去壁后的原生质体容易吸水胀破，A错误； B、V过程中若生长素和细胞分裂素的比值小于1，将有利于芽的形成，若生长素和细胞分裂素的比值高于1，将有利于根的形成，B错误； C、植物体细胞杂交的原理有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，而不是细胞培养，C错误； D、细胞在融合过程发如果发生染色体丢失，则d细胞（杂交细胞）的染色体数少于a细胞与b细胞染色体数之和，D正确。 二、多选题 14．(24-25高二下·辽宁大连·期末)狼爪瓦松是一种具有观赏价值的二倍体野生花卉，其细胞中的黄酮类化合物可入药。某科研小组利用植物细胞工程等技术手段，进行狼爪瓦松的扩大培养，具体过程见下图（其中数字序号代表相应的处理过程）。下列叙述正确的是（    ） A．过程①前需要用酒精对外植体进行灭菌 B．过程③需在生长素/细胞分裂素比值高的培养基中诱导生芽 C．植株丙与植株甲、乙属于同一物种，但遗传信息不同 D．过程⑤利用愈伤组织分裂能力强的特点进行植物细胞培养 【答案】CD 【详解】A、过程①前需要用70%酒精和次氯酸钠对植株甲进行消毒，以保证外植体不被污染， A错误； B、生长素/细胞分裂素的值高时有利于生根，该值低时有利于生芽，过程③需在生长素/细胞分裂素比值低的培养基中诱导生芽，B错误； C、植株丙经历了诱变处理，基因发生了突变，遗传物质与甲植株不同；植株乙是通过植物组织培养过程获得，属于无性繁殖，基因型不变，植株乙和植株甲细胞核遗传物质相同；，因此可知植株丙与植株甲、乙遗传信息不同，但属于同一物种，C正确； D、利用植物细胞培养进行细胞产物的工厂化生产可以获得目标产 物，过程⑥利用愈伤组织分裂能力强的特点进行细胞培养可大量获得黄酮类化合物，D正确。 15．(24-25高二下·辽宁五校联考·期末)番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞悬浮技术培养胡萝卜细胞来获取，实验流程和培养装置如图。下列有关叙述正确的是（　　） A．悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团 B．通过加料口来保证培养液中营养物质处于较高浓度 C．充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理 D．增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度 【答案】ACD 【详解】A、过程②是将愈伤组织分散成单个细胞或较小的细胞团，有利于悬浮培养时细胞增殖，A正确； B、加料口的作用是补充培养液中的营养物质，但并不是要保证培养液中营养物质处于较高浓度，培养液中营养物质浓度过高，可能会导致细胞失水，影响细胞的正常生长，B错误； C、充气口增设无菌过滤器，可防止杂菌污染，加料口加入原料要进行灭菌处理，这样才能保证整个培养过程不受杂菌干扰，维持细胞培养的无菌环境，C正确； D、细胞培养需要适宜的温度条件，增设温度监测和控制设备可以实时监测和调节装置内的温度，维持装置适宜温度，有利于细胞的正常生长和代谢，D正确。 16．(24-25高二下·吉林吉林永吉实验高级中学等校·期末)如图所示为利用植物体细胞杂交技术培育杂种植株的流程图。下列叙述正确的是（　　） A．制备A、B原生质体时需使用纤维素酶和果胶酶 B．融合的原生质体应当具有红色、绿色两种荧光标记 C．过程②中细胞内活动较旺盛的结构是溶酶体和线粒体 D．该过程依据的原理有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 【答案】ABD 【详解】A、去壁过程，常用酶解法，制备A、B原生质体时需使用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁，A正确； B、A原生质体用红色荧光标记，B原生质体用绿色荧光标记，所以融合的原生质体应当具有红色、绿色两种荧光标记，B正确； C、过程②中需要再生细胞壁，所以代谢比较旺盛的细胞结构是高尔基体和线粒体，C错误； D、该过程是植物体细胞杂交过程，涉及细胞的融合和植物组织培养技术，所以该过程依据的原理有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，D正确。 17．(24-25高二下·吉林“BEST合作体”·期末)藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述错误的是（    ） A．组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生定向突变 B．过程①中外植体依次使用次氯酸钠和70%酒精溶液进行消毒 C．过程③④所用的培养基中添加的植物激素的种类和比例都相同 D．筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分 【答案】ABCD 【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，主要包括脱分化和再分化两个步骤。 【详解】A、植物组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生突变，突变是不定向的，A错误； B、过程①为外植体消毒，外植体依次使用70%酒精溶液和次氯酸钠进行消毒，B错误； C、③④过程添加的植物激素种类相同，但浓度和比例不同，C错误； D、筛选出目标突变株后可利用植物细胞培养进行细胞产物的工厂化生产，培养生产药用成分，D错误。 18．(24-25高二下·内蒙古巴彦淖尔·期末)为培育耐盐高产大豆新品种，利用滩涂耐盐大豆和普通高产大豆进行体细胞杂交，过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．①过程需要用纤维素酶和果胶酶处理，以去除细胞壁 B．②过程用病毒诱导等方法进行诱导，可得到3种两两融合的细胞 C．④过程为脱分化，形成的愈伤组织为不定形的薄壁组织团块 D．④⑤过程中，细胞分裂方式都是有丝分裂，且都需要光照 【答案】AC 【详解】A、细胞壁的成分是纤维素和果胶，所以①过程需要用纤维素酶和果胶酶处理，获得原生质体，A正确； B、植物细胞原生质体的融合不能采用病毒诱导法，B错误； C、④过程为脱分化，形成的愈伤组织为不定形的薄壁组织团块，C正确； D、④表示脱分化，⑤表示再分化，④⑤过程中，细胞分裂方式都是有丝分裂，④不需要光照，⑤需要光照，D错误。 三、解答题 19．(24-25高二下·内蒙古赤峰·期末)某科研团队尝试利用植物体细胞杂交技术培育抗盐碱的番茄新品种（普通番茄和野生耐盐碱番茄均是二倍体生物）。以下是他们的实验流程模式图。回答下列问题： (1)在进行体细胞杂交之前，去除细胞壁，获得原生质体。制备原生质体的过程不能在无菌水中进行，这是为了防止______。 (2)诱导②过程的化学法包括聚乙二醇融合法和______融合法等。④过程是______，即失去其特有的______，转变成未分化的细胞，进而形成愈伤组织后经再分化形成芽、根等器官。这两个过程中______是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的______等都会影响植物细胞的发育方向。 (3)上述过程中利用的技术除了植物体细胞杂交技术外，还有______技术。植株G是______倍体植物，获得植物体G的原理是______。植株G的优点是______。 【答案】(1)原生质体在无菌水中吸水膨胀甚至破裂 (2)高Ca2+-高pH 脱分化 形态结构和功能 生长素和细胞分裂素 浓度、比例 (3)植物组织培养 四 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 兼有双亲的优良性状 【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇，高Ca2+-高pH等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。 【详解】（1）若仅在无菌水中操作，由于缺乏适宜的渗透压环境，原生质体易吸水破裂，故制备原生质体的过程不能在无菌水中进行。 （2）诱导②过程的化学法包括PEG(聚乙二醇)法和高Ca2＋-高pH法等；④过程是失去其特有的形态结构和功能转变成未分化的细胞，形成愈伤组织的过程，表示脱分化；植物组织培养包括脱分化和再分化，这两个过程中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度和比例等都会影响植物细胞的发育方向。 （3）为使融合后的原生质体再生出完整植株，需借助植物组织培养技术；由于普通番茄和野生耐盐番茄均为二倍体，两者融合后形成的杂种是四倍体；原生质体融合过程依据细胞膜的流动性，融合后的细胞之所以能培养成完整植株，原理在于植物细胞具有全能性；该杂种植株既保留了普通番茄的优点，又具备野生番茄的耐盐碱特性。 20．(24-25高二下·黑龙江龙东十校联盟·期末)柠檬酸是一种应用广泛的有机酸，生产时需接种黑曲霉（一种真菌）孢子在密闭发酵罐中发酵。下图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程。请回答下列问题： (1)培养基配制完成后需要_______方法灭菌。过程A采用的接种方法是___________，其作用是_______________________________________。 (2)黑曲霉发酵前需要进行菌种的扩大培养，其目的是__________________；菌液接种到发酵罐前，菌液的孢子数可用____________在显微镜下测定。 (3)红薯粉主要作为黑曲霉的碳源，同时也为黑曲霉的生命活动提供____________。 黑曲霉在密闭发酵罐生产柠檬酸，发酵过程中通过____________增加发酵液的溶氧量；为保证发酵过程的连续性，并解决营养物质不足和有害物质增加的问题，生产中可采取的措施是______________________________________。 (4)黑曲霉多不耐高温，发酵获得柠檬酸的过程需大量冷却水控制温度，生产成本高。现利用原生质体融合技术获得耐高温高产黑曲霉，过程如图所示。 为了在温和条件下获得具有活力的原生质体，②、③通常用__________法去除细胞壁。然后可采用染色排除法方法测定该原生质体的活性，其原理利用了活细胞细胞膜的_________________________功能。 【答案】(1) 湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） 平板划线法 将单个微生物分散到固体培养基上，经培养得到单菌落 (2) 获得更多的菌种 血（球）细胞计数板 (3) 能量 不断搅拌 及时添加营养物质并定期排出有害物质 (4) 酶解 能够控制物质进出细胞 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】（1）培养基配制完成后需要湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）方法灭菌。依据图中信息，过程A采用的是平板划线法接种。采用平板划线法能将单个微生物分散到固体培养基上，经培养得到单菌落。 （2）黑曲霉发酵前需要进行菌种的扩大培养，其目的是获得更多的菌种；菌液的孢子数可用血细胞（球）计数板在显微镜下测定。 （3）红薯粉主要作为黑曲霉的碳源和能源，为黑曲霉的生物体组成的提供原料和生命活动提供能量。黑曲霉在密闭发酵罐生产柠檬酸，发酵过程中通过不断搅拌增加发酵液的溶氧量，搅拌还可以有利于培养液与菌体的充分接触；为保证发酵过程的连续性，并解决营养物质不足和有害物质增加的问题，生产中可采取及时添加营养物质并定期排出有害物质等措施。 （4）为了在温和条件下获得具有活力的原生质体，②、③通常用酶解法去除细胞壁。测定该原生质体的活性，可采用染色排除法方法，其原理利用了活细胞的细胞膜能够控制物质进出细胞功能。 21．(24-25高二下·吉林长春外五县·期末)人参是名贵的中药材，利用植物组织培养技术可实现人参的快速繁殖，流程如图1所示。人参皂苷是人参的主要活性成分，科研人员诱导人参根与胡萝卜根细胞进行细胞融合并产生愈伤组织，通过植物细胞培养以提高人参皂苷的产量，流程如图2所示。回答下列问题： (1)图1中，接种的植物组织细胞主要是分生区细胞，选择该类细胞的优点是_____。愈伤组织是已经分化的细胞经过脱分化转变成未分化细胞进而形成的_____。过程③和④的实质是____，植物激素中______的浓度和比例等都会影响植物的发育方向。 (2)制备图2中的a和b需要的酶是____，a和b融合完成的标志是_____。图2中将细胞c培养至图1中的_____（填结构名称）即可。 (3)利用图1中的培养方法不仅可以达到快速繁殖的目的，还能进行作物脱毒培养。作物脱毒培养一般采取茎尖作为培养材料，原因是_____。 【答案】(1) 分裂能力强，分化程度低，容易培养 高度液泡化、不定形的薄壁组织团块 基因的选择性表达 生长素、细胞分裂素 (2) 纤维素酶和果胶酶 再生出细胞壁 愈伤组织 (3)茎尖处病毒极少甚至无病毒 【分析】植物组织培养技术是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞或原生质体进行培养，使其再生形成完整植株或生产有用物质的技术。植物体细胞杂交技术是将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的杂种植株的技术。 【详解】（1）图1中，接种的植物组织细胞主要是分生区细胞，分生区细胞分裂能力强、分化程度低，全能性容易表达，所以选择分生区细胞作为接种的植物组织细胞。愈伤组织是已经分化的细胞经过脱分化转变成未分化细胞进而形成的高度液泡化、不定形的薄壁组织团块。过程③诱导生芽和过程④诱导生根属于再分化过程，其实质是基因的选择性表达。 植物激素中生长素和细胞分裂素的浓度和比例等都会影响植物的发育方向，例如生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织的形成；生长素比例高时，有利于根的分化；细胞分裂素比例高时，有利于芽的分化。    （2）图2中的a和b是原生质体，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，制备原生质体需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。a和b融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞壁。图2中将细胞c培养至图1中的愈伤组织即可，因为后续可从愈伤组织细胞中提取人参皂苷等细胞产物。 （3）  作物脱毒培养一般采取茎尖作为培养材料，原因是茎尖处病毒极少甚至无病毒。因为植物分生区附近（如茎尖）的病毒传播速度很慢，所以茎尖细胞一般不含病毒，用茎尖进行组织培养可以获得脱毒苗。 地 城 考点02 动物细胞工程 一、单选题 1．(24-25高二下·吉林吉林永吉实验高级中学等校·期末)研究小组准备对某种动物的正常肝细胞进行培养。下列叙述正确的是（　　） A．可用胃蛋白酶处理肝组织以制备肝细胞悬液 B．该细胞在原代培养时通常会出现接触抑制现象 C．为保证细胞培养所需的无毒环境，需添加大量抗生素 D．恒温培养时CO2浓度维持在5%左右主要是为了促进细胞呼吸 【答案】B 【详解】A、胃蛋白酶需要在酸性（pH≈1.5）环境下起作用，而动物细胞培养中常用胰蛋白酶（适宜pH为8.0左右）分解细胞间质蛋白以制备细胞悬液。胃蛋白酶在此条件下无法发挥作用，A错误； B、正常肝细胞在原代培养时贴壁生长，分裂增殖到相互接触时会停止分裂（接触抑制现象），这是正常细胞的特性，B正确； C、抗生素用于抑制细菌污染，但“大量”添加可能对细胞产生毒害作用，且无菌环境还需无菌操作技术、培养液灭菌等措施配合，C错误； D、动物细胞培养中5% CO₂的作用是维持培养液pH稳定（与NaHCO₃缓冲系统相关），而非促进细胞呼吸。细胞呼吸主要依赖氧气，D错误。 2．(24-25高二下·吉林白山五校·期末)如图为实验小鼠皮肤组织进行细胞培养的过程，下列叙述中正确的是（　　） A．乙过程对皮肤组织可用胃蛋白酶处理 B．丙过程为原代培养，遗传物质一定不变 C．丁过程中某些细胞可能会无限增殖 D．动物细胞培养体现了动物细胞的全能性 【答案】C 【详解】A、乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，A错误； B、丙过程属于原代培养，此过程的细胞大部分能保持正常的二倍体核型，由于突变具有随机性，有些细胞的遗传物质也可能发生改变，B错误； C、丁过程中某些细胞可能会因癌变而无限增殖，C正确； D、动物细胞培养没有发育成完成个体或各种细胞，不能体现动物细胞的全能性，D错误。 3．(24-25高二下·吉林长春外五县·期末)青光眼是一种以视网膜神经节细胞（RGC）死亡为特征的不可逆性致盲眼病。研究表明间充质干细胞（MSC）在视网膜神经损伤修复中发挥重要作用，可以抑制视神经细胞凋亡，促进其修复和再生。下列叙述正确的是（　　） A．MSC分裂、分化过程中，基因的种类发生了变化 B．培养干细胞过程中，需要密封培养瓶瓶口以防污染 C．诱导MSC产生RGC，有望恢复失明青光眼患者的视力 D．培养干细胞所用的试剂和器具均需要进行高压蒸汽灭菌 【答案】C 【分析】1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能发生稳定性差异的过程，其实质是基因的选择性表达。 2、动物和人体内仍保留着少数具有分裂和分化能力的细胞，这些细胞叫做干细胞。 3、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。 【详解】A、细胞分化的实质是基因的选择性表达，遗传物质（基因种类）未改变，因此MSC分裂、分化时基因种类不变，A错误； B、动物细胞培养需在CO₂培养箱中进行，密封瓶口会阻碍气体交换，且需保持无菌环境，通常采用松盖或专用培养装置，B错误； C、MSC具有分化潜能，诱导其分化为RGC可补充受损细胞，可能恢复视力，符合题干中MSC的作用描述，C正确； D、动物细胞培养的培养基含血清等成分，需用过滤灭菌，而器具可用高压灭菌，并非“均需”高压灭菌，D错误。 4．(24-25高二下·吉林长春外五县·期末)抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．ADC的制备涉及动物细胞融合和动物细胞培养技术 B．ADC中的抗体主要发挥治疗效应以杀伤肿瘤细胞 C．ADC进入肿瘤细胞的过程体现了细胞膜的流动性 D．与化疗相比，使用ADC治疗癌症具有毒副作用小的优点 【答案】B 【详解】A、单克隆抗体的制备过程需要用到动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，A正确； B、ADC中的抗体主要发挥靶向运输作用，通过特异性结合靶细胞表面的抗原，将连接的药物输送到靶细胞，药物发挥杀伤靶细胞的治疗效应，B错误； C、ADC通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，体现了细胞膜的流动性，C正确； D、与化疗相比，ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用，因此它在临床上具有靶点清楚、毒副作用小等优点，D正确。 5．(24-25高二下·吉林长春东北师范大学附属中学·期末)犬疱疹病毒可引起犬类传染病。gD蛋白是犬疱疹病毒囊膜的重要组成部分，可诱导机体产生免疫应答。研究人员利用转基因技术制备gD蛋白，又以gD蛋白为抗原制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，主要技术路线如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，融合前细胞甲需通过原代培养扩大细胞数量 B．可使用选择培养基进行第1次筛选，仅有杂交瘤细胞能在其上生长增殖 C．通过克隆化培养和抗体检测进行第2次筛选，获得分泌所需抗体的杂交瘤细胞 D．筛选出的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔扩大培养后，可从其腹水中收集单克隆抗体 【答案】A 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、动物细胞工程的基础是动物细胞培养，细胞甲是从注射了gD蛋白的小鼠体内获取的B淋巴细胞，融合前一般不需要通过原代培养扩大细胞数量，因为小鼠体内经过免疫后会产生足够数量的相应B淋巴细胞，A错误； B、在单克隆抗体制备过程中，第1次筛选可使用选择培养基，该培养基能抑制未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞的生长，仅有杂交瘤细胞能在其上生长增殖，B正确； C、通过克隆化培养和抗体检测进行第2次筛选，得到的杂交瘤细胞能分泌所需抗体，C正确； D、将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内扩大培养后，杂交瘤细胞在小鼠腹腔中大量增殖，可从其腹水中获得大量单克隆抗体，D正确。 6．(24-25高二下·吉林“BEST合作体”·期末)猪体内隐藏的病毒少，是人类器官移植的优质供体。为防止免疫排斥，科研人员培育了用于器官移植的基因编辑猪，具体流程如图所示。下列叙述不正确的是（    ） A．CMAH基因和β4GalNT2基因可能是抗原决定基因 B．从1号收集的卵母细胞需在体外培养到MII期再进行去核处理 C．可用电刺激、Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚 D．胚胎移植前需用激素对3号进行同期发情和超数排卵处理 【答案】D 【分析】动物细胞核移植技术的一般步骤：①采集卵母细胞，体外培育到MⅡ期，并进行去核操作；②将供体细胞注入去核的卵母细胞；③通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚；④用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程；⑤将胚胎移入受体（代孕母动物）体内，并发育成与供体遗传物质基本相同的个体。 【详解】A、由图可知，为防止免疫排斥，在取细胞核时需敲除CMAH基因和β4GalNT2基因，说明二者可能是抗原决定基因，A正确； B、从1号收集的卵母细胞需体外培养到MⅡ中期再利用显微操作进行去核处理，B正确； C、可用电刺激、Ca2+载体、乙醇或蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确； D、胚胎移植前需用孕激素对3号进行同期发情，需要进行超数排卵的是1号，D错误。 7．(24-25高二下·吉林普通高中友好学校联合体·期末)“白雪公主”草莓被誉为“水果皇后”，具有广阔的市场前景和较高的经济价值。草莓是无性繁殖的植物，感染病毒后容易传染给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。如图是育种工作者选育高品质“白雪公主”草莓的过程。下列叙述正确的是（    ） 草莓→外植体→无病毒草莓苗 A．获得外植体时需要用纤维素酶和果胶酶处理草莓植株 B．培育无病毒草莓苗时不用控制培养基中植物激素的比例 C．选用茎尖做外植体是因为其含病毒极少甚至不含病毒 D．常需要用95%的酒精对愈伤组织消毒后再诱导其再分化 【答案】C 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A．获得外植体时通常通过消毒处理（如酒精和次氯酸钠），而非使用纤维素酶和果胶酶，后者用于去除细胞壁制备原生质体，与题干中“外植体”的获取无关，A错误； B．植物组织培养中，生长素和细胞分裂素的比例直接影响细胞脱分化和再分化，培育无病毒苗需通过调整激素比例诱导形成植株，B错误； C．茎尖分生区细胞分裂旺盛，病毒难以在此大量积累，因此选用茎尖作为外植体可减少病毒携带，C正确； D．外植体需在接种前消毒，但愈伤组织培养过程处于无菌环境，无需再次用酒精消毒，D错误； 8．(24-25高二下·吉林普通高中友好学校联合体·期末)下图是利用牛的乳腺细胞生产人体血清白蛋白的操作流程，其中细胞①已导入人血清白蛋白基因。相关叙述不正确的是（    ） A．细胞①的培养液中需要加入胃蛋白酶 B．“卵母细胞”应在体外培养到MII期 C．图示“细胞②→早期胚胎”过程在体外完成 D．该技术与试管牛培育的主要原理不同 【答案】A 【详解】A、为了得到单个细胞，在细胞①的培养液中需要加入胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，A错误； B、在进行核移植时，获取的“卵母细胞”应在体外培养到减数第二次分裂中期（MII期）才能进行去核操作，B正确； C、图示“细胞②→早期胚胎”为体外培养胚胎的过程，该过程在体外完成，C正确； D、图示过程主要采用了核移植技术和胚胎移植技术（属于无性生殖），试管牛的培育主要采用了体外受精和胚胎移植技术（属于有性生殖），因此两者培育的主要原理不同，D正确。 9．(24-25高二下·吉林友好学校第79届期末联考·期末)2020年12月24日，青岛农业大学的赵明辉团队研究的克隆猫“平安”降生。“平安”的获得是从野生森林猫的皮肤上取一小块皮肤，用一只在宠物医院做绝育手术的中华田园猫的卵子作为受体，通过细胞核置换和人工激活，制作出多枚体细胞克隆胚胎。将克隆胚胎移植到受体母猫后，经过62天孕育得到的。经鉴定，“平安”与受体母猫无任何亲缘关系。用猫克隆技术和基因编辑技术可以大量生产携带特定疾病的个体，供医学研究和药物开发所使用。下列说法错误的是（    ） A．从中华田园猫的卵巢中获取的卵子应在体外培养到减数第二次分裂的中期 B．对野生森林猫的皮肤组织用胰蛋白酶处理后进行扩大培养获得更多的核供体细胞 C．用乙醇、蛋白酶合成抑制剂等物质激活重组胚胎，使其完成细胞分裂和发育进程 D．对受体中华田园猫进行同期发情和免疫抑制处理，保证移入的桑葚胚或囊胚在其子宫内存活 【答案】D 【详解】A、卵母细胞需在体外培养至减数第二次分裂中期（MII期）才能作为核移植的受体，此阶段细胞质成熟，适合接受供体核，A正确； B、胰蛋白酶可分解皮肤组织中的细胞间质，分散体细胞后进行体外扩增，为核移植提供足够供体细胞，B正确； C、乙醇可改变细胞膜通透性进而激活重组胚胎；蛋白酶合成抑制剂可能抑制某些酶活性，促使供体核重编程并启动分裂，此为核移植中常用激活手段，C正确； D、胚胎移植需对受体进行同期发情处理以同步子宫环境，但无需用免疫抑制剂处理，因子宫对外来胚胎不会产生免疫排斥作用，D错误。 10．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)下图是某科研团队通过小鼠体细胞核移植技术获得可供研究和疾病治疗的ES细胞流程图。下列叙述错误的是（    ） A．可用紫外线短时照射或梯度离心法去除小鼠卵母细胞的细胞核 B．激活重构胚的方法有电刺激、蛋白酶合成抑制剂、乙醇和Ca2+载体 C．ES细胞和成体干细胞均具有组织特异性，只能分化成特定的组织或器官 D．囊胚DNA来源鉴定时可从囊胚的滋养层细胞中提取DNA样本 【答案】C 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、去除小鼠卵母细胞的细胞核，可用紫外线短时间照射（破坏核结构 ）或梯度离心法（利用离心力使细胞核与细胞质分离 ），A正确； B、激活重构胚的常用方法有电刺激、乙醇处理、蛋白酶合成抑制剂处理、Ca2+载体处理等，以启动胚胎发育进程，B正确； C、ES 细胞（胚胎干细胞 ）具有发育全能性，可分化为各种组织和器官；而成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定组织或器官，C错误； D、囊胚包括滋养层细胞和内细胞团，滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，其DNA与内细胞团（ES细胞来源）一致，故可从滋养层细胞提取DNA进行囊胚DNA来源鉴定，D正确。 11．(24-25高二下·黑龙江龙东十校联盟·期末)为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，抗CD14单克隆抗体的制备流程如图所示： 下列有关叙述错误的是（　　） A．步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射CD14蛋白和抗CD14抗体 B．步骤②所用的SP2/0细胞能在体外无限增殖 C．④检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体 D．步骤⑥从小鼠腹水中提取到大量的抗CD14抗体 【答案】A 【详解】A、步骤①是注射特定抗原，针对本实验目的可知，要获得抗CD14单克隆抗体，故应该注射CD14蛋白，步骤⑤是将分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体，A错误； B、步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞，特点是能在体外无限增殖，B正确； C、因为形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，因此有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，C正确； D、从制备单克隆抗体的流程可知，将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔后，最终要从小鼠的腹水中提取抗CD14抗体，D正确。 12．(24-25高二下·黑龙江齐齐哈尔·期末)下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说法正确的是（    ） A．步骤①和⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞 B．经步骤②诱导融合后的细胞都能分泌TREM2抗体又能无限增殖 C．步骤③和④的培养孔中均含有TREM2抗体，依据的原理是抗原与抗体特异性结合 D．TREM2单克隆抗体具有准确识别抗原的细微差异、又可无限增殖的特点 【答案】A 【详解】A、步骤①给小鼠注射 TREM2 蛋白（抗原 ）进行免疫；步骤⑤注射抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞（进行体内培养 ），A正确； B、步骤②诱导融合后，有未融合细胞、同种细胞融合体、杂交瘤细胞，只有杂交瘤细胞能分泌抗体且无限增殖，若要筛选出能分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞需将杂交瘤细胞经过克隆化培养和抗体阳性检测，B错误； C、步骤③特定培养基筛选（淘汰未融合 / 同种融合细胞 ），无抗体；步骤④专一抗体检测（利用抗原 - 抗体特异性结合，孔中有 TREM2 抗体 ），依据的原理是抗原与抗体特异性结合，C错误； D、单克隆抗体能准确识别抗原细微差异，但无限增殖的是杂交瘤细胞，抗体本身不能增殖，D错误。 13．(24-25高二下·黑龙江齐齐哈尔·期末)下图是利用核移植来克隆高产奶牛的大致流程示意图。下列相关叙述错误的是（    ） A．激活重构胚的目的是使其完成分裂和发育进程 B．图中过程①常用显微操作法去除细胞中的纺锤体—染色体的复合物 C．图中过程③是将供体细胞整个注入去核卵母细胞中 D．体外培养至 MⅡ期的卵母细胞要先经过获能处理才能用于后续操作 【答案】D 【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。 【详解】A、激活重构胚的目的是使其完成分裂和发育进程，A正确； B、在体细胞核移植过程中，去核实质上是去除纺锤体—染色体复合物，图中过程①常用显微操作法去除纺锤体和染色体的复合物，B正确； C、为了方便操作，动物细胞核移植时是将供体细胞整个注入去核卵母细胞中，C正确； D、需要对精子进行获能处理，卵母细胞需要在体外培养至 MⅡ期，D错误。 二、多选题 14．(24-25高二下·黑龙江大庆萨尔图区大庆实验中学·期末)HAT选择培养基可以筛选出融合成功的杂交瘤细胞，研究人员将两株不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞。该细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生具有CD3和CD87结合位点的双特异性抗体，如图所示。CD87是一种癌细胞膜上的受体蛋白，研发针对CD87的抗体类药物能提高癌症的治愈率；CD3是所有T细胞表面均有表达的特异性抗原，该抗原被激活后，能极大促进T细胞的免疫效力。下列叙述错误的是（　　） A．培养双杂交瘤细胞的培养基中应加入水、无机盐、琼脂和血清等 B．双特异性单克隆抗体使T细胞更精准接触并杀伤癌细胞 C．将两株不同的杂交瘤细胞融合后，可利用HAT选择培养基筛选出双杂交瘤细胞 D．双杂交瘤细胞受到CD87和CD3两种抗原刺激后才能产生双特异性抗体 【答案】ACD 【详解】A、双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，说明是在液体培养基中培养，而琼脂是制作固体培养基的凝固剂，不需要加入，A错误； B、CD87是癌细胞膜上受体蛋白，CD3激活后能促进T细胞免疫效力，双特异性单克隆抗体一端与癌细胞上CD87结合，一端与T细胞上CD3结合，能使T细胞更精准接触并杀伤癌细胞，B正确； C、HAT选择培养基是用于筛选融合成功的杂交瘤细胞，而将两株不同杂交瘤细胞融合后，不能再用HAT选择培养基筛选双杂交瘤细胞，C错误； D、杂交瘤细胞无需抗原刺激就能产生单克隆抗体，双杂交瘤细胞也一样，并非受到CD87和CD3两种抗原刺激后才产生双特异性抗体，D错误。 15．(24-25高二下·黑龙江龙东十校联盟·期末)在培养液中单独培养ES细胞时，ES细胞容易发生分化，科研人员设计如下实验解决此类问题。图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的示意图，图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞(ES细胞)的示意图。 有关说法正确的是（　　） A．图一所示，制备细胞悬液时，常用胃蛋白酶来消化剪碎的组织块 B．当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂 C．ES细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织器官中 D．结合图二可推知MEF细胞可抑制ES细胞分化 【答案】BD 【详解】A、制备细胞悬液时，常用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等来消化剪碎的组织块，A错误； B、据图观察，当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂，这种现象叫做接触抑制，B正确； C、干细胞存在于早期培育、骨髓和脐带血等多种组织器官中，干细胞包括胚胎干细胞（ES细胞）和成体干细胞等，ES细胞存在于早期胚胎中，C错误； D、在培养液中单独培养ES细胞时，ES细胞容易发生分化，结合图二可推知MEF细胞可抑制ES细胞分化（图中只分裂，不分化状态），D正确。 16．(24-25高二下·黑龙江牡丹江第二高级中学·期末)抗体——药物偶联物（ADC）作为一种新兴的抗癌治疗方法，近年来在生物医药领域引起了广泛关注。ADC通过将强效的抗癌药物与特异性抗体连接在一起，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列叙述不正确的是（    ） A．ADC中的抗体可通过杂交瘤技术大量制备 B．制备单克隆抗体涉及的技术有动物细胞融合、动物细胞核移植 C．ADC中的抗体主要是发挥治疗作用 D．ADC利用单克隆抗体的特异性杀伤力诱导肿瘤细胞凋亡 【答案】BCD 【详解】A、利用杂交瘤技术将骨髓瘤细胞与已免疫的B淋巴细胞融合，获得杂交瘤细胞，进而生产单克隆抗体，ADC中的抗体可以是单克隆抗体，可通过杂交瘤技术大量制备，A正确； B、制备单克隆抗体涉及的技术有动物细胞融合、动物细胞培养，不涉及动物细胞核移植，B错误； C、ADC中的抗体主要起识别肿瘤细胞的作用，抗癌药物发挥治疗作用，C错误； D、ADC中的抗体主要发挥靶向运输作用，通过特异性结合靶细胞表面的抗原，将连接的抗癌药物输送到靶细胞，由抗癌药物诱导肿瘤细胞凋亡，单克隆抗体本身没有杀伤力，D错误。 17．(24-25高二下·黑龙江哈尔滨·期末)HCG是女性怀孕后滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。抗HCG单克隆抗体可用于早早孕的诊断，图示是制备流程。下列叙述错误的是（    ） A．过程①的处理可以利用灭活的病毒诱导动物细胞融合 B．过程②的处理稀释，需要稀释至每孔最多1个细胞 C．96孔板中的细胞均为B淋巴细胞和鼠瘤细胞的融合细胞 D．图中细胞集落c可用于扩大培养生产抗HCG单克隆抗体 【答案】CD 【分析】用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，培养骨髓瘤细胞，诱导两者融合，用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，只有融合的杂交瘤细胞才能生长；对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、过程①为诱导经免疫的B淋巴细胞与鼠瘤细胞融合，可利用灭活的病毒诱导法进行诱导融合，A正确； B、过程②的处理稀释，需要稀释至每孔最多1个细胞，以保证每孔中得到的子细胞都是一个杂交瘤细胞的增殖后代，B正确； C、96孔板中的细胞包括同种细胞的融合体（B淋巴细胞-B淋巴细胞、鼠瘤细胞-鼠瘤细胞）、未融合的细胞（B淋巴细胞、鼠瘤细胞）以及杂交瘤细胞（B淋巴细胞-鼠瘤细胞），经过②③过程的筛选，只有杂交瘤细胞能存活，C错误； D、由图可知，细胞集落a出现了阳性反应，说明其能产生抗HCG抗体，细胞集落b、c、d没有出现阳性反应，即不能产生抗HCG抗体，因此细胞集落c不可用于扩大培养生产抗HCG单克隆抗体，可将细胞集落a进行扩大培养，D错误。 18．(24-25高二下·吉林白山五校·期末)青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。青蒿素的作用方式主要是干扰表膜线粒体的功能，使疟原虫迅速形成自噬泡，并不断排出虫体外，导致疟原虫损失大量胞浆而死亡。为了快速检测青蒿素，科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，其基本操作过程如图。下列相关叙述中正确的是（　　） A．过程①注射相应抗原后立即从小鼠脾脏中提取细胞甲 B．过程②诱导细胞融合，可以利用聚乙二醇作介导 C．过程③④的筛选方法不同，细胞丙的类型多于细胞丁 D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖 【答案】BCD 【详解】A、 过程①注射相应抗原后，使机体产生免疫反应，使B细胞增殖分化形成具有免疫能力的B细胞后，才可以从小鼠脾脏中提取细胞甲，A错误； B、 过程②诱导细胞融合，可以利用物理方法（如电激）、化学方法（如聚乙二醇）或生物方法（如灭活的病毒）作介导，聚乙二醇能促进细胞融合，B正确； C、 过程③是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，过程④是用抗体检测和克隆化培养筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，筛选方法不同，细胞丙是经过过程③筛选出的杂交瘤细胞，其类型有多种（因为融合的情况多样），细胞丁是经过过程④进一步筛选出的能产生特定抗体的杂交瘤细胞，类型单一，所以细胞丙的类型多于细胞丁，C正确； D、 细胞丁是经过筛选得到的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞具有既能大量增殖又能产生特异性抗体的特点，所以过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖，D正确。 19．(24-25高二下·吉林白山抚松县第一中学·月考)干眼症是由多种因素导致的以眼睛干涩为主要症状的泪腺分泌障碍性眼病。科学家将Oct4，Sox2、c-Myc和Klf4等基因导入已分化的患者体细胞，诱导出类似胚胎干细胞（ES细胞）的多能干细胞（iPS细胞），进而培养获得眼结膜组织，可分泌泪液成分“黏液素”，有望治疗干眼症。下列相关说法正确的是（    ） A．由于泪腺功能受损，内环境中的泪液分泌不足，会导致干眼症 B．iPS细胞与ES细胞相比，其优点之一是可以在不需要人类胚胎的情况下获得 C．iPS细胞可不断自我更新并具有发育为多种细胞的潜能 D．iPS细胞中仅有Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc基因能够转录、翻译 【答案】BC 【分析】干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞等。胚胎干细胞(简称ES细胞)存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能；成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞，一般认为，成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。 【详解】A、内环境不包括泪腺分泌的泪液，A错误； B、胚胎干细胞来源于胚胎，iPS细胞是通过向患者体细胞中导入相关基因获得，iPS细胞与ES细胞相比，其优点之一是可以在不需要人类胚胎的情况下获得，B正确； C、iPS细胞类似于胚胎干细胞，可不断自我更新并具有发育为多种细胞的潜能性，C正确； D、iPS细胞中不仅有Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc基因能够转录、翻译，还有一些管家基因也能转录和翻译，如：呼吸酶基因，D错误。 三、解答题 20．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)双特异性抗体（Bispecific Antibody，BsAb）是一种人工设计的抗体，能够同时结合两种不同的抗原或同一抗原的两个不同表位，从而实现“双靶向”功能，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题。 (1)图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是________。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是________。 (2)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行________和抗体检测，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，其产生的单克隆抗体的优点是____________。 (3)④步骤取一定稀释倍数的杂交瘤细胞悬液加入多孔板中，适宜条件下培养后，利用___________原理进行抗体阳性检测。图2方框内需要经过_______次筛选，才能获取单克隆杂交一杂交瘤细胞。 (4)单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外培养时，需在培养液中提供细胞所需的各种营养物质，此外，通常还需要加入________等天然成分。进行细胞培养时，需提供的气体环境是_________。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为细胞密度过大、______和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。 (5)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_______。 【答案】(1)刺激小鼠产生特定抗体的B淋巴细胞 灭活病毒诱导法 (2)克隆化培养 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备 (3)抗原与抗体特异性结合 2（或两） (4)血清 95%空气和5%CO2 有害代谢产物积累 (5)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞 【分析】题图分析，双特异性抗体制备流程为，先给小鼠注射特定癌胚抗原使之发生免疫反应，然后获取已经免疫的B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；再把单克隆杂交瘤细胞与经注射长春碱后从小鼠中获得的免疫的B淋巴细胞再杂交，得到单克隆杂交—杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体。 【详解】（1）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠产生特定抗体的B淋巴细胞。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是灭活病毒诱导法，即灭活病毒诱导法是诱导动物细胞融合特有的方法。 （2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，其目的是获得能产生目标抗体的杂交瘤细胞，筛选出杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生特异性抗体，而后对其进行体外或体内培养，通过该过程获得的单克隆抗体的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备。 （3）④步骤取一定稀释倍数的杂交瘤细胞悬液加入多孔板中，适宜条件下培养后，利用抗原与抗体特异性结合的原理进行抗体阳性检测，进而筛选出能产生目标抗体的杂交瘤细胞。图2方框内需要经过2次筛选，先筛选得到对长春碱免疫的B淋巴细胞，后筛选出杂交—杂交瘤细胞，进而才能获取单克隆杂交一杂交瘤细胞。 （4）单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外培养时，需在培养液中提供细胞所需的各种营养物质，此外，通常还需要加入血清等天然成分，因为血清的加入弥补了对动物细胞所需营养研究不清楚的不足，进而保证了动物细胞培养对营养的需求。进行细胞培养时，需提供的气体环境是95%空气和5%CO2，其中二氧化碳的作用是维持培养液的pH，体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为细胞密度过大、有害代谢产物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养，即此时需要更换培养基。 （5） 双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，避免对正常细胞造成伤害，因而对人体的副作用更小，这体现了双特异性单克隆抗体在治疗疾病（运载药物）方面的用途。 21．(24-25高二下·辽宁大连·期末)猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰以及胎盘发育异常，导致克隆成功率较低。我国科学家采用一定的技术手段对克隆胚胎进行处理，提高了克隆成功率，并在2024年获得了首个活到成年的克隆猴。操作流程如图所示，请分析回答下列问题： 注：杂种雌猴由食蟹猴（♀）与恒河猴（♂）杂交产生 (1)培养杂种雌猴的成纤维细胞时，通常将细胞置于含有_____的混合气体的CO2培养箱中进行培养，其中CO2的主要作用是______。 (2)囊胚a的内细胞团能发育形成_____，囊胚b的滋养层将发育为_____。 (3)成纤维细胞应注入去核的食蟹猴_____期卵母细胞，去核的实质是去除_____，去核的常用方法是_____。囊胚b是通过体外受精技术获得的胚胎，判断卵细胞受精的标志通常是______。 22．(24-25高二下·辽宁大连·期末)双特异性抗体是含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体，目前已在白血病等癌症的治疗中崭露头角。科研人员尝试构建PSMA×CD28双特异性抗体（简称“PC双抗”），其制备的部分流程如图1。图2为其结构及作用机理示意图，其中PSMA是癌细胞表面的抗原，CD28是T细胞表面的受体。回答下列问题。 (1)图1中“物质X”是指______，获取小鼠脾脏，用______酶进行处理，分离出B淋巴细胞。 (2)骨髓瘤细胞在进行传代培养前，______（填“需要”或“不需要”）用（1）中的酶处理。细胞在CO₂培养箱中进行培养，其中CO₂的作用是______ (3)与诱导原生质体融合相比，诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合所特有的方法是______。融合后，经初筛得到的多种杂交瘤细胞还需进行______，方可获得杂交瘤细胞A或B。 (4)将步骤（3）中获得的两种杂交瘤细胞再次进行诱导融合，筛选出杂交瘤细胞A×B．该细胞能够表达两种L链和两种H链，并产生多种抗体。根据图2所示，从蛋白质结构的角度分析，其产生多种抗体的原因是______。最终，需经过进一步筛选才能获得具有特定功能的PC双抗。 【答案】(1) PSMA、CD28 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 (2) 不需要 维持培养液的pH (3) 灭活病毒诱导法 克隆化培养和抗体检测 (4)L链和H链随机结合，形成多种抗体 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再通过克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，因此图1中“物质X”是指PSMA、CD28，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，之后从小鼠脾中获取已经免疫的B淋巴细胞。 （2）骨髓瘤细胞在进行传代培养前不需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。细胞在CO₂培养箱中进行培养，其中CO₂的作用是维持培养液的pH。 （3）与诱导原生质体融合相比，诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合所特有的方法是灭活病毒诱导法。融合后，经初筛得到的多种杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测获得杂交瘤细胞A或B。 （4）由于L链和H链随机结合，形成多种抗体，需经过进一步筛选才能获得具有特定功能的PC双抗。 地 城 考点03 胚胎工程及其应用 一、单选题 1．(24-25高二下·黑龙江绥化肇东第四中学校·期末)下图表示哺乳动物胚胎早期发育过程的某个阶段，下列叙述正确的是（    ） A．图中①将来发育成胎儿的各种组织 B．图中③表示透明带，胚胎从其中伸展出来的过程叫作卵裂 C．该胚胎均等分割后移植给受体，生出的后代毛色等性状一定相同 D．胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得 【答案】D 【详解】A、图中①为滋养层细胞，将来可发育成胎盘和胎膜，A错误； B、图中③表示透明带，胚胎从其中伸展出来的过程叫作孵化，B错误； C、囊胚均等分割后的后代理论上基因相同，但毛色等性状可能受表观遗传或环境因素影响，不一定完全相同，C错误； D、胚胎干细胞是一类未分化细胞，来源于早期胚胎或原始性腺，即胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得，D正确。 2．(24-25高二下·黑龙江齐齐哈尔·期末)下列有关生物技术相关操作的描述，正确的是（    ） A．植物体细胞杂交过程中，灭活的病毒可以诱导原生质体融合 B．动物细胞融合过程中只发生细胞膜融合而没有核膜的融合 C．在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，并对其取样做DNA分析，进行性别鉴定 D．在进行动物细胞的传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集 【答案】D 【分析】诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和 灭活病毒诱导法。 【详解】A、植物体细胞杂交中，诱导原生质体融合常用物理法（如离心）或化学法（聚乙二醇），而灭活病毒是动物细胞融合的诱导方法，A错误； B、动物细胞融合过程中，细胞膜融合后形成双核或多核的杂交细胞，随后细胞核也会融合，因此核膜融合是后续步骤，B错误； C、囊胚分割时需均等分割内细胞团以保证胚胎正常发育，但性别鉴定应取滋养层细胞进行DNA分析，而非内细胞团（会破坏胚胎），C错误； D、悬浮培养的动物细胞（如某些癌细胞系）无需酶处理，可直接通过离心法收集以进行传代培养，D正确。 3．(24-25高二下·吉林长春朝阳区长春外国语学校·期末)胚胎工程技术的应用为优良牲畜的大量繁殖提供了有效的解决办法，如奶牛活体采卵—体外胚胎生产（OPU-IVP）技术，该技术流程如下图所示。已知良种公牛Y染色体上有一段雄性特异的高度重复序列（SRY），依据该重复序列设计引物，建立了用于奶牛胚胎性别鉴定的PCR体系（SRY-PCR）。下列叙述正确的是（    ） A．一般用外源促性腺激素进行超数排卵处理，获得更多的成熟的卵子 B．体外受精后，在透明带和卵细胞膜间观察到一个极体说明受精成功 C．若对桑葚胚进行分割提高胚胎利用率，应注意将其内细胞团均等分割 D．选择SRY-PCR检测结果为阳性的胚胎进行移植可获得雌性良种奶牛 【答案】A 【分析】体外受精主要包括：卵母细胞的 采集和培养、精子的采集和获能、受精。 胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。目前以二分胚的分割和移植效率最高。 【详解】A、用促性腺激素对供体进行超数排卵处理，获得更多的成熟的卵子，经受精后可得到早期胚胎。A正确； B、体外受精后，当在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体或者雌、雄原核时，说明卵子已经完成了受精，B错误； C、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，C错误； D、取滋养层细胞进行SRY-PCR.结果为阳性的胚胎说明其含有Y染色体，为雄性，为多获得可以生产牛奶的奶牛应该选择结果为阴性的胚胎进行移植，D错误。 4．(24-25高二下·吉林长春长春汽车经济技术开发区第三中学·期末)下图是胚胎发育过程中某阶段示意图，下列有关叙述错误的是（    ） A．图中②将来发育成胎膜和胎盘 B．高等哺乳动物胚胎发育过程中，细胞分化始于桑葚胚期，终止于生命结束 C．图中③可发育成胎儿的各种组织 D．胚胎从①中伸展出来的过程发生于囊胚期 【答案】B 【分析】胚胎进一步发育，细胞逐渐分化。聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而沿透明带内壁扩展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘。随着胚胎的进一步发育，胚胎的内部出现了含有液体的腔—囊胚腔，这个时期的胚胎叫作囊胚。囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化。孵化非常重要，如果不能正常孵化，胚胎就无法继续发育。 【详解】A、图中②为滋养层细胞，将来发育成胎膜和胎盘，A正确； B、高等哺乳动物胚胎发育过程中，细胞分化始于囊胚期，终止于生命结束，B错误； C、图中③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，C正确； D、胚胎从①中伸展出来的过程称为孵化，发生于囊胚期，D正确。 5．(24-25高二下·吉林长春外五县·期末)体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，正确的是（　　） A．精子触及卵细胞膜的瞬间，内细胞团发生生理反应，防止多精子入卵 B．对胚胎进行移植时，需将胚胎移植到同种的、遗传性状优良的雌性体内 C．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 D．对优良供体母牛进行人工授精，收集胚胎后即可移植到受体母牛体内进行繁殖 【答案】C 【分析】体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。 【详解】A、内细胞团是囊胚阶段的结构，防止多精子入卵的生理反应包括透明带反应（精子触及卵细胞膜前）和卵细胞膜反应（精子入卵后），与内细胞团无关，A错误； B、胚胎移植的受体只需与供体生理状态相同，无需遗传性状优良，因胚胎遗传信息来自供体，B错误； C、“设计试管婴儿”需体外受精形成胚胎，移植前进行遗传学诊断（如基因检测），故涉及体外受精、胚胎移植和遗传学诊断技术，C正确； D、人工授精后形成的受精卵需体外培养至桑椹胚或囊胚阶段才能移植，不能直接收集胚胎移植，D错误。 6．(24-25高二下·吉林长春农安县第十中学·期末)科研人员以精子为载体，将外源基因导入受体细胞获得转基因牛的过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．刚采集到的卵母细胞和精子需要立即进行受精作用，防止两者的生理功能降低 B．早期胚胎应培养至原肠胚时期再导入受体母牛子宫 C．应对受体母牛进行同期发情处理并注射免疫抑制剂，以提高移植胚胎的成活率 D．获得的转基因牛体内不含有受体母牛的遗传物质 【答案】D 【详解】A、采集的卵母细胞须培养至MⅡ期，精子需要经过获能培养才能参与受精作用，A错误； B、早期胚胎应培养至桑葚胚或囊胚时期再导入受体母牛子宫内，B错误； C、由于受体子宫对外来的胚胎不会产生免疫排斥，因此在胚胎移植前不需要给受体注射免疫抑制剂，C错误； D、转基因牛的遗传物质来自供体提供的精子和卵细胞以及导入的外源基因，受体母牛没有提供遗传物质，因此获得的转基因牛体内不含有受体母牛的遗传物质，D正确。 7．(24-25高二下·吉林长春第五中学·期末)如图为培育体细胞克隆猴的流程。据图分析，下列叙述错误的是（　　） A．将成纤维细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是利于细胞融合 B．图中克隆猴的细胞质基因来自猴A和猴 B C．组蛋白的甲基化和乙酰化不利于重构胚完成细胞分裂和发育过程 D．体细胞克隆猴的成功便于建立某些疾病模型和药物筛选 【答案】C 【详解】A、灭活的仙台病毒具有促融的作用，因此，将成纤维细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是利于细胞融合，A正确； B、据图可知，体细胞克隆猴是由去核卵母细胞和成纤维细胞融合而成的重构胚发育而来的，故体细胞克隆猴的线粒体DNA来自去核卵母细胞和成纤维细胞，即图中克隆猴的细胞质基因来自猴A和猴B，B正确； C、结合题图，重构胚在加入Kdm4d的mRNA和TSA后，发育成克隆猴，而Kdm4d的mRNA表达产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白去乙酰化酶抑制剂，抑制组蛋白去乙酰化酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚完成细胞分裂和发育过程，C错误； D、克隆特定疾病模型的动物，可为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助，因此体细胞克隆猴的成功便于建立某些疾病模型和药物筛选，D正确。 8．(24-25高二下·吉林吉林第十二中学·期中)动物个体发育包括胚胎发育和胚后发育两个阶段。卵生（如鱼、鸟）动物的胚胎发育在母体外进行，而胎生动物（如人）的胚胎发育在体内进行。下图是人胚胎早期发育过程图。下列相关叙述错误的是（    ） A．卵生动物的出生率比胎生动物出生率高，是对环境的一种适应 B．图中从D到E的变化说明不同的细胞分裂速度有差异 C．结构E中的1、3发育结果的不同是基因选择性表达的结果 D．进行胚胎分割时可以选择结构E时期，并对2进行均等分割 【答案】D 【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚 胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或 多胎的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因 此胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一。 【详解】A、胎生动物的胚胎发育是在母体内进行的，受外界环境的影响较小，胚胎发育成功率较高，但出生率相对较低；卵生动物由于胚的发育过程是在外界环境中进行，受外界环境影响比较大，胚胎发育成功率较低，但出生率相对较高，可见卵生动物的出生率比胎生动物出生率高，是对环境的一种适应，A正确； B、卵裂的速度主要取决于受精卵中卵黄物质的含量和分布。一般情况下，卵黄含量低的一极 （动物极） 的卵裂速度高于卵黄含量高的一极 （植物极）；题图中D表示桑椹胚，E表示囊胚；图中从D到E的变化说明不同的细胞分裂速度有差异，B正确； C、题图结构E中的1表示内细胞团，3表示滋养层细胞，结构E中的1、3发育结果的不同是基因选择性表达的结果，C正确； D、进行胚胎分割时可以选择结构E时期，并对1（内细胞团）进行均等分割，D错误。 9．(24-25高二下·辽宁重点中学协作校·期末)科学家经过多年对辽宁绒山羊体外胚胎生产技术的研究总结，形成了如图所示的操作流程。下列叙述正确的是（　　） A．经过离心处理后的精子可以更好的接受获能液中的能量用于受精作用 B．胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 C．经体外胚胎培养检查合格的胚胎，移植后便不需再进行检查 D．外源促性腺激素诱发卵巢排出的次级卵母细胞可直接受精 【答案】B 【详解】A、在体外受精中，精子需经过获能处理才能具备受精能力（如培养法或化学诱导法）。离心处理的主要作用是分离精子与精浆等杂质，提高精子浓度和纯度，A错误； B、胚胎移植是将体外培养的早期胚胎移植到同种生理状态相同的雌性动物子宫内。其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，B正确； C、经体外胚胎培养检查合格的胚胎移植后，仍需对受体母畜进行妊娠检查（如通过超声等手段确认胚胎是否着床），以及后续的发育监测，以确保胚胎正常发育，C错误； D、外源促性腺激素可诱发卵巢超数排卵，排出的卵母细胞处于次级卵母细胞阶段，但需在体外培养至减数第二次分裂中期（MⅡ 期） 才具备受精能力，不能直接受精，D错误。 10．(24-25高二下·辽宁丹东·期末)下列关于动物细胞工程的叙述正确的是（    ） A．造血干细胞、神经干细胞和诱导多能干细胞均属于胚胎干细胞 B．将供体细胞注入去核卵细胞的目的是促进其完成细胞分裂和发育进程 C．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 D．进行动物细胞培养时培养基中应加入动物激素，以促进其发育成个体 【答案】C 【详解】A、造血干细胞和神经干细胞属于成体干细胞，只能分化为特定类型细胞；诱导多能干细胞（iPS细胞）是由体细胞重编程而来，并非胚胎干细胞，A错误； B、将供体细胞核（而非整个细胞）注入去核卵细胞，目的是利用卵母细胞的细胞质成分激活供体核的全能性，而非直接促进分裂和发育，B错误； C、体细胞分化程度高，核移植后重编程难度大；胚胎细胞核分化程度低，更易成功，C正确； D、动物细胞培养的目的是使细胞增殖，培养基中加入血清等提供营养，但无法发育成个体，且无需动物激素促进发育，D错误。 11．(24-25高二下·辽宁县域重点高中·期末)科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞能增殖分化为多种组织细胞，用于某些疾病的治疗。下列有关叙述正确的是（　　） A．小鼠的成纤维细胞是一种胚胎干细胞 B．造血干细胞分化程度高于iPS细胞，且有一定组织特异性 C．iPS细胞分化产生的组织细胞的基因、蛋白质均相同 D．获得iPS细胞的过程中，细胞的遗传物质一定不变 【答案】B 【详解】A、胚胎干细胞是从胚胎中分离提取的细胞，而成纤维细胞是结缔组织中最常见的细胞，不属于胚胎干细胞，A错误； B、iPS细胞是经体外诱导获得的，具有多能性，能增殖分化为多种组织细胞，而造血干细胞只能分化形成各种血细胞，具有一定组织特异性，说明造血干细胞分化程度高于iPS细胞，B正确； C、iPS细胞分化产生不同组织细胞的过程是基因选择性表达的过程，虽然细胞中的基因是相同的（因为都来自同一个iPS细胞），但由于基因的选择性表达，不同组织细胞中合成的蛋白质不完全相同，C错误； D、制备iPS细胞的方法包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成 iPS细胞。可见，获得iPS细胞的过程中，可能导致细胞中遗传物质发生改变，D错误。 12．(24-25高二下·内蒙古赤峰·期末)胚胎工程是一项具有广泛应用前景和深远意义的生物技术，如图表示胚胎工程的部分流程。下列叙述错误的是（　　） A．培养早期胚胎时，需要向培养液中添加血清等天然成分 B．与精子需要获能不同，卵母细胞排出后即可进行①过程 C．为了减少对胚胎的影响③过程可取滋养层细胞进行检测 D．④在分割囊胚阶段的胚胎时要注意将内细胞团均等分割 【答案】B 【详解】A、早期胚胎培养的培养液中除了一些无机盐和有机物外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等，A正确； B、卵细胞排出后需要培养到减数第二次分裂中期才能参与受精，B错误； C、滋养层可发育为胎盘和胎膜，内细胞团可发育为胎儿的各种组织，因此为了减少对胚胎的影响③过程可取滋养层细胞进行检测，C正确； D、④在分割囊胚阶段的胚胎时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，D正确。 二、多选题 13．(24-25高二下·吉林长春长春汽车经济技术开发区第三中学·期末)下图表示三亲婴儿的培养过程，下列相关说法错误的是（    ） A．三亲婴儿细胞中的染色体不仅仅来自甲和丙 B．该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作 C．图示方法可避免携带有线粒体致病基因的甲产下患该病的子代 D．核移植时可将乙的卵母细胞在体外培养至MI中期 【答案】AD 【详解】A、三亲婴儿的染色体（即核基因）仅来自母亲甲和父亲丙提供的细胞核，A错误； B、由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞培养、动物细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，B正确； C、根据图示可知卵母细胞的细胞质来自于捐献者乙，可避免母亲的线粒体遗传基因传递给后代，C正确； D、核移植时可将乙的卵母细胞在体外培养至MII期（减数第二次分裂中期），该时期卵母细胞核的位置靠近第一极体，可用微型吸管将之与细胞核一并吸出，D错误。 14．(24-25高二下·辽宁大连·期末)2025年3月，我国科学家成功将基因编辑猪的肾脏植入终末期肾病患者体内，这一举措成为亚洲首例活体异种肾移植案例，具体技术流程见下图。下列叙述正确的是（    ） A．培养步骤①获得的体细胞时，常在培养基中加入动物血清 B．步骤②的目的主要是去除引发免疫排斥的关键抗原 C．步骤③需利用体细胞核移植技术构建重构胚并将其激活 D．步骤④应对代孕母体进行超数排卵和同期发情处理 【答案】ABC 【详解】A、在动物细胞培养过程中，由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养时，通常需要在培养基中加入动物血清等天然成分，以保证细胞的正常增殖。所以步骤①获得的体细胞培养时，为保证细胞正常增殖，往往要加入动物血清，A正确； B、异种器官移植面临的主要问题之一是免疫排斥反应，猪细胞表面存在一些引发人免疫排斥的关键抗原。基因编辑的目标之一就是对这些关键抗原进行改造或消除，从而降低免疫排斥反应的发生，提高移植的成功率。所以步骤②基因编辑的目标之一是消除猪细胞表面引发人免疫排斥的关键抗原，B正确； C、构建用于异种器官移植的胚胎，需要利用体细胞核移植技术将供体体细胞的细胞核移植到去核卵细胞中，形成重组细胞；然后通过电融合等方法激活重组细胞使其分裂发育；最后进行早期胚胎培养，使其发育到一定阶段。所以步骤③需利用体细胞核移植技术构建重构胚并将其激活，C正确； D、为提高步骤④代孕的成功率，应对代孕母猪进行同期发情处理，使代孕母猪的子宫生理状态与供体胚胎相适应，为胚胎植入创造良好的条件。但不用对代孕母猪进行超数排卵处理，D错误。 15．(24-25高二下·辽宁重点高中联合体·期末)为探究治疗性克隆对阿尔茨海默病的治疗效果，科研人员以阿尔茨海默病模型鼠为实验对象进行如下操作，下列叙述或推测正确的是（　　） A．只有过程①②体现了动物细胞核的全能性 B．过程①前对鼠成纤维细胞可用胰蛋白酶处理使其分散 C．过程③到⑤均有基因的选择性表达发生 D．移植后的模型鼠自身免疫系统可能不会排斥植入的神经细胞 【答案】BCD 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，并使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 【详解】A、动物细胞核的全能性指已分化的细胞核具有发育成完整个体或各种细胞的潜能。从重组细胞发育到囊胚，再到胚胎干细胞，最终分化为神经细胞并移植到模型鼠体内，整个过程①~④体现了细胞核的全能性，A错误； B、在核移植（过程①）前，用胰蛋白酶处理鼠成纤维细胞，可以使其分散，便于后续的核移植操作，B正确； C、过程③从囊胚分离出胚胎干细胞，④诱导胚胎干细胞分化为神经细胞，⑤神经细胞在模型鼠体内发挥作用，这些过程中细胞的形态、结构和功能发生改变，都体现了基因的选择性表达，C正确； D、因为是利用模型鼠自身细胞进行的治疗性克隆，产生的神经细胞与模型鼠自身细胞的抗原性相似，所以移植后的模型鼠自身免疫系统可能不会排斥植入的神经细胞，D正确。 三、解答题 16．(24-25高二下·辽宁重点中学协作校·期末)“人造精子”是一种可替代精子使卵细胞“受精”的单倍体胚胎干细胞。该技术不仅为动物模型的获得提供了新手段，同时也为动物生殖、遗传与发育调控机制研究提供了新思路。下图为科研人员利用胚胎工程技术，通过两种方式获得重组细胞，进而培育出某种动物“人造精子”的流程。回答下列问题 (1)方法一中，可以利用________方法获得更多卵细胞，以保证后续操作的成功。在受精过程中，________和________是阻止多精子入卵的两道屏障。通过观察到________，作为受精的标志。接下来需要在合子形成前，及时去除________（结构），是产生单倍体胚胎干细胞、继而培育“人造精子”的关键。 (2)方法二中，卵母细胞去核最常用的方法是________，而去除的“核”其实是________。 (3)目前构建的单倍体胚胎干细胞系，均为性染色体为X的细胞系，暂时无法获得性染色体为Y的细胞系。从X、Y染色体基因差异角度推测其可能原因是________。 (4)培育出的单倍体胚胎干细胞系由于属于贴壁细胞，传代培养收集细胞的操作过程是________。 【答案】(1) 超数排卵（注射促性腺激素） 透明带反应 卵细胞膜反应 两个极体或雌、雄原核 雌原核 (2) 显微操作 染色体-纺锤体复合物 (3)X染色体上含有细胞生长、发育所需的关键基因，Y染色体缺少这些关键基因 (4)先用胰蛋白酶处理，使其分散成单个细胞后，再用离心法收集 【分析】题干以“人造精子”为背景，方法一是借助去除受精卵的雌原核的方法，制造一个带有精子核基因的细胞，以此制造“人造精子”；方法二是直接将精子注入去核卵母细胞，以此制造“人造精子”。 【详解】（1）利用注射外源促性腺激素的方法（即超数排卵）可以让雌性个体排除更多卵子，再该技术中足够数量的卵子可以保证实验材料重组，提高成功率。在正常受精过程中，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精子入卵的两道屏障。精子穿过卵细胞膜进入卵细胞后，卵细胞会完成后续的减数分裂，可以在细胞内看到形成的雌、雄原核，也可以在卵细胞膜和透明带的间隙看到两个极体，故根据这两个可观察的指标作为受精的标志。在题干信息中可了解，最终的目的是制备“人造精子”，其最终目的的实现需要制备一个仅含有雄性核基因的细胞，以此借助现代生物学技术产生可用于受精的“人造精子”，因此需要在方法一模式下，及时去除雌原核结构，避免其遗传物质干扰后续实验。 （2）卵母细胞的去核方法很多，但目前最常用的是显微操作去核；去核时，卵母细胞处于减数第二次分裂中期，此时解体的细胞核并未重建，因此去除的细胞核实际上是染色体和纺锤体复合物，以此达到去核即使去除卵母细胞核基因的真实目的。 （3）X、Y染色体从基因角度分析差异主要在X、Y染色体都有部分特有基因，根据材料给出的构建成功的都是含有X染色体的，Y染色体的都失败了，可以得出，X染色体的特有基因中含有细胞生长、分裂、分化必需的基因，Y染色体因缺乏这部分基因，从而导致细胞死亡。 （4）贴壁细胞的传代培养流程，应先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将贴壁的细胞与培养瓶壁分离，再借助离心方式将培养液与细胞分离，之后用培养液稀释分装即可。 17．(24-25高二下·广东韶关·期末)我国研究者首次在猪的体内成功培养出了含有人体细胞的中期肾脏（中肾），为解决供体器官短缺这一世界难题提供了新的方向。他们通过基因编辑技术敲除猪成纤维细胞中的肾脏发育关键基因SIX1和SALL1，再采用体细胞核移植技术获得猪早期胚胎，并将患者自身改造后的iPS细胞注射到猪早期胚胎中，形成嵌合胚胎，进而在代孕母猪体内培育出人源化中肾，操作流程如图所示。 回答下列问题： (1)图中步骤①可以采用______技术对卵母细胞去核，步骤⑥中嵌合胚胎通常培养到______阶段再移植入代孕母猪体内，所得人源化中肾细胞的基因型是______（填“相同”或“不同”）的。 (2)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对猪成纤维细胞DNA进行处理，由向导RNA定向引导Cas9蛋白与目的基因结合，Cas9蛋白对目的基因进行精准切割，使______键断裂，从而敲除猪成纤维细胞中SIX1和SALL1基因，该操作的目的是______。 (3)该项技术经临床试验后，猪体内可能无法形成完整中肾或者出现中肾在猪体内无法存活，推测原因分别是______。 (4)上述研究是通过在动物身上“种植”出可供移植的人体器官，以期解决供体器官短缺的问题。你是否认同这种解决方案，并说出理由______（理由答出一点即可）。 【答案】(1) 显微去核 桑葚胚或囊胚 不同 (2) 磷酸二酯 避免发育成猪肾脏 (3)由于敲除了猪肾脏发育关键基因SIX1和SALL1；由于有人的细胞，出现排斥反应 (4)认同，这种解决方案培育出含有人类细胞的器官，能解决供体器官短缺的问题 【分析】胚胎干细胞(ES细胞)具有自我更新及多向分化潜能，为发育学、遗传学、人类疾病的发病机理与替代治疗等研究提供非常宝贵的资源。iPS细胞技术是借助基因导入技术将某些特定因子基因导入动物或人的体细胞，以将其重编程或诱导为ES细胞样的细胞，即iPS细胞。 【详解】（1）在显微镜下将卵母细胞固定，然后使用微型吸管将卵母细胞的核吸出，达到去核的目的；步骤⑥中嵌合胚胎通常培养到桑葚胚或囊胚阶段再进行移植；所得人源化中肾是嵌合胚胎发育而来，细胞的基因型不同。 （2）Cas9蛋白对目的基因进行精准切割，使磷酸二酯键断裂；SIX1和SALL1是猪肾脏发育的关键基因，敲除该基因，有助于发育成人源化肾脏。 （3）由于敲除了猪成纤维细胞中的肾脏发育关键基因SIX1和SALL1，因此猪体内可能无法形成完整中肾；由于含有人的细胞，出现排斥反应，因此可能出现中肾在猪体内无法存活。 （4）上述研究通过人-动物嵌合体技术，科学家们能够在猪的胚胎中培育出含有人类细胞的器官，这为未来的器官移植提供了新的可能性。尽管目前这项技术仍处于初步阶段，但其潜在的应用前景非常广阔，有望在未来解决供体器官短缺的问题，从而挽救更多生命‌。因此，认同这种解决方案。（也可不认同，理由合理即可） 18．(24-25高二下·河南郑州中牟县中牟县第一高级中学·月考)骆驼被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中单峰骆驼曾经分布于阿拉伯半岛，濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝（只生活在栽培、圈养条件下即认为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养）。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。请根据所学知识回答下列问题： (1)胚胎工程中一般注射_____处理A使其超数排卵。①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有_____，受精的标志是_____。 (2)过程③之后需要将获得的重构胚激活，使其在适宜的培养液中培养至_____阶段进行胚胎移植，欲获得更多的胚胎可以对囊胚进行_____操作，操作过程需要特别注意的问题是必须将_____。 (3)胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础为受体对外来胚胎基本上不发生_____。 (4)与F相比，E更具有多样性，其原因是E的生殖方式为_____，其亲代在进行减数分裂过程中会发生基因重组。若要胚胎移植前对E进行性别鉴定应选_____细胞，避免对胚胎造成影响。 【答案】(1) 促性腺激素 透明带反应、卵细胞膜反应 观察到两个极体或雌、雄原核 (2) 桑葚胚或囊胚 胚胎分割 囊胚的内细胞团均等分割 (3)免疫排斥反应 (4) 有性生殖 滋养层 【分析】据图分析，E后代是试管动物，属于有性生殖，F后代是克隆动物，属于无性生殖，其中①表示体外受精，②表示去掉卵母细胞的细胞核，③表示早期胚胎培养。 【详解】（1）胚胎工程中一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵，以便获得更多的卵子。①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有透明带反应、卵细胞膜反应，受精的标志是观察到两个极体或雌、雄原核。 （2）在桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植，获得更多的胚胎可进行胚胎分割，再借助胚胎移植技术产生完遗传物质完全相同的后代，由于囊胚内的内细胞团将来会发育为机体的组织和器官，因此应对囊胚的内细胞团进行均等分割，才能获得完全相同的多个胚胎。 （3）胚胎能在D受体雌性体内存活，因为同种动物供、受体生殖器官生理变化相同，受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥，这是胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础。 （4）与F相比，E更具有多样性，原因是E的产生过程经过了受精作用，其的生殖方式为有性生殖，进行性别鉴定应选滋养层细胞，因为该部位的细胞将来发育成胎盘和胎膜，这样可以避免对胚胎造成影响。 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题02 细胞工程 3大模块高频考点概览 考点01 植物细胞工程及其应用 考点02 动物细胞工程 考点03 胚胎工程及其应用 地 城 考点01 植物细胞工程及其应用 一、单选题 1．A 2．C 3．C 4．A 5．C 6．B 7．B 8．D 9．B 10．B 11．C 12．B 13．D 二、多选题 14．CD 15．ACD 16．ABD 17．ABCD 18．AC 三、解答题 19．【答案】(1)原生质体在无菌水中吸水膨胀甚至破裂 (2)高Ca2+-高pH 脱分化 形态结构和功能 生长素和细胞分裂素 浓度、比例 (3)植物组织培养 四 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 兼有双亲的优良性状 20．【答案】(1) 湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） 平板划线法 将单个微生物分散到固体培养基上，经培养得到单菌落 (2) 获得更多的菌种 血（球）细胞计数板 (3) 能量 不断搅拌 及时添加营养物质并定期排出有害物质 (4) 酶解 能够控制物质进出细胞 21．【答案】(1) 分裂能力强，分化程度低，容易培养 高度液泡化、不定形的薄壁组织团块 基因的选择性表达 生长素、细胞分裂素 (2) 纤维素酶和果胶酶 再生出细胞壁 愈伤组织 (3)茎尖处病毒极少甚至无病毒 地 城 考点02 动物细胞工程 一、单选题 1．B 2．C 3．C 4．B 5．A 6．D 7．C 8．A 9．D 10．C 11．A 12．A 13．D 二、多选题 14．ACD 15．BD 16．BCD 17．CD 18．BCD 19．BC 三、解答题 20．【答案】(1)刺激小鼠产生特定抗体的B淋巴细胞 灭活病毒诱导法 (2)克隆化培养 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备 (3)抗原与抗体特异性结合 2（或两） (4)血清 95%空气和5%CO2 有害代谢产物积累 (5)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞 22．【答案】(1) PSMA、CD28 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 (2) 不需要 维持培养液的pH (3) 灭活病毒诱导法 克隆化培养和抗体检测 (4)L链和H链随机结合，形成多种抗体 地 城 考点03 胚胎工程及其应用 一、单选题 1．D 2．D 3．A 4．B 5．C 6．D 7．C 8．D 9．B 10．C 11．B 12．B 二、多选题 13．AD 14．ABC 15．BCD 三、解答题 16．【答案】(1) 超数排卵（注射促性腺激素） 透明带反应 卵细胞膜反应 两个极体或雌、雄原核 雌原核 (2) 显微操作 染色体-纺锤体复合物 (3)X染色体上含有细胞生长、发育所需的关键基因，Y染色体缺少这些关键基因 (4)先用胰蛋白酶处理，使其分散成单个细胞后，再用离心法收集 17．【答案】(1) 显微去核 桑葚胚或囊胚 不同 (2) 磷酸二酯 避免发育成猪肾脏 (3)由于敲除了猪肾脏发育关键基因SIX1和SALL1；由于有人的细胞，出现排斥反应 (4)认同，这种解决方案培育出含有人类细胞的器官，能解决供体器官短缺的问题 18．【答案】(1) 促性腺激素 透明带反应、卵细胞膜反应 观察到两个极体或雌、雄原核 (2) 桑葚胚或囊胚 胚胎分割 囊胚的内细胞团均等分割 (3)免疫排斥反应 (4) 有性生殖 滋养层 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $